2015-2024年十年高考生物真題分類匯編專題24細(xì)胞工程與胚胎工程（全國）

2013-2024年十年高考真題匯編PAGEPAGE1專題24細(xì)胞工程與胚胎工程考點(diǎn)十年考情（2015-2024）命題趨勢(shì)考點(diǎn)1動(dòng)物細(xì)胞工程（10年10考）2024·吉林、浙江、湖北、江西、全國、廣東2023·北京、海南、湖南、湖北2022·遼寧、江蘇、福建、湖北、山東、浙江、海南2021·湖北、山東、浙江、重慶、江蘇、湖南2020·海南、北京、天津、浙江、江蘇、全國2019·江蘇2018·全國、江蘇2017·全國、浙江、江蘇2016·北京、江蘇、全國、天津2015·福建、重慶、安徽、山東、天津、江蘇從近10年全國各地的高考試題來看，細(xì)胞工程與胚胎工程專題創(chuàng)設(shè)科研情景考查動(dòng)植物細(xì)胞工程與胚胎工程的具體操作過程和整個(gè)過程涉及的原理、技術(shù)應(yīng)用等，此部分內(nèi)容在選擇題和非選擇題都有考察。考點(diǎn)2植物細(xì)胞工程（10年10考）2024·北京、貴州、甘肅、安徽、湖北、吉林、浙江、山東、湖南2023·山東、浙江、廣東、湖北、海南2022·重慶、遼寧、浙江2021·江蘇、福建、湖北、北京、浙江2020·北京、江蘇、山東、天津、浙江2019·全國、上海、江蘇、浙江2018·浙江、江蘇2017·海南、浙江、天津2016·江蘇、北京2015·天津、北京、江蘇考點(diǎn)3胚胎工程（10年10考）2024·北京、貴州、甘肅、湖北2023·廣東、浙江、天津2022·北京、江蘇、全國2021·江蘇、遼寧、浙江2020·海南、山東、浙江、江蘇、全國2019·江蘇2018·江蘇2017·江蘇2016·上海、江蘇2015·江蘇、天津、四川、廣東、山東、重慶考點(diǎn)1動(dòng)物細(xì)胞工程〖2024年高考真題〗1．（2024·吉林·高考真題）從小鼠胚胎中分離獲取胚胎成纖維細(xì)胞進(jìn)行貼壁培養(yǎng)，在傳代后的不同時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)細(xì)胞數(shù)目，結(jié)果如圖。下列敘述正確的是（

）A．傳代培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)皿需密封防止污染B．選?、俚募?xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)比②更合理C．直接用離心法收集細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)D．細(xì)胞增長進(jìn)入平臺(tái)期可能與細(xì)胞密度過大有關(guān)2．（2024·浙江·高考真題）某動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞貼壁生長至接觸抑制時(shí)，需分裝培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)操作過程如圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．①加消化液的目的是使細(xì)胞與瓶壁分離 B．②加培養(yǎng)液的目的是促進(jìn)細(xì)胞增殖C．③分裝時(shí)需調(diào)整到合適的細(xì)胞密度 D．整個(gè)過程需要在無菌、無毒條件下進(jìn)行3．（2024·湖北·高考真題）糖尿病是危害人類健康的主要疾病之一?；謴?fù)功能性胰島B細(xì)胞總量是治療糖尿病的重要策略。我國學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，向患有糖尿病的小鼠注射胰高血糖素受體單克隆抗體（mAb），可以促進(jìn)胰島A細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)少數(shù)胰島A細(xì)胞向胰島B細(xì)胞轉(zhuǎn)化，促進(jìn)功能性胰島B細(xì)胞再生。根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．mAb的制備可能涉及細(xì)胞融合技術(shù)B．注射mAb可降低胰腺分泌胰高血糖素的量C．mAb和胰高血糖素均能與胰高血糖素受體特異性結(jié)合D．胰高血糖素主要通過促進(jìn)肝糖原分解和非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化為糖，升高血糖水平4．（2024·江西·高考真題）某病毒顆粒表面有一特征性的大分子結(jié)構(gòu)蛋白S（含有多個(gè)不同的抗原決定基，每一個(gè)抗原決定基能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體）。為了建立一種靈敏、高效檢測(cè)S蛋白的方法，研究人員采用雜交瘤技術(shù)制備了抗-S單克隆抗體（如圖）。下列說法正確的是（

）A．利用膠原蛋白酶處理，可分散貼壁生長的骨髓瘤細(xì)胞B．制備的單克隆抗體A和單克隆抗體B是相同的單克隆抗體C．用于生產(chǎn)單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞可傳代培養(yǎng)，但不能凍存D．單克隆抗體A和單克隆抗體B都能夠特異性識(shí)別S蛋白5．（2024·全國·高考真題）某種病原體的蛋白質(zhì)A可被吞噬細(xì)胞攝入和處理，誘導(dǎo)特異性免疫。回答下列問題。(1)病原體感染誘導(dǎo)產(chǎn)生漿細(xì)胞的特異性免疫方式屬于。(2)溶酶體中的蛋白酶可將蛋白質(zhì)A的一條肽鏈水解成多個(gè)片段，蛋白酶切斷的化學(xué)鍵是。(3)不采用熒光素標(biāo)記蛋白質(zhì)A，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證蛋白質(zhì)A的片段可出現(xiàn)在吞噬細(xì)胞的溶酶體中，簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)思路和預(yù)期結(jié)果。6．（2024·廣東·高考真題）某些腫瘤細(xì)胞表面的PD-L1與細(xì)胞毒性T細(xì)胞（CTL）表面的PD-1結(jié)合能抑制CTL的免疫活性，導(dǎo)致腫瘤免疫逃逸。免疫檢查點(diǎn)療法使用單克隆抗體阻斷PD-Ll和PD-1的結(jié)合，可恢復(fù)CTL的活性，用于腫瘤治療。為進(jìn)一步提高療效，研究者以黑色素瘤模型小鼠為材料，開展該療法與化療的聯(lián)合治療研究。部分結(jié)果見圖。

回答下列問題：(1)據(jù)圖分析，療法的治療效果最佳，推測(cè)其原因是。(2)黑色素瘤細(xì)胞能分泌吸引某類細(xì)胞靠近的細(xì)胞因子CXCL1.為使CTL響應(yīng)此信號(hào)，可在CTL中導(dǎo)入基因后再將其回輸小鼠體內(nèi)，從而進(jìn)一步提高治療效果。該基因的表達(dá)產(chǎn)物應(yīng)定位于CTL的（答位置）且基因?qū)牒蟛挥绊慍TL的能力。(3)某興趣小組基于現(xiàn)有抗體—藥物偶聯(lián)物的思路提出了兩種藥物設(shè)計(jì)方案。方案一：將化療藥物與PD-L1單克隆抗體結(jié)合在一起。方案二：將化療藥物與PD-1單克隆抗體結(jié)合在一起。你認(rèn)為方案（填“一”或“二”）可行，理由是?！?023年高考真題〗1．（2023·北京·統(tǒng)考高考真題）甲狀旁腺激素（PTH）水平是人類多種疾病的重要診斷指標(biāo)。研究者制備單克隆抗體用于快速檢測(cè)PTH，有關(guān)制備過程的敘述不正確的是（）A．需要使用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)B．需要制備用PTH免疫的小鼠C．利用抗原-抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細(xì)胞D．篩選能分泌多種抗體的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞2．（2023·海南·高考真題）某團(tuán)隊(duì)通過多代細(xì)胞培養(yǎng)，將小鼠胚胎干細(xì)胞的Y染色體去除，獲得XO胚胎干細(xì)胞，再經(jīng)過一系列處理，使之轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．營養(yǎng)供應(yīng)充足時(shí)，傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞不會(huì)發(fā)生接觸抑制B．獲得XO胚胎干細(xì)胞的過程發(fā)生了染色體數(shù)目變異C．XO胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞的過程發(fā)生了細(xì)胞分化D．若某瀕危哺乳動(dòng)物僅存雄性個(gè)體，可用該法獲得有功能的卵母細(xì)胞用于繁育3．（2023·湖南·統(tǒng)考高考真題）某些植物根際促生菌具有生物固氮、分解淀粉和抑制病原菌等作用?；卮鹣铝袉栴}：(1)若從植物根際土壤中篩選分解淀粉的固氮細(xì)菌，培養(yǎng)基的主要營養(yǎng)物質(zhì)包括水和。(2)現(xiàn)從植物根際土壤中篩選出一株解淀粉芽孢桿菌H，其產(chǎn)生的抗菌肽抑菌效果見表。據(jù)表推測(cè)該抗菌肽對(duì)的抑制效果較好，若要確定其有抑菌效果的最低濃度，需在μg·mL-1濃度區(qū)間進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。測(cè)試菌抗菌肽濃度/（μg?mL-1）55.2027.6013.806.903.451.730.86金黃色葡萄球菌++枯草芽孢桿菌++禾谷鐮孢菌-++++++假絲酵母-++++++注：“+”表示長菌，“-”表示未長菌。(3)研究人員利用解淀粉芽孢桿菌H的淀粉酶編碼基因M構(gòu)建高效表達(dá)質(zhì)粒載體，轉(zhuǎn)入大腸桿菌成功構(gòu)建基因工程菌A。在利用A菌株發(fā)酵生產(chǎn)淀粉酶M過程中，傳代多次后，生產(chǎn)條件未變，但某子代菌株不再產(chǎn)生淀粉酶M。分析可能的原因是（答出兩點(diǎn)即可）。(4)研究人員通過肺上皮干細(xì)胞誘導(dǎo)生成肺類器官，可自組裝或與成熟細(xì)胞組裝成肺類裝配體，如圖所示。肺類裝配體培養(yǎng)需要滿足適宜的營養(yǎng)、溫度、滲透壓、pH以及（答出兩點(diǎn)）等基本條件。肺類裝配體形成過程中是否運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)（填“是”或“否”）。

(5)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）是一種耐藥菌，嚴(yán)重危害人類健康?？蒲腥藛T擬用MRSA感染肺類裝配體建立感染模型，來探究解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽是否對(duì)MRSA引起的肺炎有治療潛力。以下實(shí)驗(yàn)材料中必備的是。①金黃色葡萄球菌感染的肺類裝配體

②MRSA感染的肺類裝配體

③解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽

④生理鹽水

⑤青霉素（抗金黃色葡萄球菌的藥物）

⑥萬古霉素（抗MRSA的藥物）4．（2023·湖北·統(tǒng)考高考真題）某病毒對(duì)動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)危害十分嚴(yán)重。我國學(xué)者擬以該病毒外殼蛋白A為抗原來制備單克隆抗體，以期快速檢測(cè)該病毒，其主要技術(shù)路線如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：(1)與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合前，已免疫的脾細(xì)胞（含漿細(xì)胞）（填“需要”或“不需要”）通過原代培養(yǎng)擴(kuò)大細(xì)胞數(shù)量；添加脂溶性物質(zhì)PEG可促進(jìn)細(xì)胞融合，該過程中PEG對(duì)細(xì)胞膜的作用是。(2)在雜交瘤細(xì)胞篩選過程中，常使用特定的選擇培養(yǎng)基（如HAT培養(yǎng)基），該培養(yǎng)基對(duì)和生長具有抑制作用。(3)單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進(jìn)行雜交，其目的是。(4)構(gòu)建重組質(zhì)粒需要使用DNA連接酶。下列屬于DNA連接酶底物的是?！?022年高考真題〗5．（2022·遼寧·統(tǒng)考高考真題）二甲基亞砜（DMSO）易與水分子結(jié)合，常用作細(xì)胞凍存的滲透性保護(hù)劑。干細(xì)胞凍存復(fù)蘇后指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果見下表。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）凍存劑指標(biāo)

合成培養(yǎng)基+DMSO合成培養(yǎng)基+DMSO+血清G1期細(xì)胞數(shù)百分比（%）65.7879.85活細(xì)胞數(shù)百分比（%）15.2941.33注：細(xì)胞分裂間期分為G1期、S期（DNA復(fù)制期）和G2期A．凍存復(fù)蘇后的干細(xì)胞可以用于治療人類某些疾病B．G1期細(xì)胞數(shù)百分比上升，導(dǎo)致更多干細(xì)胞直接進(jìn)入分裂期C．血清中的天然成分影響G1期，增加干細(xì)胞復(fù)蘇后的活細(xì)胞數(shù)百分比D．DMSO的作用是使干細(xì)胞中自由水轉(zhuǎn)化為結(jié)合水6．（2022·江蘇·統(tǒng)考高考真題）航天員葉光富和王亞平在天宮課堂上展示了培養(yǎng)的心肌細(xì)胞跳動(dòng)的視頻。下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．培養(yǎng)心肌細(xì)胞的器具和試劑都要先進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B．培養(yǎng)心肌細(xì)胞的時(shí)候既需要氧氣也需要二氧化碳C．心肌細(xì)胞在培養(yǎng)容器中通過有絲分裂不斷增殖D．心肌細(xì)胞在神經(jīng)細(xì)胞發(fā)出的神經(jīng)沖動(dòng)的支配下跳動(dòng)7．（2022·福建·統(tǒng)考高考真題）我國科研人員在航天器微重力環(huán)境下對(duì)多能干細(xì)胞的分化進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)與正常重力相比，多能干細(xì)胞在微重力環(huán)境下加速分化為功能健全的心肌細(xì)胞。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．微重力環(huán)境下多能干細(xì)胞和心肌細(xì)胞具有相同的細(xì)胞周期B．微重力環(huán)境下進(jìn)行人體細(xì)胞的體外培養(yǎng)需定期更換培養(yǎng)液C．多能干細(xì)胞在分化過程中蛋白質(zhì)種類和數(shù)量發(fā)生了改變D．該研究有助于了解微重力對(duì)細(xì)胞生命活動(dòng)的影響8．（2022·湖北·統(tǒng)考高考真題）某興趣小組開展小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經(jīng)元生長緩慢，其原因不可能的是（）A．實(shí)驗(yàn)材料取自小鼠胚胎的腦組織 B．為了防止污染將培養(yǎng)瓶瓶口密封C．血清經(jīng)過高溫處理后加入培養(yǎng)基 D．所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性9．（2022·湖北·統(tǒng)考高考真題）滅菌、消毒、無菌操作是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常見的操作。下列敘述正確的是（）A．動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取必須在無菌條件下進(jìn)行B．微生物、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染C．為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對(duì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌D．可用濕熱滅菌法對(duì)實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌10．（2022·山東·高考真題）如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體，簡(jiǎn)稱雙抗。下列說法錯(cuò)誤的是（

）A．雙抗可同時(shí)與2種抗原結(jié)合B．利用雙抗可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞C．篩選雙抗時(shí)需使用制備單克隆抗體時(shí)所使用的2種抗原D．同時(shí)注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞11．（2022·江蘇·統(tǒng)考高考真題）下圖表示利用細(xì)胞融合技術(shù)進(jìn)行基因定位的過程，在人-鼠雜種細(xì)胞中人的染色體會(huì)以隨機(jī)方式丟失，通過分析基因產(chǎn)物進(jìn)行基因定位?，F(xiàn)檢測(cè)細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4種酶活性，只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性。下列相關(guān)敘述正確的有（

）A．加入滅活仙臺(tái)病毒的作用是促進(jìn)細(xì)胞融合B．細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別為人-人、人-鼠、鼠-鼠融合細(xì)胞C．芳烴羥化酶基因位于2號(hào)染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號(hào)染色上D．胸苷激酶基因位于17號(hào)染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上12．（2022·浙江·統(tǒng)考高考真題）回答下列（一）、（二）小題：（一）紅曲霉合成的紅曲色素是可食用的天然色素，具有防腐、降脂等功能。研究者進(jìn)行了紅曲色素的提取及紅色素的含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)，流程如下：(1)取紅曲霉菌種斜面，加適量洗下菌苔，制成菌懸液并培養(yǎng)，解除休眠獲得菌種。經(jīng)液體發(fā)酵，收集紅曲霉菌絲體，紅曲霉菌絲體與70%乙醇溶液混合，經(jīng)浸提、，獲得的上清液即為紅曲色素提取液。為進(jìn)一步提高紅曲色素得率，可將紅曲霉細(xì)胞進(jìn)行處理。(2)紅曲色素包括紅色素、黃色素和橙黃色素等，紅色素在390nm、420nm和505nm波長處均有較大吸收峰。用光電比色法測(cè)定紅曲色素提取液甲的紅色素含量時(shí)，通常選用505nm波長測(cè)定的原因是。測(cè)定時(shí)需用作空白對(duì)照。(3)生產(chǎn)上提取紅曲色素后的殘?jiān)?，?jīng)處理后作為飼料添加劑或有機(jī)肥，這屬于廢棄物的無害化和處理。（二）我國在新冠疫情方面取得了顯著的成效，但全球疫情形勢(shì)仍然非常嚴(yán)峻、尤其是病毒出現(xiàn)了新變異株——德爾塔、奧密克戎，更是威脅著全人類的生命健康。(4)新冠病毒核酸定性檢測(cè)原理是：以新冠病毒的單鏈RNA為模板，利用酶合成DNA，經(jīng)PCR擴(kuò)增，然后在擴(kuò)增產(chǎn)物中加入特異的，如果檢測(cè)到特異的雜交分子則核酸檢測(cè)為陽性。(5)接種疫苗是遏制新冠疫情蔓延的重要手段。腺病毒疫苗的制備技術(shù)要點(diǎn)是：將腺病毒的復(fù)制基因敲除；以新冠病毒的基因?yàn)槟０搴铣傻腄NA插入腺病毒基因組，構(gòu)建重組腺病毒。重組腺病毒在人體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)產(chǎn)生新冠病毒抗原，從而引發(fā)特異性免疫反應(yīng)。在此過程中，腺病毒的作用是作為基因工程中目的基因的。將腺病毒復(fù)制基因敲除的目的是。(6)單克隆抗體有望用于治療新冠肺炎。單克隆抗體的制備原理是：取免疫陽性小鼠的細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞混合培養(yǎng)，使其融合，最后篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。與植物組織培養(yǎng)相比，雜交瘤細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)需要特殊的成分，如胰島素和。13．（2022·福建·統(tǒng)考高考真題）美西螈具有很強(qiáng)的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬細(xì)胞在斷肢再生的早期起重要作用。為研究巨噬細(xì)胞的作用機(jī)制，科研人員制備了抗巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志蛋白CD14的單克隆抗體，具體方法如下?；卮鹣铝袉栴}：（一）基因工程抗原的制備(1)根據(jù)美西螈CD14基因的核苷酸序列，合成引物，利用PCR擴(kuò)增CD14片段。已知DNA聚合酶催化引物的3’—OH與加入的脫氧核苷酸的5’—P形成磷酸二酯鍵，則新合成鏈的延伸方向是（填“5’→3’”或“3’→5’”）。

(2)載體和CD14片段的酶切位點(diǎn)及相應(yīng)的酶切抗性基因序列如圖1所示。用XhoI和Sal1分別酶切CD14和載體后連接，CD14接入載體時(shí)會(huì)形成正向連接和反向連接的兩種重組DNA．可進(jìn)一步用這兩種限制酶對(duì)CD14的連接方向進(jìn)行鑒定，理由是。培養(yǎng)能表達(dá)CD14蛋白的大腸桿菌，分離純化目的蛋白。（二）抗CD14單克隆抗體的制備流程如圖2所示：

(3)步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射和。(4)步驟②所用的SP2/0細(xì)胞的生長特點(diǎn)是。(5)吸?、壑械纳锨逡旱舰艿呐囵B(yǎng)孔中，根據(jù)抗原—抗體雜交原理，需加入①進(jìn)行專一抗體檢測(cè)，檢測(cè)過程發(fā)現(xiàn)有些雜交瘤細(xì)胞不能分泌抗CD14抗體，原因是②。(6)步驟⑥從中提取到大量的抗CD14抗體，用于檢測(cè)巨噬細(xì)胞。14．（2022·遼寧·統(tǒng)考高考真題）某抗膜蛋白治療性抗體藥物研發(fā)過程中，需要表達(dá)N蛋白胞外段，制備相應(yīng)的單克隆抗體，增加其對(duì)N蛋白胞外段特異性結(jié)合的能力。Ⅰ．N蛋白胞外段抗原制備，流程如圖1(1)構(gòu)建重組慢病毒質(zhì)粒時(shí)，選用氨芐青霉素抗性基因作為標(biāo)記基因，目的是。用脂質(zhì)體將重組慢病毒質(zhì)粒與輔助質(zhì)粒導(dǎo)入病毒包裝細(xì)胞，質(zhì)粒被包在脂質(zhì)體（填“雙分子層中”或“兩層磷脂分子之間”）。(2)質(zhì)粒在包裝細(xì)胞內(nèi)組裝出由組成的慢病毒，用慢病毒感染海拉細(xì)胞進(jìn)而表達(dá)并分離、純化N蛋白胞外段。Ⅱ．N蛋白胞外段單克隆抗體制備，流程如圖2(3)用N蛋白胞外段作為抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫后，取小鼠脾組織用酶處理，制成細(xì)胞懸液，置于含有混合氣體的中培養(yǎng)，離心收集小鼠的B淋巴細(xì)胞，與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合。(4)用選擇性培養(yǎng)基對(duì)融合后的細(xì)胞進(jìn)行篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，將其接種到96孔板，進(jìn)行培養(yǎng)。用技術(shù)檢測(cè)每孔中的抗體，篩選既能產(chǎn)生N蛋白胞外段抗體，又能大量增殖的單克隆雜交瘤細(xì)胞株，經(jīng)體外擴(kuò)大培養(yǎng)，收集，提取單克隆抗體。(5)利用N蛋白胞外段抗體與藥物結(jié)合，形成，實(shí)現(xiàn)特異性治療。15．（2022·海南·統(tǒng)考高考真題）以我國科學(xué)家為主的科研團(tuán)隊(duì)將OSNL（即4個(gè)基因Oct4／Sox2／Nanog／Lin28A的縮寫）導(dǎo)入黑羽雞胚成纖維細(xì)胞（CEFs），誘導(dǎo)其重編程為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS），再誘導(dǎo)iPS分化為誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞（iPGCs），然后將iPGCs注射到孵化2.5天的白羽雞胚血管中，最終獲得具有黑羽雞遺傳特性的后代，實(shí)驗(yàn)流程如圖。回答下列問題。(1)CEFs是從孵化9天的黑羽雞胚中分離獲得的，為了獲得單細(xì)胞懸液，雞胚組織剪碎后需用處理。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)通常需要在合成培養(yǎng)基中添加等天然成分，以滿足細(xì)胞對(duì)某些細(xì)胞因子的需求。(2)體外獲取OSNL的方法有（答出1種即可）。若要在CEFs中表達(dá)外源基因的蛋白，需構(gòu)建基因表達(dá)載體，載體中除含有目的基因和標(biāo)記基因外，還須有啟動(dòng)子和等。啟動(dòng)子是識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng)。(3)iPS細(xì)胞和iPGCs細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能不同的根本原因是。(4)誘導(dǎo)iPS細(xì)胞的技術(shù)與體細(xì)胞核移植技術(shù)的主要區(qū)別是。(5)該實(shí)驗(yàn)流程中用到的生物技術(shù)有（答出2點(diǎn)即可）?！?021年高考真題〗16．（2021·湖北·統(tǒng)考高考真題）自青霉素被發(fā)現(xiàn)以來，抗生素對(duì)疾病治療起了重要作用。目前抗生素的不合理使用已經(jīng)引起人們的關(guān)注。下列關(guān)于抗生素使用的敘述，正確的是（

）A．作用機(jī)制不同的抗生素同時(shí)使用，可提高對(duì)疾病的治療效果B．青霉素能直接殺死細(xì)菌，從而達(dá)到治療疾病的目的C．畜牧業(yè)中為了防止牲畜生病可大量使用抗生素D．定期服用抗生素可預(yù)防病菌引起的腸道疾病17．（2021·山東·統(tǒng)考高考真題）一個(gè)抗原往往有多個(gè)不同的抗原決定簇，一個(gè)抗原決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體，由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72注入小鼠體內(nèi)，可利用該小鼠的免疫細(xì)胞制備抗p72的單抗，也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗。下列說法正確的是（）A．注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對(duì)單抗純度的影響比對(duì)多抗純度的影響大B．單抗制備過程中通常將分離出的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合C．利用該小鼠只能制備出一種抗p72的單抗D．p72部分結(jié)構(gòu)改變后會(huì)出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有效的情況18．（2021·浙江·統(tǒng)考高考真題）下圖為動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是（）A．步驟①的操作不需要在無菌環(huán)境中進(jìn)行B．步驟②中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離C．步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理D．步驟④培養(yǎng)過程中不會(huì)發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化19．（2021·重慶·高考真題）為了研究PDCD4基因?qū)π∈笞訉m內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞凋亡的影響，進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。(1)取小鼠子宮時(shí)，為避免細(xì)菌污染，手術(shù)器具應(yīng)進(jìn)行處理；子宮取出剪碎后，用處理一定時(shí)間，可獲得分散的子宮內(nèi)膜組織細(xì)胞，再分離獲得基質(zhì)細(xì)胞用于培養(yǎng)。(2)培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)有（填寫兩種）；培養(yǎng)箱中CO2濃度為5%，其主要作用是。(3)在含PDCD4基因的表達(dá)載體中，啟動(dòng)子的作用是。為了證明PDCD4基因?qū)|(zhì)細(xì)胞凋亡的作用，以含PDCD4基因的表達(dá)載體和基質(zhì)細(xì)胞的混合培養(yǎng)為實(shí)驗(yàn)組，還應(yīng)設(shè)立兩個(gè)對(duì)照組，分別為。經(jīng)檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)組中PDCD4表達(dá)水平和細(xì)胞凋亡率顯著高于對(duì)照組，說明該基因?qū)|(zhì)細(xì)胞凋亡具有（填“抑制”或“促進(jìn)”）作用。20．（2021·江蘇·高考真題）根據(jù)新冠病毒致病機(jī)制及人體免疫反應(yīng)特征研制新冠疫苗，廣泛接種疫苗可以快速建立免疫屏障，阻擊病毒擴(kuò)大。圖1為新冠病毒入侵細(xì)胞后的增殖示意圖，圖2為人體免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體的一般規(guī)律示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題。(1)圖1中，新冠病毒通過S蛋白與細(xì)胞表面的ACE2受體結(jié)合，侵入細(xì)胞釋放出病毒的（+）RNA，在宿主細(xì)胞中經(jīng)合成病毒的RNA聚合酶。(2)在RNA聚合酶的作用下，病毒利用宿主細(xì)胞中的原料，按照原則合成（-）RNA。隨后大量合成新的（+）RNA。再以這些RNA為模板，分別在大量合成病毒的N蛋白和S、M、E蛋白。(3)制備病毒滅活疫苗時(shí)，先大量培養(yǎng)表達(dá)的細(xì)胞，再接入新冠病毒擴(kuò)大培養(yǎng)，滅活處理后制備疫苗。細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需通入CO2，其作用是。(4)制備S蛋白的mRNA疫苗時(shí)，體外制備的mRNA常用脂質(zhì)分子包裹后才用于接種。原因一是人體血液和組織中廣泛存在，極易將裸露的mRNA水解，二是外源mRNA分子不易進(jìn)入人體細(xì)胞產(chǎn)生抗原。(5)第一次接種疫苗后，人體內(nèi)識(shí)別到S蛋白的B細(xì)胞，經(jīng)過增殖和分化，形成的細(xì)胞可合成并分泌特異性識(shí)別的IgM和IgG抗體（見圖2），形成的細(xì)胞等再次接觸到S蛋白時(shí)，發(fā)揮免疫保護(hù)作用。(6)有些疫苗需要進(jìn)行第二次接種，據(jù)圖2分析進(jìn)行二次接種的意義是。21．（2021·湖南·統(tǒng)考高考真題）M基因編碼的M蛋白在動(dòng)物A的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)?，F(xiàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物A，流程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是，這類酶能將特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的斷開。（2）在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動(dòng)物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時(shí)，需要定期更換培養(yǎng)液，目的是。（3）與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率更低，原因是。從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細(xì)胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為（答出兩點(diǎn)即可），功能上具有。（4）鑒定轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：以免疫小鼠的淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，篩選融合雜種細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體。簡(jiǎn)要寫出利用此抗體確定克隆動(dòng)物A中M基因是否失活的實(shí)驗(yàn)思路?！?020年高考真題〗22．（2020·海南·統(tǒng)考高考真題）將人細(xì)胞與小鼠細(xì)胞融合得到的人-鼠雜種細(xì)胞進(jìn)行長期培養(yǎng)，雜種細(xì)胞隨機(jī)丟失一部分人的染色體后，染色體數(shù)目會(huì)保持穩(wěn)定。選取三種雜種細(xì)胞，對(duì)編碼人的芳烴羥化酶（AHH）和磷酸甘油酸激酶（PGK）的基因進(jìn)行染色體定位研究，結(jié)果如表（“+”表示有，“-”表示無）。雜種細(xì)胞人的染色體AHHPGK2號(hào)11號(hào)17號(hào)X甲－＋－＋－＋乙＋＋－－＋－丙－＋＋＋－＋下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．聚乙二醇可誘導(dǎo)入細(xì)胞與小鼠細(xì)胞融合B．培養(yǎng)雜種細(xì)胞時(shí)，通常需在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素C．編碼AHH的基因在11號(hào)染色體上D．編碼PGK的基因在X染色體上23．（2020·北京·統(tǒng)考高考真題）人體感染新冠病毒后，機(jī)體會(huì)產(chǎn)生多種特異性抗體。我國科學(xué)家從康復(fù)者的漿細(xì)胞中克隆出針對(duì)病毒表面抗原的抗體基因相關(guān)序列，構(gòu)建表達(dá)載體并在相應(yīng)系統(tǒng)中表達(dá)，可制備出全人源單克隆抗體。以下表述錯(cuò)誤的是（

）A．該單抗可直接用于新冠病毒的核酸檢測(cè)B．在該單抗制備過程中利用了基因工程技術(shù)C．該單抗可與新冠病毒相應(yīng)蛋白特異性結(jié)合D．可用抗原-抗體反應(yīng)檢測(cè)抗體基因表達(dá)產(chǎn)物24．（2020·天津·統(tǒng)考高考真題）在克隆哺乳動(dòng)物過程中，通常作為核移植受體細(xì)胞的是去核的（

）A．卵原細(xì)胞B．初級(jí)卵母細(xì)胞C．次級(jí)卵母細(xì)胞D．卵細(xì)胞25．（2020·浙江·高考真題）下列關(guān)于病毒的敘述，錯(cuò)誤的是（

）A．有的病毒經(jīng)滅活處理后，可用于細(xì)胞工程中介導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞的融合B．適當(dāng)增加機(jī)體內(nèi)參與免疫的細(xì)胞數(shù)量與活性，可提高對(duì)新型冠狀病毒的抵御能力C．在某人的分泌物中檢測(cè)到新型冠狀病毒，推測(cè)該病毒的增殖不依賴于宿主細(xì)胞D．用高溫高壓處理病毒使其失去感染能力，原因之一是病毒的蛋白質(zhì)發(fā)生了熱變性26．（2020·江蘇·統(tǒng)考高考真題）新型冠狀病毒可通過表面的棘突蛋白（S蛋白）與人呼吸道黏膜上皮細(xì)胞的ACE2受體結(jié)合，侵入人體，引起肺炎。圖1為病毒侵入后，人體內(nèi)發(fā)生的部分免疫反應(yīng)示意圖。單克隆抗體可阻斷病毒的粘附或入侵，故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點(diǎn)之一。圖2為篩選、制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：（1）圖1中人體內(nèi)抗原遞呈細(xì)胞吞噬病毒，并將病毒的抗原暴露在細(xì)胞表面，被細(xì)胞表面的受體識(shí)別后激活該細(xì)胞。（2）B細(xì)胞識(shí)別入侵的病毒后，在淋巴因子作用下，經(jīng)過細(xì)胞的，形成細(xì)胞。（3）為判斷疑似患者是否為新型冠狀病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原學(xué)檢查，檢測(cè)病毒的；采集血液樣本主要用于血清學(xué)檢查，檢測(cè)。（4）據(jù)圖2所示，研制抗S蛋白單克隆抗體，需先注射免疫小鼠以激活小鼠的免疫細(xì)胞，再提取激活的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，用HAT培養(yǎng)基篩選獲得細(xì)胞。因?yàn)橥环N抗原可能激活細(xì)胞，還需繼續(xù)篩選才能獲得分泌單克隆抗體的細(xì)胞株。27．（2020·全國·統(tǒng)考高考真題）為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學(xué)以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)流程。回答下列問題：（1）上述實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是。（2）寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟：。（3）為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，需要進(jìn)行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于，使用該培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是。圖中篩選2含多次篩選，篩選所依據(jù)的基本原理是。（4）若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖，可采用的方法有（答出2點(diǎn)即可）。〖2019年高考真題〗30．（2019·江蘇·統(tǒng)考高考真題）下圖為雜交瘤細(xì)胞制備示意圖。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT-），在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無法生長。下列敘述正確的是A．可用滅活的仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合B．兩兩融合的細(xì)胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長C．雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)一步篩選才能用于生產(chǎn)D．細(xì)胞膜的流動(dòng)性是細(xì)胞融合的基礎(chǔ)〖2018年高考真題〗1．（2018·江蘇·高考真題）如圖為細(xì)胞融合的示意圖，下列敘述正確的是（）A．若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞，需先去分化再誘導(dǎo)融合B．a(chǎn)細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)C．c細(xì)胞的形成與a、b細(xì)胞膜的流動(dòng)性都有關(guān)D．c細(xì)胞將同時(shí)表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因2．（2018·全國·高考真題）2018年《細(xì)胞》期刊報(bào)道，中國科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對(duì)非人靈長類動(dòng)物進(jìn)行克隆，獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”?；卮鹣铝袉栴}：（1）“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程，核移植是指。通過核移植方法獲得的克隆猴，與核供體相比，克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目（填“減半”“加倍”或“不變”）（2）哺乳動(dòng)物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的難度（填“大于”或“小于”）體細(xì)胞核移植，其原因是。（3）在哺乳動(dòng)物核移植的過程中，若分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體，通常，所得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目（填“相同”或“不相同”），性染色體組合（填“相同”或“不相同”）。3．（2018·全國·高考真題）某種熒光蛋白（GFP）在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光，這一特性可用于檢測(cè)細(xì)胞中目的基因的表達(dá)。某科研團(tuán)隊(duì)將某種病毒的外殼蛋白（L1）基因連接在GFP基因的5′末端，獲得了L1-GFP融合基因（簡(jiǎn)稱為甲），并將其插入質(zhì)粒P0，構(gòu)建了真核表達(dá)載體P1，其部分結(jié)構(gòu)和酶切位點(diǎn)的示意圖如下，圖中E1~E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同。回答下列問題：（1）據(jù)圖推斷，該團(tuán)隊(duì)在將甲插入質(zhì)粒P0時(shí)，使用了兩種限制酶，這兩種酶是。使用這兩種酶進(jìn)行酶切是為了保證，也是為了保證。（2）將P1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細(xì)胞后，若在該細(xì)胞中觀察到了綠色熒光，則說明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了和過程。（3）為了獲得含有甲的牛，該團(tuán)隊(duì)需要做的工作包括：將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的移入牛的中、體外培養(yǎng)、胚胎移植等。（4）為了檢測(cè)甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中，某同學(xué)用PCR方法進(jìn)行鑒定。在鑒定時(shí)應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的（填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”）作為PCR模板。〖2017年高考真題〗1．（2017·江蘇·高考真題）牛雄性胚胎中存在特異性H-Y抗原，可在牛早期胚胎培養(yǎng)液中添加H-Y單克隆抗體，篩選胚胎進(jìn)行移植，以利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥。下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．H-Y單克隆抗體由骨髓瘤細(xì)胞分泌 B．應(yīng)選用原腸胚做雌雄鑒別C．鑒別后的雄性胚胎可直接做胚胎移植 D．用H-Y抗原免疫母?？色@得相應(yīng)抗體2．（2017·浙江·高考真題）為了研究海拉細(xì)胞的細(xì)胞增殖，以總細(xì)胞數(shù)和細(xì)胞分裂指數(shù)(細(xì)胞群體中分裂細(xì)胞所占的百分比)為測(cè)定指標(biāo)，完善實(shí)驗(yàn)思路，預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果并進(jìn)行分析與討論(要求:細(xì)胞培養(yǎng)至培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)不足。實(shí)驗(yàn)思路涉及的主要用具須寫出,但具體操作過程不做要求。實(shí)驗(yàn)條件適宜)回答下列問題（1）完善實(shí)驗(yàn)思路：①將已知細(xì)胞密度的海拉細(xì)胞懸液,用移液管加入到各個(gè)含細(xì)胞培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中,然后置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)②對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與處理（2）預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果（以坐標(biāo)曲線圖形表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果）：（3）分析與討論①細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí),見到壓在方格線上的細(xì)胞如何計(jì)數(shù)？②若要得到大量的G1期細(xì)胞,可采用的方法，原因是。③若為了檢測(cè)某種藥物對(duì)該細(xì)胞的增殖有促進(jìn)作用，可在培養(yǎng)液中加入同位素標(biāo)記的物質(zhì)是,原因是。3．（2017·全國·高考真題）編碼蛋白甲的DNA序列（序列甲）由A、B、C、D、E五個(gè)片段組成，編碼蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段組成，如圖1所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）現(xiàn)要通過基因工程的方法獲得蛋白乙，若在啟動(dòng)子的下游直接接上編碼蛋白乙的DNA序列（TTCGCTTCT……CAGGAAGGA），則所構(gòu)建的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞后不能翻譯出蛋白乙，原因是。

（2）某同學(xué)在用PCR技術(shù)獲取DNA片段B或D的過程中,在PCR反應(yīng)體系中加入了DNA聚合酶、引物等，還加入了序列甲作為，加入了作為合成DNA的原料。（3）現(xiàn)通過基因工程方法獲得了甲、乙、丙三種蛋白，要鑒定這三種蛋白是否具有刺激T淋巴細(xì)胞增殖的作用，某同學(xué)做了如下實(shí)驗(yàn)：將一定量的含T淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)液平均分成四組，其中三組分別加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一組作為對(duì)照，培養(yǎng)并定期檢測(cè)T淋巴細(xì)胞濃度，結(jié)果如圖2。①由圖2可知，當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到a時(shí)，添加蛋白乙的培養(yǎng)液中T淋巴細(xì)胞濃度不再增加，此時(shí)若要使T淋巴細(xì)胞繼續(xù)增殖，可采用的方法是。細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)箱中通常要維持一定的C02濃度，C02的作用是。②僅根據(jù)圖1、圖2可知，上述甲、乙、丙三種蛋白中，若缺少

（填“A”“B”“C”“D”或“E”）片段所編碼的肽段，則會(huì)降低其刺激T淋巴細(xì)胞增殖效果。4．（2017·浙江·高考真題）欲研究藥物乙對(duì)海拉細(xì)胞增殖的抑制作用，請(qǐng)根據(jù)以下提供的材料與用具，以海拉細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)變化為測(cè)定指標(biāo)，完善實(shí)驗(yàn)分組設(shè)計(jì)和實(shí)驗(yàn)思路，預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果并進(jìn)行分析與討論。材料與用具：海拉細(xì)胞懸液，藥物甲溶液(對(duì)細(xì)胞增殖有影響)，藥物乙溶液，培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶，血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，顯微鏡等。(要求與說明：細(xì)胞計(jì)數(shù)的具體操作過程不做要求，不考慮加入溶液對(duì)體積的影響，實(shí)驗(yàn)條件適宜)回答下列問題：(1)實(shí)驗(yàn)分組設(shè)計(jì)：A組：海拉細(xì)胞懸液＋培養(yǎng)液B組：海拉細(xì)胞懸液＋培養(yǎng)液＋藥物甲溶液C組：海拉細(xì)胞懸液＋培養(yǎng)液＋藥物甲溶液，培養(yǎng)一段時(shí)間后，加入。(2)完善實(shí)驗(yàn)思路：(3)預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果(以坐標(biāo)曲線圖形表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并標(biāo)出加入藥物的時(shí)間)：(4)分析與討論：藥物甲的作用是。〖2016年高考真題〗1．（2016·天津·高考真題）將攜帶抗M基因、不帶抗N基因的鼠細(xì)胞去除細(xì)胞核后，與攜帶N基因、不帶抗M基因的鼠細(xì)胞融合，獲得的胞質(zhì)雜種細(xì)胞具有M、N兩種抗性。該實(shí)驗(yàn)證明了A．該胞質(zhì)雜種細(xì)胞具有全能性B．該胞質(zhì)雜種細(xì)胞具有無限增殖能力C．抗M基因位于細(xì)胞質(zhì)中D．抗N基因位于細(xì)胞核中2．（2016·江蘇·高考真題）下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述，正確的是（

）A．PEG是促細(xì)胞融合劑，可直接誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合B．用原生質(zhì)體制備人工種子，要防止細(xì)胞破裂C．骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)免疫處理，可直接獲得單克隆抗體D．核移植克隆的動(dòng)物，其線粒體DNA來自供卵母體3．（2016·全國·高考真題）[生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題]下圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物（二倍體）的流程?；卮鹣铝袉栴}：（1）圖中A表示正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為。過程①表示去除細(xì)胞核，該過程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行，去核時(shí)常采用的方法。②代表的過程是。（2）經(jīng)過多次傳代后，供體細(xì)胞中的穩(wěn)定性會(huì)降低，因此，選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。（3）若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是。（4）與克隆羊“多莉（利）”培育成功一樣，其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了。4．（2016·北京·高考真題）人感染埃博拉病毒（EV）會(huì)引起致命的出血熱。為了尋找治療EV病的有效方法，中外科學(xué)家進(jìn)行了系列研究。(1)EV表面的糖蛋白（EV-GP）作為刺激機(jī)體產(chǎn)生性免疫反應(yīng)。(2)科學(xué)家采集了多年前感染EV并已康復(fù)的甲、乙兩人的血液，檢測(cè)抗EV-GP抗體的水平。據(jù)圖1，應(yīng)選取的血液分離記憶B細(xì)胞用以制備單克隆抗體（單抗）。(3)將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測(cè)病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率。據(jù)圖2，抑制效果最好的兩種單抗是。(4)EV-GP具有多個(gè)與抗體結(jié)合的位點(diǎn)。為了研究上述兩種單抗（分別稱為A、B）與EV-GP結(jié)合的位點(diǎn)是否相同，可按圖3所示簡(jiǎn)要流程進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。①請(qǐng)將圖3中應(yīng)使用的抗體填入下表i、ii、iii、iv處（填“A”或“B”或“無關(guān)抗體”），完成實(shí)驗(yàn)方案（一種即可）。i，i，iii，iv。②若A、B與EV-GP結(jié)合的位點(diǎn)不同，與對(duì)照組1、2分別比較，實(shí)驗(yàn)組的熒光值應(yīng)。(5)中國科學(xué)家用分子結(jié)構(gòu)成像技術(shù)證實(shí)了A、B與EV-GP結(jié)合的位點(diǎn)不同。基于上述系列研究，請(qǐng)你為治療EV病提供兩種思路?！?015年高考真題〗1．（2015·江蘇·高考真題）下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程和胚胎工程的敘述,正確的是（

）A．乳腺細(xì)胞比乳腺癌細(xì)胞更容易進(jìn)行離體培養(yǎng)B．細(xì)胞核移植主要在同種動(dòng)物、同種組織的細(xì)胞之間進(jìn)行C．采用胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生同卵多胚的數(shù)量是有限的D．培養(yǎng)早期胚胎的培養(yǎng)液中含維生素、激素等多種能源物質(zhì)2．（2015·天津·高考真題）2015年2月3日，英國議會(huì)院通過一項(xiàng)歷史性法案，允許以醫(yī)學(xué)手段培育“三親嬰兒”。三親嬰兒的培育過程可選用如下技術(shù)路線。據(jù)圖分析，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．該技術(shù)可避免母親的線粒體遺傳病基因傳遞給后代B．捐獻(xiàn)者攜帶的紅綠色盲基因不能遺傳給三親嬰兒C．三親嬰兒的染色體全部來自母親提供的細(xì)胞核D．三親嬰兒的培育還需要早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)3．（2015·山東·高考真題）【生物—現(xiàn)代生物科技專題】治療性克隆對(duì)解決供體器官缺乏和器官移植后免疫排斥反應(yīng)具有重要意義。流程如下：（1）過程①采用的是細(xì)胞工程中的技術(shù)，過程②采用的是胚胎工程中的技術(shù)。（2）體細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí)，所需氣體主要有O2和CO2，其中CO2的作用是維持培養(yǎng)液（基）的。（3）如果克隆過程中需進(jìn)行基因改造，在構(gòu)建基因表達(dá)載體（重組載體）時(shí)必須使用和兩種工具酶?；虮磉_(dá)載體上除目的基因外，還需有基因，以便選出成功導(dǎo)入基因表達(dá)載體的細(xì)胞。（4）胚胎干細(xì)胞可以來自于囊胚中的。在一定條件下，胚胎干細(xì)胞可以分化形成不同的組織器官。若將圖中獲得的組織器官移植給個(gè)體(填“A”或“B”)，則不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。4．（2015·安徽·高考真題）I.已知一對(duì)等位基因控制的羽毛顏色，BB為黑羽，bb為白羽，Bb為藍(lán)羽。另一對(duì)等位基因CL和C控制雞的小腿長度，CLC為短腿，CC為正常，但CLCL胚胎致死。兩對(duì)基因位于常染色體上且獨(dú)立遺傳。一只黑羽短腿雞與一只白羽短腿雞交配，獲得F1。（1）F1的表現(xiàn)型及比例是。若讓F1中兩只藍(lán)羽短腿雞交配，F(xiàn)2中出現(xiàn)中不同的表現(xiàn)型，其中藍(lán)羽短腿雞所占比例是。（2）從交配結(jié)果可判斷CL和C的顯隱性關(guān)系，在決定小腿長度性狀上，CL是，在控制致死效應(yīng)上，CL是。（3）B基因控制色素合成酶的合成，后者催化無色前體物質(zhì)形成黑色素。研究人員對(duì)B和b基因進(jìn)行測(cè)序并比較，發(fā)現(xiàn)b基因的編碼序列缺失一個(gè)堿基對(duì)，據(jù)此推測(cè)，b基因翻譯時(shí)，可能會(huì)出現(xiàn)或，導(dǎo)致無法形成功能正常的色素合成酶。（4）在火雞（ZW型性別決定）中，有人發(fā)現(xiàn)少數(shù)雌雞的卵細(xì)胞不與精子結(jié)合，而與某一極體結(jié)合形成二倍體，并能發(fā)育成正常個(gè)體（注：WW胚胎致死）。這種情況下，后代總是雄性，其原因是。II.科研人員采用轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因綿羊，以便通過乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人凝血因子IX醫(yī)用蛋白，其技術(shù)路線如圖。（1）由過程?獲得的A為。（2）在核移植前，必須先去掉卵母細(xì)胞的核。目的是，受體應(yīng)選用期卵母細(xì)胞。（3）進(jìn)行胚胎移植時(shí)，代孕母羊?qū)χ萌胱訉m的重組胚胎基本上不發(fā)生，這是為重組胚胎在代孕母羊體內(nèi)的存活提供了可能。（4）采用胎兒成纖維細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆，理論上可獲得無限個(gè)轉(zhuǎn)基因綿羊，這是因?yàn)椤?．（2015·重慶·高考真題）2014年埃博拉病在非洲蔓延，我國派出醫(yī)療隊(duì)首次在境外組建醫(yī)院，幫助非洲防控埃博拉疫情。（1）研究表明，埃博拉病毒侵入機(jī)體后，通過靶向感染、破壞吞噬細(xì)胞等，使其不能暴露該病毒的，以致感染信息不能呈遞給，從而無法正常激活細(xì)胞免疫和體液免疫應(yīng)答過程，導(dǎo)致機(jī)體對(duì)該病毒的免疫功能下降。因此，病毒在體內(nèi)快速增殖、致病。（2）對(duì)志愿者接種埃博拉試驗(yàn)疫苗后，機(jī)體免疫系統(tǒng)能產(chǎn)生相應(yīng)抗體，還能產(chǎn)生的免疫細(xì)胞有。（3）用埃博拉病毒的某種蛋白兔疫小鼠，通過技術(shù)獲得雜交瘤細(xì)胞，用于生產(chǎn)單克隆抗體治療該病。6．（2015·福建·高考真題）GDNF是一種神經(jīng)營養(yǎng)因子．對(duì)損傷的神經(jīng)細(xì)胞具有營養(yǎng)和保護(hù)作用．研究人員構(gòu)建了含GDNF基因的表達(dá)載體（如圖1所示），并導(dǎo)入到大鼠神經(jīng)干細(xì)胞中，用于干細(xì)胞基因治療的研究．請(qǐng)回答：（1）在分離和培養(yǎng)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞的過程中，使用胰蛋白酶的目的是．（2）構(gòu)建含GDNF基因的表達(dá)載體時(shí)，需選擇圖1中的限制酶進(jìn)行酶切．（3）經(jīng)酶切后的載體和GDNF基因進(jìn)行連接，連接產(chǎn)物經(jīng)篩選得到的載體主要有三種：?jiǎn)蝹€(gè)載體自連、GDNF基因與載體正向連接、GDNF基因與載體反向連接（如圖1所示）．為鑒定這3種連接方式，選擇HpaI酶和BamHI酶對(duì)篩選的載體進(jìn)行雙酶切，并對(duì)酶切后的DNA片段進(jìn)行電泳分析，結(jié)果如圖2所示．圖中第泳道顯示所鑒定的載體是正向連接的．（4）將正向連接的表達(dá)載體導(dǎo)入神經(jīng)干細(xì)胞后，為了檢測(cè)GDNF基因是否成功表達(dá)，可用相應(yīng)的與提取的蛋白質(zhì)雜交．當(dāng)培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞達(dá)到一定的密度時(shí)，需進(jìn)行培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細(xì)胞，用于神經(jīng)干細(xì)胞移植治療實(shí)驗(yàn)．考點(diǎn)2植物細(xì)胞工程〖2024年高考真題〗1．（2024·北京·高考真題）五彩繽紛的月季裝點(diǎn)著美麗的京城，其中變色月季“光譜”備受青睞?！肮庾V”月季變色的主要原因是光照引起花瓣細(xì)胞液泡中花青素的變化。下列利用“光譜”月季進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)，難以達(dá)成目的的是（

）A．用花瓣細(xì)胞觀察質(zhì)壁分離現(xiàn)象B．用花瓣大量提取葉綠素C．探索生長素促進(jìn)其插條生根的最適濃度D．利用幼嫩莖段進(jìn)行植物組織培養(yǎng)2．（2024·貴州·高考真題）生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中合理選擇材料和研究方法是順利完成實(shí)驗(yàn)的前提條件。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．稀釋涂布平板法既可分離菌株又可用于計(jì)數(shù)B．進(jìn)行胚胎分割時(shí)通常是在原腸胚期進(jìn)行分割C．獲取馬鈴薯脫毒苗常選取莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)D．使用不同的限制酶也能產(chǎn)生相同的黏性末端3．（2024·北京·高考真題）大豆葉片細(xì)胞的細(xì)胞壁被酶解后，可獲得原生質(zhì)體。以下對(duì)原生質(zhì)體的敘述錯(cuò)誤的是（

）A．制備時(shí)需用纖維素酶和果膠酶B．膜具有選擇透過性C．可再生出細(xì)胞壁D．失去細(xì)胞全能性4．（2024·甘肅·高考真題）蘭州百合栽培過程中易受病毒侵染，造成品質(zhì)退化。某研究小組嘗試通過組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗，操作流程如下圖。下列敘述正確的是（

）

A．①為脫分化過程，1號(hào)培養(yǎng)基中的愈傷組織是排列規(guī)則的薄壁組織團(tuán)塊B．②為再分化過程，愈傷組織細(xì)胞分化時(shí)可能會(huì)發(fā)生基因突變或基因重組C．3號(hào)培養(yǎng)基用于誘導(dǎo)生根，其細(xì)胞分裂素濃度與生長素濃度的比值大于1D．百合分生區(qū)附近的病毒極少，甚至無病毒，可以作為該研究中的外植體5．（2024·安徽·高考真題）植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)在生產(chǎn)中已得到應(yīng)用。某興趣小組嘗試?yán)迷摷夹g(shù)培養(yǎng)胡蘿卜細(xì)胞并獲取番茄紅素，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)流程和培養(yǎng)裝置（如圖），請(qǐng)同學(xué)們進(jìn)行評(píng)議。下列評(píng)議不合理的是（

）

A．實(shí)驗(yàn)流程中應(yīng)該用果膠酶等處理愈傷組織，制備懸浮細(xì)胞B．裝置中的充氣管應(yīng)置于液面上方，該管可同時(shí)作為排氣管C．裝置充氣口需要增設(shè)無菌濾器，用于防止雜菌污染培養(yǎng)液D．細(xì)胞培養(yǎng)需要適宜的溫度，裝置需增設(shè)溫度監(jiān)測(cè)和控制設(shè)備6．（2024·湖北·高考真題）植物甲抗旱、抗病性強(qiáng)，植物乙分蘗能力強(qiáng)、結(jié)實(shí)性好?？蒲腥藛T通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育出兼有甲、乙優(yōu)良性狀的植物丙，過程如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．過程①中酶處理的時(shí)間差異，原因可能是兩種親本的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)有差異B．過程②中常采用滅活的仙臺(tái)病毒或PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合C．過程④和⑤的培養(yǎng)基中均需要添加生長素和細(xì)胞分裂素D．可通過分析植物丙的染色體，來鑒定其是否為雜種植株7．（2024·吉林·高考真題）迷迭香酸具有多種藥理活性。進(jìn)行工廠化生產(chǎn)時(shí)，先誘導(dǎo)外植體形成愈傷組織，再進(jìn)行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)獲得迷迭香酸，加入誘導(dǎo)劑茉莉酸甲酯可大幅提高產(chǎn)量。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．迷迭香頂端幼嫩的莖段適合用作外植體B．誘導(dǎo)愈傷組織時(shí)需加入NAA和脫落酸C．懸浮培養(yǎng)時(shí)需將愈傷組織打散成單個(gè)細(xì)胞或較小的細(xì)胞團(tuán)D．茉莉酸甲酯改變了迷迭香次生代謝產(chǎn)物的合成速率8．（2024·浙江·高考真題）山藥在生長過程中易受病毒侵害導(dǎo)致品質(zhì)和產(chǎn)量下降。采用組織培養(yǎng)技術(shù)得到脫毒苗，可恢復(fù)其原有的優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)特性，流程如圖。下列操作不可行的是（

）外植體→愈傷組織→叢生芽→試管苗A．選擇芽尖作為外植體可減少病毒感染B．培養(yǎng)基中加入抗生素可降低雜菌的污染C．將叢生芽切割后進(jìn)行繼代培養(yǎng)可實(shí)現(xiàn)快速繁殖D．提高生長素和細(xì)胞分裂素的比值可促進(jìn)愈傷組織形成叢生芽9．（2024·山東·高考真題）下列關(guān)于植物愈傷組織的說法正確的是（）A．用果膠酶和膠原蛋白酶去除愈傷組織的細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體B．融合的原生質(zhì)體需再生出細(xì)胞壁后才能形成愈傷組織C．體細(xì)胞雜交獲得的雜種植株細(xì)胞中具有來自親本的2個(gè)細(xì)胞核D．通過愈傷組織再生出多個(gè)完整植株的過程屬于無性繁殖10．（2024·湖南·高考真題）百合具有觀賞、食用和藥用等多種價(jià)值，科研人員對(duì)其進(jìn)行了多種育種技術(shù)研究。回答下列問題：(1)體細(xì)胞雜交育種。進(jìn)行不同種百合體細(xì)胞雜交前，先用去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，使原生質(zhì)體融合，得到雜種細(xì)胞后，繼續(xù)培養(yǎng)，常用（填植物激素名稱）誘導(dǎo)愈傷組織形成和分化，獲得完整的雜種植株。(2)單倍體育種。常用的方法來獲得單倍體植株，鑒定百合單倍體植株的方法是。(3)基因工程育種。研究人員從野生百合中獲得一個(gè)抵抗尖孢鐮刀菌侵染的基因L，該基因及其上游的啟動(dòng)子pL和下游的終止子結(jié)構(gòu)如圖a。圖b是一種Ti質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)示意圖，其中基因gus編碼GUS酶，GUS酶活性可反映啟動(dòng)子活性。①研究并原微生物對(duì)L的啟動(dòng)子pL活性的影響。從圖a所示結(jié)構(gòu)中獲取L，首先選用酶切，將其與相同限制酶酶切的Ti質(zhì)粒連接，再導(dǎo)入煙草。隨機(jī)選取3組轉(zhuǎn)基因成功的煙草（P1、P2和P3）進(jìn)行病原微生物脅迫，結(jié)果如圖c。由此可知：三種病原微生物都能誘導(dǎo)pL的活性增強(qiáng)，其中的誘導(dǎo)作用最強(qiáng)。②現(xiàn)發(fā)現(xiàn)栽培種百合B中也有L，但其上游的啟動(dòng)子與野生百合不同，且抗病性弱。若要提高該百合中L的表達(dá)量，培育具有高抗病原微生物能力的百合新品種，簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)思路。11．（2024·浙江·高考真題）植物體在干旱、蟲害或微生物侵害等脅迫過程中會(huì)產(chǎn)生防御物質(zhì)，這類物質(zhì)屬于次生代謝產(chǎn)物。次生代謝產(chǎn)物在植物抗蟲、抗病等方面發(fā)揮作用，也是藥物、香料和色素等的重要來源。次生代謝產(chǎn)物X的研發(fā)流程如下：篩選高產(chǎn)細(xì)胞→細(xì)胞生長和產(chǎn)物X合成關(guān)系的確定→發(fā)酵生產(chǎn)X回答下列問題：(1)獲得高產(chǎn)細(xì)胞時(shí)，以X含量高的植物品種的器官和組織作為，經(jīng)脫分化形成愈傷組織，然后通過液體振蕩和用一定孔徑的篩網(wǎng)進(jìn)行獲得分散的單細(xì)胞。(2)對(duì)分離獲得的單細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，并通過添加或營養(yǎng)缺陷培養(yǎng)方法獲取細(xì)胞周期同步、遺傳和代謝穩(wěn)定、來源單一的細(xì)胞群。為進(jìn)一步提高目標(biāo)細(xì)胞的X含量，將微生物菌體或其產(chǎn)物作為誘導(dǎo)子加入到培養(yǎng)基中，該過程模擬了的脅迫。(3)在大規(guī)模培養(yǎng)高產(chǎn)細(xì)胞前，需了解植物細(xì)胞生長和產(chǎn)物合成的關(guān)系。培養(yǎng)細(xì)胞生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物的模型分為3種，如圖所示。若X只在細(xì)胞生長停止后才能合成，則X的合成符合圖（填“甲”“乙”“丙”），根據(jù)該圖所示的關(guān)系，從培養(yǎng)階段及其目標(biāo)角度，提出獲得大量X的方法。(4)多種次生代謝產(chǎn)物在根部合成與積累，如人參、三葉青等藥用植物，可通過培養(yǎng)替代細(xì)胞懸浮培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物。隨著基因組測(cè)序和功能基因組學(xué)的發(fā)展，在全面了解生物體合成某次生代謝產(chǎn)物的和的基礎(chǔ)上，可利用合成生物學(xué)的方法改造酵母菌等微生物，利用工程生產(chǎn)植物的次生代謝產(chǎn)物?！?023年高考真題〗1．（2023·山東·高考真題）利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在離體條件下對(duì)單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)使其增殖，可獲得植物細(xì)胞的某些次生代謝物。下列說法正確的是（

）A．利用該技術(shù)可獲得某些無法通過化學(xué)合成途徑得到的產(chǎn)物B．植物細(xì)胞體積小，故不能通過該技術(shù)進(jìn)行其產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)C．次生代謝物是植物所必需的，但含量少，應(yīng)選擇產(chǎn)量高的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)D．該技術(shù)主要利用促進(jìn)細(xì)胞生長的培養(yǎng)條件提高單個(gè)細(xì)胞中次生代謝物的含量2．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）植物組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基中常添加蔗糖，植物細(xì)胞利用蔗糖的方式如圖所示。

下列敘述正確的是（）A．轉(zhuǎn)運(yùn)蔗糖時(shí)，共轉(zhuǎn)運(yùn)體的構(gòu)型不發(fā)生變化B．使用ATP合成抑制劑，會(huì)使蔗糖運(yùn)輸速率下降C．植物組培過程中蔗糖是植物細(xì)胞吸收的唯一碳源D．培養(yǎng)基的pH值高于細(xì)胞內(nèi)，有利于蔗糖的吸收3．（2023·廣東·統(tǒng)考高考真題）人參皂苷是人參的主要活性成分?？蒲腥藛T分別誘導(dǎo)人參根與胡蘿卜根產(chǎn)生愈傷組織并進(jìn)行細(xì)胞融合，以提高人參皂苷的產(chǎn)率。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．細(xì)胞融合前應(yīng)去除細(xì)胞壁B．高Ca2+—高pH溶液可促進(jìn)細(xì)胞融合C．融合的細(xì)胞即為雜交細(xì)胞D．雜交細(xì)胞可能具有生長快速的優(yōu)勢(shì)4．（2023·湖北·統(tǒng)考高考真題）栽培稻甲產(chǎn)量高、品質(zhì)好，但每年只能收獲一次。野生稻乙種植一次可連續(xù)收獲多年，但產(chǎn)量低。中國科學(xué)家利用栽培稻甲和野生稻乙雜交，培育出兼具兩者優(yōu)點(diǎn)的品系丙，為全球作物育種提供了中國智慧。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．該成果體現(xiàn)了生物多樣性的間接價(jià)值B．利用體細(xì)胞雜交技術(shù)也可培育出品系丙C．該育種技術(shù)為全球農(nóng)業(yè)發(fā)展提供了新思路D．品系丙的成功培育提示我們要注重野生種質(zhì)資源的保護(hù)5．（2023·海南·高考真題）基因遞送是植物遺傳改良的重要技術(shù)之一，我國多個(gè)實(shí)驗(yàn)室合作開發(fā)了一種新型基因遞送系統(tǒng)（切—浸—生芽Cut-Dip-Budding，簡(jiǎn)稱CDB法）。圖1與圖2分別是利用常規(guī)轉(zhuǎn)化法和CDB法在某植物中遞送基因的示意圖。

回答下列問題。(1)圖1中，從外植體轉(zhuǎn)變成愈傷組織的過程屬于；從愈傷組織到幼苗的培養(yǎng)過程需要的激素有生長素和，該過程還需要光照，其作用是。(2)圖1中的愈傷組織，若不經(jīng)過共培養(yǎng)環(huán)節(jié)，直接誘導(dǎo)培養(yǎng)得到的植株可以保持植株A的。圖1中，含有外源基因的轉(zhuǎn)化植株A若用于生產(chǎn)種子，其包裝需標(biāo)注。(3)圖1與圖2中，農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞時(shí)，可將外源基因遞送到植物細(xì)胞中的原因是。(4)已知某酶（PDS）缺失會(huì)導(dǎo)致植株白化。某團(tuán)隊(duì)構(gòu)建了用于敲除PDS基因的CRISPR/Cas9基因編輯載體（含有綠色熒光蛋白標(biāo)記基因），利用圖2中的CDB法將該重組載體導(dǎo)入植株B，長出毛狀根，成功獲得轉(zhuǎn)化植株B．據(jù)此分析，從毛狀根中獲得陽性毛狀根段的方法是，圖2中，鑒定導(dǎo)入幼苗中的基因編輯載體是否成功發(fā)揮作用的方法是，依據(jù)是。(5)與常規(guī)轉(zhuǎn)化法相比，采用CDB法進(jìn)行基因遞送的優(yōu)點(diǎn)是（答出2點(diǎn)即可）。6．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）賴氨酸是人體不能合成的必需氨基酸，而人類主要食物中的賴氨酸含量很低，利用生物技術(shù)可提高食物中賴氨酸含量。回答下列問題：(1)植物細(xì)胞合成的賴氨酸達(dá)到一定濃度時(shí)，能抑制合成過程中兩種關(guān)鍵酶的活性，導(dǎo)致賴氨酸含量維持在一定濃度水平，這種調(diào)節(jié)方式屬于。根據(jù)這種調(diào)節(jié)方式，在培養(yǎng)基中添加，用于篩選經(jīng)人工誘變的植物懸浮細(xì)胞，可得到抗賴氨酸類似物的細(xì)胞突變體，通過培養(yǎng)獲得再生植株。(2)隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞工程結(jié)合和發(fā)展，2011年我國首次利用轉(zhuǎn)基因和體細(xì)胞核移植技術(shù)成功培育了高產(chǎn)賴氨酸轉(zhuǎn)基因克隆奶牛。其基本流程為：①構(gòu)建乳腺專一表達(dá)載體。隨著測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，為獲取富含賴氨酸的酪蛋白基因（目的基因），可通過檢索獲取其編碼序列，用化學(xué)合成法制備得到。再將獲得的目的基因與含有乳腺特異性啟動(dòng)子的相應(yīng)載體連接，構(gòu)建出乳腺專一表達(dá)載體。②表達(dá)載體轉(zhuǎn)入牛胚胎成纖維細(xì)胞（BEF）。將表達(dá)載體包裹到磷脂等構(gòu)成的脂質(zhì)體內(nèi)，與BEF膜發(fā)生，表達(dá)載體最終進(jìn)入細(xì)胞核，發(fā)生轉(zhuǎn)化。③核移植。將轉(zhuǎn)基因的BEF作為核供體細(xì)胞，從牛卵巢獲取卵母細(xì)胞，經(jīng)體外培養(yǎng)及去核后作為。將兩種細(xì)胞進(jìn)行電融合，電融合的作用除了促進(jìn)細(xì)胞融合，同時(shí)起到了重組細(xì)胞發(fā)育的作用。④重組細(xì)胞的體外培養(yǎng)及胚胎移植。重組細(xì)胞體外培養(yǎng)至，植入代孕母牛子宮角，直至小牛出生。⑤檢測(cè)。DNA水平檢測(cè)：利用PCR技術(shù)，以非轉(zhuǎn)基因牛耳組織細(xì)胞作為陰性對(duì)照，以為陽性對(duì)照，檢測(cè)到轉(zhuǎn)基因牛耳組織細(xì)胞中存在目的基因。RNA水平檢測(cè)：從非轉(zhuǎn)基因牛乳汁中的脫落細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因牛乳汁中的脫落細(xì)胞和轉(zhuǎn)基因牛耳組織細(xì)胞，提取總RNA，對(duì)總RNA進(jìn)行處理，以去除DNA污染，再經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA，并以此為，利用特定引物擴(kuò)增目的基因片段。結(jié)果顯示目的基因在轉(zhuǎn)基因牛乳汁中的脫落細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，而不在牛耳組織細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，原因是什么？。7．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）甲植物細(xì)胞核基因具有耐鹽堿效應(yīng)，乙植物細(xì)胞質(zhì)基因具有高產(chǎn)效應(yīng)。某研究小組用甲、乙兩種植物細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交相關(guān)研究，基本過程包括獲取原生質(zhì)體、誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合、篩選融合細(xì)胞、雜種植株再生和鑒定，最終獲得高產(chǎn)耐鹽堿再生植株?；卮鹣铝袉栴}：(1)根據(jù)研究目標(biāo)，在甲、乙兩種植物細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交前，應(yīng)檢驗(yàn)兩種植物的原生質(zhì)體是否具備的能力。為了便于觀察細(xì)胞融合的狀況，通常用不同顏色的原生質(zhì)體進(jìn)行融合，若甲植物原生質(zhì)體采用幼苗的根為外植體，則乙植物可用幼苗的為外植體。(2)植物細(xì)胞壁的主要成分為和果膠，在獲取原生質(zhì)體時(shí)，常采用相應(yīng)的酶進(jìn)行去壁處理。在原生質(zhì)體融合前，需對(duì)原生質(zhì)體進(jìn)行處理，分別使甲原生質(zhì)體和乙原生質(zhì)體的失活。對(duì)處理后的原生質(zhì)體在顯微鏡下用計(jì)數(shù)，確定原生質(zhì)體密度。兩種原生質(zhì)體1∶1混合后，通過添加適宜濃度的PEG進(jìn)行融合；一定時(shí)間后，加入過量的培養(yǎng)基進(jìn)行稀釋，稀釋的目的是。(3)將融合原生質(zhì)體懸浮液和液態(tài)的瓊脂糖混合，在凝固前倒入培養(yǎng)皿，融合原生質(zhì)體分散固定在平板中，并獨(dú)立生長、分裂形成愈傷組織。同一塊愈傷組織所有細(xì)胞源于。下列各項(xiàng)中能說明這些愈傷組織只能來自于雜種細(xì)胞的理由是哪幾項(xiàng)？A．甲、乙原生質(zhì)體經(jīng)處理后失活，無法正常生長、分裂B．同種融合的原生質(zhì)體因甲或乙原生質(zhì)體失活而不能生長、分裂C．培養(yǎng)基含有抑制物質(zhì)，只有雜種細(xì)胞才能正常生長、分裂D．雜種細(xì)胞由于結(jié)構(gòu)和功能完整可以生長、分裂(4)愈傷組織經(jīng)可形成胚狀體或芽。胚狀體能長出，直接發(fā)育形成再生植株。(5)用PCR技術(shù)鑒定再生植株。已知甲植物細(xì)胞核具有特異性DNA序列a，乙植物細(xì)胞質(zhì)具有特異性DNA序列b；M1、M2為序列a的特異性引物，N1、N2為序列b的特異性引物。完善實(shí)驗(yàn)思路：Ⅰ．提取純化再生植株的總DNA，作為PCR擴(kuò)增的。Ⅱ．將DNA提取物加入PCR反應(yīng)體系，為特異性引物，擴(kuò)增序列a；用同樣的方法擴(kuò)增序列b。Ⅲ．得到的2個(gè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)后，若每個(gè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物在凝膠中均出現(xiàn)了預(yù)期的個(gè)條帶，則可初步確定再生植株來自于雜種細(xì)胞?！?022年高考真題〗8．（2022·重慶·統(tǒng)考高考真題）植物體細(xì)胞通常被誘導(dǎo)為愈傷組織后才能表現(xiàn)全能性。研究發(fā)現(xiàn)，愈傷組織的中層細(xì)胞是根或芽再生的源頭干細(xì)胞，其在不同條件下，通過基因的特異性表達(dá)調(diào)控生長素、細(xì)胞分裂素的作用，表現(xiàn)出不同的效應(yīng)（見如表）。已知生長素的生理作用大于細(xì)胞分裂素時(shí)有利于根的再生；反之，有利于芽的再生。下列推論不合理的是（

）條件基因表達(dá)產(chǎn)物和相互作用效應(yīng)①WOX5維持未分化狀態(tài)②WOX5+PLT誘導(dǎo)出根③WOX5+ARR2，抑制ARR5誘導(dǎo)出芽A．WOX5失活后，中層細(xì)胞會(huì)喪失干細(xì)胞特性B．WOX5+PLT可能有利于愈傷組織中生長素的積累C．ARR5促進(jìn)細(xì)胞分裂素積累或提高細(xì)胞對(duì)細(xì)胞分裂素的敏感性D．體細(xì)胞中生長素和細(xì)胞分裂素的作用可能相互抑制9．（2022·遼寧·統(tǒng)考高考真題）藍(lán)莓細(xì)胞富含花青素等多酚類化合物。在藍(lán)莓組織培養(yǎng)過程中，外植體切口處細(xì)胞被破壞，多酚類化合物被氧化成褐色醌類化合物，這一過程稱為褐變。褐變會(huì)引起細(xì)胞生長停滯甚至死亡，導(dǎo)致藍(lán)莓組織培養(yǎng)失敗。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．花青素通常存在于藍(lán)莓細(xì)胞的液泡中B．適當(dāng)增加培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至新鮮培養(yǎng)基的頻率以減少褐變C．在培養(yǎng)基中添加合適的抗氧化劑以減少褐變D．宜選用藍(lán)莓成熟葉片為材料制備外植體10．（2022·浙江·高考真題）下列關(guān)于菊花組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（

）A．用自然生長的莖進(jìn)行組培須用適宜濃度的乙醇和次氯酸鈉的混合液消毒B．培養(yǎng)瓶用專用封口膜封口可防止外界雜菌侵入并阻止瓶內(nèi)外的氣體交換C．組培苗鍛煉時(shí)采用蛭石作為栽培基質(zhì)的原因是蛭石帶菌量低且營養(yǎng)豐富D．不帶葉片的菊花幼莖切段可以通過器官發(fā)生的途徑形成完整的菊花植株11．（2022·浙江·統(tǒng)考高考真題）農(nóng)作物秸稈的回收利用方式很多，其中之一是將秸稈碎化后作為食用菌的栽培基質(zhì)。碎化秸稈中纖維所起的作用，相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)中固體培養(yǎng)基的（

）A．瓊脂+蔗糖 B．蔗糖+激素 C．激素+無機(jī)鹽 D．無機(jī)鹽+瓊脂12．（2022·重慶·統(tǒng)考高考真題）改良水稻的株高和產(chǎn)量性狀是實(shí)現(xiàn)袁隆平先生“禾下乘涼夢(mèng)”的一種可能途徑。研究人員克隆了可顯著增高和增產(chǎn)的eui基因，并開展了相關(guān)探索。步驟I：步驟II：(1)花藥培養(yǎng)能縮短育種年限，原因是。在步驟I的花藥培養(yǎng)過程中，可產(chǎn)生單倍體愈傷組織，將其培養(yǎng)于含的培養(yǎng)基上，可促進(jìn)產(chǎn)生二倍體愈傷組織。I中能用于制造人工種子的材料是。(2)步驟II中，eui基因克隆于cDNA文庫而不是基因組文庫，原因是；在構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時(shí)使用的工具酶有。為篩選含重組Ti質(zhì)粒的菌株，需在培養(yǎng)基中添加。獲得的農(nóng)桿菌菌株經(jīng)鑒定后，應(yīng)侵染I中的，以獲得轉(zhuǎn)基因再生植株。再生植株是否含有eui基因的鑒定方法是，移栽后若發(fā)育為更高且豐產(chǎn)的稻株，則可望“禾下乘涼”?！?021年高考真題〗13．（2021·江蘇·高考真題）植物組織培養(yǎng)技術(shù)常用于商業(yè)化生產(chǎn)：其過程一般為:無菌培養(yǎng)物的建立→培養(yǎng)物增殖→生根培養(yǎng)→試管苗移栽及鑒定。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．為獲得無菌培養(yǎng)物，外植體要消毒處理后才可接種培養(yǎng)B．組織培養(yǎng)過程中也可無明顯愈傷組織形成，直接形成胚狀體等結(jié)構(gòu)C．提高培養(yǎng)基中生長素和細(xì)胞分裂素的比值，有利于誘導(dǎo)生根D．用同一植株體細(xì)胞離體培養(yǎng)獲得的再生苗不會(huì)出現(xiàn)變異14．（2021·福建·統(tǒng)考高考真題）科研人員利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育矮牽牛新品種，技術(shù)流程示意圖如下。下列敘述正確的是（）A．愈傷組織是幼嫩葉片通過細(xì)胞分化形成的B．獲得的雜種植株都能表現(xiàn)雙親的優(yōu)良性狀C．可用聚乙二醇誘導(dǎo)原生質(zhì)體甲和乙的融合和細(xì)胞壁再生D．用纖維素酶和果膠酶處理愈傷組織以獲得原生質(zhì)體15．（2021·湖北·統(tǒng)考高考真題）月季在我國享有“花中皇后”的美譽(yù)。為了建立月季某新品種的快速繁殖體系，以芽體為外植體，在MS培養(yǎng)基中添加不同濃度的6-BA和IBA進(jìn)行芽體增殖實(shí)驗(yàn)，芽分化率（%）結(jié)果如表。6-BA/（mg·L-1）IBA/（mg·L-1）0．10．20．30．40．51．031635849412．040957669503．037756454414．025353130255．08211284關(guān)于上述實(shí)驗(yàn)，下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．6-BA濃度大于4．0mg·L-1時(shí)，芽分化率明顯降低B．6-BA與IBA的比例為10：1時(shí)芽分化率均高于其他比例C．在培養(yǎng)基中同時(shí)添加適量的6-BA和IBA，可促進(jìn)芽分化D．2．0mg·L-16-BA和0．2mg·L-1IBA是實(shí)驗(yàn)處理中芽分化的最佳組合16．（2021·北京·統(tǒng)考高考真題）研究者擬通過有性雜交的方法將簇毛麥（2n=14）的優(yōu)良性狀導(dǎo)入普通小麥（2n=42）中。用簇毛麥花粉給數(shù)以千計(jì)的小麥小花授粉，10天后只發(fā)現(xiàn)兩個(gè)雜種幼胚，將其離體培養(yǎng)，產(chǎn)生愈傷組織，進(jìn)而獲得含28條染色體的大量雜種植株。以下表述錯(cuò)誤的是（）A．簇毛麥與小麥之間存在生殖隔離B．培養(yǎng)過程中幼胚細(xì)胞經(jīng)過脫分化和再分化C．雜種植株減數(shù)分裂時(shí)染色體能正常聯(lián)會(huì)D．雜種植株的染色體加倍后能產(chǎn)生可育植株17．（2021·浙江·統(tǒng)考高考真題）回答下列（一）、（二）小題：（一）某環(huán)保公司從淤泥中分離到一種高效降解富營養(yǎng)化污水污染物的細(xì)菌菌株，制備了固定化菌株。（1）從淤泥中分離細(xì)菌時(shí)常用劃線分離法或法，兩種方法均能在固體培養(yǎng)基上形成。對(duì)分離的菌株進(jìn)行誘變、和鑒定，從而獲得能高效降解富營養(yǎng)化污水污染物的菌株。該菌株只能在添加了特定成分X的培養(yǎng)基上繁殖。（2）固定化菌株的制備流程如下；①將菌株與該公司研制的特定介質(zhì)結(jié)合；②用蒸餾水去除；③檢驗(yàn)固定化菌株的。菌株與特定介質(zhì)的結(jié)合不宜直接采用交聯(lián)法和共價(jià)偶聯(lián)法，可以采用的2種方法是。（3）對(duì)外，只提供固定化菌株有利于保護(hù)該公司的知識(shí)產(chǎn)權(quán)，推測(cè)其原因是。（二）三葉青為蔓生的藤本植物，以根入藥。由于野生三葉青對(duì)生長環(huán)境要求非?？量蹋约吧鷳B(tài)環(huán)境的破壞和過度的采挖，目前我國野生三葉青已十分珍稀。（1）為保護(hù)三葉青的多樣性和保證藥材的品質(zhì)，科技工作者依據(jù)生態(tài)工程原理，利用技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了三葉青的林下種植。（2）依據(jù)基因工程原理，利用發(fā)根農(nóng)桿菌侵染三葉青帶傷口的葉片，葉片產(chǎn)生酚類化合物，誘導(dǎo)發(fā)根農(nóng)桿菌質(zhì)粒上vir系列基因表達(dá)形成和限制性核酸內(nèi)切酶等，進(jìn)而從質(zhì)粒上復(fù)制并切割出一段可轉(zhuǎn)移的DNA片段（T-DNA）。T-DNA進(jìn)入葉片細(xì)胞并整合到染色體上，T-DNA上rol系列基因表達(dá)，產(chǎn)生相應(yīng)的植物激素，促使葉片細(xì)胞持續(xù)不斷地分裂形成，再分化形成毛狀根。（3）剪取毛狀根，轉(zhuǎn)入含頭孢類抗生素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行多次培養(yǎng)，培養(yǎng)基中添加抗生素的主要目的是。最后取毛狀根轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基、置于搖床上進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，通過控制搖床的和溫度，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基成分中的，獲得大量毛狀根，用于提取藥用