胡蘿卜品種抗黑腐病鑒定技術(shù)規(guī)程

Q/LB.□XXXXX-XXXX目次TOC\o"1-1"\h\t"標(biāo)準(zhǔn)文件_一級條標(biāo)題,2,標(biāo)準(zhǔn)文件_附錄一級條標(biāo)題,2,"前言 II1范圍 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 14病原物接菌體的制備 25田間抗病性鑒定 26接種病原菌 37病情調(diào)查及記錄標(biāo)準(zhǔn) 38抗病性評價(jià) 4附錄A（資料性）胡蘿卜品種抗黑腐病評價(jià)田間調(diào)查記載表 5前言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件代替DB14/T751—2013《胡蘿卜品種抗黑腐病評價(jià)方法》和DB14/T753-2013《胡蘿卜葉部黑腐病嚴(yán)重度分級及調(diào)查方法》，與DB14/T751—2013和DB14/T753-2013相比，除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動(dòng)外，主要技術(shù)變化如下:——修改了標(biāo)準(zhǔn)題目——增加了病原物形態(tài)特征內(nèi)容（見3.2）——更改了試驗(yàn)設(shè)計(jì)內(nèi)容（見4.2）——更改了種子處理內(nèi)容（見4.3.1）——更改了播種期內(nèi)容（見4.3.2.1）——更改了調(diào)查方法內(nèi)容（見4.5.2）——更改了抗病性類型內(nèi)容（見4.5.3）——增加了重復(fù)鑒定和抗性評價(jià)結(jié)果分析內(nèi)容（見4.6和4.7）本文件由山西省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出、組織實(shí)施和監(jiān)督檢查。本文件由山西省市場監(jiān)督管理局對標(biāo)準(zhǔn)的組織實(shí)施情況進(jìn)行監(jiān)督檢查。本文件由山西省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（SXS/TC19）歸口。本文件起草單位：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)。本文件主要起草人：周建波、呂紅、封云濤、殷輝、秦楠、郭貴明。本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為：——2013年首次發(fā)布為DB14/T751-2013；——本次為第一次修訂。胡蘿卜品種抗黑腐病鑒定技術(shù)規(guī)程范圍本文件規(guī)定了胡蘿卜品種抗黑腐病評價(jià)的術(shù)語和定義、評價(jià)方法。本文件適用于胡蘿卜品種抗黑腐病田間鑒定。規(guī)范性引用文件本文件沒有規(guī)范性引用文件。術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。胡蘿卜黑腐病Carrotblackrot癥狀：葉片發(fā)病，呈暗褐色斑，嚴(yán)重時(shí)致葉片枯死。葉柄發(fā)病，病斑長條狀、梭形，邊緣不明顯；濕度大時(shí)表面密生黑色霉層。肉質(zhì)根發(fā)病，根頭部形成不規(guī)則形或圓形稍凹陷黑斑，嚴(yán)重時(shí)病斑擴(kuò)展，深達(dá)內(nèi)部，肉質(zhì)根變黑腐爛。3.2病原菌Pathogen中文學(xué)名：胡蘿卜黑腐交鏈孢。拉丁學(xué)名：Alternariaradicina。形態(tài)特征：PDA培養(yǎng)基上，初期病原菌菌落呈白色，隨著病原菌生長菌落呈橄欖色，最終呈黑褐色至黑色，底部呈輪紋狀。菌絲淡褐色、褐色，有隔膜、隔膜處縊縮。分生孢子梗褐色，有隔膜、隔膜處縊縮，直立或屈膝狀，單生，分生孢子脫落后孢痕明顯。分生孢子橢圓形或倒棍棒形，光滑，無喙，單生或串生，有隔膜，橫隔1-7個(gè)，縱、斜隔0-3個(gè)，大小30-50×10-20μm。3.3病情指數(shù)DiseaseIndex將普遍率和病害嚴(yán)重度相結(jié)合，用一個(gè)數(shù)值全面反映植株群體發(fā)病程度。 (SEQ標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)公式\*ARABIC1)式中:DI——病情指數(shù)；NI——各級病葉數(shù)（片）；I——相對應(yīng)的嚴(yán)重度級數(shù)值；M——表示調(diào)查總?cè)~數(shù)（片）。3.4相對抗病性指數(shù)Relativeresistanceindex以感病品種作為對照品種，在同一生長條件下將供試品種的病情指數(shù)與對照品種的病情指數(shù)相比較，計(jì)算相對抗病性指數(shù)。 (SEQ標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)公式\*ARABIC2)式中:RRI——相對抗病性指數(shù)；X——對照品種病情指數(shù)/100；Y——供試品種病情指數(shù)/100。3.5盛發(fā)期Fullincidenceperiod此期間病害數(shù)量不斷增大，寄主群體可侵染的位點(diǎn)逐漸減少。病原物接菌體的制備4.1病原菌的分離和確定從發(fā)病植株的發(fā)病部位上以常規(guī)組織分離法分離病原菌，并進(jìn)行單孢純化，參照胡蘿卜黑腐交鏈孢Alternariaradicina的形態(tài)學(xué)特征鑒定病原，再經(jīng)致病性測定后，擴(kuò)繁保存?zhèn)溆谩?.2菌種的擴(kuò)繁將保存的病原菌轉(zhuǎn)接到PDA培養(yǎng)基上，在黑暗交替下25℃培養(yǎng)7d左右，使菌落長滿整個(gè)培養(yǎng)皿。4.3菌種的保存將擴(kuò)繁的病原菌轉(zhuǎn)接到試管斜面上，待菌落長滿整個(gè)斜面后將試管放入4℃冰箱中冷藏保存。為保證病原菌的活性和致病性，每隔1月轉(zhuǎn)接一次，間隔半年將病原菌轉(zhuǎn)接于健康胡蘿卜植株上后重新分離，即復(fù)性1次。田間抗病性鑒定病圃的設(shè)置選擇老灌區(qū)、地勢低洼的胡蘿卜黑腐病常發(fā)田塊做病圃。每年春季將上年干燥保存的帶黑腐病原菌的胡蘿卜莖、葉切成2cm～3cm殘段,均勻撒在病圃。試驗(yàn)設(shè)計(jì)鑒定材料采用隨機(jī)區(qū)組排列，每小區(qū)面積15m2～20m2，每份材料重復(fù)3次。選取胡蘿卜黑腐病高感品種作為對照品種，對照品種不同年度間一致。鑒定材料栽培管理種子處理播前7d～10d將種子晾曬1d～2d，搓去種子刺毛，然后把種子放入50℃～55℃溫水中浸泡25min，再在常溫水中浸泡4h～8h，瀝干水分，直接播種。播種5.3.2.1播種期依據(jù)試驗(yàn)地栽培習(xí)慣進(jìn)行，山西省露地栽培一般在4月中下旬播種。5.3.2.2播種量每畝用種0.8kg～1.5kg。5.3.2.3播種方法條播，行距18cm～20cm，播種深度1.5cm～2.0cm，覆土后鎮(zhèn)壓。5.3.3田間管理5.3.3.1定苗第1片～2片真葉時(shí)第1次間苗，保持株距3cm；第3片～4片真葉時(shí)第2次間苗，保持株距6cm；第5片～6片真葉定苗，保持株距10cm。澆水發(fā)芽期澆水2次～3次，土壤最大持水量維持在65%～80%；生育前期應(yīng)及時(shí)澆水，使土壤經(jīng)常保持濕潤；生育后期適當(dāng)控制澆水次數(shù)。澆水要均勻，忌田間積水，要注意排水防澇。6接種病原菌將病原菌制備成濃度為每毫升106個(gè)分生孢子的菌懸液，在胡蘿卜7~8葉期時(shí)，均勻噴霧于胡蘿卜地上部分，間隔7天連續(xù)接菌2次。7病情調(diào)查及記錄標(biāo)準(zhǔn)7.1調(diào)查時(shí)間胡蘿卜黑腐病發(fā)病盛發(fā)期，即對照品種小區(qū)DI大于50時(shí)調(diào)查。調(diào)查方法每小區(qū)5點(diǎn)隨機(jī)取樣，每點(diǎn)調(diào)查20株，以羽狀復(fù)葉為單位調(diào)查全部葉片，記錄每片羽狀復(fù)葉的病級，計(jì)算小區(qū)病情指數(shù)DI和相對抗病指數(shù)RRI。記錄表格見附表A。病情嚴(yán)重度分級葉片嚴(yán)重度分級（以羽狀復(fù)葉為單位）：0級：葉柄上無病斑；1級：葉柄上有1個(gè)～4個(gè)病斑；3級：葉柄上有5個(gè)～8個(gè)病斑；5級：葉柄上有9個(gè)以上病斑，1個(gè)～2個(gè)葉梢枯死，1個(gè)～2個(gè)分枝枯死；7級：3個(gè)以上分枝枯死，上部1/3以上葉梢枯死；9級，整片羽狀復(fù)葉枯死?？共⌒栽u價(jià)有效性鑒別判別當(dāng)鑒定圃中的高感對照品種80%植株達(dá)到平均病情嚴(yán)重度時(shí)，該批次抗病性鑒定結(jié)果是為有效?？共⌒栽u價(jià)標(biāo)準(zhǔn)胡蘿卜黑腐病抗病性類型劃分如表1所示。抗病性類型分級表抗病性類型高抗HR抗病R中抗MR感病S高感HSRRI值RRI≥1.41.1≤RRI<1.40.5≤RRI<1.10.1≤RRI<0.5RRI<0.18.3重復(fù)鑒定鑒定材料抗性初次鑒定為高抗、抗病、中抗，需再次進(jìn)行重復(fù)鑒定。8.4抗性評價(jià)結(jié)果分析