《地方品種、引進(jìn)品種豬細(xì)管凍精生產(chǎn)及保存技術(shù)規(guī)程》

ICS65.020.30DB52

B43

貴州省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB52/TXXXX—XXXX

地方品種、引進(jìn)品種豬細(xì)管凍精生產(chǎn)及保

存技術(shù)規(guī)程

Technicalrulesforproductionandpreservationofpigfinetubefrozensemen

(征求意見稿）

2022-XX-XX發(fā)布2022-XX-XX實(shí)施

貴州省市場監(jiān)督管-理1-局發(fā)布

DB52/TXXXX—XXXX

地方品種、引進(jìn)品種豬細(xì)管凍精生產(chǎn)及保存技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件確立了豬細(xì)管冷凍精液生產(chǎn)與保存的技術(shù)程序構(gòu)成，規(guī)定了采精前準(zhǔn)備、采精、原精質(zhì)量

要求、精液冷凍制作流程、精液解凍、質(zhì)量初檢、保存等技術(shù)環(huán)節(jié)要求，描述了相關(guān)方法。

本文件適用于豬細(xì)管冷凍精液（以下簡稱“凍精”）生產(chǎn)、初檢及保存。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可缺少的條款。其中，注日期的引用

文件，僅注日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）

適用于本文件。

GB23238種豬常溫精液

GB/T25172豬常溫精液生產(chǎn)與保存技術(shù)規(guī)范

NY/T2077種公豬站建設(shè)技術(shù)規(guī)范

NY/T1167畜禽場環(huán)境質(zhì)量及衛(wèi)生控制規(guī)范

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本件。

3.1原精rawSemen

采集后未經(jīng)稀釋的精液，由精子和精清兩部分組成的雄性生殖器外分泌物，其中，精子懸浮在液

狀精清中。[來源:GB/T25172-2020,3.1]

3.2精子活力spermmotility

精液中前向運(yùn)動精子活動的程度。

注：當(dāng)精液溫度在37℃左右時，以精液中前向運(yùn)動精子數(shù)占總精子數(shù)的百分比表示。

-4-

[來源:GB23238-2021，3.4]

3.3精子畸形率abnormalspermpercentage

畸型精子占總精子數(shù)的百分比。[來源:GB/T25172-2020,3.5]

3.4精子密度semenconcentration

每毫升精液中所含的精子數(shù)。[來源:GB23238-2021,3.3]

3.5凍精FrozenSemen

經(jīng)特殊方法處理的精液，通過超低溫冷凍后在液氮中（-196℃）長期保存。[來源:GB4143-

2008,3.5]

3.6細(xì)管冷凍精液Frozensperminfinetubes

原精經(jīng)過特殊處理液灌注到細(xì)管型中，再通過超低溫冷凍程序處理制成的凍精，簡稱“細(xì)管凍

精”，凍精可以在液氮中（-196℃）長期保存。

注：豬精灌裝適用細(xì)管規(guī)格為“0.25mL”、“0.5mL”、“1mL”。

4豬冷凍精液生產(chǎn)及保存技術(shù)的構(gòu)成

豬細(xì)管冷凍精液生產(chǎn)及保存程序包括6個階段，其中精液冷凍制作分為6個步驟。程序流程圖如

圖1所示。

貴州省標(biāo)準(zhǔn)化公共服務(wù)平臺

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生產(chǎn)場所（見5.1）

設(shè)備要求（見5.2）

采精前準(zhǔn)備（見5）

稀釋液配制（見5.3）

采精（見6）

室溫25℃溫平衡（見8.1）

（見5.4.3）

原精質(zhì)量要求（見7）

17℃恒溫箱平衡（見8.2）

離心去上清液（見8.3）

凍精制作（見8）

4°C平衡（見8.4）

（見6.4）

灌裝（見8.5）

（見6.5）

冷凍（見8.6）

精液解凍、初檢、保存（見

9）

貴州省標(biāo)準(zhǔn)化公共服務(wù)平臺（見5.5）

生產(chǎn)記錄表（見10）

圖1豬細(xì)管冷凍精液生產(chǎn)及保存程序流程圖

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5豬細(xì)管冷凍精液生產(chǎn)及保存的基本要求

5.1采精前準(zhǔn)備

5.1.1生產(chǎn)場所

5.1.1.1生產(chǎn)場所主要包括采精室、精液生產(chǎn)室和精液質(zhì)量檢測室。

5.1.1.2基礎(chǔ)設(shè)施能夠保證生產(chǎn)的需要，其中采精室、精液生產(chǎn)室和精液質(zhì)量檢測室使用面積及設(shè)施條

件應(yīng)符合NY/T2077-2011中7.3、7.4和7.5的規(guī)定。

5.1.1.3環(huán)境條件應(yīng)符合NY/T1167的規(guī)定,不允許有影響種豬健康和凍精質(zhì)量的不良因素。

5.2儀器設(shè)備要求

5.2.1器械及器皿消毒

器械及器皿清洗方式方法，通常為手工清洗或使用超聲波清洗機(jī)。器具的消毒滅菌，應(yīng)按照不同

材質(zhì)分別采用對應(yīng)的方式方法，玻璃器皿類清洗潔凈后,采用電熱恒溫干燥箱高溫滅菌消毒；對于一些

不耐高溫材質(zhì)的，如橡膠、塑料制品，采用75％酒精擦拭消毒或紫外線燈照射、臭氧消毒。

5.2.1精液生產(chǎn)所需儀器設(shè)備

設(shè)備的性能、精度、量程應(yīng)能夠滿足冷凍精液生產(chǎn)與檢驗(yàn)測試的需要,儀器設(shè)備清單見附錄A。

為確保設(shè)備能夠正常的運(yùn)轉(zhuǎn)和測試結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)保證以下各要求：

a）應(yīng)嚴(yán)格按照儀器設(shè)備使用技術(shù)規(guī)程規(guī)范操作；

b）在用儀器設(shè)備需要給予正常的維護(hù)，保證完好率達(dá)到100％；

c）涉及到量值器具與設(shè)備（天平、溫度計(jì)、恒溫箱等）應(yīng)定期進(jìn)行檢定和校準(zhǔn)；

d）在用儀器設(shè)備的管理應(yīng)建有檔案和臺賬。

e)精液生產(chǎn)室的設(shè)備:控溫設(shè)備、恒溫水浴箱（鍋）、顯微鏡恒溫載物臺、精子密度測定儀、電子

天平、恒溫箱、低溫平衡柜均應(yīng)提前開機(jī)預(yù)熱（冷）待用，凡是接觸精液的器皿應(yīng)按使用要求，分別

貴州省標(biāo)準(zhǔn)化公共服務(wù)平臺放置于不同環(huán)境溫度中預(yù)熱或冷藏待用。

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5.3稀釋液配制要求

5.2.1所用的試劑應(yīng)選擇分析純；稀釋用水為新鮮雙重蒸餾水；提供新鮮卵黃的雞蛋應(yīng)是來源于無疫病

雞場；添加使用的抗生素應(yīng)在有效期內(nèi)。

5.2.2稀釋液配制過程中應(yīng)按照配方要求、準(zhǔn)確稱量、先后順序、規(guī)范操作。配制完成后應(yīng)及時在稀

釋液容器上明顯標(biāo)記稀釋液的名稱、配制日期、保質(zhì)時間等。

5.2.3通常稀釋液的配方、配制方法及保存要求（見附錄B表）

5.2.4商品稀釋劑：使用時，按產(chǎn)品使用說明書操作。

6采精

6.1采精公豬來源應(yīng)符合NY/T2077-2011中8.3.1的要求。

6.2采精操作，按照GB/T25172中5.1.2的操作步驟。

根據(jù)公豬射精特點(diǎn)，應(yīng)舍去最初和最后部分精液，采集完成后立即送入精液生產(chǎn)室。

7原精質(zhì)量

原精精液品質(zhì)檢驗(yàn)，按GB/T25172中5.2.3.1～5.2.3.4規(guī)定方法，結(jié)果應(yīng)符合表1中規(guī)定。

表1原精精液質(zhì)量要求

質(zhì)量要求

檢測項(xiàng)目檢測方法

引入品種、培育品種地方品種（推廣利用）

外觀呈乳白色，無異常分泌物目測

采精量（mL）≥100mL≥80mLGB/T25172中5.2.3.1

精子活力(％)≥90％≥80％GB/T25172中5.2.3.2

精子密度/108個/mL≥2×108/mL≥1×108/mLGB/T25172中5.2.3.3

貴州省標(biāo)準(zhǔn)化公共服務(wù)平臺8凍精制作

8.1室溫25℃溫平衡

質(zhì)檢驗(yàn)合格的原精液，緩緩加入等量等溫（37℃）預(yù)先配種好的預(yù)稀釋液（原精液與預(yù)稀釋液

1:1）搖勻，標(biāo)記后置于室溫（25℃左右）約1h。

-8-

8.217℃恒溫箱平衡

8.2.1室溫平衡結(jié)束轉(zhuǎn)入17℃恒溫箱，降至17℃恒溫2h～3h（最長不超過24h），期間

注意適當(dāng)搖動精液，防止精子假死。

8.2.217℃平衡結(jié)束，取樣液?。ò凑粘鼐合♂尡壤z測精子活力，精子活力滿足第7

步驟中表1的要求，則進(jìn)行下一步，否則作廢處理。

8.3精液離心及去上清液

8.3.1冷凍稀釋液添加量的計(jì)算方法（一）

8.3.1.1稱量精子凈重單位（g），換算精子體積）（mL），計(jì)算按1g相當(dāng)于1mL行進(jìn)換算。按公式

1：

V1W1W0

a）離心前應(yīng)準(zhǔn)確稱量離心管凈重，單位為克（g），做好標(biāo)記；

b）將17℃恒溫2h-3h結(jié)束的常溫精液，分裝入離心管，在17℃環(huán)境條件下用900g離

心8-9min，舍去上清液；

c）離心后及時稱量離心管加精子重量，單位為克（g）；

d）精子體積的計(jì)算，按式（1）：

式中：

V1——總精子體積，單位為毫升（ml）；

W1——離心瓶加精子重，單位為克（g）；

W

0——離心瓶重，單位為克（g）；

e）依據(jù)測定的采精量、精子密度、精子活力，計(jì)算有效精子總數(shù)，按公式2：

SV1ρm

式中：

ρ

貴州省標(biāo)準(zhǔn)化公共服務(wù)平臺——精子密度，每毫升精液（原精液）中精子的個數(shù)，用精子密度儀測。

S——總的有效精子數(shù)，單位為億個（108個）

V1——每頭豬總的采精量，單位為毫升（ml）；

m——精子活力，單位為百分比（%）

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8.3.1.2冷凍保護(hù)劑Ⅰ液、冷凍保護(hù)劑Ⅱ液添加量的計(jì)算

f)添加冷凍保護(hù)劑Ⅰ液的量:預(yù)設(shè)外來品種每毫升精子密度2×108個/ml，用“ρ1”表示；用精

子總數(shù)S除以預(yù)設(shè)目標(biāo)密度，得到最終需要稀釋到的總精液體積數(shù)（mL），再減去凈的精子體積數(shù)V1

（mL），結(jié)果就是需要加入冷凍保護(hù)劑Ⅰ液的體積，按公式3：

S

V1V1

ρ1

式中：S——總的有效精子數(shù)，單位為億個（108個）

V

(Ⅰ)——冷凍保護(hù)劑Ⅰ液添加的量，單位為（ml）

ρ1——目標(biāo)精子密度，生產(chǎn)者結(jié)合實(shí)際預(yù)設(shè)，保證引進(jìn)品種及培育品種的目標(biāo)精子密度為2×108

個/ml，地方品種的目標(biāo)精子密度為1×108個/ml

V1——凈精子的總體積，單位為（ml）；

注意：1.若精清分離不徹底，可能會出現(xiàn)V1>V(Ⅰ)，使V(Ⅰ)V1出現(xiàn)負(fù)值，影響精液后續(xù)

的降溫，此時應(yīng)該調(diào)低凍精目標(biāo)密度的設(shè)置，如調(diào)整預(yù)設(shè)目標(biāo)密度為1×108個/mL，重新計(jì)算保護(hù)

V

劑添加量，使得(Ⅰ)1。

V1

V

e)添加冷凍保護(hù)劑Ⅱ液的量(用“(Ⅱ)”表示)等于冷凍保護(hù)劑Ⅰ液的量加上精子體積的，按公式4：

V(Ⅱ)V(Ⅰ)V1S/ρ

式中：

V(Ⅱ)——冷凍保護(hù)劑Ⅱ液添加的量，單位為（ml）

V

(Ⅰ)——冷凍保護(hù)劑Ⅰ液添加的量，單位為（ml）

V

貴州省標(biāo)準(zhǔn)化公共服務(wù)平臺1——凈精子的總體積，單位為（ml）

8.3.2冷凍稀釋液添加量計(jì)算方法（二）

8.3.2.1精液離心和上清液體積測定

17℃、將常溫稀釋后的混合液倒入50ml離心管中，在重力900g的條件下離心13min，不能超

過15min。吸取上清液注入量筒中，讀取量筒中液體的體積數(shù)即為上清液的體積，用“V2”表示。

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8.3.2.2原精子總數(shù)計(jì)算

離心后精子總數(shù)按公式1計(jì)算：

Nρ0V0

式中：N—最終精子總數(shù)，單位為108個；

ρ

0—每毫升原精液的精子密度，單位為108個；

V

0—原精液（未稀釋）體積數(shù)，單位為毫升（ml）。

8.3.2.3精子體積計(jì)算

離心后沉淀精子體積按公式2計(jì)算：

V12V0V2

式中：

V1—凈精子體積，單位為毫升（ml）；

V

0—精液等體積稀釋（1:1）在17℃恒溫下的總體積，單位為毫升（ml）；

V2—上清液體積，單位為毫升（ml）。

8.3.2.4添加保護(hù)液后最終精液總體積計(jì)算

8

外來品種需要確保最終每毫升精液中精子密度ρ1≥2×10個，地方品種需要確保最終每毫升精液

8

中精子密度ρ1≥1×10個，那么，最終稀釋后精液總量按公式3計(jì)算：

N

V3

ρ1

式中：

ρ188

—根據(jù)需要事先設(shè)定好的目標(biāo)密度，外來品種ρ1210個；地方品種ρ1110個

V

3—最終精液體積，單位為毫升（ml）；

8.3.2.5冷凍稀釋液添加量計(jì)算

貴州省標(biāo)準(zhǔn)化公共服務(wù)平臺8.3.2.5.1加入冷凍保護(hù)液I液體積按照下列公式4計(jì)算：

N

vⅠV3V1V1

ρ1

式中：

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vⅠ—最終加入等體積的冷凍保護(hù)液I液體積，單位為毫升（ml）；

V1—凈精子體積，單位為毫升（ml）；

V

3—最終精液體積，單位為毫升（ml）；

8.3.2.5.2加入冷凍保護(hù)液II液體積按照下列公式5計(jì)算：

N

V(Ⅱ)V(Ⅰ)V1(V1)V1

ρ1

式中：

V

(Ⅰ)—冷凍稀釋液I液添加量，單位為毫升（ml）；

V

(Ⅱ)—冷凍稀釋液II液添加量，單位為108個/毫升（ml）；

N—最終精子總數(shù)，單位為108個（億）。

ρ1—設(shè)定的目標(biāo)精子密度，單位為毫升（ml）；

V1—凈精子體積，單位為毫升（ml）。

8.4稀釋后4℃平衡

8.4.1第一次稀釋：將加入等量的冷凍保護(hù)劑Ⅰ液進(jìn)行懸浮精子（精子與保護(hù)劑按照1:1的比例進(jìn)行

），置于4°C恒溫水槽平衡儀中平衡，經(jīng)90min緩慢降溫，使溫度降至4℃，延續(xù)5-10min，期間

應(yīng)用溫度計(jì)監(jiān)測低溫平衡儀內(nèi)的溫度變化，警惕溫度回升。然后進(jìn)行下一步。

8.4.2第二次稀釋：4℃平衡結(jié)束后，在4℃低溫操作柜中沿管壁緩慢加入同溫度保護(hù)劑Ⅱ液（4℃

低溫保存），加入量是8.4.1步驟中兩倍Ⅰ液的量，混勻后，及時灌裝。

8.5灌裝

8.5.1灌裝前鏡檢測精子活力，引進(jìn)品種、培育品種豬凍精解凍活力在60%以上的，進(jìn)入灌裝程序，

貴州省標(biāo)準(zhǔn)化公共服務(wù)平臺若果活力低于60%，建議直接作廢。

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8.5.2細(xì)管噴碼：凍精細(xì)管壁上應(yīng)清晰印制相關(guān)標(biāo)志內(nèi)容（生產(chǎn)單位、品種、種豬號、生產(chǎn)日期），這

種適用于噴碼機(jī)與灌裝機(jī)獨(dú)立分開使用的情況，詳見附錄D。

8.5.3細(xì)管灌裝：全自動灌裝機(jī)、細(xì)管均放在低溫平衡柜中，灌裝、封口操作溫度控制在3℃～5℃

范圍內(nèi)，灌裝過程中不能出現(xiàn)溫度回升；一鍵啟動自動灌裝機(jī)或一鍵啟動全自動噴碼與灌裝一體機(jī)完

成灌裝工作。

8.5.4細(xì)管上架：灌裝完畢的細(xì)管精液立即在托碼架上整齊放置，細(xì)管棉塞封口端靠近操作者，超聲波

封口端遠(yuǎn)離操作者；記錄每頭種公豬該批次生產(chǎn)多少劑凍精。

8.5.5當(dāng)每層架上放置有不同品種或同一品種不同耳號的種公豬精液時，使用不同原色的細(xì)管或同一顏

色的細(xì)管用不同顏色的水性筆劃杠區(qū)分，便于冷凍完畢一眼就能區(qū)分，收集同一頭豬的細(xì)管凍精裝

袋。

注：要求在30min內(nèi)完成灌裝、封口。

8.6冷凍

將灌裝好的細(xì)管連同托碼架一起放入程序冷凍儀中，預(yù)先按照控制降溫的溫度、速度、時間設(shè)定

好冷凍降溫速率曲線程序，一鍵啟動冷凍程序，分段精準(zhǔn)控制降溫速率：由4℃降至1℃，用時2

min（控制降溫2℃/min）；由1℃降至-140℃，用時4.7min（控制降溫30.2℃/min）；降到-

140℃時延遲5min-6min。冷凍過程控制在12min～13min之內(nèi)完成。

8.7將凍精產(chǎn)品轉(zhuǎn)入盛有液氮的泡沫箱待裝

冷凍完成后，打開冷凍箱蓋，迅速將凍精托碼架取出，迅速置入事先加有液氮的泡沫箱中，要求

細(xì)管要被液氨面充分淹沒。待初檢合格后，收集入庫。

9細(xì)管凍精解凍、初檢、保存

9.1解凍

對每頭豬的細(xì)管凍，用鑷子夾住一次抽樣3支，迅速伸入37℃水浴鍋中晃動3s，再置于在

50℃水浴鍋中，輕輕擺動13s解凍。觀察細(xì)管有無破損，將解凍后無破損的細(xì)管剪去封口端，用細(xì)

管推針全部推至小試管內(nèi)，使用事先配制好的解凍后稀釋液20倍稀釋，混勻，置于37℃水浴鍋

10min待檢。

9.2初檢

9.2.1細(xì)管外觀：解凍過程或收集裝袋過程中，觀察細(xì)管有無破損，有破損應(yīng)作廢處理。

貴州省標(biāo)準(zhǔn)化公共服務(wù)平臺9.2.2活力：細(xì)管凍精制作完成后，收集裝袋前應(yīng)對每頭種公豬或生產(chǎn)的每批次凍精，分別隨機(jī)抽樣

3支初檢精子活力，活力不合格的凍精產(chǎn)品，應(yīng)作廢處理。

9.2.3凍精解凍復(fù)蘇初檢活力要求：推廣應(yīng)用引進(jìn)品種和培育品種的活力≥45％，推廣應(yīng)用地方品種

作為推廣應(yīng)用要求活力≥40％；不論是引進(jìn)品種、方品種，如果作為作為遺傳資源保存，要求活力

≥30％，符合規(guī)定作為初檢合格品入庫冷凍保存。

9.2.4裝袋：初檢合格產(chǎn)品，采用拇指管收集，每個拇指管裝入10支細(xì)管（0.5ml）,每個紗布袋裝入

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DB52/TXXXX—XXXX

20支拇指管，即200支/袋。

9.2.5標(biāo)簽：在紗布袋上記錄豬的耳號，細(xì)管數(shù)量，同時在標(biāo)簽上標(biāo)注，品種、數(shù)量、生產(chǎn)日期、生產(chǎn)

單位、生產(chǎn)人員等信息，按GB/T30396中第5章的要求

9.3精液保存

9.3.1標(biāo)簽，按GB/T30396中第5章的要求。

9.3.2初檢合格的凍精收集保存，按GB/T30396中7.1～7.4執(zhí)行。

9.3.3記錄

應(yīng)及時做好各階段工作的相關(guān)記錄，主要有：時間、地點(diǎn)、工作內(nèi)容（過程、結(jié)果）、參加人等。

記錄表格見附錄D。

9.3.4細(xì)管凍精質(zhì)量評估

冷凍精液出庫需要開展全項(xiàng)質(zhì)量檢測：外觀、劑量值、活力、前向運(yùn)動精子數(shù)、畸形率等指標(biāo)的

檢測，按照有關(guān)豬凍精的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)：地方品種及外來品種豬細(xì)管冷凍精液之4.2規(guī)定執(zhí)行。

10生產(chǎn)記錄表

10.1精液采集后，應(yīng)及時進(jìn)行精液品質(zhì)檢查，并記錄采精日期、公豬號、品種、采精量、顏色等信

息，以及精子活力、精子密度等精液品質(zhì)信息。所有采精及精液品質(zhì)檢測記錄見附錄B中的表

D.1。

10.2對于精液處理、冷凍、解凍階段，應(yīng)及時記錄生產(chǎn)日期、種豬號及品種，稀釋液添加，精液離

心，精液降溫、平衡，冷凍、解凍等信息記錄見附錄B中的表D.2。

10.3精液冷凍、解凍完成后，應(yīng)及時對精液品質(zhì)的檢查，并記錄種豬號、品種，劑量值、精子活力、

前向運(yùn)動精子數(shù)、精子畸形率的檢測結(jié)果。見附錄B中的表D.3。

貴州省標(biāo)準(zhǔn)化公共服務(wù)平臺

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附錄A

(資料性附錄)

豬冷凍精液生產(chǎn)儀器設(shè)備及用品配置

豬冷凍精液生產(chǎn)儀器設(shè)備配置表見表A。

表A豬冷凍精液生產(chǎn)儀器設(shè)備配置表

名稱規(guī)格及用途

采精架（假臺豬）采精用，可升降、調(diào)角度

防滑墊環(huán)保橡膠，不含滑石粉添加劑，（采精室地面防滑）

恒溫水浴鍋

數(shù)顯式控溫，控溫精度±1℃

電熱恒溫培養(yǎng)箱數(shù)顯溫度、可控溫度34℃±1℃，

磁力攪拌器可恒溫、調(diào)速

電子精密臺稱精液、稀釋粉稱重

電子天平0～300g±0.01g，化學(xué)試劑稱量

pH計(jì)0.0～14.0±0.1，測定精液、稀釋液的pH值

血球計(jì)數(shù)板測定精液中精子數(shù)量

超純水儀稀釋液用水

專用離心機(jī)TYLXJ-0-4500,最高轉(zhuǎn)速5000r/min

液氮罐（不同型號）貯存液氮，精液冷凍和保存

微量移液器50ul～100ul

微量移液器100ul～1000ul

溫度計(jì)溫度測量，0℃～60℃

磁力攪拌器可恒溫、調(diào)速

采精保溫杯600mL

量筒500mL、1000mL，量取液體

三角燒杯50mL、100mL、250mL、500mL

精子密度測定儀精液中精子密度的測定,億/mL

20X～40X；有相差顯微鏡、專用攝像系統(tǒng)、高清分辨率電腦顯示

屏、安裝windows10的電腦主機(jī)、恒溫載物臺、專用定容玻片、觀測精子

生物顯微鏡、計(jì)算機(jī)分析系統(tǒng)

數(shù)、活力和畸形率；種豬場要配有普通顯微鏡、帶視頻顯示系統(tǒng)、普通玻

片

貴州省標(biāo)準(zhǔn)化公共服務(wù)平臺顯微鏡恒溫臺（板）數(shù)顯溫度，加熱恒溫提高精子活體觀察的準(zhǔn)確性

全自動噴碼機(jī)用于細(xì)管噴碼標(biāo)識

細(xì)管精液分裝機(jī)封裝細(xì)管精液

低溫平衡柜稀釋后的精液平衡，細(xì)管精液封裝

精液冷凍程控儀細(xì)管精液冷凍

I

DB52XX-XXXX

附錄B

（資料性）

稀釋液的配方

B.1稀釋液配方

預(yù)稀釋液（原精營養(yǎng)保護(hù)液）：葡萄糖（15g）、乳糖（30g）、二水檸檬酸鈉（0.6g）、甘氨酸

（0.8g）、碳酸氫鈉（1.25g）、氯化鉀（0.075g）、雙蒸水（1000mL）；

冷凍保護(hù)劑Ⅰ液（精液稀釋）：葡萄糖（45.2g）、乙二胺四乙酸（3g）、檸檬酸（3.6g）、三羥

基甲基氨甲烷（8.2g）、青霉素鈉80萬單位（0.6g）、硫酸鏈霉素200萬單位（1g）、雙蒸水

（800mL）、蛋黃（200mL）

冷凍保護(hù)劑Ⅱ液（二次稀釋、含甘油)：冷凍保護(hù)劑Ⅰ液(950mL)、甘油（50mL）、

解凍后的稀釋：葡萄糖（37g）、二水檸檬酸鈉（6g）、碳酸氫鈉（1.25g）、乙二胺四乙酸

（1.25g）、氯化鉀（0.075g），雙蒸水1000mL。

B.2稀釋液配制方法

要求現(xiàn)配現(xiàn)用，不得使用過期或已變質(zhì)的稀釋液。

B.2.1預(yù)稀釋液（營養(yǎng)液）

用電子天平分別稱取葡萄糖（15g）、乳糖（30g）、二水檸檬酸鈉（0.6g）、甘氨酸（0.8g）、

碳酸氫鈉（1.25g）、氯化鉀（0.075g）加入到潔凈的錐形瓶（規(guī)格1000mL）,慢慢加新鮮制取的雙

蒸水1000mL，邊加邊攪拌至充分溶解，用過濾紙濾到另一錐形瓶中，煮沸15分鐘，冷卻至常溫

備用。用前提前取出置于37℃水浴鍋中待用。

B.2.2冷凍保護(hù)劑Ⅰ液（不含甘油，用于懸浮精子）

用電子天平分別稱取葡萄糖（61.2g）、EDTA（3g）、乙二醇（8.3mL）加入到潔凈的錐形瓶

（規(guī)格1000mL）中，慢慢加新鮮制取的雙蒸水800mL，邊加邊攪拌至充分溶解，用過濾紙濾到

另一錐形瓶中，煮沸15分鐘，放置至常溫；分別稱取青霉素鈉（0.6g）、硫酸鏈霉素（1g）加入

并混勻，再加入新鮮蛋黃200mL，攪拌均勻，置于17℃保存?zhèn)溆谩?/p>

B.2.3冷凍保護(hù)劑Ⅱ液（含甘油保護(hù)劑）

向錐形瓶中加入C.2.2步驟中的冷凍保護(hù)劑Ⅰ液950mL，再加入甘油50mL，攪拌均勻，

置于4℃冷藏保存?zhèn)溆谩?/p>

B.2.4解凍后稀釋液

電子天平分別稱取葡萄糖37g、二水檸檬酸鈉6g、碳酸氫鈉1.25g、乙二胺四乙酸（EDTA

1.25g）、氯化鉀0.075g放入潔凈的錐形瓶中，慢慢加新鮮制取的雙蒸水1000mL，攪拌均勻，用

過濾紙過濾入另一錐形瓶中，煮沸15分鐘，放置至常溫備用，用前提前置于36℃水浴鍋中待

貴州省標(biāo)準(zhǔn)化公共服務(wù)平臺用。

附錄C

（規(guī)范性）

種豬的品種代號

C.1種豬品種代號編寫原則和方法

C.1.1原則

按照品種名稱、豬種類型，以英文名稱字母、漢語名稱的拼音字母進(jìn)行編組代號。

C.1.2方法

品種代號的編制按以下方法：

1）引入進(jìn)品種，以其英文名稱的首字母大寫重復(fù)表示。

示例：大約克夏英文名稱“Yorkshire”，其品種代號以“YY”表示；長白英文名稱“

Landrace”，其品種代號以“LL”表示。

2）地方品種，以其漢語名稱第一個和第二字的漢語拼音第一字母組合。

示例：從江香豬的品種代號以“從”和“江”兩字漢語拼音第一字母組合為“CJ”；柯樂

豬的品種代號以“柯”和“樂”兩字漢語拼音第一字母組合為“KL”。

3）其他公豬以實(shí)際品種名稱參照1）或2）的方式編寫。

C.2種豬品種代號，見表C.1。

表C.1種豬品種代號

品種品種代號品種品種代號

貴州省標(biāo)準(zhǔn)化公共服務(wù)平臺大約克夏YY杜洛克DD

長白LL巴克夏BB

從江香豬CJ江口蘿卜豬JK

黔北黑豬QB柯樂豬KL

糯谷豬NG宗地花豬ZD

白洗豬BX關(guān)嶺豬GL

III

DB52/TXXXX—XXXX

C.3生產(chǎn)單位代碼

以單位名稱的語拼音首母組合。如貴州省種畜禽種質(zhì)測定中心，代碼為GZSZXQZZCDZX。

C.4細(xì)管噴碼標(biāo)記示例

▄GZSZXQZZCDZX-KLZ-11003-180525▄

棉塞封口端封口端

生產(chǎn)單位：如為“貴州省種畜禽種質(zhì)測定中心”的代碼用“GZSZXQCDZX”，柯樂

豬的品種代碼用首字母“KL”表示，“11003”為該公豬號，“180525”代表于2018年05

月25日生產(chǎn)。

貴州省標(biāo)準(zhǔn)化公共服務(wù)平臺

IV

附錄D

(資料性附錄)

精液采集、質(zhì)量檢測及凍精生產(chǎn)記錄

精液采集及品質(zhì)檢驗(yàn)記錄見表D.1，細(xì)管凍精生產(chǎn)記錄見表D.2，細(xì)管凍精質(zhì)量檢驗(yàn)記錄見表

D.3。

表D.1精液采集及品質(zhì)檢驗(yàn)記錄表

精子畸

采精量采精精子活力精子密度檢驗(yàn)

采精日期品種耳號外觀形率備注

mL員％108/mL員

％

表D.2細(xì)管凍精生產(chǎn)記錄表