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分子生物學(xué)名詞解釋簡答題復(fù)習(xí)題一、名詞解釋:※2.5生物大分子:指的是作為生物體內(nèi)主要活性成分的各種分子量達(dá)到上萬或更多的有機分子。常見的生物大分子包括蛋白質(zhì)、核酸、脂類、糖類。※5.ORF:開放閱讀框架openreadingframe,指在DNA鏈上,由蛋白質(zhì)合成的起始密碼開始,到終止密碼為止的一個連續(xù)編碼序列?!?.結(jié)構(gòu)基因:決定蛋白質(zhì)(包括酶)分子一級結(jié)構(gòu)的一段核苷酸順序(基因)。這類基因可被轉(zhuǎn)錄形成mRNA,并轉(zhuǎn)譯成多肽鏈,構(gòu)成各種結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì),催化各種生化反應(yīng)的酶和激素等?!?.斷裂基因:又稱隔裂基因,在真核基因中,編碼順序被一個或多個稱為內(nèi)含子的非編碼區(qū)分隔成幾段。這種由許多交替出現(xiàn)的編碼區(qū)和非編碼區(qū)所組成基因被稱作斷裂基因?!?.選擇性剪接:是指選擇性地對pre-mRNA不同的剪接位點的組合剪接方式.通過選擇性剪接,由一條pre-mRNA可生成多條的成熟mRNA.※9.C值:一種生物體單倍體基因組DNA的總量,用以衡量基因組的大小。※25.酚抽提法(SDS):是一種DNA分離純化方法,最初于1976年由Stafford及其同事提出,通過改良,以含EDTA、SDS及無DNA酶的RNA酶裂解緩沖液破碎細(xì)胞,經(jīng)蛋白酶K處理后,用pH8.0的Tris飽和酚抽提DNA,重復(fù)抽提至一定純度后,根據(jù)不同需要進(jìn)行透析或沉淀處理獲得所需的DNA樣品?!?5.凝膠過濾層析:亦稱凝膠色譜、排阻色譜或分子篩,是利用凝膠把分子大小不同的物質(zhì)分離開的一種方法?!?5.退火:熱變性DNA一般經(jīng)緩慢冷卻后即可復(fù)性,此過程稱之為“退火”。※55.多重PCR:指在一個反應(yīng)體系中加入多對引物,同時擴(kuò)增出多個核酸片段,由于每對引物擴(kuò)增的片段長度不同,可用瓊脂糖凝膠電泳或毛細(xì)管電泳等技術(shù)加以鑒別?!?7.實時熒光定量PCR:在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號累積實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法※58.熒光域值:以PCR反應(yīng)的前15個循環(huán)的熒光信號作為熒光本底信號,一般熒光閾值定義為3個至15個循環(huán)熒光信號的標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍。59.Ct值:PCR擴(kuò)增過程中,擴(kuò)增產(chǎn)物的熒光信號達(dá)到設(shè)定的閾值時所經(jīng)過的擴(kuò)增循環(huán)次數(shù)。※63.基因診斷:通過檢測基因的結(jié)構(gòu)異?;蚱浔磉_(dá)異常,對人體的健康狀態(tài)和疾病做出診斷的方法。1.分子生物學(xué):是以生物分子為靶標(biāo),在細(xì)胞內(nèi)從分子水平研究生命現(xiàn)象和生命過程規(guī)律的一門交叉學(xué)科。2.生物分子:泛指生物體特有的各類分子,是自然存在于生物體中的分子的總稱,是組成生命的基本單位。3.生物小分子:細(xì)胞內(nèi)具有活性的小分子有機物和無機物。4.基因:攜帶有遺傳信息的DNA或RNA序列,也稱為遺傳因子。10.基因組:一個細(xì)胞內(nèi)的全部遺傳信息,包括染色體基因組和染色體外基因組。11.基因重疊:同一段DNA片段能夠參與編碼兩種甚至兩種以上的蛋白質(zhì)分子。12.多順反子mRNA:病毒基因組DNA序列中功能上相關(guān)的蛋白質(zhì)的基因或rRNA的基因往往叢集在基因組的一個或幾個特定的部位,形成一個功能單位或轉(zhuǎn)錄單元。它們可被一起轉(zhuǎn)錄成含有多個mRNA的分子。13.類核:原核生物基因組通常由一條環(huán)狀的雙鏈DNA分子組成,在細(xì)胞中與蛋白質(zhì)結(jié)合成染色體的形式,在細(xì)胞內(nèi)形成一個致密的區(qū)域。14.插入序列:2000bp以內(nèi),兩端都有正向重復(fù)序列(DR)和反向重復(fù)序列(IR),中間1kb左右的編碼序列,僅編碼和轉(zhuǎn)座有關(guān)的轉(zhuǎn)座酶。只有當(dāng)IS轉(zhuǎn)座到某一基因中使該基因失活或插入位點旁邊的染色體發(fā)生畸變等效應(yīng)時才會被發(fā)現(xiàn)。15.復(fù)合型轉(zhuǎn)座子:2000~20000bp之間,兩端由一對IS元件組成,帶有與轉(zhuǎn)座作用有關(guān)的基因以及其他基因。16.質(zhì)粒:一類染色體外具有自主復(fù)制能力的環(huán)狀雙鏈DNA分子,屬染色體外基因組。嚴(yán)緊控制型質(zhì)粒:其復(fù)制常與宿主的繁殖偶聯(lián),拷貝數(shù)較少,每個細(xì)胞中只有1個到十幾個拷貝。松弛控制型質(zhì)粒:其復(fù)制與宿主不偶聯(lián),每個細(xì)胞中有幾十到幾百個拷貝。17.質(zhì)粒的不相容性:兩種不同質(zhì)粒因利用同一復(fù)制和維持機制,在復(fù)制和隨后向子代細(xì)胞分配的過程中會發(fā)生競爭,從而不能在同一宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在,其中一種質(zhì)粒將被丟失。18.基因組學(xué):對生命有機體全基因組進(jìn)行序列分析和功能研究的學(xué)科。19.基因定位克?。豪梦⑿l(wèi)星和SNP全基因組掃描來搜索與疾病性狀緊密相關(guān)的位點,從而確定疾病相關(guān)基因的位置并進(jìn)一步獲得克隆。20.功能基因組學(xué):根據(jù)已有基因的功能推測基因組中具有相似結(jié)構(gòu)的基因的功能,通過實驗手段驗證。有效的方法有定點突變、基因敲除和RNA干擾及過量表達(dá)技術(shù)等。21.蛋白質(zhì)組:指由一個基因組,或一個細(xì)胞、組織表達(dá)的所有蛋白質(zhì)。22.蛋白質(zhì)組學(xué):以蛋白質(zhì)組為研究對象,分析細(xì)胞內(nèi)動態(tài)變化的蛋白質(zhì)組成成分、表達(dá)水平與修飾狀態(tài),了解蛋白質(zhì)之間的相互作用與聯(lián)系,在整體水平上研究蛋白質(zhì)的組成與調(diào)控的活動規(guī)律。23.功能蛋白質(zhì)組:細(xì)胞在某一階段或與某一生理現(xiàn)象相關(guān)的所有蛋白質(zhì)。24.差異蛋白質(zhì)組:不同種類或狀態(tài)下各種樣本之間蛋白質(zhì)組的區(qū)別與變化。26.電泳:蛋白質(zhì)在高于或低于其pI的溶液中為帶電的顆粒,在電場中能向正極或負(fù)極移動。這種通過蛋白質(zhì)在電場中泳動而達(dá)到分離各種蛋白質(zhì)的技術(shù),稱為電泳。27.基因工程:又稱DNA重組技術(shù),是指將外源基因通過體外重組后導(dǎo)入受體細(xì)胞,并使其能在受體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制和表達(dá)的技術(shù)。28.分子克?。菏侵笇⒛康腄NA片段與載體重組,然后導(dǎo)入受體細(xì)胞,并在受體細(xì)胞中復(fù)制、擴(kuò)增,以獲得該DNA分子大量拷貝的技術(shù)。29.回文結(jié)構(gòu):指雙鏈DNA分子上按對稱軸排列的反向互補序列(常為限制酶所識別)。30.粘性末端:指限制酶錯位切開兩條對稱軸互補DNA雙鏈所產(chǎn)生的末端。31.平末端:指限制酶平齊切開兩條對稱軸互補DNA雙鏈所產(chǎn)生的末端。32.同工異源酶:指來源不同,但能識別和切割同一位點的酶。33.同尾酶:指識別序列不同,但能產(chǎn)生相同粘性末端的酶。34.載體:指能攜帶外源DNA片段導(dǎo)入宿主細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增或表達(dá)的工具。載體的本質(zhì)為DNA。35.溶菌性噬菌體:指噬菌體感染細(xì)胞后,連續(xù)增殖,直到細(xì)菌裂解,釋放的噬菌體又可感染其它細(xì)菌。36.溶原性噬菌體:指噬菌體感染細(xì)胞后,可將自身的DNA整合到細(xì)菌的染色體中,和細(xì)菌染色體一起復(fù)制。37.報告基因:是指處于待測基因下游并通過轉(zhuǎn)錄和表達(dá)水平來反映上游待測基因功能的基因,又稱報道基因。38.基因組文庫(G-文庫):是指含有某種生物全部基因隨機片段的重組DNA克隆群。39.轉(zhuǎn)化:是指以質(zhì)粒DNA或以它為載體構(gòu)建的重組子導(dǎo)入細(xì)菌的過程。40.感受態(tài)細(xì)胞:細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)改變、通透性增加并具有攝取外源DNA能力的細(xì)胞。41.核酸變性:在某些理化因素的作用下,維系DNA分子二級結(jié)構(gòu)的氫鍵和堿基堆積力受到破壞,DNA由雙螺旋變成單鏈過程。42.增色效應(yīng):DNA變性時其溶液OD260增高的現(xiàn)象。43.融解溫度:在熱變性過程中,紫外吸收值達(dá)到最大值的50%時的溫度稱為DNA的解鏈溫度或融解溫度。具有爆發(fā)性和狹窄性。44.復(fù)性:指變性DNA在適當(dāng)條件下,二條互補鏈全部或部分恢復(fù)到天然雙螺旋結(jié)構(gòu)的現(xiàn)象,它是變性的一種逆轉(zhuǎn)過程。46.核酸分子雜交:兩條DNA鏈或兩條RNA鏈或一條DNA鏈和一條RNA鏈按堿基互補的原則締合成異質(zhì)雙鏈的過程稱為分子雜交或核酸分子雜交。47.核酸探針:是指能與特定核苷酸序列發(fā)生特異性互補雜交,雜交后可用特殊方法檢測的已知被標(biāo)記的核酸分子。48.cDNA:是指與mRNA互補的DNA分子。49.固相分子雜交:是將待測的靶核苷酸鏈預(yù)先固定在固體支持物上,然后放入含有標(biāo)記探針的雜交液中,進(jìn)行雜交反應(yīng)后,使雜交分子留在支持物上,故稱固體雜交。50.原位雜交:是以特定標(biāo)記的已知序列的核酸分子作為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交并對其檢測的方法。51.熒光原位雜交:是一種利用非放射性的熒光信號對原位雜交樣本進(jìn)行檢測的技術(shù)。52.基因芯片:又稱DNA芯片或DNA微陣列,是指集成了大量DNA片段的玻璃片或纖維膜等載體。53.引物:人工合成的兩段寡核苷酸序列,決定RCP的特異性。54.one-stepRT-PCR:在同一體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶、逆轉(zhuǎn)錄引物、TaqDNA聚合酶、PCR引物、dNTP和緩沖液,直接以mRNA為模板進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄和PCR擴(kuò)增,稱為一步法RT-PCR。60.閾值高度:是基線范圍內(nèi)熒光信號強度標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍。56.重組PCR:將兩個不相鄰的DNA片段重組在一起的PCR稱為重組PCR。61.代謝組學(xué):通過考察生物體系(細(xì)胞、組織或生物體)受刺激或擾動后(如將某個特定的基因變異或環(huán)境變化后),其代謝產(chǎn)物的變化或其隨時間的變化,來研究生物體系的一門科學(xué)。62.miRNA:是由21~25個核苷酸組成的非編碼RNA;它通過與靶基因的3-UTR的配對,促進(jìn)mRNA的降解或抑制mRNA的翻譯從而抑制其靶基因的表達(dá);它在生物體生長發(fā)育、細(xì)胞增殖、分化、凋亡以及人類各種疾病的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用。64.血紅蛋白病:是由于珠蛋白基因異常導(dǎo)致珠蛋白肽鏈結(jié)構(gòu)異?;蚝铣僧惓K鸬倪z傳性血液病。65.基因治療:狹義上指將具有正常功能的基因置換或增補患者體內(nèi)有缺陷的基因,從而達(dá)到治療疾病的目的。廣義上是指將某種遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到患者細(xì)胞內(nèi),使其在體內(nèi)發(fā)揮作用,最終達(dá)到治療疾病的目的。66.干細(xì)胞:一種具有復(fù)制能力、可以形成各種組織的早期未分化細(xì)胞67.反義技術(shù):是指利用人工合成的反義RNA和反義DNA來阻斷基因的轉(zhuǎn)錄或復(fù)制,控制細(xì)胞生長在中間階段,使編碼蛋白質(zhì)的基因能轉(zhuǎn)錄為mRNA,因而不能翻譯成相應(yīng)的蛋白質(zhì),以達(dá)治療某一疾病的目的68.靶向性:是指在治療過程中,把治療作用或藥物效應(yīng)限定在特定的靶細(xì)胞、組織或器官內(nèi),而不影響其他正常的細(xì)胞、組織或器官的功能。二、填空題1.生物大分子主要包括核酸、蛋白質(zhì)、多糖等。其主要特征是由小分子的構(gòu)件分子組成,具有較復(fù)雜的空間結(jié)構(gòu),而且結(jié)構(gòu)與生物活性密切相關(guān)。2.與代謝相關(guān)的生物小分子通常又分為兩類,即內(nèi)源代謝產(chǎn)物和外源化合物。3.生命現(xiàn)象的本質(zhì)就是新陳代謝,它貫穿于遺傳、發(fā)育、生殖、生長等生命過程中。4.分子生物學(xué)的主要研究內(nèi)容有核酸、蛋白質(zhì)、細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。5.基因是合成有功能的蛋白質(zhì)或RNA所必需的全部DNA,包括編碼蛋白質(zhì)或RNA的核酸序列,也包括為保證轉(zhuǎn)錄所必需的調(diào)控序列。6.人類基因按各部分功能的不同分為3個區(qū)域:編碼區(qū)、前導(dǎo)區(qū)、調(diào)節(jié)區(qū)。7.基因的功能是:傳遞遺傳信息,控制個體性狀表現(xiàn)。8.病毒基因組的大小通常與其對宿主的依賴程度有關(guān),基因組越大,依賴性越小。9.基因重疊常見于線粒體DNA和質(zhì)粒DNA及病毒基因,此結(jié)構(gòu)意義在于使較小的基因組能夠攜帶較多的遺傳信息。是1977年Sanger在研究ΦX174時發(fā)現(xiàn)的?;蛑丿B的方式有(1)一個基因完全在另一個基因里面。(2)幾個基因部分重疊。(3)兩個基因之間只有一個堿基重疊。重疊基因的DNA序列可能大部分相同,但由于翻譯時的讀碼框架不同、或起始部位不同而產(chǎn)生不同的蛋白質(zhì)。10.根據(jù)轉(zhuǎn)座的的機制和結(jié)果,可將轉(zhuǎn)座分為:復(fù)制型轉(zhuǎn)座、保守型轉(zhuǎn)座。11.大腸桿菌質(zhì)粒是雙鏈環(huán)狀結(jié)構(gòu)的DNA分子??梢杂泄矁r閉合環(huán)狀DNA(cccDNA)、缺口的環(huán)狀DNA、線性DNA三種結(jié)構(gòu)狀態(tài)。12.影響質(zhì)粒穩(wěn)定性的因素:①宿主細(xì)胞分裂時質(zhì)粒能否均衡地分配到子代細(xì)胞。②質(zhì)粒分子自身結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。13.反向重復(fù)序列常見于基因的調(diào)控區(qū),可能與復(fù)制、轉(zhuǎn)錄的調(diào)控有關(guān)。14.高度重復(fù)序列中的無間隔反向重復(fù)序列很容易形成限制性內(nèi)切酶識別位點,也很容易因為突變產(chǎn)生或是失去一個酶切位點,可以造成限制性片段長度多態(tài)性(RFLP).15.高等動物線粒體基因組具有獨特的特點:①母系遺傳②線粒體DNA損傷后不易修復(fù),突變率較高,可能與衰老及某些疾病有關(guān)。③遺傳密碼與通用遺傳密碼存在差別。16.結(jié)構(gòu)基因組學(xué)目的是在生物體的整體水平上測定出全部蛋白質(zhì)分子、蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)與其他生物分子復(fù)合體的三維結(jié)構(gòu)。17.雙向凝膠電泳是利用蛋白質(zhì)的等電點與分子量差異分離之,其第一向是等電聚焦IEF;第二向是SDS.蛋白質(zhì)染色方法主要有考馬斯亮藍(lán)染色、銀染(不含戊二醛)、熒光染色(Cy3,Cy5),放射性同位素標(biāo)記等19.2-DE的缺點是①難以有效分離極酸、極堿性蛋白質(zhì),極大、極小蛋白質(zhì),及低豐度蛋白質(zhì)。②膠內(nèi)酶解過程費時、費力,難以與質(zhì)譜實現(xiàn)自動化聯(lián)用。20.鑒定與注釋蛋白質(zhì)的路線有,通過肽指紋圖譜(PMF)和數(shù)據(jù)庫搜尋匹配。目前應(yīng)用最普遍的數(shù)據(jù)庫是NRDB和dbEST數(shù)據(jù)庫。PMF或二級質(zhì)譜匹配檢索常用搜索引擎是MASCOT。21.抗體芯可用于研究在不同生理狀態(tài)或病理狀態(tài)下蛋白水平的量變。其優(yōu)點是微型化,集成化,高通量化。22.影響生物大分子提取效果的因素有pH、鹽濃度(離子強度)、溫度、水解酶、攪拌與氧化、有機溶劑。23.生物大分子的分離純化的方法有,鹽析法、有機溶劑沉淀法、透析、超濾。24.無論是進(jìn)行核酸結(jié)構(gòu)還是功能研究,首先需要對核酸進(jìn)行分離和純化。核酸分離純化的原則一是保持核酸堿基序列的完整性。二是盡量清除其它分子的污染,保證核酸制品的純度。25.核酸制備的技術(shù)路線包括:核酸的釋放、核酸的分離和純化、核酸的濃縮與沉淀。其中沉淀是濃縮核酸的最常用且高效的方
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