藥物分析筆記

目錄第十四章維生素類藥物分析 1第十五章.甾體激素類藥物的分析 6第十七章.合成抗菌藥物的分析 10第十二章.喹啉與青蒿素類抗瘧藥物的分析 13第十六章.抗生素類藥物的分析 15第六章芳酸類非甾體抗炎藥物的分析 19第九章.二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物的分析 22第八章.對氨基苯甲酸酯和酰苯胺類局麻藥物的分析 24第七章.苯乙胺類擬腎上腺素藥物的分析 27第十章.巴比妥及苯并二氮卓類鎮(zhèn)靜催眠藥物的分析 30第十一章.吩噻嗪類抗精神病藥物的分析 32第十三章.莨菪烷類抗膽堿藥物的分析 33第一章.藥品質量研究的內容與藥典概況 35第二章.藥物鑒別試驗 38第三章.藥物的雜質檢查 41第四章.藥物的含量測定方法與驗證 45第五章．體內藥物分析 49第十八章.藥物分析概論 51第十九章.中藥及其制劑分析的概論 53第十四章維生素類藥物分析eq\o\ac(○,1)維生素A結構與性質結構1.維生素A結構為具有一個共軛多烯酸側鏈的環(huán)乙烯2.天然維生素A主要是全反式維生素A3.VitA→VitA2（-2H），VitA1→VitA3（-H2O）（二）性質1.溶解性（與CHCl3，乙酸中微溶，在水中不溶）2.不穩(wěn)定性（制成酯，涼暗處保存，充氮氣或加入合適的抗氧劑以提高藥物的穩(wěn)定性）3.紫外吸收特性（具有共軛多烯的側鏈結構，在325-328nm有最大吸收，可用于鑒別或含量測定）4.與三氯化銻呈色（VitA在三氯甲烷中能與三氯化銻試劑作用，產生不穩(wěn)定藍色，可用于鑒別或用比色法測量）二.鑒別試驗（一）三氯化銻反應（Carr-Price反應）1.原理：維生素A在飽和無水三氯化銻的無醇三氯甲烷溶液中即顯藍色，漸變成紫紅色機制：行成不穩(wěn)定的藍色碳正離子紫外吸收光譜維生素A分子中含有5個共軛雙鍵，其無水乙醇溶液在326nm的波長處有最大吸收峰。當在鹽酸催化下加熱，生成脫水維生素A（vita3），最大吸收峰向長波長位移（紅移），同時在350-390nm的波長間出現(xiàn)三個吸收峰。三．含量測定（一）紫外-可見分光光度法（三點校正法）1.三點校正法的建立即在三個波長處測得吸光度后，在規(guī)定條件下以校正公式進行校正，再進行計算，這樣可消除非維生素A物質的無關吸收所引起的誤差，求得維生素A的真實含量。（維生素A在325-328nm的波長范圍內具有最大吸收峰）2.測得原理（1）雜質的無關吸收在310-340nm的波長范圍內幾乎成一條直線，且隨波長的增大吸光度下降（2）物質對光吸收呈加和性的原理3.波長選擇原則：一點選擇在維生素A的最大吸收波長處（即λ1），其他兩點選擇在λ1的兩側各選一點（λ2和λ3）等差波長法：使λ3-λ1=λ1-λ2等吸收比法：使Aλ2=Aλ3=6/7Aλ1eq\o\ac(○,2)維生素B1的藥物分析一.結構與性質（一）結構VitB1（鹽酸硫胺）氨基嘧啶環(huán)亞甲基噻唑環(huán)季銨鹽（二）性質1.溶解性（干燥品在空氣中可迅速吸收4%的水分，水中易溶.乙醚中微溶）2.硫色素反應（噻唑環(huán)在堿性介質中可開環(huán)，再與嘧啶環(huán)上的氨基環(huán)合，經(jīng)鐵氰化鉀等氧化劑氧化成具有熒光的硫色素，后者溶于正丁醇中呈藍色熒光）3.紫外吸收特性4.與生物堿沉淀試劑反應分子中含有兩個雜環(huán)（嘧啶環(huán)與噻唑環(huán)）5.氯化物的特性（維生素B1為鹽酸鹽）二.硫色素反應1.原理：維生素B1在堿性溶液中，可被鐵氰化鉀氧化生成硫色素。硫色素溶于正丁醇（或異丁醇）中，顯藍色熒光。硫色素反應為維生素B1的專屬鑒別反應上層顯強烈的藍色熒光，加酸使呈酸性，熒光即消失；再加堿使呈堿性，熒光又重現(xiàn)。三.含量測定（非水滴定法）1.原理：維生素B1分子中含有兩個堿性的已成鹽的伯胺和季銨基團，在非水溶液中，均可與高氯酸作用，以電位滴定法指示終點，根據(jù)消耗的高氯酸的量即可計算維生素B1的含量。由于維生素B1有兩個堿性基團，故與高氯酸反應的摩爾比為1:2eq\o\ac(○,3)維生素C一.結構與性質（一）結構維生素C（二）性質1.溶解性：水中易溶，呈酸性；乙醇中略溶，三氯甲烷或乙醚中不溶2.酸性：烯二醇基，C3位OH由于受共軛效應的影響，酸性較強（pK14.17）；C2位OH由于形成分子內氫鍵，酸性極弱（pK211.57）。Vc表現(xiàn)為一元酸，可與碳酸氫鈉作用生成鈉鹽3.旋光性：L(+)-抗壞血酸活性最強4還原性：分子中烯二醇基具有極強的還原性5.水解性：內酯環(huán)不穩(wěn)定，和碳酸鈉作用可生成單鈉鹽，不致發(fā)生水解。在強堿中，內酯環(huán)可水解，生成酮酸鹽6.糖類的性質7.紫外吸收特性：Vc具有共軛雙鍵，其稀鹽酸溶液在243nm波長處有最大吸收。中性或堿性條件下，最大吸收紅移至265nm處。二.鑒別反應（一）與硝酸銀反應烯二醇基具有強還原性，可被硝酸銀氧化為去氫抗壞血酸，同時產生黑色金屬銀沉淀（二）與二氯靛酚鈉反應1.原理：2，6-二氯靛酚為一染料，氧化型在酸性介質中為玫瑰紅色，堿性介質中為藍色。與Vc作用后生成還原型無色的酚亞胺。（三）其他抗氧化劑反應亞甲藍，高錳酸鉀，堿性酒石酸銅試液，磷鉬酸（四）糖類的反應Vc→水解，脫羧→戊糖→失水→糠醛→+吡咯，加熱至50℃→藍色四.含量測定（一）碘量法（1:1）取代反應注意事項eq\o\ac(○,1)因在酸性介質中，Vc受空氣中氧的氧化速度減慢，所以滴定時，須加入稀醋酸10ml使滴定在酸性溶液中進行，但樣品溶于稀酸后仍需立即進行滴定。eq\o\ac(○,2)加新沸過的冷水，目的是為了減少水中溶解的氧對測定的影響。eq\o\ac(○,3)為消除制劑中輔料對測定的干擾，滴定前要進行必要的處理，如片劑溶解后應濾過，取續(xù)濾液測定；注射劑測定前加丙酮2ml，以消除注射劑中抗氧劑亞硫酸氫鈉對測定的影響。eq\o\ac(○,4)維生素D的藥物分析顯色反應與醋酐-濃硫酸反應：黃→紅→紫→綠eq\o\ac(○,5)維生素E的藥物分析

一.結構與性質（一）結構苯并二氫吡喃醇衍生物，天然右旋，人工消旋，α-異構體的生理活性最強（二）性質1.溶解性：Ve為微黃色至黃色澄清的黏稠液體2.水解性：Ve苯環(huán)上有乙酰化的酚羥基，在酸性或堿性溶液中加熱可水解生成游離生育酚，常將其作為特殊雜質進行檢查。3.氧化性：氧化產物為α-生育醌和α-生育酚二聚體4.紫外吸收特性：284nm處有最大吸收，吸收系數(shù)（E1%1cm）為41.0-45.0二.鑒別反應（一）硝酸反應原理：Ve在硝酸酸性條件下，水解生成生育酚，生育酚被硝酸氧化為鄰醌結構的生育紅而顯橙色。（二）三氯化鐵反應堿性條件下，水解生成游離的生育酚，生育酚經(jīng)乙醚提取后，被FeCl3氧化成對-生育醌；同時Fe3+被還原為Fe2+，F(xiàn)e2+與聯(lián)吡啶生成紅色的配位離子。（三）雜質檢查ChP2010規(guī)定本品須檢查酸度，游離生育酚，有關物質和殘留溶劑。（一）酸度目的：檢查Ve制備過程中引入的游離醋酸（二）生育酚采用硫酸鈰滴定法檢查制備過程中未酯化的生育酚

第十五章.甾體激素類藥物的分析eq\o\ac(○,1)載體激素類藥物均具有環(huán)戊烷并多氫菲的母核eq\o\ac(○,2)載體激素腎上腺皮質激素：糖/鹽皮質激素性激素：雌激素，雄性激素R1R2R3雌甾烷HHCH3雄甾烷CH3CH3H孕甾烷CH3CH3CH3CH2eq\o\ac(○,3)腎上腺皮質激素（簡稱皮質激素）在臨床上應用廣泛均具有孕甾烷母核。氫化可的松地塞米松補充：糖皮質激素同時具有17α-OH和氫化可的松為天然的皮質激素，臨床上用作抗炎藥。地塞米松的A環(huán)的C1、C2和C3、C4之間為雙鍵。C9的位引入了氟原子，C16位引入了甲基，抗炎作用更強。地塞米松梨酸鈉則是地塞米松C12位上的羥基與磷酸行成的酯，肌注時可延長作用時間，磷酸部分再行成鈉鹽，以增大藥物的水溶性。本類藥物具有以下特征：1.A環(huán)具有△4-3-酮基，為共軛體系，在波長為240nm附近有紫外吸收，部分藥物在C1與C2之間或C6與C7之間為雙鍵，紫外吸收波長向長波方向移動。2.C17位上為α-醇酮基，具有還原性。部分成酯。3.部分藥物的C6或C9位由鹵素取代，具有有機氟化物或氯化物反應。4.部分藥物C11位上有羥基或酮基取代。eq\o\ac(○,4)雄性激素和蛋白同化激素雄性激素一般同時具有蛋白同化激素的作用，對雄性激素進行結構改造，使雄性激素作用大為減弱，同化作用仍然保留或有所增強。甲睪酮苯丙酸諾龍本類藥物具有以下特征：1.A環(huán)有△4-3-酮基2.C17位為羥基，部分藥物的羥基被酯化。3.雄性激素的母核有19個碳原子，蛋白同化激素在C10上一般無角甲基，母核只有18個碳原子。eq\o\ac(○,5)孕激素黃體酮是天然的孕激素，在臨床山應用廣泛，但黃體酮口服后被迅速破壞失效，只能注射給藥。C17位α-羥孕酮類，為黃體酮衍生物：醋酸甲地孕酮，醋酸甲羥孕酮19-去甲睪丸酮類：炔諾酮，左炔諾孕酮（少數(shù)例外，19位含甲基，如炔孕酮）本類藥物的結構特點：1.A環(huán)有△4-3-酮基。2.C17位上有甲酮基（17α-羥孕酮類）或乙炔基（19-去甲睪丸酮類）3.多數(shù)在C17位上有羥基，部分藥物的羥基被酯化（如己酸羥孕酮）。米非司酮米非司酮位抗孕激素藥物，具有甾體的母核結構，C11位上有對二甲氨基苯基取代，除具有甾體的性質外，二甲氨基還具有堿性。

eq\o\ac(○,6)雌激素雌二醇，雌三醇，雌酮，為天然的雌性激素。雌二醇炔雌醇本類藥物的結構特點：1.A環(huán)為苯環(huán)，C3位上有酚羥基，有的藥物C3位上的酚羥基成酯或成醚。2.C17位上有羥基，有些藥物C17位上羥基成酯。3.有些藥物在C17位上有乙炔基，構成19-去甲孕甾烷母核。經(jīng)驗：1.A環(huán)為苯環(huán)→雌激素2.結構上同時有C17α-OH和C11-OH（或氧化）為糖皮質及激素。3.難點在于雌激素與孕激素區(qū)別若19去甲基且C11有乙炔基為孕激素人工合成物（19-去甲孕甾烷母核）記住炔孕酮特例！C11位無乙炔基有甲酮基則為孕激素人工合成物（C17α-羥孕酮類）雄激素一般易認識，無乙炔基也無甲酮基（10位角甲基則為蛋白同化激素）eq\o\ac(○,7)甾體激素類藥物性狀特征均為具有甾烷母核的弱極性有機化合物，所以，均具有旋光性、脂溶性和在外吸收特征吸收1.本類藥物為白色至微黃色粉末或結晶性粉末。2.多數(shù)藥物顯示右旋特征，而左炔諾孕酮，炔諾酮和炔雌醇為左旋。3.具α、β-不飽和酮基團（△4-3-酮結構）的藥物在240nm波長附近有最大吸收，A環(huán)為苯環(huán)并具有酚羥基的雌激素類藥物在280nm波長附近有最大吸收。eq\o\ac(○,8)官能團的反應1.C17-α-醇酮基的呈色反應（皮質激素）具有還原性，與四氮唑試液，氨制硝酸銀試液（多倫試液）以及堿性酒石酸酮試液（斐林試液）反應呈色。與四氮唑鹽的反應廣泛應用于皮質激素藥物的分析，有色的甲簪而顯色。2.酮基的呈色反應與羰基試劑。如2,4-二硝基苯肼、硫酸苯肼、異煙肼等反應，形成黃的的腙而用于鑒別。異煙肼可選擇性的作用于C3-酮基，用于比色含量測定。3.C17-甲酮基的呈色反應黃體酮專屬鑒別反應：與亞硝基鐵氰化鈉反應，→藍紫色產物。4.酚羥基的呈色反應雌激素+重氮苯磺酸→紅色偶氮染料5.炔基的沉淀反應具有炔基的甾體激素藥物+硝酸銀→白色沉淀6.鹵素的反應需采用氧瓶燃燒法或會流水解法將有機結合的鹵原子轉化為無機離子后再進行鑒別。7.酯的反應醋酸酯類的藥物先水解生成醋酸，在硫酸存在下與乙醇形成乙酸乙酯，通過乙酸乙酯的香氣進行鑒別。eq\o\ac(○,9)特殊雜質與檢查有關物質一般具有相似甾體母核結構。eq\o\ac(○,10)比色法1.四氮唑比色法→腎上腺皮質激素2.異煙肼比色法→除雌激素以外的所有激素無水甲醇中穩(wěn)定性好，若樣品為植物油溶液（如注射劑）時，一般選用乙醇做溶劑。酸與異煙肼的摩爾比為2:1時，可獲得最大的吸光度。鹽酸最常用。C3=O>C17=O>C20=O;C11=O不反應.3.柯伯反應比色法柯伯反應是指雌激素與硫酸-乙醇的呈色反應.

第十七章.合成抗菌藥物的分析eq\o\ac(○,1)合成抗菌藥:是一類抑制或滅殺病原微生物的藥物(或稱化學治療劑)eq\o\ac(○,2)化學結構類型Ⅰ.萘啶酸Ⅱ.吡哌酸Ⅲ.諾氟/培氟/環(huán)丙沙星Ⅳ.莫西/加替/司帕/左氧氟沙星諾氟沙星培氟沙星氧氟沙星環(huán)丙沙星莫西沙星萘啶酸吡哌酸

eq\o\ac(○,3)性質1.酸堿兩性（-COOH、-N）2.溶解性（在水和乙醇中溶解度小，在堿性和酸性水溶液中有一定溶解度）3.紫外吸收光譜特征（利用此性質可進行鑒別和含量測定）4.旋光性（左氧氟沙星具有旋光性，氧氟沙星和環(huán)丙沙星等無旋光性）5.分解反應（遇光照可分解，對病人會產生光毒性反應，使用前后均應注意避光）6.與金屬離子反應（3、4位為羧基和酮羰基，極易與金屬離子形成螯合物）eq\o\ac(○,4)鑒別反應１．與丙二酸的反應本品為叔胺化合物，與丙二酸在酸酐中共熱，有棕色、紅色、紫色或藍色呈現(xiàn)。2.紫外-可見分光光度法3.薄層色譜（TLC）4.高效液相色譜（HPLC）5.紅外光譜法（IR）eq\o\ac(○,5)特殊雜質檢查一.工藝雜質：生產中可能帶入的起始原料、試劑、中間體、副產物和異構體等二.降解產物：藥品在貯藏、運輸、使用過程中，由于自身性質不穩(wěn)定而產生的各種雜質。eq\o\ac(○,6)含量測定非水溶液滴定法，紫外分光光度法，高效液相色譜法

eq\o\ac(○,7)磺胺類藥物（一）化學結構（母體為對氨基苯磺酰胺）通式磺胺嘧啶磺胺甲惡唑（二）理化性質1.性狀：具有一定的熔點2.熔融變色磺胺→藍紫色磺胺嘧啶→紅棕色磺胺脒→玫瑰紫色磺胺醋?！厣?.具有酸堿兩性配置鈉鹽的注射劑時，要避免與酸性藥物配伍4.芳伯氨基反應在酸性條件下與亞硝酸鈉發(fā)生重氮化反應后，再與堿性β-萘酚偶合→橙黃色或猩紅色沉淀5.磺酰胺基的反應磺酰胺基上的氫原子比較活潑，可被金屬離子取代，生成不同顏色的金屬鹽沉淀。6.苯環(huán)上的反應酸性條件下，發(fā)生鹵代反應7.N1和N4上取代基的反應二.鑒別反應（一）金屬離子的取代反應磺胺甲惡唑的銅鹽沉淀→草綠色；磺胺異惡唑的銅鹽→淡棕色→放置→暗綠色絮狀沉淀；（與磺胺甲惡唑區(qū)別）

磺胺嘧啶的銅鹽沉淀→黃綠色→放置→紫色；磺胺多辛的銅鹽沉淀→黃綠色→放置→淡藍色（與磺胺二甲嘧啶區(qū)別）磺胺醋酰鈉的銅鹽沉淀→藍綠色（二）芳香第一胺反應酸性條件，亞硝酸鈉作用

第十二章.喹啉與青蒿素類抗瘧藥物的分析eq\o\ac(○,1)喹啉類藥物分子結構中含有吡啶與苯稠合而成的喹啉雜環(huán)eq\o\ac(○,2)化學性質堿性：喹啉為二元生物堿，其中奎寧環(huán)上的氮原子的堿性較強（pKa8.8）喹啉環(huán)上的氮原子堿性較弱（pKa4.2）硫酸奎寧奎寧：左旋體；奎尼?。河倚谌燃淄?無水乙醇（2:1）中易溶奎寧/奎尼?。ǘ獕A）2.旋光性喹啉類抗瘧藥基本都具有手性，硫酸奎寧/二鹽酸奎寧為左旋體3.熒光特性硫酸奎寧和二鹽酸奎寧在稀硫酸溶液中均顯藍色熒光4.紫外吸收光譜特性eq\o\ac(○,3)鑒別試驗（一）綠奎寧反應奎寧為6-位含氧喹啉衍生物，可以發(fā)生綠奎寧反應機制：6-位含氧喹啉，經(jīng)氯水（或溴水）氧化氯化，再以氨水處理縮合，生成綠色的二醌基亞胺的銨鹽。取其水溶液，加溴試劑0.2ml和氨試液1ml顯翠綠色，加酸成中性變成藍色，呈酸性時則為紫紅色。翠綠色可轉溶于醇、三氯甲烷中而不溶于醚。ChP采用此反應鑒別硫酸奎寧和二鹽酸奎寧。（二）磷酸鹽的鑒別反應1.取供試品的中性溶液，加硝酸銀試液，生成淺黃色沉淀；分離，沉淀在氨試液或稀硝酸中均易溶解。2.取供試品溶液，加氯化銨鎂試液，即生成白色結晶性沉淀。3.取供試品溶液，加鉬酸銨試液與硝酸后，加熱即生成黃色沉淀；分離，沉淀能在氨試液中溶液。

eq\o\ac(○,4)純度檢查（一）硫酸奎寧的純度檢查1.酸度（pH應為5.7-6.6）2.三氯甲烷-乙醇中不溶物質3.其他金雞納堿（二）磷酸咯奈啶的純度檢查1.酸度（pH>2.4）2.水中不溶物3.氯化物4.甲醛5.四氫吡咯eq\o\ac(○,5)含量測定1mol硫酸奎寧原料藥可消耗3mol高氯酸滴定液1mol硫酸奎寧片消耗4mol高氯酸滴定液（用氫氧化鈉前處理）eq\o\ac(○,6)青蒿素類藥物的分析青蒿素又名黃蒿素，是一個含過氧基團的新型倍半萜內酯。一.主要化學性質1.氧化性：由于具有過氧橋，具有氧化性2.旋光性：均具有旋光性，且均為右旋體藥物。3.水解反應：具有內酯4.UV吸收特性由于青蒿素類藥物分子結構中母核不具有共軛體系，其紫外吸收光譜的主要是末端吸收。但C10位由于取代基的不同具有一定吸收特性。eq\o\ac(○,8)鑒別試驗（一）呈色反應1.過氧橋的氧化反應（碘化鉀試液-淀粉）2.羥肟酸鐵反應含有內酯的化合物、羧酸衍生物和一些酯類化合物在堿性條件下與羥胺作用，生成羥肟酸鐵；在稀酸中與高鐵離子呈色。3.香草醛-硫酸反應

第十六章.抗生素類藥物的分析eq\o\ac(○,1)抗生素定義：抗生素是生物（包括微生物，植物，動物）在其生命活動中產生的（或并用化學，生物或生化方法衍生的），能在低微濃度條件下有選擇地抑制或影響它種生物機能的化學物質的總稱。eq\o\ac(○,2)特點：抗生素主要由微生物發(fā)酵、經(jīng)化學純化、精制和化學修飾等過程，最后制成適當制劑。1.化學純度較低2.活性組分易發(fā)生變異3.穩(wěn)定性差eq\o\ac(○,3)抗生素活性表示方法抗生素的活性以效價單位表示，即指每ml或每mg中含有某種抗生素的有效成分的多少。效價單位（U）或微克（ug）表示。效價是以抗菌效能（活性部分）作為衡量的標準，因此，效價的高低是衡量抗生素質量的相對標準。一種抗生素有一個效價基準，同一種抗生素的各種鹽類的效價可根據(jù)其分子量與標準鹽類進行換算。微生物檢定法：管碟法，濁度法eq\o\ac(○,4)β-內酰胺類抗生素Ⅰ.化學結構Ⅱ.性質（1）β-內酰胺環(huán)的不穩(wěn)定性青霉素水溶液在pH6-6.8時較穩(wěn)定。本類藥物在酸、堿、青霉素酶、羥胺及某些金屬離子（銅、鉛、汞和銀）或氧化劑等作用下，易發(fā)生水解和分子重排，導致β-內酰胺環(huán)的破壞而失去抗菌活性。（2）旋光性（3）酸性與溶解度青霉素的堿金屬鹽水溶液遇酸則析出游離基的白色沉淀。（4）紫外吸收特性青霉素鉀（鈉）的R為芐基，在264nm波長處具有較強的紫外吸收。頭孢菌素類母核部分具有O=C-N-C=C結構，R取代基具有苯環(huán)等共軛系統(tǒng)，有紫外吸收。Ⅲ.部分結構阿莫西林（羥氨芐西林）普魯卡因青霉素氨芐西林↓阿莫西林（羥氨芐西林）→重氮化偶合反應←普魯卡因青霉素↑哌拉西林Ⅳ.呈色反應1.羥肟酸鐵反應青霉素及頭孢菌素在堿性中與羥胺作用，β-內酰胺環(huán)破裂生成羥肟酸；在稀酸中與高鐵離子呈色。2.類似肽鍵的反應本類藥物具有-COOH-結構，一些取代基有α-氨基酸結構，可顯雙縮脲和茚三酮反應3.其他呈色反應側鏈含有-C6H5-OH基團時，與重氮苯磺酸試液產生偶合反應呈色。Ⅴ.檢查聚合物檢查采用分子排阻色譜法

eq\o\ac(○,5)氨基糖苷類抗生素都是以堿性環(huán)己多元醇為苷元，與氨基酸縮合而成的苷，故稱為氨基糖苷類。Ⅰ.性質1.臨床上應用其硫酸鹽2.鏈霉素的硫酸鹽水溶液，一般以pH5.0-7.5最為穩(wěn)定。過酸或過堿條件下易水解失效。硫酸慶大霉素、硫酸奈替米星等對光、熱、空氣均較穩(wěn)定，水溶液亦穩(wěn)定，pH-2.0-12.0時，100℃加熱30min活性無明顯變化。3.鏈霉素在230nm處有紫外吸收。慶大霉素、奈替米星等無紫外吸收。Ⅱ.鑒別試驗（一）茚三酮反應具有羥基胺類和α-氨基酸的性質，可與茚三酮縮合成藍紫色化合物。中國藥典采用本法鑒別硫酸小諾米星及其制劑。（二）Molisch試驗具有五碳糖或六碳糖結構的氨基糖苷類抗生素經(jīng)酸水解后，在鹽酸（或硫酸）作用下脫水生成糠醛（五碳糖）或羥甲基糠醛（六碳糖）。這些產物遇α-萘酚或蒽酮呈色1.α-萘酚→紅紫色2.蒽酮→藍紫色（三）N-甲基葡萄糖胺反應（Elson-Morgan反應）櫻桃紅色縮合物（四）麥芽酚反應鏈霉素的特征反應。麥芽酚與高鐵離子在微酸性溶液中形成紫紅色配位化合物（五）坂口反應鏈霉素水解產物鏈霉胍的特有反應。橙紅色化合物Ⅲ.有關物質及組分分析慶大霉素C1、C２、C1a對微生物的活性無明顯差異，但其副作用和耐藥性有差異，導致各組分的多少影響產品的效價和臨床療效。ChP2010、USP29-NF27和BP2010均采用高效液相色譜法測定慶大霉素C各組分的含量。Ⅳ.含量測定氨基糖苷類抗生素的效價測定主要有微生物檢定法和HPLC法eq\o\ac(○,6)四環(huán)素類抗生素在化學結構上都具有四個并苯或萘苯環(huán)構成，故稱為四環(huán)素類抗生素。Ⅰ.性質C4位上的二甲氨基【-N(CH3)】顯弱堿性；C10位上的酚羥基（-OH）和兩個含有酮基和烯醇基的共軛雙鍵系統(tǒng)顯弱酸性，故四環(huán)素是兩性化合物。遇酸，堿，均能生成相應的鹽，臨床上多用鹽酸鹽。Ⅱ.降解性質酸性降解：反式消去反應，形成脫水四環(huán)素（ATC）堿性降解：形成異四環(huán)素（ETC）脫水四環(huán)素亦可形成差向異構體，稱差向脫水四環(huán)素（EATC）Ⅲ.有關物質ETC、ATC、EATC四環(huán)素為黃色結晶性粉末，而異構體、降解產物顏色較深，如差向四環(huán)素為淡黃色，因其不穩(wěn)定又易變成黑色；脫水四環(huán)素為橙紅色；差向脫水四環(huán)素為磚紅色。此類雜質的存在均可使四環(huán)素類抗生素的外觀色澤變深。

第六章芳酸類非甾體抗炎藥物的分析eq\o\ac(○,1)本類藥物的結構特點是：同時含有苯環(huán)和羧基eq\o\ac(○,2)典型藥物及其結構特點羧基的酸性：成鹽成酯 直接中和水解后的羥基：與FeCl3反應 兩步滴定酯基水解UV和IR

阿司匹林特殊雜質：對氨基酚Ar-OH：藍紫色水解→重氮化偶合反應

對乙酰氨基酚eq\o\ac(○,3)主要理化性質酸性：游離羧基水解性：酯鍵或酰胺鍵紫外吸收特性：苯環(huán)和特征去取代基，均具有紫外和紅外特征光譜基團或元素特性eq\o\ac(○,4)鑒別反應Ⅰ.與三氯化鐵反應1.水楊酸反應水楊酸水溶液+三氯化鐵→紫堇色注：阿司匹林必須加水煮沸水解生成水楊酸后，才可與三氯化鐵顯紫堇色2.酚羥基反應對乙酰氨基酚+三氯化鐵→藍紫色Ⅱ.縮合反應酮洛芬具有二苯甲酮結構，酸性條件下與二硝基苯肼縮合生成偶氮化合物。

Ⅲ.重氮化偶合反應對乙酰氨基酚具有潛在的芳伯氨基，在稀鹽酸中加熱水解生成對氨基酚，具有游離的芳伯氨基結構，在酸性溶液中與亞硝酸鈉試液進行重氮化反應，生成的重氮鹽再與β-萘酚偶合生成紅色偶氮化合物。Ⅳ.氧化反應Ⅴ.水解反應Ⅵ.特征元素反應：Cl、SⅦ.光譜法：UV、IRⅧ.色譜法：TLC、HPLCeq\o\ac(○,5)特殊雜質及其檢查方法特殊雜質：在特定的藥物生成和貯藏過程中引入的雜質，又稱為有關物質。Ⅰ.游離水楊酸1.生產過程乙酰化反應不完全2.精制過程及貯藏期間的水解而產生注：加冰醋酸目的→防止阿司匹林水解ODS（十八烷基硅烷鍵合硅膠）游離水楊酸不得超過0.1%Ⅱ.有關物質除“游離水楊酸”外的合成原料苯酚及其他合成副產物eq\o\ac(○,6)含量測定原料藥→酸堿滴定法制劑→檢查性定量測定，溶出度（釋放度）、含量均勻度→紫外-可見分光光度法制劑→含量測定→紫外-可見分光光度法、高效液相色譜法一.酸堿滴定法（一）直接滴定法注：加中性乙醇（對酚酞指示液顯中性）→乙醇+2滴酚酞→氫氧化鈉滴定→粉紅色

（二）剩余量滴定法ChP使用定量過量的氫氧化鈉滴定液溶解后，用鹽酸滴定液回滴定剩余的氫氧化鈉滴定液。（三）水解后剩余量滴定法1.水解后剩余量滴定法2.兩步滴定法第一步：中和制劑中的酸性水解產物和酸性穩(wěn)定劑（同時中和阿司匹林的游離羧基），以消除干擾第二步：水解與滴定即水解后剩余量滴定法（四）非水溶液滴定法二.紫外-可見分光光度法（一）直接紫外-可見分光光度法（二）柱分配色譜-紫外分光光度法三.高效液相色譜法RP:反向離子抑制色譜

第九章.二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物的分析eq\o\ac(○,1)二氫吡啶類（DHP）鈣通道阻滯藥物，也稱鈣拮抗劑，是目前臨床上特異性最高、作用最強的一類鈣拮抗劑，廣泛應用于缺血性心血管病，高血壓、腦血管疾病等的治療。eq\o\ac(○,2)常見藥物的結構與物理性質基本骨架硝苯地平苯磺酸氨氯地平eq\o\ac(○,3)主要理化性質1.二氫吡啶環(huán)的還原性（可用氧化還原反應鑒別或氧化還原滴定法進行含量測定）2.硝基的氧化性（硝基具有氧化性，可被還原為芳伯氨基，可用重氮化-偶合反應鑒別）3.二氫吡啶環(huán)氨基質子解離性4.穩(wěn)定性（遇光不穩(wěn)定）5.旋光性（二氫吡啶環(huán)的C4位多為手性碳原子，具有旋光性。臨床上用消旋體）6.吸收光譜特性eq\o\ac(○,4)鑒別試驗化學（與亞鐵鹽反應、與氫氧化鈉試液反應、沉淀反應、重氮化-偶合反應）光譜（UV、IR）色譜（HPLC、TLC）eq\o\ac(○,5)有關物質的檢查二氫吡啶類藥物遇光極不穩(wěn)定，易發(fā)生光學歧化作用，引入雜質，因此各國藥典標準中均規(guī)定在避光條件下進行有關物質檢查，大多采用HPLC法。eq\o\ac(○,6)含量測定一.鈰量法利用二氫吡啶類藥物的還原性，可用鈰量法沉淀含量（氧化還原滴定）1.加入高氯酸目的：防止Ce4+水解，故本實驗在強酸條件下進行2.鄰二氮菲指示劑→Ce4+為黃色，Ce3+為無色，故Ce4+可作自身指示劑，但不夠靈敏硝苯地平與硫酸鈰反應摩爾比→1:2二.紫外-可見分光光度法對照品對照法三.高效液相色譜法以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑以甲醇-乙腈-水（35:38:27）為流動相

第八章.對氨基苯甲酸酯和酰苯胺類局麻藥物的分析eq\o\ac(○,1)局麻藥起源于可卡因的結構改造，是一類能在用藥部位局部可逆性的阻斷感覺神經(jīng)沖動發(fā)生與傳導的藥物。eq\o\ac(○,2)基本結構特征：親脂性芳香環(huán)中間連接功能基親水性胺基一.結構通式（本類藥物均具有對氨基苯甲酸酯的母核）二.性質1.芳伯氨基→重氮化-偶合反應2.水解→酯鍵或酰胺鍵3.弱堿性→酯烴胺側鏈為叔胺氮原子（除苯佐卡因外），具有一定的堿性，可成鹽；與生物堿沉淀試劑發(fā)生沉淀反應；在水溶液中不能直接滴定，只能在水溶液體系中滴定。4.與金屬離子反應特性結構中酰胺基上的氮可在水溶液中與銅離子或鈷離子絡合，生成配位化合物沉淀5.吸收光譜特性6.游離堿多為堿性油狀液體或低熔點固體，難溶于水，可溶于有機溶劑。eq\o\ac(○,3)鑒別試驗一.重氮化-偶合反應分子結構中具有芳伯氨基或潛在的芳伯氨基的藥物，均可發(fā)生此反應。生成的重氮鹽可與堿性β-萘酚偶合生成有色的偶氮染料。注意：苯佐卡因、鹽酸普魯卡因和鹽酸普魯卡因胺在鹽酸溶液中，可直接與亞硝酸鈉進行重氮化反應。鹽酸丁卡因分子結構中不具有芳伯氨基，無此反應，但其分子結構中的芳香仲胺在酸性溶液中與亞硝酸鈉反應，生成N-亞硝基化合物的乳白色沉淀，可與具有芳伯氨基的同類藥物區(qū)別。二.與金屬離子反應1.鹽酸利多卡因的鑒別方法在碳酸鈉試液中與硫酸銅反應生成藍紫色配位化合物，此有色物轉溶入三氯甲烷中顯黃色；苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸氯普魯卡因和鹽酸丁卡因等在同樣條件下不發(fā)生此反應鹽酸利多卡因在酸性溶液中與氯化鈷試液反應，生成亮綠色細小鈷鹽沉淀。鹽酸利多卡因的水溶液在硝酸酸化后，加硝酸汞試液煮沸，顯黃色；對氨基苯甲酸酯類藥物顯紅色或橙黃色。2.鹽酸普魯卡因胺的鑒別方法芳酰胺+濃過氧化氫→羥肟酸→+三氯化鐵→羥肟酸鐵三.水解產物反應1.鹽酸普魯卡因的鑒別方法本品+10%NaOH→白色沉淀（普魯卡因）→加熱→油狀物（普魯卡因）→加熱→發(fā)生蒸汽（部分普魯卡因水解，生成溶于水的對氨基苯甲酸鈉，以及揮發(fā)的二乙氨基乙醇）能使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變藍色；熱至油狀物消失（全部水解，生成對氨基苯甲酸鈉）→放冷→+鹽酸酸化→白色沉淀（對氨基苯甲酸）注：對氨基苯甲酸溶于過量的鹽酸化學反應過程式請自行添加增加記憶力?。?！2.苯佐卡因的鑒別方法本品+NaOH→煮沸→+碘→加熱→生成黃色沉淀并發(fā)生碘仿的臭氣。eq\o\ac(○,4)特殊雜質與檢查一.鹽酸普魯卡因中對氨基苯甲酸的檢查二.鹽酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺及其他雜質的檢查eq\o\ac(○,5)含量測定一.亞硝酸鈉滴定法1.基本原理：芳伯氨基或水解或生成芳伯氨基的藥物在酸性如意紋中與亞硝酸鈉定量發(fā)生沖重氮化反應，生成重氮鹽，可用永停滴定法指示反應終點。2.測定的主要條件（1）加入適量溴化鉀加快反應速度如芳伯氨基的堿性較弱，則在一定強度酸性溶液中成鹽的比例較小，即游離芳伯氨基多，重氮化反應速度就快；反之，則游離芳伯氨基較少，重氮化反應速度就慢。（2）加過量鹽酸加速反應酸度加大可防止偶氮氨基化合物的生成，但酸度過大，可阻礙芳伯氨基的游離，影響重氮化反應速度。鹽酸的量一般按→芳胺類藥物：酸=1：（2.5-6）（3）反應溫度（4）滴定速度3.指示中點的方法ChP2010芳胺類藥物亞硝酸鈉滴定法均采用永停滴定法指示終點。二.非水溶液滴定法加入適量醋酐的作用是：冰醋酸與醋酐溶液中，醋酐解離生成的醋酐合乙酰氧離子比醋酐合質子的酸性還強，有利于布比卡因堿性的增強，使滴定突躍敏躍

第七章.苯乙胺類擬腎上腺素藥物的分析eq\o\ac(○,1)臨用：收縮血管、升高血壓、散大瞳孔、舒張支氣管、遲緩胃腸肌、加速心率、加強心肌收縮力eq\o\ac(○,2)結構與性質：一.結構：1.具有堿性的脂肪乙胺側鏈2.本環(huán)上有活潑的酚羥基二.性質1.酚羥基特性與重金屬離子配位呈色，露置在空氣中或遇光、熱易氧化，色澤變深，堿性溶液中更易變色。2.弱堿性烴氨基側鏈，其中氮為仲胺氮。3.旋光性大多數(shù)本類藥物苯乙胺基本結構存在手性碳原子，具有光學活性。4.紫外吸收特性最大吸收波長以254nm為中心紅移或者藍移eq\o\ac(○,3)鑒別試驗一.與鐵鹽反應（Ar-OH）具有酚羥基取代的本類藥物，與Fe3+離子配位顯色（大多為綠色）；加入堿性溶液即變色（大多為紫色），隨即被高鐵離子氧化并發(fā)生顏色變化（大多為紫紅色）。二.與甲醛-硫酸反應具有酚羥基取代的本類藥物，可與甲醛在硫酸中反應，形成具有醌式結構的有色化合物。腎上腺素→紅色鹽酸異丙腎上腺素→棕色至暗紫色重酒石酸去甲腎上腺素→淡紅色鹽酸去氧腎上腺素→（玫瑰紅→橙紅→深棕紅變化過程）三.還原性反應本類藥物分子中多數(shù)具有酚羥基，易被碘、過氧化氫、鐵氰化鉀等氧化劑氧化二呈現(xiàn)不同的顏色。四.氨基醇的雙縮脲反應五.脂肪伯胺的Rimini試驗分子結構中具有脂肪伯胺氨基的化合物，顯脂肪族伯胺專屬的Rimini反應，可用于鑒別。注意的是，Rimini試驗中所用的丙酮必須不含甲醛成分。eq\o\ac(○,4)特殊雜質與檢查一.酮體雜質的檢查生產過程中均存在酮體氫化還原制備工藝。檢查原理：利用酮體在310nm處有最大吸收，而藥物本身在此波長幾乎無吸收。二.光學純度的檢查對于手性藥物光學純度檢查的最佳方法是實現(xiàn)對映體分離分析，目前常用的方法為色譜法和電泳法。eq\o\ac(○,5)含量測定苯乙胺類擬腎上腺素藥物的原料藥→非水溶液滴定法去氧腎上腺素、重酒石酸間羥胺→溴量法鹽酸克倫特羅→亞硝酸鈉法一.非水溶液滴定法非水溶液滴定法是在非水溶劑中進行的酸堿滴定測定法。非水溶劑的種類1.酸性溶劑：冰醋酸。2.堿性溶劑：二甲基甲酰胺。3.兩性溶劑：兼有酸堿兩種性能，常用甲醇。4.惰性溶劑：此類溶劑無酸堿性，如甲苯、三氯甲烷、丙酮等。注：弱堿性藥物及其鹽類原料藥的含量測定，國內外藥典多采用高氯酸非水溶液滴定法。（一）基本原理強酸（HclO4）置換出與有機弱堿結合的較弱的酸（HA）通式如下：BH+·A+HClO4→BH+·ClO4+HA（二）一般方法除另有規(guī)定外，精密稱取供試品適量【約消耗高氯酸滴定液（0.1mol/L）8ml】，加冰醋酸10-30ml溶解（必要時可溫熱，放冷），加各品種項下的試液（醋酐或醋酸汞試液）、指示液1-2滴（或以電位滴定法指示終點），用高氯酸（0.1mol/L）滴定。注：低溫條件可防止氨基乙?；詫嶒灢僮骷颖姿崛芙鈽悠泛?，應在放冷的條件下加醋酐。（三）問題討論1.適用范圍本法主要適用pKb>8的有機弱堿性藥物及其鹽類的含量測定。pKb8~10，宜選用冰醋酸；pKb10~12，冰醋酸與醋酐的合溶液作為溶劑；pKb>12，醋酐作為溶劑。2.酸根的影響有機弱堿鹽類藥物非水溶液滴定時被置換出的酸類（HA），在醋酸介質中的酸性宜下列排序遞減：高氯酸>氫溴酸>硫酸>鹽酸>硝酸>磷酸>有機酸由于被置換出氫鹵酸的酸性相當強，影響滴定終點，不能直接滴定，需要加入定量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其成在醋酸中難解離的鹵化汞，以消除氫鹵酸對滴定的干擾與不良影響。3.終點指示方法電位滴定法：玻璃電極→指示電極飽和甘汞電極→參比電極指示劑法：采用高氯酸滴定液滴定時，常用指示劑為結晶紫。結晶紫的酸式色為黃色，堿式色為紫色。二.溴量法原理：藥物分子中的苯酚結構，在酸性溶液中酚羥基的鄰、對位活潑氫能與過量的溴定量的發(fā)生溴代反應，在以碘量法硫代硫酸鈉滴定測定剩余的溴。三.亞硝酸鈉法鹽酸克倫特羅分子結構中含有芳伯氨基，在酸性溶液中可與亞硝酸鈉定量發(fā)生重氮化反應，生成重氮鹽，可用永停滴定法指示反應終點。

第十章.巴比妥及苯并二氮卓類鎮(zhèn)靜催眠藥物的分析eq\o\ac(○,1)巴比妥類藥物分析1，2，5位上的H易被取代。性質：巴比妥類藥物通常為白色結晶或結晶性粉末。1.弱酸性：1，3-二酰亞胺基團能發(fā)生酮式-烯醇式互變異構。在水溶液中發(fā)生二級電離。2.水解反應：酰亞胺結構，與堿液共沸即水解。3.與金屬離子的反應（1）與銀鹽的反應碳酸鈉溶液腙，與硝酸溶液反應，先生成可溶性一銀鹽，加過量硝酸銀生成難溶性二銀鹽白色沉淀。（2）與銅鹽的反應巴比妥類藥物呈紫堇色或生成紫色沉淀，含硫巴比妥類藥物則呈現(xiàn)綠色。（3）與鈷鹽的反應堿性條件下，與鈷鹽生成紫堇色配位化合物（4）與汞鹽的反應與硝酸汞或氯化汞溶液反應，白色沉淀，此沉淀能在氨試液中溶解。4.與香草醛的反應巴比妥分子中丙二酰脲基團中的氫比較活潑，與香草醛在濃硫酸存在下發(fā)生縮合反應，生成棕紅色產物。5.紫外吸收光譜特征酸性溶液中，5，5-二取代和1,5,5三取代巴比妥類藥物不電離，無明顯紫外吸收峰；pH10堿性溶液，一級電離，形成共軛體系結構，240nm波長處最大吸收峰；pH13強堿性溶液5,5-二取代巴比妥類藥物發(fā)生二級電離，共軛體系延長，吸收峰紅移至255nm1,5,5-三取代巴比妥類藥物，因1位取代基的存在，不發(fā)生二級電離，最大吸收波長仍位于240nm。含量測定（一）銀量法原理：在滴定過程中，巴比妥類藥物先形成可溶性一銀鹽，當被測供試品完全形成一銀鹽后，繼續(xù)用硝酸銀滴定液滴定，稍過量的銀離子就與巴比妥類藥物形成難溶性的二銀鹽沉淀，是溶液變渾濁，以此指示滴定終點。（二）溴量法（不飽和鍵）司可巴比妥中含不飽和雙鍵，可與溴定量的發(fā)生加成反應。本法專屬性強、操作簡便，針對結構中的雙鍵特征，可與其他巴比妥類藥物區(qū)別不受干擾。eq\o\ac(○,2)苯二氮卓類藥物的分析苯并二氮卓類藥物為七元含氮雜環(huán)稠合而成的有機藥物，臨床上應用最廣泛的抗焦慮、抗驚厥藥。奧沙西泮地西泮氯氮卓一.性質：1.弱堿性2.水解性3.UV吸收特性二.鑒別試驗.1.沉淀反應2.硫酸-熒光反應苯二惡氮卓類藥物溶于硫酸后，在紫外（365nm）下，顯不同顏色的熒光（硫酸）地西泮→黃綠色氯氮卓→黃色（稀硫酸）地西泮→黃色氯氮卓→紫色3.特征基團反應Ⅰ.氯化物的鑒別反應Ⅱ.芳伯胺的反應本類藥物如N1位上未取代者，與鹽酸共熱水解后，生成芳伯胺，可發(fā)生重氮化-偶合反應顯色。

第十一章.吩噻嗪類抗精神病藥物的分析一.基本結構吩噻嗪類藥物具有硫氮雜蒽母核2位的R`為電負性較大的基團，如-H、-Cl、-CF3、-SCH3；10位的R為堿性側鏈。氯丙嗪二.理化性質1.弱堿性：硫氮雜蒽母核的氮原子堿性極弱2.易氧化：硫氮雜蒽母核具有還原性3.與金屬離子配合呈色硫氮雜蒽母核的二價硫可與鈀離子配合，生成有色化合物，可用于鑒別和含量測定。氧化產物亞砜和砜無此反應。4.紫外吸收特性205nm、254nm和300nm三個波長處有最大吸收，254nm波長處吸收最強。5.紅外吸收特性三.鑒別試驗1.與生物堿沉淀試劑反應10位的含氮取代基具有堿性2.氧化顯色反應硫氮雜蒽母核的氧化顯色。氧化劑：硫酸、硝酸、過氧化氫和三氯化鐵試液3.與鈀離子配合呈色硫氮雜蒽母核與鈀離子配合呈色的反應被ChP2010用于吩噻嗪類藥物及其制劑的鑒別。該反應不受氧化產物亞砜與砜的干擾，專屬性強。4.含鹵素取代基的反應5.氯化物鑒別反應四.含量測定（一）酸堿滴定法1.非水溶液滴定法2.乙醇-水溶液中的氫氧化鈉滴定法（二）分光光度法1.直接分光光度法：適用于純度較高、雜質及輔料無干擾或干擾易排除的吩噻嗪類藥物的含量測定2.提取后分光光度法：測定吩噻嗪類藥物制劑時，可通過提取排除輔料等干擾3.提取后雙波長分光光度法：消除了氧化物對測定的干擾4.二階導數(shù)分光光度法5.鈀離子比色法吩噻嗪類藥物在pH2±0.1的緩沖液中，與鈀離子（Pd2+）形成紅色配位化合物，在500nm波長附近具有最大吸收，可采用比色法測定其含量。由于鈀離子僅與未被氧化的硫元素配合呈色，消除了藥物中氧化物對測定的干擾。比色液的濃度以50~250ug/ml為宜。（三）高效液相色譜法游離堿具有弱堿性，主要采用反相色譜和離子對色譜進行分離；因為具有紫外吸收特性，常采用紫外檢測器進行檢測。反相高效液相色譜法（RP-HPLC）注意事項：分離具有弱堿性的吩噻嗪類藥物時，未硅烷化的硅醇基與吩噻嗪類藥物發(fā)生吸附或離子交換作用，是分離效能下降，表現(xiàn)為吩噻嗪類藥物的色譜峰拖尾、保留時間過長（甚至不能被洗脫）。解決方法：通常在流動相中加入含氮堿性競爭試劑（掃尾劑），以抑制堿性藥物與未硅烷化的硅醇基作用。常用掃尾劑→醋酸銨、三乙胺、二乙胺、乙腈。第十三章.莨菪烷類抗膽堿藥物的分析eq\o\ac(○,1)莨菪烷類生物堿都是有莨菪醇與不同有機酸所成的酯。eq\o\ac(○,2)主要理化性質1.水解性：阿托品與東莨菪堿分子中含酯的結構，易水解2.堿性：阿托品與東莨菪堿的五元酯環(huán)上有叔胺氮原子具有較強的堿性，易與酸成鹽3.旋光性：氫溴酸東莨菪堿有不對稱碳原子，呈左旋體；阿托品也含有不對稱碳原子，但為外消旋體，無旋光性。利用此性質可區(qū)別阿托品和東莨菪堿。eq\o\ac(○,3)鑒別試驗一.托烷生物堿類的Vitaili鑒別反應原理：酯鍵水解后生成莨菪酸，經(jīng)發(fā)煙硝酸加熱處理，轉變?yōu)槿趸苌?，再與氫氧化鉀的醇溶液和固體氫氧化鉀作用脫羧，轉化成具有共軛結構的陰離子而顯深紫色。二.與硫酸-重鉻酸鉀的反應本類物質水解后，生成的莨菪酸，可與硫酸-重鉻酸鉀在加熱的條件下，發(fā)生氧化反應，生成苯甲醛，而逸出類似苦杏仁的臭味。三.與生物堿顯色劑或沉淀劑的反應酸性溶液中與金屬鹽類或大分子酸類等沉淀試劑反應，生成難溶性的鹽、復鹽或配合物沉淀。四.光譜鑒別法五.色譜法色譜法一般用于已知生物堿的鑒別。主要有TLC、HPLC、GC以及PC等，TLC法最為常用。注意：若用硅膠吸附劑時，需在要流動相或固定相中加堿，使生物堿游離或中和硅膠表面的弱酸性，以防拖尾。eq\o\ac(○,4)特殊雜質與檢查一.氫溴酸東莨菪堿中有關物質的檢查1.酸度：pH應為4.0~5.52.易氧化物主要是檢查本品在生產過程中可能引入的雜質阿撲東莨菪堿（脫水東莨菪堿）及其他含有不飽和雙鍵的有機物質。3.其他生物堿本品水溶液加入氨試液不得發(fā)生渾濁eq\o\ac(○,5)含量測定一.酸性染料比色法針對生物堿藥物，在一定的pH條件下，可與某些酸性染料結合顯色，而進行分光光度法測定藥物含量的方法。適用條件：少量供試品、尤其是小劑量藥物制劑的定量分析。（一）基本原理在適當pH的水溶液中，堿性藥物（B）可與氫離子結合成陽離子（BH+），而一些酸性染料可解離成陰離子（In-）；兩種離子定量的結合，即生成具有吸收光譜明顯紅移的有色離子對（BH+In-），該離子對可以定量的被有機溶劑萃取，測定有色離子對特征波長處的吸光度。反應式如下：B+H+?BH+HIn?H++In-BH++In-?(BH+·In-)水相?(BH+·In-)有機相（二）影響因素1.水相最佳pH的選擇2.酸性燃料的種類3.有機溶劑的種類和性質4.有機相中的水分5.酸性染料中的有色雜質二.非水溶液滴定法硫酸阿托品與高氯酸反應的化學計量摩爾比為1:1第一章.藥品質量研究的內容與藥典概況eq\o\ac(○,1)藥品標準：（俗稱為藥品質量標準）根據(jù)藥物自身的理化與生物學特性，按照批準的來源、處方、生成工藝、貯藏運輸條件等所制定的，用以檢測藥品質量是否達到用藥要求并衡量其質量是否穩(wěn)定均一的技術規(guī)定。eq\o\ac(○,2)藥品標準內涵：真?zhèn)舞b別；純度檢查；品質要求 凡例：共性問題的統(tǒng)一規(guī)定eq\o\ac(○,3)《中國藥典》→ 正文：藥品標準 附錄：制劑通則、通用檢測方法和指導原則eq\o\ac(○,4)藥物的近似溶解度以下列名詞術語表示：極易溶解系指溶質1g（ml）能在溶劑不到1ml中溶解易溶系指溶質1g（ml）能在溶劑1~不到10ml中溶解溶解10~30略溶30~100微溶100~1000極微溶解1000~10000幾乎不溶或不溶系指溶質1g（ml）在溶劑10000ml中不能完全溶解溶解度試驗法：除里有規(guī)定外，稱取研成細粉的供試品或量取液體供試品，置于25℃±2℃一定容量的溶劑中，每隔五分鐘強力振搖30s，觀察30min內的溶解情況，如無目視可見的溶質顆粒或液滴時，即視為完全溶解。eq\o\ac(○,5)物理常數(shù)相對密度、餾程、熔點、凝點、比旋度、折光率、黏度、吸收系數(shù)、碘值、皂化值和酸值等eq\o\ac(○,6)制劑的規(guī)格：系指每一支、片或其他每一個單位制劑中含有主藥的重量（或效價）或含量（%）或裝量，即制劑的標示量。如：“1ml：10mg”指1ml中含有主藥10mgeq\o\ac(○,7)貯藏密閉防止塵土及異物進入密封防止風化、吸潮、揮發(fā)或異物進入熔封或嚴封防止空氣與水分的侵入并防止污染eq\o\ac(○,8)限度原料藥的含量（%），未規(guī)定上限時，系指不超過101.%制劑的含量限度范圍一般是95.0%~105.0%eq\o\ac(○,9)計量XXX滴定液（YYYmol/L）濃度要求精密標定YYYmol/LXXX溶液不需要精密標定室溫（常溫）10~30℃冷水2~10℃1.

%（g/g）表示溶液100g中含有溶質若干克%（ml/ml）%（ml/g）表示溶液100g中含有溶質若干毫升%（g/ml）2.

3.ppm→百萬分比；ppb→十億分比4.（1→10）：指固體溶質1.0g或液體溶質1.0ml加溶劑使成10ml的溶液。5.乙醇未指明濃度時，均指95%（ml/ml）eq\o\ac(○,10)精確度精密稱定系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一稱定百分之一精密量取系指量取體積的準確度應符合國家不標準中心對該體積移液管的精確度要求稱取量筒“約”系指去用量不得超過規(guī)定量的±10%1.

2.恒重：系指供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后的重量差異在0.3mg一下的重量3.空白試驗：指在不加供試品或以等量溶劑替代供試液的情況下，按同法操作所得的結果。4.實驗用水，除另有規(guī)定外，均系指純化水。酸堿度檢查所用的水，均系指新沸并放冷至室溫的水eq\o\ac(○,11)藥品標準制定的原則1.科學性；2.先進性；3.規(guī)范性；4.權威性

eq\o\ac(○,12)鑒別試驗選擇的原則1.要有一定的專屬性、靈敏性和簡便性2.盡可能采用藥典已有收載的方法3.一般選用2~4種不同類型所得方法，化學法與儀器法相結合，相互取長補短；4.原料藥應側重于具有指紋性的光譜方法，制劑應側重于抗感擾的專屬性色譜方法。eq\o\ac(○,13)藥物的檢查→安全性、有效性、均一性和純度1.安全性檢查：系指合格的藥品，在正常的用法用量下，不應引起與用藥目的無關和意外的嚴重不良反應2.有效性檢查：指在規(guī)定的適應癥、用法和用量條件下，能滿足預防、治療、診斷人的疾病，有目的地調節(jié)人的生理功能的要求。3.均一性檢查：指藥物及其制劑按照批準的來源、處方、生產工藝、貯藏運輸條件等所產生的每一批次的產品，都符合其質量標準的規(guī)定，滿足用藥的安全性和有效性要求。4.純度檢查：指對藥品中所含的雜質進行檢查和控制，以使藥品達到一定的純凈度而滿足用藥的要求。eq\o\ac(○,14)含量測定方法的基本原則化學原料藥首選容量分析法；藥物制劑首選色譜法，采用率最高的是HPLC法。eq\o\ac(○,15)原料藥穩(wěn)定性試驗的內容影響因素試驗高溫試驗：60℃十天高濕度試驗：25℃、RH90%±5%十天強光照射試驗：4500±500lx十天破換實驗加速試驗40℃±2℃、RH75%±5%六個月長期試驗25℃±2℃、RH60%±10%；30℃±2℃、RH65%±5%

第二章.藥物鑒別試驗eq\o\ac(○,1)藥物鑒別試驗：是根據(jù)藥物的分子結構、理化性質，采用物理、化學或生物學方法來判斷藥物的真?zhèn)?。均為用來證實貯藏在有標簽容器中的藥物是否為其所標示的藥物，而不是對未知藥物進行定性鑒別。eq\o\ac(○,2)鑒別試驗的項目一.性狀：外觀；溶解度；物理常數(shù)二.一般鑒別試驗三.專屬鑒別試驗eq\o\ac(○,3)一般鑒別試驗依據(jù)某一類藥物的化學結構或理化性質的特征，通過化學反應來鑒別藥物的真?zhèn)?。一般鑒別試驗只能證實是某一類藥物，而不能證實是哪一種藥物。（一）有機氟化物原理：有機氟化物經(jīng)氧瓶燃燒法破壞，被堿性溶液吸收成為無機氟化物，與茜素氟藍、硝酸亞鈰在pH4.3溶液中形成藍紫色絡合物。（二）有機酸鹽1.水楊酸鹽原理：中性或弱酸性條件，三氯化鐵，中性→紅色；弱酸性→紫色2.酒石酸鹽氨制硝酸銀（多倫試液）（三）芳香第一胺稀鹽酸、亞硝酸鈉、堿性β-萘酚試液→橙黃色～猩紅色（四）托烷類生物堿類發(fā)煙硝酸、乙醇、固體氫氧化鉀→深紫色原理：托烷類生物堿類均具有莨菪酸結構，可發(fā)生Vitali反應，水解后生成莨菪酸，經(jīng)發(fā)煙硝酸加熱處理，轉變?yōu)槿趸苌?，再與氫氧化鉀醇溶液作用，轉變成醌型產物而深紫色。后馬托品水解產物沒有莨菪酸，不能發(fā)生此反應，可以此作為區(qū)別。

（五）無機金屬鹽、焰色反應銨鹽供試品+過量氫氧化鈉→氨氣供試品+水濕潤的紅色石蕊試紙→藍，堿性供試品+硝酸亞汞試液濕潤的試紙→黑色焰色反應鈉鹽→589nm→鮮黃色鉀鹽→766-769nm→紫色鈣鹽→622nm→磚紅色鋇鹽→533.56nm→黃綠色eq\o\ac(○,4).專屬鑒別試驗藥物的專屬鑒別試驗是證實某一種藥物的依據(jù)，它是根據(jù)每一種藥物化學結構的差異及其所引起的物理化學特性不同，選用某些特有的靈敏的定性反應，來鑒別藥物的真?zhèn)巍Ｒ?化學鑒別法（一）呈色反應鑒別法酚羥基三氯化鐵呈色反應芳香第一胺重氮化偶合反應托烷生物堿類Vitali反應腎上腺皮質激素四氮唑反應含羰基機構苯肼反應氨基酸及氨基糖苷類茚三酮反應氨基醇結構雙縮脲反應（二）沉淀生成反應鑒別法丙二酰脲硝酸銀反應氯化物銀鹽沉淀反應還原性基團銀鏡反應（如異煙肼）腎上腺皮質激素類、葡萄糖生成氧化亞銅紅色沉淀苯甲酸鹽類三氯化鐵反應利多卡因重金屬離子沉淀反應含氮雜環(huán)類生物堿沉淀劑（碘化鉍鉀、硅鎢酸）反應磺胺類藥物銅鹽反應（三）熒光鑒別反應硫酸奎寧稀硫酸溶液→藍色熒光維生素B1→硫色素反應（四）氣體生成反應鑒別法含碘有機藥物紅火加熱→紫色碘蒸汽乙酸乙酯和乙酰胺類藥物硫酸水解，加乙醇可產生乙酸乙酯的香味

第三章.藥物的雜質檢查eq\o\ac(○,1)雜質：任何影響藥品純度的物質均稱為雜質。eq\o\ac(○,2)藥物雜質的來源：生產過程中引入1.精制時未能完全除去而引入雜質2.制成制劑過程中，產生新的雜質3.溶劑、試劑、還原劑等殘留在產品中成為雜質4.多晶型和異構體的存在成為雜質貯藏過程中受外界條件的影響，引起藥物理化特性發(fā)生變化而產生雜質eq\o\ac(○,3)藥物雜質的分類1.一般雜質：指在自然界中分布比較廣泛，在多種藥物的生產和貯藏過程中容易引入的雜質。2.特殊雜質：指在特定藥物的生產和貯藏過程中引入的雜質，也常稱有關物質。eq\o\ac(○,4)雜質限量在保證藥物的質量可控和使用安全的前提下，綜合考慮藥物生產的可行性與產品的穩(wěn)定性，允許藥物中含有一定量的雜質。藥物中所含雜質的最大允許量，叫做雜質限量。通常用百分之幾或百萬分之幾（ppm）來表示。雜質限量=（雜質最大允許量/供試品量）*100%L=(C*V)/S*100%S：供試品量；C：標準溶液的濃度；V：標準溶液的體積限量檢查法通常不要求測定其準確含量，只需檢查雜質是否超過限量。注意：此類計算應注意單位是否統(tǒng)一eq\o\ac(○,5)色譜法法一.TLC1.雜質對照品法：已知雜質并能制備雜質對照品2.供試品溶液自身稀釋對照法：雜質結構不確定；或雖然雜質結構已知但沒有雜質對照品的情況。該法僅限于雜質斑點的顏色與主成分斑點顏色相同或相近的情況下使用。3.雜質對照品與供試品溶液自身稀釋對照并用法：藥物中存在多個雜質時，若已知雜質有對照品，則采用雜質對照品法檢查；共存的未知雜質或沒有對照品的雜質，則可同時采用供試品溶液自身稀釋對照法檢查。4.對照藥物法：當無適合的雜質對照品，或者是供試品顯示的雜質斑點顏色與主成分斑點的顏色有差異，難以判斷限量時，可采用與供試品相同的藥物作為對照。二.HPLC1.外標法（雜質對照品法）：適用于有雜質對照品，而且進樣量能夠精確控制的情況2.加校正因子的主成分自身對照法：僅適用于已知雜質的控制。以主成分為對照，用雜質對照品測定雜質的校正因子。優(yōu)點：既省去了雜質對照品，又考慮到了雜質與主成分響應因子的不同所引起的測定誤差，準確度好。3.不加校正因子的主成分自身對照法：適用于沒有雜質對照品的情況。該方法躲在單一雜質含量較少、無法得到雜質對照品、雜質結構（吸收情況）與主成分相似，即雜質與主成分的響應因子基本相同的情況下適用。4.面積歸一化法：只適用于供試品中結構相似、相對含量較高且限度范圍較寬的雜質含量的粗濾考察。eq\o\ac(○,6)其他方法熱重分析法（TGA）；差熱分析（DTA）；差式掃描量熱法（DSC）eq\o\ac(○,7)藥物中一般雜質的檢查一.氯化物檢查1.原理：微量氯化物在硝酸酸性條件下與硝酸銀反應，生成氯化銀膠體微粒而顯白色渾濁，與標準氯化鈉溶液在相同條件下產生的氯化銀渾濁程度進行比較。2.方法：黑色背景上觀察氯化物濃度以50ml中含50-80ug的Cl為宜加硝酸可避免弱酸銀鹽的沉淀的干擾，且可加速氯化銀沉淀的生成并產生較好的乳濁。酸度以50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜。二．硫酸鹽檢查法1.原理：微量的硫酸鹽在稀鹽酸酸性條件下與氯化鋇反應，生成硫酸鋇微粒顯白色渾濁，與一定量標準硫酸鉀溶液在相同條件下產生的硫酸鋇渾濁程度進行比較。2.方法：鹽酸可防止碳酸鋇或磷酸鋇等弱酸形成鋇鹽沉淀對比濁的影響。但酸度過大可使硫酸鋇溶解，降低檢查靈敏度；以50ml溶液中含2ml稀鹽酸為宜。供試品溶液如帶顏色，可采用內消色法。三.鐵鹽檢查法1.原理：鐵鹽在鹽酸酸性溶液中與硫氰酸鹽作用生成紅色可溶性的硫氰酸鐵配離子，與一定量標準鐵溶液用同法處理后進行比色。2.方法：目視比色法時以50ml溶液中含10-50ugFe3+為宜。在鹽酸酸性條件下反應，可防止Fe3+水解。以50ml溶液中含稀鹽酸4ml為宜。加入氧化劑過硫酸銨既可氧化供試品中Fe2+成Fe3+，同時可防止由于光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色。四.重金屬離子檢查法重金屬：系指在實驗條件下能與硫代乙酰胺或硫代鈉作用顯色的金屬雜質。第一法、硫代乙酰胺法本法適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物，為最常用的方法?？磿鴷r注意pH3.5標準鉛溶液為1ml相當于10ugPb2+供試品如含高鐵鹽，在弱酸性溶液中易氧化硫化氫析出硫，產生渾濁，影響重金屬檢查。可先在各管中加入維生素C0.5-1.0g，使高鐵離子還原為亞鐵離子，再按上述方法檢查。第二法、熾灼后的硫代乙酰胺法適用于含芳環(huán)、雜環(huán)，以及難溶于水、稀酸及乙醇的有機物。第三法、硫化鈉法適用于溶于堿性水溶液而難溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀的藥物?；前奉?、巴比妥類藥物五．砷鹽檢查法1.古蔡氏法（1）原理：金屬鋅與酸作用產生新生態(tài)的氫，與藥物中微量砷鹽反應生成具有揮發(fā)性的砷化氫，遇溴化汞試紙，產生黃色至棕色的砷斑。與標準砷斑比較（2）方法：五價砷在酸性溶液中也能被金屬鋅還原為砷化氫，但生成砷化氫的速度較三價砷慢，故在反應液中加入碘化鉀及氯化亞錫將五價砷還原為三價砷，碘化鉀被氧化生成的碘又可被氯化亞錫還原為碘離子，后者與反應中產生的鋅離子能形成穩(wěn)定的配位離子，有利于生成砷化氫的反應不斷進行；氯化亞錫與碘化鉀還可抑制銻化氫的生成；氯化亞錫又可與鋅作用，在鋅粒表面形成鋅錫齊，起去計劃作用，從而使氫氣均勻而連續(xù)的產生。醋酸鉛棉花→免除硫化氫的干擾，使砷化氫以適宜的速度通過2.二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC）本法中吡啶的作用是吸收反應中產生的二乙基二硫代氨基甲酸3.其他方法（1）白田道夫法：含銻藥物原理：氯化亞錫在鹽酸中將砷鹽還原成棕褐色的膠肽砷（2）次磷酸法用于硫化物、亞硫酸鹽以及含銻藥物等的砷鹽檢查時不產生干擾，但靈敏度比古蔡法低。六、干燥失重測定法干燥失重：系指藥品在規(guī)定的條件下，經(jīng)干燥后所減失的量，以百分率表示ChP規(guī)定供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后稱重的差異在0.3mg以下即達到恒重，干燥至恒重的第二次及以后各次稱重均應在規(guī)定的條件下繼續(xù)干燥1小時后進行。（一）常壓恒溫干燥法適用于受熱較穩(wěn)定的藥物（二）減壓干燥法與恒溫減壓干燥法適用于熔點低或受熱分解的供試品。干燥器中常用的干燥器為無水氯化鈣、硅膠或五氧化二磷。（三）干燥器干燥法適用于受熱分解貨易升華的供試品。常用干燥劑有硅膠、硫酸和五氧化二磷。硅膠的吸水力次于五氧化二磷。七、水分測定法藥物中的水分包括結合水和吸附水。費休氏法和甲苯法測定藥物中的水分。八、熾灼殘渣檢查法熾灼殘渣：系指有機藥物經(jīng)炭化或揮發(fā)性無機藥物加熱分解后，再經(jīng)高溫熾灼，所產生的揮發(fā)性無機雜質的硫酸鹽。一些重金屬（如鉛）于高溫下易揮發(fā)，故若需將熾灼殘渣留作重金屬檢查時，熾灼溫度必須控制在500℃~600℃。熾灼至恒重的第二次稱重應在繼續(xù)熾灼30min后進行。九、易炭化物檢查法易炭化物：藥物中存在的遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有機雜質稱為易炭化物。十、殘留溶劑測定法藥物中的殘留溶劑是指在合成原料藥、輔料或制劑生產過程中使用的，但在工藝中未能完全除去的有機溶劑。第一類溶劑（避免使用）、第二類溶劑（限制使用）、第三類溶劑（GMP或其他質控要求限制使用）、第四類溶劑（GMP或其他質控要求限制使用）

第四章.藥物的含量測定方法與驗證eq\o\ac(○,1)藥物的含量：系指藥物中主成分的量，是評價藥物質量的重要指標。含量測定基于化學或物理學原理的“含量測定”基于生物學原理的“效價測定”eq\o\ac(○,2)可供藥物含量測定的方法主要包括：容量分析法、光譜分析法、色譜分析法化學原料藥含量測定→首選容量分析法藥物制劑的含量測定→色譜分析法藥物制劑的定量檢查→光譜分析法eq\o\ac(○,3)容量分析法：（也稱滴定法）是將已知濃度的滴定液（標準物質溶液）由滴定管滴加到被測藥物的溶液中，直至滴定液與被測藥物反應完全（通過適當方法指示），然后根據(jù)滴定液的濃度和被消耗的體積，按化學計量關系計算出被測藥物的含量。一、特點：1.方法簡便易行2.方法耐用性高3.測定結果準確4.方法專屬性差二、滴定度：每1ml規(guī)定濃度的滴定液所相當?shù)谋粶y藥物的質量，《中國藥典》用mg表示。aA+bB→Cc+dD被測藥物分子（A）；滴定劑（B）T（mg/ml）=m*a/b*Mm：滴定液的摩爾濃度（mol/L）；a：被測藥物的摩爾數(shù)；b：滴定劑的摩爾數(shù)；M：被測藥物的毫摩爾質量（分子量，以mg表示）三、含量的計算1.直接滴定法：用滴定液直接滴定被測藥物含量（%）=（V*T）/W*100%2.間接滴定法：生成物滴定法、剩余量滴定法（回滴定法）eq\o\ac(○,4)光譜分析法一、朗伯-比爾定律：單色光輻射穿過被測物質溶液時，在一定濃度范圍內該被測物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度成正比。A=lg（1/T）=EclA：吸收度；T:透光率；E：吸收系數(shù)；c：溶液濃度；l：液層厚度E通常采用百分吸收系數(shù)（E1cm1%）表示，物理意義：當代側溶液濃度為沒100ml中含待測藥物1g（1%，g/ml），液層厚度為1cm時的吸光度值。二、特點：1.簡便易行2.靈敏度高3.準確度高4.專屬性差eq\o\ac(○,5)色譜分析法色譜分析法是一種分離分析方法，系根據(jù)混合物中各組分的色譜行為差異，將各組分從混合物中分離后再選擇性對待測組分進行分析的方法。一.特點：1.高靈敏度2.高專屬性3.高效能與高速度二、分類1.分離原理：吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜法、分子排阻色譜法2.分離方法：紙色譜法、薄層色譜法、柱色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法三、高效液相色譜高效液相色譜法：系采用高壓輸液泵將規(guī)定的流動相泵入裝有填充劑（固定相）的色譜柱，對供試品進行分離測定的色譜方法。藥品標準中規(guī)定的色譜條件，除固定相種類、流動相組分、檢測器類型不得改變外，其余如色譜柱內徑、長度、甾體粒度、流動相流速、混合流動相各組分的比例、柱溫、進樣量、檢測器的靈敏度等均可適當改變，以適應供試品達到系統(tǒng)適用性試驗的條件。1.色譜柱：ODS正相色譜系統(tǒng)使用極性填充劑對映異構體的分離通常使用手性填充劑2.檢測器最常用紫外檢測器→二極管陣列檢測器熒光檢測器蒸發(fā)光散射檢測器示差折光檢測器電化學檢測器質譜檢測器紫外、熒光和電化學檢測器為選擇性檢測器，其響應值不僅與供試品溶液的濃度有關還與化合物的結構有關；蒸發(fā)光散射檢測器和示差折光檢測器為通用型檢測器，對所有化合物均有響應；二極管陣列檢測器可以同時記錄供試品的吸收光譜，故可用于供試品的光譜鑒定和色譜峰的純度檢查。3.流動相反相色譜系統(tǒng)的流動相首選甲醇-水系統(tǒng)4.系統(tǒng)適用性試驗理論板數(shù)（n）用于評價色譜柱的分離效能分離度（R）衡量色譜系統(tǒng)效能的關鍵指標重復性評價連續(xù)進樣中，色譜系統(tǒng)響應值的重復性能拖尾因子（T）評價色譜峰的對稱性理論板數(shù)，分離度計算公式看書，嘿嘿嘿！??！用峰高定量時T應在0.95-1.05之間。重復性→采用外標法連續(xù)進樣5次，峰面積測量值RSD≦2.0%采用內標法，配成三種不同濃度的溶液，分別至少進樣2次，計算平均校正因子，RSD≦2.0%eq\o\ac(○,6)樣品分析的前處理方法一、不經(jīng)有機破壞的前處理方法適用于結合不牢固的含金屬或含鹵素等有機藥物的分析。（一）水解法：1.酸水解法2.堿水解法（二）還原法二、經(jīng)有機破壞的前處理方法（一）濕法破壞：適用于含氮有機藥物分析的前處理方法（二）干法破壞：適用于含鹵、硫、磷等有機藥物定量分析的前處理。1.高溫熾灼法：鹵素藥物的鑒別2.氧瓶燃燒法：系將分子中含有待測元素的有機藥物在充滿氧氣的密閉燃燒瓶中充分燃燒，使有機結構部分徹底分解為二氧化碳和水，而待測元素根據(jù)電負性的不同轉化不同價態(tài)的氧化物（或無氧酸），被吸收與適當?shù)奈找褐校ǘ嘁运岣x子形式存在），以供待測元素的檢查或定量測定用。eq\o\ac(○,7)藥品質量標準分析方法驗證目的：證明采用的方法適合于相應檢測要求。一、準確度：系指用該方法測定的結果與真實值或參考值接近程度，一般用回收率（%）表示。1.原料藥：回收率（%）=測得量/加入量*100%2.制劑：回收率（%）=（測得量-本底量）/加入量*100%二、精密度：系指在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻供試品，經(jīng)多次取樣測定所得的結果之間的接近程度。精密度一般用標準差或相對標準偏差（RSD）表示。驗證內容1.重復性：在較短的時間間隔內，在相同的操作條件下，由同一分析人員連續(xù)測定所得結果的精密度稱為重復性。2.中間精密度：在同一個實驗室，由于實驗室內部條件的改變，如不同時間由不同分析人員用不同設備測定所得結