DB12T 862-2019 水產(chǎn)微生態(tài)制劑乳酸菌生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

水產(chǎn)微生態(tài)制劑乳酸菌生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程2019-01-14發(fā)布2019-02-15實施天津市市場監(jiān)督管理委員會發(fā)布I本標準依據(jù)GB/T1.1—2009《標準化工作導則第1部分：標準的結(jié)構(gòu)和編寫》的要求起草。本標準由天津市農(nóng)業(yè)科學院提出并歸口。本標準起草單位：天津市農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究中心。本標準主要起草人：謝鳳行、張峰峰、周可、趙瓊、趙玉潔、孫海波、高寶山。1件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB3095環(huán)境空氣質(zhì)量標準GB3838地表水環(huán)境質(zhì)量標準GB20287農(nóng)用微生物菌劑3術(shù)語和定義24.1.1廠區(qū)空氣質(zhì)量應符合大氣環(huán)境質(zhì)量標準GB3095中Ⅱ類要求。4.1.2發(fā)酵用水應符合地表水環(huán)境質(zhì)量標準GB3838中Ⅲ類水質(zhì)要求，冷卻水及其他用水符合該標準4.1.3生產(chǎn)車間配備消毒滅菌設(shè)施，菌種儲藏4.2生產(chǎn)設(shè)備5生產(chǎn)技術(shù)流程5.1生產(chǎn)流程5.2.1用于發(fā)酵的菌種應有菌種鑒定報告或菌株來源相關(guān)信息。5.2.2發(fā)酵前應先檢測菌種的純度和性能，如不純或退化，應先進行提純復壯。5.2.3菌種在上罐生產(chǎn)之前需檢測種子罐中菌體的純度和濃度，不能有雜菌污染，濃度達到每毫升億級以上，發(fā)酵菌液pH<4.0。5.3.1原菌種和一級菌種的培養(yǎng)基應保證菌種生長的延滯期5.3.2二級菌種培養(yǎng)基原則上為發(fā)酵培養(yǎng)基或接近發(fā)酵培養(yǎng)基。5.3.3發(fā)酵培養(yǎng)基在保證菌體生長旺盛的前提下，盡量利用來源充5.4滅菌5.4.1液體發(fā)酵，發(fā)酵罐的裝液量60%～70%,液體培養(yǎng)基、發(fā)酵設(shè)備、管道、補料罐等采用高壓蒸汽滅菌，滅菌條件為115℃~121℃,0.1MPa～0.15MPa,滅菌20min～30min。5.4.2固體物料含水率為50%±5%,滅菌條件為115℃~121℃,0.1MPa～0.15MPa,滅菌1.0h~5.4.3滅菌后無菌操作取滅菌后的培養(yǎng)基，制片，染色，鏡檢，無微生物說明滅菌徹底，若有，需重復5.3的工作。5.5接種一級種子到二級種子接種量為3%～5%,二級種子到發(fā)酵罐接種量為5%～7%。接種時需要無菌操作，調(diào)節(jié)進、排氣閥(通入的氣體為氮氣或其它惰性氣體),使接種口有氣體排出。5.6發(fā)酵5.6.1乳酸菌的發(fā)酵溫度控制在25℃~35℃。5.6.2發(fā)酵過程中不通氣，或通入氮氣，攪拌轉(zhuǎn)數(shù)50r/min～100r/min。5.6.3當有效活菌數(shù)達到每毫升十億級，并pH降低到4.0以下，結(jié)束發(fā)酵。5.6.4發(fā)酵周期為24h～48h。3發(fā)酵后的液體菌劑、固體菌劑密封包裝，包裝容器經(jīng)過滅菌處理。6質(zhì)量檢測每個批次的產(chǎn)品抽樣檢測包括感官、水分、pH、有效活菌數(shù)和雜菌率等指標，檢驗合格方可出廠。6.2.1取菌液250mL(或固體菌劑250g)于無色玻璃杯中，采用目測、鼻嗅的方法進行檢驗。6.2.2菌液為淺棕至深棕色的懸濁液，有特殊的酸香味。固體菌劑因培養(yǎng)基原料不同呈現(xiàn)不同顏色，有特殊的酸香味。乳酸菌有效活菌數(shù)的測定按GB20287規(guī)定檢測。從用來測定有效活菌數(shù)且已經(jīng)過10倍系列稀釋的樣品中，選取3個稀釋度(10??、10?、10?)進行雜菌率測定。平板計數(shù)法，按GB20287操作。7.1應貯存在通風、干燥、清潔的倉庫，倉庫內(nèi)無有害氣體、易燃易爆物品及腐蝕性化學物品，遠離熱源。7.2長途運輸時，防止日曬、雨淋，避免長期受壓和機械損傷，產(chǎn)品不應和易燃、易爆、易腐蝕的物品同車(或其他運輸工具)裝運。原菌種原菌種