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PAGEPAGE14廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《番荔枝主要病蟲(chóng)害防治技術(shù)規(guī)程》(征求意見(jiàn)稿)編制說(shuō)明一、任務(wù)來(lái)源、起草單位、主要起草人(姓名、單位、職務(wù)/職稱(chēng)、參與編制標(biāo)準(zhǔn)分工情況-列表格)等1、任務(wù)來(lái)源根據(jù)廣西壯族自治區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局《廣西壯族自治區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局關(guān)于下達(dá)2023年廣西地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂項(xiàng)目計(jì)劃的通知》(桂市監(jiān)函〔2023〕2257號(hào))文件精神,由廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出,廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所、龍州縣兆豐源農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司起草廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《番荔枝主要病蟲(chóng)害防治技術(shù)規(guī)程》(項(xiàng)目序號(hào):2023-1113),于2023年8月獲批準(zhǔn)立項(xiàng)。2、起草單位、主要起草人表1主要編制人員與責(zé)任分工唐景美助理研究員植物病理學(xué)廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所標(biāo)準(zhǔn)撰寫(xiě),病蟲(chóng)害觀察鑒定、藥效實(shí)驗(yàn)韋優(yōu)高級(jí)農(nóng)藝師園藝廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所番荔枝病蟲(chóng)害田間藥效實(shí)驗(yàn)周子義無(wú)園藝龍州縣兆豐源種養(yǎng)專(zhuān)業(yè)合作社番荔枝藥效實(shí)驗(yàn)史國(guó)英副研究員植物病理學(xué)廣西農(nóng)科院微生物研究所番荔枝病害分離鑒定黃麗君農(nóng)藝師林學(xué)廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所番荔枝病蟲(chóng)害田間調(diào)查周彩霞助理研究員植物種質(zhì)資源廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所病原菌分子鑒定蔣娟娟農(nóng)藝師生物技術(shù)與科學(xué)廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所番荔枝病蟲(chóng)害田間調(diào)查羅培四助理研究員作物栽培廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所番荔枝病蟲(chóng)害田間調(diào)查趙靜農(nóng)藝師植物科學(xué)與技術(shù)廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所番荔枝病蟲(chóng)害田間調(diào)查顏楨靈無(wú)生態(tài)學(xué)廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所番荔枝病害分離卓福昌助理研究員農(nóng)村與區(qū)域發(fā)展廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所番荔枝病蟲(chóng)害藥效實(shí)驗(yàn)盧美瑛農(nóng)藝師旅游管理廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所番荔枝病蟲(chóng)害藥效實(shí)驗(yàn)周之珞助理研究員植物種質(zhì)資源廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所番荔枝病蟲(chóng)害室內(nèi)藥效實(shí)驗(yàn)孔方南農(nóng)藝師園藝廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所番荔枝病蟲(chóng)害田間調(diào)查周婧研究員園藝廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所番荔枝病蟲(chóng)害田間調(diào)查韋雪英高級(jí)農(nóng)藝師農(nóng)學(xué)廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所番荔枝病蟲(chóng)害田間調(diào)查李文硯助理研究員果樹(shù)學(xué)廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所番荔枝病蟲(chóng)害田間調(diào)查二、制定標(biāo)準(zhǔn)的必要性和意義背景:由于近年來(lái)廣西香蕉受枯萎病、柑橘和甘蔗受價(jià)格影響種植面積萎縮,特色水果番荔枝因價(jià)格好,豐產(chǎn)快,畝收益高而備受農(nóng)業(yè)投資者看好,種植面積不斷擴(kuò)大。至2022年底,廣西番荔枝種植面積近8萬(wàn)畝,僅南寧市種植面積就達(dá)到3萬(wàn)畝。番荔枝作為一個(gè)新興特色產(chǎn)業(yè),因特殊的地理環(huán)境,番荔枝主要病蟲(chóng)害與臺(tái)灣不同。在廣西區(qū)內(nèi)基地特別是大基地的發(fā)生的主要病蟲(chóng)種類(lèi)尚未明確,很多種植者對(duì)番荔枝病蟲(chóng)害癥狀不了解,發(fā)生病蟲(chóng)害防治不能及時(shí)對(duì)癥采取措施,即使防治,也存在防治技術(shù)不成熟。番荔枝種植基地內(nèi)存在因病害死株率偏高,番荔枝枝條葉片果實(shí)病蟲(chóng)害發(fā)生嚴(yán)重,導(dǎo)致枯枝、落葉和落果嚴(yán)重,生產(chǎn)出的番荔枝花皮果率高,商品價(jià)值低等問(wèn)題,番荔枝主要病蟲(chóng)害防治技術(shù)尚未有相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。目的:針對(duì)廣西番荔枝防治技術(shù)不成熟的問(wèn)題,該標(biāo)準(zhǔn)立項(xiàng)之前,進(jìn)行了廣西番荔枝主要病蟲(chóng)害調(diào)查,明確廣西番荔枝近4年的主要發(fā)生的病蟲(chóng)害種類(lèi)及發(fā)生時(shí)期,針對(duì)部分重要病蟲(chóng)害做了相關(guān)的藥效試驗(yàn),為此,本項(xiàng)目推薦的番荔枝主要病蟲(chóng)害防治技術(shù)為廣西番荔枝病蟲(chóng)害防治提供了技術(shù)標(biāo)準(zhǔn),明確防治對(duì)象及防治方法??梢龑?dǎo)番荔枝種植者辨別廣西主要病蟲(chóng)害,并根據(jù)病蟲(chóng)害采取相應(yīng)防治措施。意義:使用該標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病蟲(chóng)害防治,可大大提高防治效率和水平,提高果實(shí)品質(zhì),增加種植者收入。三、主要起草過(guò)程1、前期的研究基礎(chǔ)該項(xiàng)目依托項(xiàng)目《“東南亞”熱帶作物種質(zhì)資源保存、維護(hù)和創(chuàng)新中心建設(shè)》,合同編號(hào):桂科ZY19183010、《廣西優(yōu)稀野生果樹(shù)研究團(tuán)隊(duì)》,合同編號(hào):桂農(nóng)科2021YT163等項(xiàng)目開(kāi)展了番荔枝種質(zhì)資源的引進(jìn)、收集、栽培技術(shù)研究及病蟲(chóng)害鑒定與防控技術(shù)研究等系列工作,收集保存了番荔枝種質(zhì)資源20多份,建立有10畝番荔枝種質(zhì)資源圃和20畝番荔枝生產(chǎn)區(qū),并對(duì)廣西南寧市、崇左市級(jí)研究所圃?xún)?nèi)番荔枝病蟲(chóng)害進(jìn)行了觀察記錄,收集數(shù)據(jù)信息。對(duì)重要的番荔枝病蟲(chóng)害進(jìn)行了深入研究,嚴(yán)重的病害,進(jìn)行采樣分離,對(duì)分離到的菌株進(jìn)行致病菌鑒定、病原菌生物學(xué)特性研究和室內(nèi)藥效,對(duì)部分不能室內(nèi)培養(yǎng)的菌進(jìn)行了田間藥效試驗(yàn);調(diào)查田間蟲(chóng)害,觀察田間蟲(chóng)害癥狀和危害時(shí)期,根據(jù)蟲(chóng)害危害時(shí)期,提出防治建議,指導(dǎo)相關(guān)基地開(kāi)展防治方案,觀察防治效果。該標(biāo)準(zhǔn)參與單位種植番荔枝200畝,同時(shí)從事番荔枝生產(chǎn)技術(shù)指導(dǎo)工作,對(duì)田間發(fā)生病蟲(chóng)害防治工作進(jìn)行全程指導(dǎo),并收集有關(guān)病蟲(chóng)害防治效果較好的配方,以上前期工作為該標(biāo)準(zhǔn)的制定奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。2、標(biāo)準(zhǔn)草案的編制2022年1月至2023年3月,標(biāo)準(zhǔn)起草單位的課題組結(jié)合科技項(xiàng)目的實(shí)施,對(duì)番荔枝上分離到的致病菌開(kāi)展了較系統(tǒng)的鑒定,確定致病菌的種,對(duì)有研究?jī)r(jià)值的菌株進(jìn)行生物學(xué)特性測(cè)定和室內(nèi)藥效試驗(yàn),對(duì)不能自主鑒定且危害嚴(yán)重的蟲(chóng)害進(jìn)行送樣鑒定,并查閱了大量的國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)資料,確定了《番荔枝主要病蟲(chóng)害防治技術(shù)規(guī)程》廣西地方標(biāo)準(zhǔn)的基本內(nèi)容及框架。經(jīng)過(guò)反復(fù)研討及編制,形成了標(biāo)準(zhǔn)草案。3、征求意見(jiàn)稿的編制2023年4-6月,標(biāo)準(zhǔn)起草單位向廣西壯族自治區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局遞交了制定廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《番荔枝主要病蟲(chóng)害防治技術(shù)規(guī)程》的申報(bào)書(shū)和標(biāo)準(zhǔn)草案,并獲批準(zhǔn)立項(xiàng)。2023年7月,按照廣西壯族自治區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局《廣西壯族自治區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局關(guān)于下達(dá)2023年廣西地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂項(xiàng)目計(jì)劃的通知》(桂市監(jiān)函〔2023〕2257號(hào))文件的通知精神,為做好標(biāo)準(zhǔn)的編制工作,起草單位成立標(biāo)準(zhǔn)起草小組,起草小組認(rèn)真學(xué)習(xí)了中華人民共和國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化法,標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則,參加標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)培訓(xùn),及時(shí)部署了制標(biāo)工作方案和標(biāo)準(zhǔn)起草工作進(jìn)度計(jì)劃。全面啟動(dòng)了《番荔枝主要病蟲(chóng)害防治技術(shù)規(guī)程》廣西地方標(biāo)準(zhǔn)的編制工作。2023年8月-2023年12月,標(biāo)準(zhǔn)起草小組成員始終堅(jiān)持理論與實(shí)際相結(jié)合的原則,多次到廣西南寧市、崇左市的各個(gè)番荔枝種植基地種質(zhì)進(jìn)行調(diào)查和采樣,對(duì)部分蟲(chóng)害進(jìn)行再次鑒定,反復(fù)觀察驗(yàn)證、討論斟酌,全面疏理總結(jié)幾年來(lái)番荔枝病蟲(chóng)害及防治信息,參考我國(guó)其它樹(shù)種病蟲(chóng)害防治技術(shù)規(guī)程編寫(xiě)的要素,同時(shí)針對(duì)番荔枝的特性及番荔枝病蟲(chóng)害防治需解決的技術(shù)性、實(shí)用性及操作性問(wèn)題,在標(biāo)準(zhǔn)征求意見(jiàn)稿第一稿的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步補(bǔ)充完善標(biāo)準(zhǔn)征求意見(jiàn)稿,形成了《番荔枝主要病蟲(chóng)害防治技術(shù)規(guī)程》征求意見(jiàn)稿及其編制說(shuō)明。四、制定標(biāo)準(zhǔn)的原則和依據(jù),與現(xiàn)行法律、法規(guī)的關(guān)系,與有關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的協(xié)調(diào)情況1、實(shí)用性原則《番荔枝主要病蟲(chóng)害防治技術(shù)規(guī)程》標(biāo)準(zhǔn)草案是由廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所和龍州縣兆豐源農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司共同起草,廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所是以實(shí)用科研為主,龍州縣兆豐源農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司種植有番荔枝200畝,指導(dǎo)廣西境內(nèi)近幾千畝番荔枝種植技術(shù),具有豐富的番荔枝病蟲(chóng)害防治技術(shù)經(jīng)驗(yàn),本標(biāo)準(zhǔn)草案是總結(jié)前期進(jìn)行番荔枝病蟲(chóng)害科研和生產(chǎn)防治技術(shù)相結(jié)合為基礎(chǔ)再進(jìn)行撰寫(xiě),具有較強(qiáng)的實(shí)用性。2、協(xié)調(diào)性原則本在標(biāo)準(zhǔn)編寫(xiě)過(guò)程中注意了番荔枝主要病蟲(chóng)害防治技術(shù)相關(guān)法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)的協(xié)調(diào)問(wèn)題,在內(nèi)容上與現(xiàn)行法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)一致。3、規(guī)范性原則本文件嚴(yán)格按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的要求和規(guī)定編寫(xiě)本文件的內(nèi)容,保證標(biāo)準(zhǔn)的編寫(xiě)質(zhì)量。4、前瞻性原則本標(biāo)準(zhǔn)具有前瞻性,在今后較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持一定的技術(shù)先進(jìn)性。本標(biāo)準(zhǔn)在番荔枝主要病蟲(chóng)害防治技術(shù)現(xiàn)實(shí)需求的同時(shí),還考慮到了對(duì)環(huán)境的影響,建議生物防治、農(nóng)業(yè)防治、物理防治,最后進(jìn)行化學(xué)防治。5、與現(xiàn)行法律、法規(guī)的關(guān)系,與有關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的協(xié)調(diào)情況本標(biāo)準(zhǔn)制定是依據(jù)《中華人民共和國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化法》等國(guó)家相關(guān)的法規(guī)和強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上結(jié)合地方實(shí)際情況制定出來(lái)的,嚴(yán)格執(zhí)行強(qiáng)制性國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),符合現(xiàn)行的法律、法規(guī),因此與現(xiàn)行法律、法規(guī)及強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)無(wú)沖突。五、主要條款的說(shuō)明,主要技術(shù)指標(biāo)、參數(shù)、試驗(yàn)驗(yàn)證的論述2019-2023年對(duì)廣西南寧市、崇左市番荔枝主要種植基地的調(diào)查,經(jīng)過(guò)調(diào)查和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,危害廣西番荔枝的病蟲(chóng)害有28種。其中,病害有9種(見(jiàn)表1),銹病、炭疽病、根腐病、煤煙病危害最嚴(yán)重。蟲(chóng)害19種(見(jiàn)表2),葉螨、粉虱、薊馬、粉蚧危害最嚴(yán)重。進(jìn)行發(fā)生規(guī)律觀察及生產(chǎn)防治指導(dǎo),對(duì)重要病害進(jìn)行深入研究,同時(shí)在番荔枝生產(chǎn)中進(jìn)行了發(fā)病前期防治指導(dǎo),取得很好的防治效果,部分病害詳細(xì)研究情況如下:表1廣西番荔枝病害種類(lèi)及危害程度病害名稱(chēng)病原物主要危害部位發(fā)生時(shí)間危害程度銹病Phakopsoraherimoliae葉片9-翌年2月+++根腐病Fusariumacutatum、Fusariumsp.根全年+++炭疽病Colletotrichumsiamense葉片、果實(shí)、嫩莖全年,其中果實(shí)炭疽4-7月,9-11月為高發(fā)期+++黑腐病Lasiodiplodiatheobromae果實(shí)5-6月,9-10月++煤煙病Meliolasp.葉片全年,其中9-12月為高發(fā)期+++梢腐病Lasiodiplodiapseudotheobromae嫩葉、嫩梢4-6月,9-10月++花腐病Lasiodiplodiasp.花4-5月,8-10月+葉斑病Nigrosporasphaerica葉片10-翌年1月+匍枝根霉果腐病Rhizopusstolonifer果實(shí)果實(shí)采摘后貯藏運(yùn)輸期,10-11月,12-翌年2月+表2番荔枝蟲(chóng)害種類(lèi)及危害程度分類(lèi)蟲(chóng)害種類(lèi)危害部位發(fā)生時(shí)間危害程度鞘翅目綠磷象甲Hypomecessquamosus葉片全年++象甲Curculionidae露尾甲Haptonchusluteolus花花4-5月,8-10月同上++++等翅目黃翅大白蟻MacrotermesbarneyiLight、黑翅土白蟻Odontotermesformosanus莖干莖干全年全年++鱗翅目樟青鳳蝶Graphiumsarpedon斜紋夜蛾Spodopteralitura煙青蟲(chóng)Heliotnisassulla番荔枝斑潛螟Anonaepestisbengalella荔枝擬木蠹蛾ArbeladeaSwinboe、相思擬木蠹蛾ArbelabaibaranaMatsumura葉片葉片葉片果實(shí)莖干莖干3-11月3-7月、8-10月3-7月、8-10月6-8月、9-12月3-12月3-12月+++++++同翅目大洋臀紋粉蚧Planococcusminor果實(shí)、葉片、嫩梢全年++白粉虱Trialeurodesvaporariorum葉片全年+++煙粉虱Bemisiatabaci葉片全年+++纓翅目茶黃薊馬ScirtothripsdorsalisHood果實(shí)、花、葉片、嫩梢3-12月+++蜱螨目柑橘全爪螨Panonychuscitri、二點(diǎn)葉螨Tetranychusurticae葉片葉片全年全年++++半翅目桃蚜Myzuspersicae葉片、梢3-6+雙翅目桔小實(shí)蠅Bactroceradorsalis果實(shí)8-10月、12-2月++1、番荔枝銹病對(duì)番荔枝銹病進(jìn)行了3年的觀察研究,在顯微鏡下測(cè)量了銹菌夏孢子大小,并提取了銹菌的DNA,用ITS1/ITS4和LSU等引物進(jìn)行擴(kuò)增,其中一對(duì)ab引物擴(kuò)增出相對(duì)應(yīng)的序列,由于受雜質(zhì)的影響,所獲取的DNA序列純度不高,進(jìn)而影響了擴(kuò)增結(jié)果,擴(kuò)增出的序列測(cè)序結(jié)果不理想,未能比對(duì)出相對(duì)于的銹菌。對(duì)不同品種的銹病發(fā)病率進(jìn)行了調(diào)查,發(fā)現(xiàn)不同品種番荔枝發(fā)病率區(qū)別較大,因而提出使用抗病品種。2022-2023年調(diào)查了解番荔枝銹病發(fā)生和發(fā)展規(guī)律,2023年對(duì)番荔枝銹病防治進(jìn)行田間藥效試驗(yàn)。番荔枝葉片銹病癥狀見(jiàn)圖1,發(fā)病初期葉背出現(xiàn)針頭大小黃色病斑,稍隆起,病斑擴(kuò)大,表皮破裂,散出銹色粉狀夏孢子,發(fā)生嚴(yán)重的葉片銹病病斑布滿(mǎn)整張葉片,導(dǎo)致葉片黃化脫落,影響光合作用,進(jìn)而影響果實(shí)大小。銹病夏孢子梨形,孢子銹色,表面有凸起,大小為(26.22-30.03μm)×(15.67-18.37μm),對(duì)第5種植年的AP釋迦園進(jìn)行觀察,時(shí)間為每年8月至翌年2月,每月進(jìn)行1次觀察,結(jié)果顯示,9月份開(kāi)始發(fā)病,1月份達(dá)到發(fā)病高峰期,2月份出現(xiàn)葉片掉落。對(duì)新植地第1種植年的AP釋迦園進(jìn)行觀察,8月至翌年2月未發(fā)現(xiàn)發(fā)生銹病。2022年1月對(duì)毛葉番荔枝、黃龍番荔枝、大目番荔枝、牛心梨、山刺番荔枝、圓滑番荔枝、AP番荔枝、鳳梨番荔枝進(jìn)行調(diào)查,結(jié)果表明,大目番荔枝和鳳梨番荔枝、AP番荔枝出現(xiàn)銹病危害,鳳梨釋迦病情指數(shù)最高,危害最嚴(yán)重,其余品種番荔枝未出現(xiàn)為害。生產(chǎn)中指導(dǎo)使用吡唑奈菌胺.苯醚甲環(huán)唑、氟吡菌酰胺.戊唑醇、苯醚甲環(huán)唑、氟唑菌酰羥胺、甲基硫菌靈、代森錳鋅輪流使用,取得較好的防效,進(jìn)行防治試驗(yàn),使用吡唑奈菌胺.苯醚甲環(huán)唑、氟吡菌酰胺.戊唑醇、苯醚甲環(huán)唑、氟唑菌酰羥胺、甲基硫菌靈、代森錳鋅進(jìn)行藥效試驗(yàn),結(jié)果表明吡唑奈菌胺.苯醚甲環(huán)唑效果最好ab圖1a葉片銹病癥狀,b夏孢子圖ba2、番荔枝炭疽病ba炭疽病為害番荔枝葉片、嫩梢、果實(shí)均可發(fā)病。炭疽菌侵染葉片,葉片出現(xiàn)橢圓形葉斑或不規(guī)則褐色病斑,病斑呈輪紋狀。炭疽菌侵染枝條,枝條上出現(xiàn)褐色圓形病斑,在葉柄也枝條連接處受害最為嚴(yán)重。炭疽菌侵染番荔枝果實(shí),果面表面產(chǎn)生圓形病斑,褐色水漬狀,后期暗褐色至黑色,病斑擴(kuò)大連成片狀,嚴(yán)重的整個(gè)果實(shí)變黑果,掉落。濕度大時(shí)果實(shí)病斑表面可產(chǎn)生橘紅色粘孢團(tuán),對(duì)果實(shí)品質(zhì)和產(chǎn)量影響極大(如圖1a,b)。2019年從膨果期的番荔枝炭疽病果實(shí)上分離到1株炭疽致病菌FLZG-3,從番荔枝果實(shí)上分離到到番荔枝致病菌1株,2021年從番荔枝幼果炭疽病果上分離到1株炭疽病致病菌FLZG-4,對(duì)該病原菌提取DNA,選擇ITS(ITS1/ITS4)、TUB(βT2a/βT2b)、ACT(ACT-51F/ACT-783R)、GAPDH(GDF/GDR)、CHS?1(CHS-79F/CHS-345R)、CAL(CL1C/CL2C)6對(duì)引物對(duì)番荔枝果實(shí)炭疽菌基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增后測(cè)序,將測(cè)序所得序列在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行BLAST比對(duì)分析,結(jié)果顯示番荔枝炭疽病病原菌為Colletotrichumsiamense。以下是所測(cè)得的序列:ColletotrichumsiamenseisolateFLZG-3ITSgene,partialcdsGGCATCTAATAACCCTTTGTGAACATACCTATAACTGTTGCTTCGGCGGGTAGGGTCTCCGTGACCCTCCCGGCCTCCCGCCCCCGGGCGGGTCGGCGCCCGCCGGAGGATAACCAAACTCTGATTTAACGACGTTTCTTCTGAGTGGTACAAGCAAATAATCAAAACTTTTAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCGCCAGCATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTTCAACCCTCAAGCTCTGCTTGGTGTTGGGGCCCTGCAGCTGATGTAGGCCCTCAAAGGTAGTGGCGGACCCTCCCGGAGCCTCCTTTGCGTAGTAACTTTACGTCTCGCACTGGGATCCGGAGGGACTCTTGCCGTAAAACCCCCAATTTTCCAAAGGTTGACCTCGGATCAGGTAGGAATACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGGCGGAGGAAACCCCCCAAAGTAColletotrichumsiamenseisolateFLZG-3beta-tubulin(BT)gene,partialcdsGAGAGACCGCCGACGATCCGGCATATATACTTGCGAGGACGGCAGATGTTGACGATAGAGTAGGCAAAACATTTCTGGCGAGCACGGCCTCGACAGCAATGGAGTGTATGTCATGCCCCTTATCTGGCCACATTGGTGGTTGACCGCTAAACTCGAACAGCTACAACGGCACCTCTGAGCTCCAGCTCGAGCGCATGAGCGTCTACTTCAACGAAGTTTGTTACCTTATAGCCCCCAGAGTGCAAGATAAACATATTGACGAGTACTGACCTTCGCTCCTACCCAGGCTTCCGGCAACAAGTACGTGCCCCGTGCCGTCCTCGTCGATTTGGAGCCCGGTACCATGGACGCCGTCCGTGCCGGTCCTTTCGGCCAGCTCTTCCGCCCCGACAACTTCGTCTTCGGCCAGTCTGGTGCCGGCAACAACTGGGCCAAGGGTCATAACColletotrichumsiamensestrainFLZG-3calmodulin(CAL)gene,partialcdsTGTGGTCTTTTTCTTCTCTCGCTGCCATCTCTTGCTCCTGGCGACAGTCGTGGCCTTTGCTAACCCACACAAGGACAAGGATGGCGATGGTCAGTGCCTCACCCCTTTTGCTCCCCTTCGATGCGCTCCTGGGAACGCCGTTCGCGACCGTCGATACACCAGCGGCATTCGATGCCACCGTCGAGGCATGTAGAATCGAGCTAAAGAGTTGGACAGGCCAAATCACTACAAAGGAGCTGGGCACCGTCATGCGCTCTCTCGGCCAGAACCCCTCCGAGTCGGAGCTCCAAGACATGATCAACGAGGTCGACGCCGACAACAACGGCACCATCGACTTTCCCGGTAGGTGGACATGCGGAATCCTGCGTCACACAATACAGGCCCGCTGACTGGTCTTCAGAGTTCCTGACTATGATGGCCCGCAAGATGAAGGATACCGACTCCGAAGAGGAGATTCGCGAGGCTTTCAAGGTTGGCTACGACGGTGCTTTTTCGCTGCGATATATGTTGACTCTGAATAGGTCTTTGACCGCGACAACAACGGCTTCATCTCCGCCGCCGAGTTGCGTCACGTCATGACCTCCATTGGTGAGAAGCTTACCGACGACGAGGTTGACGAGATGATTCGCGAGGCCGATCAGGATGGCGATGGACGCATTGACTGTGAGTGTCGATTGATTGGTATGCGTCATGGGCACTAACAGGCGGTGTAGACAACGAGTCGCACGAATTGGTTGAAAAAAAAAAAAAAAACGGAGGGTTGColletotrichumsiamenseisolateFLZG-3chitinsynthase(CHS-1)gene,partialcdsCTTCGTCTGTGTGTAGCGACGGTCGTGCCAAGATCAACCCGCGAACAAGAGCACTGCTGGCCGGTATGGGTGTGTACCAGGAGGGTATCGCGAAGCAACAGGTCAACAGCAAGGATGTCACCGCCCACATTTACGAATACACGACCCAGGTCGGCATGACGATCAAGAACGACGTTGTCTCCTTGGTTCCTAAGCAGCAGCCCGTTCAGATGCTGTTCTGCTTGAAGGAGAAGAACCAGAAGAAGATCAACTCTCACAGATGGTTCTTCCAAGTColletotrichumsiamensestrainFLZG-3glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase(GAPDH)gene,partialcdsGCTGCTGTGAGTTCCCCCACCTACCCCTCCAAACTCGCCATGACTTCACATCCATCACCACCACCACCGCTGTCATCTACATCTCGCCACCCGCGTTTGGTAAACAAGAACGCCGTCATGAATGGAGGCCAATTGAAACCATGGGTCGGGACGGCCGGACACATGCTATCACTCATATCAGCCCCATCTGTCACATTTACTGACTCGCTCTTCACAGGCCTACATGCTCAAGTCGAACTCCACCCA形態(tài)特征(見(jiàn)圖3),菌落正面純白色,氣生菌絲發(fā)達(dá),菌落綿密;背面淺綠色,有傘變,不易產(chǎn)生分生孢子;分生孢子圓柱形或梭形,兩端鈍圓,部分中部有溢縮,10.2~13.8μm×3.5~4μm。對(duì)番荔枝果實(shí)炭疽病病菌FLZG-3生物學(xué)特性進(jìn)行研究,對(duì)溫度、PH值、碳源、氮源、不同培養(yǎng)基進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果表明,使用玉米培養(yǎng)基、燕麥培養(yǎng)基、水瓊脂培養(yǎng)基、馬鈴薯培養(yǎng)基、番荔枝汁液培養(yǎng)基,結(jié)果表明,馬鈴薯培養(yǎng)基為最適培養(yǎng)基;不同碳源使用蔗糖、葡萄糖、乳糖、木糖、果糖、半乳糖、山梨酸、甘露糖、阿拉伯糖、可溶性淀粉、麥芽糖、對(duì)照,結(jié)果表明葡萄糖為最適合碳源;以牛肉膏、蛋白胨、丙氨酸、天門(mén)冬氨酸、脲、酵母侵粉、硫銨、碳銨、硝銨、硝酸鈉、硝酸鉀、氯銨、甘氨酸、對(duì)照,酵母侵粉為最適氮源;使用不同PH3-PH12馬鈴薯培養(yǎng)基進(jìn)行試驗(yàn),PH8時(shí)菌絲生長(zhǎng)最快;不同溫度對(duì)菌絲影響,采用5℃、10℃、15℃、20℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40,結(jié)果表明菌絲在25℃生長(zhǎng)最快;不同光照對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響,使用光照、光照-暗培養(yǎng)、暗培養(yǎng),結(jié)果表面,暗培養(yǎng)利于菌絲培育;使用40%百菌清懸浮劑、90%多菌靈水分散粒劑、25%吡唑醚菌酯乳油、45%咪鮮胺水乳劑、70%代生猛鋅可濕性粉劑、40%苯醚甲環(huán)唑懸浮劑進(jìn)行室內(nèi)藥效試驗(yàn),結(jié)果表明咪鮮胺2000倍、5000倍、10000倍、15000倍、20000倍菌絲均未生長(zhǎng),抑菌效果最好(見(jiàn)圖4)。aabcd圖2.a果實(shí)炭疽癥狀,b葉片炭疽癥狀,cck接種4d,dFLZG-3接種4daabc圖3.a菌落正面,b菌落背面,c分生孢子aab圖4.a咪鮮胺2000倍、5000倍、10000倍菌落圖,b對(duì)照菌落圖3、番荔枝黑腐病果實(shí)初期出現(xiàn)黑色斑點(diǎn)(見(jiàn)圖5),逐漸擴(kuò)大,呈黑色圓形病斑,最終全果變黑,腐爛,流膠,濕度大時(shí),病害果實(shí)半月后出現(xiàn)黑色粉狀物,變成下一輪侵染源。對(duì)番荔枝黑腐病致病菌進(jìn)行總DNA提起,并用引物ITS(ITS1/ITS4)擴(kuò)增,測(cè)序,將測(cè)序所得序列在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行BLAST比對(duì)分析,結(jié)果顯示番荔枝炭疽病病原菌為可可毛色二孢Lasiodiplodiatheobromae,菌株在PDA培養(yǎng)基上菌落生長(zhǎng)快,2d可長(zhǎng)滿(mǎn)整個(gè)培養(yǎng)皿。菌落初期為白色,近圓形,邊緣整齊,后變灰色,背面變?yōu)楹谏?。菌絲絨毛狀,致密。培養(yǎng)20d后,菌落邊緣或表面產(chǎn)生黑色分生孢子器,表面產(chǎn)生無(wú)色液體。分生孢子器聚生,球形或近球形,暗褐色,壁較厚。分生孢子橢圓形或卵形,初期無(wú)色透明,壁厚,單胞;成熟分生孢子暗褐色,有縱紋,壁厚,雙胞,孢子大小為22.3-30.5×13.2-15.0μm,使用使用40%百菌清懸浮劑、90%多菌靈水分散粒劑、25%吡唑醚菌酯乳油、45%咪鮮胺水乳劑、70%代生猛鋅可濕性粉劑、40%苯醚甲環(huán)唑懸浮劑進(jìn)行室內(nèi)藥效試驗(yàn),結(jié)果表明百菌清和代森錳鋅對(duì)番荔枝黑腐病菌抑菌效果最好(見(jiàn)圖6)。aabc圖5.a接種Lasiodiplodiatheobromae4d,bCK,c分生孢子圖6.a圖6.aCK,b代森錳鋅600倍,c百菌清600倍abc4、番荔枝梢腐病番荔枝梢腐病近3年危害嚴(yán)重,在9-10月份修剪后出的新梢危害高峰期。對(duì)崇左市基地梢腐病樣品采集病分離,分離到5個(gè)菌株,進(jìn)行致病性鑒定,其中FLZSF3具有強(qiáng)致病性,根據(jù)形態(tài)特征初步判斷為毛色二孢屬,選擇ITS(ITS1/ITS4)、TEF1(EF1-688F/EF1-1251R)、TUB(βT2a/βT2b)和RPB2(RPB2-LasF/RPB2-LasR)4對(duì)引物對(duì)病菌基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增后測(cè)序,將測(cè)序所得序列在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行BLAST比對(duì)分析,將FLZSF3鑒定為假可可毛色二孢Lasiodiplodiapseudotheobromae。使用40%百菌清懸浮劑、90%多菌靈水分散粒劑、25%吡唑醚菌酯乳油、45%咪鮮胺水乳劑、70%代生猛鋅可濕性粉劑、40%苯醚甲環(huán)唑懸浮劑對(duì)L.pseudotheobromae進(jìn)行室內(nèi)藥效試驗(yàn),結(jié)果表明多菌靈800倍和代森錳鋅600倍抑菌效果最好。圖10aCK,bFLZSF-3接種3d,c番荔枝梢腐病田間癥狀圖10aCK,bFLZSF-3接種3d,c番荔枝梢腐病田間癥狀abc圖10aCK,bFLZSF-3接種3d,c番荔枝梢腐病田間癥狀aabc圖1圖11aCK,b多菌靈800倍,c代森錳鋅600倍6、番荔枝煤煙病調(diào)查發(fā)現(xiàn),番荔枝煤煙病危害嚴(yán)重,特別實(shí)在每年8月至翌年1月,引起番荔枝煤煙病主要原因是粉蚧、粉虱、蚜蟲(chóng)和番荔枝自身分泌于葉背的蜜露誘發(fā)。在防治蟲(chóng)害效果好且施肥合理的基地較少發(fā)現(xiàn)。7、番荔枝根腐病根據(jù)近三年調(diào)查,番荔枝根腐病在廣西發(fā)生較為嚴(yán)重,特別是以土番為砧木的的番荔枝基地,還有排水不良的地塊發(fā)生也較為嚴(yán)重,在廣西的隆安縣丁當(dāng)鎮(zhèn)的1500畝基地,其中有200畝因積水,導(dǎo)致根腐病發(fā)生嚴(yán)重。有報(bào)道,番荔枝根腐病為寄生疫霉(Phytophthoraparasitica)、棕櫚疫霉(P.palmivora)、鐮刀菌(Fusariumsp.)等多種真菌復(fù)合侵染所引發(fā)的病害,廣西農(nóng)科院黃偉雄對(duì)感染根腐病番荔枝根際土壤微生物群落多樣性分析,初步確定引起廣西地區(qū)番荔枝根腐病的病原菌為真菌鐮刀屬的

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