【名師伴你行】2021屆高考生物二輪復習專題提能專訓15基因工程、細胞工程

提能專訓(十五)基因工程、細胞工程(老師用書獨具)1．植物葉肉細胞原生質(zhì)體的分別和培育的主要過程可用如圖所示圖解簡潔表示：eq\x(葉片)eq\o(→,\s\up17(a),\s\do15(洗凈、滅菌、切條、酶解))eq\x(原生質(zhì)體懸液)eq\o(→,\s\up17(b),\s\do15(過濾、離心))eq\x(純潔的原生質(zhì)體)eq\o(→,\s\up17(c),\s\do15(培育基中培育))eq\x(愈傷組織)eq\o(→,\s\up17(d))eq\x(胚狀體)eq\o(→,\s\up17(e))eq\x(植株)(1)培育胚狀體利用了________________這一項生物技術(shù)，胚狀體再連續(xù)培育，則可培育出完整的植株，這體現(xiàn)了________________。培育基中除了含有肯定的養(yǎng)分外，還必需含有________________等植物激素，還需要對培育基進行嚴格的____________________。(2)假如愈傷組織是三七葉肉細胞培育產(chǎn)生的，若為了獲得三七的細胞產(chǎn)物，則只需培育到______________；若為了獲得三七的人工種子，則需要培育到______________。假如愈傷組織是棉花葉肉細胞培育產(chǎn)生的，通過基因工程要獵取抗蟲棉，目的基因?qū)朊藁ㄓ鷤M織細胞常用的方法是______________法。(3)從葉片的葉肉細胞到獲得胚狀體的過程中，必需要經(jīng)過______________。①無絲分裂'②有絲分裂'③減數(shù)分裂'④原代培育⑤傳代培育'⑥植物體細胞雜交'⑦細胞融合'⑧脫分化'⑨再分化答案：(1)植物組織培育植物細胞的全能性細胞分裂素、生長素滅菌(2)愈傷組織胚狀體農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(3)②⑧⑨解析：(1)離體植物細胞通過脫分化形成愈傷組織，通過再分化形成具有根和芽的胚狀體，再通過細胞分裂、分化發(fā)育成一個完整的植株。該技術(shù)為植物組織培育，其原理為植物細胞的全能性。培育基的成分為水、無機鹽、維生素，氨基酸、蔗糖、植物激素(生長素和細胞分裂素等)等；培育基要求進行嚴格的滅菌。(2)三七的細胞產(chǎn)物為細胞的代謝產(chǎn)物，將三七葉肉細胞培育到愈傷組織即可；獲得人工種子需培育至胚狀體；棉花為雙子葉植物，導入抗蟲基因常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。(3)離體葉肉細胞培育到胚狀體的過程中必需經(jīng)過脫分化和有絲分裂形成愈傷組織，再分化和有絲分裂形成具有根和芽的胚狀體。2．(2022·東城區(qū)檢測)大腸桿菌pUC18質(zhì)粒是基因工程中常用的運載體。某限制酶在此質(zhì)粒上的唯一酶切位點位于LacZ基因中，假如沒有插入外源基因，LacZ基因便可表達出β－半乳糖苷酶。當培育基中含有IPTG和X－gal時，X－gal便會被β－半乳糖苷酶水解成藍色，大腸桿菌將形成藍色菌落。反之，則形成白色菌落。下圖表示利用此質(zhì)粒實施基因工程的主要流程。請分析并回答問題。(1)對已獲得的目的基因可利用________技術(shù)進行擴增。(2)目的基因插入質(zhì)粒構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程中，需要DNA連接酶恢復________鍵。(3)將試管Ⅰ中的物質(zhì)和大腸桿菌共同置于試管Ⅱ的目的是__________；大腸桿菌需事先用Ca2＋進行處理，目的是__________________________。(4)將試管Ⅱ中的菌液接種于選擇培育基上培育，培育基中應含有大腸桿菌必需的養(yǎng)分物質(zhì)________________和生長因子，還應加入IPTG、X－gal以及氨芐青霉素，其中加入氨芐青霉素的作用是篩選出__________________。(5)若觀看到培育基上消滅________色菌落，則說明大腸桿菌中已成功導入了重組質(zhì)粒。假如作為受體細胞的大腸桿菌也含有LacZ基因，則不利于重組質(zhì)粒的篩選，緣由是________________。答案：(1)PCR(2)磷酸二酯(3)進行轉(zhuǎn)化使大腸桿菌細胞處于感受態(tài)(4)碳源、氮源、無機鹽、水導入pUC18質(zhì)粒的大腸桿菌(5)白無論大腸桿菌中是否導入重組質(zhì)粒，均會呈現(xiàn)藍色菌落3．依據(jù)相關信息回答問題。據(jù)報道，科學家發(fā)覺了“核糖開關”。核糖開關是自然界細菌、一些植物中自然?存在的、有調(diào)控作用的傳感器，位于細菌等生物體內(nèi)特定的非翻譯區(qū)RNA序列區(qū)域，核糖開關無需依靠任何蛋白質(zhì)而直接結(jié)合小分子代謝物，從而發(fā)生結(jié)構(gòu)變化，參與調(diào)控生物的基本代謝。借助核糖開關，這些細菌能“一對一”地識別氨基糖苷類抗生素，進而產(chǎn)生相應的酶，將抗生素滅活。長期以來，以慶大霉素和新霉素等為代表的氨基糖苷類抗生素，臨床上主要用于治療一些由“敏感需氧革蘭氏陰性桿菌”所導致的腦膜炎、肺炎和關節(jié)炎等感染，但具有“核糖開關”的細菌卻能導致此類抗生素失效，現(xiàn)在，人類有望通過阻擋核糖開關的功能，使細菌失去抗藥性。(1)核糖開關________(填“能”或“不能”)作為基因工程的載體，由于________；合成“核糖開關”需要________聚合酶。(2)若某種蛋白質(zhì)X經(jīng)過修飾后即能阻擋核糖開關的功能，人們可以通過修飾過的蛋白質(zhì)X的三維結(jié)構(gòu)推想其應有的__________序列，進而找到相對應的________，再通過動物細胞培育技術(shù)，獲得大量的修飾過的蛋白質(zhì)X。獲得蛋白質(zhì)X基因及將基因轉(zhuǎn)移至受體細胞的技術(shù)稱為________。(3)利用動物細胞生產(chǎn)能阻擋核糖開關功能的蛋白質(zhì)，在培育的過程中，需要定期________，以防止細胞代謝產(chǎn)物對細胞自身造成危害。同時，還要接受培育皿或培育瓶，將其置于含有5%二氧化碳的培育箱中進行培育，二氧化碳的主要作用是維持________。答案：(1)不能核糖開關是RNA，基因工程的載體是雙鏈DNARNA(2)氨基酸脫氧核糖核苷酸序列蛋白質(zhì)工程(3)更換培育液培育液的pH4．以下為人工合成reAnti基因，轉(zhuǎn)入豬成纖維細胞，做成轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，請據(jù)圖回答：(1)構(gòu)建的重組質(zhì)粒除了要有reAnti基因和標記基因外，還要有________________和________。(2)過程③將重組質(zhì)粒導入豬胎兒成纖維細胞后，要通過DNA分子雜交技術(shù)，來檢測reAnti基因是否已重組到豬胎兒成纖維細胞的______________上。(3)從豬中取胎兒成纖維細胞，用______________處理，然后進行分散培育。培育時，將培育瓶置于含________的混合氣體培育箱中進行培育。(4)去核前的卵母細胞應培育到______________期。其去核后與成纖維細胞通過電刺激后融合，形成重組細胞，再利用物理或化學方法刺激，使之完成細胞____________，在體外培育成重組早期胚胎。(5)在進行過程⑦操作前，應用激素對受體母豬進行______________處理。答案：(1)(Anti基因的)啟動子終止子(2)染色體DNA(3)胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)95%空氣加5%CO2(4)MⅡ中分裂和發(fā)育(5)同期發(fā)情5．某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點，同時還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如圖所示，請回答下列問題。(1)將抗鹽基因?qū)霟煵菁毎麅?nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種新性狀(變異性狀)的來源屬于________。(2)假如將抗鹽基因直接導入煙草細胞，一般狀況下，煙草不會具有抗鹽特性，緣由是抗鹽基因在煙草細胞中不能________，也不能________。(3)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，應選用________和________兩種酶對________和________進行切割，以保證重組DNA序列的唯一性。(4)基因工程中的檢測篩選是一個重要的步驟。為篩選出導入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，下圖表示運用影印培育法(使一系列培育皿的相同位置上能消滅相同菌落的一種接種培育方法)檢測基因表達載體是否導入了農(nóng)桿菌。培育基除了含有細菌生長繁殖必需的成格外，培育基A和培育基B分別還含有________、________。從檢測篩選的結(jié)果分析，含有目的基因的是________菌落中的細菌。為了確定抗鹽煙草是否培育成功，既要用放射性同位素標記的________作探針進行分子雜交檢測，又要用________的方法從個體水平鑒定煙草植株的耐鹽性。(5)將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細胞培育成完整的植株需要用______________技術(shù)，愈傷組織經(jīng)______________進而形成完整植株，此過程除養(yǎng)分物質(zhì)外還必需向培育基中添加________。答案：(1)基因重組(2)復制表達(合成抗鹽基因的mRNA)(3)SalⅠHindⅢ質(zhì)粒含抗鹽基因的DNA(4)氨芐青霉素四環(huán)素(氨芐青霉素和四環(huán)素)4和6抗鹽基因肯定濃度的鹽水澆灌煙草植株(將煙草植株移栽到鹽堿地中)(5)植物組織培育細胞增殖和分化植物激素(生長素和細胞分裂素)6．基因工程和植物細胞工程技術(shù)在科研和生產(chǎn)實踐中有廣泛應用，請據(jù)圖回答有關問題。(1)獵取目的基因的方法包括________(答一種即可)和用化學方法直接人工合成。(2)基因表達載體的組成除目的基因外，還必需有________和標記基因。(3)①②過程接受最多的是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，緣由是農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上的________可轉(zhuǎn)移到受體細胞并整合到受體細胞的染色體DNA上，檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)的方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應的抗體進行________。(4)圖中③④過程須在無菌條件下進行，培育基中除加入養(yǎng)分物質(zhì)外，還需添加________等物質(zhì)，作用是促進細胞分裂、生長、分化。(5)若要獵取轉(zhuǎn)基因植物人工種子，需培育到________階段，再進行人工種皮的包裹；若用植物細胞實現(xiàn)目的基因所表達的蛋白質(zhì)類藥物的工廠化生產(chǎn)，培育到________階段即可。(6)從含有目的基因的受體細胞發(fā)育成完整的植物體依據(jù)的原理是____________________________________________。答案：(1)從基因文庫獵取、利用PCR技術(shù)擴增(答一種即可)(2)啟動子、終止子(答全得分)(3)T-DNA(可轉(zhuǎn)移的DNA)抗原—抗體雜交(4)植物激素(植物生長調(diào)整劑)(5)胚狀體愈傷組織(6)植物細胞的全能性7．下面是一項“利用轉(zhuǎn)基因番茄生產(chǎn)人胰島素的方法”的專利摘要，請回答：本創(chuàng)造利用轉(zhuǎn)基因番茄作為生物反應器生產(chǎn)人胰島素。所用的人胰島素基因是依據(jù)植物“偏愛”的密碼子來設計所含的密碼子，通過某方法合成若干DNA片段，拼接而成，重組DNA分子可通過農(nóng)桿菌介導的方法轉(zhuǎn)入番茄中，在番茄的果實中表達人胰島素。(1)本專利是接受________方法獲得目的基因。獲得的人胰島素基因與人體細胞中胰島素基因的堿基序列不同，但兩者所編碼的蛋白質(zhì)中氨基酸序列相同，緣由是_____________。要想在體外獲得大量該目的基因的片段，可以接受______技術(shù)。該技術(shù)中使用的關鍵酶是________；原料是四種脫氧核苷酸。(2)依據(jù)上述摘要，轉(zhuǎn)基因操作時所用的載體是________，載體上的________可以轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上。(3)假如要檢測在受體細胞中是否存在目的基因可接受________技術(shù)，再經(jīng)________方法培育成個體。答案：(1)人工合成密碼子具有簡并性，基因序列不同，蛋白質(zhì)可以相同PCR熱穩(wěn)定性DNA聚合酶(或Taq酶)(2)農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒T-DNA(3)DNA分子雜交組織培育8．基因工程被廣泛應用于藥物制備、動植物育種等，下圖所示為基因工程在動物乳腺生物反應器——轉(zhuǎn)基因山羊和抗蟲棉的培育過程。據(jù)圖回答：(1)在圖示①過程中，使用的限制酶能夠識別________的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，從而獲得A。也可接受________(填技術(shù)名稱)從人的DNA分子或蘇云金芽孢桿菌中對已知序列的A進行分別并擴增。(2)基因工程的關鍵環(huán)節(jié)之一是構(gòu)建B，其完整結(jié)構(gòu)至少包括________等部分，在此過程中除了使用工具酶外，還需使用的工具是________。(3)在通過⑤過程形成轉(zhuǎn)基因抗蟲棉時，一般要用到植物組織培育技術(shù)，但若在③過程中接受________法則不需要；在形成轉(zhuǎn)基因山羊C的過程中，需要從雌性動物體內(nèi)取出卵，在②過程中通過________將目的基因?qū)隷_______，在形成轉(zhuǎn)基因山羊的過程中除了基因工程技術(shù)外，還需要用到________技術(shù)。(4)由于轉(zhuǎn)基因表達產(chǎn)物存在于山羊的乳汁中。檢測其體內(nèi)是否消滅藥用蛋白，在分子水平上的檢測方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用________，表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品。答案：(1)雙鏈DNA分子PCR(或多聚酶鏈式反應)(2)目的基因、啟動子、終止子、復制原點和標記基因載體(3)花粉管通道顯微注射受精卵胚胎移植(4)相應的抗體進行抗原—抗體雜交，若有雜交帶消滅9．(2022·河南中原名校第一次聯(lián)考)藍色妖姬(藍玫瑰)因其顏色華貴而始終為人們所幻想，但玫瑰沒有產(chǎn)生藍色素的基因，無法生長藍色花瓣。下圖是利用藍三葉草中的藍色素基因培植藍玫瑰的過程(PstⅠ、SamⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ為四種限制酶)。請回答下列問題：(1)構(gòu)建表達載體A時，應選用限制酶______________，基因工程中通常狀況下使用兩種不同酶同時處理質(zhì)粒和外源DNA，優(yōu)點是可以防止____________________。(2)為使藍色素基因在玫瑰細胞中高效表達，一般需要把藍色素基因插入表達載體A的________和終止子之間，將藍色素基因?qū)胧荏w細胞的常用方法是________。(3)要檢測藍色素基因是否插入到玫瑰細胞染色體DNA上，應接受____________技術(shù)，在個體水平上是否需要檢測？________(填“是”或“否”)。(4)由玫瑰組織塊培育藍色妖姬過程中①②分別為________和________。答案：(1)PstⅠ、EcoRⅠ(答一個不給分)質(zhì)粒和目的基因自身連接環(huán)狀化(2)啟動子農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(3)DNA分子雜交否(4)脫分化再分化10．(2022·湖北荊州畢業(yè)班質(zhì)量檢查)口蹄疫是由RNA病毒引起的一種偶蹄動物傳染病。科學家嘗試利用轉(zhuǎn)基因番茄生產(chǎn)口蹄疫疫苗(其主要成分是該病毒的一種結(jié)構(gòu)蛋白VP1)，過程如下圖所示。請據(jù)圖回答下列問題：(1)圖示②成功構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程中，需要用到的工具酶除限制性核酸內(nèi)切酶外，還需要______________。(2)圖示⑤代表的過程是________。經(jīng)過該過程形成的細胞所具有的主要特點是_________________。(3)若要檢測轉(zhuǎn)化成功的番茄植株，除檢測標記基因的產(chǎn)物外，還可接受______________技術(shù)，檢測目的基因在番茄體內(nèi)是否轉(zhuǎn)錄。(4)圖示⑤⑥⑦代表的過程所涉及的生物工程技術(shù)是________________________________________________________。答案：(1)DNA連接酶(2)脫分化分裂力量強，分化程度低(3)分子雜交(4)植物細胞工程(或植物組織培育)11．(2022·太原階段測評二)如圖所示為動物細胞培育過程中，動物細胞增殖狀況的變化曲線(圖中B、D兩點表示經(jīng)篩選后連續(xù)培育)。請據(jù)圖回答：(1)OA段的培育稱為__________培育，AB段可能發(fā)生了__________現(xiàn)象，需要用__________酶處理使組織細胞分散開來。(2)G點之后的細胞能克服__________，并朝著__________的方向進展。(3)為使進行同體細胞或組織移植時細胞的核型不變，實際使用或冷凍保存的細胞應為圖中__________的細胞。(4)動物細胞培育和植物組織培育過程中，就細胞增殖、分化來說，動植物細胞都要進行__________，不同的是植物細胞還要進行__________。(5)為制備單克隆抗體，需將__________注射到小鼠體內(nèi)，以此獵取__________細胞，同時可選取圖中__________點的細胞與該細胞融合形成雜交細胞，所選取的細胞，其細胞膜上的__________比正常細胞顯著削減。為篩選能夠產(chǎn)生單克隆抗體的雜交細胞，可用__________培育基達到目的。答案：(1)原代細胞接觸性抑制(接觸性抑制)胰蛋白(2)細胞壽命的自然極限，獲得不死性(含義對即可)等同于癌細胞(癌細胞)(3)B～C(4)細胞增殖(細胞分裂)脫分化和再分化(5)抗原反復(抗原)漿(效應B)G糖蛋白選擇12．(2022·烏魯木齊診斷測試二)科學家從某耐鹽植物中得到耐鹽基因(R)，培育出耐鹽轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物?；卮鹣铝袉栴}：(1)在基因工程中，耐鹽基因(R)被稱為________。(2)假如用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將R基因?qū)朕r(nóng)作物細胞，應先將R基因插入農(nóng)桿菌的________中，然后用該農(nóng)桿菌感染農(nóng)作物細胞，將R基因插入農(nóng)作物細胞的________上。(3)上述過程中用到的DNA連接酶分為兩類，其中T4DNA連接酶既能連接雙鏈DNA分子片段的________，也能連接________。DNA連接酶的功能是連接兩個脫氧核苷酸之間的________。(4)若得到的耐鹽轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物的基因類型有甲、乙兩種，R基因的整合位點如圖(只考慮其中的兩對染色體，R基因都能正常表達)。讓植株自花傳粉(植株的減數(shù)分裂正常，且不考慮交叉互換)，會產(chǎn)生含兩個R基因配子的植株為圖________類型；若子代耐鹽植株所占比例為100%，則R基因的整合位點屬于圖________類型。答案：(1)目的基因(2)Ti質(zhì)粒的T-DNA染色體DNA(3)黏性末端平末端磷酸二酯鍵(4)乙甲13．(2022·山東濰坊高三四月模擬)下圖表示應用現(xiàn)代生物技術(shù)制備H7N9病毒單克隆抗體的流程，請回答下列問題：(1)①過程表示____________________，②過程用到的工具酶是______________。(2)構(gòu)建基因表達載體時，目的基因的首端必需含有__________________，③過程常用的方法是____________________，目的基因能否在受體細胞中穩(wěn)定遺傳的關鍵是__________________。(3)從分子水平上鑒定目的基因是否轉(zhuǎn)錄可接受________技術(shù)，對于轉(zhuǎn)基因成功的細胞Ⅱ還要進行克隆化培育和________檢測，經(jīng)多次篩選獲得足夠數(shù)量的該類細胞。(4)細胞Ⅰ是________，細胞Ⅱ的特點是______________。(5)若要預防H7N9禽流感，可用圖中的__________作為疫苗。答案：(1)逆轉(zhuǎn)錄限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)(2)啟動子顯微注射法轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因(3)分子雜交抗體(4)漿細胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生抗體(5)抗原蛋白解析：本題考查基因工程及單克隆抗體制備的學問，意在考查能理解所學學問的要點，把握學問間的內(nèi)在聯(lián)系，能用文字、圖表以及數(shù)學方式等多種表達形式精確?????地描述生物學方面的內(nèi)容。能運用所學學問的觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的推斷或得出正確的結(jié)論的力量。(1)據(jù)圖分析可知，①過程表示逆轉(zhuǎn)錄過程，②為從DNA上獵取目的基因的過程，需要的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶。(2)基因表達載體主要由目的基因、標記基因、啟動子、終止子組成。③過程為重組DNA導入受體細胞，常用顯微注射法，目的基因能否在受體細胞中穩(wěn)定遺傳的關鍵是轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因。(3)可接受分子雜交技術(shù)鑒定目的基因是否轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)基因成功的細胞Ⅱ要進行抗體檢測。(4)小鼠受抗原刺激后，可由B細胞增殖分化形成漿細胞，即細胞Ⅰ，漿細胞可產(chǎn)生抗體。細胞Ⅱ為雜交瘤細胞，既能無限增殖，又能產(chǎn)生抗體。(5)圖中抗原蛋白是H7N9病毒基因表達的產(chǎn)物，可作為疫苗預防H7N9禽流感。14．(2022·江蘇揚州中學高三模擬)重疊延長PCR技術(shù)是一種通過寡聚核苷酸鏈之間重疊的部分相互搭橋、互為模板，通過多次PCR擴增，從而獲得目的基因的方法。該技術(shù)在擴增較長片段的DNA、不同來源的DNA片段拼接、基因的定點誘變等方面具有廣泛的應用前景。如圖是利用重疊延長PCR技術(shù)擴增某目的基因的過程。其主要設計思路是用具有互補配對片段的引物(圖中引物2、引物3)，分別PCR，獲得有重疊鏈的兩種DNA片段，再在隨后的擴增反應中通過重疊鏈的延長獲得目的基因。結(jié)合所學學問，分析下列問題。(1)引物中G＋C的含量影響著引物與模板DNA結(jié)合的穩(wěn)定性，引物中G＋C的含量越高，結(jié)合穩(wěn)定性________________________。(2)在第一階段獲得兩種具有重疊片段DNA的過程中，必需將引物1、2和引物3、4置于不同反應系統(tǒng)中，這是由于_________。(3)引物1、引物2組成的反應系統(tǒng)和引物3、引物4組成的反應系統(tǒng)中均進行一次復制，共產(chǎn)生________種雙鏈DNA分子。(4)在引物1、引物2組成的反應系統(tǒng)中，經(jīng)第一階段形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過________次復制。(5)若利用微生物擴增該目的基因，其基本步驟包括：________________、__________________、微生物的篩選和培育、從菌群中獵取目的基因。答案：(1)越高(2)引物2和引物3存在互補配對片段，置于同一反應系統(tǒng)中它們會發(fā)生結(jié)合而失去作用(3)3(4)2(5)目的基因與載體結(jié)合(基因表達載體的構(gòu)建)將目的基因?qū)胧荏w細胞解析：本題考查基因工程的相關學問，意在考查理解所學學問的要點，把握學問間的內(nèi)在聯(lián)系的力量。(1)G與C配對需要形成三個氫鍵，所以引物中G＋C的含量越高，結(jié)合的穩(wěn)定性越高。(2)引物2和引物3存在互補配對片段，置于同一反應系統(tǒng)中它們會發(fā)生結(jié)合而失去作用，所以必需將引物1、2和引物3、4置于不同反應系統(tǒng)中。(3)由圖分析可知，共產(chǎn)生3種雙鏈DNA分子。(4)在引物1、引物2組成的反應系統(tǒng)中，經(jīng)第一階段形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過兩次復制。(5)擴增目的基因的基本步驟包括基因與載體結(jié)合(基因表達載體的構(gòu)建)、將目的基因?qū)胧荏w細胞、微生物的篩選和培育，從菌群中獵取目的基因。15．(2022·東北三校聯(lián)考)抗凍蛋白是一類抑制冰晶生長的蛋白質(zhì)，能降低水溶液的冰點，從而導致水溶液的熔點和冰點消滅差值，這個溫度差稱為熱滯值。昆蟲抗凍蛋白的熱滯值最高，為3℃～6℃，魚的熱滯值為0.7℃(1)基因工程的核心步驟是________，這一過程需要的酶是________。將AFPS基因?qū)霟煵菁毎?，常用________法，這是由于煙草屬于________(填“單”或“雙”)子葉植物，當植物體受到損傷時，傷口處的細胞會分泌大量的________，此操作過程中使用的運載體是________。(2)若檢測AFPS基因是否整合到煙草的染色體上，一般接受________技術(shù)，若檢測是否產(chǎn)生抗凍蛋白，一般接受________方法檢測雜交帶；還可以從________生物學水平進行抗凍鑒定。(3)生產(chǎn)上可將上述轉(zhuǎn)基因煙草大范圍種植，提高了農(nóng)夫的經(jīng)濟收入，從生態(tài)工程角度分析，主要體現(xiàn)了________原理。答案：(1)基因表達載體的構(gòu)建限制酶和DNA連接酶農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化雙酚類化合物Ti質(zhì)粒(2)DNA分子雜交抗原—抗體雜交個體(3)整體性解析：本題考查基因工程和生態(tài)工程，難度中等。(1)構(gòu)建基因表達載體是基因工程的核心步驟，這一過程需要限制酶和DNA連接酶；將目的基因?qū)胫参锛毎Ｓ棉r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；農(nóng)桿菌能感染雙子葉植物；當植物體受到損傷時，傷口處的細胞會分泌大量的酚類化合物，吸引農(nóng)桿菌移向這些細胞；這一操作過程中使用的運載體是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒。(