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考點一微生物的試驗室培育1.(2022·蘇、錫、常、鎮(zhèn)調(diào)研,32)微生物的分別和培育是現(xiàn)代生物工程應(yīng)用中的重要環(huán)節(jié)。下圖甲、乙是大腸桿菌分別和培育過程中部分操作和試驗結(jié)果示意圖,請據(jù)圖回答有關(guān)問題:(1)上圖甲所示的是制備固體培育基時的試驗操作步驟之一,它稱為________,若用該培育基培育大腸桿菌,除考慮養(yǎng)分條件外,還要考慮________、________和滲透壓等條件。(2)培育大腸桿菌時,在接種前需要檢測培育基是否被污染。對于固體培育基應(yīng)接受的檢測方法是_______________。(3)上圖乙是平板劃線法接種操作示意圖,正確的操作挨次是A→B→________(用字母和箭頭表示);找出圖乙中兩處錯誤的操作________、________(用字母表示)。解析(1)上圖甲所示的試驗操作步驟之一為倒平板,若用該培育基培育大腸桿菌,還要考慮溫度、氧氣、pH和無菌操作等一系列相關(guān)條件。(2)培育大腸桿菌時,在接種前需要檢測培育基是否被污染,因此要設(shè)置對比試驗,對于固體培育基應(yīng)接受的檢測方法是將未接種的培育基在適宜的溫度下放置適宜的時間,觀看培育基上是否有菌落產(chǎn)生,若有則說明培育基已被污染,應(yīng)重新配制培育基進行試驗。(3)上圖乙是平板劃線法接種操作示意圖,正確的操作挨次是A→B→G→F→E→C→D→H;圖乙中兩處錯誤的操作是C——未在酒精燈火焰旁進行操作,D——將第五區(qū)域內(nèi)的劃線與第一區(qū)相連。答案(1)倒平板溫度(氧氣)pH(無菌)(2)將未接種的培育基在適宜的溫度下放置適宜的時間,觀看培育基上是否有菌落產(chǎn)生(3)G→F→E→C→D→HCD2.為了從泡菜汁中篩選分別動身酵產(chǎn)酸速度快、亞硝酸鹽降解力量強的乳酸菌,科研人員做了如下試驗。請回答問題:(1)在無菌操作下,使用無菌水對泡菜汁進行________,將不同稀釋度的泡菜汁涂布于添加了CaCO3的乳酸菌培育基(MRS培育基)平板上。在適宜條件下培育后,挑取有________的菌落,連續(xù)在MRS平板上用________法分別,得到單菌落。(2)取分別到的乳酸菌分別接種到MRS液體培育基中,間隔取樣測定pH,目的是篩選出________的乳酸菌。(3)取上一步篩選出的乳酸菌接種到含有NaNO2的MRS培育基中,培育一段時間后,用________法測定NaNO2的含量,篩選出________的菌株。解析篩選分別出的菌種需要滿足兩個條件:①發(fā)酵產(chǎn)酸速度快,②亞硝酸鹽降解力量強。先篩選分別出產(chǎn)酸速度快的乳酸菌,再從產(chǎn)酸速度快的乳酸菌中篩選分別出亞硝酸鹽降解力量強的乳酸菌。產(chǎn)酸速度快的乳酸菌在含有CaCO3的選擇培育基上可較快形成透亮?????圈。測定NaNO2的含量通常用比色法。答案(1)梯度稀釋透亮?????圈劃線(2)產(chǎn)酸速度較快(3)比色亞硝酸鹽降解力量強3.(2022·河北衡水中學二模,39)請回答下列相關(guān)問題。(1)在腐乳的制作時,用來腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷潔凈后要用________消毒;在提取植物細胞的DNA時,需要先用洗滌劑溶解________。(2)葡萄皮、籽中含有原花青素、葡萄皮紅素和大量葡萄風味物質(zhì)等,這些物質(zhì)易溶于乙醇、乙酸乙酯中,因此常接受________法來分別提取,還可以用________和________等提取植物芳香油的方法。(3)為了檢測某致病菌對于抗生素的敏感性,取該單菌落適當稀釋,接種于固體培育基表面,在37℃培育箱中培育24h,使其均勻生長,布滿平板。將分別含有A、B、C三種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置,培育一段時間后,含A的濾紙片四周消滅透亮?????圈,說明該致病菌對抗生素A________(填“敏感”或“不敏感”);含B的濾紙片四周沒有消滅透亮?????圈,說明該致病菌對抗生素B________(填“敏感”或“不敏感”(4)用來推斷某選擇培育基是否起到了選擇分解纖維素的細菌的作用,要設(shè)置的對比是()A.未接種的選擇培育基B.未接種的牛肉膏蛋白胨培育基C.接種了的牛肉膏蛋白胨培育基D.接種了的選擇培育基解析(1)在制作腐乳時,用來腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷潔凈后要用沸水消毒;在提取植物細胞的DNA時,需要先用洗滌劑溶解細胞膜。(2)提取植物芳香油的最常用方法有萃取法、蒸餾法和壓榨法。(3)若含抗生素的濾紙片四周消滅透亮?????圈,說明該致病菌對相應(yīng)抗生素敏感,若含抗生素的濾紙片四周沒有透亮?????圈消滅說明該致病菌對此抗生素不敏感。(4)將菌液稀釋相同的倍數(shù),在牛肉膏蛋白胨培育基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于在選擇培育基上生長的菌落數(shù)目,因此,牛肉膏蛋白胨培育基可以作為對比,用來推斷選擇培育基是否起到了選擇作用。答案(1)沸水細胞膜(2)萃取蒸餾壓榨(3)敏感不敏感抗生素C的耐藥菌(4)C4.(2021·陜西長安五校聯(lián)考)爭辯者初步篩選到能合成纖維素酶的菌株MC-1,回答以下問題。(1)為了獲得能合成纖維素酶的單菌落,可接受________法將初篩菌液接種在固體培育基上,這種培育基屬于________培育基。(2)關(guān)于制備固體培育基的敘述,錯誤的是________。A.制備固體培育基時可以加入瓊脂B.操作的挨次為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌C.待培育基冷卻至50℃D.待平板冷卻凝固約5~10min后將平板倒過來放置(3)試驗過程中如何防止其他微生物的污染?________。(4)下表的培育液pH均為4.8,若對MC-1中纖維素酶的活力進行測定,則不能選擇表中的________培育液。(多選)(5)分別獲得了具有較高纖維素酶活性的菌株MC-1,為了在此基礎(chǔ)上獲得纖維素酶活性更高的菌株,最可行的做法是________。(6)某同學在培育過程中發(fā)覺培育基上感染了幾種細菌。若在以尿素為唯一氮源的培育基中加入________指示劑培育幾種菌后,指示劑變紅就可以鑒定其中含有能夠分解尿素的菌株;若在以纖維素為唯一碳源的培育基中加入________染料,培育后,培育基中消滅透亮?????圈,就可以鑒定其中含有纖維素分解菌。答案(1)劃線/涂布選擇(2)B(3)培育基滅菌、接種過程無菌操作(4)A、B、C(5)人工誘變(紫外線照射等)處理菌株,再進行篩選(6)酚紅剛果紅5.回答下列有關(guān)微生物培育與運用的問題。KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2gFeCl30.1gX1g維生素微量瓊脂15g(1)上表是篩選異養(yǎng)型細菌的培育基配方。從物理性質(zhì)上看該培育基屬于________培育基,其中成分X除了為目的菌供應(yīng)能源,還能供應(yīng)________。制備該培育基的一般操作挨次是計算→稱量→______→滅菌→______。對培育基進行滅菌的常用方法是________。(2)如圖A、B是純化微生物培育的兩種接種方法,C、D是接種后培育的效果。某同學接種培育后獲得圖C所示效果,則其接受的接種方法是[]________([]選填“A”“B”);接種時可能的失誤操作是________。(3)微生物強化采油是利用某些微生物能降解石油、增大石油的乳化度、降低石油黏度的原理,通過向油井中注入含微生物的水來提高采油率的新技術(shù)。為篩選和純化該類微生物,應(yīng)向培育基中添加________作為唯一碳源;培育一段時間后在培育基上形成降油圈,此時選取________就可獲得高效菌株。解析(1)表中培育基的成分有凝固劑瓊脂,因此該培育基為固體培育基。培育基除應(yīng)含有水、無機鹽、特殊養(yǎng)分物質(zhì)(維生素等)外,還應(yīng)有碳源和氮源。制備固體培育基的一般挨次是計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。(2)圖A運用接種環(huán),為平板劃線法,相應(yīng)培育效果如圖D所示;圖B運用
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