2025年魯教版選擇性必修3生物下冊(cè)月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年魯教版選擇性必修3生物下冊(cè)月考試卷647考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、不屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)必需條件的是（）A.無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境B.適宜的溫度和pHC.O2等氣體環(huán)境D.適宜的光照條件2、干細(xì)胞是一種尚未充分分化的未成熟的細(xì)胞，醫(yī)學(xué)家們正在嘗試?yán)酶杉?xì)胞治療一些頑疾，下列說(shuō)法不正確的是（）A.各種組織干細(xì)胞分化形成不同組織細(xì)胞是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果非B.利用干細(xì)胞治療某些頑疾，是因?yàn)楦杉?xì)胞具有再生各種組織，器官的潛能C.同一生物個(gè)體中，神經(jīng)細(xì)胞與干細(xì)胞所含有的遺傳物質(zhì)不同的D.干細(xì)胞包括成體干細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞3、基因工程技術(shù)也稱DNA重組技術(shù)，其實(shí)施必須具備的4個(gè)必要條件是（）A.工具酶、目的基因、載體、受體細(xì)胞B.重組DNRNA聚合酶、限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶C.模板DN信使RN質(zhì)粒、受體細(xì)胞D.目的基因、限制性核酸內(nèi)切酶、載體、受體細(xì)胞4、“篩選”是生物工程中常用的技術(shù)手段。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.基因工程育種時(shí)，需要篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞B.單倍體育種時(shí)，需要對(duì)F1的花藥進(jìn)行篩選后才可繼續(xù)組織培養(yǎng)C.胚胎移植前，需要對(duì)來(lái)自供體母牛子宮內(nèi)的胚胎進(jìn)行質(zhì)量篩查D.制備單克隆抗體時(shí)，需從分子水平篩選能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞5、科學(xué)家將葡萄糖異構(gòu)酶的第138位甘氨酸用脯氨酸替代，結(jié)果它的最適溫度提高了10～12℃，據(jù)分析，脯氨酸替代甘氨酸后，由于引入了一個(gè)吡咯環(huán)側(cè)鏈，剛好填充于138位甘氨酸附近的空洞，使蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)更具剛性，從而提高了酶的熱穩(wěn)定性。下列說(shuō)法正確的是（）A.蛋白質(zhì)工程和基因工程的根本區(qū)別是操作對(duì)象的差異B.對(duì)葡萄糖異構(gòu)酶的改造需要進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的設(shè)計(jì)C.蛋白質(zhì)工程操作過(guò)程中，不需要酶和載體作為工具D.經(jīng)蛋白質(zhì)工程改造后的葡萄糖異構(gòu)酶熱穩(wěn)定性提高這一性狀不可遺傳評(píng)卷人得分二、多選題(共5題，共10分)6、熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測(cè)樣本中DNA含量，也可用于RNA病毒的核酸檢測(cè)。其原理是：先由病毒的RNA逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA，然后對(duì)得到的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增。在PCR反應(yīng)體系中加入引物的同時(shí)，加入與某條模板鏈互補(bǔ)的熒光探針，當(dāng)Taq酶催化子鏈延伸至探針處會(huì)水解探針，使熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)接受到熒光信號(hào)，即每個(gè)DNA分子擴(kuò)增一次，就有一個(gè)熒光分子生成（如圖）。Ct值（循環(huán)閾值）的含義為：每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)到達(dá)設(shè)定閾值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.擴(kuò)增過(guò)程中引物先于探針結(jié)合到模板DNA上B.若最初該反應(yīng)體系中只有逆轉(zhuǎn)錄而來(lái)的一個(gè)DNA分子，經(jīng)n次循環(huán)后，需要消耗熒光探針2n-1個(gè)C.C值越大表示被檢測(cè)樣本中病毒數(shù)目越多D.若樣本被污染，RNA酶將病毒RNA降解，檢測(cè)結(jié)果可能為陰性7、下列有關(guān)哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.克隆羊、試管羊、轉(zhuǎn)基因羊的繁殖方式都是有性生殖B.胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)可維持只增殖不分化狀態(tài)C.受精時(shí)防止多精入卵的兩屏障是頂體反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)D.滋養(yǎng)層細(xì)胞在囊胚期發(fā)育成胎膜和胎盤(pán)并可用于性別鑒定8、大多數(shù)哺乳動(dòng)物的早期胚胎具有調(diào)節(jié)發(fā)育的功能，去掉早期胚胎的一半，仍可以發(fā)育成一個(gè)完整的胎兒，調(diào)節(jié)能力隨著發(fā)育進(jìn)程逐漸減弱甚至消失。晚期桑椹胚分割后分離的卵裂球仍具有調(diào)整發(fā)育的能力，重新致密化使卵裂球重新分布而發(fā)育至囊胚。下列說(shuō)法正確的是（）A.桑椹胚的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能B.桑椹胚不同部位的細(xì)胞致密化程度不同C.胚胎分割屬于無(wú)性繁殖或克隆的范疇D.胚胎發(fā)育到原腸胚階段，可將其取出向受體移植9、小鼠胚胎干細(xì)胞經(jīng)定向誘導(dǎo)可獲得多種功能細(xì)胞、制備流程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.為獲得更多的囊胚，采用激素注射促進(jìn)雄鼠產(chǎn)生更多的精子B.細(xì)胞a和細(xì)胞b內(nèi)含有的核基因不同，所以全能性高低不同C.用胰蛋白酶將細(xì)胞a的膜蛋白消化后可獲得分散的胚胎干細(xì)胞D.胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)出的各種細(xì)胞都需在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)10、抗體的結(jié)構(gòu)分為V區(qū)（識(shí)別并結(jié)合抗原的區(qū)域）和C區(qū)（抗體的支架），鼠源抗體具有外源性，會(huì)被人體免疫系統(tǒng)當(dāng)作抗原而清除。用人抗體的C區(qū)替換鼠源抗體的C區(qū)，保留鼠單抗的V區(qū)，可構(gòu)建人一鼠嵌合抗體，操作流程如圖所示。下列相關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.與骨髓瘤細(xì)胞融合的B淋巴細(xì)胞為能分泌抗體的漿細(xì)胞B.用選擇性培養(yǎng)基可篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞C.為獲得結(jié)構(gòu)正確的嵌合抗體，受體細(xì)胞應(yīng)選用大腸桿菌D.人一鼠嵌合抗體在保留抗體特異性的同時(shí)外源性下降評(píng)卷人得分三、填空題(共9題，共18分)11、基因工程的原理是_____，又叫_____或_____。通俗地說(shuō)，就是按照_____，把一種生物的_____提取出來(lái)，加以_____，然后放到_____，_____地改造生物的遺傳性狀。12、載體具備的條件：①_____。②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入。③______。13、兩種DNA連接酶（E·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：

①相同點(diǎn)：都縫合______鍵。

②區(qū)別：E·coliDNA連接酶來(lái)源于T4噬菌體，只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來(lái)；而T4DNA連接酶能縫合兩種末端，但連接平末端的之間的效率較低。14、重組DNA或重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞后，篩選______的依據(jù)是______。15、其它載體：_______16、沙門(mén)氏菌是一種常見(jiàn)的食源性致病菌；被感染了沙門(mén)氏菌的人或帶菌者的糞便污染的食品，會(huì)使人發(fā)生食物中毒。沙門(mén)氏菌的最適繁殖溫度為37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其對(duì)熱抵抗力不強(qiáng)，在60℃的條件下15min就能被殺死。肉桂精油是從肉桂樹(shù)中提煉獲得的，具有不溶于水；易溶于有機(jī)溶劑且易揮發(fā)的特性，能抑制沙門(mén)氏菌的繁殖。回答下列問(wèn)題：

（1）培養(yǎng)沙門(mén)氏菌時(shí)要進(jìn)行無(wú)菌操作，常用的滅菌方法有________（答出兩種）。用平板培養(yǎng)沙門(mén)氏菌時(shí)一般需要將平板________（填“倒置”或“正置”）。單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小和顏色等特征來(lái)初步區(qū)分不同種的微生物，原因是________。

（2）從雞糞便取樣，經(jīng)選擇培養(yǎng)后需要經(jīng)過(guò)一系列________才能將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基上。對(duì)獲得的沙門(mén)氏菌常采用________的方法長(zhǎng)期保存。

（3）根據(jù)題干信息，為避免食用被沙門(mén)氏菌污染的食品而引發(fā)的食物中毒，家庭中儲(chǔ)存、加工食品的方法是________。

（4）根據(jù)肉桂精油的化學(xué)特性，可采用________法來(lái)提取，提取過(guò)程中影響精油品質(zhì)的因素有________。17、注意：a生理基礎(chǔ)：______，______

b植物細(xì)胞融合前需用______和______除去細(xì)胞壁18、蛋白質(zhì)工程在生物制藥上有廣泛的應(yīng)用。如果已經(jīng)確認(rèn)某種新蛋白質(zhì)可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已經(jīng)確認(rèn)，如何通過(guò)蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)這種新藥？如果回答有困難，可以向老師請(qǐng)教或通過(guò)互聯(lián)網(wǎng)查找答案。_____19、基因表達(dá)載體的組成及其作用。

一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了______________、_______________外，還必須有__________、______________等(如圖所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦_(dá)_____________評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共18分)20、轉(zhuǎn)基因生物可能會(huì)破壞生態(tài)平衡（______）A.正確B.錯(cuò)誤21、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性。（選擇性必修3P52）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共30分)22、番茄果實(shí)在成熟的過(guò)程中；多聚半乳糖醛酸酶（PG）合成顯著增加，以降解果膠使細(xì)胞壁破損，從而使果實(shí)變紅變軟，但不利于保鮮。科學(xué)家利用基因工程得到轉(zhuǎn)基因番茄，大大延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期。操作流程如下，回答下列問(wèn)題：

（1）利用RT—PCR技術(shù)即逆轉(zhuǎn)錄—多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)制備PG基因，最好從番茄的_____細(xì)胞中提取mRNA，此技術(shù)所需要的酶主要有_____。

（2）據(jù)圖可知，轉(zhuǎn)基因番茄主要通過(guò)抑制PG基因的_____過(guò)程；使PG合成量減少，從而延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期。

（3）圖中的農(nóng)桿菌。能夠在含_____的培養(yǎng)基中生存，而在含_____的培養(yǎng)基中不能生存的即為已轉(zhuǎn)化的所需農(nóng)桿菌。

（4）圖中將反向連接PC基因?qū)敕鸭?xì)胞的方法稱為_(kāi)____。要檢測(cè)感染農(nóng)桿菌后的番茄細(xì)胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，_____（填“能”或“不能”）用標(biāo)記的PG基因的單鏈作為探針進(jìn)行檢測(cè)，理由是_____。

（5）在將轉(zhuǎn)化的番茄細(xì)胞通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)形成番茄幼苗過(guò)程中，培養(yǎng)基_____（填“要”或“不要”）添加有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，原因是_____。23、使用日益廣泛的手機(jī)；在方便人們通訊聯(lián)絡(luò)的同時(shí)也成為細(xì)菌等病原體傳播的途徑。為了解手機(jī)上細(xì)菌的情況，某興趣小組進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題：

(1)取附著在手機(jī)上細(xì)菌進(jìn)行取樣培養(yǎng)后，對(duì)菌液進(jìn)行系列梯度稀釋的目的是_______。

(2)A平板上生長(zhǎng)的菌落有多種形態(tài)，說(shuō)明附著在手機(jī)細(xì)菌有____種。若要使菌落能在A平板上生長(zhǎng)，下列培養(yǎng)基組分中最合理的是_____(選填“甲、乙、丙”)，原因是_____?？刹扇___________來(lái)檢測(cè)培養(yǎng)基A制備是否合格。培養(yǎng)基編號(hào)培養(yǎng)基組分甲蔗糖、NaC1、瓊脂、水乙牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂、水丙蛋白胨、NaCl、蔗糖、水

(3)初篩后將平板B的菌落通過(guò)“影印”方法接種到C培養(yǎng)基上培養(yǎng)，使C培養(yǎng)基對(duì)應(yīng)位置上出現(xiàn)相同菌落。然后用伊紅-美藍(lán)染液對(duì)C進(jìn)行染色，根據(jù)染色后D中出現(xiàn)的結(jié)果，可判斷平板B中______(選填圖中數(shù)字)是大腸桿菌的菌落。

(4)某同學(xué)采用平板劃線法進(jìn)一步純化大腸桿菌，接種培養(yǎng)一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)第一劃線區(qū)不間斷長(zhǎng)滿菌落，第二劃線區(qū)上幾乎無(wú)菌落，產(chǎn)生此情況的可能原因____________。24、丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化；部分患者可能發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。為研制丙肝病毒的單克隆抗體，某研究者以小鼠為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)流程?；卮鹣铝袉?wèn)題：

(1)為使單細(xì)胞懸液中的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的抗體中一定含有能與丙肝病毒結(jié)合的抗體，需要進(jìn)行的操作是______。融合之前的兩種細(xì)胞中，能通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)大量增加數(shù)量的是____

(2)誘導(dǎo)細(xì)跑融合時(shí)利用的病毒表面含有的糖蛋白和一些酶，能夠與細(xì)胞膜上的______（填化學(xué)本質(zhì)）發(fā)生作用，使得細(xì)胞互相凝聚，細(xì)胞膜上的______重新排布，細(xì)胞發(fā)生融合。篩選1利用______進(jìn)行篩選，而篩選2通過(guò)多次的_______來(lái)完成。

(3)得到大量丙肝病毒單克隆抗體的方法之一是將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)，接入培養(yǎng)液中雜交瘤細(xì)胞的量是單克隆抗體產(chǎn)量的重要影響因素之一，為探究一定培養(yǎng)液中接種雜交瘤細(xì)胞的最佳數(shù)量，實(shí)驗(yàn)思路為_(kāi)______。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共16分)25、2020年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予兩位女科學(xué)家?，敿~埃爾·卡彭蒂娜和詹妮弗·杜德娜以表彰她們對(duì)CRISPR基因編輯技術(shù)原理解析做出的貢獻(xiàn)。單細(xì)胞生物并沒(méi)有免疫系統(tǒng)；但是科學(xué)家發(fā)現(xiàn)細(xì)菌中存在清除入侵病毒DNA的功能系統(tǒng)，并發(fā)明了CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)。該系統(tǒng)主要包含單鏈向?qū)NA和Cas9蛋白兩個(gè)部分，能特異性識(shí)別并結(jié)合特定的DNA序列，從而引導(dǎo)Cas9蛋白到相應(yīng)位置并剪切DNA，最終實(shí)現(xiàn)對(duì)靶基因序列的編輯。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）圖1為CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用示意圖，該系統(tǒng)能精準(zhǔn)識(shí)別相關(guān)基因的原理是單鏈向?qū)NA與目標(biāo)DNA發(fā)生________，Cas9蛋白可催化________（化學(xué)鍵名稱）水解；剪切特定DNA片段。

（2）CRISPR/Cas9系統(tǒng)廣泛存在于原核生物中，細(xì)菌這種清除入侵病毒DNA的生理意義是________________________。

（3）真核生物中沒(méi)有編碼Cas9蛋白的基因，若要對(duì)真核生物的基因進(jìn)行編輯，要借助現(xiàn)代生物技術(shù)將CRISPR/Cas9基因?qū)胂嚓P(guān)細(xì)胞，此項(xiàng)技術(shù)的原理是____________。

（4）水稻不育系的選育是雜交水稻育種工作中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。為了獲得某水稻品種的不育系；研究人員對(duì)該水稻品種的TMS5基因進(jìn)行編輯，基因編輯過(guò)程如圖2。

①Cas9蛋白對(duì)TMS5基因剪切后（a），斷裂后的DNA分子會(huì)自動(dòng)進(jìn)行修復(fù)，修復(fù)過(guò)程中在b所示位點(diǎn)插入堿基A之后兩個(gè)片段在________酶作用下得到編輯成功的TMS5基因，此過(guò)程導(dǎo)致的變異屬于________。

②在編輯成功的TMS5基因上游連接啟動(dòng)子，可作為_(kāi)___________識(shí)別和結(jié)合的部位，后組裝形成基因表達(dá)載體。再通過(guò)農(nóng)桿菌侵染水稻愈傷組織，并整合到水稻細(xì)胞的________上，愈傷組織再經(jīng)過(guò)____________過(guò)程形成水稻幼苗。

③基因編輯中插入堿基A，會(huì)導(dǎo)致翻譯提前終止，使TMS5基因表達(dá)的蛋白質(zhì)不能產(chǎn)生，最終導(dǎo)致水稻花粉不育。用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測(cè)TMS5基因編輯是否成功，若________（填“出現(xiàn)”或“未出現(xiàn)”）雜交帶；則表明基因編輯成功。

（5）華人科學(xué)家張鋒是首個(gè)將CRISPR基因編輯技術(shù)應(yīng)用于哺乳動(dòng)物和人類細(xì)胞的科學(xué)家，為此項(xiàng)技術(shù)廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域做出了不可磨滅的貢獻(xiàn)。但是更多的學(xué)者提出了CRISRP/Cas9基因編輯技術(shù)有時(shí)存在編輯對(duì)象出錯(cuò)而造成“脫靶”，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)RNA的序列長(zhǎng)短影響成功率，越短脫靶率越________。試分析脫靶最可能的原因：____________。26、基因工程制藥是制藥行業(yè)常用的一種方法。下圖為利用轉(zhuǎn)基因工程菌生產(chǎn)干擾素的過(guò)程；請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）基因工程的操作步驟中，步驟②為_(kāi)___________，該步驟的目的是____________。

（2）圖中③過(guò)程常用Ca2+處理大腸桿菌，使大腸桿菌細(xì)胞成為_(kāi)___________。

（3）影印培養(yǎng)法是一種類似“蓋章”的接種方法，使一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落。為了篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞，在培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B中應(yīng)分別添加____________、____________（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）。根據(jù)圖中結(jié)果判斷，含有目的基因的是______（填培養(yǎng)基中的數(shù)字）號(hào)菌落中的細(xì)胞，判斷依據(jù)是____________。27、新型冠狀病毒（2019-nCoV；一種RNA病毒）的S蛋白和N蛋白都是誘發(fā)機(jī)體免疫反應(yīng)的主要抗原。病毒載體疫苗是研制新冠病毒疫苗的技術(shù)路線之一，下圖是生產(chǎn)重組腺病毒疫苗的流程?；卮鹣铝袉?wèn)題∶

（1）制備新冠病毒疫苗時(shí)，需將獲得的目的基因轉(zhuǎn)入轉(zhuǎn)移載體pShuttle質(zhì)粒，圖中的目的基因應(yīng)選用___________。不能直接從2019-nCoV的基因組中獲取目的基因，理由是__________。

（2）pAdEasy質(zhì)?？杀磉_(dá)出腺病毒，除了啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)外，其相關(guān)基因序列還包含_____________（答兩種），過(guò)程①需要的酶是________。

（3）若PacⅠ酶在過(guò)程②中使用，該酶所作用的化學(xué)鍵是____。線性pAd需要轉(zhuǎn)入特定細(xì)胞才能產(chǎn)生重組腺病毒，理由是_________________。據(jù)圖分析，與重組pAd相比，線性pAd對(duì)人體相對(duì)安全，理由是___________________。

（4）通常將重組腺病毒進(jìn)行_______，可使人獲得新冠病毒的免疫力。28、我國(guó)衛(wèi)生部門(mén)規(guī)定飲用水標(biāo)準(zhǔn)是1mL自來(lái)水中細(xì)菌總數(shù)不超過(guò)100個(gè)(37°C培養(yǎng)24h)；1000mL自來(lái)水中大腸桿菌菌落數(shù)不能超過(guò)3個(gè)(37°C培養(yǎng)48h)。水中大腸桿菌的含量常采用伊紅—亞甲基藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行檢測(cè)，生長(zhǎng)在此培養(yǎng)基上的大腸桿菌菌落呈深紫色且?guī)в薪饘俟鉂伞Ｄ承Ｉ锱d趣小組開(kāi)展校園桶裝純凈水微生物含量檢測(cè)活動(dòng)，請(qǐng)回答問(wèn)題:

(1)檢測(cè)飲用水中的細(xì)菌，需要配制牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基，牛肉膏和蛋白胨可以為細(xì)菌生長(zhǎng)提供_____(至少寫(xiě)出兩點(diǎn))等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。從物理狀態(tài)角度分析，此培養(yǎng)基屬于_____培養(yǎng)基。

(2)某同學(xué)分別向3個(gè)培養(yǎng)基中各加入1mL，未經(jīng)稀釋的待測(cè)水樣，涂布均勻后置于37°C的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，結(jié)果如圖1所示。檢測(cè)時(shí)使用的接種量為1mL而不是0，1mL，其理由是________。

(3)下圖2為用濾膜法測(cè)定飲用水中大腸桿菌數(shù)目的流程示意圖；請(qǐng)完成下表。

實(shí)驗(yàn)步驟的目的簡(jiǎn)要操作過(guò)程①_____將濾膜放入裝有蒸餾水的燒杯中，加熱煮沸15min，共煮沸三次過(guò)濾細(xì)菌裝置安裝好后，向漏斗內(nèi)加入1000mL水樣，加蓋抽濾。沖洗漏斗壁再向漏斗內(nèi)加等量②____繼續(xù)抽濾。③_____用無(wú)菌鑷子取濾膜，將其緊貼在伊紅一亞甲基藍(lán)瓊脂平板上，然后將平板④_____，37℃培養(yǎng)48小時(shí)統(tǒng)計(jì)大腸桿菌菌落數(shù)選?、輄____的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)結(jié)果為2個(gè)

(4)綜合(2)(3)測(cè)定結(jié)果，你認(rèn)為所測(cè)桶裝純凈水的微生物含量△(填能或不能)達(dá)到飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)，理由是________。(寫(xiě)出兩點(diǎn))參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、D【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)必需條件包括：無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，適宜的溫度和pH，O2等氣體環(huán)境。

【詳解】

分析可知，適宜的光照條件不屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的必需條件，故選D。2、C【分析】【分析】

1；胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞；來(lái)源于早期胚胎或原始性腺。

2；胚胎干細(xì)胞的特點(diǎn)：具有胚胎細(xì)胞的特性；體積較小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物任何一種組織細(xì)胞。另一方面，在體外培養(yǎng)條件下，ES細(xì)胞可不斷增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可以進(jìn)行某些遺傳改造。

3；胚胎干細(xì)胞的主要用途是：

①可用于研究哺乳動(dòng)物個(gè)體發(fā)生和發(fā)育規(guī)律；

②是在體外條件下研究細(xì)胞分化的理想材料。ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中；能夠維持不分化的狀態(tài)。在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，如牛黃酸；丁酰環(huán)腺苷酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí)，就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向分化，這為揭示細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡機(jī)理提供了有效的手段；

③可以用于治療人類的某些頑疾；如帕金森綜合癥；糖尿病、老年癡呆癥、肝衰竭、新衰竭、成骨不良；

④培育各種組織器官；用于器官移植，解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問(wèn)題。

【詳解】

A；細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果；A正確；

B；干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性；可以分化成成年動(dòng)物的各種組織、器官，故可利用干細(xì)胞治療某些頑疾，B正確；

C；同一個(gè)體的神經(jīng)細(xì)胞和干細(xì)胞均是由受精卵通過(guò)細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化形成的；遺傳物質(zhì)相同，C錯(cuò)誤；

D；干細(xì)胞包括成體干細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞；D正確。

故選C。3、A【分析】【分析】

基因工程的工具：

（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。

（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒；噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。

【詳解】

A；限制酶和DNA連接酶屬于工具酶；另外運(yùn)載體、目的基因和受體細(xì)胞是基因工程中的必需具備的條件，A正確；

B；重組DNA是由目的基因和質(zhì)粒重組形成的；RNA聚合酶是轉(zhuǎn)錄需要的酶，細(xì)胞中具有該種酶，因此不是基因工程必需的條件，B錯(cuò)誤；

C；信使RNA是基因轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物；基因工程中不需要提供該物質(zhì)，質(zhì)粒是運(yùn)載體中的一種，除了質(zhì)粒還有動(dòng)植物病毒和噬菌體衍生物，因此質(zhì)粒不是基因工程中必須的，C錯(cuò)誤；

D；目的基因、限制酶、運(yùn)載體、受體細(xì)胞是基因工程必需具備的條件；此外還需要DNA連接酶，D錯(cuò)誤。

故選A。

【點(diǎn)睛】4、B【分析】【分析】

1；標(biāo)記基因的作用：鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因；從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。

2；單倍體育種過(guò)程中包括兩個(gè)技術(shù)：花藥離體培養(yǎng)、秋水仙素處理單倍體幼苗。

3；胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體；有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體．用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查。

4；單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；基因工程育種時(shí)；需要通過(guò)標(biāo)記基因，篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞，A正確；

B、單倍體育種中，通過(guò)對(duì)F1的花藥離體培養(yǎng)獲得的單倍體；需要利用秋水仙素處理幼苗使染色體加倍后，才能篩選出符合要求的品種，B錯(cuò)誤；

C；胚胎移植前；需要對(duì)來(lái)自供體母牛子宮內(nèi)的胚胎進(jìn)行質(zhì)量篩查，一般選擇滋養(yǎng)層細(xì)胞檢測(cè)，因?yàn)閮?nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胎兒各組織，C正確；

D；單克隆抗體制備過(guò)程中；第一次篩選出雜交瘤細(xì)胞，第二次從分子水平篩選出產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】5、B【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程就是通過(guò)對(duì)蛋白質(zhì)化學(xué)；蛋白質(zhì)晶體學(xué)和蛋白質(zhì)動(dòng)力學(xué)的研究；獲得有關(guān)蛋白質(zhì)理化特性和分子特性的信息，在此基礎(chǔ)上對(duì)編碼蛋白質(zhì)的基因進(jìn)行有目的的設(shè)計(jì)和改造，通過(guò)基因工程技術(shù)獲得可以表達(dá)蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因生物系統(tǒng)，這個(gè)生物系統(tǒng)可以是轉(zhuǎn)基因微生物、轉(zhuǎn)基因植物、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，甚至可以是細(xì)胞系統(tǒng)。

【詳解】

A；蛋白質(zhì)工程和基因工程都要對(duì)基因進(jìn)行操作；其操作對(duì)象相同，A錯(cuò)誤；

B；對(duì)葡萄糖異構(gòu)酶的改造屬于蛋白質(zhì)工程；需要進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的設(shè)計(jì)，B正確；

C；蛋白質(zhì)工程要通過(guò)基因工程實(shí)施；需要酶和載體作為工具，C錯(cuò)誤；

D；蛋白質(zhì)工程通過(guò)基因修飾或基因合成；由于是對(duì)基因進(jìn)行的改造，遺傳物質(zhì)已經(jīng)改變，屬于可遺傳的變異，D錯(cuò)誤。

故選B。二、多選題(共5題，共10分)6、A:B:C【分析】【分析】

多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段：

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打開(kāi)DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開(kāi)始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過(guò)程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

2；PCR反應(yīng)過(guò)程是：變性→復(fù)性→延伸。

【詳解】

A；基因擴(kuò)增過(guò)程中需要特定的引物；該引物的作用是定位基因的位置，與模板鏈結(jié)合并為子鏈的延伸提供起點(diǎn)，擴(kuò)增過(guò)程中引物和探針應(yīng)同時(shí)結(jié)合到模板DNA上，A錯(cuò)誤；

B、若最初該反應(yīng)體系中只有逆轉(zhuǎn)錄而來(lái)的一個(gè)DNA分子，每個(gè)DNA分子需要1個(gè)探針，擴(kuò)增n次，可得到2n個(gè)DNA分子，則共需要消耗2n-1個(gè)探針；B錯(cuò)誤；

C；由題可知C值越大；該反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)到達(dá)設(shè)定閾值經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越大，即每次循環(huán)出現(xiàn)的熒光信號(hào)越少。每次循環(huán)出現(xiàn)的熒光信號(hào)越少，代表被檢測(cè)樣本中的病毒數(shù)目越少，C錯(cuò)誤；

D；如果樣本內(nèi)的病毒RNA被降解；會(huì)導(dǎo)致無(wú)法檢測(cè)出樣本內(nèi)的正確病毒數(shù)目，D正確。

故選ABC。7、A:C:D【分析】【分析】

哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞；是由早期胚胎或原始性腺中分離出來(lái)的一類細(xì)胞。ES細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上，表現(xiàn)為體積??；細(xì)胞核大、核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，即可以分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)條件下，ES可以增殖而不發(fā)生分化。ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上，或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中能夠維持不分化狀態(tài)。

【詳解】

A；試管羊、轉(zhuǎn)基因羊的繁殖方式都是有性生殖；克隆羊的繁殖方式屬于無(wú)性生殖，A錯(cuò)誤；

B；胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)可維持只增殖不分化狀態(tài)；B正確；

C；受精時(shí)防止多精入卵的兩屏障是透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)；C錯(cuò)誤；

D；囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞可用于性別鑒定；將來(lái)可以發(fā)育成胎膜和胎盤(pán)，D錯(cuò)誤。

故選ACD。8、A:C【分析】【分析】

當(dāng)胚胎細(xì)胞數(shù)目達(dá)到32個(gè)左右時(shí)；胚胎形成致密的細(xì)胞團(tuán)，形似桑椹，叫做桑椹胚；實(shí)驗(yàn)證實(shí)，這一階段前的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，屬于全能細(xì)胞，這些細(xì)胞都是由受精卵經(jīng)有絲分裂產(chǎn)生的。

【詳解】

A；桑椹胚前的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能；屬于全能細(xì)胞，A正確；

B；囊胚期細(xì)胞可分化內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層兩部分；不同部位的細(xì)胞致密化程度有差異，桑椹胚不同部位的細(xì)胞致密化程度相同，B錯(cuò)誤；

C；胚胎分割是指采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等；經(jīng)移植獲得同卵雙胚或多胚的技術(shù)，胚胎分割屬于無(wú)性繁殖或克隆的范疇，C正確；

D；胚胎移植一般選擇桑椹胚或囊胚期進(jìn)行；D錯(cuò)誤。

故選AC。9、A:B:C【分析】【分析】

1；胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞；來(lái)源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）。

2；ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中；能夠維持不分化的狀態(tài)．在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，如牛黃酸、丁酰環(huán)腺苷酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí)，就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化，這為揭示細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡機(jī)理提供了有效的手段。

【詳解】

A；為了獲得更多的囊胚；可以采用激素促進(jìn)成熟雌性個(gè)體超數(shù)排卵，然后將卵細(xì)胞從母體內(nèi)取出，在試管內(nèi)與人工采集的精子進(jìn)行體外受精，培育成胚胎，A錯(cuò)誤；

B、細(xì)胞a和細(xì)胞b是由同一個(gè)受精卵經(jīng)過(guò)有絲分裂形成的；故核基因相同，B錯(cuò)誤；

C；運(yùn)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以從哺乳動(dòng)物的早期胚胎中獲得胚胎干細(xì)胞；首先必須用胰蛋白酶處理內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，分解細(xì)胞間的膠原蛋白等，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，C錯(cuò)誤；

D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要在5%CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；以維持培養(yǎng)液的pH，D正確。

故選ABC。10、A:B:C【分析】【分析】

1；骨髓瘤細(xì)胞為無(wú)限增殖的細(xì)胞；分裂能力強(qiáng)，制備單克隆抗體的過(guò)程中還需該雜交細(xì)胞具備分泌特異性抗體的功能，而漿細(xì)胞為能夠分泌抗體的細(xì)胞，故與骨髓瘤細(xì)胞融合的B淋巴細(xì)胞為能分泌抗體的漿細(xì)胞。

2；骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞在融合的過(guò)程中可能會(huì)出現(xiàn)多種融合結(jié)果；如骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，B淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合，而實(shí)驗(yàn)需要的是骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的細(xì)胞，需要用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，但只能篩選出能雜交瘤細(xì)胞，而要篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞則需要進(jìn)行專一性抗體檢測(cè)。

【詳解】

A；與骨髓瘤細(xì)胞融合的B淋巴細(xì)胞取自脾臟；不一定是能分泌抗體的漿細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞在融合的過(guò)程中可能會(huì)出現(xiàn)多種融合結(jié)果；如骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，B淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合，而實(shí)驗(yàn)需要的是骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的細(xì)胞，需要用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，但是只能篩選出能雜交瘤細(xì)胞，而要篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞則需要進(jìn)行專一性抗體檢測(cè)，B錯(cuò)誤；

C；抗體為分泌蛋白；需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體對(duì)其進(jìn)行加工，大腸桿菌為原核生物，無(wú)高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，為獲得結(jié)構(gòu)正確的嵌合抗體，受體細(xì)胞不應(yīng)該選用大腸桿菌，C錯(cuò)誤；

D；結(jié)合題干“鼠源抗體具有外源性；會(huì)被人體免疫系統(tǒng)當(dāng)作抗原而清除。用人抗體的C區(qū)替換鼠源抗體的C區(qū)，保留鼠單抗的V區(qū)，可構(gòu)建人一鼠嵌合抗體”可知，該抗體不是原本的鼠源抗體，保留了其V區(qū)，但是其中還有一部分來(lái)自于人本身，使得人一鼠嵌合抗體在保留抗體特異性的同時(shí)外源性下降，D正確。

故選ABC。三、填空題(共9題，共18分)11、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因重組基因拼接技術(shù)DNA重組技術(shù)人們意愿某種基因修飾改造另一種生物細(xì)胞里定向12、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇13、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】磷酸二酯14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞標(biāo)記基因是否表達(dá)。15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】噬菌體、動(dòng)植物病毒16、略

【分析】【分析】

微生物實(shí)驗(yàn)中常用的滅菌方法有干熱滅菌；高壓蒸汽滅菌和灼燒滅菌；其中對(duì)于培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌，對(duì)于接種環(huán)一般用灼燒滅菌，對(duì)于培養(yǎng)皿等可以用干熱滅菌。培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中需要倒置培養(yǎng)，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法，即將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，在合適的溫度下培養(yǎng)，當(dāng)菌落長(zhǎng)成后將試管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6個(gè)月都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上；對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種可以采用甘油管藏法，在3mL的甘油瓶中裝入1mL甘油后滅菌，將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后放在-20℃的冷凍箱中保存。植物有效成分的提取方法主要有蒸餾法、壓榨法和萃取法，如玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，能隨水蒸氣一同蒸餾，常采用蒸餾法提??；對(duì)于如橘皮精油，其主要儲(chǔ)存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時(shí)會(huì)發(fā)生部分水解，又會(huì)產(chǎn)生原料焦糊問(wèn)題，所以一般采用壓榨法提取。

【詳解】

（1）微生物培養(yǎng)中常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌法；灼燒滅菌法、干熱滅菌法等。用平板培養(yǎng)沙門(mén)氏菌時(shí)一般需要將平板倒置；可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征，因此單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小和顏色等特征來(lái)初步區(qū)分不同種的微生物。

（2）從雞糞便取樣；經(jīng)選擇培養(yǎng)后，如果要將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基上，需要經(jīng)過(guò)一系列梯度稀釋。對(duì)獲得的沙門(mén)氏菌進(jìn)行長(zhǎng)期保存常采用甘油管藏法。

（3）根據(jù)題干信息；沙門(mén)氏菌的最適繁殖溫度為37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其對(duì)熱抵抗力不強(qiáng)，在60℃的條件下15min就能被殺死，因此為避免食用被沙門(mén)氏菌污染的食品而引發(fā)的食物中毒，家庭中可采取低溫儲(chǔ)存；高溫加工方法進(jìn)行處理。

（4）根據(jù)題意；肉桂精油不溶于水；易溶于有機(jī)溶劑且易揮發(fā)，故可采用水蒸氣蒸餾法進(jìn)行提取，提取過(guò)程中蒸餾的溫度、時(shí)間都會(huì)影響精油品質(zhì)。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查現(xiàn)代生物科技的原理和運(yùn)用，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力，能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，準(zhǔn)確判斷問(wèn)題的能力?！窘馕觥孔茻郎缇ā⒏邏赫羝麥缇?、干熱滅菌法倒置在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征梯度稀釋甘油管藏低溫儲(chǔ)存、高溫加工水蒸氣蒸餾蒸餾的溫度、時(shí)間17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】細(xì)胞膜流動(dòng)性植物細(xì)胞全能性纖維素酶果膠酶18、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步驟進(jìn)行。該蛋白質(zhì)的氨基酸序列已知，因此通過(guò)蛋白質(zhì)工程，生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥的基本過(guò)程為：根據(jù)已知的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥?！窘馕觥扛鶕?jù)已知的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥19、略

【分析】略【解析】目的基因標(biāo)記基因啟動(dòng)子終止子啟動(dòng)子上游RNA聚合酶終止子下游轉(zhuǎn)錄標(biāo)記四、判斷題(共2題，共18分)20、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)基因生物可能會(huì)破壞生態(tài)平衡，特別是對(duì)生物多樣性的影響。大自然經(jīng)過(guò)億萬(wàn)年的演化，各種生物相對(duì)處于一種和諧的生態(tài)平衡狀態(tài)。但是，如果我們用轉(zhuǎn)基因技術(shù)把某種生物人為地變得更加“強(qiáng)悍”，那其他物種就會(huì)衰敗以至滅絕，故本題正確。21、B【分析】【詳解】

動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性，不能體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的全能性，高度分化的動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到了限制，故錯(cuò)誤。五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共30分)22、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因??DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA??分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）利用RT—PCR技術(shù)即逆轉(zhuǎn)錄—多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)制備PG基因；由于多聚半乳糖醛酸酶（PG）可降解果膠使細(xì)胞壁破損，從而使果實(shí)變紅變軟，說(shuō)明PG基因在果肉中表達(dá)量較高，所以最好從番茄的果肉細(xì)胞中提取mRNA，此技術(shù)所需要的酶主要有逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶（或熱穩(wěn)定DNA聚合酶）；

（2）據(jù)圖可知；轉(zhuǎn)基因番茄PG基因與反向連接PG基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA1和mRNA2相結(jié)合形成雙鏈，從而抑制PG基因的翻譯過(guò)程，使PG合成量減少，從而延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期；

（3）分析表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程圖可知；目的基因插入到圖中農(nóng)桿菌的四環(huán)素抗性基因上，導(dǎo)致農(nóng)桿菌失去了四環(huán)素的抗性，所以圖中農(nóng)桿菌能夠在含卡那霉素的培養(yǎng)基中生存，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生存的即為已轉(zhuǎn)化的所需農(nóng)桿菌；

（4）圖中是利用農(nóng)桿菌將反向連接PC基因?qū)敕鸭?xì)胞的；此方法稱為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。不能用標(biāo)記的PG基因的單鏈作為探針進(jìn)行檢測(cè)番茄細(xì)胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，理由是番茄細(xì)胞內(nèi)原有的天然PG基因和插入的反向連接PG基因，均會(huì)與該探針形成雜交帶；

（5）將轉(zhuǎn)化的番茄細(xì)胞通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)形成番茄幼苗過(guò)程中；需要在培養(yǎng)基中添加有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，原因是該培養(yǎng)過(guò)程中植物細(xì)胞不能進(jìn)行光合作用（或光合作用很弱）。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖解，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟；識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過(guò)程及應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題?！窘馕觥抗饽孓D(zhuǎn)錄酶和Taq酶（或熱穩(wěn)定DNA聚合酶）翻譯卡那霉素四環(huán)素農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法不能番茄細(xì)胞內(nèi)原有的天然PG基因和插入的反向連接PG基因，均會(huì)與該探針形成雜交帶要該培養(yǎng)過(guò)程中植物細(xì)胞不能進(jìn)行光合作用（或光合作用很弱）23、略

【分析】【分析】

1、微生物常見(jiàn)的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

2、實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法

①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速?gòu)氐椎販缇?，此外，在接種過(guò)程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過(guò)火焰燃燒來(lái)滅菌；

②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；

③高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)；為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30min。

(1)

取附著在手機(jī)上細(xì)菌進(jìn)行取樣培養(yǎng)后；對(duì)菌液進(jìn)行系列梯度稀釋的目的是將微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，進(jìn)而獲得單個(gè)的菌落。

(2)

A平板上生長(zhǎng)的菌落有多種形態(tài)；說(shuō)明附著在手機(jī)細(xì)菌種類較多。牛肉膏；蛋白胨提供的主要營(yíng)養(yǎng)是氮源、維生素和生長(zhǎng)因子。培養(yǎng)基乙含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽這幾類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，且加入了瓊脂作為凝固劑，可以達(dá)到實(shí)驗(yàn)效果；培養(yǎng)基甲不含蛋白胨（氮源），菌落無(wú)法在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)；培養(yǎng)基丙不含凝固劑（瓊脂），無(wú)法形成固體培養(yǎng)基，無(wú)法在培養(yǎng)基表面形成菌落。檢測(cè)培養(yǎng)基A制備是否合格，可將培養(yǎng)基置于適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，檢測(cè)其是否雜菌生成。

(3)

伊紅為酸性染料；美藍(lán)為堿性染料。當(dāng)大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸時(shí)細(xì)菌帶正電荷被染成紅色，再與美藍(lán)結(jié)合形成紫黑色菌落，并帶有綠色金屬光澤。由圖可知3號(hào)菌落為大腸桿菌菌落。

(4)

采用平板劃線法接種培養(yǎng)一段時(shí)間后；發(fā)現(xiàn)第一劃線區(qū)域上都不間斷長(zhǎng)滿菌落，第二劃線區(qū)域幾乎無(wú)菌落，原因可能是接種環(huán)灼燒后未冷卻就劃線或未從第一區(qū)域末端開(kāi)始劃線。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記微生物接種的方法、菌落計(jì)數(shù)、以及菌種保存等知識(shí)，意在考查考生對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)的掌握和靈活運(yùn)用基礎(chǔ)知識(shí)的能力。【解析】(1)將微生物分散成單個(gè)細(xì)胞；進(jìn)而獲得單個(gè)的菌落。

(2)多乙培養(yǎng)基乙含有碳源；氮源、水、無(wú)機(jī)鹽這幾類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；且加入了瓊脂作為凝固劑，可以達(dá)到實(shí)驗(yàn)效果將培養(yǎng)基置于適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，檢測(cè)其是否雜菌生成。

(3)3

(4)第一次劃線后接種環(huán)灼燒后沒(méi)有冷卻；未從第一次劃線區(qū)開(kāi)始劃線24、略

【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過(guò)程：（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

【詳解】

（1）用丙肝病毒對(duì)小鼠進(jìn)行免疫后；小鼠的B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗丙肝病毒的抗體，從該小鼠的脾細(xì)胞中能獲得產(chǎn)生該抗體的B淋巴細(xì)胞。B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下不能無(wú)限增殖，而骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖，故融合之前的兩種細(xì)胞中，能通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)大量增加數(shù)量的是骨髓瘤細(xì)胞。

（2）誘導(dǎo)細(xì)胞融合的病毒表面含有的糖蛋白和一些酶；能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使得細(xì)胞互相凝聚，細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性，在滅活病毒的誘導(dǎo)下，其上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜會(huì)發(fā)生融合。細(xì)胞融合后產(chǎn)生的融合細(xì)胞有B細(xì)胞間的融合；骨髓瘤細(xì)胞間的融合及B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合，會(huì)產(chǎn)生三類細(xì)胞。篩選1是指利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選得到雜交瘤細(xì)胞。由于雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體除了抗丙肝病毒的抗體外，還可能有其他類型，故篩選2是指進(jìn)行多次的克隆化培養(yǎng)和專一性抗體檢測(cè)，以得到能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。

（3）實(shí)驗(yàn)的自變量是培養(yǎng)液中接種雜交瘤細(xì)胞的數(shù)量，因變量為一定時(shí)間內(nèi)抗丙肝病毒抗體的數(shù)量，除自變量外，其他條件要相同且適宜。所以實(shí)驗(yàn)思路為：將適宜的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液分為體積相同的幾組（可自設(shè)組數(shù)）。在不同組別中接種不同量的能產(chǎn)生丙肝病毒的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，一定時(shí)間后測(cè)定培養(yǎng)液中的抗體含量?！窘馕觥?1)給小鼠注射丙肝病毒使小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)骨髓瘤細(xì)胞。

(2)糖蛋白蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子選擇培養(yǎng)基克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。

(3)將適宜的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液分為體積相同的幾組（可自設(shè)組數(shù)）。在不同組別中接種不同量的能產(chǎn)生丙肝病毒的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，一定時(shí)間后測(cè)定培養(yǎng)液中的抗體含量六、綜合題(共4題，共16分)25、略

【分析】【分析】

1；如圖：?jiǎn)捂溝驅(qū)NA與目標(biāo)DNA發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)。Cas9蛋白是基因的剪刀；相當(dāng)于限制酶，催化磷酸二酯鍵水解。

2；基因工程的原理是基因重組。

3；基因突變指的是堿基對(duì)的增添、缺失、替換而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。

4；目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

5；啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位。

【詳解】

（1）圖1為CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用示意圖；該系統(tǒng)能精準(zhǔn)識(shí)別相關(guān)基因的原理是單鏈向?qū)NA與目標(biāo)DNA發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)，Cas9蛋白可催化磷酸二酯鍵水解。

（2）細(xì)菌這種清除入侵病毒DNA的生理意義是防止外源基因插入并表達(dá)；保證了細(xì)菌遺傳性狀的穩(wěn)定。

（3）要借助現(xiàn)代生物技術(shù)將CRISPR/Cas9基因?qū)胂嚓P(guān)細(xì)胞；屬于基因工程，基因工程的原理是基因重組。

（4）①把兩個(gè)DNA片段進(jìn)行連接的酶是DNA連接酶；由于插入了堿基A，生物發(fā)生的變異屬于基因突變。②基因上游的啟動(dòng)子作用是：RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位?；虮磉_(dá)載體通過(guò)農(nóng)桿菌侵染水稻愈傷組織，并整合到水稻細(xì)胞的染色體DNA上，愈傷組織再經(jīng)過(guò)再分化過(guò)程形成水稻幼苗。③由于使TMS5基因表達(dá)的蛋白質(zhì)不能產(chǎn)生，用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測(cè)TMS5基因編輯是否成功，若未出現(xiàn)雜交帶，則表明基因編輯成功。

（5）RNA的序列越短與其它DNA配對(duì)的幾率越高；所以越短脫靶率越高，即其他DNA序列也含有與向?qū)NA互補(bǔ)配對(duì)的序列，造成向?qū)NA錯(cuò)誤結(jié)合而脫靶。

【點(diǎn)睛】

本題主要是基因工程，屬于考察理解識(shí)記的基礎(chǔ)上綜合分析得出結(jié)論的能力?！窘馕觥繅A基互補(bǔ)配對(duì)磷酸二酯鍵防止外源基因插入并表達(dá)，保證了細(xì)菌遺傳性狀的穩(wěn)定基因重組①DNA連接酶基因突變②RNA聚合酶染色體DNA再分化③未出現(xiàn)高其他DNA序列也含有與向?qū)NA互補(bǔ)配對(duì)的序列，造成向?qū)NA錯(cuò)誤結(jié)合而脫靶26、略

【分析】【分析】

基因工程的基本操作程序。

1；目的基因的獲?。涸嘶虿扇≈苯臃蛛x獲得；真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法及PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。

2；基因表達(dá)載體的構(gòu)建組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因。

3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是顯微注射技術(shù)．此方法的受體細(xì)胞多是受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：其轉(zhuǎn)化方法是：先用Ca2+處理細(xì)胞；使其成為感受態(tài)細(xì)胞，再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過(guò)程。

4；目的基因的檢測(cè)和表達(dá)：（1）首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因；方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。（2）其次還要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交。（3）最后檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交。（4）有時(shí)還需進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定．如轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植物是否出現(xiàn)抗蟲(chóng)性狀。

【詳解】

（1）步驟②為基因表達(dá)載體的構(gòu)建；為基因工程的核心步驟，構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因表達(dá)和發(fā)揮作用。

（2）用大腸桿菌作為受體細(xì)胞時(shí)，常用Ca2+處理大腸桿菌使其成為易于吸收DNA的感受態(tài)細(xì)胞。

（3）將目的基因插入質(zhì)粒構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)；會(huì)破會(huì)四環(huán)素抗性基因，但不會(huì)破壞氨芐青霉素抗性基因，因此導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生存，但不能在含有四環(huán)素培養(yǎng)基上生存，所以培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還含有氨芐