醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)

《醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)》主要內(nèi)容1、醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)：醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)是分子生物學(xué)的一個重要分支，是從分子水平研究人體在正常和疾病狀態(tài)下生命活動及其規(guī)律的一門科學(xué)。2、基因的概念、功能基因：是貯存遺傳信息的核酸（DNA或RNA）片段，包括編碼RNA和蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因以及轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列兩部分。基因的功能：1、利用4種堿基的不同排列荷載遺傳信息；2、通過復(fù)制將所有的遺傳信息穩(wěn)定、忠實(shí)地遺傳個子代細(xì)胞；3、作為基因表達(dá)的模版。3、DNA、RNA的結(jié)構(gòu)和功能功能：DNA:DNA的基本功能是以基因的形式荷載遺傳信息，并作為基因復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的模板。它是生命遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)，也是個體生命活動的信息基礎(chǔ)。RNA:1、mRNA：攜帶蛋白質(zhì)的序列信息，在翻譯過程作為模板指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成2、tRNA:在蛋白質(zhì)生物合成時(shí)運(yùn)輸氨基酸3、核蛋白體：介導(dǎo)rRNA與mRNA的結(jié)合rRNA與核蛋白體蛋白的結(jié)合rRNA與tRNA的相互識別和相互作用4、小分子RNA：參與mRNA的剪接、加工U3與rRNA加工有關(guān)4、不同生物基因的基本結(jié)構(gòu)特點(diǎn)原核生物：5’-啟動子-結(jié)構(gòu)基因-轉(zhuǎn)錄終止子-3’真核生物：由1個結(jié)構(gòu)基因+轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列組成，mRNA多是單順反子，rRNA基因結(jié)構(gòu)是多順反子病毒：與真核基因相比很小，一般沒有內(nèi)含子，調(diào)控序列較少，有不規(guī)則基因5、原核、真核生物基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列有哪些（1）原核生物：啟動子、終止子、操縱原件、正調(diào)控蛋白結(jié)合位點(diǎn)；①啟動子：提供轉(zhuǎn)錄起始信號，其本身不出現(xiàn)于RNA產(chǎn)物中。其中有著“TATAAT”的共有特征序列，稱為普里布諾盒。②終止子：提供RNA合成終止信號。其含有GC富集區(qū)組成的回文特征序列。③操縱元件：被阻遏蛋白識別與結(jié)合。與啟動子通常有部分重疊。④正調(diào)控蛋白結(jié)合位點(diǎn)：加強(qiáng)下游結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄。（2）真核生物：啟動子、上游啟動子元件、增強(qiáng)子、加尾信號和一些反應(yīng)元件等。①啟動子：提供轉(zhuǎn)錄起始信號，啟動子本身通常不被轉(zhuǎn)錄，除了編碼tRNA基因的啟動子。分為三類：I類啟動子富含GC堿基對，編碼rRNA的基因，除了5SrRNA。II類啟動子具有TATA盒特征結(jié)構(gòu),編碼蛋白質(zhì)（mRNA）的基因和一些小RNA基因。III類啟動子包括A盒、B盒、C盒，編碼5SrRNA、tRNA、U6snRNA。②增強(qiáng)子：順式作用元件，增強(qiáng)鄰近基因的轉(zhuǎn)錄。③沉默子：負(fù)性調(diào)控元件，可抑制基因轉(zhuǎn)錄的特定序列。6、操縱子、啟動子、增強(qiáng)子、斷裂基因、內(nèi)含子和外顯子的概念操縱子：功能上相關(guān)聯(lián)的數(shù)個結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起，由一套轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列控制其轉(zhuǎn)錄，構(gòu)成的基因表達(dá)單位。啟動子：指結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)附近的一段DNA序列，它結(jié)合RNA聚合酶（真核生物還需要結(jié)合其他蛋白質(zhì)因子）后能夠開放基因轉(zhuǎn)錄。增強(qiáng)子：是可以增強(qiáng)真核生物基因啟動子的工作效率的順式作用元件。斷裂基因：真核生物的結(jié)構(gòu)基因中，編碼區(qū)與非編碼區(qū)間隔排列。內(nèi)含子：指在真核生物的斷裂基因及其初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中出現(xiàn)，但在成熟RNA中被剪接除去的核酸序列。外顯子：指在真核生物的斷裂基因及其成熟RNA中都存在的核酸序列。7、基因組的定義和功能定義：細(xì)胞或生物體中，一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)的總和。功能：儲存和表達(dá)遺傳信息8、真核生物基因組的特點(diǎn)真核生物的基因組龐大，出了結(jié)構(gòu)基因的結(jié)構(gòu)與原核生物大不相同以外，還存在大量的非結(jié)構(gòu)基因區(qū)域。真核細(xì)胞基因組具有結(jié)構(gòu)基因呈斷裂基因形式、以單順反子轉(zhuǎn)錄、結(jié)構(gòu)基因在基因組中所占比例小于非編碼區(qū)域的特點(diǎn)。真核細(xì)胞基因組存在大量重復(fù)序列，可以分為高度重復(fù)序列、中毒重復(fù)序列和單拷貝或低度重復(fù)序列等3種。真核基因組的另一特點(diǎn)是存在多基因家族。9、原核生物基因組的特點(diǎn)原核生物的基因組主要是染色體DNA。特點(diǎn)：1、基因組中很少有重復(fù)序列；2、編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因多為單拷貝基因，但編碼rRNA的基因仍然是多拷貝基因；3、結(jié)構(gòu)基因在基因組中所占的比例遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于真核基因組，但小于病毒基因組；4、許多結(jié)構(gòu)基因在基因組中以操縱子為單位排列。10、質(zhì)粒、基因重疊、基因組、假基因、核酶質(zhì)粒：細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的、染色體外的DNA分子，是共價(jià)閉合的環(huán)狀DNA分子，能夠獨(dú)立于細(xì)胞的染色質(zhì)DNA而進(jìn)行復(fù)制?；蛑丿B：同一DNA片段可以是2種甚至3種蛋白質(zhì)分子的部分編碼區(qū)?；蚪M：細(xì)胞或生物體中，一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)的總和。假基因：與有功能的基因同源，但不能產(chǎn)生有功能的基因產(chǎn)物的基因。核酶：指具有催化活性的RNA，其作用底物是RNA，主要參與RNA的加工成熟。11、DNA復(fù)制過程的共同特點(diǎn)1、半保留復(fù)制方式保證了遺傳信息的忠實(shí)傳遞；2、基因組DNA都有固定的復(fù)制起始點(diǎn)；3、復(fù)制子是基本復(fù)制單位；4、雙向復(fù)制形成復(fù)制泡和復(fù)制叉；5、半不連續(xù)復(fù)制方式克服了DNA空間結(jié)構(gòu)對DNA新鏈合成的制約。12、DNA復(fù)制保真性的機(jī)制1、DNA聚合酶對堿基配對的選擇作用，保證嚴(yán)格的堿基配對規(guī)律；2、DNA聚合酶對模板的識別作用；3、DNA聚合酶3’→513、真核生物DNA復(fù)制的基本過程1、DNA復(fù)制的起始；2、DNA鏈的延伸。DNA鏈的延伸主要由DNA聚合酶完成。DNA聚合酶催化的反應(yīng)是以親代DNA為模板、4種脫氧核糖核苷三磷酸，即dATP、dGTP、dCTP、dTTP為原料底物，一句堿基配對原則，在RNA引物鏈的3’14、端粒、端粒酶端粒：是位于真核生物染色體末端的、由DNA和蛋白質(zhì)組成的一膨出結(jié)構(gòu)。端粒DNA由短的高度重復(fù)序列組成，不同生物的重復(fù)序列不同。端粒酶：是反轉(zhuǎn)錄酶，由蛋白質(zhì)和RNA共同組成能以自身的RNA為模板反復(fù)延伸端粒的重復(fù)序列。15、DNA損傷的因素、類型DNA損傷的因素包括：電離輻射、紫外線、堿基類似物、堿基修飾劑、某些化學(xué)染料和自由基。DNA損傷的類型有堿基和糖基破壞、錯配、DNA鏈斷裂、DNA交聯(lián)等。16、DNA損傷的修復(fù)方式DNA損傷的修復(fù)方式：直接修復(fù)、切除修復(fù)、重組修復(fù)和損傷跨越。17、切除修復(fù)、重組修復(fù)切除修復(fù)：在多種酶作用下，先將損傷區(qū)域切除，然后利用互補(bǔ)鏈為模板，合成一段正確配對的堿基順序來修補(bǔ)。重組修復(fù)：重組酶系將未受損傷的DNA片段移到損傷部位，提供正確的模板，進(jìn)行修復(fù)。18、基因表達(dá)的概念基因表達(dá)：指基因轉(zhuǎn)錄及翻譯的過程，基因表達(dá)的最終產(chǎn)物是蛋白質(zhì)或者rRNA、tRNA等。管家基因是組成性表達(dá)，而可調(diào)節(jié)基因的表達(dá)具有時(shí)空特異性。19、何為轉(zhuǎn)錄？轉(zhuǎn)錄的體系？復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的區(qū)別有哪些？轉(zhuǎn)錄：以DNA為模板合成RNA的過程稱為轉(zhuǎn)錄。轉(zhuǎn)錄體系：1、模板：DNA；2、原料：ATP、GTP、CTP、UTP；3、RNA聚合酶：原核細(xì)胞：全酶α2ββ'σ；真核細(xì)胞：RNA聚合酶I、II、III復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的不同點(diǎn)：1)復(fù)制的模板是DNA雙鏈（半保留復(fù)制），轉(zhuǎn)錄的模板是DNA單鏈（不對稱轉(zhuǎn)錄）。2）復(fù)制的原料是dNTP，轉(zhuǎn)錄的原料是NTP。3)復(fù)制的主要酶類是DNA聚合酶，轉(zhuǎn)錄酶是RNA聚合酶。4)復(fù)制需要RNA引物（由引物酶合成），轉(zhuǎn)錄不需要引物。5)復(fù)制的產(chǎn)物是雙鏈DNA，轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物是單鏈RNA。6）復(fù)制的功能是傳遞遺傳信息給子代，轉(zhuǎn)錄是表達(dá)遺傳信息所需步驟。20、原核、真核生物RNA轉(zhuǎn)錄的基本過程轉(zhuǎn)錄起始：轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合體在啟動子部位形成（形成開放轉(zhuǎn)錄復(fù)合體）①原核生物：RNA聚合酶與啟動子相互作用。②真核生物:RNA聚合酶、反式作用因子與順式作用元件相互作用。轉(zhuǎn)錄延長：RNA鏈隨著轉(zhuǎn)錄泡的移動得以延長①原核生物：核心酶催化(α2β'βω)②真核生物：磷酸化的RNA聚合酶催化，核小體解聚。轉(zhuǎn)錄終止：轉(zhuǎn)錄終止受DNA模板上終止信號的控制①原核生物：a.依賴ρ因子：ρ因子與RNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物結(jié)合，結(jié)合后ρ因子和RNA聚合酶發(fā)生構(gòu)象變化，使RNA聚合酶停頓，轉(zhuǎn)錄停止。b.非依賴ρ因子：DNA模板上靠近終止處有些特殊堿基序列，轉(zhuǎn)錄出RNA后，RNA產(chǎn)物形成特殊的莖環(huán)結(jié)構(gòu)來終止轉(zhuǎn)錄。②真核生物：轉(zhuǎn)錄終止的修飾點(diǎn)處切離并加尾。21、蛋白質(zhì)合成體系蛋白質(zhì)合成體系：1、模板：mRNA；2、氨基酸運(yùn)輸：tRNA;3、肽鏈合成場所：核糖體；4、蛋白質(zhì)因子：起始、延長、終止因子；5、原料：20種有遺傳密碼的氨基酸22、原核、真核生物翻譯的基本過程：1、起始：形成翻譯起始復(fù)合物；2延長：只每加一個氨基酸經(jīng)過進(jìn)位、成肽和轉(zhuǎn)位；3、終止：原核細(xì)胞：RF1，RF2識別終止密碼，RF3激活轉(zhuǎn)肽酶釋放肽鏈；真核細(xì)胞：eRF同時(shí)具有上述功能。23、基因表達(dá)調(diào)控的基本規(guī)律（包括基因表達(dá)的特點(diǎn)、方式等）1、基因表達(dá)具有時(shí)空特異性；2、誘導(dǎo)表達(dá)和阻遏表達(dá)時(shí)基因表達(dá)調(diào)控的最普遍方式；3、基因表達(dá)受順式作用元件和反式作用元件因子共同調(diào)節(jié)；4、蛋白質(zhì)-DNA以及蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)的相互作用是基因表達(dá)調(diào)控的分子基礎(chǔ)；5、基因表達(dá)調(diào)控是多層次的復(fù)雜調(diào)節(jié)。24、RNA編輯、核蛋白體循環(huán)、分子伴侶RNA編輯：指細(xì)胞核中初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物hnRNA的序列改變，使C變?yōu)閁或者A變?yōu)镚，結(jié)果一個基因表達(dá)產(chǎn)生不止一種蛋白質(zhì)，增加了遺傳信息容量。核蛋白體循環(huán)：是指氨基酸活化后，在核蛋白體上縮合形成多肽鏈的過程，該過程包括肽鏈合成的起始，肽鏈的延長，肽鏈合成的終止和釋放。分子伴侶：幫助新生多肽鏈折疊成天然空間構(gòu)象的一類保守蛋白質(zhì)（如熱休克蛋白），在原核細(xì)胞和真核細(xì)胞中廣泛存在。25、乳糖操縱子作用機(jī)制(1)乳糖操縱子包含3個結(jié)構(gòu)基因（編碼β－半乳糖苷酶、β－半乳糖苷通透酶和轉(zhuǎn)乙?；福?個調(diào)控元件（啟動子、操縱基因和CAP結(jié)合位點(diǎn)）和1個調(diào)節(jié)基因（編碼阻遏蛋白）。(2)阻遏蛋白的負(fù)調(diào)控：無乳糖時(shí)，阻遏蛋白結(jié)合操縱基因，妨礙RNA聚合酶結(jié)合啟動子，抑制結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄。有乳糖時(shí)，生成別位乳糖（誘導(dǎo)劑）結(jié)合阻遏蛋白，不能封閉操縱基因，結(jié)構(gòu)基因可以轉(zhuǎn)錄。(3)cAMP-CAP復(fù)合物的正調(diào)控：無葡萄糖時(shí)，cAMP濃度高，形成的cAMP-CAP復(fù)合物結(jié)合于CAP結(jié)合位點(diǎn)，增強(qiáng)啟動子轉(zhuǎn)錄活性。有葡萄糖時(shí)，cAMP濃度低，cAMP-CAP復(fù)合物形成受阻，影響轉(zhuǎn)錄活性。(4)正、負(fù)調(diào)控機(jī)制相輔相成。cAMP-CAP復(fù)合物是轉(zhuǎn)錄必需的，同時(shí)阻遏蛋白進(jìn)一步控制轉(zhuǎn)錄啟動。綜上，乳糖操縱子最強(qiáng)的表達(dá)條件是有乳糖而無葡萄糖。26、試述原核生物和真核生物基因表達(dá)調(diào)控特點(diǎn)的異同(1)相同點(diǎn)轉(zhuǎn)錄起始是基因表達(dá)調(diào)控的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。(2)不同點(diǎn)1)原核基因表達(dá)調(diào)控主要包括轉(zhuǎn)錄和翻譯水平；真核基因表達(dá)調(diào)控包括染色質(zhì)活化、轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后加工、翻譯、翻譯后加工多個層次。2)原核基因表達(dá)調(diào)控主要為負(fù)調(diào)節(jié)；真核基因表達(dá)調(diào)控主要為正調(diào)節(jié)。3)原核轉(zhuǎn)錄起始不需要轉(zhuǎn)錄因子，RNA聚合酶直接結(jié)合啟動子，由σ因子決定基因表達(dá)的特異性；真核轉(zhuǎn)錄起始需要基礎(chǔ)、特異兩類轉(zhuǎn)錄因子，依賴DNA－蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)相互作用，調(diào)控轉(zhuǎn)錄激活。4)原核基因表達(dá)調(diào)控主要采用操縱子模型，轉(zhuǎn)錄出多順反子RNA，實(shí)現(xiàn)協(xié)調(diào)調(diào)節(jié)；真核基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子RNA，功能相關(guān)蛋白質(zhì)的協(xié)調(diào)表達(dá)機(jī)制更為復(fù)雜。27、細(xì)胞通訊、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的概念細(xì)胞通訊：生物體內(nèi)各種細(xì)胞在功能上的協(xié)調(diào)統(tǒng)一是通過細(xì)胞間相互識別和相互作用的機(jī)制來實(shí)現(xiàn)的，這種機(jī)制稱為細(xì)胞通訊。信號轉(zhuǎn)導(dǎo)：是通過多種分子相互作用的一系列有序反應(yīng)、將來自細(xì)胞外的信息傳遞到細(xì)胞內(nèi)各種效應(yīng)分子的過程。28、化學(xué)信號分子的分類化學(xué)信號分子可根據(jù)物理性質(zhì)分為脂溶性化學(xué)信號和水溶性化學(xué)信號兩大類。從其作用距離考慮則可分為激素、神經(jīng)遞質(zhì)和屬于旁分泌系統(tǒng)的細(xì)胞因子、生長因子等三大類。29、受體的概念、分類、作用和特點(diǎn)（1）概念：受體位于細(xì)胞膜或細(xì)胞內(nèi)，能特異識別生物活性分子，可與之相互結(jié)合，進(jìn)而引起生物學(xué)效應(yīng)的蛋白質(zhì)，以及個別糖脂。（2）分類：膜受體和胞內(nèi)受體1)膜受體分類：①離子通道型受體與此類受體結(jié)合的主要是神經(jīng)遞質(zhì)，介導(dǎo)離子通道的打開和關(guān)閉，改變膜通透性，能迅速、準(zhǔn)確地傳遞神經(jīng)沖動，作用時(shí)間很短。②G蛋白偶聯(lián)受體又名七次跨膜受體，胞漿面的第三個環(huán)能與鳥苷酸結(jié)合蛋白偶聯(lián)，通過不同的G蛋白影響腺苷酸環(huán)化酶或磷脂酶C改變細(xì)胞內(nèi)第二信使?jié)舛?，以?shí)現(xiàn)跨膜信號傳遞。③單次α螺旋跨膜受體結(jié)構(gòu)上具有一個跨膜α螺旋，包括受體型酪氨酸蛋白激酶和非酪氨酸蛋白激酶型受體。2)胞內(nèi)受體：多為反式作用因子，當(dāng)其與相應(yīng)配體（例如類固醇激素、甲狀腺素等），能與DNA的順式作用元件結(jié)合，調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄。（3）受體作用的特點(diǎn)：高度專一性、高度親和力、可飽和性、可逆性、特定的作用模式。30、何為生物體內(nèi)第二信使？主要包括哪些？第二信使：配體與受體結(jié)合后，靶細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)膜外激素信號的某些小分子化合物，在信息傳遞過程中產(chǎn)生放大的作用，稱為第二信使。主要包括：環(huán)腺苷酸（cAMP）、環(huán)鳥甘酸（cGMP）、甘油二酯（DAG）、三磷酸肌醇（IP3）、Ca2+。31、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子下游傳遞信號的方式（一）通過改變小分子的濃度和細(xì)胞內(nèi)定而傳遞信號1、酶促反應(yīng)生成小分子信使2、調(diào)控離子通道可改變小分子的濃度或細(xì)胞內(nèi)的定位分布（二）上游分子通過邊溝激活下游分子而傳遞信號1、配體結(jié)合并激活受體2、酶分子通過共價(jià)修飾變構(gòu)激活下游轉(zhuǎn)導(dǎo)分子3、小分子信使結(jié)合并激活下游分子4、上游蛋白質(zhì)結(jié)合激活下游蛋白質(zhì)分子32、列舉膜受體介導(dǎo)的細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑1)cAMP-PKA途徑。2)Ca2+-依賴性蛋白激酶途徑Ca2+-磷脂依賴性蛋白激酶途徑和Ca2+/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶途徑（Ca2+-CaM激酶途徑）。3)cGMP-PKG途徑。4)酪氨酸蛋白激酶途徑受體型TPK-Ras-MAPK途徑和JAKs-STAT途徑。5)核因子κB途徑6)TGF-β/Smad途徑33、核酸分子雜交在DNA變性后的復(fù)性過程中，如果將不同種類的DNA單鏈分子或RNA分子放在同一溶液中，只要兩種單鏈分子之間存在著一定程度的堿基配對關(guān)系，在適宜的條件下，就可以在不同的分子間形成雜化雙鏈。這種雜化雙鏈可以再不同的DNA與DNA之間形成，也可以在DNA和RNA分子間或者RNA與RNA分子間形成，這種現(xiàn)象稱為核酸分子雜交。34、重組DNA技術(shù)的基本原理35、目的基因獲取的方法聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）、反轉(zhuǎn)錄-PCR（RT-PCR）、文庫篩選和人工合成等36、基因載體的概念，常用載體有哪些，載體選擇標(biāo)準(zhǔn)載體是指能夠攜帶目的基因在宿主細(xì)胞內(nèi)擴(kuò)增或表達(dá)的DNA分子。常用的載體包括：質(zhì)粒載體、病毒載體和人工染色體載體載體選擇應(yīng)具備的條件：(1)有復(fù)制子。(2)有單一限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)。(3)有篩選標(biāo)志。(4)表達(dá)型載體具備完整的轉(zhuǎn)錄單位。37、基因克隆的基本步驟基因克隆的基本步驟是：1、用限制性內(nèi)切酶笑話目的基因和載體DNA，使其具備能連接的末端序列特征；2、用DNA連接酶將目的基因和載體DNA連接起來構(gòu)成重組DNA分子；3、將連接起產(chǎn)物導(dǎo)入合適的宿主細(xì)胞，使重組DNA分子得以復(fù)制擴(kuò)增；4、篩選及克隆化，從而獲得重組克隆載體及克隆的基因。38、cDNA文庫、基因組文庫cDNA文庫：指含有某種組織細(xì)胞全部mRNA信息的重組DNA克隆群體。以細(xì)胞總mRNA為模板，利用逆轉(zhuǎn)錄酶合成與mRNA互補(bǔ)的cDNA第一鏈，進(jìn)而形成cDNA雙鏈，與合適載體連接后轉(zhuǎn)入受體菌擴(kuò)增，由此建立cDNA文庫。基因組文庫：指含有某種生物體全部基因片段的重組DNA克隆群體。即將原核或真核細(xì)胞染色體DNA提純，用機(jī)械法或限制性內(nèi)切酶將染色體DNA切割成大小不等的片段，插入適當(dāng)?shù)目寺≥d體中，繼而轉(zhuǎn)入受體菌擴(kuò)增，由此獲得含有眾多克隆的基因組DNA文庫。39、PCR、RT-PCR、Southern印跡、Northern印跡、RNA干擾PCR：是根據(jù)DNA半保留復(fù)制和DNA聚合酶的特性建立起來的體外復(fù)制擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。RT-PCR：以mRNA為模板，先進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA,再進(jìn)行的PCR反應(yīng)。Sou