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PAGEPAGE10單元質(zhì)檢卷十生物技術(shù)實(shí)踐(時(shí)間:60分鐘滿(mǎn)分:100分)1.(15分)(2024河南洛陽(yáng)統(tǒng)考)在白酒發(fā)酵的窖池中,培育液的pH≤4.5后,酵母菌的代謝活動(dòng)漸漸受到抑制,甚至停止發(fā)酵。耐酸性酵母菌能在pH≤3.5的環(huán)境下接著表現(xiàn)出較強(qiáng)發(fā)酵實(shí)力,相宜作為白酒發(fā)酵的菌種。為選育適合生產(chǎn)白酒的耐酸性強(qiáng)的酵母菌,探討者進(jìn)行如下試驗(yàn)。請(qǐng)分析下列問(wèn)題。(1)在釀酒過(guò)程中,隨著氧氣的消耗,酵母菌將從有氧呼吸轉(zhuǎn)化為無(wú)氧呼吸,其緣由是
。
(2)取適量窖底泥,溶于10mL無(wú)菌水中,再取1mL上清液接入10mL麥芽汁培育基中培育,2天后分別接種到不同酸堿度的麥芽汁培育基中,培育結(jié)果見(jiàn)下表(注:“+”越多表示菌體長(zhǎng)得越好):pHpH=5pH=4pH=3pH=2.5pH=2結(jié)果+++++++++++++++定期對(duì)培育液中酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù),可采納法或稀釋涂布平板法;采納前者方法的操作中,為保證精確性,可用臺(tái)盼藍(lán)染色后再對(duì)呈(填“無(wú)色”或“藍(lán)色”)的菌體進(jìn)行計(jì)數(shù)。依據(jù)培育結(jié)果分析,從pH為的培育基中可以篩選出耐酸性強(qiáng)的菌種。
(3)某同學(xué)對(duì)酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí),吸取106倍的稀釋菌液各0.1mL,分別涂布在三個(gè)平板上,一段時(shí)間后形成的菌落數(shù)依次是18、16、14個(gè),該同學(xué)以平均菌落數(shù)16為統(tǒng)計(jì)結(jié)果,最終求得原菌液中酵母菌濃度為1.6×108個(gè)/mL。你認(rèn)為該同學(xué)的計(jì)數(shù)方法是否科學(xué)?(填“科學(xué)”或“不科學(xué)”),說(shuō)明理由。
。
(4)試驗(yàn)最終篩選出兩個(gè)耐酸性強(qiáng)的酵母菌菌株,特點(diǎn)如下表:菌株甲乙特點(diǎn)pH≤3.5時(shí),生長(zhǎng)代謝正常,優(yōu)于其他常規(guī)菌種pH為2.5~6時(shí),生長(zhǎng)代謝正常,優(yōu)于其他常規(guī)菌種依據(jù)菌株特點(diǎn),探討者認(rèn)為乙更適合作為白酒發(fā)酵菌株,推斷依據(jù)是
。
2.(15分)(2024江西宜春期末)如圖為制作泡菜的流程。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。(1)腌制泡菜前,檢查泡菜壇是否有裂紋或砂眼的方法是
。
(2)制作泡菜宜選用簇新的蔬菜,緣由是。在泡菜腌制過(guò)程中,壇口邊緣的水槽中保持水分足夠的目的是。
(3)在泡菜的制作過(guò)程中,依據(jù)鹽與清水的質(zhì)量比為的比例配制鹽水。將配制的鹽水煮沸的目的是。
(4)泡菜制作過(guò)程中影響亞硝酸鹽含量的因素有和溫度等。在泡菜腌制的過(guò)程中,要定期測(cè)定亞硝酸鹽含量,測(cè)定方法是法。
(5)同樣的材料和腌制條件,不同壇中各時(shí)期測(cè)得的亞硝酸鹽含量不同,最可能的緣由是
。
3.(15分)(2024湖北元月調(diào)研)科研人員把玉米深加工后生產(chǎn)玉米胚芽油和酒精。請(qǐng)分析并回答下列問(wèn)題。(1)玉米胚芽可以用來(lái)提取胚芽油。胚芽油不易揮發(fā),宜選用法或法。
(2)玉米芯可以用纖維素分解菌降解,并進(jìn)一步利用酵母菌發(fā)酵制備酒精。①篩選纖維素分解菌的試驗(yàn)流程:土壤→取樣→選擇培育→梯度稀釋→鑒別培育。以下是一種培育基配方:纖維素粉5g、NaNO31g、Na2HPO4·7H2O1.2g、KH2PO40.9g、MgSO4·7H2O0.5g、KCl0.5g、酵母膏0.5g、水解酪素0.5g(蒸餾水定容到1000mL)。該培育基能夠增加樣品中纖維素分解菌的濃度,其緣由是
。
②鑒別和進(jìn)一步純化纖維素分解菌:可以在鑒別培育基上加入染液,將篩選獲得的菌液用法接種到鑒別培育基上,然后選擇產(chǎn)生菌落作為菌種進(jìn)行擴(kuò)大培育。
③利用酵母菌制備酒精:纖維素被纖維素分解菌分解的產(chǎn)物可被酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)酒精。如圖表示酵母菌量與酒精產(chǎn)生量的關(guān)系。酵母菌接種量超過(guò)40mL后,酒精產(chǎn)量反而削減的緣由是
。
4.(10分)(2024廣東汕頭質(zhì)監(jiān))某生物愛(ài)好小組的同學(xué)安排調(diào)查某快餐店的冰塊中大腸桿菌的含量。詳細(xì)試驗(yàn)步驟如下。(1)配制培育基(成分:蛋白胨、氯化鈉、乳糖、水、X和Y)。(2)制作無(wú)菌平板。(3)設(shè)置空白比照組和試驗(yàn)組,比照組接種①,試驗(yàn)組接種②。(4)將各組平板置于37℃恒溫箱中培育一段時(shí)間,統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)?;卮鹣铝袉?wèn)題。(1)培育基中的乳糖可以為大腸桿菌供應(yīng)。為了便利大腸桿菌的鑒定,須要在培育基中添加成分X是,在該培育基表面,大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)(填顏色)。為了完成步驟二,該培育基中的成分Y通常是。
(2)完善步驟三,①是,②是。
(3)在純化大腸桿菌前,將滅菌后的空白平板先培育一段時(shí)間,目的是。劃線(xiàn)的某個(gè)平板培育后,第一劃線(xiàn)區(qū)域的劃線(xiàn)長(zhǎng)滿(mǎn)了菌落,其次劃線(xiàn)區(qū)域卻無(wú)菌落產(chǎn)生,可能的緣由是
。
(4)該小組將得到的菌株接種到液體培育基中并混勻,一部分進(jìn)行靜置培育,另一部分進(jìn)行振蕩培育。結(jié)果發(fā)覺(jué):振蕩培育的細(xì)菌比靜置培育的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其緣由是振蕩培育能提高培育液中的含量和的利用率。
5.(15分)(2024安徽宣城二調(diào))藍(lán)莓是一種養(yǎng)分價(jià)值特別高的水果,富含花青素?;ㄇ嗨厥且环N熱敏性活性物質(zhì),不易揮發(fā),易溶于水、甲醇、乙醇等極性溶劑中,在pH小于3.0時(shí)比較穩(wěn)定。探討表明花青素具有抗炎癥、延緩蒼老等作用,因此人們將藍(lán)莓加工,形成了藍(lán)莓汁、果酒、果醋等系列產(chǎn)品。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。(1)從藍(lán)莓中提取花青素不采納水蒸氣蒸餾法的緣由是
。
提取的花青素常作為食品添加劑,從平安角度考慮,以下方案最佳的是。
①鹽酸+甲醇②檸檬酸+乙醇③檸檬酸+丙酮(2)超臨界流體萃取是目前最先進(jìn)的物理萃取技術(shù)。萃取劑在常壓和室溫下為氣體,在溫度、壓力高于臨界值時(shí)為流體。利用超臨界CO2為溶劑,可將基質(zhì)與萃取物有效分別、提取和純化。與傳統(tǒng)有機(jī)溶劑萃取法相比,超臨界流體萃取法有哪些優(yōu)點(diǎn)?
。(至少答出2點(diǎn))
(3)制作藍(lán)莓汁時(shí),為提高出汁率和澄清度,可向果汁中加入。釀造藍(lán)莓酒時(shí),若要實(shí)現(xiàn)酵母菌的反復(fù)利用,可進(jìn)行。為保證果酒發(fā)酵正常進(jìn)行,須要嚴(yán)格限制的發(fā)酵條件有(答出2種即可)。
(4)藍(lán)莓酒假如暴露在空氣中,酒味會(huì)漸漸消逝而散發(fā)出酸味,特殊是燥熱的夏天更是如此,其緣由是
。
6.(15分)(2024五省優(yōu)創(chuàng)名校聯(lián)考)某小組從發(fā)酵的豇豆中提取發(fā)酵液,進(jìn)行菌種培育并分別,得到了三個(gè)品系的乳酸菌菌株,編號(hào)后分別接種在四種不同的培育基上,培育并統(tǒng)計(jì)培育基上的菌落數(shù),結(jié)果如下表所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。培育基編號(hào)菌落數(shù)
組別ⅠⅡⅢⅣ1289251103952275201956032421697832(1)在分別菌株的四種培育基中都有水、無(wú)機(jī)鹽、等養(yǎng)分物質(zhì),其中的無(wú)機(jī)鹽包括適量的NaCl溶液,NaCl溶液的作用是
(答出兩點(diǎn))。
(2)無(wú)菌技術(shù)是獲得純化菌株的關(guān)鍵,該技術(shù)能防止培育物被外來(lái)微生物污染,也能。分別純化菌株時(shí)要進(jìn)行梯度稀釋,目的是
。
(3)據(jù)表分析,在Ⅰ~Ⅳ號(hào)培育基中,用號(hào)培育基培育菌株的效果最好,理由是
。
(4)臨時(shí)保存上述三種菌株,應(yīng)將菌種先接種到試管的上進(jìn)行培育,然后置于4℃冰箱中保藏。
7.(15分)近幾年,全國(guó)柑橘銷(xiāo)售市場(chǎng)陷入低迷,為變更這種狀況,并滿(mǎn)意不同人的需求,可以將其加工制成果汁、果酒、果醋等產(chǎn)品。結(jié)合下圖回答相關(guān)問(wèn)題。(1)通過(guò)過(guò)程③制作果酒時(shí)常常接種的菌種是,最適合其繁殖的溫度為℃左右。
(2)在過(guò)程③中不用滅菌一般也不會(huì)受到雜菌的污染,緣由是Ⅰ;Ⅱ。
(3)過(guò)程③和過(guò)程④所用微生物在代謝方式上的主要區(qū)分是。
(4)選用簇新而不是干枯的柑橘果皮作為提取香精油的材料,理由是。過(guò)程⑤提取橘皮精油的主要步驟是石灰水浸泡、漂洗、、過(guò)濾、靜置、再次過(guò)濾?,F(xiàn)獲得一株無(wú)籽突變柑橘,探討人員要在較短時(shí)間內(nèi)獲得大量該突變植株,最好采納的方法,該過(guò)程中須要對(duì)外植體運(yùn)用酒精進(jìn)行消毒處理。對(duì)培育基徹底滅菌時(shí),應(yīng)采納的滅菌方法是。
單元質(zhì)檢卷十生物技術(shù)實(shí)踐1.答案:(1)酵母菌是兼性厭養(yǎng)型生物,在氧氣消耗盡后能進(jìn)行無(wú)氧呼吸(2)顯微鏡干脆計(jì)數(shù)(血細(xì)胞計(jì)數(shù)板)無(wú)色2~3(3)不科學(xué)應(yīng)當(dāng)將不同稀釋倍數(shù)的菌液分組,分別涂布在多個(gè)平板上,以獲得菌落數(shù)在30~300個(gè)之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)(4)該菌株對(duì)pH的耐受范圍更大。從發(fā)酵初期到后期pH漸漸降低的過(guò)程中,乙菌株始終能正常生長(zhǎng)2.答案:(1)將壇口向上壓入水中,視察壇內(nèi)有無(wú)滲水現(xiàn)象(2)簇新蔬菜中亞硝酸鹽的含量低供應(yīng)發(fā)酵過(guò)程中所需的無(wú)氧環(huán)境(3)1∶4殺滅雜菌并消退溶解氧(4)食鹽用量和腌制時(shí)間比色(5)各壇中微生物的種類(lèi)和數(shù)量不同解析:(1)由于乳酸菌為厭氧菌,為保證發(fā)酵環(huán)境為無(wú)氧環(huán)境,泡菜壇應(yīng)密封效果好,不漏氣,在腌制泡菜前,可將壇口向上壓入水中,視察壇內(nèi)有無(wú)滲水現(xiàn)象以檢查泡菜壇是否有裂紋或砂眼。(2)由于簇新蔬菜中亞硝酸鹽的含量低,故制作泡菜一般選用簇新的蔬菜。在泡菜腌制過(guò)程中常常向壇口邊緣的水槽中補(bǔ)充水分,目的是供應(yīng)發(fā)酵過(guò)程中所需的無(wú)氧環(huán)境。(3)泡菜制作須要加入鹽水,其中鹽與清水的比例應(yīng)為1∶4。將配制的鹽水煮沸的目的是殺滅雜菌并消退溶解氧,為了避開(kāi)高溫殺死菌種,鹽水須要煮沸并冷卻后才可運(yùn)用。(4)泡菜制作過(guò)程中影響亞硝酸鹽含量的因素有食鹽用量、腌制時(shí)間和溫度等。在泡菜腌制的過(guò)程中,常用比色法測(cè)定亞硝酸鹽的含量。(5)泡菜制作過(guò)程中運(yùn)用的菌種為自然菌種,由于各壇中微生物的種類(lèi)和數(shù)量不同,盡管不同壇中運(yùn)用了同樣的材料和腌制條件,但在各時(shí)期測(cè)得的亞硝酸鹽含量仍會(huì)不同。3.答案:(1)壓榨萃取(2)①培育基中纖維素是主要碳源,有利于纖維素分解菌生長(zhǎng),同時(shí)抑制其他微生物生長(zhǎng)。②剛果紅稀釋涂布平板透亮圈③酵母菌接種量過(guò)大導(dǎo)致酵母菌種群密度過(guò)大,不利于酵母菌的發(fā)酵活動(dòng)解析:(1)由于胚芽油不易揮發(fā),不適合用蒸餾法,宜選用壓榨法或萃取法。(2)①因?yàn)樵撆嘤欣w維素粉是主要碳源,有利于纖維素分解菌生長(zhǎng),同時(shí)其他微生物因缺少合適的碳源而被抑制。所以該培育基能夠增加樣品中纖維素分解菌的濃度。②纖維素和剛果紅染液能夠顯示紅色,纖維素分解菌可以分解培育基中的纖維素而出現(xiàn)透亮圈,所以可以用來(lái)篩選能夠分解纖維素的細(xì)菌。在分別純化時(shí)要將篩選獲得的菌液用稀釋涂布平板法接種到鑒別培育基上,然后選擇產(chǎn)生透亮圈菌落作為菌種進(jìn)行擴(kuò)大培育。③由圖可知酵母菌接種量超過(guò)40mL后,酒精產(chǎn)量反而削減,是因?yàn)榻湍妇臃N量過(guò)大導(dǎo)致酵母菌種群密度過(guò)大,種內(nèi)競(jìng)爭(zhēng)激烈,酵母菌的發(fā)酵活動(dòng)受抑制。4.答案:(1)碳源伊紅—美藍(lán)黑色瓊脂(2)適量無(wú)菌水取自該快餐店的等量冰塊水(3)檢測(cè)培育基平板滅菌是否合格接種環(huán)灼燒后未冷卻便進(jìn)行劃線(xiàn)(或劃線(xiàn)未從第一區(qū)域末端起先)(4)氧氣養(yǎng)分物質(zhì)解析:(1)乳糖是糖類(lèi)物質(zhì),不含氮元素,所以培育基中的乳糖可為大腸桿菌供應(yīng)碳源。鑒定大腸桿菌時(shí),常運(yùn)用伊紅—美藍(lán)試劑,菌落出現(xiàn)的顏色是黑色。所以在培育基中添加的成分X是伊紅—美藍(lán),大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色。制作無(wú)菌平板是制作固體培育基,所以該培育基中還應(yīng)加入瓊脂,即成分Y是瓊脂。(2)本試驗(yàn)是調(diào)查某快餐店的冰塊中大腸桿菌的含量,故試驗(yàn)中比照組應(yīng)接種適量無(wú)菌水,試驗(yàn)組應(yīng)接種取自該快餐店的等量冰塊水。(3)為了檢測(cè)培育基平板滅菌是否合格,常在純化大腸桿菌前,將滅菌后的空白平板先培育一段時(shí)間,若平板上有菌落生長(zhǎng),說(shuō)明滅菌不合格。接種環(huán)在平板內(nèi)的每一次劃線(xiàn)前,都要先灼燒滅菌冷卻后劃線(xiàn),而且要從上一次劃線(xiàn)末端而非空白處劃線(xiàn),若不冷卻會(huì)燙死上次劃線(xiàn)末端的菌株,使以后的劃線(xiàn)處沒(méi)有菌落生長(zhǎng),若從空白處劃線(xiàn)也是不會(huì)有菌落生長(zhǎng)的。所以劃線(xiàn)的某個(gè)平板培育后,第一劃線(xiàn)區(qū)域的劃線(xiàn)長(zhǎng)滿(mǎn)了菌落,其次劃線(xiàn)區(qū)域卻無(wú)菌落產(chǎn)生,可能的緣由是接種環(huán)灼燒后未冷卻便進(jìn)行劃線(xiàn)(或劃線(xiàn)未從第一區(qū)域末端起先)。(4)振蕩培育可增加溶液中氧氣的量以及提高菌體與養(yǎng)分物質(zhì)的接觸,提高養(yǎng)分物質(zhì)的利用率,從而使振蕩培育的細(xì)菌比靜置培育的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。5.答案:(1)花青素不易揮發(fā),不能隨水蒸氣蒸餾出來(lái),且高溫會(huì)破壞花青素②(2)提取率高、無(wú)有害溶劑的殘留、操作條件溫柔、對(duì)有效成分的破壞少、不燃燒、不污染環(huán)境等優(yōu)點(diǎn)(3)纖維素酶和果膠酶酵母細(xì)胞的固定化溫度和密閉條件(4)醋酸菌是好氧細(xì)菌,在較高溫度下更有利于其生長(zhǎng)繁殖,有氧條件抑制酵母菌的無(wú)氧發(fā)酵解析:(1)依據(jù)題意,花青素是一種熱敏性活性物質(zhì),花青素不易揮發(fā),又易溶于水、甲醇、乙醇等極性溶劑中,不能隨水蒸氣蒸餾出來(lái),且高溫會(huì)破壞花青素,故從藍(lán)莓中提取花青素不采納水蒸氣蒸餾法。甲醇和丙酮有毒性,故從平安角度考慮,最佳方案是②。(2)依據(jù)題意,利用超臨界CO2為溶劑,可將基質(zhì)與萃取物有效分別、提取和純化。與傳統(tǒng)有機(jī)溶劑萃取法相比,超臨界流體萃取法的優(yōu)點(diǎn)有:提取率高、無(wú)有害溶劑的殘留、操作條件溫柔、對(duì)有效成分的破壞少、不燃燒、不污染環(huán)境等。(3)制作藍(lán)莓汁時(shí),可向果汁中加入纖維素酶和果膠酶,以破壞細(xì)胞壁,可提高出汁率和澄清度。釀造藍(lán)莓酒時(shí),若要實(shí)現(xiàn)酵母菌的反復(fù)利用,可進(jìn)行酵母細(xì)胞的固定化。為保證果酒發(fā)酵正常進(jìn)行,須要嚴(yán)格限制的發(fā)酵條件有溫度和密閉條件。(4)藍(lán)莓酒假如暴露在空氣中,酒味會(huì)漸漸消逝而散發(fā)出酸味,特殊是燥熱的夏天更是如此,其緣由是有氧條件抑制酵母菌的無(wú)氧發(fā)酵,而醋酸菌是好氧細(xì)菌,在較高溫度下更有利于其生長(zhǎng)繁殖。6.答案:(1)碳源、氮源為乳酸菌的生長(zhǎng)繁殖供應(yīng)無(wú)機(jī)養(yǎng)分;維持培育基的滲透壓(2)避開(kāi)操作者自身被微生物感染將濃度較高的乳酸菌分散成單個(gè)細(xì)胞,從而在培育基表面形成單個(gè)的菌落(3)Ⅰ在Ⅰ號(hào)培育基上,三種菌株的菌落數(shù)都最多(4)固體斜面培育基解析:(1)在分別菌株的四種培育基中都有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源等養(yǎng)分物質(zhì),其中的無(wú)機(jī)鹽包括適量的NaCl溶液,NaCl溶液的作用是為乳酸菌的生長(zhǎng)繁殖供應(yīng)無(wú)機(jī)養(yǎng)分、維持滲透壓。(2)
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