2024年北師大新版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2024年北師大新版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷677考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、從燒傷患者身上取少量健康的皮膚進(jìn)行體外細(xì)胞培養(yǎng)，可構(gòu)建人造皮膚用于自體移植。下列不會(huì)發(fā)生在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中的是（）A.減數(shù)分裂B.細(xì)胞貼壁生長C.接觸抑制D.遺傳物質(zhì)發(fā)生改變2、某實(shí)驗(yàn)室做了如圖所示的實(shí)驗(yàn)研究；下列與實(shí)驗(yàn)相關(guān)的敘述正確的是（）

A.過程①導(dǎo)入的誘導(dǎo)基因使成纖維母細(xì)胞發(fā)生基因突變B.過程②屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中的原代培養(yǎng)C.丙細(xì)胞既能持續(xù)分裂，又能分泌單一的抗體D.過程③④所用的培養(yǎng)基中都含有聚乙二醇3、蛋白質(zhì)工程可以說是基因工程的延伸。下列有關(guān)蛋白質(zhì)工程的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.蛋白質(zhì)工程只能改造現(xiàn)有的蛋白質(zhì)而不能制造新的蛋白質(zhì)B.蛋白質(zhì)工程可對(duì)酶的催化活性、抗氧化性、熱變性等加以改變C.蛋白質(zhì)工程是通過對(duì)基因的修飾和合成來實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白質(zhì)的改造D.蛋白質(zhì)工程的原理是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)最終找到脫氧核苷酸序列的過程4、下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說法，正確的是（）A.蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行操作的B.蛋白質(zhì)工程能生產(chǎn)出新型的蛋白質(zhì)分子C.對(duì)蛋白質(zhì)的改造是通過改造mRNA來實(shí)現(xiàn)的D.蛋白質(zhì)工程的流程和天然蛋白質(zhì)合成的過程相同5、下圖是單克隆抗體制備流程示意圖；骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT），在HAT選擇培養(yǎng)基中不能正常合成DNA，而淋巴細(xì)胞還可通過其他途徑合成DNA。下列有關(guān)敘述，正確的是（）

A.①是從已免疫的小鼠骨髓中獲得的B淋巴細(xì)胞B.②中可用滅活的病毒誘導(dǎo)雜交瘤細(xì)胞的形成C.③中融合細(xì)胞均可以在HAT培養(yǎng)基中生長D.④是利用HAT培養(yǎng)基篩選分泌特異性抗體的細(xì)胞6、天津獨(dú)流老醋歷史悠久；獨(dú)具風(fēng)味；其生產(chǎn)工藝流程如下圖。據(jù)圖說法錯(cuò)誤的是（）

A.糖化階段可添加淀粉酶等酶制劑處理原料B.在酒精發(fā)酵階段，發(fā)酵罐需先通氣后密閉C.醋酸發(fā)酵階段所需溫度低于酒精發(fā)酵階段D.氧氣、營養(yǎng)物質(zhì)等因素會(huì)影響醋酸菌數(shù)量7、下列有關(guān)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的敘述，正確的是（）A.制作果酒時(shí)選擇新鮮的葡萄略加沖洗，除去枝梗后榨汁B.將玻璃瓶用酒精消毒后，裝滿葡萄汁C.酒精發(fā)酵期間，根據(jù)發(fā)酵進(jìn)程適時(shí)打開瓶蓋放氣D.制作果酒、果醋的過程中都應(yīng)防止微生物的生長、繁殖8、CRISPR/Cas9是應(yīng)用最廣泛的基因組編輯技術(shù)；其操作過程如下：

①人工合成的短鏈RNA作為向?qū)Вê喎QgRNA）；它將部分與細(xì)胞某目的基因中希望被編輯的序列相結(jié)合；

②來自細(xì)菌的核酸酶Cas9與gRNA結(jié)合；切割與gRNA結(jié)合的DNA，使DNA雙鏈斷裂；

③加入大量用于修復(fù)的模板DNA（即大部分序列與被切割位點(diǎn)附近序列相同；個(gè)別位點(diǎn)被人工改變）。這樣，細(xì)胞啟動(dòng)修復(fù)機(jī)制，人類希望改變的堿基序列被引入基因組中，基因組的準(zhǔn)確編輯由此實(shí)現(xiàn)。

以下關(guān)于該技術(shù)敘述正確的是（）A.gRNA的序列與目的基因特定堿基序列部分結(jié)合，結(jié)合區(qū)域最多含6種核苷酸B.Cas9經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體加工才具有切斷DNA的活性C.CRISPR/Cas9技術(shù)對(duì)不同基因進(jìn)行編輯時(shí)，應(yīng)使用相同的gRNAD.CRISPR/Cas9技術(shù)可改變基因結(jié)構(gòu)，也可以使某個(gè)基因失去功能評(píng)卷人得分二、多選題(共6題，共12分)9、關(guān)于現(xiàn)代生物工程技術(shù)應(yīng)用的安全性，下列說法正確的是（）A.對(duì)待生物武器的態(tài)度應(yīng)明確而堅(jiān)定，即堅(jiān)決禁止生物武器B.中國對(duì)于克隆人的態(tài)度是不反對(duì)治療性克隆，但禁止生殖性克隆人C.對(duì)轉(zhuǎn)基因植物外源DNA要進(jìn)行認(rèn)真選擇，避免產(chǎn)生對(duì)人體有害的或過敏的蛋白質(zhì)D.轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題，不一定要馬上停止實(shí)驗(yàn)10、下列關(guān)于“轉(zhuǎn)基因”的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.轉(zhuǎn)入的外源基因不會(huì)使作物的其他基因的表達(dá)受到影響B(tài).被轉(zhuǎn)移的基因是功能已知的基因，人們對(duì)它們研究得已經(jīng)相當(dāng)透徹，絕對(duì)不會(huì)引起安全性問題C.在“轉(zhuǎn)基因”的過程中，必須用到工具酶D.轉(zhuǎn)基因技術(shù)成果已進(jìn)入人類的生產(chǎn)和生活，特別是在醫(yī)藥和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上發(fā)揮了極大的作用11、下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.培養(yǎng)基一般為固體培養(yǎng)基B.培養(yǎng)結(jié)果只能獲得大量細(xì)胞及生物制品，而不能獲得生物體C.需要氧氣來滿足細(xì)胞代謝的需要，不需要二氧化碳D.通過細(xì)胞培養(yǎng)可以檢測有毒物質(zhì)，判斷某物質(zhì)的毒性12、RNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄后再進(jìn)行PCR擴(kuò)增的技術(shù)稱為RT－PCR，過程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.過程①需要RN逆轉(zhuǎn)錄酶、引物、核糖核苷酸等條件B.真核細(xì)胞的mRNA經(jīng)過程①②獲得的DNA無內(nèi)含子片段C.過程③PCR擴(kuò)增時(shí)引物中的CG含量會(huì)影響退火溫度D.RT－PCR技術(shù)可應(yīng)用于新冠病毒（RNA病毒）的核酸檢測13、常乳是母牛泌乳期一周后直到泌乳停止前一周這個(gè)時(shí)間段內(nèi)分泌的乳汁。奶牛自身乳房和乳頭中可能含有的細(xì)菌，加上擠乳過程中產(chǎn)生的少量污染，常乳中會(huì)有一定量的細(xì)菌存在。研究小組要檢測一份常乳樣品中細(xì)菌的總量（不考慮菌種），檢測流程如下圖，每個(gè)平板上接種菌液量為0.1mL。下列說法正確的是（）

A.倒平板時(shí)將培養(yǎng)皿打開一條細(xì)縫，不要完全打開，防止雜菌污染B.上述方法是稀釋涂布平板法，培養(yǎng)基要營養(yǎng)全面，適合各種細(xì)菌生長C.也可以通過連續(xù)劃線的方法接種，通過菌落數(shù)計(jì)算樣品中的細(xì)菌總數(shù)D.若三個(gè)平板上的菌落平均數(shù)為59，則所每毫升樣品中細(xì)菌總數(shù)為5.9×10714、下圖1表示限制酶SpeⅠ、XbaⅠ的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)，圖2表示基因P（960bp）、基因Q（840bp）的限制酶SpeⅠ或XbaⅠ的酶切圖譜和融合基因，圖3表示幾種基因經(jīng)限制酶SpeⅠ或XbaⅠ處理后進(jìn)行電泳（電泳條帶表示特定長度的DNA片段）得到的帶譜圖，下列相關(guān)分析正確的是（）

A.基因P經(jīng)限制酶SpeⅠ處理后進(jìn)行電泳的結(jié)果與圖3中的Ⅰ相同B.基因Q經(jīng)限制酶XbaⅠ處理后進(jìn)行電泳的結(jié)果與圖3中的Ⅱ相同C.融合基因經(jīng)限制酶SpeⅠ處理后進(jìn)行電泳的結(jié)果與圖3中的Ⅲ相同D.融合基因經(jīng)限制酶XbaⅠ處理后進(jìn)行電泳的結(jié)果與圖3中的Ⅳ相同評(píng)卷人得分三、填空題(共9題，共18分)15、體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題：

克隆動(dòng)物存在著健康問題、表現(xiàn)出______缺陷等。16、生化武器散布途徑：將病原體_____或者通過_____、_____等散布到敵方，會(huì)對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果。17、20世紀(jì)70年代以后；以基因工程為代表的一大批生物技術(shù)成果，進(jìn)入人類的生產(chǎn)和生活，特別是在醫(yī)藥和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上發(fā)揮了極大的作用，但是與其他高新技術(shù)一樣，生物技術(shù)也同樣具有雙刃劍效應(yīng)。如同其他高新技術(shù)一樣，轉(zhuǎn)基因成果和轉(zhuǎn)基因技術(shù)也需要你的理性看待。在轉(zhuǎn)基因生物安全方面；

（1）你認(rèn)為轉(zhuǎn)基因生物有哪些優(yōu)點(diǎn)，①____________②___________③__________。

（2）你認(rèn)為轉(zhuǎn)基因生物有哪些缺點(diǎn)，①____________②___________③__________。

（3）你對(duì)于轉(zhuǎn)基因生物的態(tài)度是__________。18、酵母菌是______________微生物。酵母菌進(jìn)行有氧呼吸的反應(yīng)式如下：______________________；酵母菌進(jìn)行無氧呼吸的反應(yīng)式如下：_________________。19、目的：使目的基因在受體細(xì)胞中_____，并且可以______，使目的基因能夠______作用。20、現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的____________條件下，將優(yōu)良__________菌種直接接種在豆腐上，這樣可以避免__________________的污染，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。21、基因工程是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵技術(shù)；蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸。有人對(duì)基因工程和蛋白質(zhì)工程的關(guān)系進(jìn)行了比較，并歸納為下表。

基因工程與蛋白質(zhì)工程的比較。比較項(xiàng)目蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程原理中心法則中心法則區(qū)別過程獲取目的基因→構(gòu)建表達(dá)載體→導(dǎo)入受體細(xì)胞→目的基因的檢測與鑒定預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測氨基酸序列→合成DNA→表達(dá)出蛋白質(zhì)實(shí)質(zhì)定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所需要的生物類型或生物產(chǎn)品（基因的異體表達(dá)）定向改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)以生產(chǎn)人類所需要的蛋白質(zhì)定向改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)以生產(chǎn)人類所需要的蛋白質(zhì)結(jié)果生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是第二代基因工程

上表的比較是否正確？如果有不妥之處，嘗試進(jìn)行修改。_________22、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：_____、_____、_____、_____等。23、基因表達(dá)載體的組成及其作用。

一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了______________、_______________外，還必須有__________、______________等(如圖所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦_(dá)_____________評(píng)卷人得分四、判斷題(共3題，共9分)24、胚胎發(fā)育至囊胚期時(shí)，細(xì)胞逐漸分化。()A.正確B.錯(cuò)誤25、利用基因工程技術(shù)建立移植器官工廠是目前基因工程取得實(shí)際應(yīng)用成果非常多的領(lǐng)域。()A.正確B.錯(cuò)誤26、我國對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是研究上要大膽，堅(jiān)持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴(yán)格，堅(jiān)持依法監(jiān)管。（選擇性必修3P104）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共18分)27、尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥；但尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收，只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某課題小組從土壤中分離能夠分解尿素的細(xì)菌并進(jìn)行計(jì)數(shù)的過程如圖1所示，圖2是乙中的培養(yǎng)基配方。請(qǐng)回答下列問題：

（1）為了獲得尿素分解菌；可在__________取樣；經(jīng)系列處理后如圖2所示培養(yǎng)基，為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是___________；__________。

（2）甲中培養(yǎng)基與乙中培養(yǎng)基的成分相比；唯一的區(qū)別是___________。

（3）在涂平板前需要對(duì)甲中的菌液進(jìn)行稀釋；稀釋涂布后能得到菌落數(shù)目在___________________的平板，則說明稀釋操作比較成功。

（4）對(duì)分離得到的尿素分解菌作進(jìn)一步鑒定時(shí)；可在上述培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，指示劑變紅的原因是尿素分解菌_____________________，再結(jié)合菌落的特征等進(jìn)行確定。

（5）統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目_________，除了上述的活菌計(jì)數(shù)法外，______________也是測定微生物數(shù)量的常用方法。28、四尾柵藻是一種淡水藻類；繁殖快；適應(yīng)性強(qiáng)，可作為制備生物柴油的重要原料之一。為提高四尾柵藻油脂含量，研究人員將從含油量高的紫蘇中獲得的二酰甘油?；D(zhuǎn)移酶基因（DGAT1）與pBI121質(zhì)粒構(gòu)建表達(dá)載體，經(jīng)轉(zhuǎn)化成功獲得高產(chǎn)油脂四尾柵藻，主要研究過程如下圖，其中DGAT1-F（5'-GCATCTAGAATGGCGATCTTGGACTC-3'）和DGAT1-R（5'-CGGATCCCTACCTTGCACTAGCTTTTC-3'）是以DGAT1基因?yàn)橐罁?jù)設(shè)計(jì)的一對(duì)引物，1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-ga1和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色。請(qǐng)回答下列問題。

(1)過程①中需要的酶有____________，過程②應(yīng)選用的限制酶是____________和____________。

(2)研究中，在保存DGAT1基因時(shí)，將克隆載體導(dǎo)入大腸桿菌的優(yōu)點(diǎn)有____________。

①穩(wěn)定保存②準(zhǔn)確復(fù)制③快速表達(dá)④方便取用。

(3)過程③經(jīng)轉(zhuǎn)化的大腸桿菌通過____________（方法）接種到培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。為篩選獲得目標(biāo)菌株，培養(yǎng)基應(yīng)加入的成分有____________。

(4)為檢測表達(dá)載體轉(zhuǎn)化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達(dá)，研究人員進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完成下表。實(shí)驗(yàn)步驟簡要操作過程初篩培養(yǎng)經(jīng)轉(zhuǎn)化后的四尾柵藻接種于含①____________的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng)，一段時(shí)間后觀察其生長情況②____________在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數(shù)個(gè)單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng)，編號(hào)備用PCR驗(yàn)證收集四尾柵藻藻體，提取基因組DNA，以DGAT1-F和DGAT1-R為引物，進(jìn)行PCR驗(yàn)證，未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻作對(duì)照油脂含量測定利用索氏抽提法分別測定③____________的油脂含量結(jié)果處理統(tǒng)計(jì)并比較PCR驗(yàn)證結(jié)果及藻體中油脂的含量29、三氯生是一種抑菌物質(zhì)，具有優(yōu)異的貯存穩(wěn)定性，可以替代抗生素用于基因工程中篩選含目的基因的受體細(xì)胞。已知fabV（從霍亂弧菌中發(fā)現(xiàn)的烯脂酰ACP還原酶）基因可以使大腸桿菌抵抗三氯生。

(1)通過PCR方法擴(kuò)增fabV基因時(shí)，先要根據(jù)_____設(shè)計(jì)兩種特異性引物序列，以確保Taq酶從引物的3′端延伸DNA鏈，至少需要經(jīng)過_____次擴(kuò)增才能獲得8個(gè)雙鏈等長的目的基因。

(2)基因工程的核心步驟是_____；某科研團(tuán)隊(duì)將可以受溫度調(diào)控的基因插入上述選出的重組質(zhì)粒中，構(gòu)建了溫度調(diào)控表達(dá)質(zhì)粒（如圖2）。其中C基因在低溫下會(huì)抑制P2，R基因在高溫下會(huì)抑制P1，如果將lacZ基因和GFP（綠色熒蛋白）基因插入圖2質(zhì)粒中，使得最后表現(xiàn)為低溫下只表達(dá)GFP蛋白，而高溫下只表達(dá)lacZ蛋白。則lacZ基因插在_____之間，GFP基因的插入位置及注意點(diǎn)是_____。

(3)若以大腸桿菌為受體細(xì)胞，篩選上述插入了GFP基因的受體細(xì)胞的依據(jù)是：大腸桿菌能在含_____的培養(yǎng)基上生長，且_____。評(píng)卷人得分六、綜合題(共3題，共6分)30、抗生素耐藥性是微生物的一種自然進(jìn)化過程?，F(xiàn)在我們使用的抗生素大多來自于放線菌（一種與細(xì)菌細(xì)胞結(jié)構(gòu)類似的原核生物）；研究發(fā)現(xiàn)，病原細(xì)菌的耐藥基因往往是通過圖所示機(jī)理獲得的。

（1）病原細(xì)菌通過接合方式將自己質(zhì)粒上的一段DNA序列a轉(zhuǎn)移到放線菌細(xì)胞中，放線菌的抗生素耐藥基因“跳躍”至病原細(xì)菌的DNA序列上，與病原細(xì)菌的DNA發(fā)生____________，形成b。

（2）放線菌裂解死亡后，b會(huì)釋放到環(huán)境中。病原細(xì)菌從周圍環(huán)境中吸收b，這一過程稱為細(xì)菌的________。

（3）病原細(xì)菌將吸收的b整合到自己的____________上，從而獲得抗生素耐藥性。序列a在耐藥基因轉(zhuǎn)移過程中所起的作用是_______________________。

（4）病原細(xì)菌產(chǎn)生抗生素耐藥性的主要機(jī)理如下圖所示。據(jù)圖可知，病原細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性的途徑有____________。

（5）研究發(fā)現(xiàn)，由于抗生素的大量生產(chǎn)和濫用，導(dǎo)致人類腸道中病原細(xì)菌的耐藥性不斷增強(qiáng)，從進(jìn)化的角度分析細(xì)菌耐藥性增強(qiáng)的原因是_______________________。

（6）由于抗生素在醫(yī)療以及養(yǎng)殖業(yè)中的大量使用，導(dǎo)致環(huán)境中出現(xiàn)了大量抗性污染熱點(diǎn)區(qū)，抗性基因可以通過多種直接或間接的傳播途徑最終進(jìn)人水體和土壤。請(qǐng)你提出一項(xiàng)對(duì)應(yīng)抗生素耐藥性蔓延的措施____________。31、某研究人員設(shè)計(jì)了下列技術(shù)路線；以期獲得甘藍(lán)和蘿卜體細(xì)胞雜交植株。

請(qǐng)回答下列問題：

(1)制備原生質(zhì)體時(shí)，常用兩種酶處理，分別是__________。誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是____________________。原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是________________。植物體細(xì)胞雜交技術(shù)最大的優(yōu)點(diǎn)是________________。

(2)植物組織培養(yǎng)的核心步驟包括____________和____________兩步，前者就是讓已經(jīng)分化的細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)后，失去其特有的____________從而轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只?xì)胞的過程。圖中X是____________________。為誘導(dǎo)融合體產(chǎn)生不定芽，通常應(yīng)在培養(yǎng)基中加入兩類植物激素，其中起主要作用的是____________。

(3)若想獲得抗鹽植株，可選用融合原生質(zhì)體作為人工誘變的材料，原因是_______________，且需在含較高濃度的NaCl培養(yǎng)基中篩選。32、IKK激酶參與動(dòng)物體內(nèi)免疫細(xì)胞的分化。臨床上發(fā)現(xiàn)某重癥聯(lián)合免疫缺陷（SCID）患兒IKK基因編碼區(qū)第1183位堿基T突變?yōu)镃；導(dǎo)致IKK上第395位酪氨酸被組氨酸代替。為研究該患兒發(fā)病機(jī)制，研究人員利用純合野生鼠應(yīng)用大引物PCR定點(diǎn)誘變技術(shù)培育出SCID模型小鼠（純合），主要過程如圖1；2。分析回答：

（1）在PCR反應(yīng)體系中，需加入引物、IKKB基因、緩沖液、Mg2＋等外，還需加入__________等。

（2）在圖1獲取突變基因過程中，需要以下3種引物：。引物A5′—CCCCAA____CGGAAAGTGTCA—3′（下劃線字母為突變堿基）引物B5′—T____CGAACATCCTA—3′（下劃線部分為限制酶HindⅢ識(shí)別序列）引物C5′—GT____GCTGCCCCAA—3′（下劃線部分為限制酶SacⅠ識(shí)別序列）

則PCR1中使用的引物有____________，PCR2中使用的引物有____________和圖中大引物的____________（①②）鏈。

（3）PCR的反應(yīng)程序?yàn)椋?4℃3min；94℃30s，58℃30s，72℃50s，30個(gè)循環(huán)。在循環(huán)之前的94℃3min處理為預(yù)變性；循環(huán)中72℃處理的目的是______________________________。

（4）據(jù)圖2分析代孕母鼠對(duì)移入子宮的胚胎基本不發(fā)生免疫反應(yīng)，這為_________提供了可能。

（5）研究人員經(jīng)鑒定、篩選獲得一只轉(zhuǎn)基因雜合鼠F0；并確認(rèn)突變基因已經(jīng)穩(wěn)定同源替代IKK基因，請(qǐng)你設(shè)計(jì)完成獲得SCID模型鼠的實(shí)驗(yàn)步驟：

①雜交親本：______________，雜交得F1；

②F1雌雄鼠隨機(jī)交配得F2；

③提取F2每只小鼠的基因組DNA，采用分子生物學(xué)方法，利用IKK基因探針和突變基因探針進(jìn)行篩選，則___________________________________________________為模型鼠。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、A【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動(dòng)物組織塊--剪碎組織--用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞--制成細(xì)胞懸液--轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)--貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞；制成細(xì)胞懸液--轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

【詳解】

A；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程的原理是細(xì)胞增殖；該過程發(fā)生的主要是有絲分裂，A符合題意；

BC；在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)會(huì)發(fā)生細(xì)胞貼壁生長和接觸抑制兩個(gè)現(xiàn)象；BC不符合題意；

D；在傳代培養(yǎng)過程中；細(xì)胞的遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變，D不符合題意。

故選A。2、C【分析】【分析】

①是將目的基因?qū)胧荏w動(dòng)物細(xì)胞；②是干細(xì)胞培養(yǎng)過程中的增殖分化，③是誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合，④是培養(yǎng)雜交細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體。

【詳解】

A；圖中過程①導(dǎo)入的誘導(dǎo)基因使成纖維母細(xì)胞發(fā)生基因重組；A錯(cuò)誤；

B；過程②為干細(xì)胞的增殖分化過程；屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中的傳代培養(yǎng)，B錯(cuò)誤；

C；丙細(xì)胞由能無限增殖的甲細(xì)胞和能分泌特定抗體的乙細(xì)胞融合而成；因此丙細(xì)胞既能持續(xù)分裂，又能分泌單一的抗體，C正確；

D；聚乙二醇作為誘導(dǎo)細(xì)胞融合的作用；過程③所用的培養(yǎng)基中含有聚乙二醇，過程④所用的培養(yǎng)基中不需要聚乙二醇，D錯(cuò)誤。

故選C。3、A【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)）

【詳解】

A；根據(jù)蛋白質(zhì)工程的概念可知；蛋白質(zhì)工程既能改造現(xiàn)有的蛋白質(zhì)也能制造新的蛋白質(zhì)，A錯(cuò)誤；

B；蛋白質(zhì)工程可通過對(duì)酶的改造；改變其催化活性、抗氧化性、熱變性等性質(zhì)，B正確；

C；蛋白質(zhì)工程是通過對(duì)基因的修飾和合成來實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白質(zhì)的改造；C正確；

D；蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)；設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，D正確。

故選A。

【點(diǎn)睛】4、B【分析】【分析】

1；蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活需求。

2；蛋白質(zhì)工程能對(duì)現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造；或制造一種新的蛋白質(zhì)；而基因工程原則上只能生產(chǎn)自然界原有的蛋白質(zhì)。

3；蛋白質(zhì)工程的過程：（1）根據(jù)中心法則逆推以確定目的基因的堿基序列：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有氨基酸序列→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）；（2）進(jìn)行基因修飾或基因合成；（3）最終還是回到基因工程上來解決蛋白質(zhì)的合成。

【詳解】

A；由蛋白質(zhì)工程概念可知：蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)的基因分子進(jìn)行操作；不是直接對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行操作，A錯(cuò)誤；

B；由概念可知：蛋白質(zhì)工程能產(chǎn)生出自然界中不曾存在過的新型蛋白質(zhì)分子；B正確；

C；對(duì)蛋白質(zhì)的改造是通過直接改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)的基因來實(shí)現(xiàn)的；C錯(cuò)誤；

D；蛋白質(zhì)工程的流程和天然蛋白質(zhì)合成的過程是不完全相同；D錯(cuò)誤。

故選B。5、B【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性；誘導(dǎo)手段有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞，主要用于制備單克隆抗體。

2；制備單克隆抗體過程中的幾種細(xì)胞：①免疫B細(xì)胞（漿細(xì)胞）：能產(chǎn)生單一抗體；但不能無限增殖；②骨髓瘤細(xì)胞：能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體；③雜交瘤細(xì)胞：既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖。

【詳解】

A；①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的B淋巴細(xì)胞；A錯(cuò)誤；

B；誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有電激、聚乙二醇和滅活的病毒；B正確；

C；③中融合細(xì)胞有3類；同種融合細(xì)胞均不能在HAT培養(yǎng)基中生長，只有雜交瘤細(xì)胞即獲得了瘤細(xì)胞的無限增殖能力，又有B細(xì)胞的DNA復(fù)制途徑，可以生長增殖，C錯(cuò)誤；

D；④過程為從融合細(xì)胞到獲得分泌特異性抗體的細(xì)胞的過程；利用HAT選擇培養(yǎng)基篩選只能得到雜交瘤細(xì)胞，需要在經(jīng)過克隆化培養(yǎng)和專一抗體陽性檢測才能得到分泌特異性抗體的細(xì)胞，D錯(cuò)誤。

故選B。6、C7、A【分析】【分析】

果酒和果醋的區(qū)別在于果酒是由酵母菌進(jìn)行發(fā)酵；果醋是經(jīng)過醋酸菌進(jìn)行發(fā)酵。在發(fā)酵過程中被酵母菌發(fā)酵成酒精的酒；果醋就是將水果用現(xiàn)代生物科技技術(shù)釀制而成的一種酸味調(diào)味品。酵母菌發(fā)酵適宜的溫度在18至25攝氏度左右；醋酸菌則在30至35攝氏度左右。

【詳解】

A；新鮮的葡萄表面有野生的酵母菌；可以用作果酒的菌種，制作果酒時(shí)選擇新鮮的葡萄略加沖洗，除去枝梗后榨汁，A正確；

B；葡萄汁不宜裝滿（一般裝2/3左右）；避免發(fā)酵旺盛時(shí)汁液溢出，B錯(cuò)誤；

C；酒精發(fā)酵期間；根據(jù)發(fā)酵進(jìn)程適時(shí)擰松瓶蓋放氣，不能完全打開，C錯(cuò)誤；

D；果酒和果醋制作都是利用微生物發(fā)酵；因此需要適宜的條件使得相應(yīng)菌種適宜生長和繁殖，D錯(cuò)誤。

故選A。8、D【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲??；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測與表達(dá)。

2；從分子水平上檢測目的基因的方法：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

A；gRNA與目的基因結(jié)合區(qū)域最多含8種核苷酸（4種脫氧核苷酸和4種核糖核苷酸）；A錯(cuò)誤；

B；Cas9來自于細(xì)菌；細(xì)菌無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體，B錯(cuò)誤；

C；對(duì)不同基因進(jìn)行編輯時(shí)；由于基因序列不同，可能需要使用不同的gRNA，C錯(cuò)誤；

D；CRISPR/Cas9技術(shù)可改變基因堿基排列順序；也可以使某個(gè)基因因?yàn)閴A基序列改變而無法表達(dá)，D正確。

故選D。二、多選題(共6題，共12分)9、A:B:C【分析】【分析】

1.生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員；牲畜、毀壞植物的武器。生物武器又是生物制劑、載體和分散手段的綜合利用。生物武器自誕生以來；給人類的生存安全構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。

2.轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題包括食物安全；生物安全和環(huán)境安全。

3.“治療性克隆”將使人胚胎干細(xì)胞（簡稱ES細(xì)胞）造福于人類的一種非常重要的途徑。治療性克隆是指把患者體細(xì)胞移植到去核卵母細(xì)胞中構(gòu)建形成重組胚胎；體外培養(yǎng)到一定時(shí)期分離出ES細(xì)胞，獲得的ES細(xì)胞定向分化為所需的特定類型細(xì)胞（如神經(jīng)細(xì)胞；肌肉細(xì)胞和血細(xì)胞），用于治療。

【詳解】

A；對(duì)待生物武器的態(tài)度應(yīng)明確而堅(jiān)定；即在任何情況下都不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器，堅(jiān)決禁止生物武器，A正確；

B；中國對(duì)于克隆人的態(tài)度是禁止生殖性克隆人；但不反對(duì)治療性克隆，B正確；

C；對(duì)轉(zhuǎn)基因植物外源DNA要進(jìn)行認(rèn)真選擇；避免產(chǎn)生對(duì)人體有害的或過敏的蛋白質(zhì)，C正確；

D；一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題；要馬上停止實(shí)驗(yàn)，并銷毀重組生物，D錯(cuò)誤。

故選ABC。10、A:B【分析】【分析】

1；基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵；（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。

2；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

【詳解】

A；外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機(jī)的；因而極有可能破壞原有基因，并使之表達(dá)受到影響，A錯(cuò)誤；

B；目前科學(xué)家對(duì)基因的結(jié)構(gòu)、基因間的相互作用以及基因的調(diào)控機(jī)制等都了解相當(dāng)有限；再加上轉(zhuǎn)移的基因雖然是功能已知的基因，但不少卻是異種生物的基因，因此可能會(huì)引起安全性問題，B錯(cuò)誤；

C；在“轉(zhuǎn)基因”的過程中；必然用到工具酶，如限制酶和DNA連接酶，C正確；

D；轉(zhuǎn)基因技術(shù)成果在農(nóng)業(yè)和醫(yī)藥上發(fā)揮了極大的作用；已進(jìn)入人類的生產(chǎn)和生活，D正確。

故選AB。

【點(diǎn)睛】11、A:C【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環(huán)境；②營養(yǎng)；③溫度和pH；④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。

【詳解】

A；動(dòng)物細(xì)胞一般用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)；需要無菌、無毒的環(huán)境、基本營養(yǎng)物質(zhì)、適宜的溫度和pH、一定量的氧氣和二氧化碳等，A錯(cuò)誤；

B；由于動(dòng)物細(xì)胞分化程度高；雖然細(xì)胞核內(nèi)具有該物種的全套遺傳物質(zhì)，但單個(gè)細(xì)胞不能形成完整生物體，所以目前還不能通過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)獲得生物體，B正確；

C；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中；需要氧氣滿足細(xì)胞代謝，需要二氧化碳維持培養(yǎng)液的pH，C錯(cuò)誤；

D；通過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可以生產(chǎn)生物制品；可以培養(yǎng)皮膚移植的材料，還可以檢測有毒物質(zhì)等，D正確。

故選AC。12、B:C:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)：1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。2、原理：DNA復(fù)制。3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；過程①是由mRNA形成單鏈DNA的過程；表示逆轉(zhuǎn)錄，需要RNA、逆轉(zhuǎn)錄酶、引物、脫氧核苷酸等條件，A錯(cuò)誤；

B；真核細(xì)胞中DNA的外顯子部分轉(zhuǎn)錄的RNA拼接形成mRNA；因此真核細(xì)胞的mRNA經(jīng)過程①②逆轉(zhuǎn)錄過程獲得的DNA無內(nèi)含子片段，B正確；

C；CG含量越高；氫鍵越多，結(jié)構(gòu)越穩(wěn)定，因此過程③PCR擴(kuò)增時(shí)引物中的CG含量會(huì)影響退火溫度，C正確；

D；新冠病毒遺傳物質(zhì)是RNA；RT-PCR技術(shù)可應(yīng)用于新冠病毒的核酸檢測，D正確。

故選BCD。

【點(diǎn)睛】13、A:B:D【分析】【分析】

分析題文描述和題圖：圖示為采用稀釋涂布平板法分離常乳樣品中細(xì)菌總量的流程圖。首先將常乳樣品進(jìn)行一系列梯度稀釋，然后取1×105倍稀釋的稀釋液0.1mL分別涂布到3個(gè)平板上進(jìn)行培養(yǎng)。為了防止雜菌污染；稀釋涂布平板的所有操作都應(yīng)控制無菌條件。

【詳解】

A；為了防止雜菌污染；倒平板時(shí)應(yīng)將培養(yǎng)皿打開一條細(xì)縫，不要完全打開，A正確；

B；為了檢測一份常乳樣品中細(xì)菌的總量；圖示對(duì)常乳樣品進(jìn)行了一系列梯度稀釋，由此可見，上述方法是稀釋涂布平板法，培養(yǎng)基要營養(yǎng)全面，適合各種細(xì)菌生長，B正確；

C；通過連續(xù)劃線的方法接種；不易分離出單個(gè)菌落，不能用于微生物的計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；

D、取1×105倍稀釋的稀釋液0.1mL分別涂布到3個(gè)平板上進(jìn)行培養(yǎng)，若三個(gè)平板上的菌落平均數(shù)為59，則所每毫升樣品中細(xì)菌總數(shù)為59÷0.1×105＝5.9×107；D正確。

故選ABD。14、A:B:D【分析】【分析】

限制酶能識(shí)別雙鏈DNA中特定的核苷酸序列并進(jìn)行切割；具有特異性；DNA連接酶將不同的DNA片段連接成DNA鏈。

【詳解】

A、根據(jù)圖2所示，基因P上有限制酶SPeⅠ的一個(gè)酶切位點(diǎn)，基因P的總長度960bp；所以經(jīng)酶切后可以得到兩個(gè)小于960的片段，符合圖3中的Ⅰ，A正確；

B、根據(jù)圖2所示，基因Q上有限制酶XbaⅠ的一個(gè)酶切位點(diǎn)，基因P的總長度為840bP；所以經(jīng)酶切后可以得到兩個(gè)小于840的片段，符合圖3中的Ⅱ，B正確；

CD、融合基因中沒有限制酶SPeⅠ和限制酶XbaⅠ的酶切位點(diǎn)；所以用這兩種端處理都不會(huì)斷開，因此處理之后只有一個(gè)片段，符合圖3中的Ⅳ，C錯(cuò)誤，D正確。

故選ABD。三、填空題(共9題，共18分)15、略

【解析】遺傳和生理16、略

【分析】【詳解】

生物武器種類：包括致病菌、病毒、生化毒劑，以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果?！窘馕觥竣?直接②.食物③.生活必需品17、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人們的愿望；進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦子生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，因此又叫做DNA重組技術(shù)。

基因工程的原理是基因重組；其優(yōu)點(diǎn)是打破了生殖隔離。但由于科學(xué)發(fā)展水平的限制，目前科學(xué)家對(duì)基因的結(jié)構(gòu)；基因間的相互作用以及基因的調(diào)控機(jī)制等都了解得相當(dāng)有限；再加上轉(zhuǎn)移的基因雖然是功能已知的基因，但不少卻是異種生物的基因；同時(shí)，由于外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機(jī)的，因此在轉(zhuǎn)基因生物中，有時(shí)候會(huì)出現(xiàn)一些人們意想不到的后果。

【詳解】

（1）轉(zhuǎn)基因生物具有以下優(yōu)點(diǎn)：

作物產(chǎn)量高；能解決糧食短缺問題；利用基因工程生產(chǎn)的抗蟲作物能夠減少農(nóng)藥使用，減少環(huán)境污染；利用基因工程培育的生長迅速；營養(yǎng)品豐富的生物，能增加食物營養(yǎng)，提高附加值；利用基因工程培育微生物，能夠生產(chǎn)稀缺的生化藥物。

（2）轉(zhuǎn)基因生物受限于科學(xué)發(fā)展水平；可能會(huì)產(chǎn)生以下問題：

轉(zhuǎn)基因生物與同種生物雜交；可能產(chǎn)生重組病菌；重組病毒或超級(jí)雜草；導(dǎo)入轉(zhuǎn)基因生物的外源基因有可能與感染轉(zhuǎn)基因生物的某些細(xì)菌或病毒雜交，從而重組出對(duì)人類或其他生物有害的病原體，可能使疾病的傳播跨越物種障礙。

（3）轉(zhuǎn)基因技術(shù)取得了巨大的成果；但科學(xué)技術(shù)是把雙刃劍，面對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，而不能因噎廢食。

【點(diǎn)睛】

本題考查轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題，意在考查學(xué)生對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性問題的識(shí)記與理解?！窘馕觥拷鉀Q糧食短缺問題減少農(nóng)藥使用，減少環(huán)境污染增加食物營養(yǎng)，提高附加值能產(chǎn)生有毒蛋白或新過敏原可能產(chǎn)生重組病菌、重組病毒或超級(jí)雜草可能使疾病的傳播跨越物種障礙趨利避害不能因噎廢食18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】兼性厭氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO219、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】穩(wěn)定存在遺傳至下一代表達(dá)和發(fā)揮20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】無菌毛霉其他菌種21、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，其結(jié)果是生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)?！窘馕觥康鞍踪|(zhì)工程的結(jié)果是生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)22、略

【分析】略【解析】營養(yǎng)無菌、無毒的環(huán)境適宜的溫度、pH和滲透壓氣體環(huán)境23、略

【分析】略【解析】目的基因標(biāo)記基因啟動(dòng)子終止子啟動(dòng)子上游RNA聚合酶終止子下游轉(zhuǎn)錄標(biāo)記四、判斷題(共3題，共9分)24、A【分析】【分析】

早期胚胎發(fā)育從受精卵開始；當(dāng)卵裂分裂到16-32個(gè)細(xì)胞時(shí)，卵裂產(chǎn)生的子細(xì)胞逐漸形成致密的細(xì)胞團(tuán)，形似桑葚時(shí)，這時(shí)的胚胎稱為桑葚胚，這一階段及之前的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，屬于全能細(xì)胞。胚胎進(jìn)一步發(fā)育，細(xì)胞開始出現(xiàn)分化，形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)；滋養(yǎng)層；隨著胚胎進(jìn)一步發(fā)育，胚胎內(nèi)部出現(xiàn)了含有液體的囊腔—囊胚腔，這個(gè)時(shí)期的胚胎叫做囊胚。胚胎發(fā)育至囊胚期時(shí)，細(xì)胞逐漸分化。

【詳解】

囊胚時(shí)期聚集在胚胎一端的細(xì)胞形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來發(fā)育成胚胎的各種組織，即發(fā)育成完整的胚胎，而沿透明帶內(nèi)壁拓展和排列的細(xì)胞，稱為滋養(yǎng)層細(xì)胞，它們將來發(fā)育成胎膜和胎盤，為胚胎的發(fā)育提供營養(yǎng)，故“胚胎發(fā)育至囊胚期時(shí)，細(xì)胞逐漸分化表述”正確。25、B【分析】【詳解】

基因工程技術(shù)可以使建立移植器官工廠的設(shè)想成為現(xiàn)實(shí)；說明并未開始實(shí)際應(yīng)用。

故錯(cuò)誤。26、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）；對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。我國對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是一貫的、明確的，就是研究上要大膽，堅(jiān)持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴(yán)格，堅(jiān)持依法監(jiān)管。

該說法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共18分)27、略

【分析】【分析】

自然界中目的菌株的篩選要根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求；到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找，要分離尿素細(xì)菌應(yīng)該使用只含有尿素為唯一氮源培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，這樣的培養(yǎng)基其他細(xì)菌不能生存，存活下來的細(xì)菌則是可以分解尿素。

【詳解】

（1）自然界中目的菌株的篩選要根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求；到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找，要獲得分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)到含尿素較多的土壤中去取樣，圖2中培養(yǎng)基為微生物提供碳源的是葡萄糖，提供氮源的是尿素；

（2）甲為液體培養(yǎng)基；乙為固體培養(yǎng)基，唯一的區(qū)別在于甲培養(yǎng)基內(nèi)無瓊脂；

（3）為了保證結(jié)果的準(zhǔn)確性；一般應(yīng)選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，在30-300范圍內(nèi)的菌落數(shù)說明稀釋比較成功；

（4）酚紅遇堿變紅；合成的脲酶將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)；

（5）該小組采用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)土壤溶液中活菌的數(shù)目時(shí)；統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)比活菌的實(shí)際數(shù)目低，是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌落連在一起時(shí)，只能統(tǒng)計(jì)一個(gè)菌落，細(xì)菌還可以使用顯微鏡直接計(jì)數(shù)。

【點(diǎn)睛】

熟記并理解微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)、微生物的分離與計(jì)數(shù)等相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)、形成清晰的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)，在此基礎(chǔ)上從題意中提取信息并進(jìn)行作答。【解析】含尿素較多的土壤中葡萄糖尿素甲中培養(yǎng)基無瓊脂30~300的平板（則說明稀釋操作比較成功）合成的脲酶將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)低顯微鏡直接計(jì)數(shù)28、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本工具：限制性內(nèi)切核酸酶；識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開。DNA連接酶，將兩個(gè)DNA片段連接起來，恢復(fù)被限制酶切開的磷酸二酯鍵。載體，將外源基因送入受體細(xì)胞。

2；基因工程的基本過程：目的基因的篩選與獲??；基因表達(dá)載體的構(gòu)建，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，目的基因的檢測和鑒定。

【詳解】

（1）過程①包括逆轉(zhuǎn)錄和PCR，逆轉(zhuǎn)錄需要反轉(zhuǎn)錄酶的參與，PCR過程需要耐高溫的DNA聚合酶。限制酶的作用是識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開，對(duì)比幾種限制酶的結(jié)合位點(diǎn)和DGAT1-F、DGAT1-R的堿基序列，可知過程②應(yīng)選用的限制酶是BamHI和XbaI。

（2）將克隆載體導(dǎo)入大腸桿菌；可以與外界環(huán)境隔離，能夠穩(wěn)定保存，準(zhǔn)確復(fù)制，大腸桿菌比基因方便取用，故選①②④。

（3）根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的分布可知所用接種方法是稀釋涂布平板法?？寺≥d體中含有氨芐青霉素抗性基因；1acZ基因；1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-ga1和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色，所以為篩選獲得目標(biāo)菌株，培養(yǎng)基應(yīng)加入的成分有氨芐青霉素、X-gal、IPTG。

（4）pBI121質(zhì)粒中含有卡那霉素抗性基因，所以經(jīng)轉(zhuǎn)化后的四尾柵藻接種于含卡那霉素的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng)，一段時(shí)間后觀察其生長情況。在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數(shù)個(gè)單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng)，液體培養(yǎng)基可以用于擴(kuò)大培養(yǎng)，增加四尾柵藻種群密度。上一步驟中用未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻作對(duì)照，所以利用索氏抽提法分別測定（等量的）轉(zhuǎn)化后和未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻的油脂含量，從而檢測表達(dá)載體轉(zhuǎn)化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達(dá)?！窘馕觥?1)反轉(zhuǎn)錄酶、耐高溫的DNA聚合酶BamHIXbaI

(2)①②④

(3)稀釋涂布平板法氨芐青霉素；X-gal、IPTG

(4)卡那霉素?cái)U(kuò)大培養(yǎng)（等量的）轉(zhuǎn)化后和未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻29、略

【分析】【分析】

1；基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：

①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因DNA分子雜交技術(shù)；

②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；

③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗原一抗體雜交技術(shù)。

④個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

2；圖1中①-④依次為目的基因的獲取、表達(dá)載體的構(gòu)建、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測。

（1）

PCR是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，需要Taq酶，但Taq酶不能從頭開始合成DNA，前提條件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物，因此需要根據(jù)目的基因fabV基因的兩端按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則設(shè)計(jì)引物。至少需要經(jīng)過4次擴(kuò)增才能獲的8個(gè)雙鏈等長的目的基因。

（2）

基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，題干信息顯示C基因在低溫下會(huì)抑制P2，R基因在高溫下會(huì)抑制P1，說明P2啟動(dòng)子在高溫下可以啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄；P1啟動(dòng)子在低溫下可以啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄。題目顯示高溫下只表達(dá)lacz蛋白，則lacZ基因要插在“高溫下不被抑制”的啟動(dòng)子的后面，即P2→T2之間；GFP基因要低溫下表達(dá)，則插入位置要在P1→T1之間；且不破壞C基因和R基因。

（3）

因?yàn)閒abV（從霍亂弧菌中發(fā)現(xiàn)的烯脂酰ACP還原酶）基因可以使大腸桿菌抵抗三氯生；大腸桿菌能在含三氯生的培養(yǎng)基上生長，說明大腸桿菌插入重組質(zhì)粒，且依據(jù)是低溫下有綠色熒光高溫下無綠色熒光。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，要求學(xué)生熟練掌握基因工程的原理、步驟及相關(guān)的目的，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)，結(jié)合題目要求解決相關(guān)問題?！窘馕觥?1)目的基因（fabV基因）兩端堿基序列4

(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建P2→T2插在P1→T1之間；且不破壞C基因和R基因。

(3)三氯生低溫下有綠色熒光，高溫下無綠色熒光六、綜合題(共3題，共6分)30、略

【分析】【分析】

【詳解】

（1）放線菌的抗生素耐藥基因“跳躍”至病原細(xì)菌的DNA序列上；與病原細(xì)菌的DNA發(fā)生重新組合，屬于DNA（基因）重組。

（2）病原細(xì)菌從周圍環(huán)境中吸收b；稱為細(xì)菌的轉(zhuǎn)化。

（3）據(jù)圖可知，病原細(xì)菌將吸收的b整合到自己的擬核上；從而獲得抗生素耐藥性。序列a在耐藥基因轉(zhuǎn)移過程中起到了載體的作用。

（4）據(jù)圖可知；病原細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性的途徑包括：通過（特異性或多重耐藥）外排泵將抗生素排出細(xì)胞外，降低胞內(nèi)抗生素濃度而表現(xiàn)出抗性；通過對(duì)抗生素靶位點(diǎn)的修飾，使抗生素?zé)o法與之結(jié)合而表現(xiàn)出抗性；通過抗生素失活酶使抗生素降解，失去功能。

（5）從進(jìn)化的角度分析；細(xì)菌耐藥性增強(qiáng)的原因是抗生素對(duì)病原細(xì)菌的選擇作用，導(dǎo)致病原細(xì)菌中耐藥基因頻率增大。

（6）抗生素在醫(yī)療以及養(yǎng)殖業(yè)中的大量使用是抗生素耐藥性蔓延的主要原因；因此嚴(yán)格管理抗生素的使用，減少向自然環(huán)境的排放，研制新型替代藥物，加強(qiáng)科普宣傳，提高公眾的認(rèn)識(shí)，減少抗生素的濫用，均可以減緩抗生素耐藥性的蔓延。

【點(diǎn)睛】

本題考查現(xiàn)代生物進(jìn)化理論，考查生物進(jìn)化實(shí)質(zhì)的理解。解答此題，可把病原細(xì)菌獲得耐藥基因的過程與基因工程類比，分析其原理；根據(jù)圖解，分