2025年湘教新版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年湘教新版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷305考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、關(guān)于DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.DNA不溶于體積分?jǐn)?shù)為95%的預(yù)冷酒精B.香蕉、魚卵或豬血都是理想的實(shí)驗(yàn)材料C.提取植物材料的DNA需先研磨破碎細(xì)胞D.沸水浴中二苯胺試劑與DNA反應(yīng)呈藍(lán)色2、小鼠胚胎干細(xì)胞可從小鼠的囊胚中獲取，經(jīng)定向誘導(dǎo)可獲得多種功能細(xì)胞。下列敘述正確的是（）A.為獲得更多的囊胚，需采用激素注射促進(jìn)雄鼠產(chǎn)生更多的精子B.胚胎干細(xì)胞和其他細(xì)胞的全能性不同是由于含有的核基因不同C.用胰蛋白酶將胚胎組織細(xì)胞的膜蛋白消化后可獲得分散的細(xì)胞D.胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)出的各種細(xì)胞都需在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)3、關(guān)于利用細(xì)胞工程方法，以H7N9病毒的核衣殼蛋白為抗原制備單克隆抗體，下列相關(guān)敘述正確的是（）A.用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體B.體外培養(yǎng)單個(gè)已免疫的B淋巴細(xì)胞可以獲得大量抗H7N9病毒的單克隆抗體C.將等量已免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞D.利用該單克隆抗體與H7N9病毒的核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出H7N9病毒感染者4、已知?jiǎng)偣t是一種染料，它可以與纖維素反應(yīng)形成紅色復(fù)合物，但并不與水解后的纖維二糖、葡萄糖等發(fā)生這種反應(yīng)。為純化菌種，在含有剛果紅的鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細(xì)菌，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是（）

A.倒平板后需間歇晃動(dòng)，以保證表面平整B.圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落C.該實(shí)驗(yàn)結(jié)果因單菌落太多，不能達(dá)到菌種純化的目的D.菌落周圍的纖維素被降解后，可與剛果紅反應(yīng)發(fā)成磚紅色5、某課題組為得到青蒿素產(chǎn)量高的新品系，通過(guò)一定的技術(shù)，使青蒿素合成過(guò)程的某一關(guān)鍵酶基因fps在野生青蒿中得到了過(guò)量表達(dá)，其過(guò)程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.PCR過(guò)程中，溫度需要控制在90℃以上的目的是破壞氫鍵B.構(gòu)建重組質(zhì)粒過(guò)程中，目的基因需插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上C.基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止密碼子和標(biāo)記基因等D.用熒光標(biāo)記的fps基因作為探針可以檢測(cè)目的基因是導(dǎo)入成功6、用PCR方法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因植株是否成功導(dǎo)入目的基因時(shí)，得到以下電泳圖譜。其中1號(hào)為DNA標(biāo)準(zhǔn)樣液（Marker），10號(hào)為蒸餾水，PCR時(shí)加入的模板DNA如圖所示。據(jù)此作出的分析，不合理的是（）

A.PCR產(chǎn)物的分子大小在250-500bp之間B.3號(hào)樣品為不含目的基因的載體DNAC.9號(hào)樣品對(duì)應(yīng)植株不是所需的轉(zhuǎn)基因植株D.10號(hào)確定反應(yīng)體系等對(duì)結(jié)果沒(méi)有干擾7、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，相關(guān)敘述正確的是（）A.因?yàn)閯?dòng)物血清成分已研究清楚，所以在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中加入動(dòng)物血清B.懸浮培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞會(huì)因細(xì)胞密度過(guò)大、發(fā)生接觸抑制等因素而分裂受阻C.體外培養(yǎng)從牛卵巢采集的卵母細(xì)胞，細(xì)胞表面相互接觸時(shí)細(xì)胞才停止分裂增殖D.將小鼠成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)為多能干細(xì)胞，體外分化后可治療小鼠的鐮狀細(xì)胞貧血評(píng)卷人得分二、多選題(共6題，共12分)8、研究人員從土壤中篩選得到酵母菌纖維素酶高產(chǎn)菌株；并對(duì)其降解纖維素的條件進(jìn)行了研究。據(jù)圖分析正確的是（）

A.篩選該高產(chǎn)菌株需要在纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)B.探究最適溫度時(shí)應(yīng)盡可能將發(fā)酵液的pH控制在9左右C.該酵母菌高產(chǎn)菌株產(chǎn)生纖維素酶的最適溫度是35℃D.利用該高產(chǎn)菌株降解纖維素時(shí)需嚴(yán)格保持厭氧環(huán)境9、營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株是野生型菌株經(jīng)過(guò)人工誘變或自發(fā)突變失去合成某種生長(zhǎng)因子的能力，只能在補(bǔ)充了相應(yīng)的生長(zhǎng)因子的基本培養(yǎng)基中才能正常生長(zhǎng)的變異菌株。某研究小組對(duì)酵母菌用紫外線照射后將其接種到甲培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基上，一段時(shí)間后將甲培養(yǎng)皿的菌落影印接種（不改變菌落位置）到乙、丙兩培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基中，進(jìn)一步培養(yǎng)得到如下圖所示結(jié)果。下列分析正確的是（）

A.接種到甲培養(yǎng)皿采用的是稀釋涂布平板法B.甲、丙兩培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基C.甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少D.乙中生長(zhǎng)的酵母菌都不屬于營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株10、白地霉侵染是導(dǎo)致柑橘酸腐病的主要原因，實(shí)驗(yàn)證明桔梅奇酵母通過(guò)分泌普切明酸對(duì)白地霉具有生物防治能力。已知鐵是真菌生長(zhǎng)的必需元素，是胞內(nèi)重要酶活性中心的組成部分。普切明酸是桔梅奇酵母產(chǎn)生的一種水溶性鐵螯合劑，能快速在培養(yǎng)基中擴(kuò)散并與其中的Fe3+形成穩(wěn)定紅色復(fù)合物。研究配制的含有不同濃度FeCl3的培養(yǎng)基如下表所示。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為隨FeCl3濃度增大，抑菌圈紅色加深但變窄，如下圖所示。相關(guān)敘述正確的是（）。成分MgSO4NaH2PO4蛋白胨FeCl3溶液水瓊脂用量5g7g15g500mL7g20g

A.蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素，瓊脂不是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)B.白地霉采用了平板劃線法，桔梅奇酵母采用了涂布平板法C.結(jié)果表明，F(xiàn)eCl3濃度增大，普切明酸與Fe3+結(jié)合的數(shù)量減少D.結(jié)果表明，F(xiàn)eCl3能降低桔梅奇酵母對(duì)白地霉的防治效果11、茯磚茶的制作包括發(fā)酵與發(fā)花等工序，發(fā)酵前要下“誘水”，下“誘水”就是將原有老茶煮水后噴灑在料堆之上。發(fā)花可使磚茶原料在加工過(guò)程中形成“金花”，學(xué)名“冠突散囊菌”——茶界“益生菌”，也是國(guó)家茶業(yè)界二級(jí)機(jī)密保護(hù)菌種。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.茯磚茶的制作需利用酵母菌等多種細(xì)菌進(jìn)行發(fā)酵B.下“誘水”相當(dāng)于微生物培養(yǎng)過(guò)程中的“接種”，推測(cè)相關(guān)菌種可耐熱C.發(fā)酵過(guò)程涉及多種酶催化，發(fā)酵后飲用有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收D.茯磚茶發(fā)酵完成后要滅菌并密封，有利于長(zhǎng)期保存12、玉米秸稈轉(zhuǎn)化為綠色能源酒精是解決能源危機(jī)的措施之一，具體的工藝流程如圖所示。下列敘述正確的是（）

A.用酸或堿預(yù)處理有利于酶與底物充分接觸，提高催化效率B.步驟③中，酵母菌在發(fā)酵初期更多分布在發(fā)酵液的上層C.隨培養(yǎng)次數(shù)的增加，分離出的菌落類型越少表示純度越高，其遺傳基因型越穩(wěn)定D.發(fā)酵過(guò)程中酒精濃度升高會(huì)抑制酵母菌代謝活動(dòng)，同時(shí)使發(fā)酵液pH降低，發(fā)酵停止13、克隆動(dòng)物常用的核移植方法主要有細(xì)胞質(zhì)內(nèi)注射法和透明帶下注射法兩種。前者是用微型注射針將供體細(xì)胞的細(xì)胞核吸出注入去核卵母細(xì)胞質(zhì)內(nèi)；后者是直接將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞透明帶內(nèi)，然后促使兩個(gè)細(xì)胞融合。世界首例體細(xì)胞克隆北極狼的供體細(xì)胞來(lái)自哈爾濱極地公園的一只野生北極狼的皮膚樣本，卵母細(xì)胞來(lái)自一只處于發(fā)情期的母犬，代孕母體則是一只比格犬。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.克隆北極狼的性狀由野生北極狼、發(fā)情期的母犬和比格犬的基因共同決定B.相比之下，透明帶下注射法對(duì)供體細(xì)胞核和卵母細(xì)胞的損傷更小C.供體細(xì)胞注入卵母細(xì)胞透明帶內(nèi)后，就可自行進(jìn)入卵母細(xì)胞D.細(xì)胞分裂、分化形成克隆胚胎的過(guò)程中發(fā)生了基因重組評(píng)卷人得分三、填空題(共8題，共16分)14、20世紀(jì)70年代以后；以基因工程為代表的一大批生物技術(shù)成果，進(jìn)入人類的生產(chǎn)和生活，特別是在醫(yī)藥和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上發(fā)揮了極大的作用，但是與其他高新技術(shù)一樣，生物技術(shù)也同樣具有雙刃劍效應(yīng)。如同其他高新技術(shù)一樣，轉(zhuǎn)基因成果和轉(zhuǎn)基因技術(shù)也需要你的理性看待。在轉(zhuǎn)基因生物安全方面；

（1）你認(rèn)為轉(zhuǎn)基因生物有哪些優(yōu)點(diǎn)，①____________②___________③__________。

（2）你認(rèn)為轉(zhuǎn)基因生物有哪些缺點(diǎn)，①____________②___________③__________。

（3）你對(duì)于轉(zhuǎn)基因生物的態(tài)度是__________。15、統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目_____________。這是因?yàn)開_____________________。因此，統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用而不是用活菌數(shù)來(lái)表示。除了上述的活菌計(jì)數(shù)法外，______________也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。16、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的______——“分子運(yùn)輸車”17、功能：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中______部位的兩個(gè)核苷酸之間的______斷開，因此具有______。18、去除DNA中的雜質(zhì)，可以在濾液中加入2mol/L濃度的NaCL溶液，目的是____去除__________________；再調(diào)節(jié)NaCL溶液濃度為0．14mol/L，目的是_______________，_______________去除_______________；最后用濃度為2mol/L的NaCL溶液重新溶解________________19、植物繁殖的新途徑。

微型繁殖：可以高效快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖。

作物脫毒：采用______組織培養(yǎng)來(lái)除去病毒（因?yàn)橹参锓稚鷧^(qū)附近的病毒______）

人工種子：以植物組織培養(yǎng)得到的______、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)_____包裝得到的種子。優(yōu)點(diǎn)：完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性，______；方便儲(chǔ)藏和運(yùn)輸。

人工種子的結(jié)構(gòu)包括：______、_____和______。20、有時(shí)還需進(jìn)行______的鑒定。如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)______。21、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似，只是前者熱穩(wěn)定性較差，進(jìn)入人體后容易失效。嘗試根據(jù)本節(jié)課所學(xué)知識(shí)提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共8分)22、要對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，最終必須通過(guò)改造氨基酸序列來(lái)完成。（選擇性必修3P94）()A.正確B.錯(cuò)誤23、轉(zhuǎn)入油菜的抗除草劑基因，可能通過(guò)花粉傳入環(huán)境中。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共1題，共8分)24、【生物技術(shù)實(shí)踐】

科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白；這種蛋白質(zhì)具有極強(qiáng)的抗菌能力，受到研究者重視。

（1）分離該抗菌蛋白可用電泳法，其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的______________、大小及形狀不同，在電場(chǎng)中的________不同而實(shí)現(xiàn)分離。

（2）可用金黃色葡萄球菌來(lái)檢驗(yàn)該蛋白的抗菌特性。抗菌實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為細(xì)菌生長(zhǎng)提供_________和_______________。

（3）分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種等量菌液。培養(yǎng)一定時(shí)間后，比較兩種培養(yǎng)基中菌落的_____________；確定該蛋白質(zhì)的抗菌效果。

（4）細(xì)菌培養(yǎng)常用的接種方法有_______和___________。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行_____________處理。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共24分)25、根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)；回答下列問(wèn)題：

（1）限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型有________________和_________________。

（2）質(zhì)粒運(yùn)載體用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如圖：

為使運(yùn)載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割，該酶必須具有的特點(diǎn)是________________________________________。

（3）根據(jù)來(lái)源的不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即_______DNA連接酶和________DNA連接酶。

（4）基因工程中除質(zhì)粒外，________________和_____________也可作為運(yùn)載體。

（5）若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，原因是________________________________。

（6）基因工程核心的步驟是____________________________，這一過(guò)程需要用到的工具酶主要是_______________________________________。26、通過(guò)細(xì)胞工程技術(shù)；利用甲；乙兩種植物的各自優(yōu)勢(shì)（甲耐鹽、乙高產(chǎn)），培育高產(chǎn)耐鹽的雜種植株。請(qǐng)完善下列實(shí)驗(yàn)流程并回答問(wèn)題：

（1）A是________________酶，D是具有________優(yōu)良性狀的幼芽。D長(zhǎng)成的幼苗需要選擇的原因是______________________________________。

（2）由C形成植株的過(guò)程利用了________________技術(shù)，愈傷組織形成D需要經(jīng)過(guò)________過(guò)程。整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程要在________的條件下進(jìn)行。

（3）植物體細(xì)胞融合成功的標(biāo)志是__________________。這項(xiàng)新技術(shù)具有的重要意義是_____________________。

（4）已知甲、乙植物分別為四倍體、二倍體，則“甲——乙植株”屬于________倍體植株。27、迄今為止新型冠狀病毒仍在全球傳播；接種疫苗是預(yù)防新型冠狀病毒的有效手段。

(1)某科研單位以新型冠狀病毒的S蛋白及此蛋白上受體結(jié)合域（RBD）作為免疫原靶點(diǎn)成分，設(shè)計(jì)研制重組蛋白疫苗。構(gòu)建重組RBD基因時(shí)加入了GP67信號(hào)肽基因序列，然后以及Bac-to-Bac桿狀病毒作為重組基因的_____，以昆蟲細(xì)胞作為_____表達(dá)RBD蛋白；加入獨(dú)有的AddaVax佐劑，制備了RBD蛋白二聚體疫苗。

(2)我國(guó)科興及北京生物兩款新冠滅活疫苗均使用Vero細(xì)胞（非洲綠猴腎細(xì)胞的傳代細(xì)胞系）進(jìn)行病毒擴(kuò)增培養(yǎng)。

①Vero細(xì)胞的合成培養(yǎng)基中通常加入_____等天然成分，Vero細(xì)胞的傳代培養(yǎng)過(guò)程中需要使用_____使細(xì)胞分傲。

②采用細(xì)胞工程技術(shù)生產(chǎn)新型冠狀病毒的單克隆抗體，需要從已痊愈的志愿者體內(nèi)獲得一定量的_____細(xì)胞，并將其與小鼠的_____細(xì)胞進(jìn)行融合。融合后的細(xì)胞經(jīng)篩選后還需要進(jìn)行_____處理，并通過(guò)_____檢測(cè)才能獲得所需的雜交瘤細(xì)胞。

③雜交瘤細(xì)胞所產(chǎn)生的單克隆抗體具有的優(yōu)點(diǎn)是_____。28、非霍奇金淋巴瘤是一種起源于淋巴組織的血液系統(tǒng)惡性腫瘤（細(xì)胞表面高表達(dá)CD19蛋白）治療方法是利用基因工程的方法使T細(xì)胞表達(dá)能足夠靶定抗原的受體（CAR）；改造后的T細(xì)胞被稱為CAR-T，可以識(shí)別并攻擊帶有特定抗原的癌細(xì)胞，同時(shí)激活機(jī)體自免疫從而達(dá)到抗癌的效果。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)目前制造CAR-T細(xì)胞大部分是采用慢性病毒感染的方式使T細(xì)細(xì)胞表達(dá)CAR。

①獲得CAR基因（實(shí)質(zhì)為抗CD19蛋白的抗體基因）：將抗CD19蛋白的抗體基因作為PCR反應(yīng)的模板；并依據(jù)_____設(shè)計(jì)一個(gè)對(duì)特殊性引物來(lái)擴(kuò)大應(yīng)該的原因。

②構(gòu)建基因表達(dá)載體：圖1為所用載體示意圖；表格為限制酶的序列及切割位置。為使目標(biāo)與載體正確連接，在擴(kuò)增目標(biāo)基因時(shí)，應(yīng)在其引物的_____端別引入_____兩種不同限制酶的序列。目的基因和載體連接時(shí)，可選_____（選填“E.coliDNA連接酶”或“T4DNA連接酶”）。

③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：將重組質(zhì)粒通過(guò)_____技術(shù)導(dǎo)入T細(xì)胞。

④重組質(zhì)粒的篩選與確定：將轉(zhuǎn)化后的T細(xì)胞置于含_____培養(yǎng)基礎(chǔ)上進(jìn)行培養(yǎng)；通過(guò)流式細(xì)胞試驗(yàn)證明CAR-T細(xì)胞的結(jié)構(gòu)是否成功。

。限制酶識(shí)別順序HindIIIA↓AGCTTPvit2CAG↓CTGKpnIG↓GTACCEcoRIG↓AATTCPstICTGCA↓GBamHIG↓GATCC

(2)采用病毒作為傳遞體存在隨機(jī)插入的安全隱患；CRISPR/Cas9技術(shù)作為第三代基因編譯工具（圖2），sgRNA可引導(dǎo)Cas9蛋白在特定位置進(jìn)行切割來(lái)完成基因的編輯?？茖W(xué)家利用該技術(shù)制作的CAR-T細(xì)胞，在非霍奇金淋巴瘤臨床前的治療中取得理想成效。其操作原理如圖3所示。

①sgRNA能與基因特異識(shí)別；結(jié)合的原理是_____；基因編輯工具中對(duì)基因進(jìn)行剪切的是_____。

②細(xì)胞表面的PD-L1蛋白和T細(xì)胞表面的PD-1受體結(jié)合；發(fā)出免疫抑制信號(hào)，現(xiàn)實(shí)免疫逃逸。該研究小組利用CRISPR/Cas9技術(shù)切割T細(xì)胞中PD-1基因的同時(shí)導(dǎo)入靶向PD-1基因的同源重組序列，利用同源重組修復(fù)的原理將_____重組在PD-1基因內(nèi)部，制作了非病毒定點(diǎn)整合的CAR-T細(xì)胞，如圖3。

③綜上所述信息分析，與病毒感染的CAR-T細(xì)胞相比較，該方法產(chǎn)生的CAR-T細(xì)胞在非霍奇金淋巴瘤的治療中的優(yōu)勢(shì)有：可以_____插入抗CD19蛋白的抗體基因，降低隨機(jī)插入的安全隱患，提高CAR-T細(xì)胞的安全性；可以使PD-1基因突變，降低腫瘤細(xì)胞_____的可能性，提高CAR-T細(xì)胞的有效。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、B【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理：

1；DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于冷酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。

2；DNA的鑒定：在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色。

【詳解】

A、根據(jù)以上分析可知，DNA不溶于95%的冷酒精，但溶于2mol?L-1的NaCl溶液；A正確；

B；豬為哺乳動(dòng)物；其成熟的紅細(xì)胞中不含細(xì)胞核和細(xì)胞器，即不含DNA，因此不能作為該實(shí)驗(yàn)的材料，B錯(cuò)誤；

C；利用植物組織提取DNA時(shí)；須先破碎細(xì)胞，破碎細(xì)朐時(shí)需添加食鹽和洗滌劑進(jìn)行研磨，添加該物質(zhì)的目的是瓦解細(xì)胞膜，而加入食鹽的目的是溶解并提取DNA，C正確；

D；在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，D正確。

故選B。2、D【分析】【分析】

1；胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞；來(lái)源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）。

2；ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中；能夠維持不分化的狀態(tài)。在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，如?；撬?、丁酰環(huán)腺苷酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí)，就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化，這為揭示細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡機(jī)理提供了有效的手段。

【詳解】

A；為了獲得更多的囊胚；可以采用激素促進(jìn)成熟雌性個(gè)體超數(shù)排卵，然后將卵細(xì)胞從母體內(nèi)取出，在試管內(nèi)與人工采集的精子進(jìn)行體外受精，培育成胚胎，A錯(cuò)誤；

B；胚胎干細(xì)胞和其他細(xì)胞含有的核基因是相同的；而兩者的全能性不同是由于分化程度不同，B錯(cuò)誤；

C；運(yùn)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以從哺乳動(dòng)物的早期胚胎中獲得胚胎干細(xì)胞；首先必須用胰蛋白酶處理內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，分解細(xì)胞間的膠原蛋白等，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，C錯(cuò)誤；

D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要在5%CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；以維持培養(yǎng)液的pH，D正確；

故選D。3、D【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過(guò)程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原；從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞；將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞；克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有：物理法（離心；振動(dòng)）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）。

【詳解】

A；用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)；產(chǎn)生的血清抗體化學(xué)性質(zhì)不單一，不是單克隆抗體，A錯(cuò)誤；

B、體外培養(yǎng)單個(gè)已免疫的B淋巴細(xì)胞，由于該B淋巴細(xì)胞不能無(wú)限繁殖，所以無(wú)法獲得大量針對(duì)H7N9病毒的單克隆抗體；B錯(cuò)誤；

C；將等量B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合；經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞不都是雜交瘤細(xì)胞，還有B細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞，C錯(cuò)誤；

D、由于抗體具有專一性，該單克隆抗體是以H7N9病毒核衣殼蛋白為抗原制備出的，所以利用該單克隆抗體與H7N9病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者；D正確。

故選D。

【點(diǎn)睛】

本題考查了單克隆抗體制備的有關(guān)知識(shí)，考生要能夠識(shí)記制備過(guò)程以及制備過(guò)程中的相關(guān)注意點(diǎn)，注意細(xì)胞融合后產(chǎn)生的融合細(xì)胞不一定是雜交瘤細(xì)胞，篩選得到的雜交瘤細(xì)胞也不一定能夠產(chǎn)生單克隆抗體。4、B【分析】【分析】

微生物常見(jiàn)的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；倒平板時(shí)需左三圈；右三圈的輕輕晃動(dòng)，以保證表面平整，A錯(cuò)誤；

B；圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多；應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落，B正確；

C；由圖可知；該實(shí)驗(yàn)的Ⅲ區(qū)已經(jīng)出現(xiàn)由單個(gè)細(xì)菌繁殖而形成的菌落，所以該實(shí)驗(yàn)結(jié)果能達(dá)到菌種純化的目的，C錯(cuò)誤；

D；剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物；纖維素分解菌產(chǎn)生的纖維素酶可以水解纖維素而使菌落周圍出現(xiàn)無(wú)色透明圈，D錯(cuò)誤。

故選B。

【點(diǎn)睛】5、C【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成?；虮磉_(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。目的基因的檢測(cè)與鑒定。

【詳解】

A；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)；使反應(yīng)體系中的模板DNA解旋為單鏈的條件是加熱至90℃以上，目的是破壞DNA分子中的氫鍵，A正確；

B；構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒的過(guò)程中；需將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上，B正確；

C；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；終止密碼子位于mRNA上，C錯(cuò)誤；

D；檢驗(yàn)?zāi)康幕蚴欠窀窈系角噍锘蚪M中；可用DNA分子雜交法，即將fps基因制成基因探針，與青蒿基因組DNA雜交，而檢測(cè)目的基因是否表達(dá)，常用抗原-抗體雜交法，D正確。

故選C。6、B【分析】【分析】

PCR過(guò)程中，可以通過(guò)設(shè)計(jì)特定的引物來(lái)擴(kuò)增特定的DNA片段。4～9號(hào)是轉(zhuǎn)基因植株，理論上應(yīng)包含目的基因。9號(hào)PCR結(jié)果不包含250～500bp片段；所以不是所需轉(zhuǎn)基因植株。

【詳解】

A、PCR過(guò)程中，可以通過(guò)設(shè)計(jì)特定的引物來(lái)擴(kuò)增特定的DNA片段。4～9號(hào)是轉(zhuǎn)基因植株，理論上應(yīng)包含目的基因，結(jié)合2號(hào)野生型和10號(hào)蒸餾水組的結(jié)果，推測(cè)包含目的基因的片段大小應(yīng)為250～500bp；A正確；

B、3號(hào)PCR結(jié)果包含250～500bp片段；應(yīng)包含目的基因，B錯(cuò)誤；

C、9號(hào)PCR結(jié)果不包含250～500bp片段；所以不是所需轉(zhuǎn)基因植株，C正確；

D；10號(hào)放入蒸餾水；可排除反應(yīng)體系等對(duì)結(jié)果的干擾，D正確。

故選B。7、D【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是指從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的技術(shù)。

【詳解】

A；由于對(duì)動(dòng)物血清成分尚未全部研究清楚；因此在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中加入動(dòng)物血清，A錯(cuò)誤；

B；雜交瘤細(xì)胞具備腫瘤細(xì)胞可無(wú)限增殖的特點(diǎn)；因此不會(huì)發(fā)生接觸抑制等現(xiàn)象，B錯(cuò)誤；

C；體外培養(yǎng)從牛卵巢采集的卵母細(xì)胞；需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂才具備受精的能力，在受精過(guò)程中完成減數(shù)第二次分裂，因此體外培養(yǎng)的卵母細(xì)胞不會(huì)增殖分裂，C錯(cuò)誤；

D；將小鼠成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)為多能干細(xì)胞；體外分化后可治療小鼠的鐮狀細(xì)胞貧血，D正確。

故選D。二、多選題(共6題，共12分)8、A:B【分析】【分析】

分解纖維素微生物的分離實(shí)驗(yàn)原理：

（1）土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌；細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長(zhǎng)，其他微生物則不能生長(zhǎng)。

（2）在培養(yǎng)基中加入剛果紅；可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

【詳解】

A；篩選該高產(chǎn)菌株需要在纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)；A正確；

B；由pH與纖維素酶活性的曲線圖分析可知；當(dāng)pH為9時(shí)，纖維素酶的活性最高，故在探究最適溫度時(shí)應(yīng)盡可能將發(fā)酵液的pH控制在9左右，B正確；

C；由溫度與纖維素酶活性的曲線圖分析可知；當(dāng)溫度為35℃時(shí)纖維素酶的活性最大，但是由于缺少35℃之后的溫度實(shí)驗(yàn)組，故無(wú)法判斷該酵母菌高產(chǎn)菌株產(chǎn)生纖維素酶的最適溫度是35℃，C錯(cuò)誤；

D；酵母菌是兼性厭氧微生物；在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，故在降解初期需要給酵母菌提高有氧環(huán)境，以保證酵母菌的數(shù)量，D錯(cuò)誤。

故選AB。

【點(diǎn)睛】9、A:C:D【分析】【分析】

微生物常見(jiàn)的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種；劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；由甲平板觀察可知；平板中菌落分布均勻，采用的是稀釋涂布平板法，A正確；

B；由題圖信息分析可知；甲、丙培養(yǎng)基菌落數(shù)目多，含有野生型酵母菌菌株和某種營(yíng)養(yǎng)缺陷型酵母菌菌株，而乙培養(yǎng)皿菌株是某種營(yíng)養(yǎng)缺陷型酵母菌菌株，據(jù)此推測(cè)，乙培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基，甲和丙是補(bǔ)充了相應(yīng)的生長(zhǎng)因子的培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；

C；由于基因突變具有不定向性；因此接種到甲培養(yǎng)皿的酵母菌可能還有其他營(yíng)養(yǎng)缺陷型，且有些菌落不一定由一個(gè)酵母菌形成，故甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少，C正確；

D；由題圖信息分析可知；乙培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基，故該培養(yǎng)皿中能夠形成的菌落是野生型菌株，不屬于營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株，D正確。

故選ACD。10、A:D【分析】【分析】

1；培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)；根據(jù)物理性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。在提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求。

2；微生物常見(jiàn)的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素；瓊脂是凝固劑的一種，并不是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，在培養(yǎng)液中加入瓊脂可以使液體培養(yǎng)基成為瓊脂固體培養(yǎng)基，A正確；

B；白地霉、桔梅奇酵母的接種都采用了涂布平板法；B錯(cuò)誤；

C、隨培養(yǎng)基中FeCl3濃度的增加，普切明酸與Fe3+的結(jié)合增強(qiáng)；抑菌圈的紅色加深，C錯(cuò)誤；

D、普切明酸與Fe3+形成紅色復(fù)合物，但隨培養(yǎng)基中FeCl3濃度的增加，抑菌圈變窄，說(shuō)明FeCl3能降低桔梅奇酵母對(duì)白地霉的防治效果；D正確。

故選AD。11、A:D【分析】【分析】

根據(jù)題意分析：茯磚茶的制作包括發(fā)酵與發(fā)花等工序；發(fā)酵過(guò)程涉及多種酶催化，發(fā)酵后飲用有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。

【詳解】

A；酵母菌是真菌；不是細(xì)菌，A錯(cuò)誤；

B；下“誘水”就是將原有老茶煮水后噴灑在料堆之上；相當(dāng)于微生物培養(yǎng)過(guò)程中的“接種”，推測(cè)相關(guān)菌種可耐熱，B正確；

C；發(fā)酵過(guò)程涉及多種酶催化；發(fā)酵后富含多種小分子營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，因此發(fā)酵后飲用有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，C正確；

D；茯磚茶在儲(chǔ)藏過(guò)程中仍然繼續(xù)自然發(fā)酵；因此滅菌并密封處理，不利于長(zhǎng)期保存，D錯(cuò)誤。

故選AD。12、A:B:C【分析】【分析】

用玉米秸稈生產(chǎn)燃料酒精是利用微生物進(jìn)行生物發(fā)酵的過(guò)程；所利用的微生物為酵母菌，通過(guò)酒精發(fā)酵將葡萄糖轉(zhuǎn)化為酒精，玉米秸稈中含有的糖類主要是纖維素，因此需要先將纖維素水解成葡萄糖，再進(jìn)行發(fā)酵。

【詳解】

A；由于纖維素組成成分復(fù)雜、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定；生物降解時(shí)難以迅速進(jìn)行，常用酸或堿進(jìn)行預(yù)處理，初步打斷纖維素內(nèi)部的化學(xué)鍵，降低聚合度，利于酶與底物充分接觸，提高催化效率，A正確；

B；在有氧的條件下酵母菌進(jìn)行出芽生殖；上層培養(yǎng)液與空氣接觸部位氧氣較多，短時(shí)間內(nèi)酵母菌更多分布在發(fā)酵液的上層，B正確；

C；在選擇培養(yǎng)基中經(jīng)多次培養(yǎng)；分離出的菌落類型越少表示純度越高，其遺傳基因型越穩(wěn)定，C正確；

D、發(fā)酵液pH下降是因?yàn)楫a(chǎn)生了CO2；D錯(cuò)誤。

故選ABC。13、A:C:D【分析】【分析】

動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核；移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成為動(dòng)物個(gè)體。

【詳解】

A；克隆北極狼的供體細(xì)胞來(lái)自野生北極狼；卵母細(xì)胞來(lái)自發(fā)情期的母犬，因此性狀由野生北極狼、發(fā)情期的母犬的基因共同決定，比格犬只是代孕母體，不提供遺傳物質(zhì)，A錯(cuò)誤；

B；透明帶下注射法不抽取供體細(xì)胞的細(xì)胞核；操作簡(jiǎn)單且對(duì)供體細(xì)胞核損傷小，同時(shí)注射的位置是卵母細(xì)胞外的透明帶，然后誘導(dǎo)兩個(gè)細(xì)胞融合，對(duì)卵母細(xì)胞的損傷小，B正確；

C；供體細(xì)胞注入卵母細(xì)胞透明帶內(nèi)后；還需要電融合法等誘導(dǎo)才能使供體細(xì)胞進(jìn)入卵母細(xì)胞形成重構(gòu)胚，C錯(cuò)誤；

D；細(xì)胞分裂、分化形成克隆胚胎的過(guò)程是有絲分裂過(guò)程；而基因重組發(fā)生在減數(shù)分裂過(guò)程，D錯(cuò)誤。

故選ACD。三、填空題(共8題，共16分)14、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人們的愿望；進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦子生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，因此又叫做DNA重組技術(shù)。

基因工程的原理是基因重組；其優(yōu)點(diǎn)是打破了生殖隔離。但由于科學(xué)發(fā)展水平的限制，目前科學(xué)家對(duì)基因的結(jié)構(gòu)；基因間的相互作用以及基因的調(diào)控機(jī)制等都了解得相當(dāng)有限；再加上轉(zhuǎn)移的基因雖然是功能已知的基因，但不少卻是異種生物的基因；同時(shí)，由于外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機(jī)的，因此在轉(zhuǎn)基因生物中，有時(shí)候會(huì)出現(xiàn)一些人們意想不到的后果。

【詳解】

（1）轉(zhuǎn)基因生物具有以下優(yōu)點(diǎn)：

作物產(chǎn)量高；能解決糧食短缺問(wèn)題；利用基因工程生產(chǎn)的抗蟲作物能夠減少農(nóng)藥使用，減少環(huán)境污染；利用基因工程培育的生長(zhǎng)迅速；營(yíng)養(yǎng)品豐富的生物，能增加食物營(yíng)養(yǎng)，提高附加值；利用基因工程培育微生物，能夠生產(chǎn)稀缺的生化藥物。

（2）轉(zhuǎn)基因生物受限于科學(xué)發(fā)展水平；可能會(huì)產(chǎn)生以下問(wèn)題：

轉(zhuǎn)基因生物與同種生物雜交；可能產(chǎn)生重組病菌；重組病毒或超級(jí)雜草；導(dǎo)入轉(zhuǎn)基因生物的外源基因有可能與感染轉(zhuǎn)基因生物的某些細(xì)菌或病毒雜交，從而重組出對(duì)人類或其他生物有害的病原體，可能使疾病的傳播跨越物種障礙。

（3）轉(zhuǎn)基因技術(shù)取得了巨大的成果；但科學(xué)技術(shù)是把雙刃劍，面對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，而不能因噎廢食。

【點(diǎn)睛】

本題考查轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題，意在考查學(xué)生對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性問(wèn)題的識(shí)記與理解?！窘馕觥拷鉀Q糧食短缺問(wèn)題減少農(nóng)藥使用，減少環(huán)境污染增加食物營(yíng)養(yǎng)，提高附加值能產(chǎn)生有毒蛋白或新過(guò)敏原可能產(chǎn)生重組病菌、重組病毒或超級(jí)雜草可能使疾病的傳播跨越物種障礙趨利避害不能因噎廢食15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】低當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落菌落數(shù)16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】載體17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】特定磷酸二酯鍵特異性18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不容的雜質(zhì)析出DNA過(guò)濾溶液中的雜質(zhì)DNA19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】莖尖極少或沒(méi)有）胚狀體人工薄膜不受季節(jié)的限制人工種皮；胚狀體和人工胚乳。

（2）20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】個(gè)體生物學(xué)水平抗蟲性狀。21、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性，可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥坎捎玫鞍踪|(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，提高該酶的熱穩(wěn)定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、判斷題(共2題，共8分)22、B【分析】【詳解】

要對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，最終必須通過(guò)改造基因中的堿基序列來(lái)完成，因?yàn)榛蚰苤笇?dǎo)蛋白質(zhì)的生物合成，故說(shuō)法錯(cuò)誤。23、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)入到油菜的抗除草劑基因，則可能通過(guò)減數(shù)分裂進(jìn)入到花粉細(xì)胞中，進(jìn)而傳入環(huán)境中的其他生物體內(nèi)。本說(shuō)法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共1題，共8分)24、略

【分析】【詳解】

（1）電泳法分離蛋白質(zhì)；是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的電荷；大小及形狀不同，在電場(chǎng)中的遷移速度不同而實(shí)現(xiàn)分離。

（2）牛肉膏和蛋白胨中蛋白質(zhì)較多；可作為碳源和氮源。

（3）加入抗菌蛋白的培養(yǎng)基中；金黃色葡萄球菌應(yīng)該不能生長(zhǎng)或生長(zhǎng)很少，未加入抗菌蛋白的培養(yǎng)基中金黃色葡萄球菌應(yīng)該能生長(zhǎng)，菌落較多。

（4）平板劃線法、稀釋涂布平板法都能使接種的菌種在固體培養(yǎng)上充分分散，對(duì)使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行滅菌處理，是為了防止細(xì)菌擴(kuò)散污染?！窘馕觥竣?電荷（帶電情況）②.遷移速度③.碳源④.氮源⑤.數(shù)量⑥.平板劃線法⑦.稀釋涂布平板法（稀釋混合平板法）⑧.滅菌六、綜合題(共4題，共24分)25、略

【分析】【分析】

基因工程至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體；限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種；DNA連接酶分為兩類：E．coliDNA連接酶和T4DNA連接酶；基因工程常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒；噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。

（1）

限制性核酸內(nèi)切酶（簡(jiǎn)稱限制酶）切割DNA分子后；產(chǎn)生的片段末端類型有黏性末端和平末端。

（2）

目的基因與運(yùn)載體具有相同的黏性末端才能連接；若用包括EcoRⅠ在內(nèi)的兩種限制酶切割目的基因，則另一種限制酶必須具有的特點(diǎn)是：切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的相同。

（3）

按其來(lái)源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即E·coliDNA連接酶（來(lái)源于大腸桿菌）和T4DNA連接酶（來(lái)源于T4D噬菌體）。

（4）

基因工程中常用的運(yùn)載體是質(zhì)粒；此外還有λ噬菌體的衍生物和動(dòng)植物病毒。

（5）

由于未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱，因此若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，而通常用Ca2+處理大腸桿菌細(xì)胞；使其成為感受態(tài)細(xì)胞，此時(shí)細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的通透性增大，容易吸收重組質(zhì)粒。

（6）

基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟；該過(guò)程需要用限制酶切出黏性末端，然后再用DNA連接酶連接形成重組DNA。

【點(diǎn)睛】

解答本題需熟記并理解DNA重組技術(shù)的基本工具、基因工程的基本操作程序并形成清晰的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上，結(jié)合問(wèn)題情境，從題意中提取有效信息進(jìn)行相關(guān)問(wèn)題的解答。【解析】（1）平末端黏性末端。

（2）切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的相同。

（3）T4E·coli

（4）動(dòng)植物病毒λ噬菌體的衍生物。

（5）未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒(外源DNA)的能力極弱。

（6）基因表達(dá)載體的構(gòu)建限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）和DNA連接酶26、略

【分析】【分析】

分析圖示；圖為培育高產(chǎn)耐鹽的雜種植株過(guò)程：將甲；乙兩種植物細(xì)胞用A纖維素酶和果膠酶除去細(xì)胞壁，獲得甲、乙原生質(zhì)體，然后用PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，獲得B融合的原生質(zhì)體，再生細(xì)胞壁獲得C完整雜種細(xì)胞，經(jīng)過(guò)脫分化形成愈傷組織，然后再分化形成幼苗，經(jīng)過(guò)高鹽環(huán)境選擇后獲得目標(biāo)植株。

（1）

由植物細(xì)胞變成原生質(zhì)體；需要去掉細(xì)胞壁，細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，酶具有專一性，所以應(yīng)用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞壁，即A是纖維素酶和果膠酶；利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可得到愈傷組織；叢芽結(jié)構(gòu)和試管苗，并非每個(gè)細(xì)胞都能表達(dá)出耐鹽性狀，需要利用含鹽培養(yǎng)基進(jìn)行選擇，D是具有耐鹽優(yōu)良性狀的幼芽；D長(zhǎng)成的幼苗有耐鹽高產(chǎn)和耐鹽不高產(chǎn)兩種，故需要進(jìn)行選擇。

（2）

C細(xì)胞是雜種細(xì)胞；形成植株需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)；由愈傷組織形成D的過(guò)程稱為再分化過(guò)程；為避免雜菌污染，整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程要在無(wú)菌的條件下進(jìn)行。

（3）

植物體細(xì)胞融合之前；需要對(duì)植物細(xì)胞去掉細(xì)胞壁，植物體細(xì)胞融合成功的標(biāo)志是雜種細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁；植物體細(xì)胞雜交的意義是可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。

（4）

已知甲；乙植物分別為不同種植物的四倍體、二倍體；融合后的細(xì)胞內(nèi)含有6個(gè)染色體組，則融合后的“甲—乙植株”屬于異源六倍體。

【點(diǎn)睛】

本題考查植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞融合相關(guān)知識(shí)，意在考查考生根據(jù)對(duì)細(xì)胞工程相關(guān)技術(shù)和過(guò)程的掌握，準(zhǔn)確分析圖示過(guò)程?！窘馕觥浚?）纖維素酶和果膠耐鹽有耐鹽高產(chǎn)和耐鹽不高產(chǎn)兩種幼苗