2024-2025學(xué)年高中生物專題五DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)課題1DNA的粗提取與鑒定學(xué)案新人教版選修1

PAGE12-專題五DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)情景引入·趣味導(dǎo)學(xué)PCR技術(shù)與SARS病因的確定通過PCR技術(shù)可以在數(shù)小時內(nèi)將特定的目的基因或核酸序列擴增數(shù)千萬倍，使原來須要幾個月乃至數(shù)年才能完成的基因克隆等工作，在幾天內(nèi)就能完成。1975年全世界首次出現(xiàn)萊姆關(guān)節(jié)炎后，科學(xué)家用了7年時間才找到病因；1981年第一個艾滋病病例出現(xiàn)，科學(xué)家花了3年時間才找到人類獲得性免疫缺陷病毒(HIV)。而在2003年的SARS爆發(fā)中，科學(xué)家僅花了幾個月就找到了SARS的病原體。在SARS病因的快速確定中，PCR技術(shù)起到了重要作用。PCR技術(shù)是如何發(fā)揮作用的呢？首先，PCR技術(shù)具有解除已知病原體的作用。德國和法國的試驗室應(yīng)用PCR技術(shù)檢測解除了肺炎支原體、肺炎衣原體、副流感病毒、人類間質(zhì)肺炎病毒等。與此同時，美國、中國的一些試驗室針對SARS患者的呼吸道分泌物和血液標(biāo)本，采納PCR技術(shù)進(jìn)行分析，解除了腺病毒、細(xì)小病毒、圓病毒、皰疹病毒等。其次，利用PCR技術(shù)確認(rèn)病原體。探討人員從患者標(biāo)本培育物中提取到一種病毒的核酸，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄后，分別進(jìn)行15個不同的PCR反應(yīng)，得到約20個DNA擴增片段并進(jìn)行測序，經(jīng)過與基因庫比對后發(fā)覺，其中3段不能與數(shù)據(jù)庫中的任何序列匹配，但經(jīng)翻譯后的氨基酸序列與已知的冠狀病毒序列同源，這表明分別到的病毒為冠狀病毒。PCR技術(shù)和SARS病因的確定與本專題的DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)親密相關(guān)，本專題須要了解提取生物大分子的基本思路和方法，嘗試DNA和蛋白質(zhì)的提取。我們應(yīng)當(dāng)理解PCR擴增DNA片段的原理，嘗試PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用。專題概述本專題分三個課題：《DNA的粗提取與鑒定》《多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增DNA片段》《血紅蛋白的提取和分別》。生物體的基本組成物質(zhì)中都有核酸和蛋白質(zhì)，核酸是遺傳信息的攜帶者，生命活動的限制者；蛋白質(zhì)是生命活動的主要擔(dān)當(dāng)者，生命活動的體現(xiàn)者。本專題將兩大生命物質(zhì)化抽象為詳細(xì)，利用三個探究性試驗，定性或定量地探究了從生物體內(nèi)干脆提取DNA和DNA的體外擴增技術(shù)、從生物體內(nèi)干脆提取血紅蛋白。在這三個課題中滲透了探究試驗設(shè)計的原則要求，滲透了物質(zhì)提取、分別、純化的一些基本技術(shù)。做好這些探究活動，會提高我們的動手操作實力。專題重點：DNA的粗提取和鑒定方法；PCR的原理和PCR的基本操作；凝膠色譜法的原理和方法。專題難點：DNA的粗提取和鑒定方法；PCR的原理；樣品的預(yù)處理；色譜柱填料的處理和色譜柱的裝填。學(xué)法指導(dǎo)DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)是分子生物學(xué)探討的基本技術(shù)。學(xué)習(xí)這些技術(shù)，不僅能夠幫助我們初步了解分子生物學(xué)的基本試驗方法，而且能夠鞏固必修課中學(xué)習(xí)的有關(guān)DNA和蛋白質(zhì)的理論學(xué)問。學(xué)習(xí)時，要明確DNA粗提取的過程及方法，特殊是NaCl的作用，對PCR原理的理解是學(xué)習(xí)中的難點，因此要充分利用教材中的圖文資料，聯(lián)系細(xì)胞中DNA復(fù)制的過程、須要的條件及遵循的堿基互補配對原則進(jìn)行學(xué)習(xí)。課題1DNA的粗提取與鑒定學(xué)習(xí)目標(biāo)課程標(biāo)準(zhǔn)1．了解DNA的物理、化學(xué)性質(zhì)。(重點)2．理解DNA粗提取以及DNA鑒定的原理。(重點)3．嘗試對植物或動物組織中的DNA進(jìn)行粗提取。(難點)DNA的提取和分別自主學(xué)習(xí)·預(yù)習(xí)熱身一、提取生物大分子的基本思路1．基本思路：選擇用肯定__物理或化學(xué)__方法分別具有__不同物理或化學(xué)性質(zhì)__的生物大分子。2．提取DNA的方法(1)概念：利用DNA與__RNA__、__蛋白質(zhì)__和__脂質(zhì)__等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的__差異__，提取DNA，去除其他成分。(2)原理①分別DNA和__蛋白質(zhì)__等其他成分在不同濃度的__NaCl__溶液中溶解度不同，利用這一特點選擇適當(dāng)?shù)腳_NaCl濃度__就能使DNA充分溶解，而使__蛋白質(zhì)__沉淀，或者相反，以達(dá)到分別目的。②提純a．DNA不溶于__酒精溶液__，但是某些__蛋白質(zhì)__則可溶于其中。b．__蛋白酶__能水解蛋白質(zhì)，但是對__DNA__沒有影響。c．大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受__60～80_℃__的高溫而發(fā)生變性，而DNA在__80_℃__以上才會變性。利用以上原理可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分別。③鑒定在沸水浴的條件下，DNA被二苯胺染成藍(lán)色。(3)__洗滌劑__能夠瓦解細(xì)胞膜，但對__DNA__沒有影響。二、試驗設(shè)計1．試驗材料的選?。悍彩呛衉_DNA__的生物材料都可以考慮，但是選用__DNA含量相對較高_(dá)_的生物組織，勝利的可能性更大。2．裂開細(xì)胞，獲得含DNA的濾液：在雞血細(xì)胞液中加入肯定量的__蒸餾水__，過濾后收集濾液即可。假如試驗材料是植物細(xì)胞，須要先用__洗滌劑__溶解細(xì)胞膜。假如以洋蔥做試驗材料，先將洋蔥切碎，然后加入肯定的__洗滌劑__和__食鹽__，進(jìn)行充分?jǐn)嚢韬脱心?，過濾后收集研磨液。3．去除濾液中的雜質(zhì)(1)方案一：通過限制__NaCl溶液__的濃度去除雜質(zhì)。(2)方案二：干脆向濾液中加入__嫩肉粉__，反應(yīng)10～15min，添加物中的__木瓜蛋白酶__能夠分解蛋白質(zhì)。(3)方案三：將濾液放在__60～80_℃__的恒溫水浴箱中保溫10～15min，留意嚴(yán)格限制溫度范圍。4．DNA的析出與鑒定：將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等的、冷卻的__酒精溶液__，靜置，溶液中會出現(xiàn)__白色絲狀物__，這就是粗提取的DNA。取兩支試管，各加入物質(zhì)的量濃度為__2_mol/L__的NaCl溶液5mL，將絲狀物放入其中一支試管中。向兩支試管中各加入4mL__二苯胺試劑__，置于__沸水__中加熱5min，待試管冷卻后，看溶解有DNA的溶液是否變__藍(lán)__色。思索依據(jù)右圖分析，要使DNA溶解，須要運用什么濃度？要使DNA析出，又須要運用什么濃度？提示：在0.14mol/L時DNA溶解度最小，較高(或較低)濃度可使DNA溶解；0.14mol/L可使DNA析出。┃┃活學(xué)巧練__■推斷題1．DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，它們都是有機物但都溶于酒精。(×)分析：DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)等雜質(zhì)可以溶于酒精。2．做DNA粗提取試驗時，可用簇新豬血代替雞血。(×)分析：哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中不含細(xì)胞核和其他的細(xì)胞器，因此不能作為提取DNA的材料。3．在沸水浴的條件下，DNA被甲基綠染成藍(lán)色。(×)分析：在沸水浴的條件下，DNA與二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色。4．DNA能夠耐受蛋白酶是因為酶具有專一性。(√)5．向溶解DNA的NaCl溶液中不斷加入蒸餾水的目的是減小雜質(zhì)的溶解度，加快雜質(zhì)的析出。(×)分析：加入蒸餾水可使2mol/L的NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度變?yōu)?.14mol/L，在這個濃度下DNA的溶解度最低，因此此過程可減小DNA溶解度，使DNA析出。6．在析出DNA時，要緩緩加入蒸餾水，直到出現(xiàn)絮狀物為止。(×)分析：出現(xiàn)絮狀物時才剛起先析出DNA，應(yīng)接著緩緩加入蒸餾水，直到白色的絮狀物不再增加為止。7．洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度。(×)分析：洗滌劑可以溶解細(xì)胞的細(xì)胞膜，但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度。新知解讀·互動探究學(xué)問點DNA粗提取的原理┃┃要點歸納__■1．DNA的溶解性溶解規(guī)律2mol/LNaCl溶液0.14mol/LNaCl溶液DNA溶解析出蛋白質(zhì)NaCl溶液濃度從2mol/L降低的過程中，蛋白質(zhì)溶解度漸漸增大部分發(fā)生鹽析沉淀溶解總結(jié)①DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同。在NaCl溶液濃度低于0.14mol/L時，DNA的溶解度隨NaCl溶液濃度的增加而漸漸降低；在0.14mol/L時，DNA溶解度最?。划?dāng)NaCl溶液濃度接著增加時，DNA的溶解度又漸漸增大；②選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分別目的2．DNA與蛋白質(zhì)對蛋白酶、高溫、洗滌劑的耐受性的區(qū)分DNA蛋白質(zhì)蛋白酶無影響水解高溫80℃以上才會變性60℃～80℃會變性洗滌劑無影響瓦解細(xì)胞膜(破壞膜中的蛋白質(zhì)分子)學(xué)問貼士①利用DNA隨NaCl溶液濃度的不同而溶解度不同作為原理可粗提取DNA。②利用DNA不溶于酒精，而細(xì)胞內(nèi)的其他很多物質(zhì)則溶于酒精作為原理可進(jìn)一步提純DNA。┃┃典例評析__■典例1向溶有DNA的2mol/L的氯化鈉溶液中不斷加入蒸餾水，在這個過程中DNA和雜質(zhì)蛋白質(zhì)溶解度變更狀況分別是(C)A．減小，減小 B．增大，增大C．先減小后增大，增大 D．減小，增大[解析]加入蒸餾水后，DNA溶解度隨著氯化鈉溶液的濃度降低而減小，至0.14mol/L時達(dá)到最小，接著加入蒸餾水，DNA溶解度增大。蛋白質(zhì)等雜質(zhì)隨著氯化鈉溶液的濃度降低而增大。答案為C。┃┃變式訓(xùn)練__■1．圖中能反映DNA溶解度與NaCl溶液濃度之間關(guān)系的是(C)[解析]DNA在NaCl溶液中的溶解度，是隨著NaCl的濃度的變更而變更的，當(dāng)NaCl的物質(zhì)的量的濃度為0.14mol/L時，DNA的溶解度最低。學(xué)問點DNA的粗提取與鑒定試驗的過程分析┃┃要點歸納__■1．方法步驟(以雞血細(xì)胞為例)裂開細(xì)胞eq\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(a.雞血細(xì)胞中加入肯定量的蒸餾水，同時,用玻璃棒沿一個方向攪拌,b.紗布過濾，濾液中含DNA和其他核物,質(zhì)，如蛋白質(zhì)、RNA等))溶解核內(nèi)DNA：上述濾液加入2mol/L的NaCl溶液，玻璃棒沿同一方向攪拌過濾除去不溶雜質(zhì)析出含DNA的絲狀物：向上述濾液緩緩加入蒸餾水，并輕輕地沿一個方向攪拌，出現(xiàn)絲狀物，當(dāng)絲狀物不再增加時，停止加水(此時NaCl溶液濃度相當(dāng)于0.14mol/L)過濾含DNA的絲狀物：用多層紗布過濾，含DNA的絲狀物留在紗布上DNA的絲狀物再溶解：再次用2mol/L的NaCl溶液溶解DNA的絲狀物提取含雜質(zhì)較少的DNA：向上述濾液加入等體積的體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻酒精溶液。靜置2min～3min，溶液中出現(xiàn)白色絲狀物，用玻璃棒沿一個方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸去外面的水分2．DNA粗提取與鑒定的原理、方法、目的基本原理方法目的DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低溶于NaCl溶液中并稀釋①NaCl濃度為2mol/L時，DNA溶解，而部分蛋白質(zhì)發(fā)生鹽析而生成沉淀，通過過濾可除去部分蛋白質(zhì)及不溶于NaCl溶液的雜質(zhì)②當(dāng)NaCl溶液稀釋至0.14mol/L時，DNA析出，過濾可除去溶于NaCl中的部分蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)DNA不被蛋白酶所水解加入嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白質(zhì)DNA不溶于酒精溶液加入冷卻酒精(95%)DNA析出，除去溶于酒精的蛋白質(zhì)DNA可被二苯胺染成藍(lán)色加入二苯胺，并沸水浴鑒定DNA3．試驗操作步驟中三次過濾的比較過濾液過濾后紗布上濾液中1加蒸餾水的細(xì)胞濾液細(xì)胞膜、核膜、糖類、蛋白質(zhì)等含雜質(zhì)的DNA2濃度為2mol/L的NaCl溶液不溶于2mol/LNaCl溶液的雜質(zhì)含雜質(zhì)較少的DNA3濃度為0.14mol/L的NaCl溶液DNA溶于0.14mol/LNaCl溶液的雜質(zhì)4．DNA鑒定(1)試驗原理DNA＋二苯胺eq\o(→,\s\up7(沸水浴),\s\do5(5min))藍(lán)色(2)試驗步驟1號試管2號試管加入2mol/LNaCl溶液5mL5mL絲狀物(DNA)不加加入用玻璃棒攪拌無絲狀物溶解加入二苯胺試劑4mL4mL沸水浴5min5min視察現(xiàn)象不變藍(lán)變藍(lán)學(xué)問貼士①獲得材料時，選取含DNA多的材料，如鳥類的紅細(xì)胞，不用哺乳動物的紅細(xì)胞(無細(xì)胞核)。②盛放雞血細(xì)胞的容器最好用塑料容器，玻璃容器簡單吸附DNA。③在以植物細(xì)胞為原料獲得DNA時，要運用洗滌劑和食鹽，洗滌劑的作用是瓦解細(xì)胞膜，釋放DNA；食鹽的作用是溶解DNA。④在提取DNA時，用玻璃棒攪拌含有懸浮物的溶液時，不要直插燒杯底部，而且攪拌要輕緩，以便獲得較完整的DNA分子。⑤二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，否則會影響鑒定結(jié)果。┃┃典例評析__■典例2在DNA粗提取與鑒定試驗中，將其次次過濾獲得的紗布上含有的DNA的黏稠物(含有較多雜質(zhì))分別處理如下：序號操作過程①放入2mol/L的NaCl溶液，攪拌后過濾②再加入0.14mol/L的NaCl溶液，攪拌后過濾③再加入冷卻的、同體積的95%酒精溶液，用玻璃棒沿一個方向攪拌，卷起絲狀物上述操作正確的是(C)A．①② B．①②③C．①③ D．②③[解析]其次次過濾后紗布上的是粗提取的DNA，此DNA還含有雜質(zhì)，因此將其溶于2mol/L的NaCl溶液中，再進(jìn)行過濾，以除去不溶于2mol/L的NaCl溶液的雜質(zhì)。然后向濾液中加入同體積的、冷卻的95%酒精即可析出DNA。然后挑出DNA進(jìn)行鑒定。答案為C。┃┃變式訓(xùn)練__■2．(2024·海南文昌中學(xué)高二期末)“DNA的粗提取與鑒定”試驗中有三次過濾：①過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細(xì)胞溶液；②過濾含黏稠物的0.14mol/L的NaCl溶液；③過濾含DNA的2mol/L的NaCl溶液。以上三次過濾分別為了獲得(C)A．含核物質(zhì)的濾液、濾液中的黏稠物、含DNA的濾液B．含核物質(zhì)的濾液、濾液中的黏稠物、紗布上的黏稠物C．含核物質(zhì)的濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液D．含較純的DNA的濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液[解析]DNA的粗提取過程中，第一次用1～2層紗布過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細(xì)胞溶液，其目的是得到含核物質(zhì)(DNA)的濾液；DNA在質(zhì)量濃度為0.14mol/L的NaCl溶解度中的最低，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出，因此其次次用3～4層紗布過濾含黏稠物的0.14mol/L的NaCl溶液，其目的是得到紗布上的黏稠物；紗布上的黏稠物用2mol/L的NaCl溶液溶解后再進(jìn)行第三次過濾，其目的是初步提純DNA，得到含DNA的濾液。綜上所述，A、B、D三項均錯誤，C項正確。指引迷津·撥云見日1．DNA粗提取試驗中的“二、三、三、六”“二”：試驗中有兩次運用蒸餾水。第一次是為了使血細(xì)胞吸水漲破，加水后必需充分?jǐn)嚢?，時間不應(yīng)低于5min，使血細(xì)胞充分裂開；其次次是為了稀釋氯化鈉溶液?！叭保涸囼炛泄?次過濾。過濾時運用的紗布層數(shù)與獲得濾液或黏稠物有關(guān)。第1、3次要用其濾液，運用的紗布為1～2層，第2次是要用其濾出的黏稠物，運用的紗布為多層?！叭保涸囼炛杏腥渭勇然c溶液。第一次，當(dāng)加入氯化鈉溶液后，必需充分晃動燒杯，使二者混合勻稱，加速染色質(zhì)中DNA與蛋白質(zhì)分別，使DNA充分游離并溶解在氯化鈉溶液中。其次次，加氯化鈉溶液也是為了DNA的溶解，不過這時溶液中蛋白質(zhì)含量已較少。第三次，加氯化鈉溶液還是為了溶解DNA?！傲保涸囼炛杏?次攪拌，在析出DNA、DNA再溶解和提取中，各步攪拌都要輕緩，玻璃棒不要直插燒杯底部，防止DNA分子斷裂。典例3下列有關(guān)DNA的粗提取與鑒定試驗的敘述，正確的是(B)A．取材：雞血細(xì)胞；緣由：有細(xì)胞核，其他動物的血細(xì)胞都沒有細(xì)胞核B．粗提?。翰煌瑵舛鹊腘aCl溶液；緣由：DNA在其中的溶解度不同C．提純：95%的冷酒精；緣由：DNA溶于酒精，蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不溶于酒精D．鑒定：二苯胺試劑；緣由：DNA溶液加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色[解析]除了哺乳動物成熟的紅細(xì)胞，其他都有細(xì)胞核，A錯誤；不同濃度的NaCl溶液，DNA在其中的溶解度不同，進(jìn)而粗提取DNA，B正確；DNA不溶于酒精，而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)溶于酒精，進(jìn)而提純DNA，C錯誤；DNA溶液加入二苯胺試劑后沸水浴加熱成藍(lán)色，D錯誤。2．通過顏色變更鑒定有機化合物、細(xì)胞器、微生物等的方法總結(jié)鑒定物運用的試劑顏色變更備注DNA二苯胺沸水浴加熱變藍(lán)色現(xiàn)配現(xiàn)用甲基綠綠色視察DNA的分布RNA吡羅紅紅色視察RNA的分布脂肪蘇丹Ⅲ橘黃色檢測生物組織中的脂肪蘇丹Ⅳ紅色蛋白質(zhì)雙縮脲試劑紫色先加入0.1g/mL的NaOH溶液，再加入0.01g/mL的CuSO4溶液還原性糖斐林試劑50～65℃溫水浴加熱出現(xiàn)磚紅色沉淀將0.1g/mL的NaOH溶液與0.05g/mL的CuSO4溶液等量混合后再用，現(xiàn)配現(xiàn)用淀粉碘酒藍(lán)色溫度、pH對唾液淀粉酶活性的影響尿素分解菌酚紅指示劑變紅在以尿素為唯一氮源的培育基上加上酚紅指示劑大腸桿菌伊紅美藍(lán)菌落呈紫黑色鑒定自來水中大腸桿菌的含量線粒體健那綠藍(lán)綠色視察線粒體染色體醋酸洋紅紅色視察植物細(xì)胞的有絲分裂龍膽紫紫色花粉粒醋酸洋紅紅色確定花粉粒的發(fā)育時期焙花青—鉻礬藍(lán)黑色典例4下列有關(guān)生物試驗所涉及的儀器、試劑及技術(shù)的說法，正確的是(C)①脂肪的鑒定②T2噬菌體侵染細(xì)菌試驗③證明DNA半保留復(fù)制④光合色素的提取和分別⑤有絲分裂的視察試驗⑥D(zhuǎn)NA的鑒定A．①②⑤均需運用光學(xué)顯微鏡 B．④⑥均需運用無水乙醇C．②③均需運用離心技術(shù) D．②③⑤均需運用同位素標(biāo)記法[解析]①在脂肪顆粒鑒定試驗中，會用到酒精和顯微鏡；②噬菌體侵染細(xì)菌試驗中只需用肉眼視察放射性部位即可；⑤須要借助顯微鏡視察有絲分裂試驗，A錯誤；④葉綠體中色素的提取須要用無水乙醇；⑥D(zhuǎn)NA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精，利用這一原理，運用95%的酒精可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分別，并非是無水乙醇；B錯誤；②噬菌體侵染細(xì)菌試驗、③證明DNA半保留復(fù)制的試驗中均須要用離心技術(shù)視察放射性在試管中的存在部位，C正確；②噬菌體侵染細(xì)菌試驗中用35S和32P分別標(biāo)記噬菌體的蛋白質(zhì)和DNA；③證明DNA半保留復(fù)制的試驗中用15N標(biāo)記了親代DNA分子的兩條鏈；⑤有絲分裂的視察試驗不須要運用同位素標(biāo)記，D錯誤。故選C。核心素養(yǎng)·技能培優(yōu)案例某生物愛好小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動，詳細(xì)步驟如下：材料處理：稱取簇新的花菜、辣椒和蒜黃各2份，每份10g。剪碎后分成兩組，一組置于20℃、另一組置于－20℃條件下保存24h。DNA的粗提?。旱谝徊剑簩⑸鲜霾牧戏謩e放人研缽中，各加入15mL研磨液，充分研磨。用兩層紗布過濾，取濾液備用。其次步：先向6只小燒杯中分別注入10mL濾液，再加入20mL體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液，然后用玻棒緩緩地向一個方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻棒上。第三步：取6支試管，分別加入等量的物質(zhì)的量濃度為2mol·L－1的NaCl溶液溶解上述絮狀物。DNA的檢測：在上述試管中各加入4mL二苯胺試劑，混合勻稱后，置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺，結(jié)果如下表。材料保存溫度花菜辣椒蒜黃20℃＋＋＋＋＋＋－20℃＋＋＋＋＋＋＋＋＋(注：“＋”越多表示藍(lán)色越深)分析上述試驗過程，回答下列問題。(1)該探究性試驗課題名稱是__探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響__。(2)其次步中“緩緩地”攪拌，這是為了削減__DNA斷裂__。(3)依據(jù)試驗結(jié)果，得出結(jié)論并分析。①結(jié)論1：與20℃相比，相同試驗材料在－20℃條件下保存，DNA的提取量較多。結(jié)論2：__等質(zhì)量的不同試驗材料，在相同的保存溫度下，從蒜黃提取的DNA量最多__。②針對結(jié)論1，請?zhí)岢龊侠淼恼f明：__低溫抑制了相關(guān)酶的活性，DNA降解速度慢__。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對DNA影響微小。為了進(jìn)一步提高DNA純度，依據(jù)氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上接著操作的步驟是__將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合，靜置一段時間，吸取上清液__，然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液使DNA析出。[思維過程]題干：三組材料各2份，分成兩組，置于兩種條件下保存，這說明進(jìn)行了比照試驗?；叵隓NA的粗提取和鑒定