2025年滬教版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年滬教版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷391考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、下列生物技術(shù)操作對遺傳物質(zhì)的改造，不能遺傳給子代的是（）A.將含胰島素基因的表達載體轉(zhuǎn)入大腸桿菌，篩選獲得的基因工程菌B.通過植物體細胞雜交獲得的番茄--馬鈴薯雜種植株C.將腺苷酸脫氨酶基因轉(zhuǎn)入淋巴細胞后回輸患者，進行基因治療D.將生長激素基因?qū)肽膛Ｊ芫?，培育出能分泌含生長激素乳汁的奶牛2、不屬于動物細胞培養(yǎng)必需條件的是（）A.無菌、無毒的環(huán)境B.適宜的溫度和pHC.O2等氣體環(huán)境D.適宜的光照條件3、下列有關(guān)現(xiàn)代生物工程技術(shù)應(yīng)用的敘述，正確的是（）A.若轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來源于自然界，則不存在安全問題B.克隆人違背現(xiàn)有的倫理道德，會造成嚴(yán)重的社會問題C.因為轉(zhuǎn)基因技術(shù)沒有新基因產(chǎn)生，所以不存在安全問題D.由于存在生殖隔離，大田種植轉(zhuǎn)基因抗旱、抗除草劑農(nóng)作物不存在生物安全性問題4、某生物興趣小組以稻草為原料，通過纖維素分解菌的作用來生產(chǎn)葡萄糖。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.纖維素酶是單酶，能夠直接將纖維素分解成葡萄糖B.分離纖維素分解菌，可選擇含纖維素的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C.驗證纖維素分解菌存在與否，可在培養(yǎng)基中添加剛果紅染色劑D.要通過平板劃線法計數(shù)纖維素分解菌5、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物引發(fā)的安全性問題的敘述，錯誤的是（）A.對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，應(yīng)趨利避害B.轉(zhuǎn)基因生物引起安全性問題的原因之一是外源基因插入宿主基因組的部分往往是隨機的C.轉(zhuǎn)基因生物引發(fā)的安全性問題是無法彌補的D.轉(zhuǎn)基因生物有可能造成安全性問題，但不能一概而論6、下列有關(guān)微生物計數(shù)的敘述中，不正確的是（）A.因為土壤中各類微生物的數(shù)量不同，所以，為獲得不同類型的微生物要按不同的稀釋倍數(shù)進行分離B.測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍不同C.測定土壤樣品中的細菌數(shù)目，常用平板劃線法進行菌落計數(shù)D.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的菌落數(shù)明顯大于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目，說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些細菌菌落7、腐乳是我國古代勞動人民制造出的一種經(jīng)過微生物發(fā)酵的大豆食品。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.制作的腐乳比豆腐更容易保存B.酵母菌也參與腐乳的發(fā)酵過程C.腐乳制作過程中，有機物的種類增加D.微生物產(chǎn)生的酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解為葡萄糖8、如圖表示通過植物細胞工程相關(guān)技術(shù)，利用甲（2n）、乙（2n）兩種植物（各含有一種不同的優(yōu)良性狀）培育高產(chǎn)耐鹽植株的過程，其中序號代表過程或結(jié)構(gòu)。請分析下列說法正確的是（）

A.①過程常用胰蛋白酶作為化學(xué)誘導(dǎo)劑B.②不是甲和乙融合的雜種細胞C.由愈傷組織到④需經(jīng)過脫分化和再分化的過程D.可通過配制選擇培養(yǎng)基對目的植株進行選擇9、下列過程不屬于克隆的是（）A.單個大腸桿菌形成單菌落B.壁虎斷尾后長出新尾巴C.PCR擴增抗除草劑基因D.植物組織培養(yǎng)技術(shù)擴繁蘭花評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)10、營養(yǎng)缺陷性菌株是野生型菌株經(jīng)過人工誘變或自發(fā)突變失去合成某種成長因子的能力；只能在補充了相應(yīng)的生長因子的基本培養(yǎng)基中才能正常生長的變異菌株。某研究小組對酵母菌用紫外線照射后將其接種到甲培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基上，一段時間后將甲培養(yǎng)皿的菌落影印接種（不改變菌落位置）到乙；丙兩培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基中，進一步培養(yǎng)得到如下圖所示結(jié)果。

下列分析正確的是（）A.接種到甲培養(yǎng)皿采用的是稀釋涂布平板法B.甲、丙兩培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基C.甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少D.甲、乙、丙三個培養(yǎng)皿都可能存在營養(yǎng)缺陷型11、從胰島素依賴型糖尿病患者的骨髓中分離骨髓間充質(zhì)干細胞（MSC），誘導(dǎo)分化成胰島樣細胞，再導(dǎo)入該患者體內(nèi)。放射性免疫分析結(jié)果表明誘導(dǎo)的胰島樣細胞團可以正常分泌胰島素，患者的血糖恢復(fù)正常。下列說法正確的是（）A.培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)液通常需加入血清B.在體外連續(xù)培養(yǎng)時，利用胰蛋白酶將接觸抑制的骨髓間充質(zhì)干細胞分開C.在功能上，骨髓間充質(zhì)干細胞具有發(fā)育的全能性D.治療成功后，康復(fù)者的血型有可能發(fā)生改變12、轉(zhuǎn)MT-like基因的衣藻對Pb、Cd等重金屬離子的抗性明顯增強，對Cb2+富集效應(yīng)顯著。某研究小組計劃通過多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)擴增MT-like基因，并進一步通過基因工程手段構(gòu)建凈化重金屬廢水的工程菌。下列有關(guān)PCR操作的敘述，正確的是（）A.PCR擴增需要加入Taq酶和DNA連接酶B.需設(shè)計一對與MT-like基因兩端序列互補的引物C.設(shè)計引物時要避免引物之間形成互補堿基對D.長度相同，但GC含量高的引物需要更高的退火溫度13、下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯誤的是（）A.腌制泡菜若時間過短，泡菜中雜菌少但酸性弱、亞硝酸鹽含量高B.家庭制作果醋和泡菜時，表面產(chǎn)生菌膜分別由醋酸菌、酵母菌形成C.當(dāng)氧氣不充足、缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿酓.制作泡菜時乳酸菌可以將葡萄糖分解成乳酸和CO214、下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的敘述正確的是（）A.用于培養(yǎng)的細胞大都取自胚胎或幼齡動物的器官或組織B.將所取的組織先用胃蛋白酶等進行處理使其分散成單個細胞C.在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液D.動物細胞培養(yǎng)只能傳50代左右，所培養(yǎng)的細胞全部衰老死亡15、RNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄后再進行PCR擴增的技術(shù)稱為RT－PCR，過程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.過程①需要RN逆轉(zhuǎn)錄酶、引物、核糖核苷酸等條件B.真核細胞的mRNA經(jīng)過程①②獲得的DNA無內(nèi)含子片段C.過程③PCR擴增時引物中的CG含量會影響退火溫度D.RT－PCR技術(shù)可應(yīng)用于新冠病毒（RNA病毒）的核酸檢測16、利用基因編輯技術(shù)將病毒外殼蛋白基因?qū)胴i細胞中，然后通過核移植技術(shù)培育基因編輯豬，可用于生產(chǎn)基因工程疫苗。如圖為基因編輯豬培育流程，下列敘述不正確的是（）

A.對1號豬使用促性腺激素處理，可使其超數(shù)排卵B.采集到的卵母細胞需在體外培養(yǎng)到MⅡ期才能用于核移植C.產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來自2號與3號豬D.為檢測病毒外殼蛋白基因是否被導(dǎo)入4號豬并正常表達，可采用DNA測序的方法17、利用基因工程技術(shù)可使大腸桿菌生產(chǎn)人的胰島素原。下列相關(guān)敘述中，錯誤的是（）A.人和大腸桿菌在合成胰島素原時，轉(zhuǎn)錄和翻譯的場所是相同的B.DNA連接酶能催化磷酸與脫氧核糖形成化學(xué)鍵C.通過檢測發(fā)現(xiàn)大腸桿菌中沒有胰島素原產(chǎn)生，則可判斷重組質(zhì)粒未導(dǎo)入受體菌D.人胰島素原基因在大腸桿菌中表達的胰島素原有較高的生物活性18、2019年，中國科學(xué)院神經(jīng)科學(xué)研究所利用CRISPR—Cas9基因編輯技術(shù)，用基因敲除的猴的體細胞通過克隆技術(shù)培育出5只克隆疾病猴。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.克隆猴基因組成差異小，可減少個體差異對實驗的干擾B.受精卵經(jīng)基因編輯后形成的胚胎都成功發(fā)育為克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機制和開發(fā)相應(yīng)藥物D.可以運用該基因編輯技術(shù)進行生殖性克隆人的研究評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)19、一般包括______、______等技術(shù)20、體細胞核移植技術(shù)存在的問題：

克隆動物存在著健康問題、表現(xiàn)出______缺陷等。21、動物細胞融合的意義：克服了______，成為研究_____、_____、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。22、基因的“剪刀”是_____，它的化學(xué)本質(zhì)是_____，它只能識別一種特定的_____，并在_____上切割DNA分子；基因的“針線”是______，它能連接DNA骨架上的_____，DNA的骨架由___________構(gòu)成；基因的運載體是將_____送入_____的運輸工具。目前常用的運載體有_____、________和_____。質(zhì)粒存在于許多_____和______等生物中，是擬核或_____外能夠_____的很小的環(huán)狀_____。23、基因工程的原理是_____，又叫_____或_____。通俗地說，就是按照_____，把一種生物的_____提取出來，加以_____，然后放到_____，_____地改造生物的遺傳性狀。24、______——“分子縫合針”25、基因工程操作一般經(jīng)歷如下四個步驟：_____。26、結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：______和______。27、動物細胞培養(yǎng)的流程：

取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行______培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)_____培養(yǎng)。評卷人得分四、實驗題(共4題，共36分)28、近年來；紀(jì)錄片《舌尖上的中國》引發(fā)全民關(guān)注美食的熱潮，其中多次講述了利用不同微生物的發(fā)酵作用制作的美味食品。請分析回答下列問題：

（1）在果醋制作時；運用醋酸菌在供應(yīng)________________和糖源充足時，將糖分解成醋酸；在糖源不充足時，也可以生成醋酸。反應(yīng)式為：________________________。

（2）制作泡菜的腌制過程中；會產(chǎn)生亞硝酸鹽。在____________________條件下，亞硝酸鹽與對氨苯磺酸發(fā)生________________反應(yīng)后，與N—1—萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成__________色染料。

（3）腐乳制作的流程是：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。用鹽腌制時；應(yīng)注意控制________；配制鹵湯時，要使鹵湯中酒的含量控制在_____________%左右。

（4）在果酒制作時，變酸的原因是_____________________________。29、鼠傷寒沙門氏菌的野生型菌株（his+）可在基本培養(yǎng)基（含微量組氨酸）上生長形成菌落，而突變型的組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株（his-）不能合成組氨酸；無法在基本培養(yǎng)基上形成菌落。利用his菌株可檢測環(huán)境或食品中是否存在化學(xué)致癌劑（誘發(fā)his-菌株突變）。回答下列問題：

(1).基本培養(yǎng)基的成分主要包括_____。制備基本固體培養(yǎng)基的操作：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。倒平板時應(yīng)注意：_____。

(2).檢測是否存在化學(xué)致癌劑時，用_____法將his-菌株接種于基本培養(yǎng)基上，使其密集均勻分布在平板上，將浸泡過待測化合物的濾紙片貼于平板中央。若培養(yǎng)基滅菌合格，則可能影響該檢測結(jié)果的兩個重要因素是_____。若圖A為對照組，B為實驗組，則A組濾紙片的處理方法是_____。經(jīng)正確檢驗后，結(jié)果如B所示，則實驗結(jié)果和結(jié)論為_____。

(3).使用過的培養(yǎng)基在丟棄之前應(yīng)做的處理及目的是_____。30、利用乳腺生物反應(yīng)器獲取藥用蛋白具有產(chǎn)量高；成本低等優(yōu)點。如圖為培育轉(zhuǎn)基因奶牛獲得人血清白蛋白的流程。

請回答：

（1）PCR擴增人血清白蛋白基因使用的酶是_____________。要使人血清白蛋白基因在轉(zhuǎn)基因奶牛的乳腺細胞中表達，應(yīng)將其與____________基因的啟動子等調(diào)控組件重組。

（2）基因工程的核心步驟是________________________，將目的基因?qū)肱Ｊ芫阉玫姆椒ㄊ莀___________________。

（3）體外受精前精子要進行____________處理，過程②包括__________技術(shù)和胚胎移植技術(shù)；可用___________技術(shù)獲得多只與該轉(zhuǎn)基因奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢。

（4）若要檢測牛奶中是否含有人血清白蛋白，可采用_________________技術(shù)。31、新冠病毒竟然是友軍？近日有媒體報道稱感染新冠病毒可以治療肺癌；該報道中的結(jié)論是基于美國科學(xué)家發(fā)表的一篇論文《鼻部吸入新冠刺突蛋白S1可緩解肺癌發(fā)展》。該研究使用新冠病毒的刺突蛋白S1進行了體內(nèi)和體外實驗，分析回答下列問題：

(1)體外實驗：首先培養(yǎng)肺癌細胞，在細胞培養(yǎng)液中除了加入必要的營養(yǎng)物質(zhì)外，還加了一定濃度的________以防止雜菌污染，細胞瓶放在37℃的________中培養(yǎng)。隨后用刺突蛋白S1處理肺癌細胞并檢測細胞的凋亡率，結(jié)果如圖1。結(jié)果表明________。

(2)小鼠體內(nèi)實驗：流程如圖2，實驗結(jié)果如圖3。其中NNK是尼古丁的衍生物亞硝胺酮，長時間對小鼠進行NNK處理的目的是________。

(3)對比體內(nèi)實驗和體外實驗的結(jié)果發(fā)現(xiàn)刺突蛋白S1在體內(nèi)抑癌的效果比體外的效果好得多，推測原因可能是刺突蛋白S1引起了免疫系統(tǒng)的________功能激活。為了進一步確認肺部腫瘤比例的減少到底是不是因為新冠病毒刺突蛋白S1的作用，還應(yīng)增加一組對照為NNK+________。

(4)上述研究成果是否足以證明感染新冠病毒可以治療肺癌？請做出判斷并說明理由________________。評卷人得分五、綜合題(共4題，共36分)32、我國釀酒技術(shù)歷史悠久；許多古籍有所記載?！短茣酚涊d，“葡萄酒，西域有之及破高昌京中始識其味?！薄妒酚洝ご笸鹆袀鳌酚涊d，“宛左右以蒲陶（即葡萄）為酒，富人藏酒至萬馀石，久者數(shù)十歲不敗?！被卮鹣铝袉栴}：

（1）葡萄酒的制作需要以酵母菌為菌種；其異化作用類型是________。酵母菌與醋酸菌在細胞結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是醋酸菌________________________。

（2）使用血細胞計數(shù)板對活菌種進行計數(shù)；取1ml菌體培養(yǎng)液并適當(dāng)稀釋（稀釋樣液的無菌水中加入幾滴臺盼藍染液），顯微鏡下觀察計數(shù)，只計________（填“被”或“不被”）染成藍色的菌體。

（3）家庭釀造葡萄酒，時間最好選在9或10月份，原因是________________________，酵母菌主要來自________________。在釀酒過程中；會出現(xiàn)“先來水后來酒”的現(xiàn)象，產(chǎn)生水的生理過程及所處的階段是________________，是否有酒精產(chǎn)生，可以用________________（試劑）檢測。

（4）如果發(fā)酵裝置中混入醋酸菌，在果酒發(fā)酵旺盛期間發(fā)酵液中________（填“有”或“沒有”）醋酸產(chǎn)生，原因是________________________。33、木質(zhì)素廣泛存在于植物細胞壁；是自然界含量僅次于纖維素的有機化合物。利用微生物降解木質(zhì)素對于造紙工業(yè)廢水處理；生產(chǎn)乙醇燃料具有重要意義。科研人員開展相關(guān)研究，從秸稈堆積處地表下篩選出高效分解木質(zhì)素微生物，初篩培養(yǎng)基成分見下表。回答以下問題：

。成分木質(zhì)素硝酸銨硫酸鎂磷酸二氫鉀磷酸氫二鈉瓊脂蒸餾水含量2．0g1．33g0．5g1．0g0．2g20g1000ml（1）該培養(yǎng)基從功能上來看屬于______培養(yǎng)基，其依據(jù)是______。

（2）該培養(yǎng)基的滅菌方法是______。為進一步分離純化，在含有愈創(chuàng)木酚的鑒別培養(yǎng)基上進行接種的方法是______。

（3）該類微生物會產(chǎn)生分解木質(zhì)素的漆酶，利用凝膠色譜法可以提純該酶，其原理是______。

（4）研究發(fā)現(xiàn)CU2+對漆酶活性有影響，其結(jié)果見下圖所示，據(jù)圖分析可以得出的結(jié)論是______。

34、生物武器的作用途徑有哪些？_____35、CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)榮獲2020年度諾貝爾化學(xué)獎；CRISPR/Cas9系統(tǒng)由Cas9蛋白和一條向?qū)NA構(gòu)成。向?qū)NA中含20個堿基的識別序列，可以和目標(biāo)DNA的靶位點結(jié)合，在向?qū)NA引導(dǎo)下，Cas9將DNA雙鏈切斷（如圖1所示）。水稻是世界上最重要的糧食作物之一，供養(yǎng)了世界將近50%的人口。由子囊菌引起的稻瘟病，是水稻生產(chǎn)上最嚴(yán)重的病害之一，常常導(dǎo)致水稻產(chǎn)量嚴(yán)重損失。為研究水稻OsERF922基因與稻瘟病抗性的關(guān)系，我國科研工作者利用CRISPR/Cas9技術(shù)獲得了水稻OsERF922基因敲除植株。請回答下列問題：

(1).向?qū)NA和Cas9蛋白形成的復(fù)合物，在功能上接近于限制酶，但是它比限制酶更具備的優(yōu)勢是___________________________。

(2).利用CRISPR/Cas9技術(shù)獲得了水稻OsERF922基因敲除植株實驗步驟如下：根據(jù)OsERF922基因序列，選擇合適的___________________，設(shè)計向?qū)NA，然后利用PCR反應(yīng)得到向?qū)NA對應(yīng)的DNA片段，將該片段連接到CRISPR/Cas9載體上，得到CRISPR/Cas9基因表達載體；CRISPR/Cas9基因表達載體應(yīng)該具備的能力是：__________________________________________________。將CRISPR/Cas9基因表達載體導(dǎo)入____________________，并用它侵染水稻細胞；再將被侵染成功的水稻細胞通過__________________技術(shù)；最終獲得OsERF922基因敲除水稻植株。

(3).前人研究表明，下調(diào)OsERF922基因的表達能提高植物與防御相關(guān)的一些基因（如植物抗毒素生物合成酶）的表達量，據(jù)此推測OsERF922基因敲除水稻植株對稻瘟病的抵抗力會_________________（“增強”或者“減弱”）。要證明此推測，請簡要寫出實驗思路：________________。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、C【分析】【分析】

基因治療是指將外源正?；?qū)氚屑毎?；以糾正或補償缺陷和異?；蛞鸬募膊?，以達到治療目的。其中也包括轉(zhuǎn)基因等方面的技術(shù)應(yīng)用，也就是將外源基因通過基因轉(zhuǎn)移技術(shù)將其插入病人的適當(dāng)?shù)氖荏w細胞中，使外源基因制造的產(chǎn)物能治療某種疾病。從廣義說，基因治療還可包括從DNA水平采取的治療某些疾病的措施和新技術(shù)。

【詳解】

A；將含胰島素基因的表達載體轉(zhuǎn)入大腸桿菌；篩選獲得的基因工程菌可以通過二分裂的方式遺傳給后代，A不符合題意；

B；通過植物體細胞雜交獲得的番茄--馬鈴薯雜種植株；遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，可以通過無性繁殖遺傳給子代，B不符合題意；

C；將腺苷酸脫氨酶基因轉(zhuǎn)入淋巴細胞；只是淋巴細胞含有這個基因，其生殖細胞的該基因沒有改變，因此不能遺傳給子代，C符合題意；

D；將生長激素基因?qū)肽膛Ｊ芫?；受精卵含有生長素基因，受精卵培育成的奶牛含有該基因，因此可以遺傳給后代，D不符合題意。

故選C。2、D【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)必需條件包括：無菌、無毒的環(huán)境，適宜的溫度和pH，O2等氣體環(huán)境。

【詳解】

分析可知，適宜的光照條件不屬于動物細胞培養(yǎng)的必需條件，故選D。3、B【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

【詳解】

A；轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全問題需要驗證才能得到證實；若轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來源于自然界，也有可能存在安全問題，A錯誤；

B；克隆人違背現(xiàn)有的倫理道德；將嚴(yán)重威脅著人類社會的穩(wěn)定，打破原有的人際關(guān)系，影響人類社會的進步，會造成嚴(yán)重的社會問題，B正確；

C；雖然轉(zhuǎn)基因技術(shù)沒有新基因產(chǎn)生；但導(dǎo)入受體細胞的位置是隨機的等原因，所以存在安全問題，C錯誤；

D；大田種植轉(zhuǎn)基因抗旱、抗除草劑農(nóng)作物可能會存在生物安全性問題；如造成基因污染，形成“超級雜草”，D錯誤。

故選B。4、C【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A、纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶；前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖.，A錯誤；

B；分離分解纖維素的細菌時；使用的選擇性培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分特點是僅以纖維素為唯一碳源，B錯誤；

C；剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物；當(dāng)纖維素被分解后；紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，故經(jīng)一段時間培養(yǎng)后，應(yīng)挑選周圍出現(xiàn)透明圈的菌落，可篩選出纖維素分解菌，C正確；

D；分離純化纖維素分解菌時可采用平板劃線法；但不能計數(shù)，D錯誤。

故選C。

【點睛】5、C【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊；正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。

【詳解】

A；對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)；應(yīng)趨利避害，這樣可以避免轉(zhuǎn)基因生物引發(fā)的安全性問題，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因生物引起安全性問題的原因之一是外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機的；可能會出現(xiàn)意想不到的后果，B正確。

C；對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)；應(yīng)趨利避害，這樣可以避免轉(zhuǎn)基因生物引發(fā)的安全性問題，C錯誤；

D；轉(zhuǎn)基因生物有可能造成安全性問題；也能造福人類，因此不能一概而論，D正確。

故選C。6、C【分析】【分析】

從土壤中篩選目的微生物的流程一般為：土壤取樣→樣品的稀釋→將稀釋液涂布到以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上→挑選能生長的菌落→鑒定。當(dāng)樣品的稀釋庋足夠高時；培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。稀釋涂布平板法可以用于微生物計數(shù)，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中大約含有的活菌數(shù)。

【詳解】

A；因為土壤中各類微生物的數(shù)量不同；所以，為獲得不同類型的微生物要按不同的稀釋倍數(shù)進行分離，A正確；

B；測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數(shù)量；選用的稀釋范圍不同，B正確；

C；平板劃線法可以用于微生物的分離；而不能用于計數(shù)，稀釋涂布平板法可以用于微生物計數(shù)，C錯誤；

D；牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的菌落數(shù)明顯大于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目；說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些細菌菌落，D正確。

故選C。

【點睛】

本題主要考查篩選與分離目的微生物的相關(guān)知識，意在強化學(xué)生對所學(xué)知識的識記、理解與掌握。7、D【分析】【分析】

腐乳的制作原理：參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉；酵母、曲霉、毛霉等多種；其中起主要作用的是毛霉，其代謝類型為異養(yǎng)需氧型，適宜溫度為15～18℃；毛霉能夠產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶，將蛋白質(zhì)和脂肪分別水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。

【詳解】

A；相比豆腐；腐乳中氨基酸、脂肪酸增多，營養(yǎng)價值比豆腐高，且腐乳容易保存，A正確；

B；參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多種微生物；其中起主要作用的是毛霉，故酵母菌液曾參與腐乳的發(fā)酵，B正確；

C；腐乳制作過程中；毛霉產(chǎn)生的蛋白酶和脂肪酶將豆腐中的蛋白質(zhì)、脂肪分解成小分子有機物并利用其中一部分能量，因此腐乳制作過程中有機物種類增多，但有機物的干重減少，含有的能量減少，C正確；

D；蛋白質(zhì)分解產(chǎn)物為氨基酸和小分子的肽；D錯誤。

故選D。8、B【分析】【分析】

該圖是植物原生質(zhì)體融合以及植物細胞培養(yǎng)過程圖；①表示利用化學(xué)或物理方法融合細胞，②表示正在融合的細胞，③表示雜種細胞，④表示雜種植株。植物組織培養(yǎng)：在無菌和人工控制的條件下，將離體的植物器官；組織、細胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。

【詳解】

A；在培育高產(chǎn)耐鹽植株時；若使用化學(xué)方法誘導(dǎo)甲、乙原生質(zhì)體融合，則①過程可選用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑，A錯誤；

B；甲、乙原生質(zhì)體經(jīng)誘導(dǎo)融合后可能形成甲和甲融合、乙和乙融合及甲和乙融合的細胞；且②為尚未再生出細胞壁的原生質(zhì)體，不是細胞，B正確；

C；愈傷組織到④只需經(jīng)過再分化的過程；C錯誤；

D；對目的植株進行篩選應(yīng)從植物性狀水平篩選；而運用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)屬于細胞水平，故應(yīng)當(dāng)用高鹽環(huán)境對目的植株進行篩選，D錯誤。

故選B。9、B【分析】【分析】

克隆是指生物體通過體細胞進行的無性繁殖；以及由無性繁殖形成的基因型完全相同的后代個體組成的種群，通常是利用生物技術(shù)由無性生殖產(chǎn)生與原個體有完全相同基因后代的過程。

【詳解】

A；單個大腸桿菌通過二分裂增殖逐漸形成大腸桿菌單菌落；二分裂是無性生殖，屬于克隆，A正確；

B；壁虎短尾后長出新尾巴是細胞分裂、分化的結(jié)果；不屬于克隆，B錯誤；

C；PCR技術(shù)的原理是DNA復(fù)制；其擴增基因的過程即DNA的復(fù)制，屬于分子水平上的克隆，C正確；

D；利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)擴繁蘭花屬于無性生殖；相當(dāng)于個體水平上的克隆，D正確。

故選B。二、多選題(共9題，共18分)10、A:C【分析】【分析】

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過足夠稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后，可形成單菌落。

【詳解】

A；甲培養(yǎng)皿的菌落均勻分布；接種方法應(yīng)為稀釋涂布平板法，A正確；

B；甲、丙培養(yǎng)基菌落數(shù)目多；包括野生型酵母菌菌株和某種營養(yǎng)缺陷型酵母菌菌株，乙培養(yǎng)皿菌株是某種營養(yǎng)缺陷型酵母菌菌株，乙培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基，甲和丙是加入了同種營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，B錯誤；

C；由于基因突變具有不定向性；接種到甲培養(yǎng)皿的酵母菌可能還有其他營養(yǎng)缺陷型，且有些菌落不一定由一個酵母菌形成，所以，甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少，C正確；

D；乙培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基；形成的菌落只可能是野生型菌落，D錯誤。

故選AC。11、A:B【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)的原理利用的是細胞的增殖；培養(yǎng)過程需要無毒無菌的環(huán)境；充足的營養(yǎng)、適宜的溫度和pH以及適宜的氣體環(huán)境。

【詳解】

A；細胞體外培養(yǎng)所需的營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同；需要加入血清，以補充培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)，A正確；

B；在體外連續(xù)培養(yǎng)時；常采用胰蛋白酶或者膠原蛋白酶將細胞分開，B正確；

C；骨髓間充質(zhì)干細胞可以分化成胰島樣組織細胞；但沒有發(fā)育成一個完整的個體人，不能說明其具有發(fā)育的全能性，C錯誤；

D；由于導(dǎo)入的是胰島樣細胞；與血型無關(guān)，治療成功后康復(fù)者的血型不可能發(fā)生改變，D錯誤。

故選AB。12、B:C:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)：1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。2、原理：DNA復(fù)制。3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開。

【詳解】

A；DNA連接酶催化DNA片段連接；Taq酶催化脫氧核苷酸連接，故PCR擴增不需要DNA連接酶，A錯誤；

B；PCR技術(shù)的原理是堿基互補配對和DNA半保留復(fù)制；其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物，因此需設(shè)計一對與MT-like基因兩端序列互補的引物，B正確；

C；為避免引物自連；設(shè)計引物時要避免引物之間形成互補堿基對，C正確；

D；因G-C堿基對之間的氫鍵多于A-T堿基對之間的氫鍵；GC堿基對含量高的雙鏈的穩(wěn)定性更高，故GC堿基對含量高的引物需要更高的退火溫度，D正確。

故選BCD。

【點睛】13、A:D【分析】【分析】

1；果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌；醋酸菌是一種好氧細菌，只有當(dāng)氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動，其代謝類型屬于異養(yǎng)需氧型。當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解為醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷４姿峋淖钸m生長溫度為30-35℃。

2；泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下；乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。

【詳解】

A；腌制泡菜若時間過短；容易造成乳酸菌、細菌大量繁殖，雜菌多，亞硝酸鹽含量增加，A錯誤；

B；家庭制作果醋；表面產(chǎn)生菌膜由醋酸菌形成，而泡菜表面的菌膜是酵母菌繁殖形成的，B正確；

C；當(dāng)氧氣不充足、缺少糖源時；醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?，C正確；

D、乳酸菌分解葡萄糖，只產(chǎn)生乳酸，不能產(chǎn)生CO2；D錯誤。

故選AD。

【點睛】14、A:C【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。（3）溫度和pH。（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。

【詳解】

A；用于培養(yǎng)的細胞大都取自胚胎或幼齡動物的器官或組織；因為胚胎或幼齡動物的器官或組織分裂能力旺盛，A正確；

B；動物細胞培養(yǎng)中需先用胰蛋白酶使所取的組織分散成單個細胞；胃蛋白酶的最適pH值呈酸性，而細胞培養(yǎng)液的pH大多數(shù)是7.2-7.4，B錯誤；

C；細胞存在接觸抑制；因此在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液進行傳代培養(yǎng)，C正確；

D；動物細胞培養(yǎng)傳到50左右不能再繼續(xù)傳代；部分細胞遺傳物質(zhì)改變，具有癌變細胞的特點，可以在培養(yǎng)條件下無限制的傳代下去，D錯誤。

故選AC。

【點睛】15、B:C:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)：1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。2、原理：DNA復(fù)制。3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；過程①是由mRNA形成單鏈DNA的過程；表示逆轉(zhuǎn)錄，需要RNA、逆轉(zhuǎn)錄酶、引物、脫氧核苷酸等條件，A錯誤；

B；真核細胞中DNA的外顯子部分轉(zhuǎn)錄的RNA拼接形成mRNA；因此真核細胞的mRNA經(jīng)過程①②逆轉(zhuǎn)錄過程獲得的DNA無內(nèi)含子片段，B正確；

C；CG含量越高；氫鍵越多，結(jié)構(gòu)越穩(wěn)定，因此過程③PCR擴增時引物中的CG含量會影響退火溫度，C正確；

D；新冠病毒遺傳物質(zhì)是RNA；RT-PCR技術(shù)可應(yīng)用于新冠病毒的核酸檢測，D正確。

故選BCD。

【點睛】16、C:D【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖示基因編輯豬培育過程涉及的技術(shù)手段有轉(zhuǎn)基因技術(shù)；核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)等，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將病毒外殼蛋白基因（目的基因）導(dǎo)入2號豬的體細胞核中，然后將2號豬的體細胞核移植到1號豬的去核卵母細胞中，再將重組細胞培養(yǎng)到囊胚并移植到3號豬的子宮中去，最后分娩產(chǎn)生了4號轉(zhuǎn)基因克隆豬。

【詳解】

A；對供體母豬使用促性腺激素處理；使其超數(shù)排卵，A正確；

B；獲得的卵母細胞去核后；需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才能進行核移植，B正確；

C；染色體位于細胞核；則產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來自于2號豬，C錯誤；

D；為檢測病毒外殼蛋白基因是否正常表達；可采用的方法是抗原-抗體雜交，D錯誤。

故選CD。17、A:C:D【分析】【分析】

大腸桿菌是原核生物；原核細胞與真核細胞相比，最大的區(qū)別是原核細胞沒有被核膜包被的成形的細胞核（沒有核膜；核仁和染色體）；原核細胞只有核糖體一種細胞器；原核細胞中，轉(zhuǎn)錄和翻譯在相同時空中進行，而真核生物的轉(zhuǎn)錄和翻譯過程在不同時間和空間進行。

【詳解】

A；人體胰島細胞是真核細胞；在合成胰島素原時，轉(zhuǎn)錄在細胞核中進行，翻譯在細胞質(zhì)的核糖體上進行，原核細胞沒有細胞核，A錯誤；

B；DNA連接酶能在兩個相同黏性末端配對后的磷酸與脫氧核糖之間形成化學(xué)鍵（磷酸二酯鍵）；B正確；

C；通過檢測；大腸桿菌中沒有胰島素原產(chǎn)生，不能判斷重組質(zhì)粒未導(dǎo)入受體菌，也可能是導(dǎo)入后沒有表達，C錯誤；

D；大腸桿菌是原核生物；沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能對胰島素原進行加工，因此人胰島素原基因在大腸桿菌中表達的胰島素原沒有生物活性，D錯誤。

故選ACD。18、B:D【分析】【分析】

動物細胞核移植技術(shù)是指將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。

【詳解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的體細胞通過克隆技術(shù)（屬于無性繁殖）獲得的；所以其基因組成差異小，可減少個體差異對實驗的干擾，A正確；

B；經(jīng)基因編輯后形成的胚胎不一定都能發(fā)育成克隆疾病猴；B錯誤；

C；克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機制和開發(fā)相應(yīng)藥物；C正確；

D；不能利用該技術(shù)進行克隆人的研究；D錯誤。

故選BD。

【點睛】三、填空題(共9題，共18分)19、略

【解析】①.動物細胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)、②.動物細胞融合與單克隆抗體20、略

【解析】遺傳和生理21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】遠緣雜交的不親和性細胞遺傳細胞免疫、22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】限制酶蛋白質(zhì)核苷酸序列特定的切點DNA連接酶缺口磷酸-脫氧核糖外源基因受體細胞質(zhì)粒噬菌體動植物病毒細菌酵母菌細胞核自主復(fù)制DNA分子23、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因重組基因拼接技術(shù)DNA重組技術(shù)人們意愿某種基因修飾改造另一種生物細胞里定向24、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA連接酶25、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】提取目的基因、目的基因與運載體結(jié)合、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。26、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】黏性末端平末端。27、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個細胞細胞懸液原代傳代四、實驗題(共4題，共36分)28、略

【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為兼性厭氧型，果酒制作原理是酵母菌在無氧條件下，利用葡萄糖產(chǎn)生酒精和CO2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型，當(dāng)氧氣；糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

（1）在果醋制作時；醋酸菌在供應(yīng)氧氣和糖源充足時，能將糖分解成醋酸；在糖源不充足時，也可以利用酒精生成醋酸。反應(yīng)式為：C?H?OH+O?→CH?COOH+H?O

（2）制作泡菜的腌制過程中；會產(chǎn)生亞硝酸鹽。在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N—1—萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰色染料。

（3）腐乳制作的流程是：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。用鹽腌制時；應(yīng)注意控制鹽的用量；配制鹵湯時，要使鹵湯中酒的含量控制在12%左右，若酒精含量過高會延長腐乳成熟的時間，若酒精含量過低則不足以殺菌。

（4）在果酒制作時；混有雜菌可能會讓果酒變酸。

【點睛】

本題考查果酒和果醋的制作、腐乳的制作、泡菜的制作等知識，要求學(xué)生掌握果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的原理及條件，掌握亞硝酸鹽的測定方法，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。【解析】氧氣C?H?OH+O?→CH?COOH+H?O鹽酸酸化重氮化玫瑰色鹽的用量12混有雜菌29、略

【分析】【分析】

培養(yǎng)基的制作流程一般為：計算→稱量→溶化（包括瓊脂）→調(diào)節(jié)pH→分裝→滅菌→倒平板→（冷卻后）倒置平板。微生物接種是微生物學(xué)研究中最常用的基本操作；主要用于微生物的分離純化。具體來說，就是在無菌條件下，用接種環(huán)或接種針等專用工具，從一個培養(yǎng)皿（上面可能存在各種雜菌落）挑取所需的微生物，轉(zhuǎn)接到另一個培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)的方法?！拘?】

培養(yǎng)基的組成成分包括碳源；氮源、水、無機鹽、生長因子等。倒平板時；應(yīng)待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右倒平板，平板冷凝后要將平板倒置，倒平板過程中應(yīng)在酒精燈火焰附近進行，以防止雜菌污染?！拘?】

題干中表明菌體密集均勻分布在平板上；所以是稀釋涂布平板法接種。培養(yǎng)基滅菌合格，影響因素應(yīng)為除培養(yǎng)基滅菌以外可能的影響因素，因此，可能操作過程中是否無菌操作，以及使用的濾紙條是否滅菌合格等。A為對照組，應(yīng)除自變量以外，其他條件都相同，因此，處理方法為浸泡在無菌水中處理后貼于平板中央；實驗中能觀察到出現(xiàn)野生型菌株菌落，說明環(huán)境中存在化學(xué)致癌劑導(dǎo)致突變型菌株突變成野生型菌株?！拘?】

使用過的培養(yǎng)基應(yīng)滅菌后再丟棄；以防止培養(yǎng)基中的有害物質(zhì)污染環(huán)境或感染實驗操作者。

【點睛】

本題考查培養(yǎng)基的成分、制備過程以及微生物的接種方法等相關(guān)知識，意在考查考生對所學(xué)知識的識記和理解能力?！窘馕觥俊拘☆}1】①.碳源；氮源、水和無機鹽②.待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時；在酒精燈火焰旁附近倒平板。

【小題2】①.稀釋涂布平板②.濾紙片是否滅菌徹底和待測化合物是否含有雜菌③.（濾紙片）用無菌水浸泡④.his-菌株在培養(yǎng)基上突變?yōu)閔is+菌株；說明待測化合物中存在致癌劑（或待測化合物中存在化學(xué)誘變劑，這些化學(xué)物質(zhì)具有致癌性，敘述合理即可）

【小題3】滅菌，避免對環(huán)境造成污染30、略

【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因奶牛的產(chǎn)生采用了體外受精（精子的采集和獲能；卵母細胞的采集和培養(yǎng)、受精）、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。

【詳解】

（1）參與PCR的主要物質(zhì)：引物；熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（Taq酶）、原料（dNTP）、模板和緩沖液（其中需要Mg2+）等；故主要使用熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（Taq酶）?；虮磉_載體包括目的基因、啟動子、終止子、復(fù)制原點和標(biāo)記基因等，故要使人血清白蛋白基因在轉(zhuǎn)基因奶牛的乳腺細胞中表達，應(yīng)將其與（牛）乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組。

（2）基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟。將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法。

（3）體外受精是指哺乳動物的精子和卵子在體外人工控制的環(huán)境中完成受精過程的技術(shù)。成熟的精子在受精前需獲能處理；過程②包括早期胚胎培養(yǎng)（動物細胞培養(yǎng)）技術(shù)和胚胎移植技術(shù)。為了獲得多只與該轉(zhuǎn)基因奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢；可進行胚胎分割，操作時的注意事項是將囊胚階段的內(nèi)細胞團均等分割。

（4）若要檢測牛奶中是否含有人血清白蛋白；根據(jù)抗原特異性結(jié)合原理，可采用抗原—抗體雜交技術(shù)。

【點睛】

本題考查基因工程等知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟；蛋白質(zhì)工程是通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)。能根據(jù)題干信息設(shè)計實驗，綜合考察運用生物學(xué)知識解決實際問題的能力。【解析】熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）（牛）乳腺蛋白基因表達載體的構(gòu)建顯微注射法獲能早期胚胎培養(yǎng)（動物細胞培養(yǎng)）胚胎分割抗原—抗體雜交31、略

【分析】【分析】

在動物細胞培養(yǎng)過程中，為防止培養(yǎng)過程中雜菌污染，通常要在細胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素。培養(yǎng)過程中通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

【詳解】

（1）培養(yǎng)動物細胞時，為防止培養(yǎng)過程中雜菌污染，通常要在細胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素。培養(yǎng)肺癌細胞需要提供適宜溫度和維持培養(yǎng)液的pH，因此要放在37℃的含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

根據(jù)題干“新冠刺突蛋白S1可緩解肺癌發(fā)展”及圖可知；刺突蛋白能促進細胞凋亡，且在一定范圍內(nèi)，隨著所用的刺突蛋白的濃度增大，其促進凋亡的效果越明顯。

（2）NNK是尼古丁的衍生物亞硝胺酮；是致癌物，用其長時間處理小鼠目的是誘導(dǎo)小鼠肺部腫瘤產(chǎn)生，即侯建肺癌小鼠模型。

（3）由題干“刺突蛋白S1在體內(nèi)抑癌的效果比體外的效果好得多”可知；在體內(nèi)環(huán)境下，刺突蛋白S1激活了免疫系統(tǒng)的免疫監(jiān)視功能，進而識別和殺傷以及清除體內(nèi)的突變細胞,防止腫瘤的發(fā)生。為探究肺部腫瘤比例的減少是不是因為新冠病毒刺突蛋白S1的作用，還應(yīng)該設(shè)計一組對照：NNK+等量其他外源蛋白，若實驗組肺部腫瘤比例的減少量大于對照組，說明肺部腫瘤比例的減少確實是因為新冠病毒刺突蛋白S1的作用。

（4）由題干“媒體報道稱感染新冠病毒可以治療肺癌”可知，其自變量為是否感染新冠病毒，而論文中自變量為刺突蛋白S1處理的濃度，二者不是同種變量，刺突蛋白并不能模擬新冠病毒的感染，無法做出上述推測，因此結(jié)論并不可靠?！窘馕觥?1)抗生素含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱刺突蛋白能促進細胞凋亡；且在一定范圍內(nèi)，濃度大的促進凋亡效果好。（答出自變量和因變量的定性和定量關(guān)系即可）

(2)建立肺癌小鼠模型（誘導(dǎo)肺部腫瘤產(chǎn)生）

(3)免疫監(jiān)視等量其他外源蛋白。

(4)不合理（1分）自變量不同，媒體的報導(dǎo)中的自變量是新冠病毒的感染，論文中的是刺突蛋白S1，刺突蛋白并不能模擬新冠病毒的感染/對照設(shè)置不合理，結(jié)論不可靠（與不合理偶聯(lián)，從自變量或?qū)嶒炘O(shè)計角度合理即可）五、綜合題(共4題，共36分)32、略

【分析】【分析】

1.果酒的制作離不開酵母菌；酵母菌是兼性厭氧型生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，在無氧條件下，酵母菌進行酒精發(fā)酵。溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件，20℃左右，酒精發(fā)酵時，一般將溫度控制在18~25℃，在葡萄酒自然發(fā)酵過程當(dāng)中，其主要作用的是附著在葡萄皮上的野生酵母菌。

2.醋酸菌是一種好氧細菌；只有當(dāng)氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動。醋酸菌對氧氣的含量特別敏感，當(dāng)進行深層發(fā)酵時，即使只是短時間中斷通入氧氣，也會引起醋酸菌死亡。當(dāng)氧氣；糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?。醋酸菌的最適生長溫度為30~35℃。

【詳解】

（1）葡萄酒的制作需要以酵母菌為菌種；其異化作用類型是兼性厭氧型，即既能進行有氧呼吸，也能進行無氧呼吸（酒精發(fā)酵）。酵母菌為單細胞真菌，為真核生物，而醋酸菌是原核生物，二者在細胞結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是醋酸菌沒有核膜包被的細胞核。

（2）使用血細胞計數(shù)板對活菌種進行計數(shù)；取1ml菌體培養(yǎng)液并適當(dāng)稀釋（稀釋樣液的無菌水中加入幾滴臺盼藍染液），由于細胞膜具有選擇透過性，活菌不被臺盼藍染色，因此，在顯微鏡下觀察計數(shù)，只計不被染成藍色的菌體即為活菌數(shù)。

（3）家庭釀造葡萄酒；時間最好選在9或10月份，因為此時的環(huán)境溫度適宜酵母菌的生長繁殖，發(fā)酵過程利用的酵母菌主要來自附著在葡萄皮上的野生型酵母菌。在釀酒過程中，會出現(xiàn)“先來水后來酒”的現(xiàn)象，其中水是在酵母菌有氧呼吸的第三階段產(chǎn)生的，酒精是酵母菌無氧呼吸的產(chǎn)物，是否有酒精產(chǎn)生，可以用（酸性）重鉻酸鉀檢測，檢測表現(xiàn)出灰綠色，意味著有酒精生成。

（4）如果發(fā)酵裝置中混入醋酸菌；在果酒發(fā)酵旺盛期間發(fā)酵液中沒有醋酸產(chǎn)生，因為醋酸菌是嚴(yán)格的需氧型微生物，在缺氧環(huán)境中無法生長繁殖，即醋酸菌不適應(yīng)果酒發(fā)酵時缺氧的環(huán)境。

【點睛】

熟知果酒、果醋制作的原理以及涉及菌種的生理特性是解答本題的關(guān)鍵，掌握果酒、果醋制作的操作要點是解答本題的另一關(guān)鍵?！窘馕觥浚?）兼性厭氧型無以核膜為界限的細胞核（2）不被（3）此時的環(huán)境溫度適宜酵母菌的生長繁殖附著在葡萄皮上的野生型酵母菌有氧呼吸第三階段（酸性）重鉻酸鉀（4）沒有醋酸菌進行有氧呼吸，無法適應(yīng)果酒發(fā)酵時缺氧的環(huán)境33、略

【分析】【分析】

1；在微生物學(xué)中；將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱做選擇培養(yǎng)基。雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）和無機鹽。另外還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。

2；微生物常見的接種的方法：（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能