2025年華師大新版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年華師大新版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、下列關(guān)于動物細胞工程的敘述，錯誤的是（）A.動物細胞培養(yǎng)過程中通常會出現(xiàn)細胞貼壁現(xiàn)象B.胚胎干細胞可以用于治療人類的某些疾病C.動物細胞培養(yǎng)過程中需使用胃蛋白酶D.動物細胞培養(yǎng)液中通常需加入血清、血漿等天然成分2、下列傳統(tǒng)發(fā)酵食品的生產(chǎn)與所用主要微生物對應(yīng)正確的是（）

。選項。

傳統(tǒng)發(fā)酵食品。

微生物。

Ａ

果酒。

真核生物；酵母菌。

Ｂ

果醋。

原核生物；乳酸菌。

Ｃ

泡菜。

原核生物；醋酸菌。

Ｄ

腐乳。

原核生物；毛霉。

A.AB.BC.CD.D3、下列有關(guān)果酒、果醋和腐乳制作的敘述，錯誤的是（）A.都需添加香辛料和鹽等佐料，以提高產(chǎn)品的口感B.都需要防止雜菌污染，以免降低產(chǎn)品品質(zhì)C.應(yīng)用的主要微生物均以DNA作為遺傳物質(zhì)D.果酒制作需要控制無氧條件，果醋制作需要注意通氣4、將某種海魚的抗凍基因?qū)胛骷t柿細胞中，培育成耐低溫的西紅柿新品種，這種導(dǎo)入外源基因的方法屬于A.雜交育種B.轉(zhuǎn)基因技術(shù)C.單倍體育種D.多倍體育種5、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物安全性的敘述，錯誤的是A.種植轉(zhuǎn)基因作物應(yīng)與傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)種植區(qū)隔離B.轉(zhuǎn)基因作物被動物食用后，目的基因會轉(zhuǎn)入動物體細胞中C.種植轉(zhuǎn)基因植物有可能因基因擴散而影響野生植物的遺傳多樣性D.轉(zhuǎn)基因植物的目的基因可能轉(zhuǎn)入根際微生物6、細胞合成DNA通常有2條途徑：第1條途徑是利用糖和氨基酸合成核苷酸，進而合成DNA；第2條途徑是通過HGPRT利用核苷酸的前體合成核苷酸，進而合成DNA．HAT培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基添加了次黃嘌呤（H）、甲氨蝶呤（A）和胸腺嘧啶核苷（T），A可以阻斷DNA合成的第1條途徑，H和T則是第2條途徑中合成核苷酸的原料。HAT培養(yǎng)基可以用于單克隆抗體制備雜交瘤細胞的選擇，小鼠骨髓瘤細胞是一類HGPRT代謝缺陷型細胞。下列說法正確的是（）A.小鼠免疫B細胞和骨髓瘤細胞融合后，培養(yǎng)基上會有3種類型的細胞B.HAT培養(yǎng)基中未融合的骨髓瘤細胞在A的阻遏下因不能合成DNA而死亡C.HAT培養(yǎng)基中未融合的免疫B細胞仍具有增殖能力而持續(xù)進行細胞分裂D.HAT培養(yǎng)基中選擇出的雜交瘤細胞都能無限增殖和產(chǎn)生單克隆抗體7、利用重疊延伸PCR技術(shù)進行定點突變可以實現(xiàn)對纖維素酶基因進行合理性改造；其過程如下圖所示。下列分析錯誤的是（）

A.PCR1過程中的產(chǎn)物AB是依賴引物a和引物b擴增的結(jié)果B.引物c和引物b上均含有與模板鏈不能互補的堿基C.①過程需要先加熱至90～95℃后再冷卻至50～60℃D.②過程需要利用引物a和引物d獲得突變產(chǎn)物AD8、利用東方百合和云南大百合進行植物體細胞雜交，部分結(jié)果如表。組別PEG濃度（%）處理條件融合率（%）125黑暗27±3℃15min102301212335151544030305452020

相關(guān)說法正確的是（）A.用胰蛋白酶處理百合組織分離得到原生質(zhì)體B.獲得原生質(zhì)體后，用血細胞計數(shù)板進行計數(shù)C.低濃度PEG促進原生質(zhì)體融合，高濃度抑制融合D.融合后的原生質(zhì)體直接經(jīng)再分化發(fā)育成雜種百合9、如圖是構(gòu)建基因表達載體的過程示意圖。下列相關(guān)說法正確的是（）

A.經(jīng)限制酶切割后，質(zhì)粒多了1個游離的磷酸基團，DNA分子多了2個游離的磷酸基團B.一個基因表達載體一般包括目的基因、標(biāo)記基因、起始密碼子和終止密碼子等結(jié)構(gòu)C.構(gòu)建的重組質(zhì)粒一定含有目的基因并能表達出所需的性狀D.將構(gòu)建好的基因表達載體導(dǎo)入動物細胞常用顯微注射法評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)10、下列有關(guān)哺乳動物精子、卵子的發(fā)生及受精作用的敘述，正確的是（）A.卵細胞膜反應(yīng)是防止多精入卵的一道屏障B.卵子形成的過程需在卵巢和輸卵管內(nèi)完成C.卵子發(fā)生時，MⅠ和MⅡ過程是不連續(xù)的，但細胞質(zhì)均等分配D.精子和卵子結(jié)合的過程中，卵子完成減數(shù)第二次分裂11、下列關(guān)于試管嬰兒技術(shù)的敘述，正確的是（）A.在采集卵母細胞之前，需要給供卵者注射適量的促性腺激素，促進排卵B.從卵巢中吸取的卵母細胞，必須經(jīng)體外培養(yǎng)獲能處理后才能用于受精C.受精過程中，卵母細胞會發(fā)生透明帶反應(yīng)和卵細胞膜反應(yīng)，阻止多精入卵D.設(shè)計試管嬰兒技術(shù)，有利于生育健康的下一代，不會造成社會危害12、轉(zhuǎn)MT-like基因的衣藻對Pb、Cd等重金屬離子的抗性明顯增強，對Cb2+富集效應(yīng)顯著。某研究小組計劃通過多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)擴增MT-like基因，并進一步通過基因工程手段構(gòu)建凈化重金屬廢水的工程菌。下列有關(guān)PCR操作的敘述，正確的是（）A.PCR擴增需要加入Taq酶和DNA連接酶B.需設(shè)計一對與MT-like基因兩端序列互補的引物C.設(shè)計引物時要避免引物之間形成互補堿基對D.長度相同，但GC含量高的引物需要更高的退火溫度13、根據(jù)某基因上游和下游的堿基序列；設(shè)計合成了用于該基因PCR的兩段引物（單鏈DNA）。引物與該基因變性DNA（單鏈DNA）結(jié)合為雙鏈DNA的過程稱為復(fù)性。下圖是兩引物的Tm（引物熔解溫度，即50%的引物與其互補序列形成雙鏈DNA分子時的溫度）測定結(jié)果，以下分析正確的是（）

A.兩引物分別與DNA的兩條互補單鏈結(jié)合，是子鏈延伸的起點B.PCR過程中，復(fù)性溫度應(yīng)低于引物的Tm值以提高PCR效率C.若兩引物的脫氧核苷酸數(shù)相同，推測引物2的（G＋C）含量較高D.適當(dāng)減少引物2的脫氧核苷酸數(shù)，可使其Tm值接近引物114、下圖為利用PCR技術(shù)擴增特定DNA片段的部分示意圖；圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。下列有關(guān)描述錯誤的是（）

A.利用PCR技術(shù)擴增目的基因時不需要解旋酶而需要耐高溫的DNA聚合酶B.引物是子鏈合成延伸基礎(chǔ)，子鏈沿著模板鏈的3’→5’方向延伸C.從理論上推測，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中只含有引物A的DNA片段所占的比例為15/16D.在第三輪循環(huán)產(chǎn)物中才開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段且占1/215、下圖表示形成cDNA并進行PCR擴增的過程。據(jù)圖分析；下列敘述錯誤的是（）

A.①過程所需的原料是脫氧核苷酸B.②過程所需的酶必須耐高溫C.③過程需要解旋酶破壞氫鍵D.④過程的引物對之間不能互補配對16、我國制作泡菜歷史悠久。《中饋錄》中記載：“泡菜之水，用花椒和鹽煮沸，加燒酒少許。如有霉花，加燒酒少許。壇沿外水須隔日一換，勿令其干?！毕铝姓f法錯誤的是（）A.“泡菜之水，用花椒和鹽煮沸”的目的是徹底滅菌B.“霉花”主要由酵母菌繁殖形成，酵母菌往往來自蔬菜C.“壇沿外水須隔日-換，勿令其干”的目的是保證壇內(nèi)適宜濕度D.制作泡菜的時間越長，亞硝酸鹽的含量越高17、抗體的結(jié)構(gòu)分為V區(qū)（識別并結(jié)合抗原的區(qū)域）和C區(qū)（抗體的支架），鼠源抗體具有外源性，會被人體免疫系統(tǒng)當(dāng)作抗原而清除。用人抗體的C區(qū)替換鼠源抗體的C區(qū)，保留鼠單抗的V區(qū)，可構(gòu)建人一鼠嵌合抗體，操作流程如圖所示。下列相關(guān)說法錯誤的是（）

A.與骨髓瘤細胞融合的B淋巴細胞為能分泌抗體的漿細胞B.用選擇性培養(yǎng)基可篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞C.為獲得結(jié)構(gòu)正確的嵌合抗體，受體細胞應(yīng)選用大腸桿菌D.人一鼠嵌合抗體在保留抗體特異性的同時外源性下降18、淀粉經(jīng)淀粉酶水解后得到的產(chǎn)物是重要的工業(yè)原料；但工業(yè)化生產(chǎn)常需在高溫條件下進行，而現(xiàn)有的淀粉酶耐熱性不強，科研人員發(fā)現(xiàn)將淀粉酶（AmyS1）第27位的亮氨酸替換為天冬氨酸能產(chǎn)生耐熱性高的淀粉酶（AmyS2），由此科研人員根據(jù)AmyS2的氨基酸序列設(shè)計并人工合成了AmyS2基因，將其導(dǎo)入芽孢桿菌內(nèi)，具體過程如下圖所示。最終結(jié)果表明，與導(dǎo)入質(zhì)粒B相比，導(dǎo)入質(zhì)粒C的芽孢桿菌培養(yǎng)液中更易獲得并提純AmyS2．下列說法錯誤的是（）

A.獲得AmyS2基因并將其導(dǎo)入芽孢桿菌得到AmyS2的過程是通過基因工程實現(xiàn)的B.構(gòu)建質(zhì)粒C時需用限制酶Eco52I和BamHI同時切割質(zhì)粒B和信號肽基因C.信號肽基因表達的產(chǎn)物可幫助核糖體上合成的AmyS2進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體D.可用PCR技術(shù)檢測芽孢桿菌的DNA上是否插入了AmyS2基因評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)19、細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就______，稱為______。細胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細胞分裂生長到表面______時，細胞就會_____，這種現(xiàn)象稱為______。20、今年年初；爆發(fā)了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過其表面的S-蛋白與人細胞膜上的ACE2相互識別，感染人的呼吸道上皮細胞。請分析回答問題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_________剌激淋巴細胞，使機體產(chǎn)生_________性免疫反應(yīng)，人細胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統(tǒng)對肺細胞強烈攻擊引發(fā)肺炎，此時可通過適度使用_________對病人進行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）科學(xué)家采集了感染新型冠狀病毒并已康復(fù)的甲、乙兩人的血液，檢測相關(guān)抗體的水平，結(jié)果如圖1。據(jù)此分析，應(yīng)選取_________的B淋巴細胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測病毒對宿主細胞的感染率，結(jié)果如圖2。據(jù)此分析，對病毒抑制效果最好的單抗是__________號。

（5）患者康復(fù)后一段時間，若再次受到該病毒的攻擊，機體內(nèi)相應(yīng)的__________細胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。21、生物武器的致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，但對植物無害。（選擇性必修3P111）()22、科學(xué)家采用定點誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會有什么變化？這項技術(shù)的要點是什么？_________23、應(yīng)用分析與比較的方法，對生殖性克隆與治療性克隆進行列表闡述?

生殖性克隆與治療性克隆的比較。比較項目生殖性克隆治療性克隆含義__________用到的技術(shù)__________目的__________評卷人得分四、判斷題(共3題，共9分)24、目前，種植的轉(zhuǎn)基因作物中以水稻和小麥最多，其次是轉(zhuǎn)基因棉花和油菜（______）A.正確B.錯誤25、目前動物細胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法。（選擇性必修3P54）()A.正確B.錯誤26、如果轉(zhuǎn)基因植物的外源基因源于自然界，則不會存在安全性問題。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共28分)27、（1）國家生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定細菌學(xué)指標(biāo)的限值：細菌總數(shù)為100CFU/mL（說明：CFU為菌落形成單位）。興趣小組同學(xué)通過濾膜法對某小區(qū)自供水設(shè)備的蓄水池進行細菌總數(shù)測定，將10mL的水樣進行過濾后，將濾膜放在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)時應(yīng)將平板倒置，其原因是___________________。

（2）所用培養(yǎng)基中的牛肉膏除為微生物提供________和_______外，還能提供磷酸鹽和________。在培養(yǎng)過程中，不同時間所觀察到的平板上菌落特征的差異有___________（至少寫出兩點）。

（3）上述檢測過程在37℃條件下經(jīng)24h培養(yǎng)后；測得如下結(jié)果：

。平板l平板2平板3細菌總數(shù)（CFU/mL）413538據(jù)上表結(jié)果判斷，所取水樣測定結(jié)果是_________________。28、研究表明生物制劑W對不同種類動物細胞的分裂均有促進作用。有同學(xué)設(shè)計相關(guān)實驗來驗證這個觀點。請根據(jù)以下提供的實驗材料；完善該實驗步驟，并預(yù)測實驗結(jié)果。

實驗材料：培養(yǎng)液；正常肝組織、肝癌組織、W、胰蛋白酶。

（要求與說明：答題時不考慮加入W后的體積變化等誤差。提供的細胞均具有分裂能力；只進行原代培養(yǎng)且培養(yǎng)條件適宜）

（1）實驗步驟：

①用_________分別處理正常肝組織和肝癌組織獲得分散的細胞。將兩種分散的細胞加入培養(yǎng)液中制成兩種細胞懸液。培養(yǎng)液需要中加入__________等營養(yǎng)物質(zhì)和__________用以滅菌。

②在顯微鏡下用_____________直接計數(shù)兩種細胞懸液中細胞的數(shù)量；并進行記錄。

③取滅菌后的培養(yǎng)瓶若干個均分為A、B兩組，A組加入正常肝細胞懸液；B組加入_________。從A、B組中各取出一半培養(yǎng)瓶作為C、D組，分別加入_________。放入動物細胞培養(yǎng)箱在適宜條件下培養(yǎng)。

④各組樣品在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段合適的時間后，每組取部分樣品，加入_____________后搖勻；在顯微鏡下計數(shù)并記錄細胞數(shù)量。

⑤重復(fù)④若干次。

⑥統(tǒng)計并分析所得數(shù)據(jù)。

（2）預(yù)測實驗結(jié)果（用坐標(biāo)系和曲線示意圖表示）_____________29、干燥綜合征（SS）是臨床常見的一種自身免疫病；患者血清中存在多種抗體，其中以SSB抗體特異性最強。下圖表示科研人員利用基因工程技術(shù)獲得SSB蛋白及利用SSB蛋白對小鼠進行免疫的過程?；卮鹣铝袉栴}：

(1)利用RNA通過①過程獲得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護尾部不被降解。為了針對性獲得cDNA，應(yīng)如何設(shè)計逆轉(zhuǎn)錄第一步時的DNA引物______，設(shè)計引物的目的是______。

(2)為確保與pET41a質(zhì)粒定向連接，對逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴增時，應(yīng)在相應(yīng)引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位點。

(3)③過程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時，需要用Ca2+處理大腸桿菌，目的是______，然后將處理后的大腸桿菌先接種在添加_______的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長出菌落后再利用無菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加______的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集_______菌落進一步純化后將菌體破碎處理；篩選得到SSB蛋白。

(4)將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測該蛋白是否具有抗原性，則后續(xù)實驗內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液_______。30、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導(dǎo)致的遺傳病。科研人員對此病的治療進行相關(guān)研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因由于堿基對___________造成突變，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子，最終導(dǎo)致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結(jié)構(gòu)差異顯著而失去活性，積累過多的黏多糖無法及時清除，造成人體多系統(tǒng)功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對。在上述這一類突變基因的翻譯過程中，加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________；從而誘導(dǎo)通讀獲得有功能的全長蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進行了相關(guān)研究，實驗結(jié)果如圖。

注：“-”代表未加入。

據(jù)圖分析，實驗組將___________基因?qū)胧荏w細胞，并采用___________技術(shù)檢測導(dǎo)入基因的表達情況。據(jù)結(jié)果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進行治療，檢測肝臟細胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實驗結(jié)果為_____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。評卷人得分六、綜合題(共3題，共27分)31、CAR-T細胞免疫療法；是一種治療腫瘤的新型精準(zhǔn)靶向療法。借助基因工程給T細胞裝上定位導(dǎo)航裝置CAR（腫瘤嵌合抗原受體），T細胞就能獲得特異性識別和攻擊腫瘤細胞的能力，猶如“細胞導(dǎo)彈”，能精確“點射”腫瘤細胞，但又不會傷及正常細胞。治療流程如下，回答下列有關(guān)問題：

（1）將T細胞改造成CAR-T細胞，可以借助逆轉(zhuǎn)錄病毒載體將CAR基因整合到正常T細胞的基因序列中，這個過程稱為____________。

（2）除借助病毒侵染外，也可通過電穿孔技術(shù)(通過高強度的電場作用，瞬時提高細胞膜的通透性，從而吸收周圍介質(zhì)中的外源分子)直接將____________導(dǎo)入細胞質(zhì)中進行表達，該方法相較于病毒侵染更安全，原因是________________________。

（3）讓CAR-T細胞進行增殖，需要用到____________技術(shù)，此技術(shù)應(yīng)在5%的CO2培養(yǎng)箱中進行，CO2的作用是________________________。

（4）將CAR-T細胞回輸?shù)交颊唧w內(nèi)后，CAR-T細胞表面的抗原受體能與____________發(fā)生特異性結(jié)合，從而高效地殺滅腫瘤細胞。32、請回答下列有關(guān)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的問題：

（1）楊梅酒制作的菌種是_________________。

（2）若在楊梅酒的基礎(chǔ)上，進一步制作楊梅醋，需要改變哪些條件？___________________。

（3）家庭制作楊梅酒不需要嚴(yán)格消毒的原因________________。

（4）腐乳制作過程中，毛霉主要產(chǎn)生哪些酶？__________，影響腐乳品質(zhì)的因素有哪些？___________。

（5）泡菜制作過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有哪些？____________。亞硝酸鹽的檢測方法是________，檢測過程中的吸附劑是______________。33、雜草會危害農(nóng)業(yè)生產(chǎn)；人為除草費工費時，除草劑的應(yīng)用可大量減輕人們的勞作，但除草劑在殺死雜草的同時也會使植物受到損傷。利用基因工程技術(shù)，將草甘膦（除草劑）抗性基因轉(zhuǎn)入玉米基因組中，培育出抗除草劑玉米可解決此項難題。下圖是培育抗除草劑玉米的流程圖，GUS基因表達的產(chǎn)物經(jīng)染色可由無色變?yōu)樗{色。回答下列問題：

(1)采用Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)運草甘膦抗性基因的原因是______。①過程用到的酶為_______。②過程用Ca2+處理農(nóng)桿菌細胞，使細胞處于一種______的生理狀態(tài)；然后與重組質(zhì)?；旌希瓿赊D(zhuǎn)化作用。

(2)在培育抗除草劑玉米的過程中存在兩次篩選，第一次篩選利用_______，篩選得到含基因表達載體的農(nóng)桿菌；第二次篩選若利用GUS基因表達產(chǎn)物對細胞進行鑒定，目的是，獲得_______。

(3)圖中脫分化需要在_______等條件的誘導(dǎo)下進行，由愈傷組織到植株的再分化過程中，先誘導(dǎo)_____（填“生根”或“生芽”），再誘導(dǎo)______（填“生根”或“生芽”），并且此過程每日需要給予適當(dāng)時間和強度的光照。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、C【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)過程取動物胚胎或幼齡動物器官；組織。將材料剪碎；并用胰蛋白酶（或用膠原蛋白酶）處理（消化），形成分散的單個細胞，將處理后的細胞移入培養(yǎng)基中配成一定濃度的細胞懸浮液。懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁。當(dāng)貼壁細胞分裂生長到互相接觸時，細胞就會停止分裂增殖，出現(xiàn)接觸抑制。此時需要將出現(xiàn)接觸抑制的細胞重新使用胰蛋白酶處理。再配成一定濃度的細胞懸浮液。另外，原代培養(yǎng)就是從機體取出后立即進行的細胞、組織培養(yǎng)。

【詳解】

A；結(jié)合分析可知；動物細胞培養(yǎng)的過程中通常會出現(xiàn)細胞貼壁生長的現(xiàn)象，A正確；

B；胚胎干細胞經(jīng)過誘導(dǎo)可分化成多種組織細胞；因而可以用于治療人類的某些疾病，B正確；

C；動物細胞培養(yǎng)過程中需使用胰蛋白酶將組織細胞分散成單個細胞制成單細胞懸液；而不能使用胃蛋白酶，C錯誤；

D；動物細胞培養(yǎng)液中通常需加入血清、血漿等天然成分；從而有利于動物細胞增殖，D正確。

故選C。

【點睛】2、A【分析】【分析】

果酒制作的原理：在無氧條件下；酵母菌能進行酒精發(fā)酵。方程式：C?H??O?→2C?H?OH+2CO?

果醋制作的原理：當(dāng)氧氣；糖源充足時；醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?。方程式：C?H?OH+O?→CH?COOH+H?O果酒在發(fā)酵過程中產(chǎn)生CO?，所以發(fā)酵后，PH會變小。果醋在發(fā)酵過程中生成醋酸，所以發(fā)酵后，pH會變小。

腐乳是好氧發(fā)酵；主要用的是毛霉，是霉菌。它是利用毛霉產(chǎn)生的蛋白酶分解豆制品中的蛋白質(zhì)，使用不易消化吸收的大分子蛋白質(zhì)分解為易于吸收的多肽，并產(chǎn)生多種風(fēng)味物質(zhì)。

泡菜是厭氧發(fā)酵；主要用的是乳酸菌，是細菌。它是利用乳酸菌在厭氧條件下產(chǎn)生乳酸，使蔬菜產(chǎn)生酸味，同時產(chǎn)生多種風(fēng)味物質(zhì)。

【詳解】

A；果酒制作是在無氧條件下；酵母菌能進行酒精發(fā)酵，酵母菌是真核生物，A正確；

B；發(fā)酵制果醋利用的微生物是醋酸菌；其為原核生物，B錯誤；

C；制泡菜利用的微生物是乳酸菌；其為原核生物，C錯誤；

D；制腐乳利用的微生物是毛霉；其為真核生物，D錯誤。

故選A。3、A【分析】【分析】

果酒；果醋和腐乳制作利用的微生物分別是酵母菌、醋酸菌和毛霉；其中酵母菌和毛霉屬于真核生物，醋酸菌屬于原核生物。

【詳解】

A；制作果酒、果醋不需添加香辛料和鹽等佐料；A錯誤；

B；果酒、果醋和腐乳制作過程中都需要防止雜菌污染；以免降低產(chǎn)品品質(zhì)，B正確；

C；真核生物h和原核生物均以DNA做遺傳物質(zhì)；C正確；

D；酵母菌在無氧條件下通過呼吸作用產(chǎn)生酒精；果酒制作需要控制無氧條件，醋酸菌為好氧菌，果醋制作需要注意通氣，D正確。

故選A。

【點睛】4、B【分析】【分析】

基因工程又叫轉(zhuǎn)基因技術(shù)；是指按照人們的意愿，進行嚴(yán)格的設(shè)計，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。

【詳解】

將一種生物的基因?qū)肓硪环N生物體內(nèi)需要采用基因工程技術(shù)。因此，將某種海魚的抗凍基因?qū)胛骷t柿細胞中，培育成耐低溫的西紅柿新品種，需要采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，這樣可以培育出在冬天也能長期保存的西紅柿。

故選B。5、B【分析】【分析】

【詳解】

A；種植轉(zhuǎn)基因作物應(yīng)與傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)種植區(qū)隔離；防止轉(zhuǎn)基因植物的基因通過雜交傳給其他農(nóng)作物，A正確；

B；動物取食轉(zhuǎn)基因作物后；要經(jīng)過消化吸收才進入身體，目的基因不可能直接進入動物細胞，B錯誤；

C；種植轉(zhuǎn)基因植物有可能因基因擴散而影響野生植物的遺傳多樣性；C正確；

D；轉(zhuǎn)基因植物的目的基因可能轉(zhuǎn)入根際微生物；D正確。

故選B。

【點睛】6、B【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)；使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細胞。利用動物細胞融合技術(shù)將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細胞，即AB型細胞（A為B淋巴細胞，B為骨髓瘤細胞），不需要A；B、AA、BB型細胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。

【詳解】

A；根據(jù)分析可知：小鼠免疫B細胞和骨髓瘤細胞融合后；培養(yǎng)基上會有5種類型的細胞，但最終生存下來的只有雜交瘤細胞，A錯誤；

B；由于小鼠骨髓瘤細胞是一類HGPRT代謝缺陷型細胞；因此骨髓瘤細胞合成DNA只第1條途徑，但是A可以阻斷DNA合成的第1條途徑，所以HAT培養(yǎng)基中未融合的骨髓瘤細胞在A的阻遏下因不能合成DNA而死亡，B正確；

C；免疫B細胞屬于高度分化的細胞；不再增殖，C錯誤；

D；HAT培養(yǎng)基中選擇出的雜交瘤細胞都能無限增殖；但不是都能產(chǎn)生單克隆抗體，D錯誤。

故選B。7、D【分析】【分析】

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4中游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

2；PCR反應(yīng)過程是：變性→復(fù)性→延伸。

3；結(jié)果：上述三步反應(yīng)完成后；一個DNA分子就變成了兩個DNA分子，隨著重復(fù)次數(shù)的增多，DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反應(yīng)過程都是在PCR擴增儀中完成的。

【詳解】

A、PCR技術(shù)中DNA單鏈延伸的方向是沿著引物的5'端向3'端延伸的，據(jù)此可分析，PCR1過程中的產(chǎn)物AB是依賴引物a和引物b擴增的結(jié)果；A正確；

B、根據(jù)突變位點的產(chǎn)生可推知，引物c和引物b上均含有與模板鏈不能互補的堿基；B正確；

C；①過程是雙螺旋解開的過程；即氫鍵斷裂可通過先加熱至90～95℃完成，而后再冷卻至55～60℃使氫鍵形成，為子鏈的延伸做準(zhǔn)備，C正確；

D；②過程為子鏈延伸的過程；該過程需要利用AB上鏈和CD下鏈之間的互補配對實現(xiàn)子鏈的延伸過程，D錯誤。

故選D。8、B【分析】【分析】

利用植物體細胞雜交技術(shù)培育雜種植物細胞；具體過程包括誘導(dǎo)植物細胞融合成雜種細胞和植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育成雜種植株兩過程。

【詳解】

A；百合是植物；其細胞壁的成分為纖維素和果膠，要得到原生質(zhì)體，需要用纖維素酶和果膠酶處理植物細胞，A錯誤；

B；獲得原生質(zhì)體后；細胞已經(jīng)分散，可以利用血細胞計數(shù)板進行計數(shù)，B正確；

C；從表格中看出；PEG濃度為40%時融合率最高，不管濃度過高還是過低對融合都是抑制作用，C錯誤；

D；融合后的原生質(zhì)體需要再生出細胞壁；再經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，再經(jīng)過再分化發(fā)育成雜種百合，D錯誤。

故選B。9、D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@?。焕肞CR技術(shù)擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；經(jīng)限制酶切割后；質(zhì)粒上出現(xiàn)2個黏性末端，多了2個游離的磷酸基團，DNA分子多了2個游離的磷酸基團，A錯誤；

B；一個基因表達載體一般包括目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因等結(jié)構(gòu)；B錯誤；

C；構(gòu)建的重組質(zhì)粒含有目的基因；但不一定能表達出所需的性狀，還需要進一步檢測，C錯誤；

D；將構(gòu)建好的基因表達載體導(dǎo)入動物細胞常用顯微注射法；D正確。

故選D。二、多選題(共9題，共18分)10、B:D【分析】【分析】

1；受精階段主要包括：精子穿越放射冠和透明帶；進入卵細胞膜，原核形成和配子結(jié)合。

2；阻止多精入卵的兩道屏障：透明帶反應(yīng)和卵細胞膜反應(yīng)。

3；多數(shù)哺乳動物卵子的形成和在卵巢內(nèi)的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動物排卵前后完成的；場所在卵巢。MⅡ是在受精過程中完成的，場所在輸卵管中。

【詳解】

A；透明帶反應(yīng)是防止多精入卵的第一道屏障；A錯誤；

B；卵子形成時的減數(shù)第一次分裂過程在卵巢內(nèi)完成；減數(shù)第二次分裂過程在輸卵管完成，B正確；

C；卵子發(fā)生時；MⅠ和MⅡ過程是不連續(xù)的，初級卵母細胞和次級卵母細胞的細胞質(zhì)不均等分配，C錯誤；

D；精子和卵子結(jié)合的過程中；卵子完成減數(shù)第二次分裂，形成雌原核，并排出第二極體，D正確。

故選BD。11、A:C【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；設(shè)計試管嬰兒技術(shù)是通過體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

【詳解】

A；在采集卵母細胞之前；需要給供卵者注射適量的促性腺激素，促進超數(shù)排卵，A正確；

B；從卵巢中吸取的卵母細胞；必須經(jīng)體外培養(yǎng)成熟后才能與獲能的精子受精，B錯誤；

C；受精過程中；卵母細胞會發(fā)生透明帶反應(yīng)和卵細胞膜反應(yīng)，這是防止多精入卵的兩道屏障，C正確；

D；以治療為目的的設(shè)計試管嬰兒技術(shù)；是救治患者最好、最快捷的辦法之一，不是有利于生育健康的下一代，并存在倫理問題，D錯誤。

故選AC。

【點睛】12、B:C:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)：1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。2、原理：DNA復(fù)制。3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開。

【詳解】

A；DNA連接酶催化DNA片段連接；Taq酶催化脫氧核苷酸連接，故PCR擴增不需要DNA連接酶，A錯誤；

B；PCR技術(shù)的原理是堿基互補配對和DNA半保留復(fù)制；其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物，因此需設(shè)計一對與MT-like基因兩端序列互補的引物，B正確；

C；為避免引物自連；設(shè)計引物時要避免引物之間形成互補堿基對，C正確；

D；因G-C堿基對之間的氫鍵多于A-T堿基對之間的氫鍵；GC堿基對含量高的雙鏈的穩(wěn)定性更高，故GC堿基對含量高的引物需要更高的退火溫度，D正確。

故選BCD。

【點睛】13、A:B:C:D【分析】【分析】

分析曲線圖：引物2的Tm高于引物1；說明引物2的熱穩(wěn)定性較高。

【詳解】

A；PCR過程是目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈；引物與單鏈互補結(jié)合，合成的子鏈在Taq聚合酶的作用下進行延伸，所以兩引物分別與DNA的兩條互補單鏈結(jié)合，是子鏈延伸的起點，A正確；

B；PCR過程中；復(fù)性溫度應(yīng)低于引物的Tm值以提高PCR效率，B正確；

C；DNA含有的氫鍵數(shù)越多；其熱穩(wěn)定性越高，而A和T堿基對間有兩個氫鍵，C和G堿基對間有三個氫鍵，曲線圖顯示：引物2的Tm高于引物1，說明引物2的熱穩(wěn)定性較高，因此若兩引物的脫氧核苷酸數(shù)相同，推測引物2的（G＋C）含量較高，C正確；

D；適當(dāng)減少引物2的脫氧核苷酸數(shù)；會降低引物2的熱穩(wěn)定性，可使其Tm值接近引物1，D正確。

故選ABCD。14、C:D【分析】【分析】

聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增DNA片段：

1.PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4中游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

2.PCR反應(yīng)過程是：變性→復(fù)性→延伸。

【詳解】

A；利用PCR技術(shù)擴增目的基因時不需要解旋酶；該過程中氫鍵的斷裂是通過高溫完成的，而子鏈延伸過程需要耐高溫的DNA聚合酶，A正確；

B；引物是子鏈合成延伸基礎(chǔ)；即DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，也可以說子鏈沿著模板鏈的3’→5’方向延伸，B正確；

C、從理論上推測，第四輪循環(huán)產(chǎn)物共有24=16個DNA分子；其中有2個是模板鏈，只含有引物A的DNA片段即為與其中的一個模板鏈形成的1個DNA分子，因此，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中只含有引物A的DNA片段所占的比例為1/16，C錯誤；

D、DNA復(fù)制為半保留復(fù)制，DNA復(fù)制n次，共形成2n個DNA，其中兩個DNA含有母鏈和子鏈（引物A或引物B），（2n-2）個DNA都含有子鏈（含有引物A和引物B）。第三輪循環(huán)即DNA復(fù)制3次；共形成8個DNA，其中2個DNA含有引物A或引物B，6個DNA含有引物A和引物B，其中只有2個兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段，含量為1/4，D錯誤。

故選CD。

【點睛】15、B:C【分析】【分析】

PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程；其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。

PCR由變性--退火--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：

①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后；使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；

②模板DNA與引物的退火（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后；溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合；

③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在72℃；DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下；以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基互補配對與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復(fù)制鏈，重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個循環(huán)需2～4分鐘，2～3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。

【詳解】

A；①過程為逆轉(zhuǎn)錄；所需的原料是脫氧核苷酸，A正確；

B；②過程由DNA單鏈合成DNA雙鏈過程所需要的DNA聚合酶不需要耐高溫；B錯誤；

C；③過程為變性；溫度上升到90℃以上時，雙鏈DNA解聚為單鏈，不需要DNA解旋酶破壞氫鍵，C錯誤；

D；④過程為復(fù)性；溫度降到50℃左右時，兩種引物通過堿基互補配對與兩條DNA單鏈結(jié)合，但引物對之間不能互補配對，D正確。

故選BC。16、A:C:D【分析】【分析】

1；泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌．在無氧條件下；乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。2、在制作泡菜時所配制的泡菜鹽水要煮沸，以殺滅鹽水中的微生物，防止雜菌污染。泡菜制作過程中，溫度過高、食鹽用量過低、腌制時間過短、容易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。

【詳解】

A；“泡菜之水；用花椒和鹽煮沸”的目的提升泡菜味道、減少水中的溶氧量和消毒殺菌防止雜菌污染，A錯誤；

B；“霉花”是指泡菜壇表面的一層白膜；主要由酵母菌繁殖形成，酵母菌往往來自蔬菜，B正確；

C；“壇沿外水須隔日一換；勿令其干”的目的是保證壇內(nèi)的無氧環(huán)境，C錯誤；

D；制作泡菜的過程；亞硝酸鹽的含量呈先上升后下降的趨勢，D錯誤。

故選ACD。17、A:B:C【分析】【分析】

1；骨髓瘤細胞為無限增殖的細胞；分裂能力強，制備單克隆抗體的過程中還需該雜交細胞具備分泌特異性抗體的功能，而漿細胞為能夠分泌抗體的細胞，故與骨髓瘤細胞融合的B淋巴細胞為能分泌抗體的漿細胞。

2；骨髓瘤細胞與B淋巴細胞在融合的過程中可能會出現(xiàn)多種融合結(jié)果；如骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合，B淋巴細胞與B淋巴細胞融合，而實驗需要的是骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合的細胞，需要用選擇性培養(yǎng)基進行篩選，但只能篩選出能雜交瘤細胞，而要篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞則需要進行專一性抗體檢測。

【詳解】

A；與骨髓瘤細胞融合的B淋巴細胞取自脾臟；不一定是能分泌抗體的漿細胞，A錯誤；

B；骨髓瘤細胞與B淋巴細胞在融合的過程中可能會出現(xiàn)多種融合結(jié)果；如骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合，B淋巴細胞與B淋巴細胞融合，而實驗需要的是骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合的細胞，需要用選擇性培養(yǎng)基進行篩選，但是只能篩選出能雜交瘤細胞，而要篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞則需要進行專一性抗體檢測，B錯誤；

C；抗體為分泌蛋白；需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體對其進行加工，大腸桿菌為原核生物，無高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，為獲得結(jié)構(gòu)正確的嵌合抗體，受體細胞不應(yīng)該選用大腸桿菌，C錯誤；

D；結(jié)合題干“鼠源抗體具有外源性；會被人體免疫系統(tǒng)當(dāng)作抗原而清除。用人抗體的C區(qū)替換鼠源抗體的C區(qū)，保留鼠單抗的V區(qū)，可構(gòu)建人一鼠嵌合抗體”可知，該抗體不是原本的鼠源抗體，保留了其V區(qū)，但是其中還有一部分來自于人本身，使得人一鼠嵌合抗體在保留抗體特異性的同時外源性下降，D正確。

故選ABC。18、A:B:C【分析】【分析】

基因工程：目的基因的篩選與獲取；構(gòu)建基因表達載體、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。

分泌蛋白的合成：首先；在游離的核糖體中以氨基酸為原料開始多肽鏈的合成。當(dāng)合成了一段肽鏈后，這段肽鏈會與核糖體一起轉(zhuǎn)移到粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上繼續(xù)合成過程，并且邊合成邊轉(zhuǎn)移到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)，再經(jīng)過加工；折疊，形成具有一定空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜鼓出形成囊泡，包裹著蛋白質(zhì)離開內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，到達高爾基體，與高爾基體融合，高爾基體對蛋白質(zhì)做進一步的加工，然后形成包裹著蛋白質(zhì)的囊泡轉(zhuǎn)運到細胞膜，與細胞膜融合。

【詳解】

A；科研人員根據(jù)AmyS2的氨基酸序列設(shè)計并人工合成了AmyS2基因；因此獲得AmyS2基因并將其導(dǎo)入芽孢桿菌得到AmyS2的過程是通過蛋白質(zhì)工程和基因工程實現(xiàn)的，A錯誤；

B；BamHI會破壞AmyS2基因；B錯誤；

C；在分泌蛋白的合成過程中；信號肽序列可幫助肽鏈進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)被切割，因此信號肽基因表達的產(chǎn)物可幫助核糖體上合成的AmyS2進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，但不能引導(dǎo)其進入高爾基體，C錯誤；

D；可用PCR技術(shù)檢測芽孢桿菌的DNA上是否插入了AmyS2基因；如果經(jīng)過PCR擴增，不出現(xiàn)擴增產(chǎn)物，說明沒有插入基因，反之，則成功插入，D正確。

故選ABC。三、填空題(共5題，共10分)19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】貼附在瓶壁上細胞貼壁相互抑制停止分裂增殖細胞的接觸抑制。20、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復(fù)的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據(jù)曲線圖可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對宿主細胞的感染率。根據(jù)柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對宿主細胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細胞，使機體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，人細胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。

（2）免疫系統(tǒng)對被新冠病毒感染后肺細胞強烈攻擊引發(fā)肺炎；此時可通過適度使用免疫抑制劑對病人進行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組，故應(yīng)選取甲的B細胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對宿主細胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復(fù)后一段時間；若再次受到該病毒的攻擊，機體內(nèi)相應(yīng)的記憶細胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。

【點睛】

本題結(jié)合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識記病毒的結(jié)構(gòu)，明確病毒沒有細胞結(jié)構(gòu)；識記單克隆抗體的制備過程，掌握其優(yōu)點及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質(zhì)）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶21、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，同時可毀壞植物，該說法錯誤?！窘馕觥垮e誤22、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會提高。這項技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥繒岣逿4溶菌酶的耐熱性。這項技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。23、略

【分析】【詳解】

生殖性克隆指利用克隆技術(shù)獲得胚胎；并將胚胎孕育成為人類個體的克隆性技術(shù)，其目的是用于生育，獲得人的復(fù)制品；治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)，其目的是用于醫(yī)學(xué)研究和疾病的治療。

據(jù)概念可知，實現(xiàn)生殖性克隆和治療性克隆都會用到的技術(shù)有體細胞核移植技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等；治療性克隆在獲取胚胎干細胞后，根據(jù)治療目的誘導(dǎo)干細胞分化形成各種組織和器官，供患者移植用，故治療性克隆還會應(yīng)用到的技術(shù)為干細胞培養(yǎng)技術(shù)。【解析】生殖性克隆指利用克隆技術(shù)獲得胚胎，并將胚胎孕育成為人類個體的克隆性技術(shù)治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)體細胞核移植技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等體細胞核移植技術(shù)，早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、干細胞培養(yǎng)技術(shù)等用于生育，獲得人的復(fù)制品用于醫(yī)學(xué)研究和疾病的治療四、判斷題(共3題，共9分)24、B【分析】【詳解】

目前，種植的轉(zhuǎn)基因作物中以大豆和玉米最多，其次是轉(zhuǎn)基因棉花和油菜，所以錯誤。25、A【分析】【詳解】

目前動物細胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法。也有人采用梯度離心、紫外線短時間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法。這些方法是在沒有穿透卵母細胞透明帶的情況下去核或使其中的DNA變性，故正確。26、B【分析】【詳解】

來源于自然界的目的基因?qū)胫参矬w后，可能破壞原有的基因結(jié)構(gòu)，具有不確定性，外源基因也可能通過花粉傳播，使其他植物成為“超級植物"等，所以如果轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來源于自然界，也可能存在安全性問題。本說法錯誤。五、實驗題(共4題，共28分)27、略

【分析】【分析】

1；微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽；此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用。

2；統(tǒng)計菌落數(shù)目使用的方法有顯微鏡直接計數(shù)法和活菌計數(shù)法；其中活菌計數(shù)法即稀釋涂布平板法，一般選擇菌落數(shù)目在30-300的平板進行計數(shù)。

【詳解】

（1）平板倒置后既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)；又可防止冷凝水滴落培養(yǎng)基，造成污染，影響實驗結(jié)果。

（2）所用培養(yǎng)基中的牛肉膏除為微生物提供碳源和氮源外；還能提供磷酸鹽和維生素。區(qū)分菌落種類的依據(jù)是菌落的形狀；大小、隆起程度和顏色等特征。

（3）統(tǒng)計菌落種類和數(shù)量時要每隔24h觀察統(tǒng)計一次；直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，以防因培養(yǎng)時間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的種類和數(shù)目。表格中3個平板的平均菌落數(shù)為（41+35+38）÷3=38個，低于國家標(biāo)準(zhǔn)，因此所取水樣符合飲用水標(biāo)準(zhǔn)。

【點睛】

本題考查微生物分離和培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生識記培養(yǎng)基的成分，掌握微生物分離和計數(shù)的方法，屬于考綱理解層次的考查?！窘馕觥糠乐估淠温湮廴九囵B(yǎng)基碳源氮源維生素菌落大小、形狀、隆起程度和顏色等符合飲用水的標(biāo)準(zhǔn)28、略

【分析】【分析】

1；動物細胞培養(yǎng)的條件：

（1）無菌；無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液；以清除代謝廢物；

（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖；氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等；還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)；

（3）適宜的溫度和pH；

（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。

2；實驗操作步驟的安排一般如下：第一步：取材隨機均分為幾組；編號；第二步：不同組自變量的處理；第三步：把上述各組放在無關(guān)變量相同且適宜等條件下處理一段時間；第四步：觀察并記錄比較相應(yīng)的因變量。根據(jù)題意可知，本實驗的目的是驗證生物制劑W對動物不同細胞的分裂具有促進作用，則該實驗的自變量是細胞的種類及是否加入生物制劑W，因變量是細胞懸液中細胞的數(shù)目，對細胞直接計數(shù)可以采用血球板計數(shù)法。

【詳解】

（1）①動物細胞培養(yǎng)前需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶分別處理正常肝組織和肝癌組織獲得分散的細胞。將兩種分散的細胞加入培養(yǎng)液中制成兩種細胞懸液。動物細胞的培養(yǎng)液中需要加入葡萄糖；氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清；為了保證無菌的條件，一般在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素。

②在顯微鏡下可以采用血球計數(shù)板直接計數(shù)兩種細胞懸液中細胞的數(shù)量；并進行記錄。

③本實驗的目的是驗證生物制劑W對動物不同細胞的分裂具有促進作用；根據(jù)題干所給實驗材料可知，不同細胞是指正常肝細胞和癌細胞，因此該實驗應(yīng)該設(shè)置四組，變量為細胞的種類及是否加入生物制劑W，具體如下：

A組：培養(yǎng)液中加入正常肝細胞懸液；B組：培養(yǎng)液中加入與之等量癌細胞懸液；從A；B組中各取出一半培養(yǎng)瓶作為C、D組；C、D兩組：培養(yǎng)液中加入等量的生物制劑W。放入動物細胞培養(yǎng)箱在適宜條件下培養(yǎng)。

④該實驗的因變量是計數(shù)細胞懸液中細胞的數(shù)量；因此各組樣品在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段合適的時間后，每組取部分樣品，加入胰蛋白酶或膠原蛋白酶搖勻，將細胞分散成單個，然后在顯微鏡下計數(shù)。

（2）預(yù)測實驗結(jié)果；若較長時間培養(yǎng)，因為正常細胞的增殖次數(shù)有限，故A組中細胞數(shù)量最少，由于W促進細胞增殖的作用，因此C組細胞數(shù)量多于A組；而癌細胞可以無限增殖，且由于其細胞膜上的糖蛋白減少，易于擴散和轉(zhuǎn)移，同時失去接觸抑制，可大量培養(yǎng)增殖，故B；D兩組中細胞數(shù)量明顯更多，且由于W的促進作用，D組多于B組；由于此實驗是驗證實驗，所以實驗結(jié)果是加入生物制劑W的實驗組比對照組細胞數(shù)多，同時癌細胞分裂能力比正常細胞高，故繪制坐標(biāo)曲線具體如下:

【點睛】

本題考查驗證實驗，要求學(xué)生明確實驗的目的，正確區(qū)分實驗的變量，能夠根據(jù)題意判斷自變量和因變量，然后根據(jù)設(shè)計實驗的單一變量和等量原則，同時結(jié)合題干所給的實驗材料完善實驗設(shè)計，并能預(yù)測實驗結(jié)果和繪制相關(guān)曲線圖表示實驗的結(jié)果?！窘馕觥恳鹊鞍酌福z原蛋白酶）葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清抗生素血球計數(shù)板等量肝癌細胞懸液等量生物制劑W胰蛋白酶（膠原蛋白酶）29、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四個步驟：目的基因的篩選與獲取、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作為受體細胞，其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。研究人員一般先用Ca2＋處理大腸桿菌細胞；使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，然后再將重組的基因表達載體導(dǎo)入其中。

【詳解】

（1）利用RNA通過①過程（逆轉(zhuǎn)錄）獲得cDNA需要逆轉(zhuǎn)錄酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護尾部不被降解。逆轉(zhuǎn)錄第一步以mRMA為模板合成DNA單鏈；新鏈與模板鏈反向平行，由于新鏈只能由5'端向3'端延伸，所以逆轉(zhuǎn)錄第一步的引物應(yīng)與mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互補配對，即用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物；設(shè)計引物的目的是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。

（2）對逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴增時；引物的5'端結(jié)合母鏈的3'端之后DNA聚合酶開始擴增DNA。為確保其與pET41a質(zhì)粒定向連接，應(yīng)使用不同種的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，由圖可知，使用EcoRI酶會破環(huán)SSB基因，故應(yīng)在相應(yīng)引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位點。

（3）由題圖分析可知：質(zhì)粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破壞了氯霉素抗性基因，所以成功組裝的重組質(zhì)粒不能在添加了氯霉素的培養(yǎng)基上生長，③過程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時，需要用Ca2+處理大腸桿菌；目的是使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)，然后分別將處理后的大腸桿菌先接種在添加卡那霉素的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長出菌落后再利用無菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加氯霉素的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長的菌落進一步純化后將菌體破碎處理，經(jīng)篩選即可得到SSB蛋白。

（4）將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測該蛋白是否具有抗原性，如果該蛋白有抗原性，會引起機體的免疫反應(yīng)，產(chǎn)生相應(yīng)抗體。則后續(xù)實驗內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測其是否含有抗SSB的抗體。【解析】(1)逆轉(zhuǎn)錄用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物

使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長的。

(4)提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測其是否含有抗SSB的抗體30、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對的替換；增添和缺失；而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過程，該過程還需要tRNA來運轉(zhuǎn)氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個氨基酸的三個相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過程。

基因工程中檢測目的基因在受體細胞內(nèi)是否成功表達可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因突變后，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變，說明其沒有發(fā)生堿基對的增添和缺失，因為這兩者改變會導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度改變，因此推測其基因突變是由于堿基對替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn)，導(dǎo)致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結(jié)構(gòu)改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導(dǎo)核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)；功能相同，據(jù)此推測該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對使翻譯過程繼續(xù)。

（3）本實驗?zāi)康氖潜容^攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實驗組細胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對實驗結(jié)果產(chǎn)生干擾），同時保證在不同的實驗組細胞中可以轉(zhuǎn)錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實驗組中受體細胞中應(yīng)該含有導(dǎo)入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個實驗組細胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導(dǎo)了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對其進行檢測，即進行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細胞中表達的全長IDUA蛋白量比其他實驗組都多，說明其能有效恢復(fù)細胞中全長IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實驗可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導(dǎo)核糖體對突變IDUA基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進行通讀，進而產(chǎn)生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA基因敲除小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細胞內(nèi)都沒有相應(yīng)mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無法發(fā)揮作用，最終導(dǎo)致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異?！窘馕觥?1)替換減少。

(2)識別終止密碼子并攜帶氨基