《中藥提取物生產(chǎn)技術(shù)》課件-制備薄層色譜法

制備薄層色譜技術(shù)中藥提取物生產(chǎn)技術(shù)制備薄層色譜技術(shù)的概念01目錄content制備薄層色譜技術(shù)的原理及色譜條件02制備薄層色譜技術(shù)的操作0301制備薄層色譜法的概念一、制備薄層色譜法的概念薄層色譜技術(shù)又稱薄層層析法，是將色譜固定相涂布于玻璃、鉛鉑、塑料片等載板上形成均一薄層，將被分離的物質(zhì)在薄層用適當?shù)牧鲃酉嗾归_，使性質(zhì)不同的化合物得以分離。02制備薄層色譜技術(shù)的原理與色譜條件二、制備薄層色譜技術(shù)的原理與色譜條件（一）原理該技術(shù)屬于液相色譜的范疇，選擇一定的固定相材料或適當處理就可進行吸附、分配、離子交換或排阻等色譜分離。一般情況下，樣品量1mg~1g固定相是硅膠、氧化鋁及C18反相鍵合相硅膠二、制備薄層色譜技術(shù)的原理與色譜條件（二）比移值（Rf值）以被分離化合物斑點中心離點樣原點的距離與溶劑前沿離原點的距離的比值。

a：被分離化合物斑點中心到原點的距離b：溶劑前沿到原點的距離二、制備薄層色譜技術(shù)的原理與色譜條件（二）比移值（Rf值）以被分離化合物斑點中心離點樣原點的距離與溶劑前沿離原點的距離的比值?！鱎f＞0.05，兩物質(zhì)可分離。被分離物質(zhì)的Rf理想值在0.05~0.85二、制備薄層色譜技術(shù)的原理與色譜條件（三）影響因素固定相、流動相是內(nèi)在根本性因素二、制備薄層色譜技術(shù)的原理與色譜條件（三）影響因素在吸附色譜中，充分考慮樣品、洗脫劑和吸附劑三者關(guān)系。分離非極性物質(zhì)時，選擇非極性展開劑和高活性吸附劑分離強極性物質(zhì)時，選擇強極性展開劑和活性較低的吸附劑分離中等極性物質(zhì)時，選擇中等極性展開劑和中等活性吸附劑二、制備薄層色譜技術(shù)的原理與色譜條件（四）色譜條件的選擇01.固定相的選擇被分離物質(zhì)極性吸附劑的吸附性能溶劑極性大弱（稍?。┐笮娦」枘zG常用的極性吸附劑，可加入熒光劑氧化鋁堿性、中性、酸性聚酰胺分離水溶性、脂溶性物質(zhì)二、制備薄層色譜技術(shù)的原理與色譜條件（四）色譜條件的選擇02.流動相的選擇相似相溶強極性樣品宜用強極性展開劑，弱極性樣品宜用弱極性展開劑對于硅膠TCL，洗脫劑的極性強度順序全氟烷（最弱）＜己烷＜戊烷＜四氟化碳＜苯/甲苯＜三氯甲烷＜乙醚＜乙酸乙酯＜乙腈＜丙醇/正丁醇＜水＜甲醇＜三乙胺＜乙酸＜甲酸（最強）二、制備薄層色譜技術(shù)的原理與色譜條件（四）色譜條件的選擇02.流動相的選擇相似相溶03制備薄層色譜技術(shù)的操作三、制備薄層色譜技術(shù)的操作（一）薄層板的制備要求：均一性、厚度制備方法主要分為干法、濕法，常用濕法。三、制備薄層色譜技術(shù)的操作（一）薄層板的制備01.濕法鋪板一份吸附劑+兩份水

刮刀平鋪法或涂鋪器涂鋪法均勻涂布活化調(diào)成糊狀烘烤三、制備薄層色譜技術(shù)的操作（二）上樣薄層板的容量與其厚度的平方根呈正比，但若厚度過厚，易造成拖尾。一般采用條形上樣。上樣工具可用注射器、小滴管或上樣器。可重復上樣，但后一次上樣要在前一次樣品條的溶劑揮發(fā)之后再進行。三、制備薄層色譜技術(shù)的操作（三）展開可分為上行展開、下行展開、單次展開和多次展開。多采用上行法展開。三、制備薄層色譜技術(shù)的操作（四）顯色常采用碘蒸氣顯色法、紫外線顯色法01.碘蒸氣顯色碘蒸氣與有機物分子形成有色締合物，為物理吸附。02.紫外線顯色化合物減弱吸附劑中熒光物質(zhì)的紫外吸收強度，引起熒光的熄滅所致顯色。三、制備薄層色譜技術(shù)的操作（四）顯色常采用碘蒸氣顯色法、紫外線顯色法03.顯色劑顯色顯色劑：硫酸、0.05%高錳酸鉀溶液、5%磷鉬酸乙醇溶液溶液。三、制備薄層色譜技術(shù)的操作（五）收集確定所需譜帶位置后，用刮刀或與真空相連的管型刮離器將所需要成分的譜帶連同吸附劑一起刮下，收集，用溶劑將所要組分洗脫下來，并清洗工具，合并洗脫液。常用洗脫劑丙酮、乙醇、氯仿等，1g吸附劑用5mL溶劑洗脫。04制備薄層色譜技術(shù)的特點及進展四、制備薄層色譜技術(shù)的特點及進展（一）特點01.分離快速，展開時間短02.方法簡便，儀器簡單03.靈敏度高04.固定相、流動相選擇范圍寬05.固定相一次使用，不會被污染06.對被分離物質(zhì)的性質(zhì)沒有限制07.自動化四、制備薄層色譜技術(shù)的特點及進展（二）進展01.加壓薄層色譜由溶劑泵和展開倉組成流動相被溶液泵以一定流速輸入展開倉。四、制備薄層色譜技術(shù)的特點及進展（二）進展02.離心制備薄層色譜離心分離法滲透于色譜領(lǐng)域而產(chǎn)生的高效分離法。小結(jié)概念01.原理及色