2025年湘師大新版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷

…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年湘師大新版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷80考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、1978年，科學家將人體內能夠產生胰島素的基因與大腸桿菌的DNA分子重組，并在大腸桿菌內獲得成功表達。按照該方法生產的胰島素已廣泛用于市場。下列敘述正確的是（）A.人的胰島素基因可與大腸桿菌DNA重組的基礎是兩者具有相似的物質組成和分子結構B.人的胰島素基因只存在于胰島組織細胞中，故只能從胰島組織細胞中獲取胰島素基因C.人的胰島素基因在大腸桿菌中表達出的肽鏈，需經大腸桿菌的內質網和高爾基體加工才能降血糖D.人的胰島素基因中的遺傳信息在大腸桿菌中的傳遞過程只有DNA→RNRNA→蛋白質2、為了防止轉基因作物的目的基因通過花粉轉移到自然界中其他植物體內，科學家設法將目的基因整合到受體細胞的葉綠體基因組中，其原因是（）A.這種操作方法更容易成功B.植物雜交的后代不會出現一定的性狀分離比C.轉基因植物中的細胞質基因與其他植物間不能通過花粉發(fā)生基因交流D.轉基因植物與其他植物間不能通過花粉發(fā)生基因交流3、在細菌的連續(xù)培養(yǎng)過程中；要以一定速度不斷添加新的培養(yǎng)基，同時以同樣速度放出老的培養(yǎng)基。下圖表示培養(yǎng)基的稀釋率（培養(yǎng)基的更新速率）與培養(yǎng)容器中營養(yǎng)物質濃度；細菌代時（細菌數目增加一倍所需的時間）、細菌密度的關系。下列相關敘述不正確的是（）

A.在稀釋率很低的情況下，稀釋率的增加會導致細菌密度增加B.稀釋率從a到b的變化過程中，細菌生長速度不斷提高C.稀釋率超過b點后，營養(yǎng)物質濃度過高導致細菌死亡率增大，細菌密度降低D.為持續(xù)高效地獲得發(fā)酵產品，應將稀釋率控制在b點附近4、天津獨流老醋歷史悠久；獨具風味；其生產工藝流程如下圖。據圖說法錯誤的是（）

A.糖化階段可添加淀粉酶等酶制劑處理原料B.在酒精發(fā)酵階段，發(fā)酵罐需先通氣后密閉C.醋酸發(fā)酵階段所需溫度低于酒精發(fā)酵階段D.氧氣、營養(yǎng)物質等因素會影響醋酸菌數量5、下表是關于對四種生物能源、碳源、氮源的來源和新陳代謝類型的描述，其中正確的一組是（）。硝化細菌乳酸菌根瘤菌衣藻能源NH3乳酸N2光能碳源CO2糖類糖類CO2氮源NH3N2N2NO3-

代謝類型自養(yǎng)需氧型異養(yǎng)厭氧型自養(yǎng)需氧型自養(yǎng)需氧型A.硝化細菌與乳酸菌B.乳酸菌與根瘤菌C.根瘤菌與衣藻D.硝化細菌與衣藻6、轉基因抗蟲植物含有Bt毒蛋白，對人體無毒，但是鱗翅目昆蟲幼蟲的腸道細胞含有Bt蛋白的受體，Bt蛋白與受體結合導致腸道壁穿孔，使幼蟲死亡。下列敘述錯誤的是（）A.促進Bt蛋白的合成有助于提高植物的抗蟲效果B.通過DNA分子雜交技術可以檢測Bt蛋白基因是否表達C.將Bt蛋白基因導入植物細胞的方法可以使用花粉管通道法或農桿菌轉化法D.將植物材料和農桿菌共同培養(yǎng)之前，需要對植物材料進行消毒處理7、在分離、純化細菌的實驗中，劃線接種（甲）、培養(yǎng)結果（乙）如下圖，a、b、c、d是劃線的四個區(qū)域。下列敘述錯誤的是（）

A.劃線前后都要對接種環(huán)灼燒滅菌B.甲圖中的a區(qū)域為劃線的起始區(qū)域C.蘸取菌液和劃線要在酒精燈火焰旁進行D.連續(xù)劃線的目的是獲得單個細菌形成的菌落8、下列關于乳酸菌種的選育的敘述，不正確的是（）A.自然選育該菌種費時且盲目性大B.該菌能發(fā)生染色體變異C.采用基因工程的方法可構建工程菌D.誘變育種原理的基礎是基因突變9、羊在畜牧生產和生物醫(yī)學模型方面都具有重要價值，因此與羊相關的基礎生物學研究也格外受到關注。科學家通過胚胎工程的方法繁育肉羊。下列相關敘述錯誤的是（）A.從雌性肉羊卵巢內取出的卵母細胞不可直接進行體外受精B.可用普通雌性羊作為受體進行胚胎移植但需生理狀態(tài)相同C.可以通過胚胎分割技術，得到更多遺傳性狀相同的肉羊后代D.在胚胎移植前，需要對體外培養(yǎng)的原腸胚進行質量篩查評卷人得分二、多選題(共5題，共10分)10、下列關于試管嬰兒技術的敘述，正確的是（）A.在采集卵母細胞之前，需要給供卵者注射適量的促性腺激素，促進排卵B.從卵巢中吸取的卵母細胞，必須經體外培養(yǎng)獲能處理后才能用于受精C.受精過程中，卵母細胞會發(fā)生透明帶反應和卵細胞膜反應，阻止多精入卵D.設計試管嬰兒技術，有利于生育健康的下一代，不會造成社會危害11、下圖1表示的是某DNA分子上的一些限制性內切酶的酶切位點。用XhoI和SalI兩種限制酶分別處理該DNA分子；經電泳分離結果如圖2。以下敘述正確的是（）

A.所用兩種限制性核酸內切酶識別的核苷酸序列可能相同B.限制酶通過作用于磷酸二酯鍵和氫鍵得到相應產物C.根據泳道②電泳示意圖可知使用的限制性內切酶為XhoID.用兩種限制酶同時處理后進行電泳，條帶可多于6條12、RNA經逆轉錄后再進行PCR擴增的技術稱為RT－PCR，過程如圖所示。下列相關敘述正確的是（）

A.過程①需要RN逆轉錄酶、引物、核糖核苷酸等條件B.真核細胞的mRNA經過程①②獲得的DNA無內含子片段C.過程③PCR擴增時引物中的CG含量會影響退火溫度D.RT－PCR技術可應用于新冠病毒（RNA病毒）的核酸檢測13、克隆動物常用的核移植方法主要有細胞質內注射法和透明帶下注射法兩種。前者是用微型注射針將供體細胞的細胞核吸出注入去核卵母細胞質內；后者是直接將供體細胞注入去核卵母細胞透明帶內，然后促使兩個細胞融合。世界首例體細胞克隆北極狼的供體細胞來自哈爾濱極地公園的一只野生北極狼的皮膚樣本，卵母細胞來自一只處于發(fā)情期的母犬，代孕母體則是一只比格犬。下列敘述錯誤的是（）A.克隆北極狼的性狀由野生北極狼、發(fā)情期的母犬和比格犬的基因共同決定B.相比之下，透明帶下注射法對供體細胞核和卵母細胞的損傷更小C.供體細胞注入卵母細胞透明帶內后，就可自行進入卵母細胞D.細胞分裂、分化形成克隆胚胎的過程中發(fā)生了基因重組14、利用基因工程技術可使大腸桿菌生產人的胰島素原。下列相關敘述中，錯誤的是（）A.人和大腸桿菌在合成胰島素原時，轉錄和翻譯的場所是相同的B.DNA連接酶能催化磷酸與脫氧核糖形成化學鍵C.通過檢測發(fā)現大腸桿菌中沒有胰島素原產生，則可判斷重組質粒未導入受體菌D.人胰島素原基因在大腸桿菌中表達的胰島素原有較高的生物活性評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)15、體細胞核移植技術存在的問題：

克隆動物存在著健康問題、表現出______缺陷等。16、酶是細胞合成的生物催化劑。隨著生物科學技術的發(fā)展；酶已經走出實驗室，走進人們的生產和生活。請回答下面有關酶的問題：

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質分解成________，____________將脂肪水解為甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應用最廣泛；效果最明顯的是____________。

（2）果膠酶包括_____________________________；生產中如果要固定果膠酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分離原理：需要用__________法去除相對分子質量大的雜質蛋白，以純化酶；利用_________________________法對酶進行純度鑒定。17、在____________的溫度范圍內，DNA的雙螺旋結構解體，雙鏈分開，這過程成為__________。18、___________（簡稱PCR）是一種____________迅速_______________的技術，它能以極少數的DNA為模板，在幾個小時內復制出上百萬份的DNA拷貝。19、DNA粗提取與鑒定實驗中，二苯胺要___________。20、應用：______（微型繁殖、作物脫毒、神奇的人工種子）、______、細胞產物的工廠化生產。21、植物繁殖的新途徑。

微型繁殖：可以高效快速地實現種苗的大量繁殖。

作物脫毒：采用______組織培養(yǎng)來除去病毒（因為植物分生區(qū)附近的病毒______）

人工種子：以植物組織培養(yǎng)得到的______、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經_____包裝得到的種子。優(yōu)點：完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性，______；方便儲藏和運輸。

人工種子的結構包括：______、_____和______。22、近年來，克隆技術的發(fā)展取得了巨大突破?在日常生活中，我們遇到過與克隆技術有關的問題嗎？_____。23、基因表達載體的組成及其作用。

一個基因表達載體的組成，除了______________、_______________外，還必須有__________、______________等(如圖所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦______________評卷人得分四、判斷題(共3題，共24分)24、植物細胞培養(yǎng)的原理是植物細胞的全能性。()A.正確B.錯誤25、胚胎發(fā)育至囊胚期時，細胞逐漸分化。()A.正確B.錯誤26、如果轉基因植物的外源基因源于自然界，則不會存在安全性問題。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共20分)27、研究表明生物制劑W對不同種類動物細胞的分裂均有促進作用。有同學設計相關實驗來驗證這個觀點。請根據以下提供的實驗材料；完善該實驗步驟，并預測實驗結果。

實驗材料：培養(yǎng)液；正常肝組織、肝癌組織、W、胰蛋白酶。

（要求與說明：答題時不考慮加入W后的體積變化等誤差。提供的細胞均具有分裂能力；只進行原代培養(yǎng)且培養(yǎng)條件適宜）

（1）實驗步驟：

①用_________分別處理正常肝組織和肝癌組織獲得分散的細胞。將兩種分散的細胞加入培養(yǎng)液中制成兩種細胞懸液。培養(yǎng)液需要中加入__________等營養(yǎng)物質和__________用以滅菌。

②在顯微鏡下用_____________直接計數兩種細胞懸液中細胞的數量；并進行記錄。

③取滅菌后的培養(yǎng)瓶若干個均分為A、B兩組，A組加入正常肝細胞懸液；B組加入_________。從A、B組中各取出一半培養(yǎng)瓶作為C、D組，分別加入_________。放入動物細胞培養(yǎng)箱在適宜條件下培養(yǎng)。

④各組樣品在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段合適的時間后，每組取部分樣品，加入_____________后搖勻；在顯微鏡下計數并記錄細胞數量。

⑤重復④若干次。

⑥統(tǒng)計并分析所得數據。

（2）預測實驗結果（用坐標系和曲線示意圖表示）_____________28、β-苯乙醇是具有令人愉悅的玫瑰香味的高級芳香醇；廣泛用于食品和日化用品等生產領域?；瘜W合成β-苯乙醇會產生多種雜質，而植物萃取則周期長；成本高，因此采用微生物合成天然β-苯乙醇是工業(yè)化新趨勢。研究小組從玉米胚芽粕和玉米皮等淀粉加工下腳料及其肥料堆放的土壤中篩選可耐受高濃度β-苯乙醇的酵母菌株（YDF-1），實驗過程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

(1)該實驗需制作多種培養(yǎng)基，這些培養(yǎng)基的配方不同，但一般都含有水、無機鹽、__________等物質，培養(yǎng)基制作后需使用__________法進行滅菌，滅菌后的培養(yǎng)基再添加相應濃度的β-苯乙醇。由實驗目的可知，初篩、復篩及再次復篩的培養(yǎng)基中，添加的β-苯乙醇的濃度應__________（填“保持不變”或“逐漸增大”或“逐漸降低”），理由是__________。

(2)若取稀釋倍數為104的0．1mL稀釋液涂布到含2g/L的YEPD培養(yǎng)基后培養(yǎng)至菌落穩(wěn)定，計算得出每毫升菌懸液中含4．5×106個菌體，則在該稀釋倍數下平板上的平均菌落數是__________個。將初篩獲得的菌株進行液體培養(yǎng)，其目的是________。

(3)若選用葡萄糖作為碳源，為確定YDF-1增殖的最佳濃度，請設計一個較為簡便的實驗進行探究，實驗設計思路是__________。29、面對新冠疫情；我國一直堅持嚴格防控措施，“零容忍”彰顯人民立場制度優(yōu)勢。堅持中高風險地區(qū)的大面積核酸檢測；適齡人群接種疫苗構建免疫屏障是嚴格防控的主要措施。新冠病毒核酸檢測常采用RT﹣PCR檢測法，技術流程如下圖，①②③④⑤表示相關步驟。

回答下列問題：

(1)步驟①需要的酶是________，步驟④需要的酶是________，引物A和引物B是根據________序列合成的。

(2)步驟③的目的是________，如果該步驟出現失誤，對檢測結果的影響是________。

(3)新冠病毒抗體檢測可作為核酸檢測的補充，抗體檢測的原理是________。對某人進行檢測時發(fā)現，其核酸檢測為陰性，抗體檢測呈陽性，原因可能是________。30、T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通過污染飼料引起畜禽中毒反應。CYP3A是豬體內降解T-2毒素的關鍵酶，T-2毒素可誘導CYP3A基因表達水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（選填“初級”或“次級”）代謝產物，主要以_____方式進入豬細胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因啟動子上游的兩個調控序列，為研究T-2毒素誘導CYP3A基因表達的機理，研究者首先將不同調控序列分別和CYP3A基因啟動子及熒光素酶基因（LUC基因）連接構建表達載體，再分別導入豬肝細胞，然后向各組豬肝細胞培養(yǎng)液中加入_____，適宜條件下進行培養(yǎng)；24h后檢測LUC酶活性，計算啟動子活性相對值，結果如圖1所示。據圖可知，B1和B2調控序列是CYP3A基因響應T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1兩種蛋白均參與T-2毒素對CYP3A的誘導；B2是Spl的結合位點。研究者推測，NF-Y通過與B1結合，與Sp1共同調控CYP3A基因的表達。

①為證明Bl是NF-Y的結合位點，研究者依據B1序列制備了野生型和突變型探針，分別與豬肝細胞核蛋白提取物混合，實驗分組及結果如圖2．據實驗結果推測，第4組出現阻滯帶的原因是_____，進而推測第5組結果產生的原因是_____。

②研究者設計實驗進一步證明了NF-Y和Spl通過互作共同發(fā)揮調控功能，實驗設計思路是：增大或縮小B1和B2兩者之間的距離，檢測CYP3A基因的啟動子活性。據此分析，實驗假設是_____。評卷人得分六、綜合題(共3題，共30分)31、甜瓣子是豆瓣醬的重要成分之一；其生產工藝如下圖所示：

回答下面相關問題：

(1)制曲過程中，加入的蠶豆主要為米曲霉的生長提供___________營養(yǎng)物質。加入的蠶豆需經沸水漂燙約4min，過濾、冷卻后使用，沸水漂燙和冷卻的目的分別是___________。

(2)制曲時將米曲霉與蠶豆瓣混合相當于微生物培養(yǎng)的___________技術，主要目的是使米曲霉充分生長繁殖，并大量產生和積蓄所需要的酶。在統(tǒng)計米曲霉的數量以了解制曲進程時，可在顯微鏡下用___________直接計數；若要測定其活菌數量，可選用___________法進行計數。在制曲容器內，上層的米曲霉數量比底層的多，說明米曲霉的代謝類型是___________。

(3)待米曲霉達到一定數量后，向豆瓣曲中加入一定量鹽水，開始制作醬醅，鹽水的作用主要是___________（答出1點即可）。

(4)將醬醅轉入發(fā)酵池進行發(fā)酵，該過程米曲霉可將蠶豆中的葡萄糖代謝為丙酮酸，在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長提供___________和___________；大量分泌的蛋白酶可將蠶豆中的蛋白質分解成___________，這些因素都影響著甜瓣子的品質，從而形成獨特的色香味和風味。32、竹芋科植物果實中含有一種甜蛋白；其甜度為蔗糖的三千倍，是理想的甜味劑。某研究小組試圖把甜蛋白基因（目的基因）導入黃瓜中，以改良這種黃瓜的品質。獲得轉基因黃瓜植株的流程圖如下圖，請回答：

(1)通過步驟①和②可人工合成目的基因。在步驟②中先以RNA為模板在____酶的作用下合成DNA，然后通過一系列實驗從中篩選出_____基因。還可以根據甜蛋白的氨基酸序列推測出___序列；再用化學方法合成。

(2)可以通過____技術獲得大量目的基因，利用該技術的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列。以便根據這一序列合成_____。

(3)導入了目的基因的葉片組織細胞經過步驟③____和④_____后形成了完整的植株，說明_____。

(4)可以通過_____技術檢測黃瓜植株中是否含有甜蛋白。33、徑柳匙葉草是一種泌鹽植物。科研工作者將徑柳匙葉草的TaNHX2基因轉移到棉花細胞內；獲得了轉基因耐鹽棉花新品種。圖1是獲取的含有目的基因的DNA片段，圖中箭頭所指為Sau3AI；EcoRI、BamHI三種限制酶的切點；圖2是三種限制酶的識別序列與酶切位點示意圖；圖3是農桿菌中用于攜帶目的基因的Ti質粒結構示意圖，請分析回答問題：

(1)基因工程的核心步驟是______________________________。

(2)將含有徑柳匙葉草不同基因的DNA片段導入受體菌的群體中儲存，再根據TaNHX2基因的特定核苷酸序列從中提取圖1的片段，此法為從____________獲取目的基因。此外也可利用PCR技術擴增TaNHX2基因，需要加入的酶是_____________________，反應的溫度和時間需根據具體情況進行設定，55～60℃有利于______________結合到互補DNA鏈上。

(3)若用BamHI切割圖1所示的DNA片段，獲得目的基因，則需選用限制酶__________切割圖3所示質粒，該方案的缺陷是_______________________________（答出一點即可）。

(4)目的基因是否成功轉錄出了mRNA，常用____________的方法進行檢測，為了檢測技術成果，科研工作者將轉基因棉花種植在鹽堿地，觀察其生長狀況，這屬于____________水平的檢測。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、A【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲??；利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；人的胰島素基因是DNA上的某一片段；與大腸桿菌DNA的分子組成和結構相同，這是兩者能重組的基礎，A正確；

B；人的不同細胞是由同一個受精卵分裂、分化形成的；所含有的基因相同，故胰島素基因廣泛存在于各種組織細胞中，B錯誤；

C；大腸桿菌屬于原核生物；無內質網和高爾基體，C錯誤；

D；胰島素基因導入大腸桿菌后；會跟隨大腸桿菌的DNA進行復制、轉錄、翻譯，故其遺傳信息傳遞過程還應有DNA→DNA，D錯誤。

故選A。

【點睛】2、C【分析】【分析】

1；根據題干分析；將目的基因整合到受體細胞的細胞核中，形成的生殖細胞中含有目的基因，可能通過花粉傳播而進入雜草；如將將目的基因整合到受體細胞的葉綠體中，形成的精子幾乎不含細胞質，則不能通過花粉傳播，避免基因污染。

2；細胞質遺傳后代具有母系遺傳特點；后代不會出現一定比例的性狀分離比。

【詳解】

A；一般而言；受精卵的全能性最高，故將目的基因整合到受體細胞的受精卵中比導入葉綠體基因組更容易成功，A錯誤；

B；轉基因植物一般是雜合子；則植物雜交的后代會出現3：1的性狀分離比，B錯誤；

C；花粉中含有精子；其幾乎不含細胞質，而受精卵中的細胞質幾乎全部來自卵細胞，所以科學家設法將目的基因整合到受體細胞的葉綠體基因組中后，就不會通過花粉轉移到自然界中的其他植物，C正確；

D；轉基因植物與其他植物間沒有生殖隔離；能通過花粉發(fā)生基因交流，D錯誤。

故選C。3、C【分析】【詳解】

A；在稀釋率很低的情況下；稀釋率的增加，也就是培養(yǎng)基的更新速率增加，會導致細菌密度增加，A正確；

B、稀釋率從a到b的變化過程中；細菌的代時越來越小，所以細菌生長速度不斷提高，B正確；

C；從圖象上看；隨稀釋率的增加，營養(yǎng)物質的濃度提高，細菌代時縮短，數目減少，這是由于培養(yǎng)基更替太快，帶走了大量的細菌，營養(yǎng)充足，細菌繁殖快，代時縮短，并不是死亡率增大所致，C錯誤。

D、在b是一個臨界點，b點后，細菌的密度減小，代謝產物也會減少，要持續(xù)高效獲得發(fā)酵產品，應控制在b點附近；D正確。

故選C。4、C5、D【分析】硝化細菌是化能自養(yǎng)型微生物，其代謝類型為自養(yǎng)需氧型；乳酸菌為異養(yǎng)厭氧型生物；根瘤菌能固定N2；其代謝類型為異養(yǎng)需氧型；衣藻是光能自養(yǎng)型生物，其代謝類型為自養(yǎng)需氧型。

【詳解】

（1）硝化細菌能將NH3氧化成亞硝酸和硝酸，并利用該過程釋放的化學能，將二氧化碳和水合成為有機物，屬于自養(yǎng)需氧型生物，其氮源和能源都是NH3；碳源是二氧化碳，正確；

（2）乳酸菌是異養(yǎng)厭氧型生物；不能直接利用氮氣，氮源是硝酸根離子等，碳源和能源為糖類，錯誤；

（3）根瘤菌是能固氮的異養(yǎng)需氧型生物，進行生命活動所需要的能量來自糖類等有機物的氧化分解，氮源是N2；碳源和能源是糖類，錯誤；

（4）衣藻是低等植物；能利用光能進行光合作用制造有機物，屬于自養(yǎng)需氧型生物，其能源是光能，碳源是二氧化碳，氮源是硝酸根離子等，正確。

所以描述正確的一組生物是硝化細菌和衣藻；ABC錯誤，D正確。

故選D。6、B【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；Bt蛋白與受體結合導致腸道壁穿孔；使幼蟲死亡，因此促進Bt蛋白的合成有助于提高植物的抗蟲效果，A正確；

B；可通過DNA分子雜交技術檢測Bt蛋白基因是否插入受體細胞染色體DNA上；而檢測目的基因是否表達應該采用抗原-抗體雜交技術，B錯誤；

C；將Bt蛋白基因導入植物細胞的方法可使用農桿菌轉化法、基因槍法或花粉管通道法；C正確；

D；將植物材料和農桿菌共同培養(yǎng)之前；植物材料需要消毒處理，D正確。

故選B。

【點睛】7、B【分析】【分析】

平板劃線法是將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

【詳解】

A；劃線前后都要對接種環(huán)灼燒滅菌；避免雜菌污染，劃線后為避免污染環(huán)境，也要照燒滅菌，A正確；

B；由乙圖菌株分布圖分析可知；甲圖中的d區(qū)域菌落數目最多，故為劃線的起始區(qū)域，B錯誤；

C；蘸取菌液和劃線要在酒精燈火焰旁進行；以防止雜菌污染，C正確；

D；在線的開始部分；微生物往往連在一起生長，隨著連續(xù)劃線，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落，D正確。

故選B。8、B【分析】【分析】

自然選育的菌種來源于自然界；菌種保藏機構或生產過程；從自然界中選育菌種的過程較為復雜，而從生產過程或菌種保藏機構得到菌種的自然選育過程較為簡單；此外也可通過誘變育種和基因工程育種獲得。

【詳解】

A；自然選育菌種要到相應的環(huán)境從眾多的微生物中進行篩選；所以費時且盲目性大，A正確；

B；乳酸菌屬于原核生物；原核生物無染色體，B錯誤；

C；基因工程是以基因重組為原理；能夠實現定向改造基因的技術，可采用基因工程的方法可構建工程菌，C正確；

D；菌種的選育可以采用誘變育種的方法；其原理是基因突變，D正確。

故選B。9、D【分析】【分析】

試管動物技術是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后；再經移植后產生后代的技術，可見試管嬰兒技術主要包括體外受精；早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術。

【詳解】

A；從卵巢內取出卵母細胞不可直接進行體外受精；需要培養(yǎng)到MII中期，A正確；

B；胚胎移植需要受體的生理狀態(tài)滿足胚胎的發(fā)育；B正確；

C；可以通過胚胎分割技術獲得遺傳性狀相同的多個子代；C正確；

D；早期胚胎培養(yǎng)到?；呋蚰遗唠A段進行移植；D錯誤。

故選D。二、多選題(共5題，共10分)10、A:C【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經移植后產生后代的技術。

2；設計試管嬰兒技術是通過體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經移植后產生后代的技術。

【詳解】

A；在采集卵母細胞之前；需要給供卵者注射適量的促性腺激素，促進超數排卵，A正確；

B；從卵巢中吸取的卵母細胞；必須經體外培養(yǎng)成熟后才能與獲能的精子受精，B錯誤；

C；受精過程中；卵母細胞會發(fā)生透明帶反應和卵細胞膜反應，這是防止多精入卵的兩道屏障，C正確；

D；以治療為目的的設計試管嬰兒技術；是救治患者最好、最快捷的辦法之一，不是有利于生育健康的下一代，并存在倫理問題，D錯誤。

故選AC。

【點睛】11、C:D【分析】【分析】

題圖分析：限制酶SalⅠ有三處切割位點；切割后產生4個DNA片段，泳道①中是用SalⅠ處理得到的酶切產物；限制酶XhoⅠ有2處切割位點，切割后產生3個DNA片段，泳道②中是用XhoⅠ處理得到的酶切產物。

【詳解】

A；酶具有專一性；不同的限制酶識別并切割不同的核苷酸序列，A錯誤；

B；限制酶通過作用于磷酸二酯鍵得到相應產物；B錯誤；

C；分析圖1；限制酶XhoⅠ有2處切割位點，切割后產生3個DNA片段，泳道②中是用XhoⅠ處理得到的酶切產物，C正確；

D；用兩種限制酶同時處理后進行電泳；若某些位點未被切割，則條帶可多于6條，D正確。

故選CD。12、B:C:D【分析】【分析】

PCR技術：1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應；是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。2、原理：DNA復制。3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復性：引物結合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；過程①是由mRNA形成單鏈DNA的過程；表示逆轉錄，需要RNA、逆轉錄酶、引物、脫氧核苷酸等條件，A錯誤；

B；真核細胞中DNA的外顯子部分轉錄的RNA拼接形成mRNA；因此真核細胞的mRNA經過程①②逆轉錄過程獲得的DNA無內含子片段，B正確；

C；CG含量越高；氫鍵越多，結構越穩(wěn)定，因此過程③PCR擴增時引物中的CG含量會影響退火溫度，C正確；

D；新冠病毒遺傳物質是RNA；RT-PCR技術可應用于新冠病毒的核酸檢測，D正確。

故選BCD。

【點睛】13、A:C:D【分析】【分析】

動物核移植是指將動物的一個細胞的細胞核；移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成為動物個體。

【詳解】

A；克隆北極狼的供體細胞來自野生北極狼；卵母細胞來自發(fā)情期的母犬，因此性狀由野生北極狼、發(fā)情期的母犬的基因共同決定，比格犬只是代孕母體，不提供遺傳物質，A錯誤；

B；透明帶下注射法不抽取供體細胞的細胞核；操作簡單且對供體細胞核損傷小，同時注射的位置是卵母細胞外的透明帶，然后誘導兩個細胞融合，對卵母細胞的損傷小，B正確；

C；供體細胞注入卵母細胞透明帶內后；還需要電融合法等誘導才能使供體細胞進入卵母細胞形成重構胚，C錯誤；

D；細胞分裂、分化形成克隆胚胎的過程是有絲分裂過程；而基因重組發(fā)生在減數分裂過程，D錯誤。

故選ACD。14、A:C:D【分析】【分析】

大腸桿菌是原核生物；原核細胞與真核細胞相比，最大的區(qū)別是原核細胞沒有被核膜包被的成形的細胞核（沒有核膜；核仁和染色體）；原核細胞只有核糖體一種細胞器；原核細胞中，轉錄和翻譯在相同時空中進行，而真核生物的轉錄和翻譯過程在不同時間和空間進行。

【詳解】

A；人體胰島細胞是真核細胞；在合成胰島素原時，轉錄在細胞核中進行，翻譯在細胞質的核糖體上進行，原核細胞沒有細胞核，A錯誤；

B；DNA連接酶能在兩個相同黏性末端配對后的磷酸與脫氧核糖之間形成化學鍵（磷酸二酯鍵）；B正確；

C；通過檢測；大腸桿菌中沒有胰島素原產生，不能判斷重組質粒未導入受體菌，也可能是導入后沒有表達，C錯誤；

D；大腸桿菌是原核生物；沒有內質網和高爾基體，不能對胰島素原進行加工，因此人胰島素原基因在大腸桿菌中表達的胰島素原沒有生物活性，D錯誤。

故選ACD。三、填空題(共9題，共18分)15、略

【解析】遺傳和生理16、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作過程中多種微生物參與了發(fā)酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產生蛋白酶能將豆腐中的蛋白質轉化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪轉化成甘油和脂肪酸。

2；果膠酶能夠分解果膠；瓦解植物的細胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，而果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶并不特指某一種酶，而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶。

【詳解】

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應用最廣泛；效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

（2）果膠酶并不特指某一種酶；而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶；果膠分解酶和果膠酯酶；在果汁生產過程中如果要固定果膠酶，最好采用化學結合和物理吸附法固定化，這是因為酶分子小，體積小的酶容易從包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分離原理：需要用凝膠色譜法去除相對分子質量大的雜質蛋白；以純化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法對酶進行純度鑒定。

【點睛】

本題考查腐乳制作和酶提取等知識，對于此類試題，需要考生注意的細節(jié)較多，如實驗的原理、實驗步驟、實驗采用的試劑及試劑的作用等，需要考生在平時的學習過程中注意積累?！窘馕觥啃》肿与暮桶被嶂久笁A性蛋白酶和堿性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶化學結合法和物理吸附凝膠色譜（分配色譜）聚丙烯酰胺凝膠電泳17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】80—100℃變性18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】多聚酶鏈式反應體外擴增DNA片段19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】現配現用20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】植物繁殖的新途徑作物新品種的培育（單倍體育種、突變體利用）21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】莖尖極少或沒有）胚狀體人工薄膜不受季節(jié)的限制人工種皮；胚狀體和人工胚乳。

（2）22、略

【分析】【詳解】

在日常生活中；我們遇到過的與克隆技術有關的問題有：

①瀕臨滅絕動物的克?。嚎寺】梢哉葹l危的國家保護動物以及植物；我們可運用克隆，復制瀕臨滅絕的生物，讓其不至于在我們的生活中消失；

②農業(yè)克?。簯糜谵r業(yè)等領域；通過轉基因的方式，增加糧食的畝產量，提高土地的單位出產量；

③細胞克隆替代或者修復人體細胞問題；比如胚胎干細胞；

④畜牧業(yè)克?。簯糜谛竽翗I(yè)，提升優(yōu)良品種群體基數，縮短畜牧育種年限。【解析】有，比如：①瀕臨滅絕動物的克??；②農業(yè)克?。簯糜谵r業(yè)等領域，通過轉基因的方式，增加糧食的畝產量，提高土地的單位出產量；③細胞克隆替代或者修復人體細胞問題，比如胚胎干細胞；④畜牧業(yè)克隆：應用于畜牧業(yè)，提升優(yōu)良品種群體基數，縮短畜牧育種年限。23、略

【分析】略【解析】目的基因標記基因啟動子終止子啟動子上游RNA聚合酶終止子下游轉錄標記四、判斷題(共3題，共24分)24、B【分析】【詳解】

植物組織培養(yǎng)是指將離體的植物器官、組織或細胞等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導其形成完整植株的技術，最終獲得了完整的植株，體現了植物細胞的全能性，而植物細胞培養(yǎng)的目的使獲得大量的植物細胞，從而獲得次生代謝物，利用的原理是細胞增殖，故錯誤。25、A【分析】【分析】

早期胚胎發(fā)育從受精卵開始；當卵裂分裂到16-32個細胞時，卵裂產生的子細胞逐漸形成致密的細胞團，形似桑葚時，這時的胚胎稱為桑葚胚，這一階段及之前的每一個細胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，屬于全能細胞。胚胎進一步發(fā)育，細胞開始出現分化，形成內細胞團；滋養(yǎng)層；隨著胚胎進一步發(fā)育，胚胎內部出現了含有液體的囊腔—囊胚腔，這個時期的胚胎叫做囊胚。胚胎發(fā)育至囊胚期時，細胞逐漸分化。

【詳解】

囊胚時期聚集在胚胎一端的細胞形成內細胞團，將來發(fā)育成胚胎的各種組織，即發(fā)育成完整的胚胎，而沿透明帶內壁拓展和排列的細胞，稱為滋養(yǎng)層細胞，它們將來發(fā)育成胎膜和胎盤，為胚胎的發(fā)育提供營養(yǎng)，故“胚胎發(fā)育至囊胚期時，細胞逐漸分化表述”正確。26、B【分析】【詳解】

來源于自然界的目的基因導入植物體后，可能破壞原有的基因結構，具有不確定性，外源基因也可能通過花粉傳播，使其他植物成為“超級植物"等，所以如果轉基因植物的外源基因來源于自然界，也可能存在安全性問題。本說法錯誤。五、實驗題(共4題，共20分)27、略

【分析】【分析】

1；動物細胞培養(yǎng)的條件：

（1）無菌；無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液；以清除代謝廢物；

（2）營養(yǎng)物質：糖；氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等；還需加入血清、血漿等天然物質；

（3）適宜的溫度和pH；

（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。

2；實驗操作步驟的安排一般如下：第一步：取材隨機均分為幾組；編號；第二步：不同組自變量的處理；第三步：把上述各組放在無關變量相同且適宜等條件下處理一段時間；第四步：觀察并記錄比較相應的因變量。根據題意可知，本實驗的目的是驗證生物制劑W對動物不同細胞的分裂具有促進作用，則該實驗的自變量是細胞的種類及是否加入生物制劑W，因變量是細胞懸液中細胞的數目，對細胞直接計數可以采用血球板計數法。

【詳解】

（1）①動物細胞培養(yǎng)前需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶分別處理正常肝組織和肝癌組織獲得分散的細胞。將兩種分散的細胞加入培養(yǎng)液中制成兩種細胞懸液。動物細胞的培養(yǎng)液中需要加入葡萄糖；氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清；為了保證無菌的條件，一般在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素。

②在顯微鏡下可以采用血球計數板直接計數兩種細胞懸液中細胞的數量；并進行記錄。

③本實驗的目的是驗證生物制劑W對動物不同細胞的分裂具有促進作用；根據題干所給實驗材料可知，不同細胞是指正常肝細胞和癌細胞，因此該實驗應該設置四組，變量為細胞的種類及是否加入生物制劑W，具體如下：

A組：培養(yǎng)液中加入正常肝細胞懸液；B組：培養(yǎng)液中加入與之等量癌細胞懸液；從A；B組中各取出一半培養(yǎng)瓶作為C、D組；C、D兩組：培養(yǎng)液中加入等量的生物制劑W。放入動物細胞培養(yǎng)箱在適宜條件下培養(yǎng)。

④該實驗的因變量是計數細胞懸液中細胞的數量；因此各組樣品在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段合適的時間后，每組取部分樣品，加入胰蛋白酶或膠原蛋白酶搖勻，將細胞分散成單個，然后在顯微鏡下計數。

（2）預測實驗結果；若較長時間培養(yǎng)，因為正常細胞的增殖次數有限，故A組中細胞數量最少，由于W促進細胞增殖的作用，因此C組細胞數量多于A組；而癌細胞可以無限增殖，且由于其細胞膜上的糖蛋白減少，易于擴散和轉移，同時失去接觸抑制，可大量培養(yǎng)增殖，故B；D兩組中細胞數量明顯更多，且由于W的促進作用，D組多于B組；由于此實驗是驗證實驗，所以實驗結果是加入生物制劑W的實驗組比對照組細胞數多，同時癌細胞分裂能力比正常細胞高，故繪制坐標曲線具體如下:

【點睛】

本題考查驗證實驗，要求學生明確實驗的目的，正確區(qū)分實驗的變量，能夠根據題意判斷自變量和因變量，然后根據設計實驗的單一變量和等量原則，同時結合題干所給的實驗材料完善實驗設計，并能預測實驗結果和繪制相關曲線圖表示實驗的結果?！窘馕觥恳鹊鞍酌福z原蛋白酶）葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清抗生素血球計數板等量肝癌細胞懸液等量生物制劑W胰蛋白酶（膠原蛋白酶）28、略

【分析】【分析】

培養(yǎng)基是指供給微生物；植物或動物（或組織）生長繁殖的；由不同營養(yǎng)物質組合配制而成的營養(yǎng)基質。一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽（包括微量元素）、維生素和水等幾大類物質。培養(yǎng)基既是提供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎物質，也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基種類很多，根據配制原料的來源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基；根據物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基；根據培養(yǎng)功能可分為基礎培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等；根據使用范圍可分為細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、真菌培養(yǎng)基等。

【詳解】

（1）培養(yǎng)基一般都含有水；無機鹽、碳源和氮源等物質；以滿足生物生長的需求；培養(yǎng)基制作后需使用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌；由于本實驗的目的是獲得可耐受高濃度β-苯乙醇的酵母菌株，因此實驗初篩、復篩和再次復篩時培養(yǎng)基中添加的β-苯乙醇濃度要逐漸升高。

（2）根據計算公式：（平均菌落數）÷涂布體積×稀釋倍數=每毫升菌液中的菌體數，可知：（平均菌落數）÷0．1mL×104=4．5×106個；所以平板上的平均菌落數是45個；液體培養(yǎng)是指將微生物直接接種于液體培養(yǎng)基中，并不斷振蕩或攪拌，可以迅速得到大量繁殖體。

（3）由實驗目的可知，該實驗的自變量是葡萄糖溶液的濃度，因變量是YDF-1的增殖情況，可通過顯微鏡直接計數這一簡便的方法來確定其增殖情況，因此實驗的設計思路是設置一系列濃度梯度的葡萄糖溶液，再向其中分別接種等量的YDF-1，每天定時用血細胞計數板統(tǒng)計溶液中的菌體數量，增殖效果最佳的葡萄糖溶液即為YDF-1增殖的最佳濃度?！窘馕觥?1)碳源；氮源高壓蒸汽滅菌逐漸增大只有將培養(yǎng)基中β-苯乙醇的濃度逐漸增大；才能篩選得到可耐受高濃度β-苯乙醇的酵母菌株。

(2)45增加目的菌株濃度。

(3)設置一系列濃度梯度的葡萄糖溶液，再向其中分別接種等量的YDF-1，每天定時用血細胞計數板統(tǒng)計溶液中的菌體數量，增殖效果最佳的葡萄糖溶液即為YDF-1增殖的最佳濃度29、略

【分析】【分析】

PCR擴增目的基因可分為以下幾步：①模板DNA的變性：模板DNA經加熱至90℃以上一定時間后；使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應作準備；②模板DNA與引物的復性：模板DNA經加熱變性成單鏈后，溫度降至50℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合；③引物的延伸：當溫度上升到72℃左右時，DNA模板--引物結合物在熱穩(wěn)定DNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應原料，靶序列為模板，按堿基配對與半保留復制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈。

(1)

步驟①從病毒RNA到病毒cDNA的過稱為逆轉錄；需要的酶是逆轉錄酶；步驟④為延伸過程，需要的酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶；利用PCR技術擴增目的基因的前提，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據這一序列合成引物，所以引物A和引物B是根據一段已知新冠病毒基因的核苷酸序列合成的。

(2)

步驟③是復性；復性指當溫度下降到50℃左右時，兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合，所以目的是使引物A；引物B、基因探針與病毒cDNA的目的片段結合，如果該步驟出現失誤，由圖可知結合的熒光染料不能被儀器檢測到熒光，游離的熒光染料能被儀器檢測到熒光對檢測結果的影響是不能降解探針，導致存在病毒cDNA但無法用儀器檢測到熒光。

(3)

新冠病毒抗體檢測可作為核酸檢測的補充；抗體檢測的原理是抗原抗體特異性結合；對某人進行檢測時發(fā)現，其核酸檢測為陰性說明此人體內沒有檢測出新冠病毒，抗體檢測呈陽性說明此人體內有相應抗體，原因可能是此人曾感染新冠病毒并已康復（或此人已注射新冠疫苗）。

【點睛】

本題考查PCR相關知識，并結合了熱點問題新冠病毒，理論聯系實際，加深了學生的理解?！窘馕觥?1)逆轉錄酶熱穩(wěn)定DNA聚合酶一段已知新冠病毒基因的核苷酸。

(2)使引物A；引物B、基因探針與病毒cDNA的目的片段結合不能降解探針；導致存在病毒cDNA但無法用儀器檢測到熒光。

(3)抗原抗體特異性結合此人曾感染新冠病毒并已康復（或此人已注射新冠疫苗）30、略

【分析】【分析】

圖1可知：T-2毒素是一種常見的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的關鍵酶，T-2毒素可誘導其表達水平升高，當用兩種調控序列同時連接啟動子，啟動子的活性最高。

圖2可知：野生型探針能與NF-Y結合；突變型探針不能與NF-Y結合，NF-Y抗體一定能與NF-Y結合。

【詳解】

（1）初級代謝產物一般是霉菌生命活動所必需的，大多存在于細胞內。次級代謝產物不是霉菌生命活動必需的，并且分泌到體外，故T-2毒素是霉菌的次級代謝產物。T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由擴散的方式進入細胞。

（2）實驗的自變量是有無調控序列；根據單一變量原則，對照組的目的是為了排除無光變量的影響，除了沒有調控序列，其他處理和實驗組相同，所以對照組和實驗組豬肝細胞均導入含CYP3A基因啟動子及LUC基因的表達載體，然后向各組豬肝細胞培養(yǎng)液中加入加入等量T-2毒素，適宜條件下進行培養(yǎng)。從圖中信息可知，缺失兩個調控序列和對照組活性一致，缺失一個比對照組活性略強，兩個都存在活性最高，說明這兩個調控序列是CYP3A基因響應T-2毒素的核心元件。故缺失兩個調控序列或其中任一個，T-2毒素都不能誘導啟動子活性明顯增強。

（3）①實驗的目的是要驗證NF-Y能與B1結合；根據第2組和第3組結果，依據B1序列制備的NF-Y結合位點野生型探針能與NF-Y結合，根據第4組結果，突變型探針不能與NF-Y結合。第5組加入了NF-Y抗體，一定能與NF-Y結合。故可以解釋為：結合位點突變的探針不能結合核蛋白中的NF-Y，也不會競爭NF-Y與標記探針的結合，所以第4組與第2組同樣位置出現阻滯帶。第5組，NF-Y的抗體結合NF-Y，因此第5組中出現標記探針；NF-Y和NF-Y抗體的結合物，結合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。

②假設NF-Y和Sp1通過互作共同發(fā)揮調控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離，故增大或縮小B1和B2兩者之間的距離都會降低CYP3A基因的啟動子的活性。【解析】(1)次級自由擴散。

(2)等量的T-2毒素缺失兩個調控序列或其中任一個；T-2毒素都不能誘導啟動子活性增強。

(3)結合位點突變的探針不能結合核蛋白中的NF-Y，也不會競爭NF-Y與標記探針的結合，所以第4組與第2組同樣位置出現阻滯帶。NF-Y的抗體結合NF-Y，因此第5組中出現標記探針、NF-Y和NF-Y抗體的結合物，結合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。NF-Y和Sp1通過互作共同發(fā)揮調控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離。六、綜合題(共3題，共30分)31、略

【分析】【分析】

實驗原理：1；在多種微生物的協同作用下進行；其中起主要作用的是毛霉，它是一種絲狀真菌，新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。2、毛霉等微生物產生的蛋白酶可以將蠶豆中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以將脂肪水解成甘油和脂肪酸。

(1)

蠶豆中含有大量蛋白質；主要為微生物的生長提供碳源（提供碳元素）和氮源（提供氮元素）類營養(yǎng)物質；加入的蠶豆經沸水漂燙約4min冷卻后使用，這樣既可以對蠶豆進行消毒，消滅蠶豆表面的雜菌，又能防止蠶豆溫度過高導致接種的微生物死亡。

(2)