2025年浙教版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年浙教版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述中，錯誤的是（）A.其原理是細胞的全能性B.必須在無菌條件下進行C.再分化的過程中需要一定光照D.一般需用培養(yǎng)液進行培養(yǎng)2、將馬鈴薯胰蛋白酶抑制劑基因Pin-Ⅱ?qū)霔顦浼毎嘤闪丝瓜x楊樹。下圖表示含目的基因的DNA分子和農(nóng)桿菌質(zhì)粒，圖中Apr表示氨芐青霉素抗性基因，Ner表示新霉素抗性基因；箭頭表示識別序列完全不同的4種限制酶的酶切位點。下列敘述不正確的是（）

A.目的基因插入到質(zhì)粒的T-DNA上，才能整合到受體細胞染色體中B.為使目的基因與質(zhì)粒高效重組，最好選用EcoRI和PstIC.成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細胞會表現(xiàn)為不抗氨芐青霉素、抗新霉素D.可用DNA分子雜交或抗原-抗體雜交技術(shù)檢測目的基因是否表達3、下列有關(guān)生物技術(shù)安全性及倫理問題的說法，錯誤的是（）A.轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性爭論重點發(fā)生在轉(zhuǎn)基因食品等方面B.基因身份證上可以檢測到個人的所有基因C.反對設(shè)計試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計嬰兒性別D.當(dāng)今社會的普遍觀點是禁止克隆人的實驗，但不反對治療性克隆4、發(fā)酵工程的正確操作過程是（）

①發(fā)酵②培養(yǎng)基的配制③滅菌④產(chǎn)品的分離與提純⑤菌種的選育⑥擴大培養(yǎng)⑦接種A.⑤②⑥⑦①③④B.⑤⑥②③⑦①④C.②⑤③⑦①⑥④D.⑦③⑤②③①④5、下列關(guān)于限制酶的敘述，錯誤的是（）A.限制酶可從原核生物中提取B.同一種限制酶切割不同的DNA分子產(chǎn)生的末端能夠進行堿基互補配對C.限制酶能任意切割DNA分子，從而產(chǎn)生大量的DNA片段D.每種限制酶只能識別特定的脫氧核苷酸序列6、實驗人員利用矮牽牛（2n=14）的紅色花瓣細胞與枸杞（4n=48）的葉肉細胞，進行植物體細胞雜交。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.可將兩種植物細胞置于含纖維素酶和果膠酶的等滲溶液中處理B.融合后的原生質(zhì)體均含有6個染色體組、62條染色體C.可利用光學(xué)顯微鏡觀察，對融合的原生質(zhì)體進行篩選D.植物體細胞雜交技術(shù)打破了生殖隔離，實現(xiàn)了遠緣雜交育種7、用現(xiàn)代生物技術(shù)培育生物新品種，關(guān)于其優(yōu)越性說法不正確的是（）A.克隆技術(shù)可以快速繁殖優(yōu)良性狀的家畜B.現(xiàn)代生物技術(shù)可以迅速使新品種形成群落C.現(xiàn)代生物技術(shù)可以克服遠緣雜交不親和的障礙D.現(xiàn)代轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)可以迅速改變生物的基因組成評卷人得分二、多選題(共7題，共14分)8、限制酶BamHⅠ和BglⅡ是兩種常見的工具酶，它們的識別序列及切割位點依次為G↓GATCC和A↓GATCT。研究中用BamHⅠ切割DNA獲得目的基因，用BglⅡ切割質(zhì)粒，并連接得到重組質(zhì)粒。相關(guān)敘述錯誤的是（）A.酶切過程中，需控制好酶濃度、溫度和反應(yīng)時間等因素B.目的基因經(jīng)BamHⅠ切割后形成的黏性末端是—CTAGC.分別用兩種限制酶切割，保證了目的基因定向插入質(zhì)粒D.經(jīng)兩種酶處理得到的重組質(zhì)粒不能再被這兩種酶所識別9、化工廠污水池中含有一種有害的難以降解的有機化合物A；研究人員用化合物A；磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素等配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解化合物A的細菌（目的菌）實驗的主要步驟如圖所示。下列敘述錯誤的是（）

A.培養(yǎng)基中加入化合物A作為唯一碳源，目的是為了篩選目的菌B.實驗培養(yǎng)過程中進行振蕩培養(yǎng)，可使目的菌和培養(yǎng)液充分接觸C.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)立即快速挑取菌落D.將固體培養(yǎng)基得到的目的菌重復(fù)多次上述實驗的目的是獲得大量菌種10、下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)及其應(yīng)用的說法中，正確的是（）A.植物體體內(nèi)具完整細胞結(jié)構(gòu)的活細胞均可作為組織培養(yǎng)的外植體B.不同培養(yǎng)階段的培養(yǎng)基中生長素與細胞分裂素的比例應(yīng)不同C.單倍體育種和轉(zhuǎn)基因植物的培育需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)D.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可實現(xiàn)某些重要細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)11、某種病毒的主要表面抗原為S蛋白，用S蛋白制備的單克隆抗體可用于該種病毒的檢測。下列說法正確的是（）

A.B淋巴細胞分離自經(jīng)S蛋白免疫過的小鼠B.稀釋培養(yǎng)后多孔玻璃板中的雜交瘤細胞數(shù)目可能不到細胞總數(shù)的一半C.集落①的細胞既能無限增殖又能產(chǎn)生單克隆抗體D.集落②～④的細胞可用于擴大化培養(yǎng)生產(chǎn)單克隆抗體12、為了檢測藥物X、Y和Z的抗癌效果，在細胞培養(yǎng)板的每個孔中加入相同數(shù)量的肺癌細胞使其貼壁生長。實驗組分別加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞礬（溶劑）的藥物X、Y或Z，培養(yǎng)過程及結(jié)果如圖所示。下列敘述錯誤的是（）

實驗結(jié)果見下表：。組別細胞數(shù)目（個/孔）對照7．8×106藥物X6．7×104藥物Y5．3×105藥物Z8．0×106

A.對照組中只需加入等體積的二甲基亞礬溶劑即可B.細胞培養(yǎng)液中通常需要加入一定量的抗生素防止病毒污染C.計數(shù)時可用胰蛋白酶處理貼壁細胞，使肺癌細胞脫落下來D.根據(jù)實驗結(jié)果，三種藥物均具有抗癌效果，但藥物X的抗癌效果最好13、被譽為“魔法子彈”的抗體—藥物偶聯(lián)物（ADC）主要由三部分構(gòu)成：“殺傷彈藥”——小分子細胞毒性藥物（有效載荷）、“制導(dǎo)系統(tǒng)”——靶向腫瘤細胞表面特異性抗原的單克隆抗體以及將兩者連接起來的連接子。這種結(jié)構(gòu)的優(yōu)勢在于具備高效的靶向性和殺傷腫瘤細胞的能力。下列說法錯誤的是（）A.ADC中的單克隆抗體可特異性消除腫瘤細胞B.ADC的用藥量比常規(guī)藥物使用量少C.ADC中的單克隆抗體的制備需用到細胞融合技術(shù)D.ADC可被定向運輸?shù)侥[瘤細胞14、熒光原位雜交可用熒光標(biāo)記的特異DNA片段為探針；與染色體上對應(yīng)的DNA片段結(jié)合，從而將特定的基因在染色體上定位。下列說法正確的是（）

A.由圖1可知，DNA探針的本質(zhì)是熒光標(biāo)記的DNA片段，其基本單位是脫氧核苷酸B.由圖2可知，高溫可以使雙鏈DNA分子中的氫鍵斷裂形成DNA單鏈C.圖2中兩條姐妹染色單體中最多可有2條熒光標(biāo)記的DNA片段D.若C分別代表不同來源的一個染色體組，已知AA和BB中各有一對同源染色體可被熒光探針標(biāo)記。若植物甲（AABB）與植物乙（AACC）雜交，則F1有絲分裂中期的細胞中可觀察到6個熒光點評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)15、______——“分子縫合針”16、利用DNA和蛋白質(zhì)等其它成分在___________中的溶解度不同，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。17、注意：a生理基礎(chǔ)：______，______

b植物細胞融合前需用______和______除去細胞壁18、今年年初；爆發(fā)了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過其表面的S-蛋白與人細胞膜上的ACE2相互識別，感染人的呼吸道上皮細胞。請分析回答問題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_________剌激淋巴細胞，使機體產(chǎn)生_________性免疫反應(yīng)，人細胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統(tǒng)對肺細胞強烈攻擊引發(fā)肺炎，此時可通過適度使用_________對病人進行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）科學(xué)家采集了感染新型冠狀病毒并已康復(fù)的甲、乙兩人的血液，檢測相關(guān)抗體的水平，結(jié)果如圖1。據(jù)此分析，應(yīng)選取_________的B淋巴細胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測病毒對宿主細胞的感染率，結(jié)果如圖2。據(jù)此分析，對病毒抑制效果最好的單抗是__________號。

（5）患者康復(fù)后一段時間，若再次受到該病毒的攻擊，機體內(nèi)相應(yīng)的__________細胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。19、有時還需進行______的鑒定。如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)______。評卷人得分四、判斷題(共2題，共10分)20、雄性動物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力()A.正確B.錯誤21、中國政府積極支持制定《禁止生殖性克隆人國際公約》，堅決反對克隆人，不允許進行任何生殖性克隆人實驗。（選擇性必修3P108）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共2題，共14分)22、單克隆抗體在防治H7N9型禽流感上具有顯著療效。下圖是科研人員制備H7N9病毒的單克隆抗體X的過程?；卮鹣铝袉栴}：

（1）上圖中B淋巴細胞是取自______________的動物或人。融合的M細胞先用選擇培養(yǎng)基進行篩選，再進行克隆化培養(yǎng)和_______________以得到符合要求的N細胞，N細胞的名稱是______________。

（2）為了進一步研究H7N9病毒的單克隆抗體X（以下簡稱抗體X）的效果及作用機制；科學(xué)家開展了如下實驗：

實驗一：在體外將抗體X與HA蛋白（H7N9病毒表面的一種蛋白）混合，檢測抗體X對HA蛋白的親和力。實驗結(jié)果如下表所示。（注：KD值越小，抗體和HA蛋白的親和力越高；機體Y為一種已知的H7N9病毒的抗體。）?？贵w種類KD抗體X5．32×10-9M抗體Y1．95×10-9M

實驗二：以一定濃度的H7N9病毒感染小鼠；一天后向小鼠腹腔分別注射一定劑量的抗體X；Y；14天后測定小鼠存活情況和體重變化。實驗結(jié)果表明：抗體X的體內(nèi)治療效果優(yōu)于抗體Y。

①實驗一結(jié)果表明：對H7N9病毒HA蛋白親和力更高的抗體是__________。

②分析實驗一和實驗二的結(jié)果差異，研究人員提出假說：抗體除了中和病毒活性之外，還可以通過和巨噬細胞表面的受體相結(jié)合，從而增強巨噬細胞的吞噬作用，進而清除被病毒感染的靶細胞。請以巨噬細胞、感染了H7N9病毒的肺上皮細胞、細胞培養(yǎng)液、抗體X、抗體Y和無關(guān)抗體等為材料，設(shè)計實驗驗證上述假說。寫出實驗思路__________。23、T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通過污染飼料引起畜禽中毒反應(yīng)。CYP3A是豬體內(nèi)降解T-2毒素的關(guān)鍵酶，T-2毒素可誘導(dǎo)CYP3A基因表達水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（選填“初級”或“次級”）代謝產(chǎn)物，主要以_____方式進入豬細胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因啟動子上游的兩個調(diào)控序列，為研究T-2毒素誘導(dǎo)CYP3A基因表達的機理，研究者首先將不同調(diào)控序列分別和CYP3A基因啟動子及熒光素酶基因（LUC基因）連接構(gòu)建表達載體，再分別導(dǎo)入豬肝細胞，然后向各組豬肝細胞培養(yǎng)液中加入_____，適宜條件下進行培養(yǎng)；24h后檢測LUC酶活性，計算啟動子活性相對值，結(jié)果如圖1所示。據(jù)圖可知，B1和B2調(diào)控序列是CYP3A基因響應(yīng)T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1兩種蛋白均參與T-2毒素對CYP3A的誘導(dǎo)；B2是Spl的結(jié)合位點。研究者推測，NF-Y通過與B1結(jié)合，與Sp1共同調(diào)控CYP3A基因的表達。

①為證明Bl是NF-Y的結(jié)合位點，研究者依據(jù)B1序列制備了野生型和突變型探針，分別與豬肝細胞核蛋白提取物混合，實驗分組及結(jié)果如圖2．據(jù)實驗結(jié)果推測，第4組出現(xiàn)阻滯帶的原因是_____，進而推測第5組結(jié)果產(chǎn)生的原因是_____。

②研究者設(shè)計實驗進一步證明了NF-Y和Spl通過互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，實驗設(shè)計思路是：增大或縮小B1和B2兩者之間的距離，檢測CYP3A基因的啟動子活性。據(jù)此分析，實驗假設(shè)是_____。評卷人得分六、綜合題(共4題，共24分)24、水稻胚乳中含直鏈淀粉和支鏈淀粉，直鏈淀粉所占比例越小糯性越強?？蒲腥藛T將能表達出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉(zhuǎn)入水稻，實現(xiàn)了對直鏈淀粉合成酶基因（Wx基因）啟動子序列的定點編輯；從而獲得了3個突變品系。

（1）將能表達出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列插入Ti質(zhì)粒構(gòu)建重組載體時，所需的酶是______，重組載體進入水稻細胞并在細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程稱為_____________。

（2）根據(jù)啟動子的作用推測，Wx基因啟動子序列的改變影響了______，從而改變了Wx基因的轉(zhuǎn)錄水平。與野生型水稻相比，3個突變品系中Wx基因控制合成的直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列___(填：發(fā)生或不發(fā)生)改變，原因是_____________。

（3）為檢測啟動子變化對Wx基因表達的影響，科研人員需要檢測Wx基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA（WxmRNA）的量。檢測時分別提取各品系胚乳中的總RNA，經(jīng)_____過程獲得總cDNA。通過PCR技術(shù)可在總cDNA中專一性的擴增出Wx基因的cDNA，原因是_____________。

（4）各品系WxmRNA量的檢測結(jié)果如圖所示，據(jù)圖推測糯性最強的品系為_____，原因是_____________。25、地球上的植物每年產(chǎn)生的纖維素超過70億噸；其中40%～60%能被土壤中某些微生物分解利用，這是因為它們能夠產(chǎn)生纖維素酶。對這些微生物的研究與應(yīng)用，使人們能夠利用秸稈等生產(chǎn)酒精，用纖維素酶處理服裝面料等。已知剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不與水解后的纖維二糖；葡萄糖等發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)我們在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物；而當(dāng)纖維素被纖維素分解菌分解后，復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以這些菌為中心的透明圈（如下圖所示）。請回答下列問題。

幾種纖維素分解菌在剛果紅培養(yǎng)基上形成的透明圈。

（1）現(xiàn)在要從土壤中分離纖維素分解菌；請你給出詳細的實驗方案。_______

（2）你打算到什么環(huán)境中去尋找纖維素分解菌？為什么？_______

（3）有同學(xué)說，可以把濾紙埋在土壤中，經(jīng)過一段時間后，再從已腐爛的濾紙上篩選纖維素分解菌。請你評價這一做法。_______26、為了研究低溫誘導(dǎo)對某基因的啟動子P活性的影響；科研人員進行了啟動子P的PCR提??；特定表達載體的構(gòu)建和轉(zhuǎn)基因煙草的功能鑒定。該基因及其啟動子P的結(jié)構(gòu)及相應(yīng)限制酶的切割位點如下圖所示，圖中淺灰色區(qū)域堿基序列是已知的，啟動子P（圖中深灰色區(qū)域）及上游堿基序列未知，片段Ⅰ和片段Ⅱ中的字母A~F均表示引物。請回答下列問題。

(1)啟動子是_____________識別和結(jié)合的部位。不能直接根據(jù)片段Ⅰ擴增啟動子P的原因是_____________。

(2)為了能擴增正常啟動子P，科研人員先用__________酶處理上圖中的片段Ⅰ，使片段Ⅰ成為環(huán)狀DNA；再將環(huán)狀DNA用酶_____________處理得到了片段Ⅱ，如下圖所示。根據(jù)片段Ⅱ，用引物_____________組合（用C；D、E、F表示）能擴增出啟動子P。

(3)已知卡那霉素可抑制煙草細胞的生長，基因M可在煙草的根部正常表達，其表達產(chǎn)物可將X-Gluc水解生成藍色物質(zhì)。將啟動子P和基因M結(jié)合并與含有卡那霉素抗性基因的Ti-質(zhì)粒重組構(gòu)建基因表達載體。將表達載體加入含有煙草細胞的培養(yǎng)基中，篩選出所需的煙草細胞，然后經(jīng)過培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)基因煙草植株。將上述轉(zhuǎn)基因煙草植株分為A、B兩組，A組在常溫（25℃，對照組）下培養(yǎng)，B組在低溫（4℃，實驗組）下培養(yǎng)，一段時間后取A、B的幼根，浸入適量_____________溶液中，觀察煙草細胞中基因M的表達情況（表達強度越大，細胞表現(xiàn)的藍色越深）。若A、B組的結(jié)果分別為_____________，則說明低溫抑制啟動子P的功能。27、蜘蛛絲（絲蛋白）被稱為“生物鋼”；有著超強的抗張強度?？芍瞥煞缽棻承?；人造韌帶等。蜘蛛通過在腹部的腺體生成蜘蛛絲，并使用一種名為“噴絲頭”的器官將蛛絲排出體外。由于蜘蛛會互相攻擊，吃掉同類，因此無法像蠶絲一樣通過養(yǎng)殖大量生產(chǎn)。利用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)蜘蛛絲不斷取得成功，請回答下列問題：

運用基因工程技術(shù)已經(jīng)創(chuàng)造出了“蜘蛛羊”過程如圖；回答下列問題：

(1)蛛絲蛋白基因可從蜘蛛的________文庫中獲取，獲取的基因不含啟動子。甲過程需用到的工具是________（填工具名稱）。檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細胞可用DNA分子雜交技術(shù)，要用_____________作探針。

(2)重組細胞培養(yǎng)成早期胚胎的過程中，需要提供________、無毒的條件，若在培養(yǎng)基中加入抗生素________（能、不能）抑制真菌的生長。若成功導(dǎo)入目的基因的轉(zhuǎn)基因羊并沒有產(chǎn)生相應(yīng)的蛛絲蛋白，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是________。

(3)可將________技術(shù)結(jié)合基因工程等技術(shù)得到具有新性狀的克隆羊。

(4)如圖為蛛絲蛋白基因?qū)?yīng)的DNA片段結(jié)構(gòu)示意圖。若用PCR技術(shù)獲取目的基因，則與之對應(yīng)的引物結(jié)合部位應(yīng)該是圖中的________（填數(shù)字）；該DNA分子在PCR儀中經(jīng)過4次循環(huán)，一共消耗每種引物數(shù)量________個。

蛛絲蛋白產(chǎn)量低；科學(xué)家嘗試用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)蛛絲蛋白，如利用微生物發(fā)酵，轉(zhuǎn)基因動植物等。家蠶是唯一可以通過人工養(yǎng)殖大量獲取絲纖維的動物，由于蠶絲蛋白和蜘蛛絲蛋白在結(jié)構(gòu)上有一定的相似性，因此利用家蠶遺傳改造大量獲取類蜘蛛絲纖維是一個可行性高的策略。請回答下列問題：

(5)下列關(guān)于應(yīng)用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)蛛絲蛋白敘述不正確的是____。A．不可采用細菌和植物作為表達體系，但可選用酵母菌作為表達體系B．將含有絲蛋白基因的表達載體導(dǎo)入雌性動物的乳腺細胞中可獲得乳腺生物反應(yīng)器C．若受體細胞為大腸桿菌，菌落的大小、有無莢膜、隆起程度等肉眼可見的特征都可作為優(yōu)秀菌種鑒定的依據(jù)D．篩選出高產(chǎn)蛛絲蛋白菌種需經(jīng)擴大培養(yǎng)，再接種到發(fā)酵罐中進行發(fā)酵生產(chǎn)(6)中國科學(xué)院譚安江研究組發(fā)現(xiàn)家蠶絲蛋白的主要成分有絲素重鏈（FibH），絲素輕鏈（FibL），絲膠蛋白（Sericin）等，其中FibH約占整個絲蛋白含量的70%以上。研究組利用基因工程的方法在家蠶絲腺和蠶繭中大量表達蜘蛛絲蛋白，其主要思路是借助轉(zhuǎn)基因技術(shù)敲除________，同時保留了其上下游完整的調(diào)控序列，定點整合了含有部分蜘蛛絲基因和________的DNA片段；以便目的基因的篩選。

(7)研究人員發(fā)現(xiàn)若將蛛絲蛋白31號位的色氨酸替換為酪氨酸，蛛絲韌性可提高50%，利用蛋白質(zhì)工程對蛛絲蛋白進行改造，基本途徑是：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→________蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)→推測氨基酸序列→找到對應(yīng)的脫氧核苷酸序列。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、D【分析】【分析】

1；植物組織培養(yǎng)的原理：植物細胞具有全能性。

2；植物組織培養(yǎng)的條件：①細胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例；特別是生長素和細胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要，被稱為“激素杠桿”。

【詳解】

A；植物組織培養(yǎng)所依據(jù)的原理是細胞的全能性；A正確；

B；為保證實驗成功；植物組織培養(yǎng)技術(shù)必須在無菌條件下進行，B正確；

C；由愈傷組織再分化過程中需要光照；原因是葉肉細胞中的葉綠素的合成需要光照，C正確；

D；植物組織培養(yǎng)一般需要用MS的固體培養(yǎng)基；D錯誤。

故選D。2、D【分析】【分析】

1；基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲??；利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

2；分析圖示可知；為保證目的基因的完整性，不能選用BamHⅠ酶；為了防止目的基因自身環(huán)化，應(yīng)選用目的基因兩側(cè)的兩種不同的限制酶；重組質(zhì)粒中至少要保留一個抗生素的抗性基因，PstI和TthⅢ1只能選其中一個；綜上所述，可選用EcoRI和PstI或者EcoRI和TthⅢ1，為保留重組質(zhì)粒中的復(fù)制原點，最好選用EcoRI和PstI同時切割目的基因和質(zhì)粒。

【詳解】

A；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞；并且整合到受體細胞染色體的DNA上，根據(jù)這一特點，將目的基因插入到質(zhì)粒的T-DNA上，才能整合到受體細胞染色體中，A正確；

B；由分析可知；為使目的基因與質(zhì)粒高效重組，最好選用EcoRI和PstI同時切割目的基因和質(zhì)粒，B正確；

C；由分析可知；應(yīng)選用EcoRI和PstI切割質(zhì)粒，氨芐青霉素抗性基因被破壞，故成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細胞會表現(xiàn)為不抗氨芐青霉素、抗新霉素，C正確；

D；檢測目的基因是否表達應(yīng)檢測是否成功產(chǎn)生蛋白質(zhì)；可用抗原-抗體雜交技術(shù)，D錯誤。

故選D。3、B【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊；正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。

【詳解】

A；轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性爭論重點發(fā)生在轉(zhuǎn)基因食品等方面；A正確；

B；基因身份證主要記錄了個人的致病基因和易感基因；因此不能檢測到個人的所有基因，B錯誤；

C；反對設(shè)計試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計嬰兒性別；C正確；

D；當(dāng)今社會的普遍觀點是禁止克隆人的實驗；但不反對治療性克隆，D正確。

故選B。4、B【分析】【分析】

發(fā)酵工程；是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種新技術(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種的選育；培養(yǎng)基的配制、滅菌、擴大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純等方面，據(jù)此答題。

【詳解】

發(fā)酵工程的基本操作過程為：菌種的選育→擴大培養(yǎng)→培養(yǎng)基的配制→滅菌→接種→發(fā)酵過程→產(chǎn)品的分離提純；因此正確的操作過程是⑤⑥②③⑦①④，B正確，ACD錯誤。

故選B。5、C【分析】【分析】

限制酶屬于基因工程中的工具酶的一種：

來源：主要從原核生物中分離純化出來。

特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種。

作用部位：磷酸二酯鍵。

【詳解】

A；限制酶可以從某些原核生物中提??；A正確；

B；同一種限制酶切割不同的DNA分子時；由于識別位點相同，所產(chǎn)生的末端相同，能夠進行堿基互補配對，B正確；

C；限制酶只能識別特定的脫氧核苷酸序列；而不能任意切割DNA分子，C錯誤；

D；一種限制酶只能識別一種特定的脫氧核苷酸序列；D正確。

故選C。6、B【分析】【分析】

誘導(dǎo)植物細胞融合前；先要采用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除細胞壁，獲得原生質(zhì)體；誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時，可以采用物理方法（電激；振動等）和化學(xué)方法（聚乙二醇）；若原生質(zhì)體均為兩兩融合，則會形成3種細胞，即矮牽牛細胞自身融合的細胞、枸杞細胞自身融合的細胞，雜種細胞，所以融合后的細胞中染色體數(shù)目為28條或96條或62條；可利用顯微鏡篩選得到融合后的雜種原生質(zhì)體。

【詳解】

A；可將兩種植物細胞置于含纖維素酶和果膠酶的等滲溶液中處理；去除植物細胞壁，A正確；

B；原生質(zhì)體融合方式可能是矮牽牛細胞與矮牽牛細胞融合含有4個染色體組、28條染色體；枸杞細胞與枸杞細胞融合含有8個染色體組、96條染色體；矮牽牛細胞與枸杞細胞融合含有6個染色體組、62條染色體，B錯誤；

C；通過B可知；不同細胞融合，含有染色體數(shù)不同，可利用光學(xué)顯微鏡觀察，對融合的原生質(zhì)體進行篩選，C正確；

D；植物體細胞雜交技術(shù)打破了生殖隔離；實現(xiàn)了遠緣雜交育種，D正確。

故選B。7、B【分析】【分析】

現(xiàn)代轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)可以迅速改變生物的基因組成；基因工程和細胞工程等現(xiàn)代生物技術(shù)培育農(nóng)作物新品種克服了遠緣雜交不親和障礙，在培育作物新品種方面所取得的重大突破。

【詳解】

A；克隆技術(shù)可以在短時間內(nèi)大量繁殖；故可快速繁殖優(yōu)良性狀的家畜，A正確；

B；現(xiàn)代生物技術(shù)可以迅速使新品種形成一個種群；群落包括該區(qū)域的所有生物，B錯誤；

C；現(xiàn)代生物技術(shù)中通過體細胞雜交可以克服遠源雜交不親和的障礙；C正確；

D；現(xiàn)代轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)可以迅速改變生物的基因組成；D正確。

故選B。

【點睛】二、多選題(共7題，共14分)8、B:C【分析】【分析】

關(guān)于限制酶；考生可以從以下幾方面把握：（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來。（2）特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端。

【詳解】

A；影響酶促反應(yīng)的因素有溫度、pH、酶濃度、底物濃度等；因此酶切過程中，需控制好酶濃度、溫度和反應(yīng)時間等因素，A正確；

B；根據(jù)題意可知；限制酶BamHⅠ的識別序列及切割位點為G↓GATCC，因此目的基因經(jīng)BamHI切割后形成的黏性末端是是-GATC或CTAG-，B錯誤；

C；由于這兩種酶切割形成的黏性末端相同；因此分別用這兩種限制酶切割，不能保證目的基因定向插入質(zhì)粒，C錯誤；

D；經(jīng)兩種酶處理得到的重組質(zhì)粒的相應(yīng)部位的序列不能再被這兩種酶識別；D正確。

故選BC。

【點睛】9、C:D【分析】【分析】

分析題干信息：該實驗的目的是篩選出高效降解化合物A的細菌；在以化合物A為唯一碳源的培養(yǎng)基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A為碳源和氮源生長繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，無法生長繁殖。

【詳解】

A；本實驗的目的是“篩選到能高效降解化合物A的細菌”；因此培養(yǎng)基中加入化合物A作為唯一碳源，目的是為了篩選目的菌，A正確；

B；實驗培養(yǎng)過程中進行振蕩培養(yǎng)；可使目的菌和培養(yǎng)液充分接觸，B正確；

C；為了防止污染；接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后需要冷卻后再挑取菌落，否則會導(dǎo)致高溫使菌種死亡，C錯誤；

D；在以化合物A為唯一碳源的培養(yǎng)基中只有能降解化合物A的微生物才能生長繁殖；不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，無法生長繁殖，將固體培養(yǎng)基得到的目的菌重復(fù)多次上述實驗的目的是對菌種“純化”，D錯誤。

故選CD。

【點睛】10、A:B:C:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)：1；過程：離體的植物組織；器官或細胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，再分化產(chǎn)生胚狀體，最好發(fā)育成植株（新植體）。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長素和細胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要。

2；原理：植物細胞的全能性。

3；應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（快速繁殖優(yōu)良品種、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種和突變體的利用）、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

【詳解】

A；用于培養(yǎng)的植物細胞必須具有完整的細胞核；以保證有全套的遺傳信息，因此植物體體內(nèi)具完整細胞結(jié)構(gòu)的活細胞均可作為組織培養(yǎng)的外植體，A正確；

B；脫分化過程和再分化過程所需的培養(yǎng)基中生長素與細胞分裂素的比例應(yīng)不同；如生長素與細胞分裂素用量比值適中時，促進愈傷組織的形成；生長素與細胞分裂素用量比值低時，有利于芽的形成；生長素與細胞分裂素用量比值高時，有利于根的形成，B正確；

C；單倍體育種和轉(zhuǎn)基因植物的培育都要經(jīng)歷細胞到植株的過程；因此都需要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)，C正確；

D；利用某些細胞能產(chǎn)生特定的產(chǎn)物；通過組織培養(yǎng)使細胞數(shù)量增加，進而增加產(chǎn)量，實現(xiàn)工廠化生產(chǎn)，D正確。

故選ABCD。

【點睛】11、A:B:C【分析】【分析】

12、B:D【分析】【分析】

分析題意可知:該實驗?zāi)康氖菣z測藥物X和Y的抗癌活性；自變量是藥物X或Y，因變量是檢測細胞數(shù)量。

【詳解】

A；加入等體積的二甲基亞礬溶作為空白對照；排除體積和溶劑等無關(guān)因素的影響，A正確;

B；抗生素具有殺菌(不是殺病毒)作用；為防止培養(yǎng)液被污染，可在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素，B錯誤;

C；要使貼壁細胞從瓶壁上分離下來；需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，C正確;

D；分析實驗結(jié)果；加入X的癌細胞個數(shù)是6.7×104，加入Y的癌細胞個數(shù)是5.3×105，說明藥物X的抗癌效果比Y好，加入Z的癌細胞個數(shù)是8.0×106，與空白對照相比無抗癌作用，D錯誤。

故選BD。13、A:D【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過程:首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)；使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細胞。利用動物細胞融合技術(shù)將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選:利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細胞，即AB型細胞（A為B淋巴細胞，B為骨髓瘤細胞），不需要A；B、AA、BB型細胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原—抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。

【詳解】

A；分析題意可知；ADC中的單克隆抗體將細胞毒性藥物運送到靶向腫瘤，但不會消除腫瘤細胞，真正發(fā)揮藥效的是細胞毒性藥物，A錯誤；

B；由于ADC可將藥物帶到腫瘤細胞所在部位；定位殺死腫瘤細胞，故ADC的用藥量比常規(guī)用藥的藥量少，B正確；

C；單克隆抗體的制備需要將B細胞與骨髓瘤細胞融合；故需要用到細胞融合技術(shù)，C正確；

D；ADC通過體液運輸；與腫瘤細胞進行特異性結(jié)合，體液運輸是不定向的，D錯誤。

故選AD。14、A:B:D【分析】【分析】

1；基因探針是用放射性同位素、熒光分子等標(biāo)記的DNA分子作為探針；原理是DNA分子雜交。

2；DNA分子是一個獨特的雙螺旋結(jié)構(gòu)；是由兩條平行的脫氧核苷酸長鏈盤旋而成，外側(cè)由脫氧核糖和磷酸交替連接構(gòu)成基本骨架，內(nèi)側(cè)是堿基對（A-T；C-G）通過氫鍵連接。

3；目的基因的檢測與鑒定：

分子水平上的檢測：

①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；

②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；

③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。

個體水平上的鑒定：

抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；由圖1可知；DNA探針是用熒光分子標(biāo)記的DNA分子，DNA的基本組成單位是脫氧核苷酸，因此熒光標(biāo)記的DNA探針的基本單位是脫氧核糖核苷酸，A正確；

B；由圖2可知；高溫（煮沸）可以使雙鏈DNA分子中的氫鍵斷裂形成DNA單鏈，B正確；

C；圖中兩條姐妹染色單體中含有2個DNA分子共有4條鏈；所以最多可有4條熒光標(biāo)記的DNA片段，C錯誤；

D、由于AA和BB中各有一對同源染色體可被熒光探針標(biāo)記，若植物甲（AABB）與植物乙（AACC）雜交，則其F1（AABC）含有3個熒光點；經(jīng)間期復(fù)制加倍，有絲分裂中期的細胞中可觀察到6個熒光點，D正確。

故選ABD。三、填空題(共5題，共10分)15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA連接酶16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不同濃度的NaCL溶液DNA雜質(zhì)17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】細胞膜流動性植物細胞全能性纖維素酶果膠酶18、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復(fù)的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據(jù)曲線圖可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對宿主細胞的感染率。根據(jù)柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對宿主細胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細胞，使機體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，人細胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。

（2）免疫系統(tǒng)對被新冠病毒感染后肺細胞強烈攻擊引發(fā)肺炎；此時可通過適度使用免疫抑制劑對病人進行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組，故應(yīng)選取甲的B細胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對宿主細胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復(fù)后一段時間；若再次受到該病毒的攻擊，機體內(nèi)相應(yīng)的記憶細胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。

【點睛】

本題結(jié)合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識記病毒的結(jié)構(gòu)，明確病毒沒有細胞結(jié)構(gòu)；識記單克隆抗體的制備過程，掌握其優(yōu)點及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質(zhì)）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】個體生物學(xué)水平抗蟲性狀。四、判斷題(共2題，共10分)20、A【分析】【詳解】

雄性動物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力，精子獲能的過程不是獲得能量的過程，是獲得受精能力的過程，可在獲能液或受精液中完成，故正確。21、A【分析】【詳解】

中國政府對于“克隆人”的態(tài)度是禁止生殖性克隆人，積極支持制定《禁止生殖性克隆人國際公約》，堅決反對克隆人，不允許進行任何生殖性克隆人實驗。故該說法正確。五、實驗題(共2題，共14分)22、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：小鼠骨體瘤細胞和取自感染病毒的人體內(nèi)的漿細胞進行細胞融合；M表示融合細胞，N表示篩選出的雜交瘤細胞。

【詳解】

（1）分析題圖：小鼠骨體瘤細胞和取自感染病毒的人體內(nèi)的漿細胞進行細胞融合，M表示融合細胞，N表示篩選出的雜交瘤細胞；B淋巴細胞是取自感染H7N9病毒的動物或人；隨后將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合，對融合后的細胞用選擇培養(yǎng)基進行篩選，挑選出B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合的細胞，然后再進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，以得到符合要求的N細胞，N細胞的名稱是雜交瘤細胞；

（2）①據(jù)題中圖表分析，KD值越小，抗體和HA蛋白的親和力越高；抗體Y的KD值小于抗體X的KD值，故對H7N9病毒HA蛋白親和力更高的抗體是抗體Y；

②抗體X的體內(nèi)治療效果優(yōu)于抗體Y，但對H7N9病毒HA蛋白親和力更高的抗體是抗體Y，驗證抗體除了中和病毒活性之外，還可以通過和巨噬細胞表面的受體相結(jié)合，從而增強巨噬細胞的吞噬作用，進而清除被病毒感染的靶細胞，需要進行抗體X和抗體Y的對照實驗，并與無關(guān)抗體進行比較，可以將巨噬細胞及感染了H7N9病毒的肺上皮細胞分別加入A；B、C三組細胞培養(yǎng)液中；并向這三組培養(yǎng)液中分別加入無關(guān)抗體、抗體X和抗體Y，一段時間后檢測并比較肺上皮細胞的裂解百分比。

【點睛】

對單克隆抗體制備流程、抗體效果檢測原理和實驗?zāi)康募坝闷返姆治觯墙鉀Q本題的關(guān)鍵?！窘馕觥竣?感染過H7N9病毒②.抗體檢測③.雜交瘤細胞④.Y⑤.將巨噬細胞及感染了H7N9病毒的肺上皮細胞分別加入A、B、C三組細胞培養(yǎng)液中，并向這三組培養(yǎng)液中分別加入無關(guān)抗體、抗體X和抗體Y，一段時間后檢測并比較肺上皮細胞的裂解百分比。23、略

【分析】【分析】

圖1可知：T-2毒素是一種常見的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的關(guān)鍵酶，T-2毒素可誘導(dǎo)其表達水平升高，當(dāng)用兩種調(diào)控序列同時連接啟動子，啟動子的活性最高。

圖2可知：野生型探針能與NF-Y結(jié)合；突變型探針不能與NF-Y結(jié)合，NF-Y抗體一定能與NF-Y結(jié)合。

【詳解】

（1）初級代謝產(chǎn)物一般是霉菌生命活動所必需的，大多存在于細胞內(nèi)。次級代謝產(chǎn)物不是霉菌生命活動必需的，并且分泌到體外，故T-2毒素是霉菌的次級代謝產(chǎn)物。T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由擴散的方式進入細胞。

（2）實驗的自變量是有無調(diào)控序列；根據(jù)單一變量原則，對照組的目的是為了排除無光變量的影響，除了沒有調(diào)控序列，其他處理和實驗組相同，所以對照組和實驗組豬肝細胞均導(dǎo)入含CYP3A基因啟動子及LUC基因的表達載體，然后向各組豬肝細胞培養(yǎng)液中加入加入等量T-2毒素，適宜條件下進行培養(yǎng)。從圖中信息可知，缺失兩個調(diào)控序列和對照組活性一致，缺失一個比對照組活性略強，兩個都存在活性最高，說明這兩個調(diào)控序列是CYP3A基因響應(yīng)T-2毒素的核心元件。故缺失兩個調(diào)控序列或其中任一個，T-2毒素都不能誘導(dǎo)啟動子活性明顯增強。

（3）①實驗的目的是要驗證NF-Y能與B1結(jié)合；根據(jù)第2組和第3組結(jié)果，依據(jù)B1序列制備的NF-Y結(jié)合位點野生型探針能與NF-Y結(jié)合，根據(jù)第4組結(jié)果，突變型探針不能與NF-Y結(jié)合。第5組加入了NF-Y抗體，一定能與NF-Y結(jié)合。故可以解釋為：結(jié)合位點突變的探針不能結(jié)合核蛋白中的NF-Y，也不會競爭NF-Y與標(biāo)記探針的結(jié)合，所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。第5組，NF-Y的抗體結(jié)合NF-Y，因此第5組中出現(xiàn)標(biāo)記探針；NF-Y和NF-Y抗體的結(jié)合物，結(jié)合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。

②假設(shè)NF-Y和Sp1通過互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離，故增大或縮小B1和B2兩者之間的距離都會降低CYP3A基因的啟動子的活性。【解析】(1)次級自由擴散。

(2)等量的T-2毒素缺失兩個調(diào)控序列或其中任一個；T-2毒素都不能誘導(dǎo)啟動子活性增強。

(3)結(jié)合位點突變的探針不能結(jié)合核蛋白中的NF-Y，也不會競爭NF-Y與標(biāo)記探針的結(jié)合，所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。NF-Y的抗體結(jié)合NF-Y，因此第5組中出現(xiàn)標(biāo)記探針、NF-Y和NF-Y抗體的結(jié)合物，結(jié)合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。NF-Y和Sp1通過互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離。六、綜合題(共4題，共24分)24、略

【分析】【分析】

基因工程的操作步驟：

1；獲取目的基因（從基因組文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增目的基因、化學(xué)合成法）；

2；基因表達載體的構(gòu)建（這也是基因工程的核心）；一個完整的基因表達載體包括：

（1）啟動子：位于基因的首端；是RNA聚合酶識別并結(jié)合的位點，驅(qū)動目的基因的轉(zhuǎn)錄；（2）目的基因：編碼蛋白質(zhì)的基因；（3）終止子：位于基因的尾端，其作用使轉(zhuǎn)錄在需要的地方停止；（4）標(biāo)記基因：作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的受體細胞篩選出來。

3；將目的基因?qū)胧荏w細胞（植物、動物、微生物）：目的基因進入受體細胞內(nèi)；并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為轉(zhuǎn)化。

4；目的基因的檢測與鑒定（DNA分子雜交技術(shù),分子雜交技術(shù)、抗原抗體雜交）。

【詳解】

（1）將目的基因與Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達載體時；需要限制酶的切割，將目的基因插入載體時需要DNA連接酶的連接，重組載體進入水稻細胞并在細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程叫做轉(zhuǎn)化。

（2）根據(jù)以上分析可知，啟動子是RNA聚合酶識別并結(jié)合的位點，如果啟動子序列改變將會影響RNA聚合酶與之結(jié)合和識別，進而影響基因的轉(zhuǎn)錄水平。在真核生物中，編碼蛋白質(zhì)的序列是基因中編碼區(qū)，編碼區(qū)中不包括啟動子序列，因此直鏈淀粉合成酶的基因堿基序列中不含有啟動子，因此3個突變品系中Wx基因中控制合成直鏈淀粉酶的氨基酸序列不發(fā)生改變。

（3）以mRNA為模板合成cDNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄，利用PCR技術(shù)擴增Wx基因的cDNA，需要以Wx基因合成的引物，這樣引物能夠在總cDNA中與Wx基因的cDNA特異性結(jié)合，從而利用PCR擴增技術(shù)專一性擴增出Wx基因的cDNA。

（4）識圖分析可知，圖中品系3的Wx基因的mRNA的含量最少；那么合成的直鏈淀粉酶最少，直鏈淀粉合成量最少，因此該水稻胚乳中含的直鏈淀粉比例最小，糯性最強。

【點睛】

本題考查基因工程的知識點，要求學(xué)生掌握基因工程的操作工具和操作步驟是解決問題的關(guān)鍵。識記并理解基因工程中工具酶的種類和作用，把握基因表達載體構(gòu)建的過程，理解啟動子的功能和編碼蛋白質(zhì)的基因的結(jié)構(gòu)，這是該題考查的難點；把握PCR擴增技術(shù)的操作過程和引物的作用，這是突破第（3）問的關(guān)鍵?！窘馕觥浚?）限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶轉(zhuǎn)化（2）RNA聚合酶與啟動子的識別和結(jié)合不發(fā)生編碼直鏈淀粉合成酶的堿基序列中不含啟動子（3）逆轉(zhuǎn)錄（或：反轉(zhuǎn)錄）引物是根據(jù)Wx基因的一段已知序列設(shè)計合成的（或：引物能與Wx基因的cDNA特異性結(jié)合）（2分）（4）品系3品系3的WxmRNA最少，控制合成的直鏈淀粉合成酶最少，直鏈淀粉合成量最少，糯性最強（2分）25、略

【分析】【分析】

1、纖維素是植物多糖，所含元素為C、H、O，是構(gòu)成植物細胞壁的成分之一。纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶；前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。

2；剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理：剛果紅是一種染料；它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)我們在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅—纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。

【詳解】

（1）對纖維素分解菌進行分離的實驗流程為：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落。

纖維素分解菌大多分布在富含纖維素的環(huán)境中；因此，采集土樣時，可以選擇纖維素豐富的環(huán)境，如樹林中多年落葉形成的腐殖土，多年積累的枯枝敗葉等，用無菌小鐵鏟鏟去表層土，迅速鏟取土樣，裝入無菌信封內(nèi)密封。土壤稀釋，將稀釋液接種到選擇培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，增加纖維素分解菌的濃度，以確保能夠從樣品中分離到該菌。然后進行梯度稀釋，將稀釋后的樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的固體培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)的過程中，纖維素分解菌產(chǎn)生纖維素酶，將纖維素分解成纖維二糖；葡萄糖。剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，而纖維素被分解后則不能與剛果紅結(jié)合形成紅色復(fù)合物，在培養(yǎng)基上就形成了以纖維素分解菌為中心的透明圈，用接種環(huán)或接種針挑選產(chǎn)生透明圈的菌落就是纖維素分解菌的菌落。

（2）生物與環(huán)境存在相互依存的關(guān)系；在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對較高，更容易找到，例如樹林中多年落葉形成的腐殖土，多年積累的枯枝敗葉等。

（3）濾紙中含有大量的纖維素；將濾紙埋在土壤中，是通過人工增大了土壤中的纖維素濃度，創(chuàng)造了纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境，纖維素分解菌就會在濾紙上聚集，經(jīng)過30d左右，就可以從腐爛濾紙上篩選出纖維素分解菌，因此這一做法可行。

【點睛】

本題主要考查分離纖維素分解菌的原理和實驗流程，要求考生識記相關(guān)知識，能運用所學(xué)內(nèi)容解釋某些生物學(xué)問題?！窘馕觥渴紫冗M行土壤取樣。在富含纖維素的潮濕土壤中用無菌小鐵鏟鏟去表層土，迅速鏟取土樣，裝入無菌信封內(nèi)密封。其次，進行選擇培養(yǎng)。將土壤稀釋液接種到選擇培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的濃度。然后進行梯度稀釋，將稀釋后的樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的固體培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)的過程中，纖維素分解菌產(chǎn)生纖維素酶，將纖維素分解成纖維二糖、葡萄糖。這些產(chǎn)物不能與剛果紅結(jié)合形成紅色復(fù)合物，在培養(yǎng)基上就形成了以纖維素分解菌為中心的透明圈，用接種環(huán)或接種針挑選產(chǎn)生透明圈的菌落就是纖維素分解菌的菌落。打算到富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌。因為根據(jù)生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對較高，因此從這種土樣中獲得目的微生物的概率要高于普通環(huán)境。這一做法可行，通過人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境，使纖維素分解菌聚集。濾紙富含纖維素，將濾紙埋在土壤中，纖維素分解菌就會在濾紙上聚集分解纖維素，可以從腐爛濾紙上篩選纖維素分解菌。26、略

【分析】【分析】

分析題圖；啟動子P左右兩端都有酶1切割位點，可用酶1切割片段I使切割后的片段I首尾兩端產(chǎn)生相同的末端，再用DNA連接酶處理片段Ⅰ形成環(huán)狀DNA分子。用酶2切割環(huán)狀DNA可獲得片段II。由于子鏈合成方向是從子鏈的5'-3'，用引物D和E可擴增出啟動子P。

(1)

啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點；用于基因的轉(zhuǎn)錄；由于啟動子P及左側(cè)的序列未知，無法合成PCR所需要的引物，故不能直接根據(jù)片段Ⅰ擴增啟動子。

(2)

結(jié)合圖示可知；圖中的片段I在啟動子P的左右兩端各有一個酶1的切割位點，酶1可切割啟動子P的左右兩端產(chǎn)生相同的末端，再用DNA連接酶連接可形成環(huán)狀DNA的片段I；片段II的首尾兩端都有灰色區(qū)域，結(jié)合題圖分析可知，片段II是用酶2切割處理環(huán)狀DNA產(chǎn)生的；由于子鏈合成方向是從子鏈的5'-3'，所以可以用引物D和E擴增出啟動子P。

(3)

結(jié)合題干信息“卡那霉素可抑制煙草細胞的生長”及“基因M可在煙草的根部正常表達，其表達產(chǎn)物可將X－Gluc水解生成藍色物質(zhì)”可知，用含有卡那霉素和X-Gluc的培養(yǎng)基可篩選出所需的煙草細胞，在卡那霉素中能存活說明獲得了質(zhì)粒，能將X-Gluc水解成藍色說明獲