2025年外研銜接版選修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線(xiàn)…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線(xiàn)※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線(xiàn)…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年外研銜接版選修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、下面是4種限制酶所識(shí)別的DNA分子序列和剪切位點(diǎn)圖（↓表示剪切點(diǎn)；切出的斷面為黏性末端）：限制酶1：——↓GATC——限制酶2：——CATG↓——限制酶3：——G↓GATCC——限制酶4：——CCGC↓GG——

請(qǐng)指出下列哪項(xiàng)表達(dá)正確A.在使用限制酶的同時(shí)還需要解旋酶B.限制酶1和3剪出的黏性末端相同C.限制酶1、2、4識(shí)別的序列都是由4個(gè)脫氧核苷酸組成D.限制酶1和2切出的DNA片段可通過(guò)T4DNA連接酶拼接2、下列有關(guān)基因工程操作工具的敘述，正確的是（）A.限制酶能識(shí)別并切割DNA任意序列B.DNA連接酶與Taq酶的作用位點(diǎn)不同C.沒(méi)有與目的基因重組的質(zhì)粒不可以進(jìn)入受體細(xì)胞D.使用質(zhì)粒作為載體可以避免目的基因在受體內(nèi)被分解3、雙特異性抗體(BsAb)是一種能夠同時(shí)結(jié)合兩種抗原的抗體。CD19和CD47是淋巴瘤細(xì)胞廣泛表達(dá)的表面標(biāo)記物(CD19在B細(xì)胞表面普遍存在，CD47在正常組織細(xì)胞上普遍存在)。研究人員將兩種產(chǎn)生不同抗體的雜交瘤細(xì)胞融合成雙雜交瘤細(xì)胞，最終得到了能同時(shí)結(jié)合CD19和CD47的BsAb，它可以結(jié)合同一靶細(xì)胞上兩種不同的抗原，通過(guò)這種“雙靶向”模式增強(qiáng)對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性，在體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)中均可顯著殺傷淋巴瘤細(xì)胞。下列敘述錯(cuò)誤的是A.同時(shí)注射2種抗原后提取B細(xì)胞，易得大量同時(shí)分泌兩種抗體的漿細(xì)胞B.獲得BsAb的過(guò)程中，篩選雙雜交瘤細(xì)胞的依據(jù)是抗原抗體的特異性結(jié)合C.使用BsAb治療對(duì)正常細(xì)胞的損傷小于聯(lián)合使用CD19單抗和CD47單抗D.若BsAb的部分結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，可能會(huì)出現(xiàn)治療效果降低的情況4、假設(shè)世界上最后一頭野驢剛死亡，以下幾個(gè)使它“復(fù)生”的方案中，可行的是（）A.將野驢的體細(xì)胞取出，利用組織培養(yǎng)培育出新個(gè)體B.將野驢的基因?qū)爰殷H的受精卵中，培育出新個(gè)體C.野驢的體細(xì)胞兩兩融合，再經(jīng)組織培養(yǎng)培育出新個(gè)體D.將野驢的體細(xì)胞核移植到家驢的去核卵母細(xì)胞中，經(jīng)孕育培育出新個(gè)體5、我國(guó)科研人員利用大鼠、小鼠兩個(gè)遠(yuǎn)親物種創(chuàng)造出世界首例異種雜合二倍體胚胎干細(xì)胞（AdESCs），具體流程如圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.單倍體囊胚1可由小鼠的卵細(xì)胞經(jīng)體外誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得B.單倍體囊胚2的形成過(guò)程中發(fā)生了細(xì)胞的分裂和分化C.圖中的單倍體胚胎干細(xì)胞來(lái)源于單倍體囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)D.AdESCs的染色體組數(shù)與大鼠——小鼠體細(xì)胞融合的雜種細(xì)胞相同6、下列關(guān)于哺乳動(dòng)物受精的有關(guān)說(shuō)法正確的是（）A.防止多精入卵受精的兩道屏障分別是頂體反應(yīng)和卵細(xì)胞膜封閉作用B.受精的實(shí)質(zhì)是雌雄原核的融合，雄原核一般略小于雌原核C.動(dòng)物排出的卵子成熟程度不同，有的是次級(jí)卵母細(xì)胞，有的是初級(jí)卵母細(xì)胞D.精子獲能必須在雌性動(dòng)物生殖道內(nèi)進(jìn)行，在體外不能進(jìn)行7、杜泊羊以其生長(zhǎng)速度快；肉質(zhì)好等優(yōu)點(diǎn)；成為廣大消費(fèi)者喜歡的綿羊品種。科研工作者通過(guò)胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下圖所示，下列說(shuō)法正確的是（）

A.過(guò)程①采集的卵母細(xì)胞需在體外培養(yǎng)至MI期B.過(guò)程②采集的精子需放入ATP溶液中獲能處理C.過(guò)程④⑤分別是早期胚胎的移植和培養(yǎng)D.可用胚胎分割技術(shù)實(shí)現(xiàn)杜泊羊快速大量繁殖評(píng)卷人得分二、多選題(共7題，共14分)8、小鼠雜交瘤細(xì)胞表達(dá)的單克隆抗體用于人體試驗(yàn)時(shí)易引起過(guò)敏反應(yīng)，為了克服這個(gè)缺陷，可選擇性擴(kuò)增抗體的可變區(qū)基因（目的基因）后再重組表達(dá)。下列相關(guān)敘述正確的是A.設(shè)計(jì)擴(kuò)增目的基因的引物時(shí)不必考慮表達(dá)載體的序列B.用PCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)不必知道基因的全部序列C.PCR體系中一定要添加從受體細(xì)胞中提取的DNA聚合酶D.一定要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細(xì)胞9、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，如右圖所示，a、b；c表示現(xiàn)代工程技術(shù)；①②③表示通過(guò)相應(yīng)技術(shù)經(jīng)胚胎移植得到的個(gè)體，請(qǐng)據(jù)圖回答，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是。

A.若a是核移植技術(shù)，①中個(gè)體的獲得反映了動(dòng)物細(xì)胞具有全能性B.若b是體外授精技術(shù)，則該技術(shù)為良種家畜快速大量繁殖提供了可能C.若c是胚胎分割技術(shù)，③中個(gè)體的基因型和表現(xiàn)型一定相同D.a、b、c三項(xiàng)技術(shù)獲得的胚胎，其將要植入的受體必須是珍稀的、存量少的雌性動(dòng)物10、2020年5月22日，在世界權(quán)威醫(yī)學(xué)期刊《柳葉刀》雜志在線(xiàn)刊登了中國(guó)陳薇團(tuán)隊(duì)研發(fā)的重組腺病毒疫苗I期人體（108位志愿者）試驗(yàn)臨床數(shù)據(jù)結(jié)果：安全、能誘導(dǎo)免疫反應(yīng)。重組腺病毒疫苗是一種重組的基因工程產(chǎn)品，用不會(huì)使人體致病的腺病毒作為載體，把克隆出來(lái)的編碼新冠病毒S蛋白（介導(dǎo)新冠病毒感染細(xì)胞的成分）基因裝入載體腺病毒，注入人體，進(jìn)入人體細(xì)胞，表達(dá)出S蛋白，刺激人體產(chǎn)生針對(duì)新冠病毒的免疫應(yīng)答。相關(guān)敘述正確的是（）A.重組腺病毒疫苗包括S蛋白基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等B.重組腺病毒疫苗能使人體產(chǎn)生體液免疫和細(xì)胞免疫C.重組腺病毒疫苗引發(fā)的體液免疫中有吞噬細(xì)胞、T細(xì)胞的參與D.重組腺病毒疫苗引起免疫反應(yīng)后相應(yīng)淋巴細(xì)胞增多，細(xì)胞周期將變長(zhǎng)11、我國(guó)科學(xué)家成功地用iPS細(xì)胞克隆出了活體小鼠，部分流程如下圖所示，其中Kdm4d為組蛋白去甲基化酶，TSA為組蛋白脫乙酰酶抑制劑。下列敘述正確的是（）

A.過(guò)程①中小分子化合物誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞突變?yōu)閕PS細(xì)胞B.過(guò)程②中的卵母細(xì)胞需要在體外培養(yǎng)到MⅡ期再除去細(xì)胞核C.過(guò)程③中可使用電融合法誘導(dǎo)兩細(xì)胞融合，進(jìn)而形成重構(gòu)胚D.組蛋白去甲基化和脫乙?；赡苡欣谥貥?gòu)胚后續(xù)的胚胎發(fā)育12、我國(guó)科學(xué)家利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)將150CAG重復(fù)序列精確地插入豬成纖維細(xì)胞內(nèi)的亨廷頓蛋白(HTT)內(nèi)源性基因中，并成功培育出世界首例含人類(lèi)突變H基因的模型豬，基本原理如圖。下列相關(guān)說(shuō)法正確的是（）

A.步驟①將150CAG重復(fù)序列插入豬的亨廷頓蛋白內(nèi)源性基因中引起的變異屬于基因突變B.步驟②將重組細(xì)胞進(jìn)行胚激活處理后可直接移植至受體的子宮中C.為短時(shí)間內(nèi)滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的需求量可進(jìn)行胚胎分割操作D.為提高細(xì)胞克隆形成率，可在培養(yǎng)皿中加入胰島素刺激13、“糧桑漁畜”農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)是江浙平原水網(wǎng)地區(qū)典型的高效農(nóng)業(yè)系統(tǒng)；下圖表示的是這一農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的基本模式。據(jù)圖判斷下列說(shuō)法正確的是（）

A.沼氣池的建立既充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力，又防止了環(huán)境污染B.通過(guò)巧接食物鏈?zhǔn)乖玖飨蚍纸庹叩哪芰扛嗟亓飨蛉?，提高了能量的傳遞效率C.這一生態(tài)工程模式主要適用于江浙平原而不適用于我國(guó)西北地區(qū)，這是因?yàn)樵诮⑸鷳B(tài)工程時(shí)還需要遵循“整體、協(xié)調(diào)、循環(huán)、自生”的原理D.上述農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中的消費(fèi)者是雞、蠶、魚(yú)、蝦14、科研人員對(duì)某地富營(yíng)養(yǎng)化水體實(shí)施生態(tài)恢復(fù)，向水體引入以藻類(lèi)為食的某些貝類(lèi)，引種蘆葦、香蒲等水生植物，以及放養(yǎng)植食性魚(yú)類(lèi)等。經(jīng)治理后實(shí)現(xiàn)了（）A.水體中溶解氧含量升高B.物質(zhì)和能量的良性循環(huán)C.生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性提高D.經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益的共同提高評(píng)卷人得分三、填空題(共8題，共16分)15、生物學(xué)家利用基因工程技術(shù)通過(guò)生物反應(yīng)器生產(chǎn)人的血清蛋白。請(qǐng)根據(jù)相關(guān)知識(shí)回答下列問(wèn)題：

（1）在基因工程的操作中的“分子手術(shù)刀”是_______________________________

（2）在基因工程的操作中的“分子縫合針”是________

（3）基因工程中最常用的運(yùn)載體是______

（4）人的基因在牛體內(nèi)能表達(dá)，說(shuō)明人和牛______16、自然條件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一頭奶牛一年只能繁殖一頭牛犢。通過(guò)胚胎工程技術(shù)可以快速繁育優(yōu)良個(gè)體，其主要步驟如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）從供體奶牛獲得的精子，需對(duì)其進(jìn)行___________處理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母細(xì)胞，為使其超數(shù)排卵常使用____________激素處理；采集到卵母細(xì)胞后，在體外將其培養(yǎng)到___________期；使其成熟。

（3）步驟甲、乙分別指___________、___________。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛，步驟乙之前應(yīng)鑒定胚胎中與___________有關(guān)的基因。

（4）進(jìn)行步驟乙時(shí)，受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生___________，這為胚胎在代孕母牛體內(nèi)的存活提供了可能。17、基因治療：基因治療是指用正常基因_______或______患者細(xì)胞中有缺陷的基因，從而達(dá)到治療疾病的目的。18、根據(jù)課本知識(shí)填空：

（1）神經(jīng)元的軸突末梢經(jīng)過(guò)多次分支；最后每個(gè)小枝末端膨大，呈杯狀或球狀，叫做________。

（2）抗體可以與病原體結(jié)合；從而抑制病原體的繁殖或___________________________。

（3）要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA；可以用____________________________做探針。

（4）所謂人工種子就是以植物組織培養(yǎng)得到的________________________（寫(xiě)出2個(gè)即可）等為材料；經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝得到的種子。

（5）胰島素能促進(jìn)組織細(xì)胞加速_______________葡萄糖。19、今年年初；爆發(fā)了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過(guò)其表面的S-蛋白與人細(xì)胞膜上的ACE2相互識(shí)別，感染人的呼吸道上皮細(xì)胞。請(qǐng)分析回答問(wèn)題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_(kāi)________剌激淋巴細(xì)胞，使機(jī)體產(chǎn)生_________性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統(tǒng)對(duì)肺細(xì)胞強(qiáng)烈攻擊引發(fā)肺炎，此時(shí)可通過(guò)適度使用_________對(duì)病人進(jìn)行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）科學(xué)家采集了感染新型冠狀病毒并已康復(fù)的甲、乙兩人的血液，檢測(cè)相關(guān)抗體的水平，結(jié)果如圖1。據(jù)此分析，應(yīng)選取_________的B淋巴細(xì)胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測(cè)病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率，結(jié)果如圖2。據(jù)此分析，對(duì)病毒抑制效果最好的單抗是__________號(hào)。

（5）患者康復(fù)后一段時(shí)間，若再次受到該病毒的攻擊，機(jī)體內(nèi)相應(yīng)的__________細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。20、下圖表示哺乳動(dòng)物精子和卵細(xì)胞發(fā)生和成熟的示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）③過(guò)程中精子頭部的頂體是由__________發(fā)育來(lái)的；④過(guò)程在__________內(nèi)完成。

（2）在④過(guò)程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)和透明帶。為了阻止多精入卵，會(huì)發(fā)生__________反應(yīng)和__________反應(yīng)。

（3）精子的發(fā)生開(kāi)始的時(shí)期是__________；雌性動(dòng)物卵泡的形成的時(shí)期是__________。

（4）初級(jí)卵母細(xì)胞進(jìn)行Ⅰ過(guò)程是在__________時(shí)期完成的，Ⅱ過(guò)程是在__________過(guò)程中完成的。21、請(qǐng)寫(xiě)出基因工程的概念：_________________。請(qǐng)寫(xiě)出胚胎移植的概念：_____________________。請(qǐng)分別寫(xiě)出植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理_________。22、自然條件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一頭奶牛一年只能繁殖一頭牛犢。通過(guò)胚胎工程技術(shù)可以快速繁育優(yōu)良個(gè)體，其主要步驟如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）從供體奶牛獲得的精子，需對(duì)其進(jìn)行___________處理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母細(xì)胞，為使其超數(shù)排卵常使用____________激素處理；采集到卵母細(xì)胞后，在體外將其培養(yǎng)到___________期；使其成熟。

（3）步驟甲、乙分別指___________、___________。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛，步驟乙之前應(yīng)鑒定胚胎中與___________有關(guān)的基因。

（4）進(jìn)行步驟乙時(shí)，受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生___________，這為胚胎在代孕母牛體內(nèi)的存活提供了可能。評(píng)卷人得分四、判斷題(共5題，共35分)23、一般情況下一個(gè)卵細(xì)胞只能由一個(gè)精子發(fā)生融合形成受精卵()A.正確B.錯(cuò)誤24、精子入卵后形成雄原核；同時(shí)卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核()A.正確B.錯(cuò)誤25、受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段，在自然狀態(tài)下，哺乳動(dòng)物的受精在子宮內(nèi)完成。（選擇性必修3P56）()A.正確B.錯(cuò)誤26、下圖表示哺乳動(dòng)物發(fā)育過(guò)程的幾個(gè)階段；請(qǐng)判斷下列題的敘述是否正確？

（_____）（1）從A到C的過(guò)程中有機(jī)物的含量減少。

（_____）（2）A；B時(shí)期胚胎中的細(xì)胞都是全能細(xì)胞。

（_____）（3）胚胎移植必須使用處于B或C時(shí)期的胚胎。

（_____）（4）圖示過(guò)程細(xì)胞通過(guò)有絲分裂增殖，遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生改變。A.正確B.錯(cuò)誤27、在生態(tài)工程建設(shè)中，只能遵循“先污染、破壞、再治理”的發(fā)展思路______A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、非選擇題(共3題，共24分)28、科研人員將某種熒光蛋白(GFP)基因?qū)虢痿~(yú)的受精卵中來(lái)進(jìn)行有關(guān)研究；請(qǐng)回答：

（1）以上過(guò)程的GFP基因稱(chēng)為_(kāi)_____基因；該基因可由mRNA________形成。

（2）已知含GFP基因的DNA兩端分別有EcoRI與SmaI切割位點(diǎn)；切割下來(lái)的GFP基因含有____末端和______末端。

（3）質(zhì)粒用EcoRI；SmaI切割之后；需用___________酶將GFP基因與其連接形成重組質(zhì)粒。

（4）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)；可用GFP基因代替抗氨芐青霉素基因作為_(kāi)____________。

（5）GFP基因重組質(zhì)粒導(dǎo)入受精卵通常用__________法，受精卵經(jīng)過(guò)卵裂、?？芭?、______、原腸胚等階段發(fā)育為胚胎。紫外光下觀(guān)察，可以看到轉(zhuǎn)基因魚(yú)發(fā)出熒光的部位存在差異，其原因是_________________________。29、許多大腸桿菌的質(zhì)粒上含有l(wèi)acZ基因；其編碼的產(chǎn)物β－半乳糖苷酶在X－gal和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色?；蚬こ讨谐＠迷撛韽膶?dǎo)入質(zhì)粒的受體細(xì)胞中篩選出真正導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞，過(guò)程如下圖所示。請(qǐng)據(jù)圖回答：

(1)基因工程中；能使目的基因在受體細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是_______。

(2)限制酶EcoRⅠ的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)是－G↓AATTC－，SmaⅠ的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)是－CCC↓GGG－。圖中目的基因被切割下來(lái)和質(zhì)粒連接之前；需在目的基因的右側(cè)連接相應(yīng)的末端，連接的末端序列是__________，連接過(guò)程中需要的基本工具是__________。

(3)轉(zhuǎn)化過(guò)程中；大腸桿菌應(yīng)先用________處理，使其處于能吸收周?chē)鶧NA的狀態(tài)。

(4)菌落顏色為白色的是________；原因是_______________________。

(5)菌落③中的目的基因是否表達(dá)，可采用的檢測(cè)辦法是_________________。30、美國(guó)食品藥品管理局于2018年5月24日宣布；經(jīng)過(guò)基因改造的黃金大米可以安全食用。據(jù)此，飽受非議的黃金大米終于得到公眾的認(rèn)可。已知維生素A缺乏會(huì)導(dǎo)致夜盲癥，β一胡蘿卜素會(huì)在體內(nèi)轉(zhuǎn)變成維生素A。黃金大米是通過(guò)基因工程向水稻細(xì)胞轉(zhuǎn)入三種酶基因，其中的酶A基因和酶B基因可使水稻胚乳富含β－胡蘿卜素而呈現(xiàn)金黃色?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）已知酶A基因來(lái)自細(xì)菌；酶B基因來(lái)自玉米，酶D基因來(lái)自其他植物，與細(xì)菌基因相比，植物基因特有的結(jié)構(gòu)是___________；圖示三種基因的本質(zhì)區(qū)別是_____________________________。構(gòu)建上述基因組合，需用到的酶是________________________________________。

（2）提取農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒；將上述結(jié)構(gòu)導(dǎo)入Ti質(zhì)粒的相關(guān)片段中就可整合到水稻染色體DNA上，原因是_______________________________________________________________________。已知農(nóng)桿菌對(duì)多數(shù)單子葉植物沒(méi)有感染能力，那么如何使農(nóng)桿菌感染單子葉植物水稻呢?__________________________________________。

(3)將成功導(dǎo)入上述基因的水稻細(xì)胞置于培養(yǎng)基上培養(yǎng)，經(jīng)過(guò)______________________兩個(gè)過(guò)程可獲得幼苗，幼苗在長(zhǎng)大成熟后，所結(jié)種子的胚乳將富含__________________。該技術(shù)的成功，說(shuō)明了_________________________________________________________________________________。評(píng)卷人得分六、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共15分)31、下圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑；請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）圖中A基因是由從人細(xì)胞內(nèi)提取的mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，基因A中__________（填“含有”或“不含”）內(nèi)含子序列。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，a和b表示兩種引物，這兩種引物的堿基序列不能互補(bǔ)，原因是__________。

（2）接受目的基因的綿羊的受體細(xì)胞是__________，其性染色體組成為_(kāi)_________。為了從乳汁中獲取產(chǎn)物，應(yīng)在人血清白蛋白基因上游連接上__________等調(diào)控組件。

（3）將含人血清白蛋白基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物受體細(xì)胞通常采用的方法是__________，為了大量獲得基因產(chǎn)物，應(yīng)通過(guò)植物組織培養(yǎng)將受體細(xì)胞培養(yǎng)到__________階段。32、R一7是家蠶體內(nèi)的一種小分子非編碼RNA；可與某些mRNA尾端的一段非編碼序列（3′-UTR）結(jié)合，進(jìn)而影響基因的表達(dá)．為研究R一7是否影響家蠶基因B（調(diào)控家蠶眼睛發(fā)育）的表達(dá)，科研人員將基因B中對(duì)應(yīng)3′一UTR的DNA片段與熒光素酶基因（R一7不影響熒光素酶基因的表達(dá)）重組后導(dǎo)入家蠶胚胎細(xì)胞觀(guān)察其表達(dá)結(jié)果．請(qǐng)回答：

（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增基因B對(duì)應(yīng)3′一UTR的DNA片段，應(yīng)先依據(jù)該基因的一段核苷酸序列合成相應(yīng)的___________．

（2）利用______酶可將上述DNA片段插入熒光素酶基因表達(dá)載體（如圖1）上的位點(diǎn)______；構(gòu)建重組載體．

（3）將重組載體與R一7共同導(dǎo)入家蠶胚胎細(xì)胞，同時(shí)應(yīng)設(shè)置兩個(gè)對(duì)照組，即將熒光素酶基因表達(dá)載體、__________分別導(dǎo)入兩組家蠶胚胎細(xì)胞．

（4）科研人員分別從實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組細(xì)胞中提取________；經(jīng)處理檢測(cè)后獲得相對(duì)熒光值（在適宜條件下，熒光素酶可催化熒光素發(fā)生氧化反應(yīng)并發(fā)出熒光），其結(jié)果如圖2．

依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可推斷，R一7影響基因B的表達(dá)，即通過(guò)遵循__________原則，R一7與基因B所轉(zhuǎn)錄的mRNA的3’-uTR結(jié)合，進(jìn)而__________（填“促進(jìn)”或“抑制”）基因B的表達(dá)．33、2006年；Yamanaka將Oct﹣4；Sox2、c﹣Myc和K1f4四個(gè)轉(zhuǎn)錄因子導(dǎo)入小鼠胚胎成纖維細(xì)胞，獲得“誘導(dǎo)多能干細(xì)胞”（iPSc）。雖然iPSC具有非常高的應(yīng)用價(jià)值和前景，但應(yīng)用于臨床仍有問(wèn)題阻礙，例如其供體細(xì)胞需從患者皮膚穿刺獲得皮膚成纖維細(xì)胞，給患者帶來(lái)痛苦，同時(shí)誘導(dǎo)效率非常低，初始化效率甚至低于0.01%.因此近年來(lái)iPSc研究熱點(diǎn)為如何選用來(lái)源便捷、數(shù)目充足的成熟體細(xì)胞，以及如何提高基因的轉(zhuǎn)錄效率。

（1）iPSc能在適當(dāng)?shù)恼T導(dǎo)條件下分化為3個(gè)胚層的細(xì)胞，具有多能分化能力，類(lèi)似_____細(xì)胞的特性。

（2）有科學(xué)家利用成熟的T淋巴細(xì)胞作為供體細(xì)胞，成熟的T淋巴細(xì)胞在體外不能增殖分化，利用刀豆蛋白A（ConA）活化成熟T淋巴細(xì)胞，使之增殖分化為_(kāi)____細(xì)胞，在這里刀豆蛋白A（ConA）充當(dāng)_____。

（3）為提高誘導(dǎo)為iPSc的效率，首先應(yīng)提高運(yùn)載體的導(dǎo)入受體細(xì)胞的效率，科學(xué)家利用HIV﹣1病毒改造的（無(wú)致病性，高感染性）慢病毒作為載體，這類(lèi)慢病毒屬于_____（RNA/DNA）病毒。同時(shí)在慢病毒中構(gòu)建GFP基因（綠色熒光蛋白基因）作為_(kāi)____；以便直觀(guān)方便的檢驗(yàn)慢病毒是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。

（4）為驗(yàn)證慢病毒對(duì)T淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率，科學(xué)家用腺病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)T淋巴細(xì)胞作為對(duì)照，設(shè)置不同MOI（MOI＝轉(zhuǎn)染時(shí)的病毒顆粒數(shù)/細(xì)胞數(shù)）實(shí)驗(yàn)組得到下圖結(jié)果，由此可得出的結(jié)論為_(kāi)____________________________________________________________________________。

參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、B【分析】【分析】

本題主要考查限制酶和DNA連接酶的有關(guān)知識(shí)。限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；DNA經(jīng)不同限制酶切割后，只有在形成相同的黏性末端時(shí)，才可以通過(guò)DNA連接酶拼接。

【詳解】

在使用限制性核酸內(nèi)切酶時(shí)，是為了切割目的基因和運(yùn)載體，不需要解旋酶解開(kāi)雙螺旋，A錯(cuò)誤；限制性核酸內(nèi)切酶1和3切出的黏性末端相同，都是-CTAG，B正確；限制性核酸內(nèi)切酶1、2識(shí)別的序列都是由4個(gè)含GATC堿基的脫氧核苷酸組成，限制酶3、4識(shí)別的序列是由6個(gè)脫氧核苷酸組成，依次是GGATCC和CCGCGG，C錯(cuò)誤；限制性核酸內(nèi)切酶1和2切割形成的DNA片段的黏性末端不同，前者是-CTAG，后者是-CATG，不能通過(guò)T4DNA連接酶拼接；D錯(cuò)誤；因此，本題答案應(yīng)選B。

【點(diǎn)睛】

解答本題關(guān)鍵有明確4種限制酶所切割的粘性末端的堿基序列。限制酶1和2切割形成的DNA片段的黏性末端依次是GATC-和GTAC-，限制酶3和4切割形成的DNA片段的黏性末端依次是GATC-和CG-。2、D【分析】【分析】

基因工程是狹義的遺傳工程；基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因（即目的基因）在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定高效地表達(dá)。為了實(shí)現(xiàn)基因工程的目標(biāo)，通常要有多種工具酶；目的基因、載體和宿主細(xì)胞等基本要素，并按照一定的程序進(jìn)行操作?；蚬こ痰墓ぞ甙拗菩院怂醿?nèi)切酶、DNA連接酶和載體，載體是運(yùn)載著外源DNA進(jìn)入宿主細(xì)胞的“車(chē)子”，即運(yùn)載工具，除質(zhì)粒外，基因工程的載體還有λ噬菌體、植物病毒和動(dòng)物病毒。限制性核酸內(nèi)切酶是能夠識(shí)別和切割DNA分子內(nèi)一小段特殊核苷酸序列的酶，DNA連接酶的作用是將具有末端堿基互補(bǔ)的外源基因和載體DNA連接在一起，形成的DNA分子稱(chēng)為重組DNA分子。

【詳解】

A；限制酶只能識(shí)別和切割DNA分子內(nèi)一小段特殊核苷酸序列；具有專(zhuān)一性，不能識(shí)別并切割DNA任意序列，A錯(cuò)誤；

B；DNA連接酶與Taq酶（一種DNA聚合酶）的作用位點(diǎn)都是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵；B錯(cuò)誤；

C；沒(méi)有與目的基因重組的質(zhì)粒也可以進(jìn)入受體細(xì)胞；C錯(cuò)誤；

D；裸露的目的基因很容易丟失或遭受宿主細(xì)胞的降解；使用質(zhì)粒作為載體可以避免目的基因在受體內(nèi)被分解，D正確。

故選D。3、A【分析】【分析】

利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)發(fā)展起來(lái)的雜交瘤技術(shù)；是制造單克隆抗體的基本技術(shù)；雙特異性抗體的制備是在單克隆抗體制備技術(shù)的基礎(chǔ)上進(jìn)行的，選擇能產(chǎn)生雙抗的雜交瘤細(xì)胞需要利用抗原抗體結(jié)合技術(shù)。

【詳解】

A；漿細(xì)胞不能同時(shí)分泌兩種抗體；一種漿細(xì)胞只能分泌一種相應(yīng)的抗體，A錯(cuò)誤；

B；雙雜交瘤細(xì)胞能產(chǎn)生兩種特異性抗體；根據(jù)抗原與抗體可特異性結(jié)合，可篩選出能產(chǎn)生抗CD19和CD47的雙雜交瘤細(xì)胞，B正確；

C、CD19在B細(xì)胞表面普遍存在，CD47在正常組織細(xì)胞上普遍存在，使用BsAb治療，可識(shí)別同時(shí)具有CD19和CD47的淋巴瘤細(xì)胞，能特異性傷淋巴瘤細(xì)胞，而聯(lián)合使用CD19單抗和CD47單抗能殺傷淋巴瘤細(xì)胞的同時(shí)，也可殺傷B淋巴細(xì)胞和正常細(xì)胞，因此使用BsAb治療對(duì)正常細(xì)胞的損傷小于聯(lián)合使用CD19單抗和CD47單抗；C正確；

D、若BsAb的部分結(jié)構(gòu)發(fā)生改變；識(shí)別能力減弱，可能會(huì)出現(xiàn)治療效果降低的情況，D正確。

故選A。4、D【分析】【分析】

1；動(dòng)物核移植的概念：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為克隆動(dòng)物。

2；植物細(xì)胞具有全能性；因此植物復(fù)生可以通過(guò)植物組織培養(yǎng)來(lái)實(shí)現(xiàn)，而動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到限制，因此動(dòng)物復(fù)生不能通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)現(xiàn)。

【詳解】

A；由于動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到限制；目前動(dòng)物細(xì)胞還不能培養(yǎng)成動(dòng)物個(gè)體，A錯(cuò)誤；

B；將野驢的個(gè)別基因?qū)爰殷H的受精卵中；只能培育出轉(zhuǎn)基因驢，不能讓野驢“復(fù)生”，B錯(cuò)誤；

C；由于動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到限制；目前動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)還不能產(chǎn)生生物體，C錯(cuò)誤；

D；將野驢的體細(xì)胞核移植到雌性家驢的去核卵細(xì)胞中；可以克隆形成野驢，D正確。

故選D。5、D【分析】【分析】

分析題圖：小鼠的卵細(xì)胞體外培養(yǎng)到囊胚時(shí)期；取內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞培養(yǎng)成孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞，取大鼠的精子體外培養(yǎng)到囊胚時(shí)期，取內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞培養(yǎng)成孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞，兩種胚胎融合成異種雜合二倍體胚胎干細(xì)胞(AdESCs)。

【詳解】

A；根據(jù)單倍體囊胚1能發(fā)育成孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞；可知單倍體囊胚1最可能是由小鼠的卵子(卵細(xì)胞)經(jīng)體外誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得，A正確；

B；單倍體囊胚2來(lái)自大鼠體細(xì)胞；其形成過(guò)程中發(fā)生了細(xì)胞的脫分化、分裂和分化，B正確；

C；單倍體囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中的細(xì)胞為胚胎干細(xì)胞；具有較強(qiáng)的分裂、分化能力，C正確；

D；結(jié)合分析可知；該AdESCs是“雜合二倍體胚胎干細(xì)胞”，故體內(nèi)有2個(gè)染色體組，但大鼠-小鼠雜種細(xì)胞，是由體細(xì)胞融合產(chǎn)生，因此雜種細(xì)胞中通常含有4個(gè)染色體組，兩者染色體組數(shù)不同，D錯(cuò)誤。

故選D。6、C【分析】【分析】

受精--受精是精子與卵子結(jié)合形成合子（即受精卵）的過(guò)程．它包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段。

1；受精前的準(zhǔn)備階段。

（1）準(zhǔn)備階段1-精子獲能．剛剛排出的精子；不能立即與卵子受精，必須在雌性動(dòng)物生殖道發(fā)生相應(yīng)的生理變化后，才能獲得受精能力；

（2）準(zhǔn)備階段2-卵子的準(zhǔn)備；動(dòng)物排出的可能是初級(jí)卵母細(xì)胞也可能是次級(jí)卵母細(xì)胞，都要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟，達(dá)到減數(shù)第二次分裂中期時(shí)，才具備與精子受精的能力。

2；受精階段（主要包括：精子穿越放射冠和透明帶；進(jìn)入卵黃膜，原核形成和配子結(jié)合），具體過(guò)程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細(xì)胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開(kāi)始。

【詳解】

A；受精過(guò)程中防止多精入卵的兩道屏障分別是透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)；A錯(cuò)誤；

B；精子入卵后會(huì)形成雄原核；雄原核一般略大于雌原核，B錯(cuò)誤；

C；動(dòng)物排出的卵子還不成熟；可能是初級(jí)卵母細(xì)胞也可能是次級(jí)卵母細(xì)胞，都要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟，達(dá)到減數(shù)第二次分裂中期時(shí)，才具備與精子受精的能力，C正確；

D；精子在體外也能進(jìn)行獲能處理；D錯(cuò)誤。

故選C。

【點(diǎn)睛】7、D【分析】【分析】

題圖分析：圖示為培育“試管山羊”的基本過(guò)程圖解；其中包括卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)；精子的采集和獲能、體外受精過(guò)程、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植過(guò)程。

【詳解】

A；過(guò)程①采集的卵母細(xì)胞需在體外培養(yǎng)至MⅡ期；A錯(cuò)誤；

B；過(guò)程②采集的精子需放入一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中；用化學(xué)藥物誘導(dǎo)精子獲能，B錯(cuò)誤；

C；過(guò)程④⑤分別是早期胚胎的培養(yǎng)和移植；C錯(cuò)誤；

D；為了進(jìn)一步擴(kuò)大繁殖規(guī)模；可通過(guò)胚胎分割技術(shù)獲得同卵多胎，D正確。

故選D。

【點(diǎn)睛】二、多選題(共7題，共14分)8、B:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)的相關(guān)知識(shí)：

1；概念：PCR全稱(chēng)為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

2；原理：DNA復(fù)制。

3；前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列；以便合成引物。

4；過(guò)程：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)。

【詳解】

A；設(shè)計(jì)擴(kuò)增目的基因的引物時(shí)要考慮表達(dá)載體相關(guān)序列；從而保證目的基因能與表達(dá)載體相連接及正常表達(dá)，A錯(cuò)誤；

B；用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)不必知道其全部序列；只需知道目的基因的一段核苷酸序列即可，以便合成引物，B正確；

C；PCR技術(shù)需要特殊的耐高溫的DNA聚合酶；從細(xì)胞內(nèi)提取的DNA聚合酶不耐高溫，C錯(cuò)誤；

D；根據(jù)目的基因的編碼產(chǎn)物要選擇特定合適的受體細(xì)胞；從而保證目的基因能表達(dá)出所需產(chǎn)物，D正確。

故選BD。9、A:C:D【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)表面動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性。

2；體外受精包括精子的采集和獲能、卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、體外受精；該技術(shù)產(chǎn)生的動(dòng)物稱(chēng)為試管動(dòng)物。

3；胚胎分割的特點(diǎn)：來(lái)自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)；胚胎分割可以看做動(dòng)物無(wú)性繁殖或克隆的方法之一。

4；表現(xiàn)型=基因型+外界環(huán)境。

【詳解】

a是核移植技術(shù)，①反映了動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性，A錯(cuò)誤；體外受精技術(shù)得到的動(dòng)物叫做試管動(dòng)物，試管動(dòng)物技術(shù)為良種家畜快速大量繁殖提供了可能，B正確；胚胎分割技術(shù)所得個(gè)體的基因型完全相同，但表現(xiàn)型不一定完全相同，因?yàn)楸憩F(xiàn)型還受環(huán)境的影響，C錯(cuò)誤；a、b、c三項(xiàng)技術(shù)獲得的胚胎，其將要植入的受體必須是健康的具有正常孕育能力的本地物種，提供胚胎的供體往往是珍稀的、存量少的雌性動(dòng)物，D錯(cuò)誤。綜上所述，A、C、D錯(cuò)誤，B正確。10、A:B:C【分析】【分析】

編碼新冠病毒的S蛋白不具有感染性；但可以引起機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫，腺病毒不會(huì)使人致病，可將克隆出來(lái)的編碼新冠病毒S蛋白（介導(dǎo)新冠病毒感染細(xì)胞的成分）基因裝入載體腺病毒，注入人體，進(jìn)入人體細(xì)胞，表達(dá)出S蛋白，刺激人體產(chǎn)生針對(duì)新冠病毒的免疫應(yīng)答。

【詳解】

A；基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心；一個(gè)完整的基因表達(dá)載體至少包括目的基因（S蛋白基因）、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等，A正確；

B；由于病毒需要寄生在細(xì)胞內(nèi)；且S蛋白是在細(xì)胞內(nèi)合成的，所以重組腺病毒疫苗能使人體產(chǎn)生體液免疫和細(xì)胞免疫，B正確；

C；重組腺病毒疫苗引發(fā)的體液免疫中有吞噬細(xì)胞（處理抗原）、T細(xì)胞（釋放淋巴因子）的參與；C正確；

D；重組腺病毒疫苗引起免疫反應(yīng)后相應(yīng)淋巴細(xì)胞增多；細(xì)胞周期將變短，D錯(cuò)誤。

故選ABC。11、B:C【分析】【分析】

生物體基因的堿基序列保持不變；但基因表達(dá)和表型發(fā)生可遺傳變化的現(xiàn)象，叫作表觀(guān)遺傳；除了DNA甲基化，構(gòu)成染色體的組蛋白發(fā)生甲基化；乙?；刃揎椧矔?huì)影響基因的表達(dá)。

【詳解】

A；過(guò)程①中小分子化合物誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞脫分化為iPS細(xì)胞；并未發(fā)生突變，A錯(cuò)誤；

B；MⅡ期卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有促使細(xì)胞核全能性表現(xiàn)的物質(zhì)；故要選用MⅡ期卵母細(xì)胞去除細(xì)胞核，B正確；

C；過(guò)程③為動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程；可使用電融合法誘導(dǎo)兩細(xì)胞融合，C正確；

D；由圖可知；重構(gòu)胚在加入中Kdm4d的mRNA和TSA后，發(fā)育成克隆鼠，而Kdm4d的mRNA表達(dá)產(chǎn)物為組蛋白去甲基化酶，可以使組蛋白去甲基化，TSA為組蛋白脫乙酰酶抑制劑，抑制組蛋白脫乙酰酶的作用，保持組蛋白乙?；?，即組蛋白乙?；腿ゼ谆欣谥貥?gòu)胚后續(xù)的胚胎發(fā)育過(guò)程，D錯(cuò)誤。

故選BC。12、A:C:D【分析】【分析】

1；胚胎分割是指采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等；經(jīng)移植獲得同卵雙胚或多胚的技術(shù)。進(jìn)行胚胎分割時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)要注意將內(nèi)細(xì)胞均等分割，否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。

2、提高細(xì)胞克隆形成率的措施：①選擇適宜的培養(yǎng)基；②添加血清；③以滋養(yǎng)細(xì)胞支持生長(zhǎng)；④激素（胰島素等）刺激；⑤使用CO2培養(yǎng)箱調(diào)節(jié)pH和選擇細(xì)胞生長(zhǎng)支持物。

【詳解】

A；步驟①將150CAG重復(fù)序列插入豬的亨廷頓蛋白內(nèi)源性基因中；導(dǎo)致該基因結(jié)構(gòu)改變，屬于基因突變，A正確；

B；步驟②中的重組細(xì)胞進(jìn)行胚激活處理后需在體外培養(yǎng)至桑椹胚或囊胚階段再將早期胚胎移至受體的子宮中；B錯(cuò)誤；

C；根據(jù)分析可知；胚胎分割可在短時(shí)間內(nèi)增加胚胎數(shù)量，滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的需求量，C正確；

D；胰島素可促進(jìn)葡萄糖進(jìn)入組織細(xì)胞；為組織細(xì)胞提供能源物質(zhì)，因此為提高細(xì)胞克隆形成率，可在培養(yǎng)皿中加入胰島素刺激，D正確。

故選ACD。13、A:C:D【分析】【分析】

生態(tài)農(nóng)業(yè)中能夠調(diào)整能量流動(dòng)的方向；使能量更多的流向?qū)θ祟?lèi)有益的方面，提高能量的利用率，但是不能改變營(yíng)養(yǎng)級(jí)之間的能量傳遞效率。

【詳解】

A；建立沼氣池可以充分利用植物的秸稈、殘枝敗葉以及動(dòng)物的糞便；這樣實(shí)現(xiàn)了物質(zhì)的循環(huán)再生，能量的多級(jí)利用，同時(shí)也可以避免因焚燒秸稈產(chǎn)生的環(huán)境污染，A正確；

B；通過(guò)合理設(shè)計(jì)食物鏈；可使能量持續(xù)高效地流向?qū)θ俗钣幸娴姆较颍岣吡四芰康睦寐?，但是不能提高能量的傳遞效率，B錯(cuò)誤；

C；生態(tài)工程的建立需要結(jié)合當(dāng)?shù)氐膶?shí)際條件；因地制宜地進(jìn)行。整體考慮，我國(guó)西北地區(qū)缺水、不適宜建立題圖中所示的生態(tài)工程模式，C正確；

D；題圖中農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中的消費(fèi)者是雞、蠶、魚(yú)、蝦；D正確。

故選ACD。

【點(diǎn)睛】

本題考查了生態(tài)工程中“糧桑漁畜”農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的識(shí)圖能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，準(zhǔn)確判斷問(wèn)題的能力，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查。14、A:C:D【分析】【分析】

治理前的水體不能實(shí)現(xiàn)自我凈化說(shuō)明該生態(tài)系統(tǒng)抵抗力穩(wěn)定性弱；治理后生態(tài)恢復(fù)，生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性越來(lái)越高，生態(tài)系統(tǒng)的各項(xiàng)功能恢復(fù)，其中的物質(zhì)實(shí)現(xiàn)了良性的循環(huán)，食物網(wǎng)成功構(gòu)建使能量流動(dòng)順利進(jìn)行，各種物產(chǎn)相繼豐富，如其中的植食性魚(yú)類(lèi)的產(chǎn)出不僅為人們提供了食物來(lái)源，而且還可以創(chuàng)造經(jīng)濟(jì)效益，生態(tài)環(huán)境變得越來(lái)越好，經(jīng)過(guò)治理后實(shí)現(xiàn)了經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益的共同提高。

【詳解】

A；經(jīng)治理后水體實(shí)現(xiàn)了生態(tài)恢復(fù)；水中溶解氧含量升高，A正確；

B；生態(tài)系統(tǒng)中物質(zhì)可以良性循環(huán)；而能量需要不斷輸入，B錯(cuò)誤；

C；隨著生態(tài)系統(tǒng)的恢復(fù)；生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性逐漸提高，C正確；

D；經(jīng)過(guò)治理后的水體；環(huán)境優(yōu)美，物產(chǎn)豐富，其中的植食性魚(yú)類(lèi)還可食用，實(shí)現(xiàn)了經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益的共同提高，D正確。

故選ACD。三、填空題(共8題，共16分)15、略

【分析】（1）在基因工程的操作中的“分子手術(shù)刀”即切割DNA的是限制核酸內(nèi)切酶簡(jiǎn)稱(chēng)限制酶；

（2）在基因工程的操作中的“分子縫合針”是DNA連接酶；

（3）基因工程中最常用的運(yùn)載體是質(zhì)粒；

（4）人的基因在牛體內(nèi)能表達(dá)；說(shuō)明人和牛共用一套遺傳密碼。

【考點(diǎn)定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA連接酶質(zhì)粒共用一套遺傳密碼16、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎；或者通過(guò)體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)，其中提供胚胎的個(gè)體稱(chēng)為“供體”，接受胚胎的個(gè)體稱(chēng)為“受體”。(供體為優(yōu)良品種，作為受體的雌性動(dòng)物應(yīng)為常見(jiàn)或存量大的品種)，如轉(zhuǎn)基因、核移植，或體外受精等任何一項(xiàng)胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎，都必須經(jīng)過(guò)胚胎移植技術(shù)才能獲得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意義：大大縮短了供體本身的繁殖周期；充分發(fā)揮雌性?xún)?yōu)良個(gè)體的繁殖能力。

【詳解】

（1）體外受精前要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理；使其具有受精能力。

（2）要使動(dòng)物超數(shù)排卵；利用促性腺激素；需將卵子培養(yǎng)到MII中期后進(jìn)行體外受精。

（3）步驟甲是人工受精；將受精卵移入受體母牛，進(jìn)行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前應(yīng)鑒定胚胎中與有關(guān)的優(yōu)良基因。

（4）胚胎移植實(shí)現(xiàn)的前提是受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。

【點(diǎn)睛】

胚胎移植的實(shí)質(zhì)：早期胚胎在生理狀態(tài)相同的條件下空間位置的轉(zhuǎn)移?！窘馕觥烤荧@能促性腺M(fèi)Ⅱ中期人工受精胚胎移植優(yōu)良性狀受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】取代修補(bǔ)18、略

【分析】【分析】

1；神經(jīng)元由細(xì)胞體和突起兩部分組成；突起又分為樹(shù)突和軸突，樹(shù)突短而多，軸突長(zhǎng)而少。神經(jīng)元的軸突末梢經(jīng)過(guò)多次分支，最后每個(gè)小枝末端膨大，呈杯狀或球狀，叫做突觸小體。

2；目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

3；人工種子就是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料；經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝得到的種子，在適宜條件下同樣能夠萌發(fā)長(zhǎng)成幼苗。

【詳解】

（1）神經(jīng)元由細(xì)胞體和突起兩部分組成；突起又分為樹(shù)突和軸突，樹(shù)突短而多，軸突長(zhǎng)而少；軸突末端的多次分支后，每個(gè)小枝末端膨大的部分稱(chēng)為突觸小體。

（2）抗體可以與病原體結(jié)合；從而抑制病原體的繁殖或?qū)θ梭w細(xì)胞的黏附。

（3）檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA可采用分子雜交技術(shù)。

（4）人工種子就是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體；不定芽、頂芽、腋芽為材料；經(jīng)過(guò)人工包膜包裝得到的種子，可以在適宜條件下同樣能夠萌發(fā)長(zhǎng)成幼苗．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)就是克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，或者是打破了生殖隔離。

（5）胰島素能促進(jìn)組織細(xì)胞加速攝?。焕煤蛢?chǔ)存葡萄糖；從而使血糖水平降低。

【點(diǎn)睛】

本題考查教材基礎(chǔ)知識(shí)，旨在考查考生的理解、記憶能力，要求考生熟記關(guān)鍵語(yǔ)句，并能運(yùn)用專(zhuān)業(yè)術(shù)語(yǔ)準(zhǔn)確作答?！窘馕觥客挥|小體對(duì)人體細(xì)胞的黏附放射性同位素）標(biāo)記的目的基因胚狀體、不定芽、腋芽、頂芽攝取、利用和儲(chǔ)存19、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復(fù)的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據(jù)曲線(xiàn)圖可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對(duì)照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率。根據(jù)柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細(xì)胞，使機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。

（2）免疫系統(tǒng)對(duì)被新冠病毒感染后肺細(xì)胞強(qiáng)烈攻擊引發(fā)肺炎；此時(shí)可通過(guò)適度使用免疫抑制劑對(duì)病人進(jìn)行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對(duì)照組，故應(yīng)選取甲的B細(xì)胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復(fù)后一段時(shí)間；若再次受到該病毒的攻擊，機(jī)體內(nèi)相應(yīng)的記憶細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識(shí)記病毒的結(jié)構(gòu)，明確病毒沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)；識(shí)記單克隆抗體的制備過(guò)程，掌握其優(yōu)點(diǎn)及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質(zhì)）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶20、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：①表示染色體復(fù)制；②是減數(shù)分裂，③是精細(xì)胞變形為精子過(guò)程，④是受精作用；

2；哺乳動(dòng)物精子和卵子發(fā)生的不同點(diǎn)：（1）精子的減數(shù)兩次分裂是連續(xù)的；場(chǎng)所唯一（MⅠ和MⅡ的場(chǎng)所都是睪丸）；而卵子的兩次分裂是不連續(xù)的，場(chǎng)所不唯一，（MⅠ場(chǎng)所在卵巢，MⅡ場(chǎng)所在輸卵管中）；（2）精子和卵子發(fā)生的時(shí)間不同：精子的發(fā)生是從初情期一直到生殖機(jī)能衰退；多數(shù)哺乳動(dòng)物卵子的形成和在卵巢內(nèi)的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動(dòng)物排卵前后完成的，MⅡ是在受精過(guò)程中完成的。

【詳解】

（1）精子變形③過(guò)程中精子頭部的頂體是由高爾基體發(fā)育來(lái)的；④過(guò)程是受精過(guò)程，在輸卵管內(nèi)完成。

（2）在④過(guò)程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)和透明帶，透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)是阻止多精入卵的兩道防線(xiàn)。

（3）雄性動(dòng)物精子產(chǎn)生的時(shí)期是初情期；雌性動(dòng)物卵泡細(xì)胞的形成是在胚胎期性別分化以后完成的，這是精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別。

（4）初級(jí)卵母細(xì)胞進(jìn)行減數(shù)第一次分裂是在排卵前后時(shí)期完成的；減數(shù)第二次分裂是在受精作用過(guò)程中完成的。

【點(diǎn)睛】

本題考查卵細(xì)胞的形成過(guò)程和受精作用等相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生識(shí)記相關(guān)細(xì)節(jié)和解決問(wèn)題的能力?！窘馕觥扛郀柣w輸卵管透明帶反應(yīng)卵細(xì)胞膜反應(yīng)初情期胚胎期性別分化以后排卵前后受精作用21、略

【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)，指從植物體分離出符合需要的組織；器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過(guò)無(wú)菌操作，在無(wú)菌條件下接種在含有各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。

【詳解】

1；基因工程又稱(chēng)基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)；是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來(lái)源的基因按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品的遺傳技術(shù)。

2；胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎；或者通過(guò)體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。

3；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖，其原理是細(xì)胞增殖。

4；植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)；指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過(guò)無(wú)菌操作，在無(wú)菌條件下接種在含有各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程概念、胚胎移植、動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)等相關(guān)知識(shí)，意在考察考生對(duì)知識(shí)點(diǎn)的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)②.又稱(chēng)受精卵移植，是指將雌性動(dòng)物體內(nèi)的的早期胚胎，或者通過(guò)體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀況相同的其他雌性動(dòng)物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)③.植物細(xì)胞全能性、細(xì)胞增殖22、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎；或者通過(guò)體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)，其中提供胚胎的個(gè)體稱(chēng)為“供體”，接受胚胎的個(gè)體稱(chēng)為“受體”。(供體為優(yōu)良品種，作為受體的雌性動(dòng)物應(yīng)為常見(jiàn)或存量大的品種)，如轉(zhuǎn)基因、核移植，或體外受精等任何一項(xiàng)胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎，都必須經(jīng)過(guò)胚胎移植技術(shù)才能獲得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意義：大大縮短了供體本身的繁殖周期；充分發(fā)揮雌性?xún)?yōu)良個(gè)體的繁殖能力。

【詳解】

（1）體外受精前要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理；使其具有受精能力。

（2）要使動(dòng)物超數(shù)排卵；利用促性腺激素；需將卵子培養(yǎng)到MII中期后進(jìn)行體外受精。

（3）步驟甲是人工受精；將受精卵移入受體母牛，進(jìn)行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前應(yīng)鑒定胚胎中與有關(guān)的優(yōu)良基因。

（4）胚胎移植實(shí)現(xiàn)的前提是受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。

【點(diǎn)睛】

胚胎移植的實(shí)質(zhì)：早期胚胎在生理狀態(tài)相同的條件下空間位置的轉(zhuǎn)移?！窘馕觥烤荧@能促性腺M(fèi)Ⅱ中期人工受精胚胎移植優(yōu)良性狀受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。四、判斷題(共5題，共35分)23、A【分析】【詳解】

由于存在防止多精入卵的兩道屏障，故一個(gè)卵細(xì)胞一般只能同一個(gè)精子結(jié)合，形成受精卵，這句話(huà)是正確的。24、A【分析】【詳解】

受精過(guò)程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細(xì)胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開(kāi)始。精子入卵后形成雄原核，同時(shí)被激活的卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核，雄、雌原核充分發(fā)育后，相向移動(dòng)，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此說(shuō)法正確。

故正確。25、B【分析】【詳解】

受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段；在自然狀態(tài)下，哺乳動(dòng)物的受精在輸卵管內(nèi)完成。

故錯(cuò)誤。26、B【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原腸胚。圖B中1是滋養(yǎng)層，2是內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，3是透明帶，4是囊胚腔；圖C中5是外胚層，6是滋養(yǎng)層，7是原腸腔，8是內(nèi)胚層。

【詳解】

（1）從A到C的過(guò)程中細(xì)胞均需要消耗能量；故胚胎中有機(jī)物的含量均減少，（1）正確。

（2）桑椹胚之前所有細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能；屬全能細(xì)胞，故A時(shí)期胚胎中的細(xì)胞都是全能細(xì)胞，囊胚期時(shí)細(xì)胞出現(xiàn)分化，滋養(yǎng)層細(xì)胞不是全能細(xì)胞，（2）錯(cuò)誤。

（3）胚胎移植必須使用處于桑椹胚或囊胚時(shí)期的胚胎；處于A(yíng)或B時(shí)期的胚胎，（3）錯(cuò)誤。

（4）圖示過(guò)程細(xì)胞通過(guò)有絲分裂增殖；有絲分裂過(guò)程中可能發(fā)生突變，遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生改變，（4）正確。

故分別為√、×、×、√。27、B【分析】【詳解】

生態(tài)系統(tǒng)的恢復(fù)力穩(wěn)定性是有一定限度的，導(dǎo)致了生態(tài)工程的局限性，使生態(tài)工程并不能解決所有的污染、破壞問(wèn)題，因此不能走“先污染、破壞，后治理”的老路，故錯(cuò)誤。五、非選擇題(共3題，共24分)28、略

【分析】【分析】

目的基因主要指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因；也可以是一些具有調(diào)控作用的因子；獲得目的基因的方法：①?gòu)幕蛭膸?kù)中獲?、诶肞CR技術(shù)擴(kuò)增③人工合成（化學(xué)合成）。限制性核酸內(nèi)切酶主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的，其能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)，因此具有專(zhuān)一性，結(jié)果是經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端；DNA連接酶連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，DNA連接酶將目的基因和質(zhì)粒重組。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的方法是顯微注射技術(shù)，具體操作程序：目的基因表達(dá)載體提純→取卵（受精卵）→顯微注射→注射了目的基因的受精卵移植到雌性動(dòng)物的子宮或輸卵管內(nèi)發(fā)育→新性狀動(dòng)物。

【詳解】

（1）科研人員將綠色熒光蛋白（GTP）基因?qū)虢痿~(yú)的受精卵中進(jìn)行有關(guān)研究；則GTP基因?yàn)槟康幕?，可以通過(guò)mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得。

（2）EcoRⅠ酶切割GFP基因后露出的是黏性末端；SmaⅠ限制酶切割GFP基因后露出的是平末端。

（3）用DNA連接酶可以把目的基因（GFP基因）和運(yùn)載體（質(zhì)粒）連接起來(lái)。

（4）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)；常常采用抗生素抗性基因作標(biāo)記基因，因此可以GFP基因代替抗氨芐青霉素基因作為標(biāo)記基因。

（5）把目的基因（或重組質(zhì)粒）導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞的受精卵常常采用顯微注射法；胚胎發(fā)育過(guò)程包括受精卵→卵裂→桑椹胚→囊胚→原腸胚等階段發(fā)育成胚胎；紫外光下；金魚(yú)體內(nèi)發(fā)光部位有差異，說(shuō)明該基因表達(dá)的部位不同，即基因是選擇性表達(dá)的。

【點(diǎn)睛】

解答本題的關(guān)鍵是掌握基因工程的操作步驟，識(shí)記基因工程的操作工具及作用，能夠結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確答題?！窘馕觥磕康姆崔D(zhuǎn)錄黏性平DNA連接標(biāo)記基因顯微注射囊胚基因的選擇性表達(dá)29、略

【分析】本題主要考查基因工程的操作步驟。難點(diǎn)在于限制酶的選擇及目的基因的處理。要求學(xué)生能熟知基因工程的操作步驟；會(huì)分析限制酶作用后的粘性末端。

（1）啟動(dòng)子是一段有特殊序列的DNA片段；位于目的基因的首端，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，在啟動(dòng)子存在時(shí)才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需要的蛋白質(zhì)。因此在基因工程中，能使目的基因在受體細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是啟動(dòng)子。

（2）由圖可知；目的基因的左側(cè)有限制酶EcoRI的識(shí)別序列，右側(cè)是限制酶SmaI的識(shí)別序列，而質(zhì)粒上只有限制酶EcoRI的識(shí)別序列，所以需要用限制酶EcoRI來(lái)切割質(zhì)粒，用限制酶EcoRI和SmaI來(lái)切割含有目的基因的外源DNA分子，這樣就使目的基因右側(cè)無(wú)法與質(zhì)粒連接，所以目的基因被切割下來(lái)和質(zhì)粒連接之前，需在目的基因的右側(cè)連接限制酶EcoRI切割形成的末端，即-TTAA，連接過(guò)程中需要DNA連接酶。

（3）將目的基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞之前，應(yīng)先用Ca2+處理大腸桿菌；使其處于能吸收周?chē)鶧NA的感受態(tài)。

（4）用限制酶EcoRI切割質(zhì)粒時(shí)；會(huì)破壞質(zhì)粒上的lacZ'基因，但切割后的質(zhì)粒自身環(huán)化后，lacZ'基因又被修復(fù)，能表達(dá)產(chǎn)生B-半乳糖苷酶，在X-gal和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，所以菌落①②呈現(xiàn)藍(lán)色；菌落③導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒，其lacZ'基因被破壞，不能表達(dá)產(chǎn)生B-半乳糖苷酶，在X-gal和IPTG存在下，菌落顏色為白色。

（5）檢測(cè)目的基因是否表達(dá)產(chǎn)生蛋白質(zhì)，可采用抗原一抗體雜交法?！窘馕觥繂?dòng)子－TTAADNA連接酶Ca2＋菌落③lacZ標(biāo)記基因區(qū)插入外源基因后被破壞，不能表達(dá)出β－半乳糖苷酶，故菌落為白色抗原—抗體雜交30、略

【分析】【分析】

本題以圖文結(jié)合為情境；考查學(xué)生對(duì)基因的結(jié)構(gòu)；基因工程的基本操作程序、植物組織培養(yǎng)技術(shù)的過(guò)程等相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力。

【詳解】

(1)細(xì)菌為原核生物；其基因的編碼區(qū)是連續(xù)的，無(wú)內(nèi)含子；植物細(xì)胞為真核細(xì)胞，其基因的編碼區(qū)是間隔的；不連續(xù)的，有內(nèi)含子。可見(jiàn)，與細(xì)菌基因相比，植物基因特有的結(jié)構(gòu)是內(nèi)含子。基因是有遺傳效應(yīng)的DNA片段，圖示三種基因的本質(zhì)區(qū)別是堿基排列順序不同。構(gòu)建上述基因組合，先要使用限制酶分別切割含有上述三種基因的DNA片段，再用DNA連接酶將獲得的上述三種基因進(jìn)行連接，即需用到的酶是限制酶(或限制性核酸內(nèi)切酶)和DNA連接酶。

(2)農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上的T-DNA；可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體DNA上，據(jù)此，提取農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒，將上述結(jié)構(gòu)導(dǎo)入Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以使上述結(jié)構(gòu)整合到水稻染色體DNA上。農(nóng)桿菌能在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物，而對(duì)大多數(shù)單子葉植物沒(méi)有感染能力；當(dāng)植物體受到損傷時(shí)，傷口處的細(xì)胞會(huì)分泌大量的酚類(lèi)化合物，吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞?？梢?jiàn)，在人工受傷的水稻細(xì)胞上涂抹酚類(lèi)化合物，就能使農(nóng)桿菌感染單子葉植物水稻。

(3)成功導(dǎo)入上述基因的水稻細(xì)胞；需借助植物組織培養(yǎng)技術(shù)，將其置于培養(yǎng)基上培養(yǎng)，經(jīng)過(guò)脫分化；再分化兩個(gè)過(guò)程可獲得幼苗；該幼苗在長(zhǎng)大成熟后，由于酶A基因和酶B基因的成功表達(dá)，導(dǎo)致所結(jié)種子的胚乳富含β一胡蘿卜素。該技術(shù)的成功，說(shuō)明了DNA可以從原核生物轉(zhuǎn)移到真核生