2025年滬科版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案

…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年滬科版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、下列關于生物技術的安全性和倫理問題的分析，不合理的觀點是A.試管嬰兒技術可廣泛用于設計嬰兒性別B.我國的政策是禁止進行生殖性克隆人C.禁止運用基因重組技術將致病菌等改造成生物武器D.轉基因生物合成的某些蛋白質可能成為某些人的過敏源2、下列有關“DNA粗提取與鑒定”實驗的敘述，正確的是（）A.隨NaCl溶液濃度增大，DNA的溶解度逐漸增大B.新鮮的豬血中不含DNA，新鮮的雞血中含DNAC.在酒精溶液中，某些蛋白質的溶解度大于DNA的溶解度D.在50～60℃水浴中，DNA遇二苯胺試劑后即呈藍色3、腫瘤壞死因子（TNF）在體內和體外均能殺死某些腫瘤細胞或抑制腫瘤細胞的增殖，科研人員欲利用乳腺生物反應器大量生產TNF，用于臨床上疾病的治療。已知HindⅢ、BamHI、BglⅡ和PstI為限制性內切核酸酶，識別的序列均不相同。下列關于基因工程中重組質粒構建的說法，正確的是（）

A.可選用PstI，BglⅡ和HindⅢ、BglⅡ兩種組合切割質粒和目的基因B.可用DNA連接酶或DNA聚合酶連接TNF基因和切割開的質粒C.啟動子指的就是起始密碼子，可驅動TNF基因的轉錄過程D.四環(huán)素抗性基因屬于標記基因，便于鑒別受體細胞中是否含有目的基因4、下列關于“DNA片段的擴增及電泳鑒定”的實驗，說法錯誤的是（）A.PCR利用了DNA的熱變性原理，通過調節(jié)溫度來控制B.PCR的產物一般要通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定C.凝膠中DNA分子的遷移速率只與DNA分子的大小有關D.為避免外源DNA等因素的污染，PCR實驗中使用的工具也需要滅菌處理5、下列有關“DNA的粗提取與鑒定”實驗的敘述，正確的是（）A.提取細胞中的DNA必須用蒸餾水漲破細胞B.常溫下菜花勻漿中有些酶類會影響DNA的提取C.將絲狀物加入二苯胺試劑，沸水浴冷卻后呈藍色D.DNA溶于95%的冷酒精，所以可用95%的冷酒精進一步提純評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)6、2016年初；首位由“三合一”胚胎人工授精技術培育的嬰兒出生，其培有過程如下圖所示。下列相關說法正確的是（）

A.“三親嬰兒”孕育過程中使用了動物細胞培養(yǎng)、核移植等技術B.融合激活后的卵母細胞要培養(yǎng)到MII中期才能完成受精作用C.卵母細胞A的捐獻者攜帶的血友病基因能遺傳給“三親嬰兒”D.“三親嬰兒”培育技術可以用來避免細胞質遺傳病的遺傳7、近年來；全人源化單克隆抗體技術發(fā)展迅速，利用轉基因鼠技術進行全人源化單克隆抗體的制備流程如圖所示，下列說法正確的是（）

A.該技術能降低單克隆抗體藥物的免疫排斥反應B.過程①②采用核移植技術，體現了動物細胞核的全能性C.過程⑧要經過選擇培養(yǎng)基篩選、克隆化培養(yǎng)和抗體檢測等過程D.體外培養(yǎng)B細胞也可以大量獲得針對該抗原的單克隆抗體8、為探究提高“日照藍莓”品質和產量的新途徑，某生物興趣小組以“日照藍莓”的主要品種——兔眼藍莓為實驗材料進行脫毒處理，其技術路線為“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→出芽→生根→移栽”。下列有關敘述正確的是（）A.取材時可選用兔眼藍莓的芽尖等分生組織作為外植體B.用70%酒精和5%左右次氯酸鈉對外植體消毒時，要控制好時間以避免造成傷害C.對分化培養(yǎng)基滅菌前需添加生長素類、細胞分裂素類和赤霉素類等生長調節(jié)劑D.脫毒后的兔眼藍莓果實體積更大，產量更高，后代個體中更不易被病毒感染9、在進行擬矮牽牛和矮牽牛的種間原生質體融合時，利用親本材料對藥物抗性的差異來選擇雜種細胞的過程如圖所示。下列說法錯誤的是（）

A.只有雜種細胞能在含放線菌素D的MS培養(yǎng)基上正常生長B.同一株植物的不同細胞經離體培養(yǎng)獲得的再生苗基因型可能不相同C.②中的融合過程一定要在無菌水中進行，防止雜菌污染D.通過③得到的愈傷組織等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子10、下列有關動物細胞工程操作的敘述，錯誤的是（）A.動物細胞培養(yǎng)是動物細胞工程的基礎，在進行細胞培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中除了加入細胞所需的各種營養(yǎng)物質外，還需要加入瓊脂B.動物細胞融合與植物體細胞雜交都能形成雜種個體C.干細胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，包括胚胎干細胞和成體干細胞等，有著自我更新能力及分化潛能D.動物體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植11、基因工程在農牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術生產人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（）

A.若某基因是從人的細胞內提取mRNA經逆轉錄形成的，則該基因中不含啟動子序列B.擴增目的基因時，利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3'－端進行子鏈合成C.導入人血清白蛋白基因的綿羊受體細胞是乳腺細胞D.利用農桿菌轉化法可將含有目的基因的重組質粒整合到植物受體細胞的染色體DNA上12、利用PCR技術擴增目的基因的過程中兩種引物分別為A和B，其原理與細胞內DNA復制類似。下列敘述正確的是（）A.從理論上推測，第二輪循環(huán)產物中含有引物A的DNA片段占3/4B.在第二輪循環(huán)產物中開始出現兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段C.引物之間或引物自身發(fā)生堿基互補配對則不能擴增目的基因D.耐熱的DNA聚合酶總將游離的脫氧核苷酸連接到3’端13、下列關于限制酶和DNA連接酶的理解，錯誤的是（）A.限制酶能在特定部位的兩個核苷酸之間切斷磷酸二酯鍵B.DNA連接酶可以恢復DNA分子中的氫鍵，將兩條DNA片段的黏性末端之間的縫隙連接起來C.在基因工程操作中，可以用DNA聚合酶代替DNA連接酶D.限制酶廣泛存在于動植物體內，微生物內很少分布14、圖甲為培育轉基因生物時選用的載體，圖乙是含有目的基因的一段DNA序列，圖中標注了相關限制酶的酶切位點。下列敘述錯誤的是（）

A.若通過PCR技術提取該目的基因，應該選用引物a和引物cB.構建表達載體時應選用BamHⅠ和HindⅡ這兩種限制酶C.圖乙中一個DNA分子在PCR儀中經過四輪復制得到所需目的基因的分子數為8個D.只利用含四環(huán)素的培養(yǎng)基就可以直接篩選出成功導入表達載體的受體細胞評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)15、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？____________________________16、原核基因采取______獲得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。17、來源：主要是從______中分離純化出來的。18、通過____________的方式，來控制NaCL溶液的濃度，使DNA在鹽溶液中溶解或析出。19、科學家采用定點誘變的方法構建T4溶菌酶的新蛋白質，發(fā)現其中一種新蛋白質的第9和第164位氨基酸殘基被轉換為半胱氨酸殘基，并形成一個二硫鍵。這種新蛋白質的熱穩(wěn)定性會有什么變化？這項技術的要點是什么？_________評卷人得分四、實驗題(共4題，共40分)20、單克隆抗體特異性強；靈敏度高，用于診療疾病具有準確；高效等特點。下圖表示單克隆抗體制備過程。

回答下列問題：

（1）若細胞B是小鼠的骨髓瘤細胞；則A是_________________細胞，誘導d過程常用的因素是_________________（答出一個即可）。

（2）用于篩選細胞D的培養(yǎng)基必需滿足兩個條件：一是_________________細胞都會死亡；二是保證_________________細胞能生長。

（3）使用合成培養(yǎng)基體外培養(yǎng)雜交瘤細胞時；通常需要加入_________________等一些天然成分，并置于含有_________混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（4）制備抗新冠病毒單克隆抗體檢測試劑，可用_________________（選填數字標號：①新冠病毒滅活疫苗、②新冠病毒RNA疫苗、③新冠病毒滅活疫苗或RNA疫苗）免疫小鼠，以獲得圖中的A細胞。21、如圖為釀制葡萄酒的兩個簡易裝置；請分析回答：

（1）制作果酒與果醋的菌種在結構上最主要的區(qū)別在于前者有_____，后者應將溫度控制在_____℃

（2）甲裝置中，A液體是_____，NaHCO3溶液的作用是_____；若用乙裝置，在發(fā)酵過程中，必須進行的操作是每隔12小時左右將瓶蓋_____一次。

（3）將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時，要留有大約1/3的空間，這是因為___________

（4）果酒制作是否成功，需發(fā)酵后取樣鑒定，可用_____試劑檢驗。

（5）醋酸菌可以利用果酒進行發(fā)酵，請寫出相應反應式：_________________22、《傷寒論》中記載的芍藥甘草湯是由芍藥和甘草兩味藥物制成，具有調和肝脾，緩急止痛的作用，芍藥和甘草的主要活性成分分別為芍藥苷和甘草酸?？蒲袌F隊通過制備抗芍藥苷的單克隆抗體，將其純化后結合在固相載體上，讓芍藥甘草湯流過，去除湯中芍藥苷，用于探究芍藥苷與芍藥甘草湯對小鼠鎮(zhèn)痛作用的相關性?；卮鹣铝袉栴}。

(1)制備單克隆抗體依賴的生物技術有______________、_________________等。將芍藥苷與蛋白質結合作為抗原，定期間隔免疫小鼠，取免疫后的小鼠脾臟，剪碎并用_____________酶處理得到小鼠脾臟細胞。

(2)圖中誘導其與骨髓瘤細胞融合的試劑X是____________，經選擇培養(yǎng)篩選出的細胞Y具有________________________特點。用多孔培養(yǎng)板培養(yǎng)細胞Y并收集上清液，利用___________________技術對上清液進行抗體陽性檢測。

(3)研究人員將生理狀態(tài)相同的小鼠隨機分為對照組、造模組進行如下處理，造模組前期已完成冰醋酸致痛處理（冰醋酸能引起深部的、大面積且較持久的疼痛刺激，此時小鼠會出現扭體反應）。請完善實驗方案。。組別前期處理后期處理對照組腹腔注射生理鹽水I造模組腹腔注射冰醋酸模型組：口服生理鹽水陽性藥組：口服芍藥甘草湯陽性藥組：口服芍藥甘草湯實驗組：Ⅱ實驗組：Ⅱ

①表中I的處理是_____________、Ⅱ的處理_______________。

②結果與分析：

若前期處理后，造模組小鼠扭體次數顯著__________對照組，表明致痛處理成功。后期處理結束后測定各組小鼠扭體次數，若結果為______________________，則表明芍藥苷是芍藥甘草湯中發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的重要成分之一。23、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導致的遺傳病?？蒲腥藛T對此病的治療進行相關研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因由于堿基對___________造成突變，轉錄出的mRNA長度不變但提前出現終止密碼子，最終導致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結構差異顯著而失去活性，積累過多的黏多糖無法及時清除，造成人體多系統(tǒng)功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結構、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對。在上述這一類突變基因的翻譯過程中，加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________；從而誘導通讀獲得有功能的全長蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進行了相關研究，實驗結果如圖。

注：“-”代表未加入。

據圖分析，實驗組將___________基因導入受體細胞，并采用___________技術檢測導入基因的表達情況。據結果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進行治療，檢測肝臟細胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實驗結果為_____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。評卷人得分五、綜合題(共2題，共18分)24、青蒿素是有效的抗瘧疾藥物，但野生黃花蒿中青蒿素的產量較低。為緩解青蒿素供應不足的狀況，科學家將tms基因和tmr基因導入黃花蒿的愈傷組織；獲得了黃花蒿的冠癭組織，改造過程用到的部分結構如圖所示。

（1）科學家將目的基因導入黃花蒿愈傷組織細胞的常用方法是_____________________。

（2）圖中結構P、T是基因成功轉錄的保證，其中結構P位于基因的首端，其作用是__________________________。為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，并將含有目的基因的細胞篩選出來，圖中還缺少的結構是_________________________。構建重組DNA的目的是_________________________________________________。

（3）要檢測目的基因是否插入到冠癭組織細胞的染色體DNA上，可采用_______________技術。該技術的原理是____________________________。

（4）與愈傷組織相比，冠癭組織的生長速度更快，原因可能是________________________。25、四尾柵藻是一種淡水藻類；繁殖快；適應性強，可作為制備生物柴油的重要原料之一。為提高四尾柵藻油脂含量，研究人員將從含油量高的紫蘇中獲得的二酰甘油?；D移酶基因（DGAT1）與pBI121質粒構建表達載體，經轉化成功獲得高產油脂四尾柵藻，研究過程如下圖，其中DGAT1-F（5'-GCATCTAGAATGGCGATCTTGGACTC-3'）和DGATI-R（5'-CGGATCCCTACCTTGCACTAGCTTTTC-3'）是以DGATI基因為依據設計的一對引物，1acZ基因編碼產物在X-gal和IPTG存在下，可以產生藍色沉淀，使菌落呈現藍色，否則菌落呈現白色。請回答下列問題。

(1)過程②應選用的限制酶是__________和__________。

(2)過程③經轉化的大腸桿菌接種到培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，為篩選獲得目標菌株，培養(yǎng)基應加入的成分有__________、__________；IPTG。

(3)為檢測表達載體轉化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達，研究人員進行了如下實驗，請完成下表。實驗步驟簡要操作過程初篩培養(yǎng)經轉化后的四尾柵藻接種于含①__________的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng)，一段時間后觀察其生長情況擴大培養(yǎng)在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數個單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng)，編號備用驗證收集四尾柵藻藻體，提取基因組DNA，以DGAT1-F和DGAT1-R為引物，采用②__________技術驗證是否含有目的基因，未轉化的四尾柵藻作對照油脂含量測定利用索氏抽提法分別測定③__________的油脂含量結果處理統(tǒng)計并比較驗證結果及藻體中油脂的含量參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、A【分析】【分析】

本題考查了生物技術的安全性和倫理問題方面的觀點；屬于對識記；理解層次的考查。

【詳解】

與試管嬰兒相比，設計試管嬰兒在操作技術上的特點是胚胎在移植前，需進行遺傳學診斷。有些人認為那些配型不合適的胚胎被丟棄或殺死，及濫用設計試管嬰兒技術如設計嬰兒性別等引起性別比例失調，違反了倫理道德，故本題選A。2、C【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理：1；DNA的溶解性：DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但細胞中的某些蛋白質溶于酒精；DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性；

2；DNA的鑒定：在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會被染成藍色。

【詳解】

A；DNA在氯化鈉溶液中的溶解度；是隨著氯化鈉的濃度變化而改變的。當氯化鈉的物質的量濃度為0.14mol/L時，DNA的溶解度最低，高于或低于該濃度，DNA的溶解度都會升高，A錯誤；

B；哺乳動物成熟的紅細胞不含細胞核和細胞器；沒有DNA，但新鮮的豬血中含有血細胞和未成熟的紅細胞，所以也含有DNA，B錯誤；

C；在酒精溶液中；某些蛋白質的溶解度大于DNA的溶解度，所以可以用酒精溶液對提取的DNA進行提純，C正確；

D；二苯胺鑒定DNA分子時需要沸水浴加熱；待試管冷卻后才能觀察到現象，D錯誤。

故選C。

【點睛】3、D【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲??；利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

A；據圖可知；限制酶PstI切割質粒時，會將質粒切成兩段，且會破壞標記基因，切掉啟動子，因此不能選用PstI．BglⅡ這一組合，A錯誤；

B；不能使用DNA聚合酶連接目的基因和切割開的質粒；應使用DNA連接酶，B錯誤；

C；起始密碼子位于mRNA上；啟動子是一段具有特殊序列結構的DNA片段，是RNA聚合酶識別和結合的位點，可驅動TNF基因的轉錄過程，C錯誤；

D；四環(huán)素抗性基因屬于標記基因；便于鑒別受體細胞中是否含有目的基因，D正確。

故選D。4、C【分析】【分析】

DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但細胞中的某些蛋白質溶于酒精；DNA對酶；高溫和洗滌劑的耐受性。

【詳解】

A；PCR技術利用了DNA的熱變性原理；通過調節(jié)該變性-復性-延伸步驟中不同溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結合，A正確；

B；對PCR擴增后的產物；一般需要通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定，凝膠中的DNA分子需要染色，以便使電泳結果更直觀，B正確；

C；在凝膠中DNA分子的遷移速率與DNA分子的大小和構象、凝膠的濃度有關；C錯誤；

D；為避免外源DNA等因素的污染；PCR實驗中使用的微量離心管、槍頭、蒸餾水等在使用前都必須進行高壓滅菌處理，D正確。

故選C。5、B【分析】【分析】

1；DNA的溶解性（1）DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低）；利用這一特點，選擇適當的鹽濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質沉淀，或者相反，以達到分離目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些蛋白質則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質進一步的分離。

2；DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性蛋白酶能水解蛋白質；但是對DNA沒有影響。大多數蛋白質不能忍受60-80℃的高溫，而DNA在80℃以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解細胞膜，但對DNA沒有影響。

3；DNA的鑒定在沸水浴條件下；DNA遇二苯胺會被染成藍色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；提取動物細胞中的DNA用蒸餾水漲破細胞；提取植物細胞的DNA用洗滌劑和食鹽，A錯誤；

B；常溫下菜花勻漿中有些酶類可破壞DNA而影響DNA的提??；B正確；

C；將絲狀物DNA溶解于2mol/L的NaCl溶液；加入二苯胺試劑，沸水浴冷卻后呈藍色，C錯誤；

D；DNA不溶于酒精；而蛋白質等雜質能溶于酒精，D錯誤。

故選B。

【點睛】二、多選題(共9題，共18分)6、A:B:D【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經移植后產生后代的技術。設計試管嬰兒技術是通過體外受精獲得許多胚胎，然后從中選擇符合要求的胚胎，再經移植后產生后代的技術。

2；分析題圖：圖示表示三親嬰兒的培育過程；由圖可知，三親嬰兒的培育采用了核移植技術、體外受精技術、早期胚胎培養(yǎng)技術和胚胎移植技術等。

【詳解】

A；由圖可知；“三親嬰兒”孕育過程中使用了動物細胞培養(yǎng)、體外受精、核移植等技術，A正確；

B；融合激活后的卵母細胞要培養(yǎng)到MⅡ中期才具備受精能力；從而完成受精作用，B正確；

C；卵母細胞A的捐獻者提供的是細胞質；而其攜帶的血友病基因位于細胞核內的染色體上，所以其攜帶的血友病基因不能遺傳給“三親嬰兒”，C錯誤；

D；“三親嬰兒”培育技術可以通過核移植來避免細胞質遺傳病的遺傳；D正確。

故選ABD。7、A:C【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原；從該動物的脾臟中獲取B淋巴細胞，將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞，最后獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；利用轉基因鼠技術進行全人源化單克隆抗體；能降低單克隆抗體藥物的免疫排斥反應，A正確；

B；過程①②利用的是轉基因技術；B錯誤；

C；融合后的細胞需要用選擇培養(yǎng)基篩選獲得雜交瘤細胞；還要經過克隆化培養(yǎng)、（專一性）抗體檢測等，C正確；

D；B細胞在體外培養(yǎng)條件下不能無限增殖；體外培養(yǎng)B細胞不能獲得大量的單克隆抗體，D錯誤。

故選AC。8、A:B【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)技術：

1；過程：離體的植物組織；器官或細胞(外植體)→愈傷組織→胚狀體→植株(新植體)。

2；原理：植物細胞的全能性。

3；條件：①細胞離體和適宜的外界條件(如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等)；②一定的營養(yǎng)(無機、有機成分)和植物激素(生長素和細胞分裂素)。

【詳解】

A；取材時可選用兔眼藍莓的芽尖等分生組織作為外植體；這是因為芽尖分裂旺盛，且很少帶有病毒，甚至不含毒，A正確；

B；用70%酒精和5%左右次氯酸鈉對外植體消毒時；要控制好時間以避免造成傷害，否則外植體會受到損失，導致實驗失敗，B正確；

C；生長調節(jié)劑應該在培養(yǎng)基滅菌后添加；否則高溫可能使其失去效果，C錯誤；

D；脫毒后的兔眼藍莓果實體積更大；產量更高，后代個體中含病毒較少，但并不是不易被病毒感染，D錯誤。

故選AB。9、C:D【分析】【分析】

人工種子是以植物組織培養(yǎng)的胚狀體；不定芽、頂芽和腋芽為原料,用人工薄膜包裝而成的種子。

【詳解】

A；由圖可知；只有雜種細胞能在含放線菌素D的MS培養(yǎng)基上正常生長得到雜種植物，A正確；

B；同一株植物的不同細胞的基因型可能不同；比如：配子的基因型與體細胞的基因型不同，離體培養(yǎng)獲得的再生苗基因型可能不相同，B正確；

C；②是原生質體的融合過程；原生質體放入無菌水中可能會吸水漲破，C錯誤；

D；通過③得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子；D錯誤。

故選CD。10、A:B【分析】【分析】

動物細胞工程技術包括動物細胞培養(yǎng)；動物細胞融合、核移植技術等技術；其中動物細胞培養(yǎng)是動物細胞工程的基礎。在進行細胞培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中除了加入細胞所需的各種營養(yǎng)物質外，還需要加入血清等天然成分。干細胞包括胚胎干細胞和成體干細胞等，存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，有著自我更新能力及分化潛能。

【詳解】

A；在進行動物細胞培養(yǎng)時；培養(yǎng)基中除了加入細胞所需的各種營養(yǎng)物質外，還需要加入血清等天然成分，A錯誤；

B；動物細胞融合不能形成雜種個體；形成的是雜種細胞，而植物體細胞雜交能形成雜種個體，兩者都能形成雜種細胞，B錯誤；

C；干細胞包括胚胎干細胞和成體干細胞等；存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，有著自我更新能力及分化潛能，C正確；

D；動物體細胞分化程度較高；全能性較低，因此動物體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植，D正確。

故選AB。11、C:D【分析】【分析】

將目的基因導入植物細胞常用農桿菌轉化法；農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可整合到受體細胞的染色體DNA上。基因表達載體常包括目的基因；啟動子、終止子、標記基因。標記基因是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。

【詳解】

A；啟動子是位于DNA上RNA聚合酶的結合部位；mRNA是由基因啟動子后面的序列編碼而來的，若某基因是從人的細胞內提取mRNA經逆轉錄形成的，則該基因中不含啟動子序列，A正確；

B、引物的延伸方向為3'端，擴增目的基因時，利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3'－端進行子鏈合成；B正確；

C；導入人血清白蛋白基因的綿羊受體細胞不是乳腺細胞；而是受精卵或早期胚胎細胞，C錯誤；

D；農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞；并且整合到受體細胞染色體的DNA上，根據農桿菌的這一特點，將目的基因插入到Ti質粒的T-DNA上，通過農桿菌的轉化作用，就可以把目的基因的T-DNA整合到植物細胞中染色體的DNA上，D錯誤。

故選CD。12、A:C:D【分析】【分析】

PCR全稱為聚合酶鏈式反應；是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術，所利用的原理為DNA分子的復制，因此PCR技術一般用于基因擴增。

【詳解】

A；基因擴增中引物通常是一小段DNA或RNA片段；每一次循環(huán)后DNA分子數量增加一倍，從理論上推測，第二輪后只有一個DNA片段只有引物B，含引物A的比例為3/4，A正確；

B；引物A和引物B均不在該片段的端點；因此第一輪循環(huán)后，得到的兩DNA片段中兩條脫氧核苷酸鏈都不等長，通過繪圖可推知，第二輪中也不會出現等長的引物，所以在第二輪循環(huán)產物中不會出現兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段，B錯誤；

C；引物A和引物B必須與目的基因配對；如果引物之間或引物自身發(fā)生堿基互補配對，則不能擴增目的基因，C正確；

D；由于復制過程子鏈的合成方向是從子鏈的5’端向3’端延伸；所以耐熱的DNA聚合酶總將游離的脫氧核苷酸連接到3’端，D正確。

故選ACD。13、B:C:D【分析】【分析】

限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開。

DNA連接酶是鏈接兩個DNA的片段；形成磷酸二酯鍵。

【詳解】

A；限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列；能在特定部位的兩個核苷酸之間切斷磷酸二酯鍵，A正確；

B；DNA連接酶可以恢復DNA分子中的磷酸二酯鍵；將兩條DNA片段的黏性末端之間的縫隙連接起來，B錯誤；

C；DNA聚合酶將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端；形成磷酸二酯鍵，DNA連接酶是鏈接兩個DNA的片段，形成磷酸二酯鍵。在基因工程操作中，不可以用DNA聚合酶代替DNA連接酶，C錯誤；

D；限制酶主要來源于微生物；D錯誤。

故選BCD。14、B:D【分析】【分析】

分析題圖：構建表達載體時；不能選用限制酶BamHⅠ，否則會導致兩種抗性基因都被破壞，因此應該選擇Bc1I和HindⅢ這兩種限制酶，根據引物的延伸方向，所用的引物為圖乙中引物a和引物c。

【詳解】

A；PCR技術要求兩種引物分別和目的基因的兩條單鏈結合；根據引物的延伸方向，所用的引物為圖乙中引物a和引物c，A正確；

B；根據圖甲可知；BamHⅠ會導致兩種抗性基因都被破壞，同時為防止目的基因自身環(huán)化，因此只能選BclI和HindⅢ兩種限制酶切割，B錯誤；

C；圖乙中一個DNA分子在PCR儀中經過四輪復制可得到16個DNA片段；其中所需目的基因的分子數為8個，C正確；

D；由于選擇BclI和HindⅢ這兩種限制酶；破壞了氨芐青霉素抗性基因，但沒有破壞四環(huán)素抗性基因，因此應該先用含四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選出含有基因表達載體和普通質粒的大腸桿菌，再用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基篩選含重組質粒的大腸桿菌，培養(yǎng)基加氨芐青霉素含普通質粒的大腸桿菌能生存，而含重組質粒的不能生存，從而篩選出成功導入表達載體的受體細胞，D錯誤。

故選BD。三、填空題(共5題，共10分)15、略

【解析】避免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】直接分離人工合成反轉錄法化學合成法17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】原核生物18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】滴加蒸餾水逐漸稀釋2mol/L濃度的NaCL溶液19、略

【分析】【詳解】

蛋白質形成二硫鍵，使蛋白質的結構更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會提高。這項技術屬于蛋白質工程技術，其步驟為從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質?！窘馕觥繒岣逿4溶菌酶的耐熱性。這項技術屬于蛋白質工程技術，該技術的要點是從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質。四、實驗題(共4題，共40分)20、略

【分析】【分析】

1；動物細胞培養(yǎng)注意事項：

（1）原理：細胞增殖。

（2）培養(yǎng)基性質：液體培養(yǎng)基。動物細胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與體內細胞基本相同；如需要有葡萄糖；氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素、動物血清或血漿，還有適量的抗生素以保證無菌環(huán)境。

（3）需要使用動物血清。

（4）適宜的溫度：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。

（5）無菌條件下進行。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產物積累對細胞自身造成危害。

（6）氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

2；單克隆抗體的制備：

（1）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫原理：B淋巴細胞能產生特異性抗體。②細胞融合原理：利用病毒對宿主細胞的穿透性使B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合。③動物細胞培養(yǎng)技術：對雜交瘤細胞進行體內；體外培養(yǎng)。

（2）單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應；之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

（3）制備單克隆抗體過程中的幾種細胞：①免疫B細胞（漿細胞）：能產生單一抗體；但不能無限增殖。②骨髓瘤細胞：能無限增殖，但不能產生抗體。③雜交瘤細胞：既能產生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖。

（4）動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性；細胞的增殖。動物細胞融合誘導手段有電刺激、聚乙二醇、滅活的病毒等；結果產生雜交細胞。

【詳解】

（1）若細胞B是小鼠的骨髓瘤細胞；則此過程可以為單克隆抗體的制備過程。故A是已經免疫的B淋巴細胞或能產生特定抗體的B細胞。動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性；細胞的增殖。動物細胞融合誘導手段（誘導d過程）有電刺激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結果產生雜交細胞。

（2）一般來說；誘導A細胞和B細胞融合，形成C細胞后，必須利用選擇培養(yǎng)基來篩選出目的細胞。那么滿足的條件必須是：未融合的（親本）細胞和融合的同種（核的）細胞都會死亡，而雜交（瘤）細胞（或雜種細胞）能夠在選擇培養(yǎng)基上生長。

（3）動物細胞培養(yǎng)注意事項：一是液體培養(yǎng)基。動物細胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與體內細胞基本相同，如需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素、動物血清或血漿，還有適量的抗生素以保證無菌環(huán)境。二是氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。

（4）選用免疫原性好的細菌；病毒、立克次體、螺旋體等；經人工培養(yǎng)，再用物理或化學方法將其殺滅制成疫苗，即為滅活疫苗。而新冠病毒為RNA病毒，選用RNA疫苗都可以。故選③新冠病毒滅活疫苗或RNA疫苗。

【點睛】

本題考查動物細胞培養(yǎng)、單克隆抗體制備的相關知識，意在考查考生理解所學知識要點，把握知識間內在聯系的能力；能運用所學知識與觀點，對某些現實生活中的生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結論?！窘馕觥拷涍^（抗原、病原體）免疫的（小鼠）B（淋巴）細胞（或漿細胞，或已免疫的B細胞，或能產生特定抗體的B細胞）聚乙二醇（PEG）、滅活的（仙臺）病毒、電激（或電融合）未融合的（親本）細胞和融合的同種（核的）細胞雜交（瘤）細胞（或雜種細胞））血清（或血漿）95%空氣和5%CO2③21、略

【分析】【分析】

分析題圖：圖示為釀制葡萄酒的兩個簡易裝置，甲裝置中，A為葡萄汁，能為酵母菌提供碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子；NaHCO3溶液能夠吸收酵母菌酒精發(fā)酵產生的CO2；乙裝置需要定期擰松瓶蓋排氣。

（1）

制作果酒的菌種是酵母菌；屬于真核生物；制作果醋的菌種是醋酸菌，屬于原核生物，它們在結構上最主要的區(qū)別在于前者有以核膜為界限的細胞核，即有核膜包被的細胞核。醋酸菌發(fā)酵的適宜溫度為30℃～35℃，因此制作果酒后制果醋，應將溫度控制在30℃～35℃。

（2）

甲裝置中，A液體是葡萄汁，能為酵母菌提供碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子；NaHCO3溶液的作用是吸收酵母菌酒精發(fā)酵產生的CO2；若用乙裝置；在發(fā)酵過程中，必須進行的操作是每隔12小時左右將瓶蓋擰松一次，排除二氧化碳。

（3）

酵母菌屬于兼性厭氧菌；其在有氧條件下可以大量繁殖，故將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時，要留有大約1/3的空間，這樣既為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣，又可防止發(fā)酵旺盛時汁液溢出。

（4）

酒精可用重鉻酸鉀來檢驗；在酸性條件下，該試劑與酒精反應呈現灰綠色。

（5）

醋酸菌可以利用果酒進行發(fā)酵，相應反應式為：

【點睛】

本題考查果酒和果醋的制作，要求考生識記參與果酒和果醋制作的微生物及其代謝類型，掌握果酒和果醋制作的原理及條件，能結合所學的知識準確答題，難度適中?！窘馕觥浚?）核膜包被的細胞核30-35

（2）葡萄汁吸收酵母菌酒精發(fā)酵產生的CO2擰松。

（3）為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣；防止發(fā)酵旺盛時汁液溢出。

（4）重鉻酸鉀。

（5）22、略

【分析】【分析】

1；單克隆抗體：由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產生出的化學性質單一、特異性強的抗體。具有特異性強、靈敏度高；并可能大量制備的特點。

2；單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內；使其發(fā)生免疫，小鼠體內產生具有免疫能力的B淋巴細胞，利用動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細胞，即AB型細胞(A為B淋巴細胞，B為骨髓瘤細胞)，不需要A、B、AA、BB型細胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原抗體雜交法篩選，獲得產生特定抗體的雜交瘤細胞。

【詳解】

（1）單克隆抗體制備的基本步驟：對小鼠進行免疫→提取B淋巴細胞→將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合→通過篩選；克隆化培養(yǎng)和擴大化培養(yǎng)→最終注入小鼠體內→從腹腔腹水中提取單克隆抗體；此過程依賴的生物技術有動物細胞培養(yǎng)和動物細胞融合等。剪碎后的組織用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使其分散成單個細胞。

（2）誘導B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合的試劑是聚乙二醇（PEG）；因此試劑X是聚乙二醇（PEG）。用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選，只有雜交瘤細胞才能成活，因此經選擇培養(yǎng)篩選出的細胞Y具有既能迅速大量增殖，又能產生抗體的特點。上清液中含有雜交瘤細胞，由于雜交瘤細胞能分泌抗體，故利用抗原-抗體雜交技術對上清液進行抗體陽性檢測，以便篩選出能產生專一抗體的雜交瘤細胞，選擇陽性孔中的細胞（即能產生芍藥苷抗體的細胞）繼續(xù)植入小鼠腹腔內進行體內培養(yǎng)，從小鼠腹水中可提取到抗芍藥苷的單克隆抗體，也可以將陽性孔中的細胞在體外進行擴大培養(yǎng)。

（3）①正常對照組：前期處理為腹腔注射生理鹽水(空白對照)；后期處理為a腹腔注射生理鹽水(空白對照)；造模組：模型組為口服生理鹽水(產生模型小鼠)，陽性藥組為口服芍藥甘草湯(藥物具有顯著的鎮(zhèn)痛作用)，實驗組為c口服去除芍藥苷的芍藥甘草湯(檢驗去除芍藥苷的芍藥甘草湯是否具有鎮(zhèn)痛作用)。

②因為造模組注射了冰醋酸，結合題意可知，冰醋酸能引起小鼠的扭體反應，因此前期處理后，造模組小鼠扭體次數顯著高于正常對照組，表明致痛處理成功。如果芍藥苷是芍藥甘草湯中發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的重要成分之一，則陽性藥組小鼠的扭體次數最低，實驗組小鼠雖然口服的是去除了芍藥苷的芍藥甘草湯，但芍藥甘草湯中除了芍藥苷還有其他成分能夠起到鎮(zhèn)痛作用，則實驗組小鼠扭體次數低于模型組，因此若結果為實驗組小鼠扭體次數高于陽性藥組低于模型組，則表明芍藥苷是芍藥甘草湯中發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的重要成分之一?！窘馕觥?1)動物細胞培養(yǎng)動物細胞融合胰蛋白（膠原蛋白）

(2)聚乙二醇（PEG）既能大量增殖，又能產生抗體抗原—抗體雜交

(3)腹腔注射生理鹽水口服去除芍藥苷的芍藥甘草湯高于實驗組小鼠扭體次數高于陽性藥組低于模型組23、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對的替換；增添和缺失；而引起的基因結構的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質的過程，該過程還需要tRNA來運轉氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個氨基酸的三個相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過程。

基因工程中檢測目的基因在受體細胞內是否成功表達可以用抗原-抗體雜交技術。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因突變后，轉錄出的mRNA長度不變，說明其沒有發(fā)生堿基對的增添和缺失，因為這兩者改變會導致轉錄出的mRNA長度改變，因此推測其基因突變是由于堿基對替換。由于終止密碼子提前出現，導致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結構改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結構；功能相同，據此推測該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對使翻譯過程繼續(xù)。

（3）本實驗目的是比較攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實驗組細胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對實驗結果產生干擾），同時保證在不同的實驗組細胞中可以轉錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實驗組中受體細胞中應該含有導入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個實驗組細胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對其進行檢測，即進行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細胞中表達的全長IDUA蛋白量比其他實驗組都多，說明其能有效恢復細胞中全長IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實驗可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導核糖體對突變IDUA基因轉錄出的mRNA進行通讀，進而產生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA基因敲除小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細胞內都沒有相應mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無法發(fā)揮作用，