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PAGEPAGE8動(dòng)物細(xì)胞培育和核移植技術(shù)1.關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培育的敘述,錯(cuò)誤的是()A.用于培育的細(xì)胞大都取自胚胎、幼齡動(dòng)物的器官或組織B.將所取的組織需用胰蛋白酶等處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞C.在培育瓶中要定期用胰蛋白酶處理使細(xì)胞從瓶壁上脫離,制成細(xì)胞懸浮液D.動(dòng)物細(xì)胞培育只能傳50代左右,所培育的細(xì)胞都會(huì)蒼老死亡答案D解析動(dòng)物細(xì)胞培育傳至10~50代左右時(shí),絕大部分細(xì)胞分裂停止,進(jìn)而出現(xiàn)蒼老甚至死亡的現(xiàn)象,但少數(shù)細(xì)胞的遺傳物質(zhì)會(huì)發(fā)生變更,獲得不死性,就能在相宜培育條件下無(wú)限制地傳代下去。2.名為“我的皮膚”的生物活性繃帶自從在英國(guó)誕生后,給皮膚燒傷病人帶來(lái)了福音。該活性繃帶的原理是先采集一些細(xì)胞樣本,再讓其在特別的膜片上增殖。5~7天后,將膜片敷在患者的傷口上,膜片會(huì)將細(xì)胞漸漸“釋放”到傷口,并促進(jìn)新生皮膚層生長(zhǎng),達(dá)到加速傷口愈合的目的。下列有關(guān)敘述中,錯(cuò)誤的是()A.“我的皮膚”的獲得技術(shù)屬于動(dòng)物細(xì)胞工程B.人的皮膚燒傷后會(huì)因人體其次道防線的破壞而導(dǎo)致免疫力下降C.種植在膜片上的細(xì)胞樣本最好選自患者本人D.膜片能否把細(xì)胞順當(dāng)“釋放”到傷口,加速患者自身皮膚愈合與細(xì)胞膜上的糖蛋白有關(guān)答案B解析依據(jù)題意可知,“我的皮膚”的獲得技術(shù)屬于動(dòng)物細(xì)胞工程中的動(dòng)物細(xì)胞培育;人的皮膚燒傷后會(huì)因人體第一道防線的破壞而導(dǎo)致免疫力下降;種植在膜片上的細(xì)胞樣本最好選自患者本人,以避開(kāi)發(fā)生免疫排斥反應(yīng);細(xì)胞膜上的糖蛋白具有識(shí)別、免疫、愛(ài)護(hù)等作用,與細(xì)胞免疫排斥反應(yīng)有關(guān),因此膜片能否把細(xì)胞順當(dāng)“釋放”到傷口,加速患者自身皮膚愈合與細(xì)胞膜上的糖蛋白有關(guān)。3.下列關(guān)于哺乳動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物的敘述,正確的是()A.體細(xì)胞核移植過(guò)程中通常用卵細(xì)胞作為受體細(xì)胞B.目前科學(xué)家可以用類似植物組織培育的方法獲得完整的動(dòng)物個(gè)體C.利用動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)可有選擇地繁殖某一性別的家畜D.用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代50代以內(nèi)的細(xì)胞答案C解析體細(xì)胞核移植過(guò)程中常用處于MⅡ中期的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞;動(dòng)物體細(xì)胞的全能性受到限制,不能經(jīng)過(guò)培育獲得完整的動(dòng)物個(gè)體;用于核移植的供體細(xì)胞一般是10代以內(nèi)的細(xì)胞;克隆動(dòng)物細(xì)胞核內(nèi)的遺傳物質(zhì)來(lái)自供體細(xì)胞,其性別與供應(yīng)細(xì)胞核的動(dòng)物一樣,因此可有選擇地克隆某一性別的家畜。4.下圖是某克隆羊的培育過(guò)程模式圖,則與獲得該克隆羊接近的生殖方式和其發(fā)育成熟時(shí)所分泌的主要性激素分別是()A.無(wú)性生殖、雄性激素 B.無(wú)性生殖、雌性激素C.有性生殖、雄性激素 D.有性生殖、雌性激素答案A解析克隆羊的產(chǎn)生屬于無(wú)性生殖;由于此過(guò)程是雄性羊供核,故得到的克隆羊?yàn)樾坌裕置诘闹饕约に厥切坌约に亍?.在將動(dòng)物組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞時(shí),可以運(yùn)用胰蛋白酶。由此推斷以下推想不合理的是()A.動(dòng)物細(xì)胞之間可能依靠蛋白質(zhì)相互聯(lián)系B.處理時(shí)肯定要留意處理時(shí)間、加酶量C.胰蛋白酶肯定不會(huì)對(duì)動(dòng)物細(xì)胞造成損傷D.動(dòng)物細(xì)胞培育液的pH應(yīng)與胰蛋白酶作用的相宜pH基本一樣答案C解析胰蛋白酶可使蛋白質(zhì)分解,又可破壞動(dòng)物細(xì)胞之間的聯(lián)系,可推想動(dòng)物細(xì)胞之間可能依靠蛋白質(zhì)相互聯(lián)系;細(xì)胞膜中含有蛋白質(zhì)成分,所以肯定要留意處理的時(shí)間和酶的用量,以防止對(duì)動(dòng)物細(xì)胞造成損傷;酶促反應(yīng)須要相宜的pH,所以培育液的pH應(yīng)與胰蛋白酶作用的相宜pH基本一樣。6.試驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培育的基本過(guò)程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.甲過(guò)程須要在無(wú)菌條件下進(jìn)行B.乙過(guò)程可用胰蛋白酶處理皮膚組織C.丙過(guò)程是原代培育,會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象D.丁過(guò)程是傳代培育,細(xì)胞不能保持二倍體核型答案D解析甲過(guò)程取小鼠的皮膚組織應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行;乙過(guò)程可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理皮膚組織,獲得單細(xì)胞懸液;丙過(guò)程是原代培育,原代培育會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象;丁過(guò)程是傳代培育,傳代培育細(xì)胞通常10代以內(nèi)能保持二倍體核型,10代以后核型可能發(fā)生變更。7.從母羊甲的體細(xì)胞中取出細(xì)胞核,移植入母羊乙的去核卵母細(xì)胞中,融合后的細(xì)胞經(jīng)有絲分裂形成早期胚胎,再植入另一只母羊丙的子宮內(nèi)。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是()A.生出小羊的性狀與甲羊完全相同B.一般來(lái)說(shuō)生出小羊的核基因型與甲羊完全相同C.生出小羊的遺傳物質(zhì)由甲、乙兩雙親共同確定,所以該過(guò)程為有性生殖D.生出小羊的性狀由甲、乙、丙三個(gè)親本的基因型與環(huán)境共同確定答案B解析小羊由重組細(xì)胞發(fā)育而來(lái),重組細(xì)胞的細(xì)胞核來(lái)自甲羊,細(xì)胞質(zhì)來(lái)自乙羊;遺傳物質(zhì)DNA主要在細(xì)胞核內(nèi),少量存在于細(xì)胞質(zhì)的線粒體內(nèi),故小羊性狀大部分與甲羊相同,少量與乙羊相同;此過(guò)程為無(wú)性生殖。8.如圖是動(dòng)物細(xì)胞培育的基本過(guò)程示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)容器A中放置的是動(dòng)物器官或組織,它一般取自________________。(2)容器A中的動(dòng)物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是________,然后用________酶處理,這是為了使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái),這樣做的目的是______________________。(3)培育先在B瓶中進(jìn)行,瓶中的培育基成分有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和________等,細(xì)胞增殖產(chǎn)生的新細(xì)胞會(huì)表現(xiàn)出________生長(zhǎng)現(xiàn)象。當(dāng)細(xì)胞分裂生長(zhǎng)相互接觸時(shí),就會(huì)停止分裂增殖,這稱為_(kāi)_______現(xiàn)象。需用胰蛋白酶處理后分瓶接著培育,稱為_(kāi)_______。(4)細(xì)胞在C瓶培育,出現(xiàn)極少數(shù)細(xì)胞無(wú)限繁殖,其緣由是________________________________________________________________________。答案(1)胚胎或幼齡動(dòng)物(2)剪碎胰蛋白(或膠原蛋白)使細(xì)胞與培育液充分接觸(3)動(dòng)物血清貼壁接觸抑制傳代培育(4)細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了變更,帶有癌變特點(diǎn)解析(1)胚胎或幼齡動(dòng)物的細(xì)胞具有旺盛的分裂實(shí)力,培育后可獲得較多細(xì)胞。(2)為了增加細(xì)胞與培育液的接觸面積,應(yīng)使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái),可先用物理方法剪碎,再用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。(3)血漿中含有豐富的養(yǎng)分成分,為良好的自然養(yǎng)分物質(zhì);在培育過(guò)程中細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象,需用胰蛋白酶處理,使之分散開(kāi),以便與培育液充分接觸;若再分瓶培育則為傳代培育。(4)培育過(guò)程中細(xì)胞的遺傳物質(zhì)可能發(fā)生變異而具有癌細(xì)胞的特點(diǎn),即具有無(wú)限增殖實(shí)力。9.核苷酸合成有兩個(gè)途徑,物質(zhì)A可以阻斷其中的全合成途徑(如下圖)。正常細(xì)胞內(nèi)含有補(bǔ)救合成途徑所必需的轉(zhuǎn)化酶和激酶,制備單克隆抗體時(shí)選用的骨髓瘤細(xì)胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶?,F(xiàn)用加入H、A、T三種物質(zhì)的“HAT培育基”來(lái)篩選特定的雜交瘤細(xì)胞。關(guān)于篩選原理的敘述,正確的是()A.免疫的B細(xì)胞及其相互融合細(xì)胞因全合成途徑被A阻斷而在HAT培育基上不能增殖B.骨髓瘤細(xì)胞及其相互融合細(xì)胞因無(wú)法進(jìn)行上述兩個(gè)途徑而在HAT培育基上不能增殖C.雜交瘤細(xì)胞因?yàn)榭梢赃M(jìn)行上述兩個(gè)途徑,所以能在HAT培育基上大量增殖D.HAT培育基上篩選出的全部雜交瘤細(xì)胞既能大量增殖又能產(chǎn)生高純度的目標(biāo)抗體答案B解析免疫的B細(xì)胞及其相互融合細(xì)胞均屬于高度分化的細(xì)胞,不能增殖,A項(xiàng)錯(cuò)誤;骨髓瘤細(xì)胞及其相互融合細(xì)胞缺乏轉(zhuǎn)化酶,又因HAT培育基中的物質(zhì)A阻斷了全合成途徑,所以在HAT培育基上不能增殖,B項(xiàng)正確;雜交瘤細(xì)胞因?yàn)榭梢赃M(jìn)行補(bǔ)救合成途徑,能夠在HAT培育基上大量增殖,C項(xiàng)錯(cuò)誤;HAT培育基上篩選出的雜交瘤細(xì)胞能大量增殖,也能產(chǎn)生專一的抗體,但不肯定產(chǎn)生目標(biāo)抗體,D項(xiàng)錯(cuò)誤。10.如圖為小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)培育的過(guò)程圖,下列敘述錯(cuò)誤的是()A.可用膠原蛋白酶分散組織塊中的細(xì)胞B.MEF細(xì)胞可能產(chǎn)生某種物質(zhì)抑制胚胎干細(xì)胞的分化C.加入培育液中的MEF細(xì)胞最好是來(lái)自傳代培育的細(xì)胞D.細(xì)胞培育過(guò)程中可能出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象答案C解析將動(dòng)物組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞,可以用膠原蛋白酶或胰蛋白酶處理;由圖可知,在胚胎干細(xì)胞培育液中加入MEF細(xì)胞,胚胎干細(xì)胞不分化,但未加入MEF細(xì)胞的一組易分化,據(jù)此推知MEF細(xì)胞可能產(chǎn)生某種物質(zhì)抑制胚胎干細(xì)胞的分化;加入培育液中的MEF細(xì)胞最好是來(lái)自原代培育的細(xì)胞;在動(dòng)物細(xì)胞培育過(guò)程中可能出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象。11.動(dòng)物細(xì)胞體外培育時(shí),通常要在培育基中補(bǔ)充肯定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對(duì)正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培育影響的試驗(yàn)結(jié)果。不能從該圖獲得的結(jié)論是()A.正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同B.有無(wú)血清對(duì)正常細(xì)胞培育的影響較大C.培育基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培育D.培育基中是否補(bǔ)充血清對(duì)癌細(xì)胞的培育影響不大答案A解析分析圖中曲線可知,對(duì)癌細(xì)胞來(lái)說(shuō),相同的培育時(shí)間內(nèi),培育基中有無(wú)血清,其細(xì)胞數(shù)目相差不大,說(shuō)明培育基中有無(wú)血清對(duì)癌細(xì)胞的培育影響不大;對(duì)正常細(xì)胞來(lái)說(shuō),在相同的培育時(shí)間內(nèi),有血清的培育基中培育的細(xì)胞數(shù)目遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于沒(méi)有血清的培育基中培育的細(xì)胞數(shù)目,說(shuō)明有無(wú)血清對(duì)正常細(xì)胞的培育影響較大;在相同條件和相同的培育時(shí)間內(nèi),癌細(xì)胞和正常細(xì)胞的數(shù)目差距較大,正常細(xì)胞達(dá)到肯定的數(shù)目后不再增加,而癌細(xì)胞卻能不斷增加。12.某探討小組為測(cè)定某藥物對(duì)體外培育細(xì)胞的毒性,打算對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞(甲)和正常肝細(xì)胞(乙)進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培育。下列說(shuō)法不正確的是()A.在利用兩種肝組織塊制備肝細(xì)胞懸液時(shí),可用胃蛋白酶處理B.為了防止細(xì)胞培育過(guò)程中細(xì)菌的污染,可向培育液中加入適量的抗生素C.細(xì)胞培育應(yīng)在含CO2的恒溫培育箱中進(jìn)行,其作用是維持培育液的pHD.將數(shù)量相等的甲、乙細(xì)胞分別置于相同且相宜的條件下培育,一段時(shí)間后,會(huì)視察到甲細(xì)胞的數(shù)量比乙細(xì)胞的多答案A解析動(dòng)物細(xì)胞培育的相宜pH為7.2~7.4,而在這樣的環(huán)境中胃蛋白酶會(huì)變性失活,因此在利用兩種肝組織塊制備肝細(xì)胞懸液時(shí),不行用胃蛋白酶處理,而用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,A項(xiàng)錯(cuò)誤;向培育液中加入適量的抗生素,可以防止細(xì)胞培育過(guò)程中細(xì)菌的污染,B項(xiàng)正確;動(dòng)物細(xì)胞培育所需氣體主要是O2(細(xì)胞代謝必需的)和CO2(維持培育液的pH),C項(xiàng)正確;肝腫瘤細(xì)胞代謝和繁殖速度較快,故數(shù)量相等的甲、乙細(xì)胞分別置于相同且相宜的條件下培育,一段時(shí)間后,會(huì)視察到甲細(xì)胞的數(shù)量比乙細(xì)胞的多,D項(xiàng)正確。13.下圖是克隆羊的培育流程圖,依據(jù)所學(xué)學(xué)問(wèn)回答下列問(wèn)題。(1)培育克隆羊時(shí)用到的卵母細(xì)胞可以從屠宰場(chǎng)收集,并在體外培育到____________________。(2)從供體羊中取上皮細(xì)胞,用________處理,然后進(jìn)行分散培育。培育過(guò)程一般在________中進(jìn)行,整個(gè)過(guò)程必需保證細(xì)胞處于________的環(huán)境中,所需養(yǎng)分物質(zhì)要與體內(nèi)基本相同。(3)通過(guò)________法吸出卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核,微型吸管除了將細(xì)胞核吸出外,往往還會(huì)將________一并吸出。(4)去核的卵母細(xì)胞與供體細(xì)胞通過(guò)電激后融合,________進(jìn)入受體卵母細(xì)胞,構(gòu)建成重組細(xì)胞,融合后的重組細(xì)胞,須要用物理或化學(xué)的方法進(jìn)行激活,使其完成______________過(guò)程。答案(1)減數(shù)其次次分裂中期(2)胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)CO2培育箱無(wú)菌、無(wú)毒(3)顯微操作第一極體(4)供體核細(xì)胞分裂和發(fā)育解析(1)核移植時(shí),卵母細(xì)胞需在體外培育到減數(shù)其次次分裂中期。(2)動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí),需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理組織使其分散成單個(gè)細(xì)胞;動(dòng)物細(xì)胞培育過(guò)程必需保證細(xì)胞處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境中,且一般在CO2培育箱中進(jìn)行培育。(3)核移植過(guò)程中,通過(guò)顯微操作法吸出卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核,由于減數(shù)其次次分裂中期卵母細(xì)胞核的位置靠近第一極體,所以用微型吸管可一并吸出細(xì)胞核與第一極體。(4)去核的卵母細(xì)胞與供體細(xì)胞通過(guò)電激后融合,供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞,構(gòu)建成重組細(xì)胞,融合后的重組細(xì)胞,須要用物理或化學(xué)的方法進(jìn)行激活,使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育過(guò)程。14.某探討小組進(jìn)行藥物試驗(yàn)時(shí),以動(dòng)物肝細(xì)胞為材料,測(cè)定藥物對(duì)體外培育細(xì)胞的毒性。供培育的細(xì)胞有甲、乙兩種,甲細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞,乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞。請(qǐng)回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培育的問(wèn)題:(1)將數(shù)量相等的甲細(xì)胞和乙細(xì)胞分別置于培育瓶中培育,培育液及其他培育條件均相同。一段時(shí)間后,視察到甲細(xì)胞數(shù)量比乙細(xì)胞數(shù)量________。(2)在動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí),通常在合成培育基中加入適量血清,其緣由是______________________________________________________________________________________________________________________________。(3)在兩種細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中,當(dāng)乙細(xì)胞鋪滿瓶壁時(shí),其生長(zhǎng)____________。藥物試驗(yàn)須要大量細(xì)胞,兩種細(xì)胞頻繁傳代,甲細(xì)胞比乙細(xì)胞可以傳代的次數(shù)更________。若用動(dòng)物的肝臟組織塊制備肝細(xì)胞懸液,需用________處理。(4)為了防止細(xì)胞培育過(guò)程中細(xì)菌的污染,可向培育液中加入適量的________。(5)已知癌細(xì)胞的X基因表達(dá)過(guò)量與肝腫瘤的發(fā)生親密相關(guān)。要試驗(yàn)一種抗腫瘤藥物Y對(duì)甲細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,可將甲細(xì)胞分為A、B兩組,A組細(xì)胞培育液中加入________,B組細(xì)胞培育液中加入無(wú)菌生理鹽水。經(jīng)培育后,從A、B兩組收集等量細(xì)胞,通過(guò)分別檢測(cè)X基因在A、B兩組細(xì)胞中的________或________合成水平的差異,確定藥物Y的藥效。答案(1)多(2)血清中含有適合動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的多種物質(zhì)(3)產(chǎn)生接觸抑制多胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)(4)抗生素(5)藥物YmRNA蛋白質(zhì)解析(1)腫瘤細(xì)胞具有無(wú)限增殖實(shí)力,細(xì)胞周期短,相同培育時(shí)間內(nèi),甲細(xì)胞的數(shù)量多于乙細(xì)胞。(2)動(dòng)物血清中含有能促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的多種物質(zhì),是自然的培育基。(3)動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí)為了獲得細(xì)胞懸液,需用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)處理組織塊,使組織塊中的細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞。(4)動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí)須要?jiǎng)?chuàng)建無(wú)菌的環(huán)境,因此為了防止病菌污染,可在培育基中添加適量的抗生素。(5)設(shè)計(jì)比照試驗(yàn)須要遵循單一變量原則,因此A組須要加入藥物Y,可通過(guò)檢測(cè)基因是否完成轉(zhuǎn)錄和翻譯來(lái)確定Y的藥效。15.2024年11月27日,世界上首例體細(xì)胞克隆猴“中中”誕生;12月5日,其次例克隆猴“華華”誕生。我國(guó)科學(xué)家攻克了與人類相近的靈長(zhǎng)類動(dòng)物獼猴的體細(xì)胞克隆的難題。獲得克隆猴的流程如圖所示,據(jù)圖回答問(wèn)題:(1)“中中”和“華華”的性狀與________(填“核供體”“卵母細(xì)胞供體”或“代孕”)動(dòng)物的性狀基本無(wú)關(guān)。(2)圖示過(guò)程運(yùn)用了____________(填“胚胎細(xì)胞核移植”或“體細(xì)胞核移植”)技術(shù),該技術(shù)難度________,緣由是______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)欲獲得單個(gè)雌獼猴體細(xì)胞,可用__________________酶處理動(dòng)物組織塊。過(guò)程①表示去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核,該過(guò)程一般要將卵母細(xì)胞培育至________________期再進(jìn)行,目前常用的去核方法是________________。將卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞的緣由是_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
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