2025年湘教版選擇性必修3生物上冊月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年湘教版選擇性必修3生物上冊月考試卷873考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、用PCR擴增下面的DNA片段：

5'GACCTGTGGAAGCCATACGGGATTG3'

3'CTGGACACCTTCGGTATGCCCTAAC5'

供選擇的引物有：

①5'GACCTGTGGAAGC3'；②5'CATACGGGATTG3'；

③5'GTATGCCCTAAC3'和④5'CAATCCCGTATG3'

共四種，應選擇（）A.①②B.②③C.③④D.①④2、下列敘述錯誤的是（）A.用顯微注射技術將基因表達載體導入動物受精卵B.用DNA分子雜交技術檢測轉(zhuǎn)基因生物是否含有目的基因C.單子葉植物常用的基因轉(zhuǎn)化方法是基因槍法D.PCR技術指通過DNA合成儀直接人工合成目的基因的技術3、某實驗室做了下圖所示的實驗研究。下列相關敘述，正確的是

A.與纖維母細胞相比，過程①形成的誘導干細胞的全能性較低B.過程②是誘導干細胞的結構和遺傳物質(zhì)發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程C.每個Y細胞只產(chǎn)生一種抗體，故過程③不需用選擇性培養(yǎng)基進行篩選D.過程④產(chǎn)生的單抗，不需細胞膜上的載體蛋白的協(xié)助就能釋放到細胞外4、6-磷酸葡萄糖脫氫酶（G-6PD）有F和S兩種類型，分別由一對等位基因XF和XS編碼?；蛐蜑閄FXS的女性體細胞中的兩個X染色體，會有一個隨機失活，且這個細胞的后代相應的X染色體均會發(fā)生同樣的變化。將基因型為XFXS的女性皮膚組織用胰蛋白酶處理后先進行細胞的原代培養(yǎng)；再對不同的單細胞分別進行單克隆培養(yǎng)。分別對原代培養(yǎng)和單克隆培養(yǎng)的細胞進行G-6PD蛋白電泳檢測，結果如下圖所示。有關敘述錯誤的是（）。

A.原代培養(yǎng)的細胞中都含有XF基因和XS基因B.用胰蛋白酶處理皮膚組織可使其分散成單個細胞C.原代培養(yǎng)細胞電泳圖有2個條帶是因為同時檢測了多個細胞D.單克隆培養(yǎng)的細胞1、2、4、5、8、9與3、6、7所含基因不同5、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是植物轉(zhuǎn)基因技術中常用的轉(zhuǎn)化方法之一。下列與該方法相關的敘述，錯誤的是（）A.土壤農(nóng)桿菌是重組質(zhì)粒的受體細胞B.T—DNA是擬核DNA上的一段序列C.農(nóng)桿菌能侵染雙子葉植物和裸子植物D.新鮮葉圓片與農(nóng)桿菌在適宜條件下共培養(yǎng)，部分細胞會被轉(zhuǎn)化評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)6、下列屬于生物武器的是（）A.致病菌B.病毒C.抗生素D.生化毒劑7、三聚氰胺是小分子有機物；下圖為采用單克隆技術制備三聚氰胺特異性抗體的過程，下列有關敘述錯誤的是（）

A.三聚氰胺分子經(jīng)“擴容”后可激活小鼠的免疫系統(tǒng)B.從自然免疫的小鼠體內(nèi)可獲得產(chǎn)生該特異性抗體的B淋巴細胞C.經(jīng)培養(yǎng)篩選后得到的雜交瘤細胞只具有產(chǎn)生單一抗體的特點D.在基因水平上將單克隆抗體改造為嵌合抗體可降低對人體的不良反應8、下列有關利用酵母菌發(fā)酵制作葡萄酒的敘述，錯誤的是（）A.葡萄糖在酵母菌細胞的線粒體內(nèi)分解成丙酮酸B.制作葡萄酒時，酵母菌先在有氧條件下大量繁殖C.制作過程中，酵母菌始終處于堿性環(huán)境D.酵母菌的發(fā)酵產(chǎn)物不會影響自身的代謝活動9、研究人員從土壤中篩選得到酵母菌纖維素酶高產(chǎn)菌株；并對其降解纖維素的條件進行了研究。據(jù)圖分析正確的是（）

A.篩選該高產(chǎn)菌株需要在纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)B.探究最適溫度時應盡可能將發(fā)酵液的pH控制在9左右C.該酵母菌高產(chǎn)菌株產(chǎn)生纖維素酶的最適溫度是35℃D.利用該高產(chǎn)菌株降解纖維素時需嚴格保持厭氧環(huán)境10、下列有關生物技術安全性和倫理問題的觀點，合理的是（）A.對轉(zhuǎn)基因技術，我們應該趨利避害，理性看待B.我國禁止生殖性克隆和治療性克隆C.我國不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，并反對其擴散D.對基因檢測應該保護個人遺傳信息的隱私權11、玉米秸稈轉(zhuǎn)化為綠色能源酒精是解決能源危機的措施之一，具體的工藝流程如圖所示。下列敘述正確的是（）

A.用酸或堿預處理有利于酶與底物充分接觸，提高催化效率B.步驟③中，酵母菌在發(fā)酵初期更多分布在發(fā)酵液的上層C.隨培養(yǎng)次數(shù)的增加，分離出的菌落類型越少表示純度越高，其遺傳基因型越穩(wěn)定D.發(fā)酵過程中酒精濃度升高會抑制酵母菌代謝活動，同時使發(fā)酵液pH降低，發(fā)酵停止評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)12、雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有_____________、___________________(提供碳元素的物質(zhì))、_________________(提供氮元素的物質(zhì))和__________________。13、20世紀70年代以后；以基因工程為代表的一大批生物技術成果，進入人類的生產(chǎn)和生活，特別是在醫(yī)藥和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上發(fā)揮了極大的作用，但是與其他高新技術一樣，生物技術也同樣具有雙刃劍效應。如同其他高新技術一樣，轉(zhuǎn)基因成果和轉(zhuǎn)基因技術也需要你的理性看待。在轉(zhuǎn)基因生物安全方面；

（1）你認為轉(zhuǎn)基因生物有哪些優(yōu)點，①____________②___________③__________。

（2）你認為轉(zhuǎn)基因生物有哪些缺點，①____________②___________③__________。

（3）你對于轉(zhuǎn)基因生物的態(tài)度是__________。14、統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目_____________。這是因為______________________。因此，統(tǒng)計結果一般用而不是用活菌數(shù)來表示。除了上述的活菌計數(shù)法外，______________也是測定微生物數(shù)量的常用方法。15、兩種DNA連接酶（E·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：

①相同點：都縫合______鍵。

②區(qū)別：E·coliDNA連接酶來源于T4噬菌體，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶能縫合兩種末端，但連接平末端的之間的效率較低。16、來源：主要是從______中分離純化出來的。17、生態(tài)工程的設計所依據(jù)的是______和______原理18、今年年初；爆發(fā)了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過其表面的S-蛋白與人細胞膜上的ACE2相互識別，感染人的呼吸道上皮細胞。請分析回答問題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_________剌激淋巴細胞，使機體產(chǎn)生_________性免疫反應，人細胞膜上的ACE2的化學本質(zhì)是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統(tǒng)對肺細胞強烈攻擊引發(fā)肺炎，此時可通過適度使用_________對病人進行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴重受損。

（3）科學家采集了感染新型冠狀病毒并已康復的甲、乙兩人的血液，檢測相關抗體的水平，結果如圖1。據(jù)此分析，應選取_________的B淋巴細胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測病毒對宿主細胞的感染率，結果如圖2。據(jù)此分析，對病毒抑制效果最好的單抗是__________號。

（5）患者康復后一段時間，若再次受到該病毒的攻擊，機體內(nèi)相應的__________細胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。19、請回答有關植物細胞工程的問題：

（1）在植物中，一些分化的細胞，經(jīng)過________的誘導，可以脫分化失去其__________而轉(zhuǎn)變成未分化細胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中，將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫_________（填：“光照”或“黑暗”）條件下培養(yǎng)。一段時間后，將生長良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到_________培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過程中，由于培養(yǎng)細胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到__________的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含_____的培養(yǎng)基上，獲得所需個體。20、我國政府同樣禁止進行治療性克隆實驗。（選擇性必修3P108）()評卷人得分四、判斷題(共1題，共4分)21、生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質(zhì)的區(qū)別。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共40分)22、“掌心對掌心；手心壓手背，十指交叉摩，手握關節(jié)搓，拇指圍軸轉(zhuǎn)，指尖掌心揉，手腕別放過?！逼卟较词址梢郧宄植康奈畚锖臀⑸?，是預防新冠病毒感染的有效措施之一。某生物實驗小組設計了“比較洗手前后手上細菌分布情況”的探究活動：各小組成員分別將拇指在甲組培養(yǎng)基上輕輕按一下，然后用肥皂將該手洗干凈，再將洗凈后的拇指在乙組培養(yǎng)基上輕輕按一下。將這兩組培養(yǎng)基放入恒溫培養(yǎng)箱中，在適宜溫度下培養(yǎng)24小時后，統(tǒng)計兩組培養(yǎng)基中菌落數(shù)目。

（1）該實驗中用到的培養(yǎng)基中加入了牛肉膏、蛋白胨、NaCl和水，蛋白胨可以為微生物的生長提供__________________________等營養(yǎng)物質(zhì)，為了使配制的溶液呈固體狀態(tài)，還需要加入__________。為了防止外來雜菌的入侵，可以將培養(yǎng)基放入盛有適量_________的高壓滅菌鍋內(nèi)滅菌15－30min。

（2）實驗中“將拇指在培養(yǎng)基上輕輕按一下”相當于微生物培養(yǎng)操作中的_______，該操作應該在酒精燈火焰附近進行，原因是__________________________。

（3）統(tǒng)計甲乙兩組培養(yǎng)皿中的菌落，乙組中菌落數(shù)比甲少得多，實驗結果說明肥皂洗手不能徹底清除手上的微生物。為避免手上微生物在無菌操作中污染培養(yǎng)基，洗過的手還應進行________________________等方法處理（答出1種即可）。

（4）有同學認為乙中也有菌落產(chǎn)生，是因為培養(yǎng)過程受到雜菌污染，請你在本實驗的基礎上設計一個簡單的方案驗證他的猜想是否正確，并預期結果和結論。________________________________。23、餐廚垃圾廢液中的淀粉；蛋白質(zhì)、脂肪等微溶性物質(zhì)可以被微生物分解并利用；但由于初期有益微生物數(shù)量相對較少，存在發(fā)酵周期長、效率低等缺點，極易對環(huán)境造成污染。為探究用圓褐固氮菌、巨大芽孢桿菌處理某餐廚垃圾廢液時，單獨接種和混合接種的效果差異及最佳接種量比，以制備微生物菌劑，研究者做了如下實驗：

（1）將兩種菌液進行不同配比分組處理如下表所示：。編號R0R1R2R3圓褐固氮菌：巨大芽孢桿菌1：00：11：12：1

將上表菌液分別接種于l00mL________________中進行振蕩培養(yǎng)。本實驗還需設置空白對照，對照組接種________________。

（2）培養(yǎng)3天后測定活菌數(shù)，取一定量菌液用_____________法接種于基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)，該方法包括_____________和____________兩個操作。進行計數(shù)時，可依據(jù)______________對兩種菌進行區(qū)分，并選取菌落數(shù)在__________內(nèi)的平板。實驗結果如下圖所示，由實驗結果可知___________________。

24、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導致的遺傳病?？蒲腥藛T對此病的治療進行相關研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因由于堿基對___________造成突變，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子，最終導致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結構差異顯著而失去活性，積累過多的黏多糖無法及時清除，造成人體多系統(tǒng)功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結構、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對。在上述這一類突變基因的翻譯過程中，加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________；從而誘導通讀獲得有功能的全長蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進行了相關研究，實驗結果如圖。

注：“-”代表未加入。

據(jù)圖分析，實驗組將___________基因?qū)胧荏w細胞，并采用___________技術檢測導入基因的表達情況。據(jù)結果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進行治療，檢測肝臟細胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實驗結果為_____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。25、干燥綜合征（SS）是臨床常見的一種自身免疫病；患者血清中存在多種抗體，其中以SSB抗體特異性最強。下圖表示科研人員利用基因工程技術獲得SSB蛋白及利用SSB蛋白對小鼠進行免疫的過程?；卮鹣铝袉栴}：

(1)利用RNA通過①過程獲得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護尾部不被降解。為了針對性獲得cDNA，應如何設計逆轉(zhuǎn)錄第一步時的DNA引物______，設計引物的目的是______。

(2)為確保與pET41a質(zhì)粒定向連接，對逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴增時，應在相應引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位點。

(3)③過程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時，需要用Ca2+處理大腸桿菌，目的是______，然后將處理后的大腸桿菌先接種在添加_______的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長出菌落后再利用無菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加______的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集_______菌落進一步純化后將菌體破碎處理；篩選得到SSB蛋白。

(4)將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測該蛋白是否具有抗原性，則后續(xù)實驗內(nèi)容應為抽取小鼠血液_______。評卷人得分六、綜合題(共2題，共6分)26、研究人員在培育轉(zhuǎn)bt基因抗蟲番茄過程中，選用hpt（抗潮霉素基因）為標記基因。為了提高轉(zhuǎn)基因番茄的安全性，在篩選成功后，用Cre酶（能特異識別loxp位點；切除loxp位點間的基因序列）切除hpt。相關技術流程如圖。

（1）步驟①中，為防止原番茄植株帶有病毒，應選用______作為外植體；培養(yǎng)時，常在培養(yǎng)基中加入2，4-D，其作用是____________。

（2）步驟②將bt基因?qū)胗鷤M織的最常用方法是___________________________

（3）步驟③需在培養(yǎng)基中加入__________________以初步篩選出轉(zhuǎn)人bt基因的植株。

（4）提取F1植株的基因組DNA，用hpt特異性引物進行PCR。其中，植株1和2的PCR產(chǎn)物電泳結果如圖，據(jù)此判斷，植株___________為不具有hpt的抗蟲番茄。27、人β防御素（由H基因編碼）是一種抗菌肽；科研人員欲利用酵母對其進行生產(chǎn)。

(1)獲得H基因的序列信息后，可以其cDNA為模板通過_____方法獲得該基因。

(2)由于人β防御素會損傷酵母細胞；組成型表達（持續(xù)表達）H的酵母菌最大種群數(shù)量偏低，限制了最終產(chǎn)量?？蒲腥藛T在酵母菌基因組DNA中插入Р和S基因，使質(zhì)粒上H基因的表達受到紅光控制。紅光調(diào)控H基因表達的原理如圖1所示。

P和S基因應為_____（填“組成型表達”或“紅光誘導表達”）。

(3)發(fā)酵后菌體和產(chǎn)物分離是發(fā)酵工藝的基本環(huán)節(jié)。定位于細胞表面的F蛋白可使酵母細胞彼此結合；進而沉淀在發(fā)酵罐底部。科研人員引入藍光激活系統(tǒng)（圖2），在酵母菌基因組中插入了2個E基因，使F基因的表達受到藍光控制（圖3）。

圖3中兩個E基因作用分別是_____。

(4)工程菌泄露到環(huán)境中可能引發(fā)環(huán)境問題?？蒲腥藛T利用兩種阻遏蛋白基因（T和L）和調(diào)控元件；使酵母細胞在紅光和藍光同時照射時才激活致死基因N的表達，進而誘導工程菌死亡（圖4）。

圖4中①②應選用的啟動子為：①_____，②_____。

A．JubB．ACTC．CYC

圖4中③④處結合的阻遏蛋白為：③_____，④_____。

a、T蛋白b；L蛋白。

(5)寫出利用該工程菌發(fā)酵生產(chǎn)人β防御素的步驟。_____參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、D【分析】【分析】

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4中游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復制過程。DNA的復制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

2；PCR反應過程是：變性→復性→延伸。

。過程。

說明。

變性。

當溫度上升到90℃以上時；雙鏈DNA解聚為單鏈。

復性。

溫度下降到50℃左右；兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合。

延伸。

72℃左右時；TaqDNA聚合酶有最大活性，可使DNA新鏈由5'端向3'端延伸。

3、結果：上述三步反應完成后，一個DNA分子就變成了兩個DNA分子，隨著重復次數(shù)的增多，DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反應過程都是在PCR擴增儀中完成的。

【詳解】

用PCR擴增DNA片段的過程中；在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的，故引物的堿基序列應與每條模板鏈5'端的一段核苷酸鏈的堿基序列相同，即應以模板鏈5'端的一段脫氧核苷酸單鏈片段作為引物；由題干信息分析可知，5'端的堿基序列是5'GACCTGTGGAAGC和5'CAATCCCGTATG，故對應的引物為①5′GACCTGTGGAAGC3′和④5′CAATCCCGTATG3′，D正確，ABC錯誤。

故選D。2、D【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲?。焕肞CR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；動物細胞全能性受到限制；轉(zhuǎn)基因動物常用顯微注射技術將基因表達載體導入動物受精卵，A正確；

B；用單鏈的目的基因做探針；通過DNA分子雜交技術可檢測轉(zhuǎn)基因生物是否含有目的基因，B正確；

C；由于農(nóng)桿菌不侵染單子葉植物；單子葉植物常用的基因轉(zhuǎn)化方法是基因槍法，C正確；

D；PCR技術指通過基因擴增儀；在細胞外進行DNA復制、擴增目的基因的技術，D錯誤。

故選D。

【點睛】3、D【分析】【分析】

【詳解】

纖維母細胞脫分化形成誘導干細胞，則誘導干細胞分化程度低，全能性高，A錯誤；過程②是細胞分化的結果，即干細胞的形態(tài)結構和生理功能發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程，但是遺傳物質(zhì)并未改變，B錯誤；Y細胞是經(jīng)單一抗原刺激后產(chǎn)生的效應B細胞，每個Y細胞只產(chǎn)生一種抗體，過程③需要篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交細胞，C錯誤；單抗為大分子物質(zhì)，是通過胞吐排出細胞，不需載體蛋白，D正確。4、D【分析】【分析】

1；動物細胞培養(yǎng)過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞；制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。2、動物細胞培養(yǎng)是動物細胞工程技術的基礎。3、動物細胞培養(yǎng)的原理是細胞增殖。

【詳解】

A、由題意可知，原代培養(yǎng)細胞是基因型為XFXS的女性皮膚組織用胰蛋白酶處理得到的，都含有XF和XS，A正確；

B、動物細胞之間的蛋白質(zhì)，被胰蛋白酶或膠原蛋白酶分解，分散成單個細胞，B正確；

C、結合題干，基因型為XFXS的女性體細胞中的兩個X染色體會有一個隨機失活，故一個細胞中6-磷酸葡萄糖脫氫酶，電泳后只顯示一個條帶，原代培養(yǎng)的細胞電泳有2個條帶，故同時檢測了多個細胞，C正確；

D、單克隆培養(yǎng)的細胞，是通過有絲分裂得到的增殖的細胞，故單克隆培養(yǎng)的細胞1、2、4、5、8、9與3、6、7，所含基因相同，表達的基因不一定相同，D錯誤。

故選D。5、B【分析】【分析】

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞；并且整合到受體細胞染色體的DNA上。根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上。

【詳解】

A；將目的基因與載體相連形成重組質(zhì)粒后；要導入土壤農(nóng)桿菌內(nèi)，再讓農(nóng)桿菌去侵染植物細胞，A正確；

B；T-DNA是位于Ti質(zhì)粒中的一段序列；不位于擬核，B錯誤；

C；農(nóng)桿菌能在自然條件下侵染雙子葉植物和裸子植物；對大多數(shù)單子葉植物沒有侵染能力，C正確；

D；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的轉(zhuǎn)化效率不是100%；因此適宜條件下，新鮮葉圓片與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)后，一部分細胞會被轉(zhuǎn)化，D正確。

故選B。二、多選題(共6題，共12分)6、A:B:D【分析】【分析】

生物武器包括致病菌類；病毒類和生化毒劑類等；例如，天花病毒、波特淋菌、霍亂弧菌和炭疽桿菌，都可以用來制造生物武器。生物武器的致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或者通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵人人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，也能大量損害植物。

【詳解】

生物武器的種類包括致病菌類；病毒類、生化毒劑類；而抗生素不屬于生物武器，C錯誤，A、B、D正確。

故選ABD。7、B:C【分析】【分析】

分析題圖：該圖是制備三聚氰胺特異性抗體的過程。由于三聚氰胺分子量過?。徊蛔阋约せ罡叩葎游锏拿庖呦到y(tǒng)，制備抗體前必須對三聚氰胺分子進行有效“擴容”。

【詳解】

A；根據(jù)試題的分析；由于三聚氰胺分子量過小，不足以激活高等動物的免疫系統(tǒng)，制備抗體前必須對三聚氰胺分子進行有效“擴容”，以激活小鼠的免疫反應，A正確；

B；三聚氰胺是小分子有機物；不會被動物的免疫細胞的受體所識別，B錯誤；

C；經(jīng)培養(yǎng)篩選得到的雜交瘤細胞具有雙親的特性；既能無限增殖又能產(chǎn)生單一抗體，C錯誤；

D；通過對鼠和人控制抗體產(chǎn)生的基因進行拼接；實現(xiàn)對鼠源雜交瘤抗體的改造，能生產(chǎn)出對人體的不良反應減少、效果更好的鼠-人嵌合抗體，D正確。

故選BC。8、A:C:D【分析】【分析】

酵母菌是單細胞的真核生物；屬于真菌，代謝類型是兼性厭氧型。在氧氣充足時，酵母菌進行有氧呼吸，將葡萄糖分解為二氧化碳和水；在無氧條件下，進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳。

【詳解】

A；利用酵母菌發(fā)酵的方式制作葡萄酒時；酵母菌進行無氧呼吸，葡萄糖在酵母菌細胞質(zhì)基質(zhì)內(nèi)被分解成丙酮酸，A錯誤；

B；酵母菌繁殖需要空氣；在完全隔絕空氣的情況下，酵母菌繁殖幾代就停止了，要維持酵母菌長時間發(fā)酵，必須供給一定的氧氣，故制作葡萄酒時酵母菌先在有氧條件下大量增殖，B正確；

C、酵母菌發(fā)酵的后期，由于產(chǎn)生的CO2和其他代謝產(chǎn)物的積累；發(fā)酵液呈酸性，C錯誤；

D；酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生的酒精會對酵母菌的生長產(chǎn)生抑制作用；D錯誤。

故選ACD。9、A:B【分析】【分析】

分解纖維素微生物的分離實驗原理：

（1）土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌；細菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。

（2）在培養(yǎng)基中加入剛果紅；可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，紅色復合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

【詳解】

A；篩選該高產(chǎn)菌株需要在纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)；A正確；

B；由pH與纖維素酶活性的曲線圖分析可知；當pH為9時，纖維素酶的活性最高，故在探究最適溫度時應盡可能將發(fā)酵液的pH控制在9左右，B正確；

C；由溫度與纖維素酶活性的曲線圖分析可知；當溫度為35℃時纖維素酶的活性最大，但是由于缺少35℃之后的溫度實驗組，故無法判斷該酵母菌高產(chǎn)菌株產(chǎn)生纖維素酶的最適溫度是35℃，C錯誤；

D；酵母菌是兼性厭氧微生物；在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，故在降解初期需要給酵母菌提高有氧環(huán)境，以保證酵母菌的數(shù)量，D錯誤。

故選AB。

【點睛】10、A:C:D【分析】【分析】

1；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

2；治療性克?。褐咐每寺〖夹g產(chǎn)生特定細胞和組織（皮膚、神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植。

3；生殖性克?。褐笇⒖寺〖夹g用于生育目的；即用于產(chǎn)生人類個體。

4；中國政府：禁止生殖性克隆人；堅持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗），不反對治療性克隆。

【詳解】

A；對轉(zhuǎn)基因技術；我們應該趨利避害，理性看待，A正確；

B；中國政府的態(tài)度是禁止生殖性克隆人；堅持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗），不反對治療性克隆，B錯誤；

C；中國在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器；并反對生物武器及其技術和設備的擴散，C正確；

D；對基因檢測應該保護個人遺傳信息的隱私權；D正確。

故選ACD。11、A:B:C【分析】【分析】

用玉米秸稈生產(chǎn)燃料酒精是利用微生物進行生物發(fā)酵的過程；所利用的微生物為酵母菌，通過酒精發(fā)酵將葡萄糖轉(zhuǎn)化為酒精，玉米秸稈中含有的糖類主要是纖維素，因此需要先將纖維素水解成葡萄糖，再進行發(fā)酵。

【詳解】

A；由于纖維素組成成分復雜、結構穩(wěn)定；生物降解時難以迅速進行，常用酸或堿進行預處理，初步打斷纖維素內(nèi)部的化學鍵，降低聚合度，利于酶與底物充分接觸，提高催化效率，A正確；

B；在有氧的條件下酵母菌進行出芽生殖；上層培養(yǎng)液與空氣接觸部位氧氣較多，短時間內(nèi)酵母菌更多分布在發(fā)酵液的上層，B正確；

C；在選擇培養(yǎng)基中經(jīng)多次培養(yǎng)；分離出的菌落類型越少表示純度越高，其遺傳基因型越穩(wěn)定，C正確；

D、發(fā)酵液pH下降是因為產(chǎn)生了CO2；D錯誤。

故選ABC。三、填空題(共9題，共18分)12、略

【解析】①.水②.碳源③.氮源④.無機鹽13、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人們的愿望；進行嚴格的設計，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術，賦子生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNA分子水平上進行設計和施工的，因此又叫做DNA重組技術。

基因工程的原理是基因重組；其優(yōu)點是打破了生殖隔離。但由于科學發(fā)展水平的限制，目前科學家對基因的結構；基因間的相互作用以及基因的調(diào)控機制等都了解得相當有限；再加上轉(zhuǎn)移的基因雖然是功能已知的基因，但不少卻是異種生物的基因；同時，由于外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機的，因此在轉(zhuǎn)基因生物中，有時候會出現(xiàn)一些人們意想不到的后果。

【詳解】

（1）轉(zhuǎn)基因生物具有以下優(yōu)點：

作物產(chǎn)量高；能解決糧食短缺問題；利用基因工程生產(chǎn)的抗蟲作物能夠減少農(nóng)藥使用，減少環(huán)境污染；利用基因工程培育的生長迅速；營養(yǎng)品豐富的生物，能增加食物營養(yǎng)，提高附加值；利用基因工程培育微生物，能夠生產(chǎn)稀缺的生化藥物。

（2）轉(zhuǎn)基因生物受限于科學發(fā)展水平；可能會產(chǎn)生以下問題：

轉(zhuǎn)基因生物與同種生物雜交；可能產(chǎn)生重組病菌；重組病毒或超級雜草；導入轉(zhuǎn)基因生物的外源基因有可能與感染轉(zhuǎn)基因生物的某些細菌或病毒雜交，從而重組出對人類或其他生物有害的病原體，可能使疾病的傳播跨越物種障礙。

（3）轉(zhuǎn)基因技術取得了巨大的成果；但科學技術是把雙刃劍，面對轉(zhuǎn)基因技術的利弊，正確的做法應該是趨利避害，而不能因噎廢食。

【點睛】

本題考查轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題，意在考查學生對轉(zhuǎn)基因生物安全性問題的識記與理解?！窘馕觥拷鉀Q糧食短缺問題減少農(nóng)藥使用，減少環(huán)境污染增加食物營養(yǎng)，提高附加值能產(chǎn)生有毒蛋白或新過敏原可能產(chǎn)生重組病菌、重組病毒或超級雜草可能使疾病的傳播跨越物種障礙趨利避害不能因噎廢食14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】低當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落菌落數(shù)15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】磷酸二酯16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】原核生物17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】生態(tài)學工程學18、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據(jù)曲線圖可知；多年前感染EV并已康復的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對宿主細胞的感染率。根據(jù)柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對宿主細胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細胞，使機體產(chǎn)生特異性免疫反應，人細胞膜上的ACE2的化學本質(zhì)是蛋白質(zhì)。

（2）免疫系統(tǒng)對被新冠病毒感染后肺細胞強烈攻擊引發(fā)肺炎；此時可通過適度使用免疫抑制劑對病人進行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組，故應選取甲的B細胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對宿主細胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復后一段時間；若再次受到該病毒的攻擊，機體內(nèi)相應的記憶細胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。

【點睛】

本題結合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識記病毒的結構，明確病毒沒有細胞結構；識記單克隆抗體的制備過程，掌握其優(yōu)點及相關應用，能結合圖中信息準確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質(zhì)）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶19、略

【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的條件：①細胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度；適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）。決定植物脫分化和再分化的關鍵因素是植物激素的種類和比例；特別是生長素和細胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要，被稱為“激素杠桿”。

【詳解】

（1）在植物中；一些分化的細胞，經(jīng)過激素的誘導，可以脫分化失去其特有的結構和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中；將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫黑暗條件下培養(yǎng)。一段時間后，將生長良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過程中；由于培養(yǎng)細胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含一定濃度的鹽的培養(yǎng)基上，獲得所需個體。

【點睛】

本題考查植物組織培養(yǎng)的相關知識，要求考生識記植物組織培養(yǎng)的過程、原理及條件，掌握植物組織培養(yǎng)技術的相關應用，能結合所學的知識準確分析，屬于考綱識記和理解層次的考查?！窘馕觥竣?激素②.特有的結構和功能③.黑暗④.分化⑤.培養(yǎng)條件和外界壓力⑥.一定濃度的鹽20、略

【分析】【詳解】

中國政府的態(tài)度：禁止生殖性克隆，不反對治療性克隆，該表述錯誤。【解析】錯誤四、判斷題(共1題，共4分)21、A【分析】【分析】

生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質(zhì)區(qū)別；最重要的體現(xiàn)在目的不同。

【詳解】

治療性克隆：是指把克隆出來的組織和器官用于治療疾病，這種用于醫(yī)療目的的使用克隆技術制造胚胎稱為治療性克隆。生殖性克?。禾幱谏车哪康氖褂每寺〖夹g在實驗室制造人類胚胎。治療性克隆和生殖性克隆最重要的差別是目的不同。五、實驗題(共4題，共40分)22、略

【分析】【分析】

1；培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)；分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因為它們來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質(zhì)。在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物種和氧氣的要求。

2；微生物實驗中無菌技術的主要內(nèi)容：

（1）對實驗操作的空間；操作者的衣著和手；進行清潔和消毒。

（2）將用于微生物培養(yǎng)的器皿；接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌。

（3）為避免周圍環(huán)境中微生物的污染；實驗操作應在酒精燈火焰附近進行。

（4）實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。

【詳解】

（1）該實驗中用到的培養(yǎng)基中加入了牛肉膏；蛋白胨、NaCl和水；蛋白胨來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質(zhì)，故蛋白胨可以為微生物的生長提供碳源、氮源和維生素等營養(yǎng)物質(zhì)，為了使配制的溶液呈固體狀態(tài)，還需要加入瓊脂。為了防止外來雜菌的入侵，可以將培養(yǎng)基放入盛有適量水的高壓滅菌鍋內(nèi)滅菌15-30min。

（2）實驗中“將拇指在培養(yǎng)基上輕輕按一下”相當于微生物培養(yǎng)操作中的接種；該操作應該在酒精燈火焰附近進行，這樣能夠保證接種時處于一個無菌的環(huán)境，防止周圍環(huán)境中的微生物污染培養(yǎng)基。

（3）為避免手上微生物在無菌操作中污染培養(yǎng)基；洗過的手還應酒精棉球擦拭雙手；帶消毒手套等方法處理。

（4）有同學認為乙中也有菌落產(chǎn)生；是因為培養(yǎng)過程受到雜菌污染，若要驗證乙培養(yǎng)基是否被污染，需要再加一個不接種的相同培養(yǎng)基作為對照，與甲乙在相同條件下培養(yǎng)，若該培養(yǎng)基上沒有生長菌落，說明培養(yǎng)過程中未被雜交污染，故猜想錯誤；若該培養(yǎng)基上生長菌落，則說明猜想正確。

【點睛】

本題主要考查微生物的分離和培養(yǎng)，解題關鍵是識記培養(yǎng)基的概念、微生物實驗中無菌技術和實驗操作等知識，掌握相關的操作技能，并能將這些實驗涉及的方法和技能進行綜合運用?！窘馕觥刻荚?、氮源和維生素瓊脂水接種避免周圍環(huán)境中的微生物污染培養(yǎng)基酒精棉球擦拭雙手、戴消毒手套等再加一個不接種的相同培養(yǎng)基（空白培養(yǎng)基），與甲乙在相同條件下培養(yǎng)，若該培養(yǎng)基上沒有生長菌落，說明培養(yǎng)過程未被雜交污染，猜想錯誤；若該培養(yǎng)基上生長菌落，說明培養(yǎng)基中被雜菌污染，猜想正確23、略

【分析】微生物實驗室培養(yǎng)的實驗操作：1；制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的過程為：計算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板。2、純化大腸桿菌：（1）原理：在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成單個細胞；使其長成單個的菌落，這個單個菌落就是一個純化的細菌菌落。（2）微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在-起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

（1）將上表菌液分別接種于100mL餐廚垃圾廢液中進行振蕩培養(yǎng)；振蕩處理的目的是增加溶液中的溶氧量；有利于目的菌與溶液充分接觸；本實驗還需設置對照組為接種等量無菌水。

（2）測定活菌數(shù)；需要利用稀釋涂布平板法，接種時故需要取一定量菌液進行梯度稀釋，然后分別取0.1mL的菌液采用涂布法接種于基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)。進行計數(shù)時，可依據(jù)菌落的特征對兩種菌進行區(qū)分，并選取菌落數(shù)在30-300內(nèi)的平板。由實驗結果可知：兩種菌混合接種時有效菌落數(shù)均大于單獨接種；兩菌種接種量比例為1:1時，廢液中兩種菌種的有效活菌數(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)同步最大化。

【點睛】

本題結合圖表，考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記制備培養(yǎng)基的過程;識記接種微生物常用的兩種方法及微生物的計數(shù)方法，能結合柱形圖中信息準確答題。【解析】某餐廚垃圾廢液等量無菌水稀釋涂布平板系列（梯度）稀釋涂布平板菌落特征30~300兩種菌混合接種時有效菌落數(shù)均大于單獨接種；兩菌種接種量比例為1：1時，廢液中兩種菌種的有效活菌數(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)同步最大化24、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對的替換；增添和缺失；而引起的基因結構的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過程，該過程還需要tRNA來運轉(zhuǎn)氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個氨基酸的三個相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過程。

基因工程中檢測目的基因在受體細胞內(nèi)是否成功表達可以用抗原-抗體雜交技術。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因突變后，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變，說明其沒有發(fā)生堿基對的增添和缺失，因為這兩者改變會導致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度改變，因此推測其基因突變是由于堿基對替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn)，導致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結構改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結構；功能相同，據(jù)此推測該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對使翻譯過程繼續(xù)。

（3）本實驗目的是比較攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實驗組細胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對實驗結果產(chǎn)生干擾），同時保證在不同的實驗組細胞中可以轉(zhuǎn)錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實驗組中受體細胞中應該含有導入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個實驗組細胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對其進行檢測，即進行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細胞中表達的全長IDUA蛋白量比其他實驗組都多，說明其能有效恢復細胞中全長IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實驗可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導核糖體對突變IDUA基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進行通讀，進而產(chǎn)生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA基因敲除小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細胞內(nèi)都沒有相應mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無法發(fā)揮作用，最終導致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異。【解析】(1)替換減少。

(2)識別終止密碼子并攜帶氨基酸至核糖體使翻譯過程繼續(xù)。

(3)攜帶不同氨基酸的suptRNA基因和變IDUA抗原一抗體雜交恢復細胞中全長IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突變基因純合小鼠IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異25、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四個步驟：目的基因的篩選與獲取、基因表達載體的構建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作為受體細胞，其中以大腸桿菌應用最為廣泛。研究人員一般先用Ca2＋處理大腸桿菌細胞；使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，然后再將重組的基因表達載體導入其中。

【詳解】

（1）利用RNA通過①過程（逆轉(zhuǎn)錄）獲得cDNA需要逆轉(zhuǎn)錄酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護尾部不被降解。逆轉(zhuǎn)錄第一步以mRMA為模板合成DNA單鏈；新鏈與模板鏈反向平行，由于新鏈只能由5'端向3'端延伸，所以逆轉(zhuǎn)錄第一步的引物應與mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互補配對，即用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物；設計引物的目的是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。

（2）對逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴增時；引物的5'端結合母鏈的3'端之后DNA聚合酶開始擴增DNA。為確保其與pET41a質(zhì)粒定向連接，應使用不同種的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，由圖可知，使用EcoRI酶會破環(huán)SSB基因，故應在相應引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位點。

（3）由題圖分析可知：質(zhì)粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破壞了氯霉素抗性基因，所以成功組裝的重組質(zhì)粒不能在添加了氯霉素的培養(yǎng)基上生長，③過程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時，需要用Ca2+處理大腸桿菌；目的是使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)，然后分別將處理后的大腸桿菌先接種在添加卡那霉素