2025年牛津上海版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年牛津上海版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、牛奶消毒及細(xì)菌檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的過程如下圖所示；下列相關(guān)敘述不正確的是（）

A.步驟①為巴氏消毒法，步驟②為系列梯度稀釋，步驟③中的牛肉膏蛋白胨均可提供碳源、氮源B.實(shí)驗(yàn)中對(duì)試管、培養(yǎng)皿的滅菌是干熱滅菌，這種方法適用的是能耐高溫且需要保持干燥的物品C.實(shí)驗(yàn)中的培養(yǎng)基適宜的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌D.實(shí)驗(yàn)中采用平板劃線法計(jì)數(shù)，最可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏低2、科研人員研究了馬鈴薯莖尖外植體大小對(duì)幼苗的成苗率和脫毒率的影響；結(jié)果如圖。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.培育脫毒苗所依據(jù)的原理有基因突變和細(xì)胞全能性B.培育脫毒苗的過程中涉及脫分化和再分化兩個(gè)階段C.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明莖尖越小脫毒率越高，成苗率越低D.根據(jù)本實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)脫毒苗時(shí)莖尖的適宜大小為0．27mm3、科研工作者利用禽流感病毒蛋白制備單克隆抗體，下列步驟中敘述不正確的是（）A.用適宜濃度相同抗原多次免疫小鼠，以獲得更多的漿細(xì)胞B.用培養(yǎng)液培養(yǎng)禽流感病毒，通過離心獲得抗原蛋白C.可以用電融合法或PEG融合法誘導(dǎo)漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合得到雜交瘤細(xì)胞D.單克隆抗體相比血清抗體特異性更強(qiáng)，并且可以大量制備4、下面是哺乳動(dòng)物受精過程示意圖；數(shù)字表示過程，字母表示結(jié)構(gòu)。下列有關(guān)敘述正確的是（）

A.a結(jié)構(gòu)的名稱是透明帶B.受精之前，精子需在睪丸的曲細(xì)精管中獲能C.精子發(fā)生頂體反應(yīng)釋放的頂體酶，由高爾基體合成D.c、d分別為雄原核和雌原核5、高等哺乳動(dòng)物受精后不久；受精卵開始進(jìn)行細(xì)胞分裂。經(jīng)桑椹胚；囊胚、原腸胚和組織器官的分化，最后發(fā)育成一個(gè)完整的幼體，完成胚胎發(fā)育的全過程。下圖為該過程中的某一時(shí)期示意圖。下列有關(guān)敘述不正確的是（）

A.圖中①②③依次為透明帶、滋養(yǎng)層、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)B.高等哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育中的細(xì)胞分化開始于圖示時(shí)期C.胚胎從①中伸展出來的過程叫做孵化D.②將來發(fā)育成胎兒的各種組織，③將來發(fā)育成胎盤和胎膜6、“白菜—甘藍(lán)”是用細(xì)胞工程的方法培育出來的蔬菜新品種，它具有生長(zhǎng)期短、耐熱性強(qiáng)和易于儲(chǔ)藏等優(yōu)點(diǎn)。下圖是“白菜—甘藍(lán)”雜種植株的培育過程。以下說法不正確的是（）

A.用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁時(shí)，酶溶液的滲透壓略大于細(xì)胞液B.“白菜—甘藍(lán)”培養(yǎng)過程中，要用到不同濃度的細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素C.“白菜—甘藍(lán)”相對(duì)于白菜、甘藍(lán)，發(fā)生了染色體變異，不具有可育性D.植物體細(xì)胞雜交打破了不同種生物之間的生殖隔離7、2019年，中國(guó)科學(xué)院神經(jīng)科學(xué)研究所利用CRISPR—Cas9基因編輯技術(shù)，用基因敲除的猴的體細(xì)胞通過克隆技術(shù)成功培育出5只克隆疾病猴。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.克隆猴基因組成差異小，可減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾B.受精卵經(jīng)基因編輯后形成的胚胎不一定都成功發(fā)育為克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機(jī)制和開發(fā)相應(yīng)藥物D.可以運(yùn)用該基因編輯技術(shù)進(jìn)行生殖性克隆人的研究8、如圖所示為植物體細(xì)胞雜交的流程；兩種植物細(xì)胞都為二倍體，它們的基因型分別為AABB；ddee。下列敘述正確的是（）

A.圖中“去壁”要使用淀粉酶和果膠酶B.①過程常采用的物理法有離心、振動(dòng)、聚乙二醇C.③過程和④過程分別表示再分化和脫分化D.雜種植株的基因型為AABBddee9、菊花是一種常見的觀賞花卉，易感桃蚜。桃蚜不但直接影響菊花生長(zhǎng)，還是多種病毒的傳播媒介。雪花蓮凝集素基因GNA的表達(dá)產(chǎn)物能有效抑制桃蚜生長(zhǎng)。某科研團(tuán)隊(duì)利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得了轉(zhuǎn)基因菊花。下列有關(guān)敘述不正確的是（）A.受體細(xì)胞可以選擇菊花葉片細(xì)胞或桃蚜細(xì)胞B.需將含GNA的片段插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上C.需經(jīng)過植物組織培養(yǎng)過程獲得轉(zhuǎn)基因菊花D.可通過接種桃蚜對(duì)轉(zhuǎn)基因菊花進(jìn)行抗性鑒定評(píng)卷人得分二、多選題(共6題，共12分)10、下列關(guān)于試管嬰兒技術(shù)的敘述，正確的是（）A.在采集卵母細(xì)胞之前，需要給供卵者注射適量的促性腺激素，促進(jìn)排卵B.從卵巢中吸取的卵母細(xì)胞，必須經(jīng)體外培養(yǎng)獲能處理后才能用于受精C.受精過程中，卵母細(xì)胞會(huì)發(fā)生透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)，阻止多精入卵D.設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)，有利于生育健康的下一代，不會(huì)造成社會(huì)危害11、下列實(shí)驗(yàn)過程中，出現(xiàn)的正常現(xiàn)象有（）A.制作果酒時(shí)，發(fā)酵瓶中溶液產(chǎn)生較多泡沫B.用果酒制作果醋過程中，液面出現(xiàn)一層褐色菌膜C.制作腐乳過程中，豆腐表面發(fā)黏且長(zhǎng)有白色菌絲D.用固定化酵母進(jìn)行酒精發(fā)酵，凝膠珠浮在液面12、我國(guó)的釀酒技術(shù)歷史悠久，古人在實(shí)際生產(chǎn)中積累了很多經(jīng)驗(yàn)。《齊民要術(shù)》記載：“酒冷沸止，米有不消者，便是曲勢(shì)盡?！币馑际钱Y中酒液涼了不再起泡，米有未消耗完的，就是酒曲的力量用盡了。下列敘述正確的是（）A.用酒曲釀酒過程中，為加快微生物代謝需不斷通入O2B.酒液溫度的變化與酒曲中微生物呼吸作用釋放熱量有關(guān)C.起泡是由微生物進(jìn)行呼吸作用產(chǎn)生的CO2釋放形成的D.“曲勢(shì)盡”可能是甕中液體pH降低、酒精濃度過高導(dǎo)致13、擴(kuò)展青霉常見于腐爛蘋果中，其分泌的展青霉素（Pat）是一種具有致突變作用的毒素。為研究腐爛蘋果中Pat的分布，進(jìn)行了如圖實(shí)驗(yàn)，其中“病健交界處”為病斑與正常部位的交界處，依據(jù)與病斑的距離不同將蘋果劃分為①~⑤號(hào)部位，其中⑤為剩余部分。測(cè)定病斑直徑為1、2、3cm的蘋果中①~⑤號(hào)部位的Pat含量，結(jié)果如下。下列說法正確的是（）

A.該實(shí)驗(yàn)自變量是腐爛蘋果中的病斑大小和離病斑距離大小B.可向擴(kuò)展青霉培養(yǎng)液中加入青霉素以防止雜菌污染C.病斑越大，靠近腐爛部位的果肉中Pat含量越高D.由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，蘋果去除腐爛部位后可放心食用14、下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定、DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定的原理的敘述正確的是（）A.利用DNA不溶于酒精，但蛋白質(zhì)均溶于酒精的原理，可分離DNA與蛋白質(zhì)B.利用在一定溫度下DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色的原理對(duì)粗提取的DNA進(jìn)行鑒定C.PCR技術(shù)利用了DNA的熱變性原理，通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合D.電泳鑒定DNA利用了DNA在電場(chǎng)中會(huì)向著它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理15、長(zhǎng)春花是野生花卉，其所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。研究人員利用已免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞通過雜交技術(shù)生產(chǎn)出能夠同時(shí)特異性識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿的雙特異性單克隆抗體，制備過程如圖所示。下列說法錯(cuò)誤的是（）

A.①過程要多次注射抗原，其目的是刺激小鼠產(chǎn)生更多的抗體B.經(jīng)③過程獲得的雜交瘤細(xì)胞都能產(chǎn)生抗癌胚抗原的特異性抗體C.圖中“?”處只能使用PEG融合法和電融合法來誘導(dǎo)細(xì)胞融合D.制備雙特異性抗體的目的是使長(zhǎng)春堿能定向地作用于癌細(xì)胞評(píng)卷人得分三、填空題(共5題，共10分)16、本課題對(duì)能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行了初步的篩選。但是，這只是分離純化菌種的第一步。對(duì)分離的菌種作進(jìn)一步的鑒定，還需要借助生物化學(xué)的方法。在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的___________將尿素分解成了_____________。氨會(huì)使培養(yǎng)基的________________，pH______________。因此，我們可以通過檢測(cè)培養(yǎng)基______________來判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_____________，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果pH升高，指示劑將變________________。17、載體具備的條件：①_____。②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入。③______。18、常用的轉(zhuǎn)化方法：

將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是_______，其次還有______和______等。

將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是_______。此方法的受體細(xì)胞多是_______。

將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：原核生物作為受體細(xì)胞的原因是_______，最常用的原核細(xì)胞是_____，其轉(zhuǎn)化方法是：先用______處理細(xì)胞，使其成為______，再將______溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。19、假設(shè)PCR反應(yīng)中，只有一個(gè)DNA片段作為模板，請(qǐng)計(jì)算在30次循環(huán)后，反應(yīng)物中大約有個(gè)這樣的_______個(gè)DNA片段，一共需要加入______________個(gè)引物。20、純化DNA，去除雜質(zhì)有________________個(gè)方案。評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共24分)21、（1）在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮______、______和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類型容易選擇、______、______等優(yōu)點(diǎn)；因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。

（2）在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行________（消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和______；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能__________。

（3）若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的_______。

（4）通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的____________。

（5）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是_________。

（6）若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過_______處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。22、炭疽；是一種由炭疽芽孢桿菌引起的人獸共患性傳染病，也是我國(guó)規(guī)定的乙類傳染病?；卮鹣铝杏嘘P(guān)問題：

(1)人通常是通過接觸患炭疽的動(dòng)物或動(dòng)物制品被感染，皮膚炭疽病在人類炭疽病中最為常見，這類患者的皮膚滲出物中含有炭疽芽孢桿菌。皮膚炭疽病疑似患者就醫(yī)時(shí)，醫(yī)生先要取患者的皮膚滲出物稀釋后涂布到固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過一段時(shí)間的培養(yǎng)獲得的平板可能是_____。A．B．C．D．(2)挑取上述培養(yǎng)基上的菌落進(jìn)行如圖所示實(shí)驗(yàn)（注：實(shí)驗(yàn)組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽芽孢桿菌）。

①該實(shí)驗(yàn)的目的是_____。

②對(duì)照組試管中應(yīng)加入_____，實(shí)驗(yàn)過程中為避免雜菌污染進(jìn)行的操作包括_____（至少寫出兩點(diǎn)）。

③實(shí)驗(yàn)結(jié)果為_____時(shí)；表明該疑似患者被炭疽芽孢桿菌感染。

④實(shí)驗(yàn)過程中需將錐形瓶固定在搖床上，在35℃下振蕩培養(yǎng)24h，直至液體培養(yǎng)基變渾濁。振蕩培養(yǎng)說明炭疽芽孢桿菌的代謝類型是_____，振蕩培養(yǎng)的目的是_____。液體培養(yǎng)基變渾濁的原因是_____。

(3)對(duì)炭疽芽孢桿菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，選用10-4、10-5、10-6三個(gè)稀釋度的菌液，各取0．2mL涂布，每個(gè)稀釋度作三次重復(fù)，經(jīng)24h恒溫培養(yǎng)后結(jié)果如表。稀釋度10-410-510-6平板編號(hào)A1A2A3B1B2B3C1C2C3菌落數(shù)31529830245535112911

由表可知，最適合計(jì)數(shù)的稀釋度為_____，原因是_____。23、科學(xué)家的發(fā)現(xiàn)給人類的生活帶來了無限的想象；他們采集了某深海海域的沉積物樣品，分離；鑒定得到其中的深海放線菌，以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問題：

(1)研究人員欲篩選出深海放線菌進(jìn)行研究，取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后取菌液通過_______________法接種到高氏一號(hào)（加數(shù)滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的酚）培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

(2)通過PCR技術(shù)擴(kuò)增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進(jìn)行菌株的種屬鑒定。PCR技術(shù)中起關(guān)鍵作用的酶是_____________。該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR產(chǎn)物一般可通過_________________鑒定。

(3)科學(xué)家還將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中。2~3周后，這些細(xì)胞顯示出ES細(xì)胞的形態(tài)、具有活躍的分裂能力，它們就是iPS細(xì)胞。在這個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用是_______________如何證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用？請(qǐng)寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路______________評(píng)卷人得分五、綜合題(共4題，共32分)24、炭疽病是一種由炭疽桿菌引發(fā)的急性傳染病；炭疽桿菌主要以孢子形式存在，其孢囊具有保護(hù)功能，能使細(xì)菌不受陽(yáng)光；高溫和消毒劑的影響而在自然界中長(zhǎng)期存活。通過空氣傳播的呼吸性炭疽病后果最為嚴(yán)重，致死率為95%～100%。因此，炭疽桿菌是一種重要的生物武器。請(qǐng)回答下列相關(guān)問題。

（1）生物武器多具有_______________________（答出兩點(diǎn)即可）等特點(diǎn)。

（2）下列有關(guān)炭疽桿菌致病特點(diǎn)的敘述，不正確的是________。

A．傳染性極強(qiáng)。

B．感染者死亡率極高。

C．僅0.001mg炭疽桿菌就能引發(fā)炭疽病。

D．使人精神失常。

（3）1998年6月27日，中美聯(lián)合聲明中重申了在任何情況下________、不生產(chǎn)、________生物武器，并反對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散。25、用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶（CarE）制劑的流程如下圖所示。據(jù)圖回答下列問題：

（1）①過程所需的酶是____________。在構(gòu)建基因表達(dá)載體過程中，構(gòu)建的重組質(zhì)粒上啟動(dòng)子的本質(zhì)是__________，作用是_________________________。

（2）實(shí)現(xiàn)②過程常用PCR技術(shù)，該技術(shù)中需用到的酶是__________，該技術(shù)的前提是要有____________________________；以便合成引物。

（3）過程③將基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌時(shí)，首先用________處理大腸桿菌，目的是_____________________。26、玉米是重要的糧食作物；其葉片細(xì)胞中的P蛋白是一種水通道蛋白，由P基因編碼，在植物生長(zhǎng)發(fā)育過程中對(duì)水分的吸收具有重要的調(diào)節(jié)功能?？蒲腥藛T成功培育出超量表達(dá)P蛋白的轉(zhuǎn)基因玉米，回答下列問題。

(1)利用PCR技術(shù)以圖1中的DNA片段為模板擴(kuò)增P基因，需要的引物有______________（從A；B、C、D四種單鏈DNA片段中選擇）。

(2)培育超量表達(dá)P蛋白的轉(zhuǎn)基因玉米過程中所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖2所示（Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞，并整合到該細(xì)胞的染色體DNA上）。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，應(yīng)優(yōu)先選用______________酶組合，理由是_____________；不選用圖中其它限制酶的原因是_____________。

(3)將農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入_____________（填潮霉素/卡那霉素/潮霉素或卡那霉素）進(jìn)行篩選。

(4)P蛋白在玉米株系的表達(dá)量如圖3所示，可作為超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米的生理特性研究實(shí)驗(yàn)材料的有_____________。27、針對(duì)新冠病毒（SARS-CoV-2）的重組蛋白疫苗；核酸疫苗（包括DNA疫苗和RNA疫苗）等疫苗都在研發(fā)當(dāng)中。下圖為其中一種疫苗的研發(fā)思路；圖中①～⑦表示過程，虛線箭頭表示NcoI、SphI、NheI、BamHI的酶切位點(diǎn)（四種酶的識(shí)別序列詳見表），標(biāo)記基因SUC2控制合成蔗糖酶，使P型酵母菌能利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存。

。限制酶NcoⅠSphⅠNheⅠBamHⅠ識(shí)別序列和切割位點(diǎn)C↓CATGGGCATG↓CG↓GATCCG↓CTAGC

（1）圖中①過程需要使用___________酶先得到cDNA，再使用___________技術(shù)擴(kuò)增得到S基因。

（2）為使③過程順利進(jìn)行，需先使用限制酶___________和___________切割質(zhì)粒B，選用兩種限制酶對(duì)新冠病毒的S基因進(jìn)行切割的目的是___________（答出1點(diǎn)即可）。

（3）圖中表示篩選的過程是___________（填編號(hào)），篩選時(shí)應(yīng)使用以___________為唯一碳源的培養(yǎng)基。

（4）重組疫苗注入志愿者體內(nèi)后，S蛋白基因指導(dǎo)合成的S蛋白作為___________，刺激機(jī)體產(chǎn)生能與之相結(jié)合的抗體，抗體的分泌量可作為檢測(cè)疫苗對(duì)志愿者免疫效果的指標(biāo)。參加臨床試驗(yàn)的志愿者需要滿足的條件之一是___________（選填“有”或“無”）SARS-CoV-2感染史，理由是___________。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、D【分析】【分析】

無菌技術(shù)。

1．無菌技術(shù)的主要內(nèi)容①對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間；操作者的衣著和手；進(jìn)行清潔和消毒；②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌；③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行；④實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。

2．實(shí)驗(yàn)室常用的消毒方法：煮沸消毒；化學(xué)藥物消毒；紫外線消毒。

3．實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法。

①灼燒滅菌：將微生物的接種工具；如接種環(huán)；接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速?gòu)氐椎販缇?，此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌；

②干熱滅菌：能耐高溫的；需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管；培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；

③高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)；為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30min。

【詳解】

A；步驟①為巴氏消毒法；這種消毒法的特點(diǎn)是既能殺死牛奶中的微生物，又不破壞牛奶中的營(yíng)養(yǎng)成分，步驟②采用無菌水進(jìn)行梯度稀釋，步驟③中的牛肉膏蛋白胨都能為微生物的生長(zhǎng)提供碳源和氮源，A正確；

B；實(shí)驗(yàn)中對(duì)試管、培養(yǎng)皿的滅菌可采用的方法是干熱滅菌；這種方法適用的是能耐高溫且需要保持干燥的物品，B正確；

C；培養(yǎng)基的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法；C正確；

D；平板劃線法不能對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)；應(yīng)該用稀釋涂布平板法，D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】2、A【分析】【分析】

分析題圖：圖示表示莖尖外植體大小對(duì)苗的脫毒率和成活率的影響。莖尖越小；脫毒率越高，成苗率越低。在莖尖外植體大小為0.27mm時(shí)，脫毒率和成苗率均較高，因此馬鈴薯脫毒培養(yǎng)中莖尖外植體的適宜大小為0.27mm。

【詳解】

A；馬鈴薯莖尖病毒極少甚至無病毒；因此可利用馬鈴薯莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)形成脫毒苗，所依據(jù)的原理是細(xì)胞全能性，A錯(cuò)誤；

B；培育脫毒苗的過程中利用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)；涉及脫分化和再分化兩個(gè)階段，B正確；

C；據(jù)圖可知；實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明莖尖越小，脫毒率越高，成苗率越低，C正確；

D；莖尖外植體大小為0.27mm時(shí)；脫毒率和成苗率均較高，因此馬鈴薯脫毒培養(yǎng)中莖尖外植體的適宜大小為0.27mm，D正確。

故選A。3、B【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，可用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)，最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；多次給小鼠注射適宜濃度的抗原；引起小鼠發(fā)生體液免疫，可以獲得更多的漿細(xì)胞，A正確；

B；禽流感病毒沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)；不能在培養(yǎng)液中獨(dú)立生存，B錯(cuò)誤；

C；用滅活的病毒可誘導(dǎo)漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞發(fā)生融合形成雜交瘤細(xì)胞；除外還可以用聚乙二醇誘導(dǎo)融合，C正確；

D；雜交瘤細(xì)胞既具有漿細(xì)胞能合成抗體的特點(diǎn)；也具有骨髓瘤細(xì)胞無限繁殖的特點(diǎn)，骨髓瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體，因此單克隆抗體相比血清抗體特異性更強(qiáng)，并且可以大量制備，D正確。

故選B。4、D【分析】【分析】

1．圖中a是放射冠，b是卵細(xì)胞間隙；c是雄原核，d是雌原核。

2．圖中數(shù)字表示的過程是：①精子穿過放射冠；②精子穿過透明帶；③精子進(jìn)入卵細(xì)胞膜；④精卵原核融合。

3．在精卵相遇之前；精子在雌性動(dòng)物生殖道發(fā)生相應(yīng)的生理變化，具有了受精能力，這個(gè)過程叫做精子獲能。卵子一般在排出后都要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟，當(dāng)達(dá)到減數(shù)第二次分裂中期時(shí)，才具備與精子受精的能力。

4．在精卵相遇時(shí)精子發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放出頂體酶，該酶可溶解透明帶外面的卵丘細(xì)胞群和細(xì)胞間的物質(zhì)，形成越放射冠的通道。在精子觸及到卵細(xì)胞的瞬間會(huì)發(fā)生透明帶反應(yīng)，這是防止多精入卵的第一道屏障；同時(shí)精子膜卵細(xì)胞膜融合，精子進(jìn)入卵的第二道屏障。同時(shí)精子的頭部和尾部分離，由此看出精子進(jìn)入卵子的部分幾乎只有頭部的細(xì)胞核。

【詳解】

A；看圖；a結(jié)構(gòu)的名稱是放射冠，A錯(cuò)誤；

B；受精之前；精子在雌性動(dòng)物生殖道發(fā)生相應(yīng)的生理變化，具有了受精能力，這個(gè)過程叫做精子獲能，B錯(cuò)誤；

C；在精卵相遇時(shí)精子發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放出頂體酶，由核糖體合成，C錯(cuò)誤；

D；由上述分析可知c是雄原核；d是雌原核，D正確。

故選D。5、D【分析】【分析】

題圖分析：圖示表示囊胚期胚胎示意圖；其中①為透明帶，在囊胚期后期會(huì)破裂；②為滋養(yǎng)層，將來分化成胎盤和胎膜；③為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來分化形成各種組織。

【詳解】

A；由分析可知；圖中①②③依次為透明帶、滋養(yǎng)層、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，A正確；

B；圖示為囊胚期；高等哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育中的細(xì)胞分化開始于該時(shí)期，終止于生命結(jié)束，B正確；

C；孵化是指胚胎（囊胚）從①透明帶中伸展出來的過程；C正確；

D；圖示為囊胚期；其中②滋養(yǎng)層將來發(fā)育成胎盤和胎膜，③內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胎兒的各種組織，D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】6、C【分析】【分析】

題圖分析：利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育雜種植物細(xì)胞；具體過程包括誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合成雜種細(xì)胞和植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育成雜種植株兩過程，該過程的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性。

【詳解】

A；植物體細(xì)胞雜交的去壁過程；需要將植物組織置于含纖維素酶和果膠酶的等滲溶液中，或略大于細(xì)胞液滲透壓，否則原生質(zhì)體可能吸水漲破，A正確；

B；雜種細(xì)胞組織培養(yǎng)形成雜種植物；需用不同濃度的細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素誘導(dǎo)，如誘導(dǎo)生根的過程中需要培養(yǎng)基中含有較多的生長(zhǎng)素，而在誘導(dǎo)生芽的過程中需要在培養(yǎng)基中加入較多的細(xì)胞分裂素，B正確；

C；“白菜—甘藍(lán)”相對(duì)于白菜、甘藍(lán)；發(fā)生了染色體數(shù)目變異，屬于異源四倍體，可育，C錯(cuò)誤；

D；有性雜交不能突破生殖隔離；需在同一物種的雌雄個(gè)體之間進(jìn)行，而植物體細(xì)胞雜交打破了這個(gè)障礙，D正確。

故選C。7、D【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中；使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。

【詳解】

A；用基因敲除的猴的體細(xì)胞通過克隆技術(shù)成功培育出克隆疾病猴；該過程是屬于無性繁殖，所以基因組成差異小，可減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾，A正確；

B；胚胎發(fā)育會(huì)受到環(huán)境因素的影響；受精卵經(jīng)基因編輯后形成的胚胎不一定都成功發(fā)育為克隆疾病猴，B正確；

C；克隆特定疾病模型的動(dòng)物；還能為研究該疾病的致病機(jī)制和開發(fā)相應(yīng)的藥物提供幫助，所以克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機(jī)制和開發(fā)相應(yīng)藥物，C正確；

D；不可以運(yùn)用該基因編輯技術(shù)進(jìn)行生殖性克隆人的研究；D錯(cuò)誤。

故選D。8、D【分析】【分析】

據(jù)圖分析；①是誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的過程；②是再生出新的細(xì)胞壁的過程；③是脫分化；④是再分化。

【詳解】

A；植物細(xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠；根據(jù)酶的專一性，圖中“去壁”要使用的酶為纖維素酶和果膠酶，A錯(cuò)誤；

B；①過程常采用的物理法有離心、振動(dòng)、電激等；用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑來誘導(dǎo)細(xì)胞融合是化學(xué)法，B錯(cuò)誤；

C；③是雜種細(xì)胞形成愈傷組織的過程；④是愈傷組織形成雜種植株的過程，故③過程和④過程分別表示脫分化和再分化，C錯(cuò)誤；

D；分析題意可知；兩種植物細(xì)胞都為二倍體，它們的基因型分別為AABB、ddee，雜種植株能集中兩個(gè)親本的遺傳物質(zhì)，其基因型為AABBddee，D正確。

故選D。9、A二、多選題(共6題，共12分)10、A:C【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)是通過體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

【詳解】

A；在采集卵母細(xì)胞之前；需要給供卵者注射適量的促性腺激素，促進(jìn)超數(shù)排卵，A正確；

B；從卵巢中吸取的卵母細(xì)胞；必須經(jīng)體外培養(yǎng)成熟后才能與獲能的精子受精，B錯(cuò)誤；

C；受精過程中；卵母細(xì)胞會(huì)發(fā)生透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)，這是防止多精入卵的兩道屏障，C正確；

D；以治療為目的的設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)；是救治患者最好、最快捷的辦法之一，不是有利于生育健康的下一代，并存在倫理問題，D錯(cuò)誤。

故選AC。

【點(diǎn)睛】11、A:C:D【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖；（2）在無氧條件下，產(chǎn)生酒精和二氧化碳。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

3；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【詳解】

A；果酒制作時(shí)；除了產(chǎn)生酒精，還會(huì)產(chǎn)生大量二氧化碳，因此發(fā)酵瓶中容易產(chǎn)生較多泡沫，A正確；

B；用果酒制作果醋過程中；液面出現(xiàn)一層白色菌膜，而不是褐色菌膜，B錯(cuò)誤；

C；制作腐乳過程中；豆腐表面發(fā)黏且長(zhǎng)有白色菌絲，C正確；

D；用固定化酵母進(jìn)行酒精發(fā)酵；酒精濃度越來越高，因此凝膠珠逐漸浮上液面，D正確。

故選ACD。

【點(diǎn)睛】12、B:C:D【分析】【分析】

用酒曲釀酒菌種是酵母菌；代謝類型是兼性厭氧型真菌，屬于真核細(xì)胞，條件是18～25℃；前期需氧，后期不需氧。

【詳解】

A、用酒曲釀酒是利用了微生物細(xì)胞呼吸的原理，進(jìn)行的是酵母菌的無氧發(fā)酵，不能一直通入O2；A錯(cuò)誤；

B；由于呼吸作用會(huì)產(chǎn)熱；故會(huì)導(dǎo)致酒液溫度產(chǎn)生變化，B正確；

C、起泡是由微生物進(jìn)行呼吸作用產(chǎn)生的CO2釋放到發(fā)酵液中形成的；C正確；

D；“曲勢(shì)盡”可能是隨著發(fā)酵的進(jìn)行甕中液體pH降低、酒精濃度過高導(dǎo)致酵母菌大量死亡；D正確。

故選BCD。13、A:B:C【分析】【分析】

1；據(jù)圖分析可知；①號(hào)部位為病斑區(qū)域，即腐爛部位，①與②交界處為“病鍵交界處”，是腐爛部位與未腐爛部位交界的地方，②③④⑤均為未腐爛部位，且距離腐爛部位依次變遠(yuǎn)。

2；在曲線圖中；病班部位的Pat含量最高，而距離病班部位越來越遠(yuǎn)，Pat含量就會(huì)越來越少。

【詳解】

A；由曲線圖可知；該實(shí)驗(yàn)自變量是腐爛蘋果中的病斑大小和離病斑距離大小，A正確；

B；青霉素可以抑制細(xì)菌生長(zhǎng)；可向擴(kuò)展青霉培養(yǎng)液中加入青霉素以防止雜菌污染，B正確；

C；病斑越大；說明病斑中擴(kuò)展青霉素的密度就越大，產(chǎn)生的Pat就越多，C正確；

D；如果只去除腐爛部位；那么未腐爛部位中的Pat仍然會(huì)對(duì)人體造成傷害，存在健康風(fēng)險(xiǎn)，故窩爛蘋果去除腐爛部位后不能食用，D錯(cuò)誤。

故選ABC。14、B:C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理：

（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對(duì)酶；高溫和洗滌劑的耐受性。

（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色。

【詳解】

A；DNA不溶于酒精溶液；但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精，可將DNA與蛋白質(zhì)分離，A錯(cuò)誤；

B；在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，B正確；

C；PCR是一種體外擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)；利用了DNA熱變性原理，通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合，包括：高溫變性（解鏈）→低溫復(fù)性→中溫延伸三個(gè)步驟，C正確；

D；由于同性相斥、異性相吸；帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)，電泳鑒定DNA利用了DNA在電場(chǎng)中會(huì)向著它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理，D正確。

故選BCD。15、A:B:C【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融臺(tái)，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基坮養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；①過程要多次注射抗原；其目的是刺激小鼠產(chǎn)生更多的已免疫的B淋巴細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；③為選擇培養(yǎng)基；經(jīng)選擇培養(yǎng)基獲得的雜交瘤細(xì)胞不一定能產(chǎn)生所需抗體，要產(chǎn)生所需抗體還要進(jìn)行抗體檢測(cè)陽(yáng)性和克隆化培養(yǎng)，B錯(cuò)誤；

C；誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合可以使用PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等；C錯(cuò)誤；

D；雙特異性抗體中的癌胚抗原抗體能將藥物定向引導(dǎo)至和癌細(xì)胞結(jié)合；從而避免對(duì)其他細(xì)胞的破壞，D正確。

故選ABC。三、填空題(共5題，共10分)16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】脲酶氨堿性增強(qiáng)升高pH的變化酚紅指示劑紅17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法顯微注射技術(shù)受精卵繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少大腸桿菌Ca2+感受態(tài)細(xì)胞重組表達(dá)載體DNA分子19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2030×22030×2－220、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】3四、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共24分)21、略

【分析】【分析】

1；大腸桿菌屬于細(xì)菌；是原核生物。微生物營(yíng)養(yǎng)成分主要有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等，另外還需要注意滲透壓、溫度、pH等條件。大腸桿菌常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料．微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌技術(shù)，防止外來雜菌的污染。

2；微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌操作。使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過程稱為滅菌；常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等。

【詳解】

（1）大腸桿菌具有體積小；結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點(diǎn)；培養(yǎng)過程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。

（2）滅菌使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物；所以對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌；消毒使用較為溫和的物理或化學(xué)方法，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物，操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒，紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。

（3）稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液，分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)保證樣品稀釋的比例適合。

（4）對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀；大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。

（5）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)；在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。

（6）因?yàn)橛械拇竽c桿菌會(huì)釋放一種強(qiáng)烈的毒素；并可能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記大腸桿菌的培養(yǎng)條件以及其作為遺傳實(shí)驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)，區(qū)分掌握不同材料消毒和滅菌的方法，識(shí)記菌種鑒定的方法等，屬于基礎(chǔ)題?！窘馕觥竣?溫度②.酸堿度③.易培養(yǎng)④.生活周期短⑤.滅菌⑥.消毒⑦.損傷DNA的結(jié)構(gòu)⑧.比例合適⑨.鑒定(或分類)⑩.將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生.?.滅菌22、略

【分析】【分析】

1；稀釋涂布平板法：將待測(cè)樣品制成均勻的系列稀釋液；盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開，使成單個(gè)細(xì)胞存在，再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。2、平板劃線法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞，用接種環(huán)在平板表面上作多次由點(diǎn)到線的劃線稀釋而獲得較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞，并讓其成長(zhǎng)為單菌落的方法。

【詳解】

（1）A；B、C中的菌落分布較均勻；是通過稀釋涂布平板法獲得的，而D是通過平板劃線法獲得的，劃線平板法是從上一次劃線的末端開始劃線。故選ABC。

（2）①?gòu)恼麄€(gè)實(shí)驗(yàn)過程可以看出；實(shí)驗(yàn)通過對(duì)皮膚滲出物稀釋培養(yǎng)形成的菌落進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)后，利用噬菌體的作用檢測(cè)其中是否含有炭疽芽孢桿菌。②對(duì)照組中加入的液體不應(yīng)含有噬菌體，因此應(yīng)加入等量的生理鹽水；在進(jìn)行微生物培養(yǎng)時(shí)為防止雜菌的混入，消毒和滅菌工作是關(guān)鍵，主要包括對(duì)操作的空間；操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒；將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌；實(shí)驗(yàn)操作在酒精燈火焰附近進(jìn)行；操作過程中避免已經(jīng)滅菌的材料用具與周圍物品相接觸等。③若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度低于對(duì)照組，說明實(shí)驗(yàn)組中的炭疽芽孢桿菌被噬菌體侵染與破壞，即該疑似患者感染了炭疽芽孢桿菌。④炭疽芽孢桿菌屬于細(xì)菌，能寄生在人和動(dòng)物體內(nèi)，說明它是異養(yǎng)型生物，培養(yǎng)時(shí)需要借助搖床振蕩培養(yǎng)，說明它是需氧型生物；振蕩培養(yǎng)的目的是增加培養(yǎng)液中的氧氣含量，使細(xì)菌與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充分接觸，有利于炭疽芽孢桿菌的大量繁殖；培養(yǎng)液變渾濁表明炭疽芽孢桿菌大量繁殖。

（3）分析表中數(shù)據(jù)可知，只有稀釋度為10-5時(shí)菌落數(shù)在30~300之間，適合用于計(jì)數(shù)。【解析】(1)ABC

(2)檢驗(yàn)皮膚炭疽病疑似患者的皮膚滲出物中是否含有炭疽芽孢桿菌與實(shí)驗(yàn)組等量的生理鹽水對(duì)操作的空間；操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒；將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌；實(shí)驗(yàn)操作在酒精燈火焰附近進(jìn)行；操作過程中避免已經(jīng)滅菌的材料用具與周圍物品相接觸實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對(duì)照組低（異養(yǎng)）需氧型增加培養(yǎng)液中的氧氣含量；使細(xì)菌與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充分接觸炭疽芽孢桿菌大量繁殖。

(3)10-5稀釋度為10-5時(shí)菌落數(shù)在30~300之間23、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）分析題意可知；研究人員取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后可通過稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

（2）PCR技術(shù)是一項(xiàng)通過體外控制溫度擴(kuò)增DNA的技術(shù)，該技術(shù)中由于溫度較高，起關(guān)鍵作用的酶是耐高溫DNA聚合酶；PCR擴(kuò)增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析題意，該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是：引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計(jì)合成的；PCR產(chǎn)物一般可通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定：凝膠中的DNA分子通過染色；可以在波長(zhǎng)為300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來。

（3）分析題意，科學(xué)家將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中，該過程中逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細(xì)胞；分析題意，實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖莍PS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用，故實(shí)驗(yàn)的自變量是外源基因的有無，因變量是IPS細(xì)胞的產(chǎn)生情況，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循對(duì)照與單一變量原則，故可設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)如下：將轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)化成了iPS細(xì)胞，則可以證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用?！窘馕觥?1)稀釋涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高溫DNA聚合酶引物能與16SrRNA基因特異性結(jié)合（引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計(jì)合成的）瓊脂糖凝膠電泳。

(3)逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細(xì)胞。將轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)化成了iPS細(xì)胞，則可以證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用五、綜合題(共4題，共32分)24、略

【分析】【分析】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員；牲畜、毀壞植物的武器。生物武器又是生物制劑、載體和分散手段的綜合利用。生物武器自誕生以來；給人類的生存安全構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。

【詳解】

（1）生物武器多具有致病力強(qiáng)；傳染性大；有潛伏期，一般在潛伏期癥狀不明顯，難以及時(shí)發(fā)現(xiàn)；傳染面積廣，危害時(shí)間長(zhǎng)；傳播途徑多；造價(jià)低，技術(shù)難度不大；隱秘性強(qiáng)等特點(diǎn)。

（2）ABCD；炭疽桿菌致病特點(diǎn)包括傳染性極強(qiáng)、感染者死亡率極高、僅0.001mg炭疽桿菌就能引發(fā)炭疽病等；不包括使人精神失常。ABC正確，D錯(cuò)誤。

故選D。

（3）1998年6月27日；中美聯(lián)合聲明中重申了在任何情況下不發(fā)展；不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器，并反對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散。

【點(diǎn)睛】

本題考查生物武器的特點(diǎn)和對(duì)待生物武器的態(tài)度，意在考查學(xué)生的識(shí)記能力和判斷能力，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問題的能力?！窘馕觥竣?致病力強(qiáng)，傳染性大；有潛伏期，一般在潛伏期癥狀不明顯，難以及時(shí)發(fā)現(xiàn)；傳染面積廣，危害時(shí)間長(zhǎng)；傳播途徑多；造價(jià)低，技術(shù)難度不大；隱秘性強(qiáng)②.D③.不發(fā)展④.不儲(chǔ)存25、略

【分析】【分析】

基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)步驟：

①目的基因的獲取：包含基因文庫(kù)和部分基因文庫(kù)；其中部分基因文庫(kù)常用的是cDNA文庫(kù)，當(dāng)使用cDNA作為目的基因來源時(shí)，因cDNA不包含啟動(dòng)子和終止子，常常需要將目的基因插入在質(zhì)粒載體的啟動(dòng)子與終止子之間。

②基因表達(dá)載體的構(gòu)建：需要用到限制酶和DNA連接酶以及基因運(yùn)載體；常見運(yùn)載體有λ噬菌體的衍生物，動(dòng)植物病毒，質(zhì)粒。

③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；對(duì)不同的受體細(xì)胞所采用方法不同，對(duì)雙子葉植物和裸子植物采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，對(duì)植物還可以采用花粉管通道法和基因槍法；對(duì)動(dòng)物常采用顯微注射技術(shù)導(dǎo)入目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；對(duì)于微生物，如大腸桿菌，常用感受態(tài)細(xì)胞法。

④目的基因的檢測(cè)與鑒定：可采用分子雜交；DNA分子雜交，抗原—抗體雜交技術(shù)，或者個(gè)體生物學(xué)水平的抗蟲，抗病毒接種實(shí)驗(yàn)來進(jìn)行。

【詳解】

（1）題圖中過程①表示利用mRNA通過反轉(zhuǎn)錄法合成相應(yīng)的DNA的過程；需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化?；虮磉_(dá)載體的組成包括目的基因；標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子，復(fù)制原點(diǎn)等，其中啟動(dòng)子的本質(zhì)是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，其作用是供RNA聚合酶的識(shí)別、結(jié)合以驅(qū)動(dòng)目的基因的轉(zhuǎn)錄。

（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)需要熱穩(wěn)定性的DNA聚合酶（常用Taq酶）。PCR擴(kuò)增目的基因的前提是要有