動(dòng)物的克隆課件知識(shí)課件

第三節(jié)動(dòng)物的克隆1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（一）動(dòng)物細(xì)胞、組織培養(yǎng)動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞得以生存并保持生命活動(dòng)現(xiàn)象生長、分裂乃至接觸抑制和有規(guī)律的衰老、死亡性能等一、動(dòng)物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)機(jī)械消化或胰酶消化（1）定義動(dòng)物組織在體外及人工條件下維持生活狀態(tài)或生長特性。2、動(dòng)物組織培養(yǎng)3.動(dòng)物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)系單個(gè)細(xì)胞轉(zhuǎn)入特殊培養(yǎng)液中進(jìn)行原代培養(yǎng)細(xì)胞形成生長暈并增大分裝到多個(gè)卡氏瓶中進(jìn)行傳代培養(yǎng)?細(xì)胞系泛指可傳代的細(xì)胞細(xì)胞株是具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞系細(xì)胞系與細(xì)胞株的關(guān)系（3）動(dòng)物組織培養(yǎng)的條件:1.無菌無毒的環(huán)境2.營養(yǎng)3.溫度和pH4.氣體環(huán)境植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物組織培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)結(jié)果細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基蔗糖植物激素葡萄糖動(dòng)物血清植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系（三）克隆培養(yǎng)法把一個(gè)單細(xì)胞從群體中分離出來單獨(dú)培養(yǎng)，使之繁衍成一個(gè)新的細(xì)胞群體的技術(shù)1、定義：未經(jīng)克隆的異質(zhì)性細(xì)胞系純系：分離克隆經(jīng)克隆以后的細(xì)胞的后裔細(xì)胞群，來源于一個(gè)共同的祖細(xì)胞。2、產(chǎn)物:遺傳性狀均一、表現(xiàn)的性狀相似的純系3、細(xì)胞克隆的基本要求:必須保證所建成的克隆來源于單個(gè)細(xì)胞單細(xì)胞不如群體細(xì)胞原代培養(yǎng)細(xì)胞和有限細(xì)胞系不如無限細(xì)胞系、轉(zhuǎn)化細(xì)胞系和腫瘤細(xì)胞4、克隆對(duì)象的選擇依據(jù)：選擇對(duì)培養(yǎng)環(huán)境具有較大適應(yīng)范圍和具有較強(qiáng)獨(dú)立生存能力的細(xì)胞。5、提高細(xì)胞克隆形成率的措施選擇適宜的培養(yǎng)基、添加血清、以滋養(yǎng)細(xì)胞支持生長、激素刺激、使用CO2培養(yǎng)箱調(diào)節(jié)PH6、細(xì)胞克隆的用途從普通細(xì)胞系中分離出缺乏特殊基因的突變細(xì)胞系，方便科學(xué)研究1.動(dòng)物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度二、動(dòng)物的克隆繁殖全能干細(xì)胞多能干細(xì)胞專能干細(xì)胞：低等動(dòng)物細(xì)胞的全能性一般比較容易體現(xiàn)。無論分化或癌變，變化的都是表現(xiàn)型，基因組完整性可以保留2.動(dòng)物難以克隆的原因細(xì)胞的分化使得細(xì)胞發(fā)生了基因的差異表達(dá)，有的基因開放，有的基因關(guān)閉已分化的體細(xì)胞，基因組中基因的活動(dòng)很不完全，不能像受精卵那樣發(fā)揮細(xì)胞的全能性3.動(dòng)物核移植實(shí)驗(yàn)和克隆繁殖利用一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核（核供體）來取代另一細(xì)胞中的細(xì)胞核，形成重建的“合子”。

核移植：實(shí)踐證明：胚胎細(xì)胞核的移植成功率遠(yuǎn)高于成體細(xì)胞?？寺⊙蚺嘤^程黑面綿羊去核卵細(xì)胞白面綿羊乳腺細(xì)胞核細(xì)胞核移植重組細(xì)胞電脈沖刺激8細(xì)胞胚胎胚胎移植另一頭綿羊的子宮妊娠、出生克隆羊多利體細(xì)胞核移植技術(shù)實(shí)例討論（閱讀P36-37