《白果總黃酮優(yōu)化提取工藝探究》9100字（論文）

第1頁白果總黃酮優(yōu)化提取工藝研究目錄TOC\o"1-2"\h\u16027摘要： 17535前言 2323941儀器、試劑和材料 4323571.1儀器 43801.2試劑材料 4275661.3材料 482902實(shí)驗(yàn)方法 5326052.1白果總黃酮的含量測定 598202.2白果中總黃酮的提取工藝研究 6296923實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論 10225173.1白果總黃酮含量測定 1018290超聲波輔助提取法提取 10248173.2白果中總黃酮的提取工藝探究 1028163微波輔助提取正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果 16178703.3討論 1624150結(jié)論 177733參考文獻(xiàn) 18摘要：目的優(yōu)化白果總黃酮的提取工藝，確定白果總黃酮的最佳提取條件。方法以白果為原料，采用超聲波提取法和微波輔助提取法，分別以乙醇濃度、提取時(shí)間、提取功率、液料比四個(gè)因素為基礎(chǔ)分別設(shè)計(jì)單因素實(shí)驗(yàn)，并對(duì)各個(gè)因素的最佳點(diǎn)進(jìn)行優(yōu)擇，選定正交試驗(yàn)所需的數(shù)據(jù)范圍，依據(jù)此范圍設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)，確定提取白果黃酮的最佳條件。結(jié)果超聲波提取的最佳提取條件為功率200W，液料比35:1，提取時(shí)間60min，乙醇濃度為70%，白果總黃酮的最佳提取率為0.69%；微波輔助提取的最佳提取條件為功率400W，液料比25:1，提取時(shí)間20min，乙醇濃度為70%，白果總黃酮的最佳提取率為0.507%。結(jié)論由兩種黃酮提取法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知超聲波輔助提取法優(yōu)于微波輔助提取法。關(guān)鍵詞：超聲波提取；微波輔助提取；白果；黃酮前言白果又稱為銀杏果。銀杏在中國、日本、朝鮮、韓國、加拿大、新西蘭、澳大利亞、美國、法國、俄羅斯等國家和地區(qū)均有大量分布。銀杏的自然地理分布范圍很廣據(jù)調(diào)查全國有23個(gè)?。▍^(qū)）有銀杏古樹分布[1]。白果主要含黃酮類化合物,其主要成分為山奈黃素、槲皮素、蘆丁、白果素、銀杏素、穗花雙黃酮等。尚含奎寧酸等有機(jī)酸、銀杏酸、銀杏酚等酚類,以及銀杏醇、蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、鈣、磷、鐵、胡蘿ト素等[2]。其毒性成分為白果酚。銀杏酚酸、白果醇等具有殺蟲效果[3]。銀杏葉性平，味甘、苦、澀，歸心經(jīng)、肺經(jīng)，是一味常見中藥，具有活血化瘀、通絡(luò)止痛，斂肺平喘，化濁降脂，主治瘀血阻絡(luò)、胸痹心痛、肺虛咳喘等[4]。種子含少量氰、赤霉素和動(dòng)力精樣物質(zhì)。內(nèi)胚乳中還分離出兩種核糖核酸酶。銀杏果實(shí)、葉片和樹皮均有很高的藥食價(jià)值，主要含有黃酮類、內(nèi)酯類、有機(jī)酚酸類、聚戊烯醇類、多糖類等生物活性物質(zhì)[5-7]，其中黃酮類和內(nèi)酯類是主要藥用成分[8]。目前，銀杏的藥用成分在臨床上主要用于治療心腦血管疾病、抗氧化[9]、抗腫瘤、抗衰老、抗炎、降低血液黏度、降血脂、提高機(jī)體免疫力等方面[10-13]。白果有抗結(jié)核、抗菌作用，并有祛痰作用[14][15]。銀杏外種皮具有鎮(zhèn)咳祛痰，降壓，增加冠脈流量和血管流量，降低心肌耗氧量，提高耐缺氧能力，對(duì)抗急、慢性炎癥及免疫性炎癥等作用[16-18]。外種皮含有毒成分白果酸、氫化白果酸、氫化白果亞酸、白果酚和白果醇。我國銀杏資源占世界總量的70%以上[19]。銀杏的葉、果、樹皮均可入藥。國內(nèi)外許多學(xué)者采用現(xiàn)代分離技術(shù)與測量手段對(duì)銀杏葉提取物進(jìn)行了大量研究。銀杏黃酮類是低分子量化合物,均衍生于其母體化合物黃酮,以糖苷和甲基化的形式存在。銀杏葉含黃酮類化合物35種,其中雙黃酮6種,銀杏黃酮苷元7種,黃酮苷17種。有很多黃酮類化合物都有很強(qiáng)的抗氧化作用[20],能夠軟化血管,改善微循環(huán),降低血脂等。銀杏除葉片外,果實(shí)中亦含豐富的黃酮。目前我國用銀杏果和銀杏葉提取物開發(fā)出來的食品飲料主要有:罐頭類:如聽裝清水白果罐頭；飲料類:主要有銀杏晶、銀杏露、白果露、白果汁等；銀杏葉茶；酒類:如銀杏啤酒、白果酒等;另外還有用銀杏果和銀杏葉提取物生產(chǎn)的糖果、口香糖和月餅等。為提高黃酮純度和收率,提取工藝非常關(guān)鍵。目前用于提取銀杏總黃酮的方法主要有水提取法、有機(jī)溶劑萃取法、堿性稀醇或堿性水提取法、超臨界萃取法、超聲波提取法、酶法等[21]。水提取法：水提法又稱為煎煮法，就是將藥材加水煎煮取汁的方法。該法是最早使用的一種簡易浸出方法，至今仍是制備浸出制劑最常用的方法。由于浸出溶煤通常用水，故有時(shí)也稱為“水煮法”。適用于有效成分能溶于水、對(duì)濕和熱較穩(wěn)定的藥材。該法浸提成分范圍廣，但往往雜質(zhì)較多，給精制帶來不利，且煎出液易霉敗變質(zhì)。因其符合中醫(yī)傳統(tǒng)用藥習(xí)慣，溶劑易得價(jià)廉，至今仍為最廣泛適用的基本浸提方法。有機(jī)溶劑萃取法：利用溶質(zhì)在互不相溶的溶劑里溶解度的不同，用一種溶劑把溶質(zhì)從另一溶劑所組成的溶液里提取出來的操作方法。其主要特點(diǎn)為提取親水性強(qiáng)的皂甙則多選用正丁醇、異戊醇和水作兩相萃取。不過，一般有機(jī)溶劑親水性越大，與水作兩相萃取的效果就越不好，因?yàn)槟苁馆^多的親水性雜質(zhì)伴隨而出，對(duì)有效成分進(jìn)一步精制影響很大。超臨界萃取法：超臨界二氧化碳流體萃取分離過程的原理是利用超臨界流體的溶解能力與其密度的關(guān)系，即利用壓力和溫度對(duì)超臨界流體溶解能力的影響而進(jìn)行的。在超臨界狀態(tài)下，將超臨界流體與待分離的物質(zhì)接觸，使其有選擇性地把極性大小、沸點(diǎn)高低和分子量大小的成分依次萃取出來。當(dāng)然，對(duì)應(yīng)各壓力范圍所得到的萃取物不可能是單一的，但可以控制條件得到最佳比例的混合成分，然后借助減壓、升溫的方法使超臨界流體變成普通氣體，被萃取物質(zhì)則完全或基本析出，從而達(dá)到分離提純的目的，所以超臨界二氧化碳流體萃取過程是由萃取和分離過程組合而成的。超聲提取法是利用超聲波的空化作用、機(jī)械效應(yīng)和熱效應(yīng)等加速胞內(nèi)有效物質(zhì)的釋放、擴(kuò)散及溶解[22]，是顯著提高提取效率的提取方法。與傳統(tǒng)提取方法相比，超聲輔助提取技術(shù)具有提取時(shí)間短、效率高、對(duì)有效成分結(jié)構(gòu)破壞小、提取溫度可控、適應(yīng)性廣等優(yōu)點(diǎn)[23]。可用于生物和植物有效成份萃取、生物和植物細(xì)胞破碎、中草藥有效成份的低溫提取等。微波輔助提取是利用微波能來提高提取率的一種發(fā)展起來的新技術(shù)[24]。它的原理在學(xué)術(shù)界有許多不同的描述，其最基本的理論還是以微波穿透性加熱的原理為基礎(chǔ)，即微波對(duì)物料為立體加熱，而常規(guī)方法大多為平面加熱。微波場中，各種物料吸收微波能力的差異使得基體物質(zhì)的某些區(qū)域或萃取體系中的某些組分被選擇性加熱，從而使得物質(zhì)內(nèi)部產(chǎn)生能量差，被萃取物質(zhì)得到足夠的動(dòng)力從基體或體系中分離[25][26]。目前，科研人員對(duì)銀杏中黃酮的研究主要集中在銀杏葉片，已知的從銀杏葉中分離出的黃酮有40余種，主要為單黃酮類和雙黃酮類。大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)已表明，銀杏葉中含有的黃酮類化合物具有優(yōu)異的抗氧化活性、抗腫瘤活性、防治心血管疾病和增強(qiáng)免疫力等作用[27-31]。然而，實(shí)驗(yàn)對(duì)于白果黃酮的研究卻相對(duì)較少，本實(shí)驗(yàn)將通過超聲提取法和微波輔助提取法[32][33]來提取白果總黃酮，并通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選白果總黃酮的最佳提取工藝，為白果總黃酮的進(jìn)一步研究提供科學(xué)依據(jù)。儀器、試劑和材料儀器FA2004電子天平上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗器昆山市超聲儀器有限公司FMO-9410花琦微波爐上?；ㄧ姎庥邢薰?65型紫外-可見分光光度計(jì)上海儀電分析儀器有限公司試劑材料95%乙醇四川西隴科學(xué)有限公司蒸餾水佳木斯市虹源純凈水廠氫氧化鈉（分析純）廣州光華科技股份有限公司亞硝酸鈉(分析純)天津市凱通化學(xué)試劑有限公司硝酸鋁成都市科龍化工試劑廠蘆丁對(duì)照品上海源葉生物科技有限公司材料銀杏粉江蘇邳州市實(shí)驗(yàn)方法白果總黃酮的含量測定2.1.1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的含量制作精密稱量蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品20mg于50mL容量瓶中，加入少量濃度為60%乙醇，溶解并搖勻，加入60%乙醇定容至刻度。精密量取上述溶液25mL于50mL容量瓶，加入蒸餾水定容至刻度，得到0.2mg·mL-1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液。精確量取對(duì)照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL分別加入標(biāo)號(hào)為1、2、3、4、5、6的20mL刻度試管中,各加去離子水至6mL。另取一刻度試管標(biāo)記7,加入6mL去離子水作為空白對(duì)照樣。然后在每根試管中加入1mL5%亞硝酸鈉溶液,搖勻,放置6min;再在每根管中加入1mL10%硝酸鋁溶液,搖勻,放置6min;最后在每根試管中加入10mL4%氫氧化鈉溶液,搖勻,再加70%乙醇溶液至刻度,搖勻,放置15min后于510nm處測量吸光度。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。黃酮含量計(jì)算方式：其中C為樣品濃度(mg/ml)，N為溶液稀釋倍數(shù)，V為體積(ml)，m為加入白果粉質(zhì)量(g).2.1.2總黃酮的含量測定表2-SEQ表2-\*ARABIC1序號(hào)吸光度A黃酮含量總黃酮提取率10.01830.16250.6520.019380.170.6830.021530.1850.74表2-SEQ表2-\*ARABIC2序號(hào)吸光度A黃酮含量總黃酮提取率10.013070.1260.50420.013250.1270.50930.013250.1270.508白果中總黃酮的提取工藝研究超聲波輔助提取法提取稱取白果粉1g,加入一定濃度乙醇中,超聲提取后過濾,濾液定容至50mL,然后取樣1mL按測定標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法于波長510nm處測定吸光值。單因素實(shí)驗(yàn)（1）乙醇濃度的選取精密稱量1.0000g的白果粉5份，按乙醇溶液和白果粉30∶1的液料比分別加入濃度為60%、65%、70%、75%、80%的乙醇，在超聲功率300W下進(jìn)行60min的超聲反應(yīng)，分別測出各濃度乙醇的吸光值，通過計(jì)算得出黃酮提取率。具體見REF_Ref7359\h表2-1表2-SEQ表2-\*ARABIC3乙醇濃度單因素實(shí)驗(yàn)序號(hào)乙醇濃度(%)超聲時(shí)間（min）液料比（mL?g-1）超聲功率(W)16060301300370603013005806030:1300超聲時(shí)間的選取精密稱量1.0000g的白果粉5份，按乙醇溶液和白果粉30∶1的液料比加入70%濃度的乙醇，在超聲功率為300W下分別進(jìn)行50、55、60、65、70min的超聲反應(yīng)。分別測出各超聲時(shí)間下的吸光值，通過計(jì)算得出黃酮提取率。具體見REF_Ref8172\h表2-4表2-SEQ表2-\*ARABIC4序號(hào)乙醇濃度(%)超聲時(shí)間（min）液料比（mL?g-1）超聲功率(W)17050301300370603013005707030:1300（3）液料比的選取精密稱量1.0000g的沙棘果粉5份，分別按乙醇溶液和白果粉20∶1、25∶1、30∶1、35∶1、40∶1的液料比加入70%乙醇溶液，在超聲功率為300W下進(jìn)行60min的超聲反應(yīng)。分別測出各液料比下的吸光值，通過計(jì)算得出黃酮提取率。具體見REF_Ref8231\h表2-5表2-SEQ表2-\*ARABIC5序號(hào)乙醇濃度(%)超聲時(shí)間（min）液料比（mL?g-1）超聲功率(W)17060201300370603013005706040:1300（4）超聲功率的選取精密稱量1.0000g的白果粉5份，按乙醇溶液和白果粉30∶1的液料比加入70%乙醇，分別在200W、300W、400W、500W、600W的超聲功率下超聲60min。分別測出各超聲溫度下的吸光值，通過計(jì)算得出黃酮提取率。具體見REF_Ref8325\h表2-6表2-SEQ表2-\*ARABIC6序號(hào)乙醇濃度(%)超聲時(shí)間（min）液料比（mL?g-1）超聲功率(W)1706030:12002706030140047060301600正交試驗(yàn)將以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果作為依據(jù)，分別確定各因素中對(duì)黃酮提取率影響較為顯著的因素值范圍，采用正交實(shí)驗(yàn)法，篩選白果總黃酮提取的最佳提取工藝條件。微波輔助提取法稱取白果粉1g,加入一定濃度乙醇中,微波輔助提取后過濾,濾液定容至50mL,然后取樣1mL按測定標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法于波長510nm處測定吸光值。單因素實(shí)驗(yàn)（1）乙醇濃度的選取精密稱量1.0000g的白果粉5份，按乙醇溶液和白果粉25∶1的液料比分別加入濃度為60%、65%、70%、75%、80%的乙醇，在功率400W條件下反應(yīng)15min后，分別測出各濃度乙醇的吸光值，通過計(jì)算得出黃酮提取率。具體見REF_Ref8505\h表2-7表2-SEQ表2-\*ARABIC7序號(hào)乙醇濃度(%)超聲時(shí)間（min）液料比（mL?g-1）超聲功率(W)16015251400370152514005801525:1400（2）提取時(shí)間的選取精密稱量1.0000g的白果粉5份，按乙醇溶液和白果粉25∶1的液料比加入70%濃度的乙醇，在功率為400W條件下分別進(jìn)行5、10、15、20、25min的反應(yīng)。分別測出各超聲時(shí)間下的吸光值，通過計(jì)算得出黃酮提取率。具體見REF_Ref8603\h表2-8表2-SEQ表2-\*ARABIC8序號(hào)乙醇濃度(%)超聲時(shí)間（min）液料比（mL?g-1）超聲功率(W)1705251400370152514005702525:1400（3）液料比的選取精密稱量1.0000g的沙棘果粉5份，分別按乙醇溶液和白果粉15∶1、20∶1、25∶1、30∶1、35∶1的液料比加入70%乙醇溶液，在功率為400W下進(jìn)行15min的反應(yīng)。分別測出各液料比下的吸光值，通過計(jì)算得出黃酮提取率。具體見REF_Ref8701\h表2-9表2-SEQ表2-\*ARABIC9序號(hào)乙醇濃度(%)超聲時(shí)間（min）液料比（mL?g-1）超聲功率(W)17015151400370152514005701535:1400（4）微波功率的選取精密稱量1.0000g的白果粉5份，按乙醇溶液和白果粉25∶1的液料比加入70%乙醇，分別在200W、300W、400W、500W、600W的超聲功率下超聲15min。分別測出各功率下的吸光值，通過計(jì)算得出黃酮提取率。具體見REF_Ref8822\h表2-10表2-SEQ表2-\*ARABIC10序號(hào)乙醇濃度(%)超聲時(shí)間（min）液料比（mL?g-1）超聲功率(W)1701525:12002701525140047015251600正交試驗(yàn)將以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果作為依據(jù)，分別確定各因素中對(duì)黃酮提取率影響較為顯著的因素值范圍，采用正交實(shí)驗(yàn)法，篩選白果總黃酮提取的最佳提取工藝條件。實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論白果總黃酮含量測定蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制如REF_Ref8956\h圖3-1，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：Y=93.05x+0.4631，相關(guān)系數(shù)R2=0.9996.圖3-SEQ圖3-\*ARABIC1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線總黃酮的含量測定結(jié)果超聲波輔助提取法提取微波輔助提取法白果中總黃酮的提取工藝探究超聲波提取法單因素實(shí)驗(yàn)的結(jié)果（1）乙醇濃度對(duì)黃酮提取的影響隨著乙醇濃度的增加,溶液的吸光值不斷升高,當(dāng)乙醇濃度增加到70%左右時(shí),吸光值達(dá)到最大,此時(shí)提取液中黃酮含量達(dá)到最高,而后隨著濃度的增加,溶液的吸光值開始下降。此實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在該實(shí)驗(yàn)條件下，乙醇濃度在70%左右為宜。如REF_Ref9096\h圖3-2圖3-SEQ圖3-\*ARABIC2乙醇濃度對(duì)黃酮提取的影響（2）時(shí)間對(duì)黃酮提取的影響在50～60min范圍內(nèi),溶液的吸光值不斷增加,在60min時(shí)達(dá)到最大值,此時(shí)提取液中黃酮含量亦達(dá)到最高,此后隨著時(shí)間的增加,溶液的吸光值不斷下降。此實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在此實(shí)驗(yàn)條件下，反應(yīng)在60min時(shí)的提取時(shí)間是比較適宜的。如REF_Ref9187\h圖3-3圖3-SEQ圖3-\*ARABIC3提取時(shí)間對(duì)黃酮提取的影響（3）液料比對(duì)黃酮提取的影響隨著液料比(mL∶g)的增大,提取液吸光值逐漸升高,提取液中黃酮含量不斷增加,在料液比為30∶1時(shí)達(dá)到最大值,當(dāng)料液比大于30∶1時(shí),溶液吸光值有所下降。此實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在該實(shí)驗(yàn)條件下，液料比在30∶1時(shí)為最佳。如REF_Ref9256\h圖3-4圖3-SEQ圖3-\*ARABIC4液料比對(duì)黃酮提取的影響（4）功率對(duì)黃酮提取的影響隨著提取功率的不斷增加,溶液的吸光值不斷升高，當(dāng)超聲提取功率增加到300W左右時(shí)，吸光值達(dá)到最大，此時(shí)提取液中黃酮含量達(dá)到最高，而后隨著提取功率的增加，溶液的吸光值開始不斷下降。此實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在該實(shí)驗(yàn)條件下，超聲提取功率在300W左右為宜。如REF_Ref9347\h圖3-5圖3-SEQ圖3-\*ARABIC5功率對(duì)黃酮提取的影響正交試驗(yàn)的結(jié)果（1）超聲波提取法最佳條件正交試驗(yàn)結(jié)果表明,影響銀杏果總黃酮提取的因素大小為:提取時(shí)間>乙醇濃度>功率>液料比,各因素均不顯著,因此無主因素。通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)優(yōu)選的銀杏果總黃酮超聲波提取的最佳條件:A2B2C3D1,即用70%乙醇作為提取劑,料液比35∶1,提取60min，功率200W。在9組試驗(yàn)中的黃酮提取率最大的為5號(hào)試驗(yàn)條件組合。對(duì)5號(hào)試驗(yàn)和A2B2C3D1組合分別做平行試驗(yàn),結(jié)果表明,A2B2C3D1組合的提取率為0.69%,比5號(hào)試驗(yàn)得率高,為較優(yōu)水平組合。如REF_Ref9668\h表3-1表3-SEQ表3-\*ARABIC1超聲波法提取正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果序號(hào)乙醇濃度（%）時(shí)間（min）液料比（ml/g）功率(W)黃酮提取率(%)1655525:12000.1562656030:13000.5113656535:14000.4314705530:14000.1935706035:12000.6526706525:13000.5177755535:13000.1878756025:14000.4629756530:12000.535K11.0980.5361.1351.343K21.3621.6251.2391.215K31.2571.4831.271.086k10.3660.1790.3780.448k20.4540.5420.4130.405k30.4190.4940.4230.362R0.0880.3630.0450.086超聲波法提取正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果微波輔助提取單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果（1）乙醇濃度對(duì)黃酮提取的影響乙醇濃度對(duì)黃酮提取的影響如圖2所示，在60%～70%的濃度范圍內(nèi)，溶液的吸光值逐漸升高，在濃度為70%時(shí)黃酮含量達(dá)到最大值，當(dāng)濃度大于70%之后，隨著濃度的升高，吸光值開始逐漸減小。此實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在該實(shí)驗(yàn)條件下，提取功率在300W左右為宜。如REF_Ref9821\h圖3-6圖3-SEQ圖3-\*ARABIC6乙醇濃度對(duì)黃酮提取的影響（2）時(shí)間對(duì)黃酮提取的影響在5～20min范圍內(nèi),溶液的吸光值不斷增加,在20min時(shí)達(dá)到最大值,此時(shí)提取液中黃酮含量亦達(dá)到最高,此后隨著時(shí)間的增加,溶液的吸光值緩慢下降。此實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在此實(shí)驗(yàn)條件下，反應(yīng)在20min時(shí)的提取時(shí)間是比較適宜的。如REF_Ref9909\h圖3-7。圖3-SEQ圖3-\*ARABIC7提取時(shí)間對(duì)黃酮提取的影響（3）液料比對(duì)黃酮提取的影響隨著料液比(mL∶g)的增大,提取液吸光值逐漸升高,提取液中黃酮含量不斷增加,在料液比為25∶1達(dá)到最大值,當(dāng)料液比大于25∶1時(shí),溶液吸光值略有下降(如)。此實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在該實(shí)驗(yàn)條件下，液料比在25∶1時(shí)為最佳。如REF_Ref10102\h圖3-8。圖3-SEQ圖3-\*ARABIC8液料比對(duì)黃酮提取的影響（4）功率對(duì)黃酮提取的影響隨著提取功率的不斷增加,溶液的吸光值不斷升高，當(dāng)微波提取功率增加到300W左右時(shí)，吸光值達(dá)到最大，此時(shí)提取液中黃酮含量達(dá)到最高，而后隨著提取功率的增加，溶液的吸光值開始不斷下降。此實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在該實(shí)驗(yàn)條件下，微波提取功率在300W左右為宜。如REF_Ref10174\h圖3-9。圖3-SEQ圖3-\*ARABIC9功率對(duì)黃酮提取的影響正交試驗(yàn)結(jié)果（1）微波輔助提取法最佳條件由正交試驗(yàn)結(jié)果可知,影響總黃酮提取各因素的主次作用為:乙醇濃度>提取時(shí)間>功率>液料比。分析結(jié)果表明,各因素間差異均不顯著,因此無主因素。通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)優(yōu)選的銀杏果總黃酮提取的最佳條件為A2B3C2D2,即用70%乙醇作為提取劑,料液比25∶1,功率400W，提取時(shí)間20min。在9組試驗(yàn)中的黃酮得率最大為2號(hào)試驗(yàn)條件組合。對(duì)2號(hào)試驗(yàn)和A2B3C2D2組合分別做平行試驗(yàn),結(jié)果表明,A2B3C2D2組合的提取率為0.507%,優(yōu)于2號(hào)試驗(yàn)得率,為較優(yōu)水平組合。如REF_Ref10291\h表3-2表3-SEQ表3-\*ARABIC2微波輔助提取正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果序號(hào)液料比（ml/g）提取時(shí)間(min)功率(W)乙醇濃度(%)黃酮提取率(%)120：110300650.166220:115400700.423320:120500750.344425:110400750.318525:115500650.282625:120300700.396730:110500700.313830:115300750.297930:120400650.349K10.9330.7970.8590.797K20.9961.0021.091.132K30.9591.0890.9390.959k10.3110.2660.2860.266k20.3320.3340.3630.377k?30.3200.3630.3130.320R0.0210.0970.0770.112微波輔助提取正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果討論本次提取白果總黃酮利用了超聲波提取法和微波輔助提取法，將從白果中提取黃酮作為研究作為背景，以黃酮提取率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，并用正交實(shí)驗(yàn)法對(duì)此方法進(jìn)行優(yōu)化，使白果總黃酮提取率達(dá)到較高值。以乙醇濃度、提取時(shí)間、液料比和功率四個(gè)因素為條件展開單因素實(shí)驗(yàn)，隨著各因素條件的增加或延長，黃酮的提取率有一個(gè)先升高后下降的趨勢，分析其原因可能是和黃酮的結(jié)構(gòu)被破壞或有其他雜質(zhì)被提取出來有關(guān)。確定好最佳影響范圍后再進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，正交實(shí)驗(yàn)法將單因素的最佳條件范圍重新進(jìn)行組合，設(shè)計(jì)正交表，根據(jù)R值的大小，排出因素顯著性的順序，并比較k值選出最優(yōu)水平組合，最后得出白果總黃酮最佳提取工藝。通過本次實(shí)驗(yàn)正交表R值大小判斷，超聲波提取法中超聲時(shí)間對(duì)提取黃酮的影響最顯著，表現(xiàn)為當(dāng)提取時(shí)間小于60min時(shí)，黃酮提取率有升高趨勢，當(dāng)高于60min以后，可能由于提取時(shí)間延長，部分黃酮細(xì)胞細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)被損壞而導(dǎo)致提取率降低；其他三個(gè)因素對(duì)提取黃酮也有一定影響，影響順序?yàn)椋禾崛r(shí)間>乙醇濃度>功率>液料比；微波輔助提取法中乙醇濃度對(duì)提取黃酮的影響最顯著，表現(xiàn)為當(dāng)提取時(shí)間小于70%時(shí)，黃酮提取率有升高趨勢，當(dāng)高于70%以后，可能由于提取時(shí)間延長，部分黃酮細(xì)胞細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)被損壞而導(dǎo)致提取率降低；其他三個(gè)因素對(duì)提取黃酮也有一定影響，影響順序?yàn)椋阂掖紳舛?gt;提取時(shí)間>功率>液料比。對(duì)于黃酮來說，結(jié)構(gòu)上的酚羥基是使其進(jìn)行顯色反應(yīng)的主要依據(jù)，實(shí)驗(yàn)中常用Al(NO3)3等金屬鹽進(jìn)行鑒定，因此在本實(shí)驗(yàn)中也正是運(yùn)用了這種原理來驗(yàn)證黃酮類物質(zhì)的存在；正交實(shí)驗(yàn)法是研究多因素多水平的一種設(shè)計(jì)方法，它依據(jù)Galois理論從全面試驗(yàn)中挑選出部分具有代表性的水平組合進(jìn)行試驗(yàn)，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析從而找出最優(yōu)的水平組合，是一種高效率、快速、經(jīng)濟(jì)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法。根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)的結(jié)果設(shè)計(jì)正交表，據(jù)正交表R值的大小，可排出因素顯著性的順序，通過比較k值可選出優(yōu)水平組合。結(jié)論在本課題實(shí)驗(yàn)過程中，分別以微波輔助提取法和超聲波提取法來提取白果總黃酮，通過單因素試驗(yàn)確定乙醇濃度、提取時(shí)間、液料比、提取功率分別對(duì)白果總黃酮提取的影響，通過正交試驗(yàn)優(yōu)選出提取白果總黃酮的最佳工藝條件。在探究此次超聲輔助提取白果總黃酮的實(shí)驗(yàn)過程中，提取白果總黃酮的最優(yōu)條件為乙醇濃度70%、提取時(shí)間60min、液料比35:1、提取功率200W，白果總黃酮的最佳提取率為0.69%。在探究此次微波輔助提取白果總黃酮的實(shí)驗(yàn)過程中，提取白果總黃酮的最優(yōu)條件為乙醇濃度70%、提取時(shí)間20min、液料比25:1、提取功率400W，白果總黃酮的最佳提取率為0.507%。在探究提取白果總黃酮的最佳提取條件的實(shí)驗(yàn)過程中，分別采用了微波輔助提取法和超聲波提取法，通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)優(yōu)選提取白果總黃酮的最佳提取條件。由此次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知，白果總黃酮的提取超聲波提取法優(yōu)于微波輔助提取法。參考文獻(xiàn)劉政,胡孫田,李穎,朱培,褚旭東,孫勇.長興縣古銀杏樹齡檢測與資源特征分析[J].浙江林業(yè)科技,2019,39(06):87-91.陳柏林,鄒敏敏,蘇二正,汪貴斌,郭起榮,王佳宏,曹福亮.銀杏果食藥物質(zhì)基礎(chǔ)及其加工利用現(xiàn)狀[J].生物加工過程,2020,18(06):758-765+774.董俊,劉文漪.銀杏果中有效殺蟲成分的提取及效果檢驗(yàn)[J].生物化工,2021,7(02):96-97國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(2020年版一部)[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社,2020.祝玲,葉曼紅.微波輔助萃取銀杏中的黃酮類物質(zhì)的研究[J].化工之友,2006(08):11-12.26.谷政偉.銀杏葉黃酮實(shí)驗(yàn)室提取技術(shù)進(jìn)展[J].食品安全導(dǎo)刊,2020(15):140-142.31.李根,任國艷,李倩,周明,張軼馨,肖楓.超聲輔助提取鯢皮膠原蛋白工藝優(yōu)化及特性分析[J/OL].食品工業(yè)科技:1-15[2021-05-23].劉寶亮,吳一帆,穰小東,等.響應(yīng)面法優(yōu)化離子液體雙水相提取銀杏黃酮的工藝研究[J].中國食品添加劑.2018(12):108-115.李超峰,吳雯雯,王靖雯,雷曉萌,唐伯平.銀杏果外種皮總黃酮提取工藝和抗氧化活性[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2021,49(06):150-155.10.孟凡瑞,劉宇,劉波,李曉秀,劉洋,孔玉梅,王丹.白果黃酮的提取工藝研究[J].遼寧大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2014,41(04):369-373.25.WuCE,JiaSQ,FanGJ,etal.PurificationandidentificationofnovelantioxidantpeptidesfromenzymatichydrolysateofGinkgobilobaseedproteins[J].FoodScienceandTechnologyResearch,2013,19(6):1029-1035.6.HyunK.HypocholesterolemiceffectofGinkgobilobaseedsextractfromhighfatdietmice[J].BiomedicalScienceLetters,2017,23(2):138-143.ShugoH,YumiK,ToshikazuS,etal.Anti-obesityeffectofginkgovinegar,afermentedproductofginkgoseedcoat,inmicefedahigh-fatdietand3T3-L1preadipocytecells[J].Nutrients,2020,12(1):230.譚琪明,楊廣安,馬海霞,羅立婭.影響銀杏葉多糖提取因素的研究[J].當(dāng)代化工研究,2021(08):137-13.14.吳海霞,田志芳.銀杏果實(shí)(白果)多糖提取工藝優(yōu)化及其抑菌活性分析[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2020,36(06):1551-1558.30.蔡錦源,王萌璇,韋坤華,等.銀杏黃酮的提取及純化方法研究進(jìn)展[J].應(yīng)用化工,2017,46(5):982-985