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文檔簡介

第55講植物細(xì)胞工程

【課標(biāo)內(nèi)容】1.闡明植物組織培養(yǎng)是在一定條件下,將離體植物器官、組織和細(xì)胞在

適宜的培養(yǎng)條件下誘導(dǎo)形成愈傷組織,并重新分化,最終形成完整植株的過程;2.概

述植物體細(xì)胞雜交是將不同植物體細(xì)胞在一定條件下融合成雜合細(xì)胞,繼而培育成新植

物體的技術(shù);3.舉例說明植物細(xì)胞工程利用快速繁殖、脫毒、次生代謝產(chǎn)物生產(chǎn)、育

種等方式有效提高了生產(chǎn)效率。

考點1植物組織培養(yǎng)

考點落實

[細(xì)胞生物學(xué)

原理和方法|分子生物學(xué)

〔發(fā)育生物學(xué)

細(xì)胞I操作水平:細(xì)胞器、細(xì)胞.或組織水平

工程目的:改變細(xì)胞內(nèi)的一遺傳物質(zhì)一或

獲得.細(xì)胞產(chǎn)品一

f植物細(xì)胞工程

〔[動物細(xì)胞工程

知識1植物組織培養(yǎng)基本技術(shù)

1.概念:植物組織培養(yǎng)是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等,培養(yǎng)在(人工配制的)

培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)。

2.原理:植物細(xì)胞的全能性一。

'①具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)

②.離體.狀態(tài)(脫離母體)

全能性表達(dá)的條件〈③一定的營養(yǎng)、植物激素(如生長素和

細(xì)胞分裂素)等

、④環(huán)境條件:無菌、適宜的—溫度_、光照

解疑釋惑

植物細(xì)胞在未脫離母體狀態(tài)下不體現(xiàn)全能性,如芽原基的細(xì)胞只能發(fā)育為芽,葉原基的

細(xì)胞只能發(fā)育為葉。這是因為在特定的時間和空間條件下,細(xì)胞中的基因會選擇性表

達(dá)。

3.流程

解疑釋惑

三個重要概念

、讓已經(jīng)分化的細(xì)胞,經(jīng)過透導(dǎo)后,失

[脫?化],去其特有的結(jié)構(gòu)和功能,轉(zhuǎn)變成未

女工分化細(xì)胞的過程。一般不需要光照

形成

愈傷-不定形的薄壁組織團塊

組織

—?一,愈傷組織重新分化成芽、根

再分化卜等器官的過程s需要光照

4.植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基(MS培養(yǎng)基)

(1)主要成分

成分作用

無機

提供植物細(xì)胞生活所必需的無機鹽和水

營養(yǎng)

有機提供碳源和能量,調(diào)節(jié)滲透壓;氨基酸和維生素滿足離體植

營養(yǎng)物細(xì)胞的特殊營養(yǎng)需求

生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵

激素

激素

瓊脂凝固劑

(2)類型

①誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基:生長素與細(xì)胞分裂素濃度相當(dāng)。

②誘導(dǎo)生芽的培養(yǎng)基:生長素濃度/細(xì)胞分裂素濃度的比值—低_

③誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基:生長素濃度/細(xì)胞分裂素濃度的比值—高_(dá)

解疑釋惑

植物組織培養(yǎng)中的無菌操作

(1)無菌操作的理由:避免雜菌在培養(yǎng)基上迅速生長消耗營養(yǎng),同時防止有些雜菌危害培

養(yǎng)物的生長。

(2)無菌操作要求:①培養(yǎng)基滅菌(高壓蒸汽滅菌);②外植體要進行_消毒一處理(酒精、

次氯酸鈉、無菌水沖洗);③接種的無菌操作(各種器械要徹底無菌濾紙、

酒精燈火焰旁、封口膜或瓶蓋封住瓶口);④無菌箱中培養(yǎng);⑤移栽到消過毒的環(huán)境中

一生存一段時間(“煉苗”)。

知識2植物細(xì)胞工程的應(yīng)用

1.植物繁殖的新途徑:快速(微型)繁殖、作物脫毒。

優(yōu)點:能保持優(yōu)良品種的遺傳特性;可以快速大量地培育新個體,有利于進行工廠

化培養(yǎng);選材少,周期短,便于自動化管理。

2.作物新品種的培育:單倍體育種(如花藥/花粉離體培養(yǎng))、突變體的利用(用

射線、化學(xué)物質(zhì)等處理培養(yǎng)的細(xì)胞后篩選)。

3.細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn):獲取植物一次生代謝物一,如紫杉醇、人參皂甘的生產(chǎn)。

一般只需培養(yǎng)到愈傷組織階段,從細(xì)胞培養(yǎng)液中獲取產(chǎn)物。具有不占用耕地,幾

乎不受天氣、季節(jié)等的限制等優(yōu)點。

解疑釋惑

(1)幼嫩的組織脫分化較為容易,如莖尖、根尖、形成層細(xì)胞,而植物的莖、葉和成熟的

組織則較難。另外,幼嫩的芽尖、莖尖幾乎不含病毒或病毒很少,作為植物組織培

養(yǎng)材料容易實現(xiàn)作物脫毒。

(2)突變體的利用中,培養(yǎng)的愈傷組織處于不斷增殖狀態(tài),易發(fā)生.基因突變.,從而得

到突變體。

(3)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)利用了.細(xì)胞增殖.的原理。

(4)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)中,用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)愈傷組織的細(xì)胞,培養(yǎng)過程中可加以攪

拌,一是增加培養(yǎng)液中的溶解氧;二是有利于細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸。

II

概念思辨

判斷下列說法的正誤:

⑴高度分化的成熟葉肉細(xì)胞不具備發(fā)育成完整植株的潛能。(x)

提示:高度分化的植物細(xì)胞含有該生物全套的遺傳信息,具有發(fā)育的全能性。

(2)植物組織培養(yǎng)的目的都是獲得完整的植株。(x)

提示:植物組織培養(yǎng)的目的不一定是獲得完整的植株,也可能是獲得細(xì)胞代謝物。

(3)正常情況下,同一植物的不同體細(xì)胞經(jīng)植物組織培養(yǎng)產(chǎn)生的植株基因不同。(x)

提示:正常情況下,同一植物的不同體細(xì)胞經(jīng)植物組織培養(yǎng)產(chǎn)生的植株基因相同。

(4)盡管愈傷組織可以進行光合作用,但其培養(yǎng)基中仍需要糖類、氨基酸等有機營養(yǎng)。

(x)

提示:愈傷組織細(xì)胞中不含葉綠體,不能進行光合作用。

(5)某些植物激素和維生素不能連同其他培養(yǎng)基成分一起進行高壓蒸汽滅菌。(V)

提示:某些植物激素、維生素等遇熱時容易分解,需要進行過濾除菌,待培養(yǎng)基降低到

適宜溫度后(凝固前)再加入這些成分并混勻。

典題說法

考向1植物組織培養(yǎng)的過程

而(2021.江蘇卷)植物組織培養(yǎng)技術(shù)常用于商業(yè)化生產(chǎn)過程,其過程一般為:無菌培養(yǎng)

物建立一培養(yǎng)物增殖一生根培養(yǎng)一試管苗移栽及鑒定。下列相關(guān)敘述錯誤的是(D)

A.為獲得無菌培養(yǎng)物,外植體要消毒處理后才可以接種培養(yǎng)

B.組織培養(yǎng)過程中也可無明顯愈傷組織形成,直接形成胚狀體等結(jié)構(gòu)

C.提高培養(yǎng)基中生長素和細(xì)胞分裂素的比值,有利于誘導(dǎo)生根

D.用同一植株體細(xì)胞離體培養(yǎng)獲得的再生苗不會出現(xiàn)變異

解析:植物組織培養(yǎng)過程中應(yīng)注意無菌操作,為獲得無菌培養(yǎng)物,外植體要經(jīng)過表面消

毒處理后,才能進行培養(yǎng),所用的培養(yǎng)基必須徹底滅菌,A正確;組織培養(yǎng)花粉時無明

顯愈傷組織形成,直接形成胚狀體等結(jié)構(gòu),B正確;生長素和細(xì)胞分裂素的比值高時,

有利于根的分化、抑制芽的形成,因此提高培養(yǎng)基中生長素和細(xì)胞分裂素的比值,有利

于誘導(dǎo)生根,C正確;用同一植株體細(xì)胞離體培養(yǎng)獲得的再生苗會出現(xiàn)變異,如在愈傷

組織的培養(yǎng)過程中可能發(fā)生基因突變等變異,D錯誤。

Ei(多選)(2023?南京、鹽城一模)草莓是無性繁殖的作物,它感染的病毒很容易傳播

給后代。病毒在草莓體內(nèi)逐年積累,會導(dǎo)致產(chǎn)量降低、品質(zhì)變差。下圖是育種工作者選

育高品質(zhì)草莓的流程圖。下列有關(guān)敘述錯誤的是(BD)

方法—:?草莓?—4~^-1―-一,無病毒菌

方法二:|SMTEZ,V-CP產(chǎn),|草莓細(xì)胞卜馬抗病毒草莓

注:SMYELV—CP是草莓輕型黃邊病毒的外殼蛋白基因。

A.方法一中,甲常選用莖尖,原因是其幾乎未感染病毒

B.通常采用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的次氯酸鈉溶液對甲進行消毒處

C.A、C兩個過程屬于植物組織培養(yǎng),都經(jīng)過脫分化和再分化

D.判斷兩種選育方法的效果都需要通過病毒接種實驗

解析:方法一中,選擇甲作為組織培養(yǎng)材料的原因是該部位(莖尖)細(xì)胞的含病毒量少,

甚至不帶病毒,誘導(dǎo)更容易獲得脫毒苗,A正確。對外植體的消毒通常采用體積分?jǐn)?shù)為

70%的酒精和5%的次氯酸鈉溶液,消毒后需用無菌水進行沖洗,B錯誤。A、C兩個過

程屬于植物組織培養(yǎng),都需要經(jīng)過脫分化形成愈傷組織和再分化形成根、芽,最終發(fā)育

成植株,C正確。圖中方法一獲得的無病毒苗應(yīng)根據(jù)植株性狀檢測,不需要接種病毒;

方法二獲得的抗病毒草莓需要通過接種病毒檢測,D錯誤。

考向2植物細(xì)胞工程的應(yīng)用

皿2(2023?南通三調(diào))植物細(xì)胞工程在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)等方面有著廣泛的應(yīng)用,相關(guān)敘述

錯誤的是(D)

A.切取一定大小的草莓植株莖尖進行組織培養(yǎng),可獲得脫毒苗

B.用射線處理植物組織培養(yǎng)過程中不斷增殖的煙草細(xì)胞培育抗鹽堿的煙草

C.在離體條件下對紫草細(xì)胞進行培養(yǎng)使其增殖可以獲得紫草寧

D.玉米花藥離體培養(yǎng)獲得的單倍體植株都能穩(wěn)定遺傳

解析:因為分生組織的病毒極少,甚至沒有病毒,所以將草莓植株莖尖進行離體培養(yǎng)能

獲得脫毒植株,A正確;由于基因突變是不定向的,所以用射線處理植物組織培養(yǎng)過程

中不斷增殖的煙草細(xì)胞,即進行誘變育種,可篩選得到抗鹽堿的煙草新品種,B正確;

離體的條件下對紫草細(xì)胞進行植物細(xì)胞培養(yǎng),可大量生產(chǎn)紫草寧,C正確;玉米花藥細(xì)

胞經(jīng)過脫分化和再分化過程形成單倍體幼苗,經(jīng)過秋水仙素處理后才能得到能夠穩(wěn)定遺

傳的純合植株,D錯誤。

查式^(2023?鹽城二模)束頂病毒能夠引起香蕉的嚴(yán)重病害,科研人員用感病植株的莖尖

作為外植體進行培養(yǎng)獲得脫毒苗,實驗結(jié)果如下圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是(C)

A.感病植株的莖尖需經(jīng)滅菌處理后才能用于脫毒苗的培育

B.培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基常添加生長激素、細(xì)胞分裂素等激素

C.超低溫保存感病植株莖尖可提高其脫毒率,降低成活率

D.莖尖脫分化形成的愈傷組織是一團呈正方形的薄壁細(xì)胞

解析:滅菌會將植株的莖尖殺死,所以需要對感病植株的莖尖進行消毒處理,A錯誤;

培養(yǎng)過程中加入生長素和細(xì)胞分裂素,B錯誤;從圖中可以看出,經(jīng)過超低溫處理后,

感病植株的脫毒率增加,但成活率由93.75%下降至55%,C正確;愈傷組織是無定形

狀態(tài),D錯誤。

考點2植物體細(xì)胞雜交技術(shù)

考點落實

1.原理:細(xì)胞膜的流動性.、植物細(xì)胞的全能性。

步驟操作或說明

①去壁纖維素酶和果膠酶等分解細(xì)胞壁

物理法:電融合法、離心法等;

植物②原生質(zhì)體

化學(xué)法:聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高

細(xì)胞.融合一(關(guān)鍵環(huán)節(jié))

pH融合法

融合

③再生出細(xì)胞壁高爾基體、線粒體活躍

植物組織培養(yǎng)經(jīng)④脫分化、⑤再分化后獲得雜種植物

3.意義:植物體細(xì)胞雜交技術(shù)在打破生殖隔離、實現(xiàn)一遠(yuǎn)緣雜交育種一、培育新品種

等方面展示出獨特的優(yōu)勢。

解疑釋惑

(1)植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果不是形成雜種細(xì)胞,而是要經(jīng)過組織培養(yǎng)形成雜種植株。

(2)植物細(xì)胞融合成功的標(biāo)志是.再生出新的細(xì)胞壁一,植物體細(xì)胞雜交成功的標(biāo)志是

.形成雜種植株.。

(3)植物體細(xì)胞雜交過程中沒有有性生殖細(xì)胞的結(jié)合,因此應(yīng)為£性生殖。

(4)獲得雜種植株的變異類型屬于一染色體變異_。與多倍體育種一樣,都是通過改變細(xì)

胞內(nèi)的染色體數(shù)目來改變遺傳物質(zhì),從而改變生物的性狀。但不同的是,雜種植株的染

色體數(shù)通常是兩個不同種親本細(xì)胞染色體數(shù)目之和,屬于異源多倍體。

II

概念思辨

判斷下列說法的正誤:

(1)制備植物的原生質(zhì)體需要使用胰蛋白酶或者膠原蛋白酶來處理兩種細(xì)胞。(x)

提示:由于植物細(xì)胞的細(xì)胞壁主要由纖維素和果膠組成,因此制備植物原生質(zhì)體需要用

纖維素酶和果膠酶除去細(xì)胞壁。

(2)在誘導(dǎo)愈傷組織形成的培養(yǎng)基中需加入植物激素來誘導(dǎo)脫分化和再分化。(x)

提示:形成愈傷組織屬于脫分化,沒有再分化。

(3)雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁后經(jīng)植物組織培養(yǎng)獲得雜種植物。(V)

(4)原生質(zhì)體融合依賴生物膜的流動性,獲得的融合原生質(zhì)體需放在無菌水中以防雜菌

污染。(x)

提示:細(xì)胞融合依賴于生物膜的流動性,但獲得的原生質(zhì)體沒有細(xì)胞壁,不能放在無菌

水中,以防原生質(zhì)體吸水漲破。

(5)雜種細(xì)胞可以培育成雜種植株,說明雜種細(xì)胞具有全能性。(7)

典題說法

考向1植物體細(xì)胞雜交技術(shù)

?(2023?江蘇卷)研究者通過體細(xì)胞雜交技術(shù),探索利用條斑紫菜和擬線紫菜培育雜種

紫菜。下列相關(guān)敘述正確的是(D)

A.從食用紫菜的動物消化道內(nèi)提取蛋白酶,用于去除細(xì)胞壁

B.原生質(zhì)體需在低滲溶液中長期保存,以防止過度失水而死亡

C.檢測原生質(zhì)體活力時可用苯酚品紅或甲紫溶液處理,活的原生質(zhì)體被染色

D.聚乙二醇促進原生質(zhì)體融合后,以葉綠體顏色等差異為標(biāo)志可識別雜種細(xì)胞

解析:酶具有專一性,紫菜細(xì)胞壁的主要成分為纖維素和果膠,蛋白酶無法催化細(xì)胞壁

分解,A錯誤;原生質(zhì)體在低滲溶液中會因吸水漲破而死亡,可在超低溫液氮中長期保

存原生質(zhì)體,B錯誤;原生質(zhì)體的細(xì)胞膜具有選擇透過性,活的原生質(zhì)體不會被苯酚品

紅或甲紫溶液染色,C錯誤;聚乙二醇可促進原生質(zhì)體融合,不同來源的細(xì)胞可能所含

葉綠體情況不同,進而可以葉綠體顏色等差異為標(biāo)志識別雜種細(xì)胞,D正確。

座式(2023?廣東卷)人參皂昔是人參的主要活性成分??蒲腥藛T分別誘導(dǎo)人參根與胡蘿

卜根產(chǎn)生愈傷組織并進行細(xì)胞融合,以提高人參皂甘的產(chǎn)率。下列敘述錯誤的是(C)

A.細(xì)胞融合前應(yīng)去除細(xì)胞壁

B.高Ca2+—高pH溶液可促進細(xì)胞融合

C.融合的細(xì)胞即為雜交細(xì)胞

D.雜交細(xì)胞可能具有生長快速的優(yōu)勢

解析:植物細(xì)胞壁影響植物細(xì)胞融合,因此細(xì)胞融合前可利用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)

胞壁以制備原生質(zhì)體,A正確;在高Ca2+—高pH溶液中有利于兩種原生質(zhì)體的融合,

B正確;融合的細(xì)胞有多種類型,自身融合的細(xì)胞不是雜交細(xì)胞,只有人參細(xì)胞與胡蘿

卜細(xì)胞融合成的細(xì)胞才是雜交細(xì)胞,C錯誤;由題干信息“誘導(dǎo)人參根與胡蘿卜根產(chǎn)生

愈傷組織并進行細(xì)胞融合,以提高人參皂甘的產(chǎn)率”,說明雜交細(xì)胞包含兩種細(xì)胞的遺

傳物質(zhì),可能具有生長快速的優(yōu)勢,D正確。

考向2植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的應(yīng)用

皿?(多選)(2023?泰州期末)甘蔗新臺糖22號(ROC22)具有高產(chǎn)、高糖等優(yōu)良特性,但耐

寒性差;桂糖28號(GT28)耐寒。研究者欲利用這兩個品種進行植物體細(xì)胞雜交以培育

新品種,相關(guān)敘述正確的是(AB)

A.甘蔗幼葉在體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒后需用無菌水沖洗

B.酶解液的滲透壓過低可能導(dǎo)致產(chǎn)生細(xì)胞碎片

C.臺盼藍(lán)染液檢測原生質(zhì)體的活力時,活細(xì)胞被染成藍(lán)色

D.ROC22和GT28雜合體細(xì)胞再生植株一定耐寒又高產(chǎn)

解析:原生質(zhì)體缺乏細(xì)胞壁,酶解液的滲透壓過低時,細(xì)胞可能會吸水漲破,B正確;

原生質(zhì)體具有選擇透過性,活細(xì)胞不會吸收臺盼藍(lán),呈無色,C錯誤;ROC22和GT28

雜合體細(xì)胞同時具有ROC22和GT28的基因,但相關(guān)基因不一定均能表達(dá),D錯誤。

驗遁果※隨堂,練

1.(2019?江蘇卷)為探究矮牽牛原生質(zhì)體的培養(yǎng)條件和植株再生能力,某研究小組的實

驗過程如下圖所示。下列敘述正確的是(D)

懸浮原生質(zhì)體愈傷組織從生芽J

A.過程①獲得的原生質(zhì)體需懸浮在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%的蔗糖溶液中

B.過程②需提高生長素的比例以促進芽的分化

C.過程③需用秋水仙素處理誘導(dǎo)細(xì)胞壁再生

D.原生質(zhì)體雖無細(xì)胞壁,但仍保持細(xì)胞的全能性

解析:原生質(zhì)體在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%的蔗糖溶液中會失水皺縮,A錯誤;②誘導(dǎo)芽分化時,

需要提高細(xì)胞分裂素的比例,B錯誤;③可以表示誘導(dǎo)根的分化形成幼苗,而秋水仙素

的作用是誘導(dǎo)染色體數(shù)加倍,C錯誤;原生質(zhì)體含有一整套的遺傳物質(zhì),故具有全能性,

D正確。

2.花藥離體培養(yǎng)是重要的育種手段。下圖是某二倍體植物花藥育種過程的示意圖,下

列敘述正確的是(C)

.8白?筐?耳耳

花藥I~'愈傷組織愈傷組織八,'u'

A.為了防止微生物污染,過程①所用的花藥需在體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇溶液中浸泡30

min

B.過程②的培養(yǎng)基中需添加較高濃度的細(xì)胞分裂素以利于根的分化

C.過程③逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體

D.過程④應(yīng)將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上

解析:為了防止微生物污染,過程①所用的花藥需在體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇溶液中浸泡

30s;培養(yǎng)基中添加較高濃度生長素以利于根的分化,添加較高濃度細(xì)胞分裂素以利于

芽的分化;過程③逐步分化的植株已經(jīng)用秋水仙素處理,可篩選獲得純合的二倍體;煉

苗后的植株應(yīng)移栽到大田。

3.(多選)(2023?常州期末)體細(xì)胞胚是由愈傷組織表面形成的類似種子胚的結(jié)構(gòu),下列相

關(guān)敘述正確的是(AC)

A.植株組織培養(yǎng)過程中不一定形成體細(xì)胞胚

B.體細(xì)胞胚的形成一定要經(jīng)過愈傷組織階段

C.體細(xì)胞胚可由有性生殖細(xì)胞分裂、分化而來

D.體細(xì)胞胚的再分化過程中不需更換培養(yǎng)基

解析:植物組織培養(yǎng)過程不一定形成體細(xì)胞胚,A正確;植物組織培養(yǎng)過程中可直接形

成體細(xì)胞胚,B錯誤;外植體為離體的組織、器官或細(xì)胞,包括體細(xì)胞及生殖細(xì)胞,體

細(xì)胞胚可由有性生殖細(xì)胞分裂、分化而來,C正確;體細(xì)胞胚的再分化過程中需要更新

培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)以及植物激素的比例,從而滿足植物組織不同階段的發(fā)育需求,D

錯誤。

4.某雜種植株的獲取過程如圖所示,下列有關(guān)分析正確的是(D)

撕去下表皮,____?,保溫②

Nm—18h

表皮已消酶溶液及滲透壓穩(wěn)定原生質(zhì)體沉

毒的葉片劑,葉段漂浮其上于培養(yǎng)皿底

吸吟酶液巳瞬一原生質(zhì)體

臺、。一減亞細(xì)胞雜交回*雜交植林

原生質(zhì)體沉細(xì)胞碎片

于清洗培養(yǎng)基

A.清洗培養(yǎng)基密度小于原生質(zhì)體密度

B.圖示①過程可用聚乙二醇調(diào)節(jié)滲透壓

C.葉片經(jīng)消毒后需用蒸儲水多次沖洗

D.原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是再生細(xì)胞壁

解析:原生質(zhì)體在輕微高滲溶液中比在等滲溶液中更為穩(wěn)定,清洗培養(yǎng)基密度大于原生

質(zhì)體密度,A錯誤;圖示①過程調(diào)節(jié)滲透壓用的是滲透壓穩(wěn)定劑,聚乙二醇用于誘導(dǎo)原

生質(zhì)體融合,B錯誤;葉片經(jīng)消毒后需用無菌水沖洗,C錯誤;原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)

志是再生細(xì)胞壁,即原生質(zhì)體活性正常,D正確。

5.(2023?揚州考前調(diào)研)下列有關(guān)植物細(xì)胞工程的敘述,正確的是(A)

A.脫分化的實質(zhì)是通過基因的選擇性表達(dá)改變細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能

B.植物體細(xì)胞雜交培育出的新品種植株有可能是單倍體

C.菊花組織培養(yǎng)選擇外植體,通常選用分裂能力強的新生細(xì)胞

D.植物細(xì)胞培養(yǎng)中獲得了許多細(xì)胞代謝產(chǎn)物,體現(xiàn)了細(xì)胞全能性

解析:脫分化過程需要植物激素調(diào)節(jié)植物體相關(guān)基因的表達(dá),屬于基因的選擇性表達(dá),

A正確;植物體細(xì)胞雜交是將不同物種的體細(xì)胞融合后再發(fā)育成個體,不是直接由配子

發(fā)育成個體,不屬于單倍體,B錯誤;菊花組織培養(yǎng)選擇外植體,通常選用分裂能力強

的部位,如分生組織,通常不直接選擇細(xì)胞,C錯誤;植物細(xì)胞培養(yǎng)過程僅發(fā)生脫分化

產(chǎn)生愈傷組織,未體現(xiàn)細(xì)胞全能性,D錯誤。

配套精練

一、單項選擇題

L(2023滁州考前模擬)下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)及其應(yīng)用的敘述,正確的是(C)

A.依次經(jīng)酒精和次氯酸鈉消毒后的外植體可直接接種到培養(yǎng)基上

B.對莖尖脫分化形成的愈傷組織需用射線處理后方可得到脫毒苗

C.玉米(2〃=20)的花藥壁細(xì)胞經(jīng)植物組織培養(yǎng)可獲得二倍體幼苗

D.培養(yǎng)基中蔗糖越多,越有利于脫分化和再分化

解析:經(jīng)酒精和次氯酸鈉消毒后的外植體,需用無菌水清洗,并用無菌濾紙吸去表面的

水分,再接種到培養(yǎng)基上,A錯誤;莖尖組織分裂旺盛,所含病毒少,可經(jīng)組織培養(yǎng)得

到脫毒苗,B錯誤;培養(yǎng)基中蔗糖的作用為提供碳源、能量和調(diào)節(jié)滲透壓,蔗糖濃度過

高會導(dǎo)致外植體失水死亡,D錯誤。

2.(2024.淮安調(diào)研)利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在離體條件下對單個細(xì)胞或細(xì)胞團進行培養(yǎng)

使其增殖,可獲得植物細(xì)胞的某些次生代謝物。下列說法正確的是(A)

A.利用該技術(shù)可獲得某些自然狀態(tài)含量少或無法通過化學(xué)合成途徑得到的產(chǎn)物

B.單個植物細(xì)胞體積小,產(chǎn)生的次生代謝物少,故無法進行產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)

C.次生代謝物是植物基本生命活動所必需的微量物質(zhì),應(yīng)選擇產(chǎn)量高的細(xì)胞進行培養(yǎng)

D.該技術(shù)原理是利用促進細(xì)胞生長的培養(yǎng)條件提高單個細(xì)胞中次生代謝物的含量

解析:由于植物細(xì)胞的次生代謝物含量很低,從植物組織提取會大量破壞植物資源,有

些產(chǎn)物又不能或難以通過化學(xué)合成途徑得到,人們可以利用植物細(xì)胞培養(yǎng)來獲得目標(biāo)產(chǎn)

物,這個過程就是細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn),A正確;單個植物細(xì)胞體積小,產(chǎn)生的次生

代謝物少,可以進行產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn),B錯誤;次生代謝物不是植物基本的生命活動

所必需的物質(zhì),C錯誤;細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)主要是利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),通過促

進細(xì)胞增殖,以從細(xì)胞群中獲得次生代謝物,單個細(xì)胞中次生代謝物的含量并沒有提高,

D錯誤。

3.(2024.海安期初監(jiān)測)利用東方百合和云南大百合進行植物體細(xì)胞雜交,部分結(jié)果如

表。相關(guān)說法正確的是(B)

組另UPEG濃度/%處理條件融合率/%

12510

230黑暗12

33527±3℃15

44015min30

54520

A.用胰蛋白酶處理百合組織分離得到原生質(zhì)體

B.獲得原生質(zhì)體后,用血細(xì)胞計數(shù)板進行計數(shù)

C.低濃度PEG促進原生質(zhì)體融合,高濃度抑制融合

D.融合后的原生質(zhì)體直接經(jīng)再分化發(fā)育成雜種百合

解析:百合是植物,其細(xì)胞壁的主要成分為纖維素和果膠,要得到原生質(zhì)體,需要用纖

維素酶和果膠酶處理植物細(xì)胞,A錯誤;獲得原生質(zhì)體后,細(xì)胞已經(jīng)分散,可以利用血

細(xì)胞計數(shù)板進行計數(shù),B正確;從表格中看出,PEG濃度為40%時融合率最高,當(dāng)PEG

濃度為45%時,融合率高于PEG濃度為25%時,且無PEG濃度為0的對照組,無法得

出高濃度抑制融合的結(jié)論,C錯誤;融合后的原生質(zhì)體需要再生出細(xì)胞壁,經(jīng)過脫分化

形成愈傷組織,再經(jīng)過再分化發(fā)育成雜種百合,D錯誤。

4.高寒藏藥材川西獐牙菜能有效治療肝炎,其野生資源匱乏且難以建立快速繁殖系。

紫外線照射能隨機破壞染色體結(jié)構(gòu),使其發(fā)生斷裂,使染色體上某些片段轉(zhuǎn)移到其他染

色體上。研究人員利用胡蘿卜與川西獐牙菜進行體細(xì)胞雜交,流程如圖。下列分析錯誤

的是(B)

紫外線照射

胡蘿卜d鬟笑_

A.過程②中可用PEG誘導(dǎo)兩個親本原生質(zhì)體的融合

B.過程③雜種細(xì)胞經(jīng)脫分化、再分化形成愈傷組織

C.此種體細(xì)胞雜交技術(shù)可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙

D.此種方法存在變異的不定向性,可在③④過程中進行篩選

解析:②是原生質(zhì)體融合的過程,該過程可用PEG(聚乙二醇)誘導(dǎo)融合,A正確;過程

③是雜種細(xì)胞形成愈傷組織的過程,表示脫分化,B錯誤;此種體細(xì)胞雜交技術(shù)可以克

服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能,C正確;紫外線照射能隨機破壞染色

體結(jié)構(gòu),存在變異的不定向性,可在③脫分化和④再分化過程中進行篩選,D正確。

5.培育甘蔗脫毒苗有兩條途徑,經(jīng)②過程獲得的脫毒苗效果更好。下列說法錯誤的是

(A)

取0.5?1.0mm52℃熱水處理30min接種到培養(yǎng)基A

帶葉原基的芽再38℃處理10?15d中,誘導(dǎo)生芽

獲得轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)基B

脫毒苗中,誘導(dǎo)生根

A.不經(jīng)過流程②能明顯縮短育種年限且獲得的脫毒苗都是純合子

B.過程②能使組織中的病毒減少或減弱其侵染增殖能力

C.圖中脫毒苗的培育過程體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性

D.從過程③到④需要調(diào)整所用培養(yǎng)基中某些成分的含量和比例

解析:不經(jīng)過流程②產(chǎn)生脫毒苗的方法脫毒率低,不能明顯縮短育種年限,獲得的脫毒

苗基因型和原植物體相同,不一定是純合子,A錯誤。過程②利用52℃和38。。水

處理能使組織中的病毒部分或全部失活,從而減少或減弱其侵染增殖能力,B正確。圖

中脫毒苗的培育過程利用了植物組織培養(yǎng)技術(shù),體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性,C正確。由

圖可知,過程③是誘導(dǎo)生芽,過程④是誘導(dǎo)生根,在植物組織培養(yǎng)基中,生長素與細(xì)胞

分裂素用量比值高時,有利于根的分化、抑制芽的形成;比值低時,有利于芽的分化、

抑制根的形成,故從過程③到④需要調(diào)整所用培養(yǎng)基中某些成分的含量和比例,D正確。

6.(2023?泰州中學(xué))花椰菜(2〃=18)種植時容易遭受病菌侵害形成病斑,紫羅蘭(2〃=14)

具有一定的抗病性。科研人員利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育具有抗病性狀的花椰菜新品

種,如圖所示。下列有關(guān)敘述錯誤的是(C)

再生|鑒叫雜種

組織植株植株

紫羅蘭葉片

A.圖中培育雜種植株所用的技術(shù)體現(xiàn)了植物細(xì)胞全能性和細(xì)胞膜流動性原理

B.過程③的培養(yǎng)基中需加入植物激素來誘導(dǎo)脫分化

C.過程①可使用纖維素酶和果膠酶,過程②用滅活的病毒進行誘導(dǎo)

D.病菌懸浮液均勻噴施于雜種植株葉片上,一段時間后,測定病斑面積占葉片總面積

的百分比,可篩選抗病性強的雜種植株

解析:圖中培育雜種植株所用的技術(shù)涉及原生質(zhì)體融合和雜種細(xì)胞形成雜種植株兩個過

程,因此體現(xiàn)了細(xì)胞膜流動性和植物細(xì)胞全能性原理,A正確;過程③的培養(yǎng)基是誘導(dǎo)

脫分化的,其中需加入植物激素來誘導(dǎo)脫分化,B正確;過程①為去壁過程,植物細(xì)胞

壁的主要成分是纖維素和果膠,根據(jù)酶的專一性原理,該過程可使用纖維素酶和果膠酶,

過程②用物理法和化學(xué)法進行誘導(dǎo),但不能用滅活的病毒進行誘導(dǎo),C錯誤;病菌懸浮

液均勻噴施于雜種植株葉片上,一段時間后,測定病斑面積占葉片總面積的百分比,可

篩選抗病性強的雜種植株,即病斑面積占葉片總面積的百分比小的植株是抗病性強的雜

種植株,D正確。

7.(2023?江蘇模擬)植物細(xì)胞工程在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)等方面有著廣泛的應(yīng)用,并取得了

顯著的社會效益和經(jīng)濟效益。相關(guān)敘述錯誤的是(B)

A.利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)紫草寧的主要原理是細(xì)胞增殖

B.利用作物脫毒技術(shù)繁育抗毒草莓利用了植物細(xì)胞的全能性

C.利用單倍體育種技術(shù)培育單育1號煙草大大縮短了育種年限

D.利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育白菜一甘藍(lán)打破了物種間的生殖隔離

解析:利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)紫草寧,應(yīng)將紫草的外植體培育到愈傷組織階段,并

進行植物細(xì)胞培養(yǎng),主要原理是細(xì)胞增殖,A正確;利用作物脫毒技術(shù)繁育的草莓利用

了植物細(xì)胞的全能性,但該草莓不抗病毒,B錯誤;與常規(guī)的雜交育種相比,單倍體育

種極大地縮短了育種年限,C正確;白菜與甘藍(lán)屬于不同的物種,二者之間存在生殖隔

離,利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育出的白菜一甘藍(lán)打破了物種間的生殖隔離,D正確。

8.酸性土壤是pH小于7的土壤總稱。下圖表示利用耐酸植物甲(4〃)和高產(chǎn)植物乙(2〃)

培育高產(chǎn)耐酸雜種植物的過程(圖中標(biāo)號表示過程或處理手段),下列相關(guān)敘述錯誤的是

(C)

甲種植物細(xì)胞、①甲原生質(zhì)體、②._人〃“出③

乙種植物細(xì)胞/處理乙原生質(zhì)體/誘導(dǎo)

雜種細(xì)胞翌愈傷組織疑胚狀體毀雜種植株

A.圖示過程中依據(jù)的原理主要有細(xì)胞膜的流動性、植物細(xì)胞的全能性等

B.過程①可將甲、乙植物細(xì)胞置于含纖維素酶和果膠酶的等滲溶液中處理

C.過程②可以用PEG誘導(dǎo),過程③得到的雜種細(xì)胞中含有3個染色體組

D.過程④⑤使用的培養(yǎng)基需加入生長素和細(xì)胞分裂素,但加入的比例不同

解析:圖示過程為植物體細(xì)胞雜交技術(shù),該過程中原生質(zhì)體融合利用的原理是細(xì)胞膜的

流動性,植物組織培養(yǎng)利用的原理是植物細(xì)胞的全能性,A正確;圖中①表示酶解法去

壁獲得原生質(zhì)體的過程,由于原生質(zhì)體失去了細(xì)胞壁的保護,會發(fā)生失水皺縮或吸水漲

破的現(xiàn)象,因此該過程需要在含纖維素酶和果膠酶的等滲溶液中處理,B正確;過程②

表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的過程,可以用PEG誘導(dǎo),產(chǎn)生的雜種細(xì)胞中的染色體組數(shù)是

兩種原生質(zhì)體中染色體組之和,因此雜種細(xì)胞中應(yīng)該含有6個染色體組,C錯誤;過程

④⑤分別表示脫分化和再分化,兩個過程的培養(yǎng)基中都需要加入生長素和細(xì)胞分裂素,

但是兩種植物激素的比例應(yīng)該不同,D正確。

9.利用植物細(xì)胞工程生產(chǎn)紫杉醇的過程主要包括誘導(dǎo)愈傷組織、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)、篩選

穩(wěn)定高產(chǎn)紫杉醇的細(xì)胞系、利用生物反應(yīng)器進行培養(yǎng)等。下列說法不正確的是(B)

A.用藥劑對外植體消毒時,要兼顧消毒效果和植物的耐受性

B.愈傷組織細(xì)胞具有大液泡,誘導(dǎo)其形成需避光處理

C.將愈傷組織分散成單個懸浮細(xì)胞時可以用適量的果膠酶處理

D.圖中懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞還需要經(jīng)過篩選才能用于紫杉醇工業(yè)化生產(chǎn)

解析:用藥劑對外植體消毒時,要兼顧消毒效果和植物的耐受性,避免過度消毒對外植

體造成損傷,A正確;愈傷組織細(xì)胞比較幼嫩,細(xì)胞核大、液泡小,誘導(dǎo)其形成需避光

處理,B錯誤;植物細(xì)胞壁的主要成分為纖維素和果膠,所以懸浮培養(yǎng)時,可以利用果

膠酶(酶的專一性)處理將植物細(xì)胞分散開,C正確;植物細(xì)胞在進行傳代培養(yǎng)過程中,

細(xì)胞會發(fā)生變異,需要篩選出生長速度快、紫杉醇積累多的細(xì)胞系用于工業(yè)化生產(chǎn),D

正確。

10.(2023?海安中學(xué))狼爪瓦松是一種具有觀賞價值的野生花卉且其細(xì)胞中的黃酮類化合

物可入藥。為滿足狼爪瓦松市場化需求,某科研小組利用植物細(xì)胞工程等技術(shù)手段進行

狼爪瓦松的擴大培養(yǎng),具體過程如圖所示(其中數(shù)字序號代表相應(yīng)的處理過程)。下列有

關(guān)分析正確的是(B)

狼爪瓦松植株甲

幼嫩的葉到秀變體

@?原生質(zhì)體一植株丁

誘導(dǎo)形成

愈傷組織

A.過程③先在生長素/細(xì)胞分裂素的值高的培養(yǎng)基中培養(yǎng),再轉(zhuǎn)移至其值低的培養(yǎng)基中

培養(yǎng)

B.制備培養(yǎng)基的正確順序是:稱量一溶解一定容一調(diào)pH-分裝一滅菌

C.過程④常用射線或化學(xué)物質(zhì)處理,可獲得大量所需的突變體植株丙

D.過程⑥利用愈傷組織分裂能力強、全能性高的特點可大量獲得黃酮類化合物

解析:③應(yīng)先誘導(dǎo)生芽再誘導(dǎo)生根,先在生長素/細(xì)胞分裂素的值低的培養(yǎng)基中培養(yǎng),再

轉(zhuǎn)移至其值高的培養(yǎng)基中培養(yǎng),A錯誤;過程④常用射線或化學(xué)物質(zhì)處理,由于人工誘

變具有不定性向和低頻性,因此通過篩選可能獲得所需的突變體植株丙,c錯誤;過程

⑥利用愈傷組織分裂能力強的特點,通過培養(yǎng)愈傷組織細(xì)胞可大量獲得黃酮類化合物,

D錯誤。

二、多項選擇題

H.(2024?南京零模)寒蘭為名貴的蘭花品種,一般生長在深山幽谷的山腰谷壁。由于

人類的過度采摘,現(xiàn)在很難找到寒蘭,偶爾能發(fā)現(xiàn)的也只是較小的植株。為了增加野生

寒蘭數(shù)量,科研人員希望對其進行大量人工繁殖,再移栽至原有生境。下列有關(guān)敘述正

確的是(BC)

A.在植物的生長發(fā)育過程中,所有的細(xì)胞都表現(xiàn)出全能性

B.可將寒蘭的組織細(xì)胞放置在培養(yǎng)基中進行植物組織培養(yǎng)

C.在誘導(dǎo)生根時,培養(yǎng)基中應(yīng)適當(dāng)提高生長素的占比

D.長出叢芽的過程中,寒蘭組織細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)會發(fā)生改變

解析:在生物的生長發(fā)育過程中,細(xì)胞中的基因選擇性表達(dá),不能表現(xiàn)出全能性,離體

細(xì)胞在適宜條件下才能表現(xiàn)出全能性,A錯誤;“為了增加野生寒蘭數(shù)量,對其進行人

工大量繁殖,再移栽至原有生境”,可利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將寒蘭的組織細(xì)胞放置在

培養(yǎng)基中進行植物組織培養(yǎng)得到寒蘭幼苗,然后再移栽,B正確;誘導(dǎo)生根時應(yīng)適當(dāng)提

高生長素的比例,誘導(dǎo)生芽時應(yīng)適當(dāng)提高細(xì)胞分裂素的比例,C正確;長出叢芽的過程

為再分化,寒蘭組織細(xì)胞的遺傳物質(zhì)未發(fā)生改變,D錯誤。

12.(2024.南京調(diào)研)下圖表示科學(xué)家通過植物細(xì)胞工程,培育“矮牽牛一粉藍(lán)煙草”雜種

植株的過程。下列敘述正確的有(BD)

⑤藍(lán)

細(xì)

A.過程①和②需要在濃度為0.5g-mL-1蔗糖溶液中用酶解法處理適宜時間

B.③過程可以用PEG誘導(dǎo)融合,細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是再生細(xì)胞壁

C.“矮牽?!鬯{(lán)煙草,,為二倍體植株,培育過程中需使用選擇培養(yǎng)基

D.⑤過程培養(yǎng)基需要添加細(xì)胞分裂素和生長素等,培養(yǎng)過程中需更換培養(yǎng)基

解析:過程①和②表示用酶去除植物細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體的過程,該過程若在0.5g?mL

一i蔗糖溶液中處理,會導(dǎo)致原生質(zhì)體滲透失水,A錯誤;③過程是誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,

該過程可以用PEG誘導(dǎo)融合,細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是再生細(xì)胞壁,B正確;該培育過

程利用二倍體矮牽牛和二倍體粉藍(lán)煙草通過細(xì)胞融合獲得的,“矮牽牛一粉藍(lán)煙草”是異

源四倍體雜種植株,C錯誤;⑤過程培養(yǎng)基需要添加細(xì)胞分裂素和生長素等,由于兩者

的使用順序和配比會影響分化方向,故培養(yǎng)過程中需更換培養(yǎng)基,D正確。

13

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