CN202110926607.2 - 川陳皮素在制備抗膽管癌藥物中的應(yīng)用配方專利技術(shù)

A61K31/352(2006.01)A61P35/00(2006.01)C12Q1/02(2006.01)KR20210027031A,2021.US6239114B1,2001.0本發(fā)明涉及川陳皮素在制備抗膽管癌藥物細(xì)胞RBE和膽管癌細(xì)胞TFK1體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，川陳皮素對RBE和TFK1細(xì)胞具有明顯的抑制作用，阻22.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的膽管癌為肝內(nèi)膽管癌或肝外膽管3.川陳皮素作為唯一活性成分在制備抑制膽管癌細(xì)胞3[0002]癌癥是對人類生命健康危害最大的疾病之一，膽管癌是起源于膽管上皮細(xì)胞的[0003]川陳皮素(Nobiletin)是從蕓香科柑桔屬橘子CitrusreticulaiaBlanco果皮[0004]中國專利文獻(xiàn)CN113018292A公開了川陳皮素作為BH3擬似藥對小細(xì)胞肺癌的抑制作用及與組蛋白去乙?；敢种苿﹨f(xié)同作用。中國專利文獻(xiàn)CN110327465A公開了一種復(fù)方抗前列腺癌藥物。所述的藥物由多甲氧基黃酮類藥物川陳皮素和雄激素受體抑制劑[0006]本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供川陳皮素在制備抗膽管癌藥物中4[0014]在本發(fā)明的另一方面，提供川陳皮素作為靶點(diǎn)在篩選制備抗膽管[0016]1、本發(fā)明通過肝膽管癌細(xì)胞RBE和膽管癌細(xì)胞TFK1體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，川陳皮素對[0018]圖1.CCK8實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)川陳皮素(Nob)對TFK1和RBE[0019]圖2.細(xì)胞存活能力檢測(集落形成實(shí)驗(yàn))發(fā)現(xiàn)川陳皮素對TFK1和RBE人膽管癌細(xì)[0020]圖3.細(xì)胞增殖檢測發(fā)現(xiàn)川陳皮素對TFK1和RBE人膽管癌細(xì)胞具有抑制細(xì)胞增殖養(yǎng)基(Gibco)；5養(yǎng)基和DMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并置于37℃,5％CO2的培養(yǎng)箱中，細(xì)胞融合度達(dá)到90％以上時(shí)進(jìn)行傳代，從10cm皿中吸出舊的培養(yǎng)基并丟棄，向10cm皿中加入1mL預(yù)熱的含0.25％EDTA的胰酶后，將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱消化1?3min可使細(xì)胞解離程度達(dá)90％以上，往皿中加入[0038]細(xì)胞存活率(100％)＝(給藥組OD值?完全空白對照組OD值)/(對照組OD值?完全[0041]經(jīng)過消化和計(jì)數(shù)，1000個(gè)TFK1和RBE細(xì)胞分別種在含有2mL完全培養(yǎng)基的6孔板[0042]細(xì)胞存活率計(jì)算公式：細(xì)胞存活率(％)＝(實(shí)驗(yàn)組集落數(shù)/對照組集落數(shù))×[0044]EdU(5?ethynyl?2’?deoxyuridine)可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中，因此新合成的DNA可在熒光顯微鏡下發(fā)出熒光，代表細(xì)胞增殖水平。分別將630min。吸除Click反應(yīng)液，用洗滌液洗滌3次，每次3-5min。吸除洗滌液后，每孔加1XUSA)混合，皮下注射于裸鼠右腋下。4d后開始腹腔注射川陳皮素(50mg/kg/d，溶于10%[0057]結(jié)果如圖4所示，川陳皮素可以誘導(dǎo)TFK1和RBE膽管癌細(xì)胞的G0/G1細(xì)胞周期阻[0059]結(jié)果如圖5所示，川陳皮素處理組腫瘤體積明顯7