中藥制劑一般雜質(zhì)檢查-砷鹽檢查法

中藥制劑雜質(zhì)檢查技術(shù)——砷鹽檢查法案例導入科學證實光緒皇帝死于砒霜中毒

2008年北京市公安局法醫(yī)檢驗鑒定中心，中國原子能科學研究院反應堆工程研究設(shè)計所，清西陵文物管理處共同發(fā)布了歷時5年研究的成果《清光緒帝死因研究工作報告》（以下簡稱《報告》）

《報告》稱通過對光緒皇帝頭發(fā)樣本進行法醫(yī)學檢測，發(fā)現(xiàn)含砷量遠超過正常值，僅頭發(fā)殘渣中的砒霜含量就高達201.5毫克，而正常人口服砒霜60—200毫克就會中毒身亡如何進行砷鹽檢查?砷鹽和砒霜有什么關(guān)系?中藥制劑中砷鹽的來源有哪些?案例導入科學證實光緒皇帝死于砒霜中毒

砷鹽檢查法一、概述砒霜是一種急性劇毒物質(zhì)，無臭無味，為白色霜狀粉末，化學成分為三氧化二砷（As2O3）。部分中藥方劑中含有砒霜，記載其有“劫痰截瘧，殺蟲，蝕惡肉，治寒痰哮喘”的功效

1.砷鹽與砒霜砷鹽是藥物中存在的微量的砷化物和砷酸鹽。其中砷可以三價、五價或有機狀態(tài)的形式存在一、概述

2.砷鹽的來源砷鹽檢查法中藥材栽培種植階段：除草劑、殺蟲劑、磷酸鹽肥料等中藥制劑生產(chǎn)過程：無機試劑、搪瓷反應器等一、概述

3.砷鹽的檢查方法砷鹽檢查法對照法：比較供試品溶液與一定量的標準砷溶液在相同條件下處理所呈現(xiàn)的產(chǎn)物顏色的深淺，《中國藥典》收載砷鹽檢查第一法（古蔡氏法）和第二法（Ag-DDC）法含量測定法：原子吸收分光光度法（AAS）、電感耦合等離子體質(zhì)譜法測定部分中藥制劑中砷鹽的含量二、第一法：古蔡氏法1.測定原理砷鹽檢查法金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，與供試品中的微量砷鹽反應生成具有揮發(fā)性的砷化氫，遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑，與相同條件下一定量的標準砷溶液所產(chǎn)生的砷斑比較，以判定供試品中砷鹽是否超過限量As3++3Zn+3H+→3Zn2++AsH3

（反應快）AsO33-+3Zn+9H+→3Zn2++3H2O+AsH3（反應快）AsO43-+4Zn+11H+→4Zn2++4H2O+AsH3（反應慢）砷鹽與鋅和鹽酸作用AsH3+2HgBr2→2HBr+AsH(HgBr)2(黃色)2As(HgBr)3+AsH3→3AsH(HgBr)2(棕色)

砷化氫與溴化汞試紙作用2.儀器用具古蔡氏法檢砷裝置，分析天平（感量0.1mg）、量瓶（100ml、1000ml）、量筒（10ml）、恒溫水浴鍋、馬弗爐、坩堝、干燥器、變色硅膠、定量濾紙鹽酸、碘化鉀、鋅粒、酸性氯化亞錫試液、標準砷溶液、溴化汞試紙、醋酸鉛棉花等砷鹽檢查法二、第一法：古蔡氏法3.測定方法砷鹽檢查法二、第一法：古蔡氏法搭建儀器裝置（醋酸鉛棉花準備、溴化汞試紙準備）標準砷斑的制備（標準砷溶液2ml）供試品檢查（中藥制劑需經(jīng)有機破壞后使砷鹽游離出來）4.注意事項砷鹽檢查法二、第一法：古蔡氏法醋酸鉛棉花的作用：吸收H2S，避免形成PbS色斑4.注意事項砷鹽檢查法二、第一法：古蔡氏法碘化鉀/KI和氯化亞錫SnCl2的作用：還原劑，加快反應速度將五價砷還原為三價砷，加快反應速度AsO33-KISnCl2AsO43-AsH3慢快＋5＋3將I2還原為I-，循環(huán)利用4.注意事項砷鹽檢查法二、第一法：古蔡氏法碘化鉀KI和氯化亞錫SnCl2的作用：還原劑，加快反應速度與Zn粒表面形成Zn-Sn齊SnCl2抑制銻化氫的生成三、第二法：二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC法）1.測定原理本法既可以用于藥品中的砷鹽限量檢查，又可以測定砷鹽含量砷鹽檢查法金屬鋅與酸反應生成新生態(tài)的氫，與供試品中的微量砷鹽反應生成具有揮發(fā)性的砷化氫，用二乙基二硫代氨基甲酸銀的三氯甲烷溶液吸收（含二乙胺），生成紅色膠態(tài)銀，與相同條件下一定量的標準砷溶液所產(chǎn)生的產(chǎn)物比較顏色，或在510nm條件下測定吸光度，以判定供試品中砷鹽是否超過限量2.儀器用具砷鹽檢查法三、第二法：二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC法）Ag-DDC法檢砷裝置，分析天平（感量0.1mg）、量瓶（100ml、1000ml）、量筒（10ml）、恒溫水浴鍋、馬弗爐、坩堝、干燥器、變色硅膠、定量濾紙等鹽酸、碘化鉀、鋅粒、酸性氯化亞錫試液、標準砷溶液、二乙基二硫代氨基甲酸銀試液、三氯甲烷、醋酸鉛棉花等3.測定方法砷鹽檢查法三、第二法：二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC法）搭建儀器裝置（醋酸鉛棉花準備、Ag-DDC試液準備）標準砷斑的制備（標準砷溶液2ml）供試品檢查（中藥制劑需經(jīng)有機破壞后使砷鹽游離出來）對照法含量測定法：照紫外-可見分光光度法，在510nm處測定吸光度4.注意事項二乙基二硫代氨基甲酸銀試液的配制：試液中加入三乙胺是為了中和反應生成的二乙基二硫代氨基甲酸二乙基二硫代氨基甲酸銀試液為淺黃綠色，測吸光度時，須以此試液為空白砷鹽檢查法三、第二法：二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC法）操作時由于在25～40℃水浴中反應45分鐘后，平底玻璃管中有部分三氯甲烷揮發(fā)，故比色前應添加三氯甲烷至5ml，搖勻鏈接未來崗位砷鹽是中藥飲片和中藥制劑中常見的毒性雜質(zhì)，砷鹽限量檢查可以有效控制某些藥材中微量砷鹽的含量，對于保證藥品安全性和純度有著重要意義作為一名藥品檢驗人員，須牢固樹立“質(zhì)量第一、安全操作”的意識，牢固掌握砷鹽檢查的操作方法和注