細(xì)菌實驗室檢查項目

細(xì)菌室常規(guī)檢測項目:一

形態(tài)學(xué)檢驗（MorphologicalExamination）（一）

多種染色1革蘭染色（Gramstain）:將細(xì)菌分為革蘭陽性菌如葡萄球菌屬,鏈球菌屬等;革蘭陰性菌如大腸埃希菌沙門菌,志賀菌等。2抗酸染色(Acid-faststain):經(jīng)過染色將細(xì)菌分為兩大類:抗酸性細(xì)菌和非抗酸性細(xì)菌,抗酸性細(xì)菌種類較少,如結(jié)核分枝桿菌,麻風(fēng)分枝桿菌等。正常:未見?？顾崛旧?找到紅色分枝桿菌,及匯報“找見抗酸分枝桿菌”,量能夠用加號表示:

++++

每個視野>10根

+++

每個視野發(fā)覺1～10根++

100個視野發(fā)覺10～99根+

300個視野發(fā)覺3～9根±

300個視野發(fā)覺1～2根3異染顆粒染色（Metachromaticgranulastain）:用于檢驗棒狀桿菌。4墨汁染色（Indianinknegativestaining）:用背景著色,而細(xì)菌本身不著色染色方法,用于腦脊液中查找新生隱球菌。正常:未見。5鞭毛染色（Flagellastain）:鞭毛數(shù)目和位置隨細(xì)菌種類而不一樣,可分為周毛菌、單毛菌、雙毛菌和叢毛菌,是細(xì)菌分類和判定關(guān)鍵依據(jù)。如霍亂弧菌是單鞭毛菌。6莢膜染色（Capsulesstain）:莢膜是細(xì)菌壁外一層粘液性多聚物,給予致病菌侵襲力。染色將莢膜染成與菌體不一樣顏色,可作為細(xì)菌判定依據(jù)。如肺炎鏈球菌。（二）

涂片檢測(smear)

1便球桿比檢驗(stoolcocus/bacillus):即革蘭陽性球菌與革蘭陰性桿菌之比。正常值:便球桿比:1:3臨床意義:健康人腸道內(nèi)借居著大量厭氧菌和小部分需氧菌。除人乳喂養(yǎng)嬰兒腸道內(nèi)以革蘭陽性球菌為主外,其它人均以革蘭陰性桿菌占絕對優(yōu)勢。在腸道發(fā)生致病菌如沙門、志賀、弧菌感染時往往因為使用抗生素而是革蘭陰性桿菌受到抑制,此時球菌/桿菌比值有可能變大。若比值顯著增大,常提醒腸道菌群紊亂或發(fā)生二重感染。2標(biāo)本真菌涂片（fungi）:經(jīng)革蘭染色如發(fā)覺革蘭陽性卵圓形芽生孢子或假菌絲,可初步匯報為:找到真菌孢子和菌絲。正常值:未見真菌。3痰涂片檢驗（sputumsmear）:臨床意義:目確定標(biāo)本是否適合做細(xì)菌培養(yǎng),初步判定是否有致病菌存在。首先應(yīng)確定標(biāo)本是否為來自下呼吸道痰,其標(biāo)準(zhǔn)為革蘭染色WBC>25/LPF(低倍視野),上皮細(xì)胞<10/LPF。有些細(xì)菌可做初步判定:1)

肺炎鏈球菌:革蘭染色為陽性球菌,成雙或短鏈狀排列2)

結(jié)核分枝桿菌:抗酸染色,找到紅色分枝桿菌,及匯報“找見抗酸分枝桿菌”,量能夠用加號表示:

++++

每個視野>10根

+++

每個視野發(fā)覺1～10根++

100個視野發(fā)覺10～99根+

300個視野發(fā)覺3～9根±

300個視野發(fā)覺1～2根3)

真菌:經(jīng)革蘭染色如發(fā)覺革蘭陽性卵圓形芽生孢子或假菌絲,可初步匯報為:找到真菌孢子和菌絲。4)

放線菌及奴卡菌:革蘭染色后,插件中央部分菌絲為革蘭陽性,而四面放射末梢菌絲為革蘭陰性,切部分菌株有抗酸性?？蓞R報:找見疑似放線菌或奴卡菌。4淋球菌涂片檢驗（Neisseriagonorrhoeae）臨床意義:標(biāo)本:男性以滅菌鹽水清洗尿道口,取尿道膿性分泌物涂片;女性尿道炎患者清洗尿道口后從陰道后壁從后向前方壓迫尿道使分泌物排出,涂片。子宮頸炎患者先用滅菌鹽水清洗宮頸口和陰道壁,再用陰道窺鏡壓迫子宮陰道部使分泌物排出。涂片革蘭染色后鏡檢,中性粒細(xì)胞內(nèi)有革蘭氏陰性雙球菌含有診療價值。匯報結(jié)果:“中性粒細(xì)胞內(nèi)（或/和）外見到革蘭陰性雙球菌”。正常:未見。二

細(xì)菌分離培養(yǎng)（IsolationandCultureofbacteria）

1血培養(yǎng)(bloodculture):臨床意義:正常人體血液是無菌,當(dāng)人體局部感染向全身播散和出現(xiàn)全身感染時,血液中可出現(xiàn)細(xì)菌,依據(jù)程度不一樣稱為菌血癥或敗血癥.菌血癥往往需要以數(shù)次血培養(yǎng)證實,如表皮葡萄球菌,即可是致病菌,也是較常見污染菌.正常:無菌生長。最終陰性匯報時間為7天。亞急性心內(nèi)膜炎患者標(biāo)本如5～6天無菌生長,應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)至2周方可匯報陰性結(jié)果。布魯氏菌培養(yǎng)第3周做出最終陰性匯報。厭氧菌培養(yǎng)應(yīng)在第2周做出最終陰性匯報。真菌血癥應(yīng)在第3周做出最終陰性匯報。結(jié)核血培養(yǎng)應(yīng)在第6周做出最終陰性匯報。

2尿液培養(yǎng)（urineculture）:臨床意義:正常人體膀胱中尿液是無菌,用膀胱穿刺取出尿液應(yīng)是無菌。當(dāng)尿液經(jīng)尿道排出體外,受到尿道中細(xì)菌污染而混有細(xì)菌。取經(jīng)尿道排出中止尿,細(xì)菌數(shù)不會超出104-5ml,所以,以此界限作為診療泌尿道系感染依據(jù)。尿液培養(yǎng)反應(yīng)腎臟、尿道、前列腺等炎癥改變,幫助臨床選擇有效抗菌藥品。正常48小時仍無菌生長可做最終陰性匯報。二十四小時如有細(xì)菌生長即做細(xì)菌判定及藥敏。3痰培養(yǎng):（sputumculture）:臨床意義:痰中病原菌不少屬于機(jī)會致病菌,與正常菌群同在,在匯報時應(yīng)做說明。對于機(jī)會致病菌,通常僅當(dāng)其數(shù)量超出正常菌群時才可匯報判定結(jié)果及藥敏試驗結(jié)果。檢出致病菌時,除匯報該菌判定名稱外,還需同時匯報正常菌群情況。通常以匯報甲型鏈球菌和奈瑟氏菌作為正常菌群存在指標(biāo)。如:甲型鏈球菌+奈瑟氏菌

+肺炎克雷伯氏菌2+此匯報表明肺炎克雷伯氏菌在數(shù)量上多于正常菌群,診療為病原菌。未檢出致病菌時,應(yīng)匯報“正常菌群”。4咽拭子培養(yǎng)（pharynxswabculture）:臨床意義:鼻、咽部細(xì)菌感染病原菌源于口腔,口腔中現(xiàn)有需氧菌,也有厭氧菌。同痰培養(yǎng)一樣,病原菌不少屬于機(jī)會致病菌,與正常菌群同在,要正確區(qū)分。未檢出致病菌時,應(yīng)匯報“正常菌群”。5穿刺液標(biāo)本（包含胸腹水、關(guān)節(jié)液、心包液）培養(yǎng)（SerousCavityEffusionculture）:臨床意義:正常穿刺液是無菌,有感染情況下,只要檢出細(xì)菌,通常都可視為是病原菌。正常:無菌生長。6糞便培養(yǎng)（stoolculture）:臨床意義:首先從腸道大量細(xì)菌中找出致病菌,對腸道疾病進(jìn)行病原學(xué)診療并經(jīng)過藥敏試驗為臨床提供適宜用藥;其次可對腸道菌群進(jìn)行監(jiān)測,在疾病診療中預(yù)防菌群紊亂。正常:未檢出致病菌。7腦脊液培養(yǎng)(CSFculture):臨床意義:正常人體腦脊液是無菌。當(dāng)人體患有腦脊髓膜炎時,在腦脊髓液中能夠出現(xiàn)病原菌。常見病原菌有細(xì)菌、真菌和結(jié)核菌等。正常:無菌生長。8化膿及創(chuàng)傷感染標(biāo)本培養(yǎng)（PurulentSecretionCulture）:臨床意義組織或器官化膿性感染,其病原菌起源能夠分為兩類內(nèi)源性:感染源是炎癥局部周圍器官中正常菌群(常在菌群),因為損傷等原因造成常在菌群進(jìn)入無菌狀態(tài)組織內(nèi),發(fā)生感染.外源性:感染源是存在于人體外部自然界微生物,因為外傷和直接接觸,外界微生物經(jīng)過人體表面進(jìn)入人體,造成感染.常見細(xì)菌有金黃色葡萄球菌、鏈球菌、消化鏈球菌;陽性桿菌有炭疽芽孢桿菌、破傷風(fēng)梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、潰瘍棒狀桿菌;陰性桿菌有腸桿菌、嗜血桿菌、產(chǎn)堿桿菌、假單胞菌、無色桿菌、擬桿菌、弧菌、氣單胞菌;其她有放線菌、奴卡氏菌、念珠菌、結(jié)核分枝桿菌。三

手工試驗

1觸酶試驗(catalasetest):含有觸酶（過氧化氫酶）細(xì)菌,能催化過氧化氫,放出新生態(tài)氧,繼而生成份子氧出現(xiàn)氣泡。2凝固酶試驗（coagulasetest）:金黃色葡萄球菌產(chǎn)生結(jié)合凝固酶,結(jié)合在細(xì)胞壁上,使血漿中纖維蛋白原變成纖維蛋白附著于細(xì)菌表面,發(fā)生凝集反應(yīng)。3CAMP試驗:B群鏈球菌含有“CAMP”因子,能促進(jìn)葡萄球菌β溶血素活性,使兩種細(xì)菌在劃線處展現(xiàn)箭頭形透明溶血區(qū)。4Optochin敏感試驗:Optochin（ethylhydrocupreine,乙基氫化去甲奎寧商品名）可干擾肺炎鏈球菌葉酸生物合成,抑制該菌生長,故肺炎鏈球菌對其敏感,其她鏈球菌對其耐藥。5氧化酶試驗(oxidasetest):該試紙條適適用于G-桿菌氧化酶試驗。含有氧化酶細(xì)菌,首先使細(xì)胞色素C氧化,再由氧化型細(xì)胞色素C使鹽酸對二甲氨基苯胺氧化,并與α萘酚結(jié)合,生成靛酚藍(lán)而成藍(lán)色。用于初步判定奈瑟氏菌屬及腸桿菌科非發(fā)酵菌。6超廣譜β-內(nèi)酰胺酶測定（ESBLS檢測）:有些大腸和肺克能產(chǎn)生超廣譜β-內(nèi)酰胺酶,她不僅能水解第一代和第二代頭孢菌素,還能水解第三代頭孢菌素類抗生素,如頭孢她啶、頭孢噻肟等和單酰胺酶,使其失去抗菌作用,但對碳青霉烯類無顯著作用。7MRSA和MRS檢測:用30ug紙片頭孢西丁藥敏結(jié)果及新折點(diǎn)能估計mecA介導(dǎo)耐藥。8D－試驗:大環(huán)內(nèi)脂類耐藥葡萄球菌能夠改變、誘導(dǎo)克林霉素耐藥。由erm基因造成23SrRNA甲基化耐藥,與大環(huán)內(nèi)脂類,林可霉素,和鏈霉素B型有交叉,又叫MLSB耐藥,或只耐大環(huán)內(nèi)脂類(msrA基因編碼泵出機(jī)制

)四

血清學(xué)檢測1肥達(dá)氏反應(yīng)（Widal）:正常值:H:<1:80;

O:1<:80;

甲:<1:80;

乙:<1:80;丙:<1:80臨床意義:用標(biāo)準(zhǔn)傷寒、副傷寒菌液與稀釋待檢測血清反應(yīng),依據(jù)凝集效價判定血清中有沒有抗傷寒或抗副傷寒桿菌抗體。在病程不一樣時期相隔5-7天,連續(xù)進(jìn)行血清學(xué)檢驗,假如血清滴度隨之增高4倍或4倍以上就更有診療價值。2外斐氏反應(yīng)(Weil-Felix):正常值:OX19:<1:80

;OXK:<1:80臨床意義:用與立克次氏體有共同抗原成份變形桿菌X19、X2、Xk菌株O抗原與被檢血清作交叉凝集反應(yīng),借以診療斑疹傷寒、恙蟲病等立克次氏體病。通常認(rèn)為凝集價>1:80即有診療意義.更為關(guān)鍵是此種試驗?zāi)味入S病程發(fā)展而很快上升(在發(fā)病兩周末可升高數(shù)倍),到恢復(fù)后期又顯著下降。3結(jié)核抗體檢測(TB-CHECK-1)正常值:陰性臨床意義:快速、定性過篩試驗,能特異性地檢測出活動性結(jié)核病人血清、血漿或全血中抗結(jié)核桿菌抗體。關(guān)鍵檢測IgG和IgA,高濃度IgM亦可被檢出。接種過疫苗人體試驗不起反應(yīng)。4支原體培養(yǎng)（解脲支原體UU或人型支原體MH）正常值:陰性臨床意義:現(xiàn)已從人類泌尿生殖道分離出來7種支原體,其中分離率較高而與泌尿生殖道疾病相關(guān),是解脲支原體,其次是人型支原體。人型支原體（M.humenis,MH）、解脲支原體（Ureaplasmaurealyticum,UU）和生殖器支原體（M.genitalium,MG）都會引發(fā)泌尿生殖道感染。UU與新生兒疾病與成人泌尿生殖道系統(tǒng)炎癥疾病相關(guān),傳輸路徑為性接觸和母嬰接觸,所以UU感染列為性傳輸疾病常引發(fā)非淋菌性尿道炎,慢性前列腺炎和附睪炎,不育不孕,妊娠期感染等。MH關(guān)鍵引發(fā)泌尿生殖系統(tǒng)感染包含盆腔炎,急性腎盂腎炎,陰道炎及宮頸炎等。在健康人群中,可能有U.u或M.h寄生,但<103CCU/ml,故本試劑盒檢測結(jié)果為陰性。檢測到≥104CCU/mlU.u或M.h有較明確臨床意義,通常需用藥診療。103～104CCU/mlU.u或M.h,提醒支原體輕度感染,供醫(yī)生診療診療時參考。7革蘭陰性菌脂多糖（LPS）檢測:體液內(nèi)毒素測定（鱟試驗）正常范圍:<10Pg/ml臨床意義:細(xì)菌內(nèi)毒素作為革蘭陰性菌細(xì)胞壁最外層結(jié)構(gòu)之一,含有多個生物效應(yīng),微量內(nèi)毒素進(jìn)入機(jī)體后,將會產(chǎn)生發(fā)燒、休克及內(nèi)毒素血癥等臨床癥狀。以鱟試驗來檢測內(nèi)毒素,能對內(nèi)毒素血癥、革蘭氏陰性細(xì)菌敗血癥和革蘭氏陰性細(xì)菌感染病人做出早期診療和診療。

8真菌（1-3）-β-D-葡聚糖檢測(G試驗)正常范圍:<10Pg/ml臨床意義:全部真菌細(xì)胞壁上都含有（1-3）-β-D-葡聚糖,而其她微生物、動物及人細(xì)胞成份和細(xì)胞外液都不含這種成份,所以在機(jī)體體液中檢測到（1-3）-β-D-葡聚糖時診療侵襲性真菌感染有效依據(jù)。9嗜異性凝集檢試驗:正常值:陰性或凝集價<1:8臨床意義:傳染性單核細(xì)胞增多癥病原體是EB病毒,病人血清中可測到嗜異性凝集和抗EB病毒抗體,此試驗可診療此病。凝集價有較大增高見于:血清病、何杰金氏病和日本血吸蟲感染急性期。當(dāng)凝集價達(dá)成1:224以上時可結(jié)合病人臨床癥狀確診為傳染性單核細(xì)胞增多癥。約10%病人試驗為陰性,以兒