T-CBPIA 0008-2024 重組溶瘤II型單純皰疹病毒生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范

ICSCCS11.120.10C2762CBPIAⅠT/CBPIA0008—2024 Ⅰ Ⅱ 12規(guī)范性引用文件 4一般要求 25組織機(jī)構(gòu)和人員 36生產(chǎn)場(chǎng)地及設(shè)施設(shè)備 47生產(chǎn)管理 68采購(gòu)控制和物料管理 9質(zhì)量控制 10包裝儲(chǔ)存和運(yùn)輸 附錄A（規(guī)范性）生產(chǎn)檢定用細(xì)胞庫(kù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（以Vero 20附錄B（規(guī)范性）生產(chǎn)用病毒種子批質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 23 28ⅡT/CBPIA0008—2024本指南按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本標(biāo)準(zhǔn)適用于重組溶瘤II型單純皰疹病毒的生產(chǎn)管理、質(zhì)量控制及質(zhì)量保證等活動(dòng)。值得注意的是，如涉及重組溶瘤II型單純皰疹病毒生產(chǎn)及質(zhì)量相關(guān)變更的，應(yīng)當(dāng)按照現(xiàn)行法規(guī)和變更相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則執(zhí)行，不得依據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)改變已經(jīng)批準(zhǔn)的注冊(cè)生產(chǎn)工藝及質(zhì)控規(guī)程。本標(biāo)準(zhǔn)由武漢濱會(huì)生物科技股份有限公司提出。本標(biāo)準(zhǔn)由中國(guó)生化制藥工業(yè)協(xié)會(huì)歸口管理。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：武漢濱會(huì)生物科技股份有限公司、北京昭衍藥物檢定研究有限公司、康希諾生物股份公司、廈門大學(xué)。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人（按拼音姓氏排序）：陳媛、范九梅、方志正、高凱、胡文言、金燕京、劉濱磊、李少偉、劉瓊、魯惠萍、毛澤勇、饒春明、石曉太、夏南、余鵬威、朱濤、周斌。1T/CBPIA0008—2024重組溶瘤II型單純皰疹病毒生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了采用基因工程技術(shù)重組修飾的II型單純皰疹病毒的生產(chǎn)技術(shù)要求，以確保重組溶瘤II型單純皰疹病毒的質(zhì)量。本標(biāo)準(zhǔn)適用于人用重組溶瘤II型單純皰疹病毒原液及制劑的生產(chǎn)和質(zhì)量控制。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本標(biāo)準(zhǔn)必不可少的條款。其中，凡是標(biāo)注日期的引用文件，僅標(biāo)注日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)；不標(biāo)注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修訂）適用于本標(biāo)準(zhǔn)。在正文中引用文件時(shí)同樣適用以上規(guī)則?！瘛端幤飞a(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（2010版）及無菌藥品和生物制品附錄●《中華人民共和國(guó)藥典》●《體內(nèi)基因治療產(chǎn)品藥學(xué)研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》2022年）●《溶瘤病毒產(chǎn)品藥學(xué)研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》（2023年）●ICHQ5：生物技術(shù)產(chǎn)品的質(zhì)量●ICHQ6B：質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：生物技術(shù)產(chǎn)品以及生物制品的檢測(cè)方法和可接受標(biāo)準(zhǔn)●ICHQ9：質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理3術(shù)語(yǔ)、定義及縮略語(yǔ)3.1術(shù)語(yǔ)及定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3.1.1單次收獲液（SingleHarvest）指在單一輪病毒生產(chǎn)或一個(gè)連續(xù)生產(chǎn)時(shí)段中，用同一病毒株接種于細(xì)胞基質(zhì)并一起培養(yǎng)和收獲的一定量病毒懸液。3.1.2原液（Bulk）指用于制造最終配制物（FinalFormulation）或半成品（FinalBulk）的均一物質(zhì)。3.1.32T/CBPIA0008—2024半成品（FinalBulk）指由原液經(jīng)稀釋和（或）配制成均一的用于分裝至終容器的中間產(chǎn)物。3.1.4成品（FinalProducts）指半成品分裝（或經(jīng)凍干）、以適宜方式封閉于最終容器后，再經(jīng)目檢、貼簽、包裝后的制品。3.2縮略語(yǔ)下列縮略語(yǔ)適用于本標(biāo)準(zhǔn)。HSV：?jiǎn)渭儼捳畈《荆℉erpesSimplexVirusHSV2為II型單純皰疹病毒GMP：生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GoodManufacturingPractice）MOI：感染復(fù)數(shù)（MultiplicityofInfection）CCID50：半數(shù)細(xì)胞感染劑量（CellCultureInfectiousDose50）ELISA：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay）EU：細(xì)菌內(nèi)毒素單位（EndotoxinUnit）BSA：牛血清白蛋白（BovineSerumAlbumin）HSA：人血白蛋白（HumanSerumAlbumin）ATCC：美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)菌種保藏中心（AmericanTypeCultureCollection）EHS：環(huán)境、健康與安全（Environment,Health,andSafety）4一般要求重組溶瘤II型單純皰疹病毒系經(jīng)過基因修飾的具有復(fù)制能力的病毒產(chǎn)品，其可選擇性地感染腫瘤細(xì)胞并在腫瘤細(xì)胞中復(fù)制以裂解腫瘤細(xì)胞，同時(shí)表達(dá)外源基因以提高相應(yīng)功能，還可通過刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)達(dá)到治療目的。4.1生物安全要求由于重組溶瘤II型單純皰疹病毒是具有復(fù)制能力的活病毒，在基因修飾設(shè)計(jì)、生產(chǎn)工藝、質(zhì)量研究和控制、貯存與運(yùn)輸，以及臨床使用方面應(yīng)關(guān)注其對(duì)人員、動(dòng)植物、微生物及環(huán)境潛在風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)估和控制，使其設(shè)計(jì)開發(fā)、生產(chǎn)、使用和廢棄處理符合生物安全相關(guān)法規(guī)的要求。4.2環(huán)境要求為有效控制污染/交叉污染風(fēng)險(xiǎn)，病毒生產(chǎn)用起始原材料（病毒種子批、生產(chǎn)用細(xì)胞庫(kù)系統(tǒng)）的制備，以及用于人體的病毒制劑的生產(chǎn)應(yīng)在符合GMP及其附錄的基本原則和相關(guān)3T/CBPIA0008—2024要求的環(huán)境中進(jìn)行。4.3基本技術(shù)要求用于人體的病毒生產(chǎn)和檢定用設(shè)施、原材料及輔料、水、器具、動(dòng)物等應(yīng)符合現(xiàn)行《中華人民共和國(guó)藥典》的有關(guān)要求。本標(biāo)準(zhǔn)中所列的各項(xiàng)檢測(cè)的接受標(biāo)準(zhǔn)都是針對(duì)符合GMP的產(chǎn)品而言。任何違反GMP或有未經(jīng)批準(zhǔn)添加物質(zhì)所生產(chǎn)的病毒產(chǎn)品及其制劑，即使符合各項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)或按照本標(biāo)準(zhǔn)未檢出其添加物質(zhì)或相關(guān)雜質(zhì)，亦不能認(rèn)為其符合規(guī)定。5組織機(jī)構(gòu)和人員5.1企業(yè)應(yīng)當(dāng)設(shè)置與產(chǎn)品生產(chǎn)質(zhì)量管理相適應(yīng)的組織機(jī)構(gòu)，配備足夠數(shù)量并具有相應(yīng)資質(zhì)（含學(xué)歷、執(zhí)業(yè)資格、接受過的培訓(xùn)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)）的管理和操作人員，并以文件形式明確規(guī)定質(zhì)量、生產(chǎn)、物料、工程設(shè)備和儲(chǔ)運(yùn)等人員崗位職責(zé)。所有人員應(yīng)當(dāng)明確和理解自己的職責(zé)，熟悉與其職責(zé)相關(guān)的要求，并履行職責(zé)。5.2企業(yè)的關(guān)鍵人員至少應(yīng)當(dāng)包括企業(yè)負(fù)責(zé)人、生產(chǎn)管理負(fù)責(zé)人、質(zhì)量管理負(fù)責(zé)人和質(zhì)量受權(quán)人。關(guān)鍵人員應(yīng)具有相應(yīng)的專業(yè)知識(shí)（如化學(xué)、生物學(xué)、生物化學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、藥學(xué)、中藥學(xué)、生物制藥等能夠在生產(chǎn)、質(zhì)量管理中切實(shí)履行職責(zé)，并以文件形式明確規(guī)定其崗位職責(zé)。5.2.1企業(yè)負(fù)責(zé)人對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量全面負(fù)責(zé)，合理計(jì)劃、組織和協(xié)調(diào)，為實(shí)現(xiàn)質(zhì)量管理目標(biāo)提供必要的資源，建立完善的組織機(jī)構(gòu)和產(chǎn)品質(zhì)量管理體系；全面系統(tǒng)開展相關(guān)方質(zhì)量審核；確保產(chǎn)品研制、生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)、使用等相關(guān)記錄與數(shù)據(jù)真實(shí)、準(zhǔn)確、完整、可追溯。5.2.2質(zhì)量受權(quán)人需參與企業(yè)質(zhì)量體系建立、內(nèi)部自檢、外部質(zhì)量審計(jì)、驗(yàn)證以及藥品不良反應(yīng)報(bào)告、產(chǎn)品召回等質(zhì)量管理活動(dòng)；承擔(dān)產(chǎn)品放行的職責(zé)，確保每批已放行產(chǎn)品的生產(chǎn)、檢驗(yàn)均符合相關(guān)法規(guī)、藥品注冊(cè)要求和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。5.3員工培訓(xùn)5.3.1企業(yè)應(yīng)當(dāng)指定部門或?qū)Ｈ素?fù)責(zé)培訓(xùn)管理工作，并建立培訓(xùn)方案或計(jì)劃，培訓(xùn)記錄應(yīng)當(dāng)予以保存。5.3.2從事病毒生產(chǎn)、質(zhì)量保證、質(zhì)量控制及其他相關(guān)人員（包括采購(gòu)發(fā)運(yùn)、設(shè)施設(shè)備維保人員）均應(yīng)根據(jù)其崗位要求的技能，定期進(jìn)行相關(guān)法律法規(guī)、技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)、專業(yè)知識(shí)和技能及安全防護(hù)要求等方面的培訓(xùn)及考核，并納入個(gè)人培訓(xùn)檔案。5.3.3結(jié)合行業(yè)和產(chǎn)品生產(chǎn)最新發(fā)展和技術(shù)前沿，更新培訓(xùn)內(nèi)容，確保培訓(xùn)的實(shí)用性和先進(jìn)5.4員工衛(wèi)生和健康要求4T/CBPIA0008—20245.4.1可能與病毒發(fā)生接觸的人員都應(yīng)當(dāng)接受衛(wèi)生操作規(guī)程培訓(xùn)及生物安全培訓(xùn)，包括與健康、衛(wèi)生習(xí)慣及人員著裝相關(guān)的內(nèi)容，最大限度地降低人員對(duì)產(chǎn)品生產(chǎn)造成污染的風(fēng)險(xiǎn)。凡體表有傷口、患有傳染病或其他可能危及產(chǎn)品質(zhì)量的人員，不得從事直接接觸產(chǎn)品的生產(chǎn)活動(dòng)。5.4.2從事與病毒相關(guān)的生產(chǎn)操作、研究開發(fā)、質(zhì)量控制等可能與病毒接觸的人員應(yīng)接受相關(guān)生物安全的培訓(xùn)，并采取必要的生物安全防護(hù)措施，盡可能減少產(chǎn)品對(duì)人員的生物安全風(fēng)5.4.3從事生產(chǎn)相關(guān)的人員每年應(yīng)至少進(jìn)行一次健康體檢，并建立健康檔案。5.4.4從事病毒制劑燈檢的工作人員應(yīng)每半年進(jìn)行一次視力檢查，檢查結(jié)果納入個(gè)人健康檔6生產(chǎn)場(chǎng)地及設(shè)施設(shè)備6.1企業(yè)倉(cāng)儲(chǔ)區(qū)、生產(chǎn)區(qū)、質(zhì)量控制區(qū)應(yīng)在受控的區(qū)域內(nèi)，所處的環(huán)境應(yīng)當(dāng)能夠最大限度地降低原材料或產(chǎn)品遭受污染的風(fēng)險(xiǎn)。企業(yè)應(yīng)當(dāng)采取適當(dāng)措施防止未經(jīng)批準(zhǔn)人員的進(jìn)入。采取適宜措施以有效防止蚊蠅等昆蟲、鼠類或其它動(dòng)物進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)、倉(cāng)儲(chǔ)區(qū)、質(zhì)量控制區(qū)。6.2生產(chǎn)區(qū)要求6.2.1生產(chǎn)區(qū)應(yīng)當(dāng)有足夠的空間，確保有序地、符合要求地存放設(shè)備、物料和產(chǎn)品。生產(chǎn)區(qū)的墻壁、地面、頂棚應(yīng)采用無毒、不滲水、耐沖洗的材料，應(yīng)當(dāng)平整無裂縫、接口嚴(yán)密、無顆粒物脫落。地面應(yīng)防滑、無局部積水。按生產(chǎn)要求配備凈化空調(diào)系統(tǒng)。6.2.2病毒生產(chǎn)車間應(yīng)為專用廠房，處理病毒區(qū)域的主要操作間包括病毒接種間、純化間、半成品配制間及灌裝軋蓋間，本區(qū)域的人、物流走向應(yīng)滿足單向流的要求；不涉及病毒處理的操作間主要包括細(xì)胞間、配液間，暫存間等。車間環(huán)境潔凈級(jí)別的設(shè)置應(yīng)滿足非最終滅菌的無菌產(chǎn)品生產(chǎn)及操作的要求。車間入口處應(yīng)設(shè)置與生產(chǎn)能力相適應(yīng)的洗手、消毒、干手設(shè)施。6.2.3車間內(nèi)應(yīng)設(shè)有能夠滿足生產(chǎn)用工具、器具和設(shè)備清洗或消毒的區(qū)域，其操作對(duì)生產(chǎn)過程和產(chǎn)品不會(huì)造成污染。6.2.4生產(chǎn)區(qū)的D級(jí)潔凈車間可設(shè)置大小適宜的排水設(shè)施，其設(shè)計(jì)與安裝應(yīng)具備空氣阻斷5T/CBPIA0008—2024功能以防止倒灌。6.2.5病毒的生產(chǎn)環(huán)境、廠房設(shè)施與設(shè)備不應(yīng)對(duì)原材料、中間產(chǎn)品造成污染；潔凈度級(jí)別應(yīng)與產(chǎn)品預(yù)定用途和生產(chǎn)操作相適應(yīng)。6.2.6宜采用密閉的隔離操作器進(jìn)行病毒的制劑灌封操作；隔離操作器的背景環(huán)境的潔凈度級(jí)別可適當(dāng)降低，應(yīng)當(dāng)定期檢查隔離操作器的完整性。6.3倉(cāng)儲(chǔ)區(qū)要求6.3.1倉(cāng)儲(chǔ)區(qū)的設(shè)計(jì)和建造應(yīng)當(dāng)確保良好的倉(cāng)儲(chǔ)條件，冷凍或冷藏設(shè)施應(yīng)有預(yù)防突發(fā)事件的應(yīng)急措施，避免物料及產(chǎn)品質(zhì)量受到影響。有通風(fēng)和照明設(shè)施，能滿足其物料或產(chǎn)品的存放貯存要求。6.3.2倉(cāng)儲(chǔ)區(qū)應(yīng)當(dāng)有足夠的空間，確保有序存放各類物料和產(chǎn)品。倉(cāng)儲(chǔ)區(qū)內(nèi)不同質(zhì)量狀態(tài)物料或產(chǎn)品應(yīng)當(dāng)隔離存放，并有醒目的標(biāo)識(shí)。如果采用其他方法替代物理隔離，則該方法應(yīng)當(dāng)具有同等的安全性。6.3.3接收、發(fā)放和發(fā)運(yùn)區(qū)域應(yīng)當(dāng)能夠保護(hù)物料、產(chǎn)品免受外界氣候環(huán)境影響。接收區(qū)的布局和設(shè)施應(yīng)當(dāng)能夠確保到貨物料在進(jìn)入倉(cāng)儲(chǔ)區(qū)前可對(duì)外包裝進(jìn)行必要的清潔。6.4質(zhì)量控制區(qū)要求質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)應(yīng)當(dāng)使其與生產(chǎn)區(qū)分開，并確保適用于預(yù)定的用途，能夠避免差錯(cuò)和交叉污染，應(yīng)當(dāng)有足夠的區(qū)域用于樣品處置、留樣和穩(wěn)定性考察樣品的存放以及記錄的保存。必要時(shí)，應(yīng)當(dāng)設(shè)置專門的儀器室和理化操作室，使靈敏度高的儀器免受靜電、震動(dòng)、潮濕或其他外界因素的干擾。6.5設(shè)施設(shè)備6.5.1設(shè)備的設(shè)計(jì)、選型、安裝、改造和維護(hù)必須符合預(yù)定用途，原材料處理和提取、純化使用的設(shè)備、管道、閥門和容器具等應(yīng)光潔、耐腐蝕、易清洗或消毒。6.5.2設(shè)備應(yīng)當(dāng)在規(guī)定的參數(shù)范圍內(nèi)使用，并制定設(shè)備使用、清潔、維護(hù)和維修管理操作規(guī)6T/CBPIA0008—2024程并保存相應(yīng)的記錄。應(yīng)當(dāng)按照規(guī)定的操作規(guī)程清潔生產(chǎn)設(shè)備，包括清潔方法、清潔用設(shè)備或工具、清潔劑的名稱和配制方法等。6.5.3生產(chǎn)設(shè)備應(yīng)當(dāng)有明顯的狀態(tài)標(biāo)識(shí)，標(biāo)明設(shè)備編號(hào)、內(nèi)容物（如名稱、規(guī)格、批號(hào)沒有內(nèi)容物的應(yīng)當(dāng)標(biāo)明清潔狀態(tài)。主要固定管道應(yīng)標(biāo)明內(nèi)容物及其流向。6.5.4應(yīng)當(dāng)建立操作規(guī)程對(duì)生產(chǎn)和檢驗(yàn)用衡器、量具、儀表、記錄和控制設(shè)備以及儀器進(jìn)行校準(zhǔn)或計(jì)量檢定，并保存相關(guān)記錄。校準(zhǔn)的量程范圍應(yīng)當(dāng)涵蓋實(shí)際生產(chǎn)和檢驗(yàn)的使用范圍。所有經(jīng)校準(zhǔn)的設(shè)備或儀器應(yīng)當(dāng)有明顯的標(biāo)識(shí)，標(biāo)明其校準(zhǔn)或計(jì)量檢定有效期。6.5.5凡與產(chǎn)品接觸的設(shè)備表面均應(yīng)采用不與其反應(yīng)、不釋放出微粒及不吸附物料的惰性材料。避免因設(shè)備自身材質(zhì)的原因影響產(chǎn)品質(zhì)量。6.5.6不銹鋼管道的固定連接應(yīng)采用氬氣保護(hù)的自動(dòng)焊接，保證管道內(nèi)外表面的光潔度，不得使用螺紋連接，以避免產(chǎn)生死角。密封材料、過濾材料、墊圈墊片等，應(yīng)無毒、無污染、無析出物且不與產(chǎn)品發(fā)生相容性反應(yīng)。6.5.7設(shè)備所用的潤(rùn)滑劑、冷卻劑等不得對(duì)產(chǎn)品或容器造成污染，關(guān)鍵設(shè)備不用或少用潤(rùn)滑劑。6.6生產(chǎn)用水生產(chǎn)用水應(yīng)當(dāng)采用飲用水、純化水、注射用水和滅菌注射用水，生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)配備制藥用水系統(tǒng)，水質(zhì)應(yīng)能滿足產(chǎn)品生產(chǎn)及企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求。7生產(chǎn)管理7.1病毒生產(chǎn)起始原材料7.1.1生產(chǎn)和檢定用細(xì)胞需建立完善的細(xì)胞庫(kù)系統(tǒng)（主細(xì)胞庫(kù)和工作細(xì)胞庫(kù)）。細(xì)胞庫(kù)系統(tǒng)的建立、維護(hù)和檢定應(yīng)當(dāng)符合現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》的要求。7.1.2生產(chǎn)和檢定用毒種應(yīng)當(dāng)建立完善的種子批系統(tǒng)（主種子批和工作種子批）。種子批系統(tǒng)的建立、維護(hù)、保存和檢定應(yīng)當(dāng)符合現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》的要求。7T/CBPIA0008—20247.1.3種子批和細(xì)胞庫(kù)建立、保存和使用的方式，應(yīng)當(dāng)能夠避免污染或變異的風(fēng)險(xiǎn)。7.1.4種子批或細(xì)胞庫(kù)和成品之間的傳代數(shù)目（倍增次數(shù)、傳代次數(shù)）應(yīng)當(dāng)與注冊(cè)（IND、NDA/BLA）工藝中規(guī)定的一致，不應(yīng)隨生產(chǎn)規(guī)模變化而改變。7.1.5在指定人員監(jiān)督下、經(jīng)批準(zhǔn)的人員才能進(jìn)行種子批和細(xì)胞庫(kù)操作。且應(yīng)當(dāng)在適當(dāng)受控環(huán)境下建立種子批和細(xì)胞庫(kù)，以保護(hù)種子批、細(xì)胞庫(kù)以及操作人員。在建立種子批和細(xì)胞庫(kù)的過程中，操作人員不得在同一區(qū)域同時(shí)處理不同活性或具有傳染性的物料（如病毒、細(xì)胞7.1.6種子批與細(xì)胞庫(kù)的來源、領(lǐng)用、制備、貯存及其穩(wěn)定性考察和復(fù)蘇、使用情況應(yīng)當(dāng)有記錄。7.1.7種子批和細(xì)胞庫(kù)應(yīng)分別在≤-70℃和≤-130℃條件下儲(chǔ)藏，儲(chǔ)存容器應(yīng)有明確的標(biāo)簽；冷藏溫度應(yīng)當(dāng)有連續(xù)記錄，液氮貯存條件應(yīng)當(dāng)有適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測(cè)；任何偏離貯存條件的情況及糾正措施都應(yīng)記錄；庫(kù)存臺(tái)賬應(yīng)當(dāng)長(zhǎng)期保存。7.1.8不同種子批或細(xì)胞庫(kù)的貯存方式應(yīng)當(dāng)能夠防止差錯(cuò)、混淆或交叉污染。生產(chǎn)用種子批、細(xì)胞庫(kù)應(yīng)當(dāng)在規(guī)定的貯存條件下在不同地點(diǎn)分別保存，避免丟失。7.1.9貯存期間，主種子批和工作種子批儲(chǔ)存條件應(yīng)當(dāng)一致；主細(xì)胞庫(kù)和工作細(xì)胞庫(kù)的儲(chǔ)存條件應(yīng)當(dāng)一致。一旦取出使用，不得再返回庫(kù)內(nèi)貯存。7.2生產(chǎn)病毒的原輔材料來源于不同供應(yīng)商，采購(gòu)和日常管理應(yīng)遵循以下管理原則：7.2.1所有物料供應(yīng)商的確定及變更均應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量評(píng)估，并經(jīng)質(zhì)量管理部門批準(zhǔn)后方可向其采購(gòu)。7.2.2供應(yīng)商審計(jì)，應(yīng)評(píng)估供應(yīng)商的質(zhì)量保證體系，考察其生產(chǎn)運(yùn)輸過程對(duì)微生物、熱原、微粒污染等的控制能力。7.2.3物料驗(yàn)收時(shí)需確認(rèn)包裝完整性。物料驗(yàn)收后應(yīng)及時(shí)按待驗(yàn)狀態(tài)管理，直至放行。物料8T/CBPIA0008—2024使用應(yīng)“先進(jìn)先出，近效期先出”的原則發(fā)放。7.2.4應(yīng)采取有效措施避免原輔料、中間品在收貨、轉(zhuǎn)運(yùn)、存放中的混淆、差錯(cuò)、污染和交叉污染。7.2.5物料進(jìn)入潔凈區(qū)前應(yīng)進(jìn)行脫外包處理，經(jīng)凈化后方可進(jìn)入潔凈區(qū)。7.2.6動(dòng)物來源的物料應(yīng)明確動(dòng)物種屬，產(chǎn)地相對(duì)固定，如適用還應(yīng)出具無TSE或BSE污染的聲明。病毒生產(chǎn)原輔料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)包括對(duì)動(dòng)物源原材料的外源因子控制。不同來源的原輔料應(yīng)做質(zhì)量研究，確定不同來源的原材料生產(chǎn)的產(chǎn)品質(zhì)量具有可比性。7.3應(yīng)當(dāng)制定病毒生產(chǎn)工藝規(guī)程并經(jīng)過批準(zhǔn)，工藝規(guī)程中應(yīng)明確產(chǎn)品的關(guān)鍵質(zhì)量屬性、生產(chǎn)工藝流程、關(guān)鍵工藝參數(shù)和控制范圍、中間品質(zhì)量控制項(xiàng)目及接受標(biāo)準(zhǔn)等。應(yīng)制定標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)操作程序，對(duì)操作步驟進(jìn)行詳細(xì)說明，以確保生產(chǎn)過程的有效運(yùn)行和有效控制。7.4病毒的生產(chǎn)通常以病毒種子批和生產(chǎn)細(xì)胞基質(zhì)為起始原材料，工藝過程分為上游工藝和下游工藝。上游工藝包括生產(chǎn)細(xì)胞擴(kuò)增、病毒接種及擴(kuò)培、病毒釋放及酶解等步驟；下游工藝包括澄清過濾、層析純化、超濾濃縮、半成品配制及灌裝等步驟，最終經(jīng)檢定合格后包裝成制劑成品。典型的病毒生產(chǎn)關(guān)鍵工藝步驟和工藝控制點(diǎn)如下：7.4.1細(xì)胞復(fù)蘇與擴(kuò)增：取工作細(xì)胞庫(kù)，復(fù)蘇，使用培養(yǎng)瓶/細(xì)胞工廠或生物反應(yīng)器進(jìn)行逐級(jí)擴(kuò)增培養(yǎng)，培養(yǎng)至病毒接種的細(xì)胞為一批。培養(yǎng)過程中應(yīng)對(duì)培養(yǎng)基組成、培養(yǎng)條件（溫度、二氧化碳濃度、攪拌轉(zhuǎn)速等）、培養(yǎng)時(shí)間、細(xì)胞傳代比率、細(xì)胞密度等工藝參數(shù)進(jìn)行監(jiān)控。7.4.2病毒接種和擴(kuò)培：通常使用生物反應(yīng)器結(jié)合微載體進(jìn)行接種病毒前的細(xì)胞培養(yǎng)，達(dá)到接種病毒的細(xì)胞密度后取病毒工作種子批進(jìn)行接種培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)和病變發(fā)生情況，可加入新鮮維持液繼續(xù)培養(yǎng)，經(jīng)培養(yǎng)適宜時(shí)間，待細(xì)胞病變充分后結(jié)束培養(yǎng)；在病毒接種以前需取未接種病毒的生產(chǎn)對(duì)照細(xì)胞送樣檢定，病毒接種步驟應(yīng)對(duì)病毒感染復(fù)數(shù)（MOI）、病毒培養(yǎng)基組成、病毒培養(yǎng)條件（溫度、pH值、溶氧值和轉(zhuǎn)速）等進(jìn)行監(jiān)控。9T/CBPIA0008—20247.4.3病毒釋放及收獲：接種病毒培養(yǎng)至細(xì)胞完全病變，加入病毒釋放液，取上清澄清過濾后收集濾過液以及過濾系統(tǒng)置換液合并成病毒初濾液，酶解病毒初濾液得到病毒收獲液。病毒釋放基于高滲原理，需對(duì)釋放液配方/配比、裂解時(shí)間、沉淀澄清參數(shù)進(jìn)行監(jiān)控；初濾后進(jìn)行酶解，去除宿主蛋白、宿主DNA，需關(guān)注初濾液組成、酶效價(jià)濃度、反應(yīng)時(shí)間等。7.4.4純化層析：對(duì)病毒收獲液進(jìn)行層析，進(jìn)一步去除宿主蛋白、宿主DNA及培養(yǎng)基成分殘留，如BSA，通常使用凝膠層析、親和層析及離子層析等填料介質(zhì)，利用分子大小、特異性結(jié)合、荷電、疏水性等方法進(jìn)行雜質(zhì)去除；層析過程中應(yīng)對(duì)層析柱載樣量、線性流速、洗雜和洗脫條件（pH、鹽濃度等）、收集峰起止點(diǎn)進(jìn)行監(jiān)控。7.4.5超濾濃縮：對(duì)層析獲取液進(jìn)行超濾濃縮和換液，通過此步驟將病毒置換到山梨醇-肌醇緩沖液或者其他適宜緩沖液中，濃縮至適宜濃度，得到病毒原液，以便進(jìn)行制劑的配制和灌裝。應(yīng)對(duì)超濾換液體積、跨膜壓、濃縮倍數(shù)等參數(shù)進(jìn)行監(jiān)控。7.4.6半成品配制及灌裝：依據(jù)病毒原液的滴度及成品目標(biāo)滴度配制成病毒半成品，立即進(jìn)行灌裝。整個(gè)過程應(yīng)當(dāng)保證無菌和避免污染及交叉污染，并進(jìn)行相關(guān)監(jiān)控，應(yīng)基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的結(jié)果確定灌裝的生產(chǎn)形式和方式，其生產(chǎn)形式和方式應(yīng)經(jīng)過無菌工藝驗(yàn)證。7.5病毒生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)有與生產(chǎn)工序相關(guān)的SOP，并應(yīng)按照工藝規(guī)程和操作規(guī)程進(jìn)行操作、進(jìn)行記錄。7.6制定生產(chǎn)批次管理規(guī)程。生產(chǎn)批次劃分應(yīng)當(dāng)能夠確保同一批次產(chǎn)品質(zhì)量和特性的均一性。應(yīng)當(dāng)制定編制批號(hào)和確定生產(chǎn)計(jì)劃的管理規(guī)程。每批產(chǎn)品均應(yīng)當(dāng)編制唯一的批號(hào)。7.7應(yīng)當(dāng)根據(jù)穩(wěn)定性研究或驗(yàn)證數(shù)據(jù)規(guī)定中間品進(jìn)行下一步操作前的存儲(chǔ)條件和存儲(chǔ)時(shí)間；同時(shí)根據(jù)起始物料及工藝中間品特性及貯存條件規(guī)定不同生產(chǎn)階段的生產(chǎn)時(shí)限；起始物料、中間品，應(yīng)進(jìn)行必要的質(zhì)量控制，以確保產(chǎn)品質(zhì)量不受影響。7.8制備的中間品應(yīng)有專人保管，并制定臺(tái)賬。T/CBPIA0008—20247.9應(yīng)當(dāng)制定無菌操作規(guī)程確保在生產(chǎn)的每一階段產(chǎn)品和物料均進(jìn)行了無菌控制。制造過程產(chǎn)生的廢料應(yīng)及時(shí)經(jīng)處理后退出生產(chǎn)區(qū)域，防止污染生產(chǎn)環(huán)境及設(shè)備。7.10病毒生產(chǎn)應(yīng)當(dāng)核算投入物料與產(chǎn)品產(chǎn)量，確保物料平衡符合設(shè)定的限度。如有偏差必須查明原因，確認(rèn)無潛在質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)后方可進(jìn)行產(chǎn)品放行。7.11生產(chǎn)期間使用的所有容器及主要設(shè)備、操作室應(yīng)當(dāng)貼簽標(biāo)識(shí)或以其他方式標(biāo)明生產(chǎn)中的產(chǎn)品或物料名稱、規(guī)格和批號(hào)，如有必要，還應(yīng)當(dāng)標(biāo)明生產(chǎn)工序。除在標(biāo)識(shí)上使用文字說明外，還可采用不同的顏色區(qū)分被標(biāo)識(shí)物的狀態(tài)。7.12生產(chǎn)開始前應(yīng)當(dāng)進(jìn)行檢查，確保設(shè)備和工作場(chǎng)所沒有遺留的上批產(chǎn)品、文件或與本批產(chǎn)品生產(chǎn)無關(guān)的物料，設(shè)備處于已清潔及使用狀態(tài)，并保留檢查記錄。每次生產(chǎn)結(jié)束后應(yīng)當(dāng)進(jìn)行清場(chǎng)，確保設(shè)備和工作場(chǎng)所沒有遺留與本次生產(chǎn)有關(guān)的物料、產(chǎn)品和文件。下次生產(chǎn)開始前，應(yīng)對(duì)前次清場(chǎng)情況進(jìn)行確認(rèn)。7.13應(yīng)當(dāng)盡可能避免出現(xiàn)任何偏離工藝規(guī)程或操作規(guī)程的偏差。如果出現(xiàn)偏差，應(yīng)當(dāng)按照偏差處理操作規(guī)程執(zhí)行。7.14不得將不合格批次產(chǎn)品與其他合格批次相混合，擬混合批次的每批原液均應(yīng)按規(guī)定的工藝生產(chǎn)，單獨(dú)檢驗(yàn)并符合相應(yīng)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。7.15病毒的生產(chǎn)應(yīng)采用保障終產(chǎn)品無菌的工藝過程，如除菌過濾工藝或全流程無菌工藝。7.16生產(chǎn)用緩沖液配制、直接接觸終產(chǎn)品的包裝材料和器具等最終清洗、A/B級(jí)潔凈區(qū)內(nèi)消毒劑和清潔劑配制的用水應(yīng)當(dāng)符合注射用水的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。7.17生產(chǎn)病毒的高風(fēng)險(xiǎn)操作區(qū)應(yīng)符合GMP和生物安全的相關(guān)要求。人員經(jīng)過更衣控制，物料和部件則需要經(jīng)過必要的清潔消毒或滅菌后方可進(jìn)入無菌操作區(qū)域，使外界對(duì)無菌環(huán)境的影響降到最低。7.18物料應(yīng)通過物流通道進(jìn)入潔凈區(qū)。T/CBPIA0008—20247.19控制相鄰房間壓差（氣流方向）對(duì)保護(hù)生產(chǎn)操作起著關(guān)鍵作用。潔凈區(qū)與非潔凈區(qū)之間、不同等級(jí)潔凈區(qū)之間的壓差應(yīng)不低于10Pa。潔凈室壓差的設(shè)計(jì)通常是氣流由高潔凈級(jí)別流向低潔凈級(jí)別。7.20生產(chǎn)病毒相關(guān)潔凈區(qū)應(yīng)有門禁系統(tǒng)，限制無關(guān)人員進(jìn)出潔凈區(qū)，并對(duì)進(jìn)出潔凈區(qū)的人數(shù)進(jìn)行控制，最大允許進(jìn)入的人員數(shù)量應(yīng)經(jīng)過驗(yàn)證。盡可能減少非必要人員進(jìn)出潔凈區(qū)的次7.21應(yīng)當(dāng)定期對(duì)公用設(shè)施進(jìn)行維修保養(yǎng)，使其達(dá)到生產(chǎn)的必要條件：7.21.1制藥用水系統(tǒng)：應(yīng)有效地控制系統(tǒng)的微生物或細(xì)菌內(nèi)毒素的污染水平，設(shè)定企業(yè)內(nèi)控警戒限度及糾偏限度，以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)不良趨勢(shì)或異常，并采取措施。7.21.2壓縮空氣系統(tǒng)：進(jìn)入無菌區(qū)（通常指B級(jí)和A級(jí)區(qū)）使用點(diǎn)的壓縮空氣應(yīng)經(jīng)過除菌過濾，可通過控制過濾前壓縮空氣的微生物限度、除菌過濾器的截留能力和完整性來確保除菌過濾的效果，達(dá)到所進(jìn)入?yún)^(qū)域空氣的微生物限度水平。7.21.3凈化空調(diào)系統(tǒng)：應(yīng)對(duì)生產(chǎn)潔凈區(qū)的懸浮粒子、浮游菌、沉降菌進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，應(yīng)符合相應(yīng)的動(dòng)態(tài)標(biāo)準(zhǔn)，必要時(shí)應(yīng)進(jìn)行人員及環(huán)境表面微生物監(jiān)測(cè)。7.22應(yīng)配備足夠數(shù)量的符合條件的人員，這些人員應(yīng)接受病毒生產(chǎn)相關(guān)的培訓(xùn)，并具有適當(dāng)?shù)馁Y質(zhì)和經(jīng)驗(yàn)。7.22.1進(jìn)入病毒生產(chǎn)潔凈區(qū)的人員不應(yīng)化妝、美甲、或佩戴首飾，不能帶病上崗。7.22.2生產(chǎn)溶瘤Ⅱ型單純皰疹病毒的人員進(jìn)入潔凈車間前應(yīng)經(jīng)過培訓(xùn)并獲取潔凈更衣資質(zhì)，A/B級(jí)區(qū)域至少需完成連續(xù)3次更衣評(píng)估，評(píng)估合格后方可授予進(jìn)入該區(qū)域的資格。A/B級(jí)區(qū)域應(yīng)定期做更衣資質(zhì)確認(rèn)。7.22.3車間內(nèi)所有動(dòng)作應(yīng)輕緩、盡量減少語(yǔ)言交流。無菌生產(chǎn)區(qū)人員不得倚靠墻壁、設(shè)備，無操作時(shí)手應(yīng)端平并保持在腰部以上，不應(yīng)下垂、叉腰、交叉手臂或放于腋下。T/CBPIA0008—20248采購(gòu)控制和物料管理8.1采購(gòu)控制8.1.1生產(chǎn)用物料供應(yīng)商的確定及變更應(yīng)當(dāng)進(jìn)行質(zhì)量評(píng)估，并經(jīng)質(zhì)量部批準(zhǔn)后方可納入《合格供應(yīng)商清單》。采購(gòu)人員應(yīng)在批準(zhǔn)的《合格供應(yīng)商清單》中，選擇合適的供應(yīng)商進(jìn)行物料采購(gòu)。8.1.2物料的運(yùn)輸應(yīng)當(dāng)能夠滿足保證其質(zhì)量的要求，對(duì)運(yùn)輸有特殊要求的，應(yīng)對(duì)運(yùn)輸條件予8.2物料驗(yàn)收8.2.1物料到貨后由倉(cāng)庫(kù)人員編制物料放行申請(qǐng)?zhí)?，并進(jìn)行初驗(yàn)，初驗(yàn)內(nèi)容包括但不限于：物料信息、運(yùn)輸情況、包裝情況、數(shù)量復(fù)核等。8.2.2物料與采購(gòu)訂單/合同中名稱、規(guī)格、數(shù)量、供貨單位等項(xiàng)目不符；外包裝明顯破損、受潮、霉變或有水漬、蟲蛀、鼠咬、內(nèi)容物灑漏等痕跡、外包裝標(biāo)識(shí)難以辨認(rèn)；內(nèi)包裝密封不嚴(yán)；箱內(nèi)單個(gè)包裝與大包裝箱上信息標(biāo)示不一致；稱重抽檢不符合要求；印刷型包裝材料與簽字稿/標(biāo)準(zhǔn)樣張核對(duì)不一致；出廠檢驗(yàn)報(bào)告不合格或經(jīng)審核發(fā)現(xiàn)與質(zhì)量協(xié)議中所載質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不一致；生產(chǎn)地址與物料合格供應(yīng)商清單上的地址不一致等情況都應(yīng)拒收。8.2.3物料分為非受控物料和受控物料。非受控物料在初驗(yàn)合格后由質(zhì)量保證人員確認(rèn)放行；受控物料初驗(yàn)合格后還應(yīng)根據(jù)企業(yè)內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗(yàn)合格后方可放行。8.2.4物料出、入庫(kù)和保存管理8.2.4.1倉(cāng)庫(kù)設(shè)置合格區(qū)、不合格區(qū)、待檢區(qū)和退貨區(qū)，進(jìn)行有效物理隔離。各類物料由倉(cāng)庫(kù)管理員登記入庫(kù)，分別存放。8.2.4.2物料應(yīng)當(dāng)有標(biāo)識(shí)，以防止混淆。8.2.4.3物料應(yīng)按照各種物料的貯存條件（如溫度、濕度、光照等）和有效期進(jìn)行相應(yīng)的控T/CBPIA0008—2024制。8.2.4.4印刷型外包裝材料應(yīng)設(shè)置專門的區(qū)域進(jìn)行存放，由倉(cāng)庫(kù)人員妥善管理，貯存過程中物料出現(xiàn)異常情況應(yīng)及時(shí)隔離并發(fā)起偏差開展調(diào)查。8.2.4.5固體與液體物料、酸性與堿性物料、氧化性與還原性物料等應(yīng)分開貯存；藥品類易制毒化學(xué)品及易燃、易爆和其他危險(xiǎn)品的驗(yàn)收、貯存、管理應(yīng)當(dāng)執(zhí)行國(guó)家有關(guān)的規(guī)定。8.2.4.6物料申領(lǐng)和發(fā)放應(yīng)當(dāng)遵循先進(jìn)先出、近效期先出的原則，由倉(cāng)庫(kù)人員發(fā)放；與批生產(chǎn)相關(guān)的物料還應(yīng)提供批準(zhǔn)的《批生產(chǎn)指令單》領(lǐng)取物料。8.2.4.7《生產(chǎn)物料出入庫(kù)臺(tái)賬》由專人管理存檔。9質(zhì)量控制應(yīng)當(dāng)根據(jù)重組溶瘤II型單純皰疹病毒關(guān)鍵質(zhì)量屬性，以及對(duì)其工藝?yán)斫獾姆e累和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，制定相應(yīng)的質(zhì)量控制策略和技術(shù)要求，以確保穩(wěn)定地輸入質(zhì)量合格的產(chǎn)品。質(zhì)量控制應(yīng)涵蓋病毒生產(chǎn)的工藝鏈，從起始原材料、工藝中間體到制劑生產(chǎn)關(guān)鍵控制點(diǎn)應(yīng)制定相應(yīng)的質(zhì)量技術(shù)規(guī)范。本標(biāo)準(zhǔn)闡述的質(zhì)量控制策略，并不代表全部的技術(shù)要求，僅供借鑒和參考?？筛鶕?jù)病毒制劑的特性以及不同工藝階段，按照風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果增減質(zhì)量監(jiān)控點(diǎn)或質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中要求檢測(cè)的項(xiàng)目及變更分析方法，建立的分析方法應(yīng)進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證或確認(rèn)。應(yīng)當(dāng)制定操作規(guī)程，詳細(xì)規(guī)定中間品和成品的取樣方法。取得的樣品應(yīng)密封完好，按要求進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn)和保存，防止差錯(cuò)與污染。應(yīng)綜合考慮病毒特性、制備工藝對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量影響程度等因素來確定質(zhì)量檢測(cè)項(xiàng)目、檢驗(yàn)方法和可接受標(biāo)準(zhǔn)范圍。原材料、輔料、中間品及成品的檢驗(yàn)應(yīng)在適當(dāng)?shù)纳a(chǎn)階段或檢驗(yàn)時(shí)限內(nèi)完成，當(dāng)檢驗(yàn)周期較長(zhǎng)時(shí)，經(jīng)過風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估后可按照風(fēng)險(xiǎn)放行先進(jìn)行后續(xù)工藝的生產(chǎn)，待檢驗(yàn)合格后方可放行成品。9.1起始原材料T/CBPIA0008—2024病毒生產(chǎn)的起始原材料為經(jīng)基因工程改造的HSV2和生產(chǎn)用細(xì)胞如，Vero細(xì)胞，起始原材料的質(zhì)量應(yīng)符合現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則“生物制品生產(chǎn)檢定用菌毒種管理及質(zhì)量控制”、“生物制品生產(chǎn)檢定用動(dòng)物細(xì)胞基質(zhì)制備及質(zhì)量控制”的要求。生產(chǎn)用細(xì)胞庫(kù)及病毒種子批的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)詳見附錄。9.2原材料和輔料病毒生產(chǎn)所用原材料和輔料應(yīng)符合現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則“生物制品生產(chǎn)用原材料及輔料質(zhì)量控制”的相關(guān)規(guī)定。9.3生產(chǎn)對(duì)照細(xì)胞細(xì)胞鑒別試驗(yàn)：生產(chǎn)對(duì)照細(xì)胞每年應(yīng)至少進(jìn)行一次細(xì)胞鑒別試驗(yàn)，參照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》“生物制品生產(chǎn)檢定用動(dòng)物細(xì)胞基質(zhì)制備及質(zhì)量控制”執(zhí)行。9.3.1無菌檢查：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則1101“無菌檢查法”進(jìn)行檢查，應(yīng)無菌生長(zhǎng)。9.3.2支原體檢查：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則3301“支原體檢查法”進(jìn)行檢查，應(yīng)無支原體生長(zhǎng)。9.3.3外源病毒因子檢查：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則3302“外源病毒因子檢查法”進(jìn)行檢查，應(yīng)無外源病毒污染。9.4病毒收獲液9.4.1病毒滴度：采用CCID50方法測(cè)定，應(yīng)符合批準(zhǔn)的規(guī)定。9.4.2無菌檢查：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則1101“無菌檢查法”進(jìn)行檢查，應(yīng)無菌生長(zhǎng)。9.4.3支原體檢查：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則3301“支原體檢查法”進(jìn)行檢查，應(yīng)無支原體生長(zhǎng)。T/CBPIA0008—20249.5原液9.5.1蛋白質(zhì)含量：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則0731“蛋白質(zhì)含量測(cè)定法”第五法或經(jīng)驗(yàn)證的方法進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)符合批準(zhǔn)的規(guī)定。9.5.2牛血清白蛋白殘留量：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則3411“牛血清白蛋白殘留量測(cè)定法”進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)≤50ng/ml。9.5.3宿主DNA殘留量：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則3407“外源性DNA殘留量測(cè)定法”第三法進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)≤10ng/ml。9.5.4病毒濃度：采用qPCR法或經(jīng)驗(yàn)證的方法進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)符合批準(zhǔn)的規(guī)定。9.5.5病毒感染滴度：采用CCID50方法或經(jīng)驗(yàn)證的方法進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)符合批準(zhǔn)的規(guī)定。9.5.6比滴度：病毒感染滴度與病毒濃度的比值應(yīng)符合批準(zhǔn)的規(guī)定。9.5.7比活性：病毒感染滴度與蛋白質(zhì)含量的比值應(yīng)符合批準(zhǔn)的規(guī)定。9.5.8體外溶瘤活性：采用Fluc法或經(jīng)驗(yàn)證的方法進(jìn)行測(cè)定，對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷率應(yīng)符合批準(zhǔn)的規(guī)定。9.5.9無菌檢查：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則1101“無菌檢查法”進(jìn)行檢查，應(yīng)無菌生長(zhǎng)。9.5.10細(xì)菌內(nèi)毒素：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則1143“細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法”進(jìn)行檢查，應(yīng)≤25EU/ml。9.6半成品無菌檢查：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則1101“無菌檢查法”進(jìn)行檢查，應(yīng)無菌生長(zhǎng)。9.7成品9.7.1鑒別試驗(yàn)（基因修飾鑒定采用PCR法，以野生型HSV2、野生型HSV1，生產(chǎn)用T/CBPIA0008—2024細(xì)胞DNA作為對(duì)照，應(yīng)符合規(guī)定。9.7.2外觀：目視法，應(yīng)為無色澄明液體，可帶乳光。9.7.3可見異物：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則0904“可見異物檢查法”檢查，應(yīng)無可見異物。9.7.4裝量：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則0942“最低裝量檢查法”檢查，應(yīng)不低于標(biāo)示量。9.7.5pH值：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則0631“pH值測(cè)定法”測(cè)定，應(yīng)符合批準(zhǔn)的規(guī)定。9.7.6滲透壓摩爾濃度：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則0632“滲透壓摩爾濃度測(cè)定法”測(cè)定，應(yīng)符合批準(zhǔn)的規(guī)定。9.7.7蛋白質(zhì)含量：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則0731“蛋白質(zhì)含量測(cè)定法”第五法或經(jīng)驗(yàn)證的方法進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)符合批準(zhǔn)的規(guī)定。9.7.8牛血清白蛋白殘留量：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則3411“牛血清白蛋白殘留量測(cè)定法”進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)≤50ng/ml。9.7.9宿主DNA殘留量：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則3407“外源性DNA殘留量測(cè)定法”第三法進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)≤10ng/ml。9.7.10Vero細(xì)胞蛋白質(zhì)殘留量：采用ELISA法或經(jīng)驗(yàn)證的方法進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)≤10μg/ml。9.7.11核酸酶殘留量：采用ELISA法或經(jīng)驗(yàn)證的方法進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)≤50ng/ml。9.7.12病毒濃度：采用qPCR法或經(jīng)驗(yàn)證的方法進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)符合批準(zhǔn)的規(guī)定。9.7.13病毒滴度：采用CCID50方法或經(jīng)驗(yàn)證的方法測(cè)定，應(yīng)符合批準(zhǔn)的規(guī)定。9.7.14體外溶瘤活性：采用A375-Fluc細(xì)胞/D-熒光素鉀鹽法或經(jīng)驗(yàn)證的方法測(cè)定，應(yīng)符合批準(zhǔn)的規(guī)定。T/CBPIA0008—20249.7.15插入的外源基因表達(dá)量：采用ELISA法或其他經(jīng)驗(yàn)證的適宜方法進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)符合批準(zhǔn)的規(guī)定。9.7.16外源基因表達(dá)物生物學(xué)活性：采用經(jīng)驗(yàn)證的適宜方法進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)符合批準(zhǔn)的規(guī)定。9.7.17無菌檢查：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則1101“無菌檢查法”進(jìn)行檢查，應(yīng)無菌生長(zhǎng)。9.7.18細(xì)菌內(nèi)毒素檢查：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則1143“細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法”進(jìn)行檢查，應(yīng)≤25EU/ml。9.7.19異常毒性檢查：依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則1141“異常毒性小鼠試驗(yàn)10包裝儲(chǔ)存和運(yùn)輸10.1包裝10.1.1包裝操作場(chǎng)所或包裝生產(chǎn)線，需有標(biāo)識(shí)標(biāo)明包裝中的產(chǎn)品名稱、規(guī)格、批號(hào)和批量的生產(chǎn)狀態(tài)。10.1.2有數(shù)條包裝線同時(shí)進(jìn)行包裝時(shí)，采取物理、時(shí)/空間隔離或其他有效防止污染、交叉污染或混淆的措施。10.1.3包裝材料上印刷的內(nèi)容應(yīng)當(dāng)清晰，不易褪色和擦除。10.1.4單獨(dú)打印的標(biāo)簽信息（如產(chǎn)品批號(hào)或有效期）均要進(jìn)行檢查，并有人復(fù)核確保其正確無誤，并予以記錄。如手工打印，需增加檢查頻次（前、中、后）。10.1.5打印檢查用樣品從包裝生產(chǎn)線取走后不得再返還，以防止產(chǎn)品混淆或污染。10.1.6因包裝過程產(chǎn)生異常情況而需要重新包裝產(chǎn)品的，必須經(jīng)專門檢查、調(diào)查并由生產(chǎn)部門負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)。重新包裝需填寫詳細(xì)記錄。10.1.7需要去除原有產(chǎn)品標(biāo)簽和包裝時(shí)需隔離操作，以防止試驗(yàn)藥物與對(duì)照藥品出現(xiàn)污染、T/CBPIA0008—2024交叉污染以及混淆、差錯(cuò)。10.2儲(chǔ)存10.2.1成品應(yīng)儲(chǔ)存在≤-70℃條件下，建議超低溫冰箱溫度設(shè)置為-80℃,設(shè)置報(bào)警上限-70℃,報(bào)警下限-90℃10.2.2成品應(yīng)當(dāng)有標(biāo)識(shí)，以防止混淆。10.2.3成品應(yīng)按照成品的貯存條件和有效期貯存，其貯存環(huán)境應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的控制，例如溫度、濕度、光照等。10.2.4印刷包裝材料應(yīng)設(shè)置專門的區(qū)域進(jìn)行存放，由供銷組倉(cāng)庫(kù)人員妥善管理。10.2.5貯存過程中成品出現(xiàn)異常情況應(yīng)由成品貯存部門隔離并發(fā)起偏差進(jìn)行調(diào)查。10.2.6超過有效期或其他原因被判定為不合格的成品，應(yīng)由倉(cāng)庫(kù)人員將其轉(zhuǎn)入不合格品區(qū)域。10.3運(yùn)輸10.3.1委托其他單位運(yùn)輸產(chǎn)品的，對(duì)承運(yùn)方運(yùn)輸產(chǎn)品的質(zhì)量保障能力進(jìn)行審計(jì)，索取承運(yùn)商的相關(guān)資料，符合運(yùn)輸設(shè)施設(shè)備條件和要求的方可委托。10.3.2委托運(yùn)輸產(chǎn)品需與承運(yùn)方簽訂運(yùn)輸質(zhì)量保證協(xié)議，內(nèi)容包括承運(yùn)方應(yīng)當(dāng)按照產(chǎn)品經(jīng)營(yíng)質(zhì)量管理規(guī)范，建立并執(zhí)行運(yùn)輸標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，運(yùn)輸過程中產(chǎn)品的溫度控制、實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)要求，運(yùn)輸過程質(zhì)量安全責(zé)任等內(nèi)容。10.3.3索取承運(yùn)方的運(yùn)輸資質(zhì)文件、運(yùn)輸設(shè)施設(shè)備證明、設(shè)施設(shè)備的定期驗(yàn)證文件、運(yùn)輸過程溫度控制及監(jiān)測(cè)等相關(guān)資料。10.3.4對(duì)承運(yùn)方的運(yùn)輸設(shè)施設(shè)備、人員資質(zhì)、質(zhì)量保障能力、安全運(yùn)輸能力、風(fēng)險(xiǎn)控制能力等進(jìn)行審計(jì)，審計(jì)報(bào)告應(yīng)當(dāng)存檔。10.3.5承運(yùn)方冷藏、冷凍運(yùn)輸設(shè)施設(shè)備及自動(dòng)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)不符合規(guī)定或未經(jīng)驗(yàn)證的，不得委T/CBPIA0008—2024托運(yùn)輸。10.3.6對(duì)承運(yùn)方制定冷藏、冷凍產(chǎn)品運(yùn)輸過程中溫度控制的應(yīng)急預(yù)案進(jìn)行審計(jì)，確保能對(duì)運(yùn)輸過程中出現(xiàn)的異常氣候、設(shè)備故障、交通事故等意外或緊急情況，及時(shí)采取有效的應(yīng)對(duì)措施，防止因異常情況造成的溫度失控。10.3.7根據(jù)產(chǎn)品的包裝、質(zhì)量屬性和貯存要求，提前與承運(yùn)方確認(rèn)適宜的運(yùn)送方式，防止出現(xiàn)變質(zhì)、破損、污染、溫控失效等問題。10.3.8使用冷藏箱、保溫箱運(yùn)送產(chǎn)品時(shí)，由冰箱轉(zhuǎn)入至箱內(nèi)的過程不得超過五分鐘，如產(chǎn)品過多，可分多次中轉(zhuǎn)。10.3.9裝箱前將冷藏箱、保溫箱預(yù)冷至符合產(chǎn)品包裝標(biāo)示的溫度范圍內(nèi)。10.3.10產(chǎn)品裝箱后，冷藏箱啟動(dòng)動(dòng)力電源和溫度監(jiān)測(cè)設(shè)備，保溫箱啟動(dòng)溫度監(jiān)測(cè)設(shè)備，檢查設(shè)備運(yùn)行正常后，將箱體密閉。10.3.11產(chǎn)品發(fā)運(yùn)需填寫發(fā)運(yùn)記錄，實(shí)現(xiàn)運(yùn)輸過程的質(zhì)量追溯。記錄包括但不限于產(chǎn)品名稱、規(guī)格、批號(hào)、數(shù)量、收貨單位和地址、聯(lián)系方式、發(fā)貨日期、運(yùn)輸方式等。記錄應(yīng)由專人保存。T/CBPIA0008—2024（規(guī)范性）生產(chǎn)檢定用細(xì)胞庫(kù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（以Vero細(xì)胞為例）A.1范圍適用于生產(chǎn)檢定用Vero細(xì)胞主細(xì)胞庫(kù)、工作細(xì)胞庫(kù)的檢驗(yàn)與質(zhì)量判定。A.2術(shù)語(yǔ)A.2.1主細(xì)胞庫(kù)（MCB,MasterCellBank）由原始細(xì)胞庫(kù)的細(xì)胞制備而成，分裝于容器內(nèi)，組成應(yīng)均一，保存于液氮或-130℃以下，用于制備工作細(xì)胞庫(kù)。A.2.2工作細(xì)胞庫(kù)（WCB,WorkCellBank）由有限傳代水平的主細(xì)胞庫(kù)制備而來的均一性細(xì)胞懸液，分裝適宜體積于多個(gè)容器中，保存于液氮或-130℃以下，用于生產(chǎn)。A.2.3生產(chǎn)終末細(xì)胞（EOPC,EndofProductionCell）指在或超過生產(chǎn)末期時(shí)收獲的細(xì)胞A.3內(nèi)容A.3.1細(xì)胞信息A.3.1.1細(xì)胞名稱：適宜細(xì)胞（標(biāo)明名稱）。A.3.1.2細(xì)胞代次：各級(jí)細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞代次應(yīng)不超過批準(zhǔn)的限定代次。A.3.1.3包裝形式：適宜的細(xì)胞凍存管。A.3.2取樣細(xì)胞庫(kù)取樣：按照細(xì)胞庫(kù)建庫(kù)方案的規(guī)定取樣。T/CBPIA0008—2024A.3.3主細(xì)胞庫(kù)和工作細(xì)胞庫(kù)檢驗(yàn)A.3.3.1細(xì)胞庫(kù)建立后，應(yīng)至少對(duì)MCB細(xì)胞及生產(chǎn)終末細(xì)胞（EOPC）進(jìn)行一次全面檢定。當(dāng)生產(chǎn)工藝發(fā)生改變時(shí)，應(yīng)重新對(duì)EOPC進(jìn)行檢測(cè)。每次從MCB建立一個(gè)新的WCB，均應(yīng)按規(guī)定項(xiàng)目進(jìn)行檢定。檢定項(xiàng)目按表1規(guī)定。表1細(xì)胞檢驗(yàn)項(xiàng)目要求檢測(cè)項(xiàng)目MCBWCBEOPC細(xì)胞鑒別＋＋-細(xì)菌、真菌檢查＋＋＋支原體檢查＋＋＋細(xì)胞內(nèi)、外源病毒污染檢查細(xì)胞形態(tài)觀察及血吸附試驗(yàn)＋＋＋體外不同細(xì)胞接種培養(yǎng)法＋＋＋動(dòng)物和雞胚體內(nèi)接種法＋－＋逆轉(zhuǎn)錄病毒檢查＋－＋種屬特異性病毒檢查－－牛源性病毒檢查＋－＋豬源性病毒檢查＋－＋其他特定病毒檢查－成瘤性檢查＋－致瘤性檢查－“＋”為必檢項(xiàng)目，“－”為非強(qiáng)制檢驗(yàn)項(xiàng)目。A.3.3.2細(xì)胞鑒別試驗(yàn)：依現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》“生物制品生產(chǎn)檢定用動(dòng)物細(xì)胞基質(zhì)制備及質(zhì)量控制”相關(guān)規(guī)定檢查，應(yīng)為本細(xì)胞且無其它細(xì)胞污染。A.3.3.3細(xì)菌、真菌檢查：對(duì)于MCB及WCB培養(yǎng)物，至少取混合細(xì)胞培養(yǎng)上清液10ml，采用薄膜過濾法檢查。對(duì)于凍存細(xì)胞，至少取凍存細(xì)胞總支數(shù)的1%或至少2支凍存細(xì)胞管（取量大者采用直接接種法檢查。依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則1101“無菌檢查法”檢查，應(yīng)無菌生長(zhǎng)。T/CBPIA0008—2024A.3.3.4支原體檢查：取細(xì)胞培養(yǎng)上清液20ml，依照現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》通則3301“支原體檢查法”進(jìn)行檢查，應(yīng)無支原體生長(zhǎng)。檢查，應(yīng)無支原體污染。A.3.3.5內(nèi)、外源病毒污染檢查：依現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》“生物制品生產(chǎn)檢定用動(dòng)物細(xì)胞基質(zhì)制備及質(zhì)量控制”相關(guān)規(guī)定檢查，應(yīng)符合規(guī)定。A.3.4儲(chǔ)存A.3.4.1儲(chǔ)存位置：主細(xì)胞庫(kù)和工作細(xì)胞庫(kù)應(yīng)分別存放，檢定用細(xì)胞應(yīng)與生產(chǎn)用細(xì)胞嚴(yán)格分開存放。應(yīng)監(jiān)測(cè)并維護(hù)細(xì)胞庫(kù)凍存容器，以保證細(xì)胞庫(kù)貯存在一個(gè)高度穩(wěn)定的環(huán)境中。A.3.4.2儲(chǔ)存溫度：≤-130℃（液氮）。A.4注意事項(xiàng)A.4.1細(xì)胞庫(kù)凍存容器應(yīng)有溫度監(jiān)測(cè)系統(tǒng)。細(xì)胞庫(kù)凍存容器的存放環(huán)境應(yīng)控制溫濕度、避免陽(yáng)光照射。A.4.2從凍存容器中取出細(xì)胞后，不可再放回。T/CBPIA0008—2024(規(guī)范性)生產(chǎn)用病毒種子批質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)B.1范圍適用于重組溶瘤II型單純皰疹病毒主種子批及工作種子批的檢驗(yàn)和質(zhì)量判定。B.2術(shù)語(yǔ)B.2.1主種子批（MSL,MasterSeedLot）由原始種子傳代擴(kuò)增至特定代次，并經(jīng)一次制備獲得的同質(zhì)和均一的懸液分裝于容器制備而成。主種子批用于制備工作種子批。B.2.2工作種子批（WSL,WorkingSeedLot）由主種子批傳代擴(kuò)增至特定代次，并經(jīng)一次制備獲得的同質(zhì)和均一的懸液分裝于容器制備而成。B.3內(nèi)容B.3.1病毒信息B.3.1.1病毒名稱：重組溶瘤II型單純皰疹病毒B.3.1.2病毒來源：對(duì)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)株HSV2（如HG52；ECACC編號(hào)#657）進(jìn)行改造，獲得溶瘤性HSV2（oHSV2）。這些改造的目的包括但不限于：實(shí)現(xiàn)病毒選擇性地在腫瘤細(xì)胞內(nèi)繁殖；增強(qiáng)病毒在腫瘤細(xì)胞中的繁殖能力，提高溶瘤活性；插入外源基因的表達(dá)序列，誘導(dǎo)和增強(qiáng)抗腫瘤免疫反應(yīng)等。B.3.1.3包裝形式：主種子批可使用凍存管保存，工作種子批宜按生產(chǎn)規(guī)模分裝合適的病毒數(shù)量于可冷凍保存的無菌容器中。B.3.1.4病毒代次：主種子批和工作種子批應(yīng)不超過批準(zhǔn)的限定代次。T/CBPIA0008T/CBPIA0008—2024B32病毒種子批的檢定B321生產(chǎn)用病毒主種子批和工作種子批的檢定WSL-++-++++++