2.2動物細(xì)胞工程（課時1）課件-高二下學(xué)期生物人教版（2019）選擇性必修3

動物細(xì)胞工程知識點(diǎn)1動物細(xì)胞培養(yǎng)1、含義：p43黑體字指從動物體中取出相關(guān)組織，將它分散成單個細(xì)胞，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長和增殖的技術(shù)。1題答案：細(xì)胞增殖能力與供體的年齡有關(guān)，幼齡動物的細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，有絲分裂旺盛，老齡動物的細(xì)胞則相反。所以，一般來說，幼齡動物細(xì)胞比老齡動物細(xì)胞易于培養(yǎng)。分化程度越低的細(xì)胞，增殖能力越強(qiáng)，所以更容易培養(yǎng)。p45知識點(diǎn)1動物細(xì)胞培養(yǎng)1、含義：p43黑體字指從動物體中取出相關(guān)組織，將它分散成單個細(xì)胞，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長和增殖的技術(shù)。選材：原因：這些細(xì)胞分化程度低，分裂能力強(qiáng)，容易培養(yǎng)。動物胚胎或幼齡動物的組織、器官在進(jìn)行培養(yǎng)之前為什么要將細(xì)胞分散成單個細(xì)胞？用什么方法分散？資料卡片：在動物組織中存在由細(xì)胞分泌物構(gòu)成的的非細(xì)胞復(fù)雜聚合物網(wǎng)絡(luò)，主要成分包括膠原蛋白、非膠原蛋白糖蛋白、蛋白聚糖和糖胺聚糖。知識點(diǎn)1動物細(xì)胞培養(yǎng)1、含義：p43黑體字指從動物體中取出相關(guān)組織，將它分散成單個細(xì)胞，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長和增殖的技術(shù)。原因：常用方法：單個細(xì)胞更容易吸收營養(yǎng)物質(zhì)和排出代謝廢物，生長和分裂的速度會更快。分散成單個細(xì)胞后，細(xì)胞間的接觸抑制消失，生長和分裂的速度會更快。注：接觸抑制指在貼壁生長的細(xì)胞之間互相接觸，發(fā)出信號讓細(xì)胞停止分裂。機(jī)械方法；胰蛋白酶處理；膠原蛋白酶處理。可能對細(xì)胞造成損傷，應(yīng)注意控制處理時間不宜過長。p44答案：說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)胃蛋白酶作用的適宜pH約為2，當(dāng)pH大于6時，胃蛋白酶就失去活性，多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2~7.4，胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性，所以用胃蛋白酶不行。我想使用胃蛋白酶？可以嘛？知識點(diǎn)1動物細(xì)胞培養(yǎng)1、含義：p43黑體字指從動物體中取出相關(guān)組織，將它分散成單個細(xì)胞然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長和增殖的技術(shù)。知識點(diǎn)1動物細(xì)胞培養(yǎng)2、動物細(xì)胞培養(yǎng)所需滿足的條件（1）p44合成培養(yǎng)基的含義主要是葡萄糖，不使用淀粉、蔗糖知識點(diǎn)1動物細(xì)胞培養(yǎng)2、動物細(xì)胞培養(yǎng)所需滿足的條件（1）p44合成培養(yǎng)基的含義培養(yǎng)基中添加血清的原因血清和血漿有什么區(qū)別？培養(yǎng)動物細(xì)胞時為什么常添加血清？用血漿可以不？培養(yǎng)基類型辨析可能導(dǎo)致培養(yǎng)基凝固，且缺乏足夠的生長因子，影響細(xì)胞生長。注：血清成分復(fù)雜，不僅會增加產(chǎn)品分離純化的成本，還容易引起病原體污染。知識點(diǎn)1動物細(xì)胞培養(yǎng)2、動物細(xì)胞培養(yǎng)所需滿足的條件（2）p44③添加一定量的抗生素①②：用于抑制細(xì)菌繁殖,但要注意選擇抗生素的種類和劑量.分析：在培養(yǎng)基中加入一定量的抗生素，從培養(yǎng)基功能的角度分類屬于什么培養(yǎng)基？從培養(yǎng)基功能的角度看屬于選擇培養(yǎng)基。濕熱滅菌知識點(diǎn)1動物細(xì)胞培養(yǎng)2、動物細(xì)胞培養(yǎng)所需滿足的條件（3）p44知識點(diǎn)1動物細(xì)胞培養(yǎng)2、動物細(xì)胞培養(yǎng)所需滿足的條件（4）p44作用直接通空氣行不行？換成95%O?+5%CO?的混合氣體行不行？作用1.提供氧氣等氣體研究表明，高濃度氧氣（>50%）會對大多數(shù)動物細(xì)胞產(chǎn)生毒性，抑制細(xì)胞增殖，甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡。氮?dú)馔耆灰瞥?，?xì)胞無法適應(yīng)。知識點(diǎn)1動物細(xì)胞培養(yǎng)2、動物細(xì)胞培養(yǎng)所需滿足的條件（4）p44【拓展】松蓋培養(yǎng)瓶瓶蓋上有微孔或透氣膜，允許氣體（如O?和CO?）自由交換，確保細(xì)胞生長所需的氣體環(huán)境。知識點(diǎn)1動物細(xì)胞培養(yǎng)2、動物細(xì)胞培養(yǎng)所需滿足的條件（4）p44液體培養(yǎng)基【小結(jié)】知識點(diǎn)1動物細(xì)胞培養(yǎng)3、原理：細(xì)胞增殖4、目的：獲得細(xì)胞或者細(xì)胞產(chǎn)物知識點(diǎn)1動物細(xì)胞培養(yǎng)3、過程：取動物組織單個細(xì)胞細(xì)胞懸液培養(yǎng)加培養(yǎng)液細(xì)胞的兩種生活方式：①懸浮生長細(xì)胞：細(xì)胞能夠懸浮在培養(yǎng)液中生長增殖②貼壁生長細(xì)胞：細(xì)胞需要貼附于某些基質(zhì)(如培養(yǎng)瓶壁)表面才能增殖培養(yǎng)液中的細(xì)胞增殖曲線是“S”型？還是“J”型？后期細(xì)胞數(shù)量是否會下降？為什么？在適宜條件下機(jī)械方法；胰蛋白酶處理；膠原蛋白酶處理知識點(diǎn)1動物細(xì)胞培養(yǎng)3、過程：取動物組織單個細(xì)胞細(xì)胞懸液培養(yǎng)細(xì)胞有兩種生活方式①懸浮生長細(xì)胞②貼壁生長細(xì)胞

(主要類型)細(xì)胞密度大營養(yǎng)不足代謝廢物累積接觸抑制細(xì)胞凋亡、壞死導(dǎo)致接觸抑制是指當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時，細(xì)胞通常會停止分裂增殖的現(xiàn)象。知識點(diǎn)1動物細(xì)胞培養(yǎng)3、過程：取動物組織單個細(xì)胞細(xì)胞懸液培養(yǎng)細(xì)胞有兩種生活方式①懸浮生長細(xì)胞②貼壁生長細(xì)胞

(主要類型)細(xì)胞密度大營養(yǎng)不足代謝廢物累積接觸抑制細(xì)胞凋亡、壞死導(dǎo)致接觸抑制是指當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時，細(xì)胞通常會停止分裂增殖的現(xiàn)象。注：癌細(xì)胞沒有接觸抑制現(xiàn)象。再不想想辦法細(xì)胞全都“死翹翹”了，咋個辦嘛？知識點(diǎn)1動物細(xì)胞培養(yǎng)3、過程：培養(yǎng)過程中易出現(xiàn)的問題：解決辦法：原代培養(yǎng)：指將分瓶前的細(xì)胞培養(yǎng)，即動物組織經(jīng)過處理后的初次培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)：指分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)。P45教材原文勾畫將原代培養(yǎng)中貼壁生長細(xì)胞在進(jìn)行進(jìn)行“分瓶培養(yǎng)”/“傳代培養(yǎng)”之前應(yīng)該用什么方法進(jìn)行處理，才更有利于后續(xù)培養(yǎng)？【筆記整理】動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程取動物組織單個細(xì)胞細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)細(xì)胞有兩種生活方式①懸浮生長細(xì)胞

(次要類型)②貼壁生長細(xì)胞

(主要類型)離心法收集細(xì)胞先用胰蛋白酶處理，再用離心法收集細(xì)胞制成細(xì)胞懸液傳代培養(yǎng)因細(xì)胞密度大、營養(yǎng)不足、代謝廢物累積導(dǎo)致細(xì)胞死亡因：①細(xì)胞密度大、營養(yǎng)不足、代謝廢物累積；②接觸抑制，導(dǎo)致細(xì)胞死亡傳代培養(yǎng)可以一直進(jìn)行下去嗎？正常細(xì)胞：傳代次數(shù)有限。指細(xì)胞只能分裂一定次數(shù)，之后會停止增殖。干細(xì)胞：傳代能力較強(qiáng)，但可能隨傳代次數(shù)增加而喪失增殖與分化的能力。癌細(xì)胞：理論上可無限傳代，但需監(jiān)控遺傳穩(wěn)定性?！颈容^】原代培養(yǎng)&傳代培養(yǎng)原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)含義分瓶之前的細(xì)胞培養(yǎng)分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞來源直接來自生物體（如組織塊或器官）來自原代培養(yǎng)的細(xì)胞細(xì)胞特點(diǎn)細(xì)胞保持較高的生物學(xué)特性，接近體內(nèi)狀態(tài)傳至10代后就不易傳下去，10-50代左右，增殖會逐漸緩慢，甚至停止。但有些細(xì)胞會克服細(xì)胞壽命的自然極限，獲得不死性細(xì)胞。應(yīng)用研究細(xì)胞的基本特性藥物篩選等大規(guī)模細(xì)胞生產(chǎn)長期實驗等培養(yǎng)條件相同初次使用胰蛋白酶處理后進(jìn)行培養(yǎng)的細(xì)胞。第二次次使用胰蛋白酶處理后進(jìn)行培養(yǎng)的細(xì)胞?！颈容^】原代培養(yǎng)&傳代培養(yǎng)【基礎(chǔ)檢測】(1)原代培養(yǎng)：將

的細(xì)胞培養(yǎng)，即動物組織經(jīng)處理后的

稱為原代培養(yǎng)。(2)傳代培養(yǎng)：將

的細(xì)胞培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)；(3)細(xì)胞貼壁：

體外培養(yǎng)的細(xì)胞需要

才能生長增殖，這類細(xì)胞往往貼附在培養(yǎng)瓶的

上，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞貼壁；(4)接觸抑制：當(dāng)

細(xì)胞生長到

時，細(xì)胞通常會

。答案：(1)分瓶之前

初次培養(yǎng) (2)分瓶后(3)大多數(shù)

貼附于某些基質(zhì)表面

瓶壁(4)貼壁

表面相互接觸

停止分裂增殖p45不同相同項目動物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)原理細(xì)胞增殖植物細(xì)胞的全能性培養(yǎng)前處理無菌；用機(jī)械的方法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理，使組織分散成單個細(xì)胞無菌、離體取材動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織植物幼嫩的部位或花藥等培養(yǎng)基液體固體培養(yǎng)基成分糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、維生素和動物血清等水、礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、植物激