2025年核酸檢驗面試試題及答案

核酸檢驗面試試題及答案姓名：____________________

一、選擇題（每題2分，共20分）

1.下列哪種方法不屬于核酸提取的常用方法？

A.磷酸鹽緩沖液法

B.離心法

C.沉淀法

D.紫外線照射法

2.下列哪種酶用于PCR反應(yīng)中擴(kuò)增DNA？

A.聚合酶

B.核酸酶

C.蛋白酶

D.磷酸酶

3.下列哪種試劑用于核酸雜交實驗？

A.磷酸鹽緩沖液

B.丙烯酰胺

C.醋酸銨

D.DNA探針

4.下列哪種方法可以檢測DNA序列中的突變？

A.Southernblot

B.Northernblot

C.DNA測序

D.Westernblot

5.下列哪種方法可以檢測RNA病毒？

A.PCR

B.ELISA

C.Westernblot

D.IFA

6.下列哪種核酸提取方法最適用于細(xì)胞核提??？

A.CTAB法

B.Trizol法

C.CTAB/CTAB法

D.CTAB/SDS法

7.下列哪種方法可以檢測RNA的完整性？

A.Northernblot

B.Southernblot

C.DNA測序

D.RT-PCR

8.下列哪種方法可以檢測DNA的完整性？

A.Northernblot

B.Southernblot

C.DNA測序

D.RT-PCR

9.下列哪種方法可以檢測病毒載量？

A.PCR

B.ELISA

C.Westernblot

D.IFA

10.下列哪種方法可以檢測細(xì)菌的核酸？

A.PCR

B.ELISA

C.Westernblot

D.IFA

二、填空題（每題2分，共20分）

1.核酸提取的常用方法包括__________、__________、__________等。

2.PCR反應(yīng)的四個步驟分別是__________、__________、__________、__________。

3.核酸雜交實驗中，常用的探針類型有__________、__________、__________。

4.Southernblot實驗中，常用的標(biāo)記方法有__________、__________、__________。

5.DNA測序的原理是__________、__________、__________。

6.ELISA實驗中，常用的酶聯(lián)反應(yīng)底物有__________、__________、__________。

7.IFA實驗中，常用的熒光標(biāo)記有__________、__________、__________。

8.PCR實驗中，常用的引物設(shè)計原則有__________、__________、__________。

9.核酸提取的步驟包括__________、__________、__________、__________。

10.核酸雜交實驗的步驟包括__________、__________、__________、__________。

三、簡答題（每題5分，共25分）

1.簡述PCR反應(yīng)的原理和步驟。

2.簡述DNA測序的原理和步驟。

3.簡述核酸提取的常用方法及其原理。

4.簡述核酸雜交實驗的原理和步驟。

5.簡述ELISA實驗的原理和步驟。

四、論述題（每題10分，共20分）

1.論述核酸檢測在傳染病防控中的重要作用。

2.論述PCR技術(shù)在分子生物學(xué)研究中的應(yīng)用。

五、計算題（每題10分，共20分）

1.若某基因片段長度為1000bp，設(shè)計引物時，引物長度為20bp，求引物之間的距離應(yīng)為多少？

2.若某DNA片段的濃度為1ng/μl，體積為100μl，求該DNA片段的摩爾濃度是多少？

六、綜合應(yīng)用題（每題10分，共20分）

1.某實驗室需要從一份含有多種病毒樣本中檢測一種特定病毒，請簡述如何利用PCR技術(shù)進(jìn)行病毒檢測。

2.某研究人員在研究一種腫瘤基因的表達(dá)情況，已知該基因長度為2000bp，請簡述如何利用RT-PCR技術(shù)檢測該基因的表達(dá)水平。

試卷答案如下：

一、選擇題答案及解析思路：

1.D（紫外線照射法不屬于核酸提取的常用方法，其他選項均為提取方法）

2.A（聚合酶用于PCR反應(yīng)中擴(kuò)增DNA，其他選項為其他類型的酶）

3.D（DNA探針用于核酸雜交實驗，其他選項為其他類型的試劑）

4.C（DNA測序可以檢測DNA序列中的突變，其他選項為其他檢測方法）

5.A（PCR可以檢測RNA病毒，其他選項為其他檢測方法）

6.A（CTAB法適用于細(xì)胞核提取，其他選項為其他提取方法）

7.A（Northernblot可以檢測RNA的完整性，其他選項為其他檢測方法）

8.B（Southernblot可以檢測DNA的完整性，其他選項為其他檢測方法）

9.A（PCR可以檢測病毒載量，其他選項為其他檢測方法）

10.A（PCR可以檢測細(xì)菌的核酸，其他選項為其他檢測方法）

二、填空題答案及解析思路：

1.磷酸鹽緩沖液法、CTAB法、Trizol法

2.變性、退火、延伸、延伸

3.DNA探針、RNA探針、寡核苷酸探針

4.同位素標(biāo)記、熒光標(biāo)記、酶聯(lián)標(biāo)記

5.核苷酸鏈的合成、堿基配對、鏈延伸

6.3,3'-二氨基聯(lián)苯胺（TMB）、4-甲基傘形酮（4-MU）、對硝基苯磷酸（pNPP）

7.異硫氰酸熒光素（FITC）、四甲基異硫氰酸羅丹明（TRITC）、藻紅蛋白（PE）

8.保守性、特異性、簡并性

9.樣本處理、裂解、沉淀、純化

10.樣本處理、雜交、洗滌、顯影

三、簡答題答案及解析思路：

1.PCR反應(yīng)的原理是利用DNA聚合酶在特定條件下復(fù)制DNA片段，步驟包括變性、退火、延伸和延伸。

2.DNA測序的原理是利用DNA聚合酶在特定條件下合成新的DNA鏈，并通過電泳分離和讀取堿基序列，步驟包括模板制備、引物設(shè)計、PCR擴(kuò)增、測序和數(shù)據(jù)分析。

3.核酸提取的常用方法包括CTAB法、Trizol法和SDS法，原理是通過裂解細(xì)胞、沉淀核酸和純化核酸來提取。

4.核酸雜交實驗的原理是利用核酸探針與目標(biāo)核酸序列互補配對，步驟包括標(biāo)記探針、雜交、洗滌和檢測。

5.ELISA實驗的原理是利用抗原抗體反應(yīng)檢測目標(biāo)蛋白，步驟包括包被、洗滌、加樣、洗滌、加酶聯(lián)抗體、洗滌、顯色和讀數(shù)。

四、論述題答案及解析思路：

1.核酸檢測在傳染病防控中的重要作用包括快速、準(zhǔn)確地診斷傳染病、監(jiān)測病毒載量、評估疫情趨勢和制定防控策略。

2.PCR技術(shù)在分子生物學(xué)研究中的應(yīng)用包括基因克隆、基因表達(dá)分析、基因突變檢測、基因編輯和基因治療。

五、計算題答案及解析思路：

1.引物之間的距離=基因片段長度/引物長度=1000bp/20bp=50bp

2.摩爾濃度=物質(zhì)的量/溶液體積=1ng/(6.022x10^23molecules/mol)/100μl=1.65x10^-1