2025屆黑龍江安達(dá)市育才高中高考全國(guó)統(tǒng)考預(yù)測(cè)密卷生物試卷含解析

2025屆黑龍江安達(dá)市育才高中高考全國(guó)統(tǒng)考預(yù)測(cè)密卷生物試卷注意事項(xiàng)：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫(xiě)在答題卡上。2．回答選擇題時(shí)，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對(duì)應(yīng)題目的答案標(biāo)號(hào)涂黑，如需改動(dòng)，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標(biāo)號(hào)。回答非選擇題時(shí)，將答案寫(xiě)在答題卡上，寫(xiě)在本試卷上無(wú)效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)操作流程的敘述中，正確的是（）A．腐乳制作：豆腐長(zhǎng)毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制B．制作植物細(xì)胞有絲分裂臨時(shí)裝片：解離→染色→漂洗→制片C．血球計(jì)數(shù)板的使用：蓋蓋玻片→滴培養(yǎng)液→等待沉降→鏡檢計(jì)數(shù)→刷洗D．果酒果醋制作：挑選葡萄→沖洗→榨汁→果醋發(fā)酵→果醋→酒精發(fā)酵→果酒2．胰島素可以改善腦神經(jīng)元的生理功能，其調(diào)節(jié)機(jī)理如圖所示。下列推論正確的是（）A．胰島素可抑制腦神經(jīng)元的凋亡，但可促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的變性、壞死B．胰島素可以促進(jìn)突觸前膜釋放的神經(jīng)遞質(zhì)進(jìn)入突觸后膜C．免疫系統(tǒng)可以防衛(wèi)并清除體內(nèi)變性、壞死的神經(jīng)細(xì)胞D．InR、GLUT的作用可體現(xiàn)蛋白質(zhì)在細(xì)胞膜上行使不同的功能3．下列有關(guān)敘述不正確的是（）A．孟德?tīng)柦?jīng)過(guò)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)耐评砗痛竽懙南胂蠼沂镜倪z傳規(guī)律，是超越自己時(shí)代的設(shè)想B．T2噬菌體侵染大腸桿菌實(shí)驗(yàn)比肺炎雙球菌體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)更具說(shuō)服力C．沃森和克里克在探究DNA結(jié)構(gòu)時(shí)，利用了物理模型構(gòu)建的方法D．薩頓通過(guò)觀察雄蝗蟲(chóng)體細(xì)胞和精子細(xì)胞的染色體數(shù)，提出了基因在染色體上的假說(shuō)4．生物鐘是指生物體生命活動(dòng)的內(nèi)在節(jié)律性。哺乳動(dòng)物的生物鐘包括腦部的中樞生物鐘和周圍器官中的外周生物鐘。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，分別敲除兩組正常小鼠肝臟和胰腺中的外周生物鐘基因，小鼠分別表現(xiàn)出低血糖和糖尿病癥狀。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是A．參與中樞生物鐘調(diào)節(jié)的神經(jīng)中樞位于下丘腦B．肝臟和胰腺細(xì)胞中不存在中樞生物鐘基因C．低血糖出現(xiàn)的原因可能是肝糖原分解受阻D．敲除胰腺中的外周生物鐘基因可能影響了胰島素的分泌5．人體的體溫調(diào)定點(diǎn)，在正常生理狀態(tài)下為37℃。如果體溫偏離這個(gè)數(shù)值，則通過(guò)反饋系統(tǒng)將信息傳回下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞，此中樞會(huì)整合這些信息并與調(diào)定點(diǎn)比較，相應(yīng)地調(diào)節(jié)散熱機(jī)制或產(chǎn)熱機(jī)制，維持體溫的相對(duì)穩(wěn)定。體溫調(diào)定點(diǎn)不是一成不變的，如正常人體因病毒感染引起的發(fā)熱過(guò)程分為體溫上升期、高溫持續(xù)期和體溫下降期。下圖為發(fā)熱體溫上升期，機(jī)體體溫調(diào)節(jié)過(guò)程示意圖。下列說(shuō)法不正確的是（）A．激素甲和激素乙都是通過(guò)體液運(yùn)輸發(fā)揮作用B．體溫上升期，骨骼肌不自主收縮有助于增加產(chǎn)熱C．體溫升高后的持續(xù)期，人體的產(chǎn)熱量大于散熱量D．體溫調(diào)節(jié)過(guò)程體現(xiàn)了神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)是相互聯(lián)系的6．下列關(guān)于生物技術(shù)實(shí)踐的敘述，正確的是（）A．制作果醋時(shí)，通氣的直角玻璃管內(nèi)塞有脫脂棉球，用以過(guò)濾空氣B．振蕩培養(yǎng)能增大微生物與培養(yǎng)液的接觸面積，從而促進(jìn)微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收C．測(cè)定樣品中亞硝酸鹽含量時(shí)，將水放入比色杯中，直接測(cè)其OD值，作為空白對(duì)照D．亞硝酸鹽可在堿性條件下與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)，產(chǎn)物再與N-1-萘基乙二胺偶聯(lián)，形成紫紅色產(chǎn)物7．在植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中，調(diào)控赤霉素（GA）生物合成和代謝途徑的關(guān)鍵酶的基因表達(dá)可以控制植物體內(nèi)GA的含量，GA3氧化酶（GA3ox）促進(jìn)活性GA的生成，GA2氧化酶（GA2ox）能夠使GA失活，兩者在植物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．上述事例說(shuō)明，基因通過(guò)控制酶的合成間接控制生物性狀B．利用赤霉素和生長(zhǎng)素類似物都能夠培育無(wú)子果實(shí)C．GA3ox和GA2ox之間相互協(xié)調(diào)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)GA含量的精準(zhǔn)控制D．GA3ox的過(guò)量合成對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育是有利的，GA2ox則相反8．（10分）基因在表達(dá)過(guò)程中如有異常mRNA會(huì)被細(xì)胞分解，如圖是S基因的表達(dá)過(guò)程，則下列有關(guān)敘述正確的是（）A．異常mRNA的出現(xiàn)是基因突變的結(jié)果B．圖中所示的①為轉(zhuǎn)錄，②為翻譯過(guò)程C．圖中②過(guò)程使用的酶是反轉(zhuǎn)錄酶D．S基因中存在不能翻譯成多肽鏈的片段二、非選擇題9．（10分）人類胰島素基因位于第11號(hào)染色體上，長(zhǎng)度8416bp，包含3個(gè)外顯子和2個(gè)內(nèi)含子，人類胰島素的氨基酸序列已知?；卮鹣嚓P(guān)問(wèn)題：（1）上圖是利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因的方法，除了此方法外，還可以利用的方法是____________。（2）利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因，在緩沖液中除了要添加模板和引物外，還需要添加的物質(zhì)有_____________________________。（3）經(jīng)過(guò)______輪循環(huán)可以得到所需的目的基因，一個(gè)DNA分子經(jīng)過(guò)5輪循環(huán)，需要引物A_____個(gè)，從PCR的過(guò)程和DNA分子的特點(diǎn)，試著寫(xiě)出設(shè)計(jì)引物需要注意的問(wèn)題_____、_____（答出2點(diǎn)即可）。（4）利用SDS-凝膠電泳分離不同DNA分子，遷移速度取決于__________________。（5）利用圖示方法獲取的目的基因，直接構(gòu)建基因表達(dá)載體后導(dǎo)入大腸桿菌，（選能或不能）___________表達(dá)出人胰島素，理由是______________________________。10．（14分）請(qǐng)回答下列與生物工程有關(guān)的問(wèn)題：（1）基因工程中常利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，此過(guò)程需要在________酶的作用下進(jìn)行，主要利用了_________原理。此過(guò)程的前提是要有____________序列，以便根據(jù)這一序列合成_______。（2）在基因表達(dá)載體中，______是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出_______。（3）哺乳動(dòng)物核移植可以分為體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植。但實(shí)際操作中，利用體細(xì)胞核移植技術(shù)的難度很大，其原因是_________________________________________。11．（14分）某同學(xué)欲從土壤中分離出能分解尿素的細(xì)菌?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）配制培養(yǎng)基時(shí)，需添加瓊脂作為_(kāi)___；培養(yǎng)基中的KH2PO4與Na2HPO4的作用是_________（答出2點(diǎn)）。（2）在篩選過(guò)程中，接種土壤樣品稀釋液前，需要先檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染，檢測(cè)方法是____。（3）在篩選過(guò)程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以____為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于____培養(yǎng)基。（4）對(duì)分離得到的分解尿素的細(xì)菌作進(jìn)一步鑒定時(shí)，可在上述培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，指示劑變紅的原因是__________。12．研究發(fā)現(xiàn)仙人掌和蘿卜相比，有一個(gè)很特殊的CO2固定過(guò)程：夜間氣孔開(kāi)放，吸收的CO2生成蘋(píng)果酸儲(chǔ)存在液泡中（如圖一所示）；白天氣孔關(guān)閉，液泡中的蘋(píng)果酸經(jīng)脫羧作用釋放CO2用于光合作用（如圖二所示）。而蘿卜固定CO2過(guò)程如圖三所示。據(jù)圖回答下列問(wèn)題：（1）據(jù)圖可知仙人掌和蘿卜共有的代謝途徑是____________________________。（2）仙人掌夜晚能吸收CO2，卻不能合成（CH2O）的原因是缺乏暗反應(yīng)必需的____________，白天進(jìn)行光合作用所需的CO2的來(lái)源有____________________________________。（3）在上午11：00點(diǎn)時(shí)，突然降低環(huán)境中CO2濃度后的一小段時(shí)間內(nèi)，仙人掌和蘿卜的葉肉細(xì)胞中C3含量的變化趨勢(shì)分別是_______（填“升高”、“降低”或“基本不變”），原因是________________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】

酵母菌計(jì)數(shù)方法-抽樣檢測(cè)法：先將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙吸去，稍待片刻，待細(xì)菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央，計(jì)數(shù)一個(gè)小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量。再以此為根據(jù)估算試管中的酵母菌總數(shù)。腐乳制作過(guò)程主要是：讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉、加鹽腌制、加鹵湯裝瓶、密封腌制。讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉的主要條件是溫度保持在15～18℃；加鹽腌制時(shí)，為防止污染將長(zhǎng)滿毛霉的豆腐放在瓶中，并逐層加鹽，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些，大約8d以后，豆腐因水分大量被析出而變硬；鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右?！驹斀狻緼、腐乳制作的流程：豆腐長(zhǎng)毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制，A正確；B、制作植物細(xì)胞有絲分裂臨時(shí)裝片的流程：解離→漂洗→染色→制片，B錯(cuò)誤；C、血球計(jì)數(shù)板的使用：蓋蓋玻片→滴培養(yǎng)液→等待沉降→鏡檢計(jì)數(shù)→清洗，C錯(cuò)誤；D、果酒果醋制作流程：挑選葡萄→沖洗→榨汁→酒精發(fā)酵→果酒→果醋發(fā)酵→果醋，D錯(cuò)誤。故選A。2、D【解析】

免疫系統(tǒng)除具有防衛(wèi)功能外，免疫系統(tǒng)還能監(jiān)控并清除人體內(nèi)衰老、凋亡細(xì)胞和癌變的細(xì)胞，以維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)。題圖分析，胰島素與胰島素受體InR結(jié)合后，可以促進(jìn)神經(jīng)元軸突末梢釋放神經(jīng)遞質(zhì)；可以抑制炎癥因子的作用，進(jìn)而抑制神經(jīng)元的變性、壞死；可以促進(jìn)GLUT轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)葡萄糖，從而使血糖濃度降低，增加了神經(jīng)元細(xì)胞能量供應(yīng)。【詳解】A、結(jié)合題圖分析可知，胰島素起作用后可抑制腦神經(jīng)元的凋亡，同時(shí)也可以通過(guò)抑制炎癥因子的作用，抑制神經(jīng)細(xì)胞的變性、壞死的過(guò)程，A錯(cuò)誤；B、胰島素可以促進(jìn)突觸前膜釋放神經(jīng)遞質(zhì)進(jìn)入突觸間隙，神經(jīng)遞質(zhì)與突觸后膜的受體結(jié)合，不進(jìn)入突觸后膜，B錯(cuò)誤；C、免疫系統(tǒng)可以監(jiān)控并清除體內(nèi)變性、壞死的神經(jīng)細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、由InR、GLUT兩種蛋白質(zhì)的功能可知，不同的蛋白質(zhì)在細(xì)胞膜上行使的功能是不同的，D正確。故選D。3、D【解析】

1、孟德?tīng)柊l(fā)現(xiàn)遺傳定律用了假說(shuō)演繹法，其基本步驟：提出問(wèn)題→作出假說(shuō)→演繹推理→實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證（測(cè)交實(shí)驗(yàn)）→得出結(jié)論。

2、肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)包括格里菲斯體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和艾弗里體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，其中格里菲斯體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明S型細(xì)菌中存在某種“轉(zhuǎn)化因子”，能將R型細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型細(xì)菌；艾弗里體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明DNA是遺傳物質(zhì)。

3、T2噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)步驟：分別用35S或32P標(biāo)記噬菌體→噬菌體與大腸桿菌混合培養(yǎng)→噬菌體侵染未被標(biāo)記的細(xì)菌→在攪拌器中攪拌，然后離心，檢測(cè)上清液和沉淀物中的放射性物質(zhì)。

4、沃森和克里克用建構(gòu)物理模型的方法研究DNA的結(jié)構(gòu)。

5、薩頓運(yùn)用類比推理的方法提出基因在染色體的假說(shuō)，摩爾根運(yùn)用假說(shuō)演繹法證明基因在染色體上?！驹斀狻緼、孟德?tīng)柦?jīng)過(guò)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)耐评砗痛竽懙南胂?，發(fā)現(xiàn)遺傳因子并證實(shí)了遺傳因子傳遞規(guī)律，比其他科學(xué)家早了30年，是超越自己時(shí)代的設(shè)想，A正確；

B、噬菌體侵染細(xì)菌時(shí)只有DNA進(jìn)入細(xì)菌，蛋白質(zhì)外殼留在細(xì)菌外，這樣DNA和蛋白質(zhì)徹底分開(kāi)，而肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)提取的DNA中由于技術(shù)有限混有0.02%的蛋白質(zhì)，因此噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)比肺炎雙球菌體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)更具說(shuō)服力，B正確；

C、沃森和克里克在探究DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)時(shí)，利用了物理模型構(gòu)建的方法，C正確；

D、薩頓運(yùn)用類比推理的方法，依據(jù)基因和染色體在行為上存在著明顯的平行關(guān)系，提出了基因在染色體的假說(shuō)，D錯(cuò)誤。

故選D。4、B【解析】

1、胰島素通過(guò)促進(jìn)葡萄糖進(jìn)入肝臟、肌肉、脂肪等組織細(xì)胞，并且在這些細(xì)胞中合成糖元、氧化分解或者轉(zhuǎn)化成脂肪；另一方面又能夠抑制肝糖元的分解和非糖類物質(zhì)轉(zhuǎn)化為葡萄糖從而降低血糖濃度。2、血糖含量升高時(shí)，胰島素分泌增多，促進(jìn)葡萄糖進(jìn)入肝臟、肌肉、脂肪等組織細(xì)胞，并且在這些細(xì)胞中合成糖元、氧化分解或者轉(zhuǎn)化成脂肪；另一方面又能夠抑制肝糖元的分解和非糖類物質(zhì)轉(zhuǎn)化為葡萄糖。從而降低血糖。血糖含量降低時(shí)，胰高血糖素含量升高，促進(jìn)肝糖元分解，促進(jìn)非糖類物質(zhì)轉(zhuǎn)化為葡萄糖。【詳解】A、下丘腦是生物節(jié)律的調(diào)節(jié)中樞，A正確；B、肝臟和胰腺細(xì)胞中存在中樞生物鐘基因，只是基因的選擇性表達(dá)，B錯(cuò)誤；C、肝糖原分解受阻，血糖來(lái)源減少，可能出現(xiàn)低血糖，C正確；D、由題可知，敲除胰腺中的外周生物鐘基因小鼠患糖尿病，胰島素分泌可能減少，D正確；故選：B。5、C【解析】

據(jù)圖分析，圖示為體溫調(diào)節(jié)過(guò)程，包括神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)，激素甲表示下丘腦分泌的促甲狀腺激素釋放激素，乙表示垂體分泌的促甲狀腺激素，圖中增加產(chǎn)熱的方式有骨骼肌收縮和甲狀腺激素調(diào)節(jié)使代謝增強(qiáng)，減少散熱的方式是皮膚血管收縮?！驹斀狻緼、激素調(diào)節(jié)的特點(diǎn)之一是通過(guò)體液運(yùn)輸，所以激素甲和激素乙都是通過(guò)體液運(yùn)輸發(fā)揮作用，A正確；B、體溫上升期，產(chǎn)熱量大于散熱量，骨骼肌不自主收縮有助于增加產(chǎn)熱，B正確；C、體溫升高后的持續(xù)期，人體的產(chǎn)熱量等于散熱量，C錯(cuò)誤；D、由圖可知，體溫調(diào)節(jié)過(guò)程是神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)相互聯(lián)系、共同作用的結(jié)果，D正確。故選C。6、A【解析】

亞硝酸鹽測(cè)定的原理亞硝酸鹽可與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氨化反應(yīng)，這一產(chǎn)物再與N-1-萘基乙二胺偶聯(lián)，形成紫紅色產(chǎn)物，可用光電比色法定量?！驹斀狻緼、制作果醋時(shí)，通氣的直角玻璃管內(nèi)塞上脫脂棉球的目的是過(guò)濾空氣，A正確；B、振蕩培養(yǎng)能使微生物與培養(yǎng)液充分接觸，但沒(méi)有增大微生物與培養(yǎng)液的接觸面積，B錯(cuò)誤；C、作為空白對(duì)照的水中也應(yīng)與樣品組一樣，加入氯化銨緩沖液、乙酸和顯色液，C錯(cuò)誤；D、亞硝酸鹽在酸性條件下與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)，D錯(cuò)誤。故選A。【點(diǎn)睛】熟知亞硝酸鹽濃度的測(cè)定是解答本題的關(guān)鍵！果醋的制作流程是解答本題的另一關(guān)鍵！7、D【解析】

本題以基因調(diào)控赤霉素的生物合成和代謝為情境，考查基因與生物性狀的關(guān)系和育種的相關(guān)知識(shí)，重點(diǎn)考查科學(xué)思維能力。赤霉素能促進(jìn)細(xì)胞伸長(zhǎng)，引起植株增高，促進(jìn)種子和果實(shí)發(fā)育，對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育和作物育種方面具有重要作用?！驹斀狻緼、根據(jù)題意可知，植物體內(nèi)GA的含量受基因控制合成的GA3ox和GA2ox控制，即基因通過(guò)控制酶的合成間接控制生物性狀，A正確；B、赤霉素能夠培育無(wú)子葡萄，生長(zhǎng)素類似物可以培育無(wú)子番茄，B正確；C、根據(jù)題意可知，基因通過(guò)控制合成GA3ox和GA2ox，GA3ox和GA2ox之間相互作用，進(jìn)而精準(zhǔn)控制赤霉素的含量，C正確；D、GA3ox和GA2ox的過(guò)量合成對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育均是不利的，D錯(cuò)誤；故選D。8、D【解析】由圖可以直接看出異常mRNA出現(xiàn)是對(duì)前體RNA剪切出現(xiàn)異常造成的，不是基因突變的結(jié)果，A錯(cuò)誤；圖示②為對(duì)前體RNA剪切的過(guò)程，不需要反轉(zhuǎn)錄酶，BC錯(cuò)誤；S基因轉(zhuǎn)錄形成的RNA前體需經(jīng)過(guò)剪切才能指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成，說(shuō)明S基因中存在不能翻譯多肽的序列，D正確。二、非選擇題9、從基因文庫(kù)獲取或人工合成四種脫氧核苷酸（dNTP）和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）331引物自身不能有互補(bǔ)序列引物之間不能有互補(bǔ)序列DNA分子的大小不能因?yàn)榇朔椒ǐ@得的目的基因中含有內(nèi)含子，大腸桿菌無(wú)法正常識(shí)別內(nèi)含子而對(duì)內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯，導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯(cuò)誤【解析】

根據(jù)題干信息和圖形分析，基因工程的基本步驟包括目的基因的獲取、構(gòu)建基因表達(dá)載體、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與表達(dá)；圖示目的基因?yàn)槿祟愐葝u素基因（位于11號(hào)常染色體上），其通過(guò)PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，需要A、B兩種引物；PCR擴(kuò)增目的基因的過(guò)程包括變性、退貨、延伸?！驹斀狻浚?）獲取目的基因的方法除了PCR技術(shù)，還有從基因文庫(kù)獲取或人工合成。（2）用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因（人胰島素基因）時(shí)，所需的條件有引物、模板(目的基因或人胰島素基因)、原料(4種脫氧核糖核苷酸)和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）等。（3）根據(jù)PCR過(guò)程和DNA分子半保留復(fù)制特點(diǎn)可知，前兩輪循環(huán)產(chǎn)生的四個(gè)DNA分子的兩條鏈均不等長(zhǎng)，第三輪循環(huán)產(chǎn)生的DNA分子存在等長(zhǎng)的兩條核苷酸鏈，即僅含引物之間的序列，因此，經(jīng)過(guò)三輪循環(huán)可以得到所需的目的基因；一個(gè)DNA分子經(jīng)過(guò)5輪循環(huán)，理論上至少需要26-2=62個(gè)引物，其中A引物31個(gè)。引物設(shè)計(jì)時(shí)需要注意以下幾點(diǎn)：引物自身不能有互補(bǔ)序列；引物之間不能有互補(bǔ)序列；引物長(zhǎng)度適當(dāng)；引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合；避免與擴(kuò)增DNA內(nèi)有過(guò)多互補(bǔ)的序列。（4）SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)中分子的遷移速率主要取決于分子的大小，因此利用SDS-凝膠電泳分離不同DNA分子，遷移速度取決于DNA分子的大小。（5）題干信息顯示，圖示獲取的目的基因含有外顯子和內(nèi)含子，因此直接將含有此目的基因的表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌并不能表達(dá)出胰島素，原因是大腸桿菌無(wú)法正常識(shí)別內(nèi)含子而對(duì)內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯，導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯(cuò)誤。【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握基因工程的基本步驟、PCR技術(shù)等相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，弄清楚PCR技術(shù)的過(guò)程和原理，能夠利用公式計(jì)算PCR技術(shù)過(guò)程中需要的引物的數(shù)量，并能夠分析大腸桿菌不能表達(dá)出該目的基因產(chǎn)物的原因。10、熱穩(wěn)定DNA聚合（Taq）DNA雙鏈復(fù)制一段已知目的基因的核苷酸引物啟動(dòng)子mRNA動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難【解析】

PCR技術(shù)：（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。（2）原理：DNA復(fù)制。（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。（5）過(guò)程：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。【詳解】（1）基因工程中常利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，此過(guò)程需要在熱穩(wěn)定DNA聚合（Taq）酶的作用下進(jìn)行，主要利用了DNA雙鏈復(fù)制原理。此過(guò)程的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。（2）在基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子的作用是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，并驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。（3）由于體細(xì)胞分化程度高，不容易恢復(fù)全能性，因此體細(xì)胞核移植技術(shù)的難度大于胚胎細(xì)胞核移植。【點(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次考查。11、凝固劑為細(xì)菌提供無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)和保持培養(yǎng)基pH的相對(duì)穩(wěn)定將未接種的培養(yǎng)基在適宜的條件下放置一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落出現(xiàn)尿素選擇分解尿素的細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)【解析】

1、選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基，使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率。鑒別培養(yǎng)基是依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)。2、分離尿素分解菌的方法：能合成脲酶的細(xì)菌才能分解尿素。配制以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，能夠生長(zhǎng)的細(xì)菌就是能分解尿素的細(xì)菌。3、分解尿素的細(xì)菌的鑒定：細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細(xì)菌，若指示劑變紅，可確定該種細(xì)菌能夠分解尿素。【詳解】（1）配制培養(yǎng)基時(shí)，需添加瓊脂作為凝固劑；培養(yǎng)基中的KH2PO4與Na2HPO4的作用有：為細(xì)菌提供無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)、保持培養(yǎng)基pH的相對(duì)穩(wěn)定。（2）在篩選過(guò)程中，接種土壤樣品稀釋液前，需要先檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染，檢測(cè)方