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文檔簡介
2025屆河南省平頂山,許昌市,汝州市高三第一次模擬考試生物試卷注意事項:1.答題前,考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號碼填寫清楚,將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2.答題時請按要求用筆。3.請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答,超出答題區(qū)域書寫的答案無效;在草稿紙、試卷上答題無效。4.作圖可先使用鉛筆畫出,確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5.保持卡面清潔,不要折暴、不要弄破、弄皺,不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.消毒和滅菌是微生物培養(yǎng)中常用的操作方法。下列說法正確的是()A.微生物接種技術(shù)的方法各不相同,但核心都是要防止雜菌污染,保證培養(yǎng)物的純度B.在100℃煮沸5-6分鐘屬于滅菌方法,可殺死微生物細(xì)胞和一部分芽孢C.在滅菌后倒平板前,加入一定量的緩沖液以調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值D.高壓蒸汽滅菌,只有當(dāng)壓力表的壓力降到一個標(biāo)準(zhǔn)大氣壓時,才能打開蓋子2.分泌蛋白S在人胚胎發(fā)育過程中起重要的調(diào)控作用,由基因Shh控制合成。固醇類復(fù)合物是該基因轉(zhuǎn)錄所必需的。翻譯后的產(chǎn)物,只有在切除羧基端的一部分氨基酸后才有活性。下列敘述合理的是()A.基因Shh表達(dá)時,RNA聚合酶與mRNA上的起始密碼子結(jié)合B.切除羧基端一部分氨基酸,可能發(fā)生在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或高爾基體C.患者體內(nèi)缺乏分泌蛋白S是由于遺傳信息改變導(dǎo)致的D.固醇類復(fù)合物是通過控制RNA聚合酶的活性來影響分泌蛋白S的合成3.小麥種子萌發(fā)過程中,α-淀粉酶在糊粉層的細(xì)胞中合成,在胚乳中用于分解淀粉。該酶從糊粉層細(xì)胞排到細(xì)胞外的方式是()A.萌發(fā)過程中氧氣是否充足不會影響其排出B.逆濃度梯度經(jīng)協(xié)助擴散排出C.需要細(xì)胞膜上的載體蛋白協(xié)助D.含該酶的囊泡與細(xì)胞膜融合排出4.高等植物細(xì)胞內(nèi)元素轉(zhuǎn)移的過程,只能發(fā)生在細(xì)胞器中的是()A.CO2中的碳元素轉(zhuǎn)移到葡萄糖 B.H2O中的氫元素轉(zhuǎn)移到葡萄糖C.丙酮酸中的氧元素轉(zhuǎn)移到CO2 D.ATP中的磷元素轉(zhuǎn)移到RNA5.下列有關(guān)HIV的敘述,正確的是()A.HIV的特異性受體只存在于人體的輔助性T淋巴細(xì)胞表面B.HIV的遺傳物質(zhì)不能直接整合到宿主細(xì)胞的染色體中C.HIV感染者細(xì)胞免疫下降,但體液免疫基本不受影響D.HIV主要通過性接觸、血液、昆蟲等途徑傳播6.下列有關(guān)赤霉素的敘述,正確的是()A.赤霉素僅存在于高等植物體內(nèi),是一種植物激素B.赤霉素主要分布于植物的根尖、休眠的種子中C.赤霉素使大麥無須發(fā)芽就能產(chǎn)生α-淀粉酶D.赤霉素和生長素均能促進(jìn)細(xì)胞生長,并具有兩重性二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)錦鯉皰疹病毒是一種雙鏈DNA病毒。下圖為TaqMan熒光探針技術(shù)的原理示意圖,探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時該探針被Taq酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增1個DNA分子,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。請回答下列問題:(1)在基因工程中,目前獲取目的基因的常用方法除了利用PCR技術(shù)擴增外,還有___________和_________兩種類型。(2)引物的化學(xué)本質(zhì)是_________,其與模板DNA的結(jié)合具有_________性。(3)通常情況下,探針中的GC含量比引物中的略高,這有利于保證退火時_________與模板DNA結(jié)合。(4)用TaqMan熒光探針技術(shù)檢測錦鯉皰疹病毒時,在反應(yīng)體系中要加相應(yīng)的病毒遺傳物質(zhì)、引物、探針和_________、_________酶等,其中酶發(fā)揮的具體作用是延伸DNA鏈和_________。(5)若最初該反應(yīng)體系中只有一個病毒DNA分子,經(jīng)n次循環(huán)后,需要消耗TaqMan熒光探針_________個。8.(10分)轉(zhuǎn)染是指利用一定手段使外源基因進(jìn)入細(xì)胞中并穩(wěn)定表達(dá)的過程。腺病毒載體常用于外源基因的轉(zhuǎn)染,這在基因治療、疫苗研發(fā)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的可視化監(jiān)控方面有著廣闊的應(yīng)用前景?;卮鹣铝袉栴}。(l)腺病毒營____活,用作轉(zhuǎn)染的腺病毒載體上具有____識別和結(jié)合的部位,是外源基因在受體細(xì)胞中啟動表達(dá)的關(guān)鍵。(2)構(gòu)建腺病毒載體時,先用同種限制酶對腺病毒DNA和外源基因進(jìn)行切割,可獲得相同的____,再用DNA連接酶恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的___。(3)通過腺病毒載體將藍(lán)色熒光基因轉(zhuǎn)染山羊耳緣成纖維細(xì)胞,利用藍(lán)色熒光直觀監(jiān)控細(xì)胞的體外培養(yǎng)過程。首先將山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或_______處理得到單個成纖維細(xì)胞,培養(yǎng)至貼滿瓶壁時,細(xì)胞就會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為________。這時,重新用胰蛋白酶等處理,然后分瓶繼續(xù)進(jìn)行_______培養(yǎng)。培養(yǎng)時使用的合成培養(yǎng)基,通常需加入___等一些天然成分,以滿足細(xì)胞對營養(yǎng)物質(zhì)的全面需求。9.(10分)果蠅的灰身(A)與黑身(a)、直毛(B)與分叉毛(b)是兩對相對性狀。兩只雌雄果蠅雜交,F(xiàn)1表現(xiàn)型及數(shù)量如下表:灰身黑身直毛分叉毛雌蠅(只)75261010雄蠅(只)74255049回答下列問題:(l)這兩對基因的遺傳遵循___定律。(2)F1灰身直毛雌果蠅的基因型有____種,雜合子的比例為____。(3)若F1中的灰身雄果蠅與黑身雌果蠅雜交,則后代中黑身果蠅所占比例為____。(4)為測定F1中某只雄蠅(甲)的基因型,可將其與基因型為____的果蠅測交,若后代表現(xiàn)型及比例為___,則雄果蠅(甲)的基因型為AaXBY。10.(10分)癌細(xì)胞表面蛋白“PDL-1”與T細(xì)胞表面蛋白“PD-1”特異性結(jié)合后,可抑制T細(xì)胞活性并啟動其凋亡,導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進(jìn)行克隆、表達(dá)及生物學(xué)活性鑒定,為制備抗體打基礎(chǔ)。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點見圖2:α鏈:5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈:5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1(1)首先提取細(xì)胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄生成____________________作為模板;設(shè)計含有不同的限制酶切點的α和β序列為引物,通過____________________技術(shù)擴增目的基因。(2)選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?!陛d體進(jìn)行雙切,再用DNA連接酶將其與目的基因拼接,構(gòu)建表達(dá)載體。該表達(dá)載體的組成,除了目的基因、標(biāo)記基因抗卡那霉素基因外,還必須具有____________________等。(3)而后一定溫度下,與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中,可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌,繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴增重組DNA。(4)將擴增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉(zhuǎn)入可高度表達(dá)外源基因的原代293T細(xì)胞。一段時間后,為確定PD-1基因是否表達(dá),檢測細(xì)胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能,則可裂解293T細(xì)胞,提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結(jié)合,從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。研究中還會有一步驟,只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞,其目的是_________________________。11.(15分)2019-nCov是2019年在武漢首次發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致肺炎的新型冠狀病毒(RNA病毒),世衛(wèi)組織將其引發(fā)的疾病正式命名為2019冠狀病毒病?;卮鹣铝袉栴}。(1)2019-nCov能和細(xì)胞膜上的結(jié)合位點血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2結(jié)合從而入侵細(xì)胞。從細(xì)胞膜控制物質(zhì)進(jìn)出功能方面分析,該現(xiàn)象說明____________。(2)2019-nCov入侵機體后,引發(fā)機體產(chǎn)生_____細(xì)胞并與靶細(xì)胞結(jié)合,使靶細(xì)胞裂解死亡,吞噬細(xì)胞在特異性免疫過程中的作用______________。(答出2點即可)。(3)病愈后的病人在短期內(nèi)一般不會再被感染的原因是___________。一段時間后,制備出的該病毒疫苗不一定能發(fā)揮作用,其原因是____________。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、A【解析】
消毒是能是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面和內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子),滅菌是指用強烈的理化因素殺死物體表面和內(nèi)部的所有微生物,包括芽孢和孢子。常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法,稀釋涂布平板法常用來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目?!驹斀狻緼、微生物接種技術(shù)的方法各不相同,但核心都是要防止雜菌污染,保證獲得純凈的培養(yǎng)物,A正確;B、在100℃煮沸5-6分鐘屬于煮沸消毒法,可殺死微生物細(xì)胞和一部分芽孢,B錯誤;C、在滅菌前,加入一定量的緩沖液以調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值,B錯誤;D、高壓蒸汽滅菌,只有當(dāng)壓力表的壓力降到零時,才能打開排氣閥,擰松螺栓,打開蓋子,D錯誤。故選A。2、B【解析】
解答本題的關(guān)鍵是緊扣題干信息“分泌蛋白S在人胚胎發(fā)育過程中起重要的調(diào)控作用,由Shh基因控制合成,固醇類復(fù)合物是該基因轉(zhuǎn)錄所必需的”、“分泌蛋白S合成后并沒有生物活性,只有在切除羧基端的一部分氨基酸后才有活性”答題?!驹斀狻緼、RNA聚合酶是轉(zhuǎn)錄時所需要的,應(yīng)與基因Shh的啟動子相結(jié)合,A錯誤;B、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體對分泌蛋白都具有加工作用,B正確;C、缺乏分泌蛋白,可能是基因突變,也可能是蛋白質(zhì)翻譯后的加工、分泌等出問題,C錯誤;D、題干信息無法確定固醇類復(fù)合物是如何影響轉(zhuǎn)錄的,D錯誤。故選D。3、D【解析】
小分子物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞方式包括自由擴散、協(xié)助擴散、主動運輸,利用的是細(xì)胞膜的選擇透過性;大分子物質(zhì)和顆粒物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的方式是胞吞和胞吐,利用的是細(xì)胞膜的流動性。根據(jù)題干信息分析,α-淀粉酶化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì),是生物大分子,生物大分子進(jìn)出細(xì)胞的方式是胞吞胞吐,因此既不是順濃度梯度也不是逆濃度梯度,更不是通過離子通道排出,而是通過囊泡包裹與細(xì)胞膜融合以胞吐方式排出,該過程需要消耗能量,借助于細(xì)胞膜的流動性完成。【詳解】A、根據(jù)以上分析已知,α-淀粉酶排到細(xì)胞外的方式為胞吐,需要消耗能量,而氧氣參與有氧呼吸供能,因此α-淀粉酶的排出與氧氣是否充足有關(guān),A錯誤;B、α-淀粉酶排到細(xì)胞外的方式為胞吐,而不是協(xié)助擴散,B錯誤;C、α-淀粉酶排到細(xì)胞外的方式為胞吐,利用的是細(xì)胞膜的流動性,不需要載體蛋白的協(xié)助,C錯誤;D、α-淀粉酶是通過囊泡包裹與細(xì)胞膜融合以胞吐方式排出的,D正確。故選D。4、A【解析】
光合作用的場所是葉綠體,包括光反應(yīng)和暗反應(yīng)階段;有氧呼吸分為三個階段,第一階段在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì),二、三階段在線粒體進(jìn)行?!驹斀狻緼、CO2中的碳元素通過光合作用的暗反應(yīng)過程轉(zhuǎn)移到葡萄糖(CO2→C3→葡萄糖),該反應(yīng)的場所是葉綠體基質(zhì),A正確;B、二糖分解為葡萄糖的過程需要水參與,發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì),不需要細(xì)胞器的參與,B錯誤;C、丙酮酸中的氧元素轉(zhuǎn)移到CO2可發(fā)生在酵母菌等無氧呼吸的第二階段,場所為細(xì)胞質(zhì)基質(zhì),C錯誤;D、ATP脫去兩分子磷酸基團,形成AMP即可作為合成RNA的原料,RNA的合成可發(fā)生在細(xì)胞核中,D錯誤。故選A?!军c睛】解答此題需要明確光合作用與呼吸作用中物質(zhì)的關(guān)系,熟記ATP與RNA的關(guān)系,進(jìn)而結(jié)合選項分析作答。5、B【解析】
A、人體對抗艾滋病靠特異性免疫和非特異性免疫,因此吞噬細(xì)胞表面以及T細(xì)胞表面都有受體,A錯誤;B、HIV的遺傳物質(zhì)通過逆轉(zhuǎn)錄形成DNA后整合到宿主細(xì)胞的染色體中,B正確;C、IV感染者細(xì)胞免疫下降,體液免疫降低,C錯誤;D、艾滋病的傳播途徑有:性接觸傳播、血液傳播和母嬰傳播等,艾滋病不會通過昆蟲傳播,D錯誤。故選B?!军c睛】艾滋病是因為感染人類免疫缺陷病毒(HIV)后導(dǎo)致的免疫缺陷病.HIV是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒,主要攻擊和破壞的靶細(xì)胞為T淋巴細(xì)胞,隨著T淋巴細(xì)胞的大量死亡,導(dǎo)致人體免疫力降低,病人大多死于其他病原微生物的感染或惡性腫瘤,艾滋病的傳播途徑有:性接觸傳播、血液傳播和母嬰傳播等。6、C【解析】
赤霉素的生理作用是促進(jìn)細(xì)胞伸長,從而引起莖稈伸長和植物增高。此外,它還有促進(jìn)麥芽糖化,促進(jìn)營養(yǎng)生長,防止器官脫落和解除種子、塊莖休眠促進(jìn)萌發(fā)等作用?!驹斀狻緼、赤霉素也可存在于赤霉菌中,A錯誤;B、高等植物中的赤霉素主要存在于幼根、幼芽及未成熟的種子等部位,B錯誤;C、在啤酒工業(yè)上多用赤霉素促進(jìn)α-淀粉酶的產(chǎn)生,避免大麥種子由于發(fā)芽而造成大量有機物的消耗,C正確;D、赤霉素和生長素均能促進(jìn)細(xì)胞生長,后者具有兩重性,前者不具有,D錯誤。故選C?!军c睛】本題考查植物激素的相關(guān)知識,意在考查考生能運用所學(xué)知識與觀點,對某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理,做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論。二、綜合題:本大題共4小題7、從基因文庫中獲取人工合成DNA單鏈特異探針先于引物4種脫氧核苷酸(或Mg2+)Taq將探針?biāo)?n-1【解析】
PCR技術(shù)擴增目的基因(1)原理:DNA雙鏈復(fù)制(2)過程:第一步:加熱至90~95℃DNA解鏈;第二步:冷卻到55~60℃,引物結(jié)合到互補DNA鏈;第三步:加熱至70~75℃,熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。【詳解】(1)在基因工程中,目前獲取目的基因的常用方法有:利用PCR技術(shù)擴增、從基因文庫中獲取、人工合成。(2)引物的化學(xué)本質(zhì)是DNA單鏈,其與模板DNA的結(jié)合具有特異性。(3)通常情況下,探針中的GC含量比引物中的略高,這有利于保證退火時探針先于引物與模板DNA結(jié)合。(4)PCR擴增所需的條件包括:模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶),結(jié)合圖中信息可知,用TaqMan熒光探針技術(shù)檢測錦鯉皰疹病毒時,在反應(yīng)體系中要加相應(yīng)的病毒遺傳物質(zhì)、引物、探針和4種脫氧核苷酸、Taq酶等;由圖可知,酶發(fā)揮的具體作用是延伸DNA鏈和將探針?biāo)狻#?)根據(jù)題干信息可知,“熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物數(shù)量完全同步”,因此計算時需要去除原來親代的DNA分子,因此若最初該反應(yīng)體系中只有一個病毒DNA分子,經(jīng)n次循環(huán)后,需要消耗TaqMan熒光探針2n-1個?!军c睛】本題結(jié)合圖解,考查基因工程的相關(guān)知識,要求考生識記基因工程的操作步驟,掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié);識記PCR技術(shù)的條件,能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題。8、寄生RNA聚合酶黏性末端或平末端磷酸二酯鍵膠原蛋白酶細(xì)胞的接觸抑制傳代血清、血漿【解析】
1、基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。構(gòu)建基因表達(dá)載體時需要用同種限制酶切割目的基因和載體,以產(chǎn)生相同的末端,然后用DNA連接酶連接,恢復(fù)被切開的核苷酸之間的磷酸二酯鍵,RNA聚合酶能夠與啟動子識別并結(jié)合催化轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行,這是是外源基因在受體細(xì)胞中啟動表達(dá)的關(guān)鍵。2、動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:取動物組織塊(動物胚胎或幼齡動物的器官或組織)→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)?!驹斀狻浚?)腺病毒屬于動物病毒,其無細(xì)胞結(jié)構(gòu),營寄生生活,必須寄生于宿主的活細(xì)胞中才能繁殖;用作轉(zhuǎn)染的腺病毒載體上應(yīng)具有RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位啟動子,這樣才能驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄形成mRNA,最終合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)。(2)構(gòu)建腺病毒載體時,先用同種限制酶對腺病毒DNA和外源基因進(jìn)行切割,可以獲得相同的黏性末端或平末端,再用DNA連接酶恢復(fù)被限制酶切開的兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵。(3)對山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理得到單個成纖維細(xì)胞,便于細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸;培養(yǎng)至貼滿瓶壁時,細(xì)胞就會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為接觸抑制;這時重新用胰蛋白酶等處理,然后分瓶繼續(xù)進(jìn)行傳代培養(yǎng);由于人們對動物細(xì)胞培養(yǎng)所需的營養(yǎng)物質(zhì)還沒有完全搞清楚,因此培養(yǎng)時使用的合成培養(yǎng)基,通常需加入血漿、血清等一些天然成分,以滿足細(xì)胞對營養(yǎng)物質(zhì)的全面要求?!军c睛】本題考查基因工程和細(xì)胞工程的知識點,要求學(xué)生掌握基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程以及啟動子的作用,把握操作工具限制酶和DNA連接酶的應(yīng)用及其作用結(jié)果,理解動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程和特點,把握動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中的原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的概念,識記動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件,這是解決問題的關(guān)鍵。9、基因自由組合45/61/3aaXbXb灰身直毛雌蠅:黑身直毛雌蠅:灰身分叉毛雄蠅:黑身分叉毛雄蠅=1:1:1:1【解析】
根據(jù)題意和圖表分析可知:雄果蠅中灰身∶黑身≈3∶1,雌果蠅中灰身∶黑身≈3∶1,黑身果蠅與灰身果蠅的比例在雌雄果蠅之間的比例沒有差異,因此控制黑身和灰身的基因位于常染色體上,且灰身對黑身是顯性性狀,親本基因型是Aa×Aa;雄果蠅中直毛:分叉毛≈1:1,雌果蠅中沒有分叉毛,只有直毛,因此控制直毛與分叉毛的基因位于X染色體上,直毛是顯性性狀,親本基因型是XBXb×XBY,對于兩對相對性狀來說,親本果蠅的基因型是AaXBXb×AaXBY。【詳解】(1)由分析可知這兩對基因遵循自由組合定律。(2)親本基因型AaXBXb×AaXBY,所以F1灰身直毛雌果蠅的基因型及AAXBXB∶AaXBXB∶AAXBXb∶AaXBXb=1∶2∶1∶2,共4種,雜合子比例為5/6。(3)F1中的灰身雄果蠅的基因型及比例AA∶Aa=1∶2,所以與黑身雌果蠅雜交,后代黑身果蠅=2/3×1/2=1/3。(4)測交是和隱性純合子交配,即和基因型aaXbXb的雌果蠅測交,若后代表現(xiàn)型及比例為灰身直毛雌蠅∶黑身直毛雌蠅∶灰身分叉毛雄蠅∶黑身分叉毛雄蠅=1∶1∶1∶1,則灰身雄果蠅的基因型為AaXBY?!军c睛】本題需要考生從表格中的數(shù)據(jù)分析出基因在染色上的位置及傳遞方式,在結(jié)合自由組合定律進(jìn)行解答。10、cDNAPCRXhoIEoRI啟動子、終止子、復(fù)制原點卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對照【解析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA采用分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫(cDNA)。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因,而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因,可以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成cDNA;由于PCR技術(shù)利用的是DNA分子復(fù)制的原理,所以用該cDNA進(jìn)行PCR技術(shù)擴增短時間內(nèi)可以獲得大量的目的基因。(2)分析圖1中堿基序列,α鏈上有“—CTCGAC—”識別序列,β鏈上有“—GAATTC—”堿基識別序列,與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)粒”載體進(jìn)行雙切,再用DNA連接酶將其與目的基因拼接,構(gòu)建基因表達(dá)載體。基因表達(dá)載體的組成包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動子、終止子、復(fù)制原點等。(3)根據(jù)第(2)題可知,基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因,因此一定溫度下,與經(jīng)過Ca2+處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基,可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌。(4)基因表達(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì),一段時間后,為確定PD-1基因是否表達(dá),可以檢測細(xì)胞膜表面是否具有PD-1基因表達(dá)的PD-1蛋白。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能,可采用抗原—抗體雜交技術(shù),即從裂解293T細(xì)胞中,提取PD-1蛋白看能否與PDL-1發(fā)生結(jié)合,從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。為了增加實驗的可信度,還需要設(shè)置對照實驗,只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞,因為不含PD-1基因,所以“PD-1與PDL-1信號通路”不會阻斷?!军c睛】題考查基因工程的相關(guān)知識,要求考生識記基因工程的概念、原理及操作步驟,掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié),能結(jié)合所學(xué)的知識在新的情景材料下分析運用。11、細(xì)胞膜控制物質(zhì)進(jìn)出的作用是相對的效應(yīng)T
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