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PAGEPAGE1微生物的利用1.(2024江蘇單科,25,3分)漆酶屬于木質(zhì)素降解酶類,在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。下圖是分別、純化和保存漆酶菌株的過程,相關(guān)敘述正確的是(多選)()A.生活污水中含有大量微生物,是分別產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品B.篩選培育基中須要加入漆酶的底物,通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落C.在涂布平板上長出的菌落,再通過劃線進一步純化D.斜面培育基中含有大量養(yǎng)分物,可在常溫下長期保存菌株答案BC產(chǎn)漆酶的微生物主要生活在木質(zhì)素含量較高的環(huán)境中,生活污水中含有大量的微生物,不是分別產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品;篩選產(chǎn)漆酶微生物的培育基中應(yīng)加入木質(zhì)素等漆酶降解的底物,因不同菌種的菌落特征不同,故可通過菌落特征選擇產(chǎn)漆酶的菌落;圖示顯示,通過涂布平板法進行初步篩選,再通過平板劃線法進一步純化;微生物長期保存應(yīng)用甘油管藏法,保存溫度為-20℃。2.如圖為通過DNA分子雜交鑒定含有某特定DNA的細菌克隆示意圖。下列敘述正確的是()A.依據(jù)培育皿中菌落數(shù)可以精確計算樣品中含有的活菌實際數(shù)目B.外源DNA必需位于重組質(zhì)粒的啟動子和終止子之間才能進行復(fù)制C.重組質(zhì)粒與探針能進行分子雜交是因為DNA分子脫氧核糖和磷酸交替連接D.放射自顯影結(jié)果可以顯示原培育皿中含有特定DNA的細菌菌落位置答案D本題主要考查微生物的計數(shù)和DNA分子雜交等相關(guān)學(xué)問。依據(jù)培育皿中菌落數(shù)只能估算樣品中含有的活菌數(shù)目;外源DNA必需位于重組質(zhì)粒的啟動子和終止子之間才能夠進行轉(zhuǎn)錄;重組質(zhì)粒與探針因堿基互補配對能進行分子雜交;用放射性標記的DNA探針與特定DNA分子雜交后,洗去未結(jié)合的探針,放射自顯影結(jié)果可以顯示原培育皿中含特定DNA的細菌菌落位置。3.一般酵母菌干脆利用淀粉的實力很弱,有人將地衣芽孢桿菌的α-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中,經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種(過程如圖甲所示)。圖甲圖乙(1)圖甲中,過程①須要的酶有。為達到篩選目的,平板內(nèi)的固體培育基應(yīng)以作為唯一碳源。②、③過程需重復(fù)幾次,目的是。

(2)某同學(xué)嘗試過程③的操作,其中一個平板經(jīng)培育后的菌落分布如圖乙所示。該同學(xué)的接種方法是;推想該同學(xué)接種時可能的操作失誤是。

(3)以淀粉為原料,用工程酵母菌和一般酵母菌在相同的相宜條件下密閉發(fā)酵,接種菌的發(fā)酵罐須要先排氣,其緣由是。

(4)用凝膠色譜法分別α-淀粉酶時,在色譜柱中移動速度較慢的蛋白質(zhì),相對分子質(zhì)量較。

答案(1)限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶淀粉進一步篩選純化獲得分解淀粉實力強的酵母菌(2)涂布分別法涂布不勻稱(3)工程酵母工程酵母菌分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的實力強,導(dǎo)致乙醇發(fā)酵產(chǎn)生CO2的速率更快(4)小解析本題考查生物技術(shù)實踐與基因工程在生產(chǎn)生活中的應(yīng)用。(1)構(gòu)建基因表達載體時需限制酶和DNA連接酶。為篩選可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種,平板內(nèi)的固體培育基應(yīng)以淀粉作為唯一碳源。②、③過程需重復(fù)幾次,目的是進一步篩選純化獲得分解淀粉實力強的酵母菌。(2)分析圖乙平板中經(jīng)培育后的菌落分布狀況可知,菌落分布不勻稱,此現(xiàn)象可能是該同學(xué)涂布不勻稱所致。(3)工程酵母菌與一般酵母菌相比,干脆利用淀粉的實力強,分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的實力強,從而使乙醇發(fā)酵產(chǎn)生CO2的速率更快,因此培育工程酵母菌的發(fā)酵罐須要先排氣。(4)凝膠色譜法是依據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分別蛋白質(zhì)的有效方法,相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部的通道,移動速度較快。而相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)能進入凝膠內(nèi)部,移動路徑較長,移動速度也較慢。4.胡蘿卜素是一種常用的食用色素,可分別從胡蘿卜或產(chǎn)胡蘿卜素的微生物菌體中提取獲得,流程如下:(1)篩選產(chǎn)胡蘿卜素的酵母菌R時,可選用或劃線分別法接種。采納平板劃線法接種時需先灼燒接種環(huán),其目的是。

(2)培育酵母菌R時,培育基中的蔗糖和硝酸鹽可分別為酵母菌R的生長供應(yīng)和。

(3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時,干燥過程應(yīng)限制好溫度和以防止胡蘿卜素分解;萃取過程中宜采納

方式加熱以防止溫度過高;萃取液濃縮前需進行過濾,其目的是。

(4)紙層析法可用于鑒定所提取的胡蘿卜素,鑒定過程中需用胡蘿卜素標準品作為。

答案(1)涂布分別法滅菌(或防止雜菌污染)(2)碳源氮源(3)時間水浴濾去不溶物(4)(試驗)比照解析(1)微生物分別和培育中常用的接種方法是劃線分別法和涂布分別法。微生物培育須要無菌操作,其中對接種針需進行灼燒滅菌處理。(2)蔗糖和硝酸鹽可分別為微生物的生長供應(yīng)碳源和氮源。(3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時,干燥過程中若溫度過高、干燥時間太長會導(dǎo)致胡蘿卜素分解;萃取過程應(yīng)避開明火加熱,宜采納水浴方式加熱,以防止溫度過高;萃取液在濃縮之前,還要進行過濾,以除去萃取液中的不溶物。(4)利用紙層析法鑒定所提取的胡蘿卜素時,需用胡蘿卜素標準樣品作比照,對比分析標準樣品和萃取樣品出現(xiàn)的層析帶。5.從土壤中分別以尿素為氮源的細菌,試驗過程如圖所示。(1)圖中物質(zhì)A為,若要統(tǒng)計每克土壤樣品中以尿素為氮源的細菌的活菌數(shù)目,宜采納法接種到尿素培育基上,比照組配制的培育基為培育基,若用同濃度的土壤稀釋液接種,試驗組培育皿中菌落數(shù)(大于、等于或小于)比照組。在能利用尿素的細菌菌落四周,有紅色環(huán)帶出現(xiàn)的緣由是。

(2)下列對尿素溶液進行滅菌的最適方法是滅菌。()

A.高壓蒸汽 B.紫外燈照耀C.70%酒精浸泡 D.過濾(3)下列培育基中,能分別出分解尿素的細菌的是()A.葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖、水B.葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖、水、尿素C.NaCl、瓊脂糖、水、蛋白胨、酵母提取物、尿素D.葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖、水、蛋白胨、酵母提取物(4)欲將分別得到的以尿素為氮源的細菌進行擴大培育,應(yīng)運用培育基。

答案(1)無菌水涂布分別LB全養(yǎng)分小于能利用尿素的細菌產(chǎn)生的脲酶,將培育基中的尿素分解,產(chǎn)生的氨使指示劑呈紅色(2)D(3)B(4)LB液體解析(1)圖中物質(zhì)A為無菌水,要統(tǒng)計土壤中活菌的數(shù)目一般用涂布分別法。在能利用尿素的細菌菌落四周常會有紅色環(huán)帶出現(xiàn),其緣由是能利用尿素的細菌產(chǎn)生的脲酶將培育基中的尿素分解,產(chǎn)生的氨使指示劑變紅。(2)對尿素溶液進行滅菌的方法是過濾。(3)以尿素為唯一氮源的培育基能分別出分解尿素的細菌。(4)欲將分別得到的以尿素為氮源的細菌進行擴大培育,應(yīng)運用LB液體培育基。6.微生物與我們生活健康有著親密的聯(lián)系,請回答下列問題。(1)試驗室常用的滅菌方法為,假如試驗器材不能遇水,則用。

(2)微生物的分別提純方法主要有和法。

(3)培育微生物的培育基依據(jù)用途不同,物理性質(zhì)有所差異。擴大培育一般用培育基,分別菌種用培育基。它們在物理性質(zhì)上不同的主要緣由是。

(4)某些微生物能利用尿素是因為它們能合成和分泌。其分解尿素的方程式為:。

答案(1)高壓蒸汽滅菌干熱滅菌(2)劃線分別法涂布分別(3)液體固體是否含有瓊脂(4)脲酶(NH2)2C=O+H2O2NH3+CO2解析(1)試驗室

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