高考生物二輪復(fù)習(xí)高頻考點(diǎn)解密 解密19 基因工程分層訓(xùn)練（原版卷）

解密19基因工程（分層訓(xùn)練）A組基礎(chǔ)練第I卷（選擇題）一、單選題1．（2022秋·廣東·高三校聯(lián)考階段練習(xí)）通過(guò)咽拭子取樣進(jìn)行RT-PCR技術(shù)檢測(cè)是目前臨床上診斷新型冠狀病毒感染疑似患者的常用方法，用于核酸檢測(cè)的RT-PCR試劑盒的部分工作原理簡(jiǎn)圖如下。下列說(shuō)法正確的是（

）A．將新冠病毒在瓊脂培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，然后通過(guò)滅活和純化，制成滅活疫苗B．用于新冠病毒的PCR技術(shù)，與擴(kuò)增Bt毒蛋白基因的過(guò)程完全相同C．PCR技術(shù)擴(kuò)增獲得的產(chǎn)物，可采用抗原——抗體雜交的方法進(jìn)行鑒定D．RT-PCR是指以病毒的RNA為模板合成cDNA，并對(duì)cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增的過(guò)程2．（2022秋·廣東·高三校聯(lián)考階段練習(xí)）大腸桿菌乳糖操縱子包括lacZ、lacY、lacA三個(gè)結(jié)構(gòu)基因（編碼參與乳糖代謝的酶，其中酶a能夠水解乳糖），以及操縱基因、啟動(dòng)子和調(diào)節(jié)基因。培養(yǎng)基中無(wú)乳糖存在時(shí)，調(diào)節(jié)基因表達(dá)的阻遏蛋白和操縱基因結(jié)合，導(dǎo)致RNA聚合酶不能與啟動(dòng)子結(jié)合，使結(jié)構(gòu)基因無(wú)法轉(zhuǎn)錄；乳糖存在時(shí)，結(jié)構(gòu)基因才能正常表達(dá)，調(diào)節(jié)過(guò)程如下圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（

）A．結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄時(shí)，只能以β鏈為模板，表達(dá)出來(lái)的酶a會(huì)使結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)受到抑制B．過(guò)程①的堿基配對(duì)方式與②過(guò)程不完全相同，參與②過(guò)程的氨基酸都可被多種tRNA轉(zhuǎn)運(yùn)C．若調(diào)節(jié)基因的堿基被甲基化修飾，可能導(dǎo)致結(jié)構(gòu)基因持續(xù)表達(dá)，造成大腸桿菌物質(zhì)和能量的浪費(fèi)D．據(jù)圖可知，乳糖能夠調(diào)節(jié)大腸桿菌中基因的選擇性表達(dá)，沒(méi)有發(fā)生細(xì)胞的分化3．（2019秋·天津?qū)幒印じ呷旖蚴袑幒訁^(qū)蘆臺(tái)第一中學(xué)?？茧A段練習(xí)）以下為形成cDNA過(guò)程和PCR擴(kuò)增過(guò)程示意圖。據(jù)圖分析，下列說(shuō)法正確的是（

）A．催化①過(guò)程的酶是RNA聚合酶B．④過(guò)程發(fā)生的變化是引物與單鏈DNA結(jié)合C．催化②⑤過(guò)程的酶都是DNA聚合酶，都能催化形成氫鍵D．從骨骼肌細(xì)胞提取的RNA構(gòu)建的cDNA經(jīng)PCR過(guò)程可以獲得胰島素基因4．（2021春·河北唐山·高二開灤第二中學(xué)?？茧A段練習(xí)）草甘膦是一種低毒性的廣譜除草劑，能非特異性侵入并殺死所有的植物，其除草機(jī)制是抑制植物體內(nèi)EPSPS酶的合成，最終導(dǎo)致植物死亡?？茖W(xué)家從一種抗草甘膦的大腸桿菌突變株中分離出EPSPS基因（控制EPSPS合成酶合成的基因）轉(zhuǎn)入小麥，以提高其對(duì)草甘膦的耐受性。下列有關(guān)敘述正確的是（

）A．必須將EPSPS基因轉(zhuǎn)入小麥的受精卵，以便獲得對(duì)草甘膦耐受性高的小麥B．可用抗原-抗體雜交的方法檢測(cè)細(xì)胞中是否有EPSPS基因的表達(dá)產(chǎn)物C．要篩選出含EPSPS基因的突變菌株，應(yīng)在培養(yǎng)基中加入EPSPS酶D．EPSPS基因?qū)胄←溔~肉細(xì)胞的葉綠體后，該性狀可隨傳粉過(guò)程遺傳5．（2021春·河北唐山·高二開灤第二中學(xué)校考階段練習(xí)）某研究所的研究人員將生長(zhǎng)激素基因通過(guò)質(zhì)粒介導(dǎo)進(jìn)入大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)，來(lái)表達(dá)產(chǎn)生生長(zhǎng)激素。已知質(zhì)粒中存在兩個(gè)抗性基因：A是抗鏈霉素基因，B是抗氨芐青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大腸桿菌不帶有任何抗性基因。下列敘述正確的是（

）A．導(dǎo)入大腸桿菌的質(zhì)粒一定為重組質(zhì)粒B．研究過(guò)程需要使用限制酶、DNA連接酶和運(yùn)載體這些專門的工具酶C．可用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基檢測(cè)大腸桿菌中是否導(dǎo)入了重組質(zhì)粒D．在含鏈霉素培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)的可能是符合生產(chǎn)要求的大腸桿菌6．（2023秋·北京東城·高三統(tǒng)考期末）人凝血酶Ⅲ是一種分泌蛋白，可預(yù)防和治療急慢性血栓。重組人凝血酶Ⅲ是世界上首個(gè)上市的動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)的重組蛋白藥物。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．可從人細(xì)胞中提取RNA后利用逆轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)獲取目的基因B．目的基因的上游需連接在乳腺細(xì)胞中特異表達(dá)基因的啟動(dòng)子C．用顯微注射技術(shù)將表達(dá)載體導(dǎo)入乳腺細(xì)胞來(lái)獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物D．若用大腸桿菌作為受體細(xì)胞難以獲得活性高的人凝血酶Ⅲ7．（2022秋·福建廈門·高三廈門一中?？茧A段練習(xí)）研究人員用EcoRI和Smal兩種限制酶處理某DNA分子，圖1為EcoRI切割該DNA分子后的結(jié)果；圖2是酶切后的凝膠電泳圖譜，其中1號(hào)泳道是DNAMarker，2號(hào)、3號(hào)、4號(hào)分別是EcoRI單獨(dú)處理、Smal單獨(dú)處理、兩種酶共同處理后的電泳結(jié)果。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．據(jù)圖1可知EcoRI的識(shí)別序列為—GAATTC—，切割位點(diǎn)在G和A之間B．據(jù)圖2可知瓊脂糖凝膠的加樣孔在B端，且連著電泳槽的負(fù)極C．據(jù)圖2可知該DNA分子最可能是含1000個(gè)堿基對(duì)的環(huán)狀DNAD．據(jù)圖2可知該DNA分子中兩種限制酶的酶切位點(diǎn)各有一個(gè)8．（2022·浙江·模擬預(yù)測(cè)）如圖是培育抗除草劑玉米的技術(shù)路線圖，含有內(nèi)含子的報(bào)告基因只能在真核生物中正確表達(dá)，其產(chǎn)物能催化無(wú)色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。轉(zhuǎn)化過(guò)程中愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌，會(huì)導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化的愈傷組織可能在含除草劑的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．過(guò)程①中除草劑抗性基因插入T－DNA中，導(dǎo)致T－DNA片段失活B．過(guò)程②用Ca2＋處理使農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性改變，成為感受態(tài)細(xì)胞C．檢測(cè)是否轉(zhuǎn)化成功，過(guò)程③應(yīng)在培養(yǎng)基中加入除草劑和物質(zhì)KD．轉(zhuǎn)化過(guò)程中未轉(zhuǎn)化的愈傷組織可能在含除草劑的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)是因?yàn)榛蚱?．（2023秋·天津·高三天津市咸水沽第一中學(xué)?？计谀┫铝嘘P(guān)于變異與育種的敘述，正確的是（）A．基因工程育種能夠產(chǎn)生新的基因，定向改造生物的性狀B．與正常植株相比，單倍體植株常常表現(xiàn)為莖桿弱小，果實(shí)和種子等也都比較小C．雜交育種的目的不一定是獲得具有優(yōu)良性狀的純合子D．以種子為繁殖對(duì)象的植物，誘變處理后必須經(jīng)多次自交、選擇才能用于生產(chǎn)10．（2021·天津?qū)幒印ぬ旖蚴袑幒訁^(qū)蘆臺(tái)第一中學(xué)校考一模）下列關(guān)于生物學(xué)中常見的幾種酶的敘述，正確的是（）A．DNA連接酶將目的基因的黏性末端與載體的黏性末端之間的堿基黏合B．用限制性核酸內(nèi)切酶從質(zhì)粒上切下一個(gè)目的基因需破壞4個(gè)磷酸二酯鍵C．Taq酶是PCR儀擴(kuò)增DNA分子時(shí)常用的一種耐高溫的DNA連接酶D．在解離根尖分生區(qū)細(xì)胞時(shí)加入纖維素酶有利于提高解離的效果11．（2023·浙江·統(tǒng)考一模）PCR擴(kuò)增得到的P基因經(jīng)酶切連接插入載體后，與編碼FLAG的序列形成一個(gè)融合基因，如圖甲所示，下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．其中“ATGTGCA”為P基因編碼鏈起始序列。將該重組載體導(dǎo)入細(xì)胞后，融合基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA序列出現(xiàn)了錯(cuò)誤B．據(jù)圖甲分析其中翻譯出的融合蛋白中FLAG的氨基酸序列正確，但P基因?qū)?yīng)的氨基酸序列與P可能不同C．運(yùn)用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ切割啟動(dòng)子可以識(shí)別P基因的序列D．通過(guò)PCR技術(shù)一定程度上可以解決融合基因出現(xiàn)排斥的反應(yīng)12．（2023·浙江·統(tǒng)考一模）生長(zhǎng)激素是醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)及生物實(shí)驗(yàn)中常用的重要物質(zhì)，最初生長(zhǎng)激素是從牛和豬腦垂體中提取出來(lái)的，但副作用過(guò)多。而化學(xué)合成的方法效率較低，沒(méi)有實(shí)用價(jià)值，因此，采用基因工程方法大規(guī)模生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素是滿足臨床大量需求的重要手段。該過(guò)程所用的質(zhì)粒A與含生長(zhǎng)激素基因的DNA上相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)分別如圖1、圖2所示，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）（限制性核酸內(nèi)切酶BamHl、BclI、Sau3AI、HindⅢ，它們識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT）A．圖1的質(zhì)粒與目的基因結(jié)合后不可直接導(dǎo)入受體細(xì)胞B．BamHI酶和BclI酶切的DNA末端連接，連接部位用酶Sau3AI一定能用切開C．用Sau3AI切圖1所示的質(zhì)粒A得到DNA片段對(duì)RNA聚合酶有一定的親和力D．生長(zhǎng)激素基因也可以嵌入羊基因組的任何位置，以得到轉(zhuǎn)基因羊并對(duì)生長(zhǎng)激素進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)13．（2022春·廣東潮州·高二饒平縣第二中學(xué)?？计谥校┥锛夹g(shù)安全性和倫理問(wèn)題是社會(huì)關(guān)注的熱點(diǎn)，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．種植抗蟲棉可減少農(nóng)藥的使用量，不存在安全性問(wèn)題B．外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機(jī)的，有可能會(huì)出現(xiàn)意想不到的后果C．克隆技術(shù)還不成熟，與社會(huì)倫理有嚴(yán)重沖突，應(yīng)研究治療性克隆而禁止生殖性克隆人D．若有人以病毒作為生物武器，帶來(lái)的危害將難以預(yù)估14．（2018春·湖南邵陽(yáng)·高一統(tǒng)考期末）下列有關(guān)轉(zhuǎn)基因食品的說(shuō)法，正確的是（

）A．轉(zhuǎn)基因食品絕對(duì)安全，可放心食用B．轉(zhuǎn)基因食品絕對(duì)不安全，應(yīng)該全面禁止C．轉(zhuǎn)基因食品可以治療各種疾病D．轉(zhuǎn)基因食品進(jìn)入市場(chǎng)必須經(jīng)過(guò)相關(guān)部門檢測(cè)和批準(zhǔn)15．（2022春·重慶·高二校聯(lián)考期末）生物技術(shù)的進(jìn)步在給人類帶來(lái)福祉的同時(shí)，也引起了人們對(duì)它的安全性的關(guān)注，以及倫理道德的碰撞，帶來(lái)新的困惑和挑戰(zhàn)。下列符合我國(guó)政策的是（

）A．鼓勵(lì)發(fā)展利用基因編輯技術(shù)設(shè)計(jì)試管嬰兒用以解決不孕夫婦的生殖問(wèn)題B．不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)，但鼓勵(lì)用于醫(yī)學(xué)研究和治療的治療性克隆，可放寬監(jiān)控和審查C．如果轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物的外源基因來(lái)自于自然界原來(lái)已經(jīng)存在的生物體內(nèi)，則進(jìn)行銷售時(shí)無(wú)需直接標(biāo)注“轉(zhuǎn)基因××”D．在任何情況下均不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器，反對(duì)對(duì)生物武器和設(shè)備的擴(kuò)散，應(yīng)全面禁止和徹底銷毀生物武器二、多選題16．（2022秋·江蘇鎮(zhèn)江·高三江蘇省鎮(zhèn)江第一中學(xué)校聯(lián)考階段練習(xí)）如圖為DNasel（一種消化DNA的內(nèi)切核酸酶）足跡法示意圖，該方法可鑒別RNA聚合酶等蛋白質(zhì)在DNA上的結(jié)合位點(diǎn)，下列有關(guān)敘述正確的是（

）A．DNasel作用于DNA的氫鍵和磷酸二酯鍵B．加入的蛋白質(zhì)可保護(hù)相應(yīng)DNA序列不受DNasel攻擊C．圖中①處的空白區(qū)域是蛋白質(zhì)與DNA結(jié)合后留下的“足跡”D．該方法可找到與特異性DNA結(jié)合的目標(biāo)蛋白且能確定目標(biāo)蛋白結(jié)合的堿基17．（2021秋·山東青島·高二青島二中校考期末）下圖是利用基因工程培有抗蟲植物的示意圖。下列相關(guān)敘述，正確的是（

）A．切割T質(zhì)粒的限制酶均特異性地識(shí)別6個(gè)或4個(gè)核苷酸序列B．③侵染植物細(xì)胞后，T-DNA整合到④的染色體DNA上C．獲得基因表達(dá)載體的過(guò)程中，至少需要限制酶斷開6個(gè)、DNA連接酶連接4個(gè)磷酸二酯鍵D．⑤只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了定向的可遺傳變異18．（2022春·河北滄州·高二任丘市第一中學(xué)校考期末）CRISPR/Cas9是一種生物學(xué)工具，能夠通過(guò)“剪切和粘貼”脫氧核糖核酸（DNA）序列的機(jī)制來(lái)編輯基因組。這套系統(tǒng)源自細(xì)菌的防御機(jī)制，是一種對(duì)任何生物基因組均有效的基因編輯工具。CRISPR?Cas9基因組編輯系統(tǒng)由向?qū)NA（也叫sgRNA）和Cas9蛋白組成，向?qū)NA識(shí)別并結(jié)合靶基因DNA，Cas9蛋白切斷雙鏈DNA形成兩個(gè)末端。這兩個(gè)末端通過(guò)“斷裂修復(fù)”重新連接時(shí)通常會(huì)有個(gè)別堿基對(duì)的插入或缺失，從而實(shí)現(xiàn)基因敲除，如圖所示。CRISPR?Cas9基因組編輯技術(shù)有時(shí)存在編輯出錯(cuò)而造成脫靶。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．Cas9蛋白相當(dāng)于限制酶，能作用于脫氧核糖和堿基之間的化學(xué)鍵B．對(duì)不同目標(biāo)DNA進(jìn)行編輯時(shí)，使用Cas9蛋白和不同的sgRNA進(jìn)行基因編輯C．CRISPR?Cas9基因組編輯系統(tǒng)使細(xì)菌獲得抵抗溶菌酶或抗生素的能力D．其他DNA序列含有與sgRNA互補(bǔ)配對(duì)的序列，造成sgRNA錯(cuò)誤結(jié)合而脫靶19．（2022秋·江蘇南京·高三?？计谥校┲亟M腺病毒載體疫苗是通過(guò)將腺病毒中與復(fù)制相關(guān)的基因剔除，替換為目標(biāo)病毒的抗原蛋白基因而研發(fā)的疫苗。圖為其結(jié)構(gòu)示意圖。下列敘述正確的是（

）A．腺病毒載體疫苗構(gòu)建過(guò)程中利用了限制酶和DNA連接酶B．抗原蛋白基因不屬于抗原，不能直接引起機(jī)體免疫反應(yīng)C．注射疫苗后，機(jī)體可產(chǎn)生與纖突蛋白特異性結(jié)合的抗體D．需要采用完全培養(yǎng)基培養(yǎng)重組后的病毒以大規(guī)模生產(chǎn)疫苗20．（2022·浙江杭州·浙江省杭州第二中學(xué)校聯(lián)考模擬預(yù)測(cè)）治療性克隆的做法是先從需要救治的患者身上提取細(xì)胞，然后將該細(xì)胞的遺傳物質(zhì)植入一個(gè)去除了細(xì)胞核的卵細(xì)胞中，該卵細(xì)胞開始自行分裂，直至形成一個(gè)早期胚胎，從早期胚胎中提取胚胎干細(xì)胞后將其培養(yǎng)成人們所需要的各種人體器官。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是（

）A．可采用開放式培養(yǎng)的方式，置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞B．該早期胚胎發(fā)育始于受精卵，胚胎是由囊胚內(nèi)部的細(xì)胞團(tuán)不斷增殖分化而來(lái)C．治療性克隆中運(yùn)用胚胎移植技術(shù)，一般不選擇原腸胚進(jìn)行胚胎移植D．我國(guó)不贊成、不允許、不支持、不接受任何克隆性實(shí)驗(yàn)第II卷（非選擇題）三、綜合題21．（2022秋·湖南株洲·高三校聯(lián)考階段練習(xí)）磷脂酰絲氨酸（PS）是一種廣泛應(yīng)用于治療腦萎縮、老年癡呆癥等疾病的磷脂。自然界中PS的含量極少，生物體內(nèi)的PS可在磷脂酶D（PLD）的催化下生成，但PLD活性較低。如圖所示，研究人員將改造后的PLD基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞中，成功生產(chǎn)出高活性的PLD。其中EcoRV、BamHI、SmaI、NindII均為限制酶。回答下列問(wèn)題。(1)為了獲得高活性PLD，需要先設(shè)計(jì)預(yù)期的____________，推測(cè)其應(yīng)有的____________序列，再通過(guò)改造或合成新的PLD基因，最終才能獲得所需要的PLD。(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要用到的兩種限制酶是____________，不選擇另外兩種限制酶的原因是____________。為了檢測(cè)是否表達(dá)出高活性PLD，應(yīng)從成功導(dǎo)入PLD基因的菌株中提取蛋白質(zhì)，用____________方法檢測(cè)。(3)研究人員發(fā)現(xiàn)，將PLD的第209號(hào)氨基酸改為色氨酸，或?qū)⒌?24號(hào)氨基酸改為苯丙氨酸，或同時(shí)改變這2個(gè)氨基酸，PLD的活性會(huì)大大提高。若要改變氨基酸，需要先用基因的定點(diǎn)突變技術(shù)對(duì)PLD基因進(jìn)行____________。(4)該科研小組成功生產(chǎn)出三種高活性PLD:已知PLD可催化磷脂酰膽堿和L-絲氨酸反應(yīng)生成PS。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)比較三種高活性PLD的活性高低，簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)思路________________________。22．（2023年1月浙江省普通高校招生選考科目考試生物試題）甲植物細(xì)胞核基因具有耐鹽堿效應(yīng)，乙植物細(xì)胞質(zhì)基因具有高產(chǎn)效應(yīng)。某研究小組用甲、乙兩種植物細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交相關(guān)研究，基本過(guò)程包括獲取原生質(zhì)體、誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合、篩選融合細(xì)胞、雜種植株再生和鑒定，最終獲得高產(chǎn)耐鹽堿再生植株?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)根據(jù)研究目標(biāo)，在甲、乙兩種植物細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交前，應(yīng)檢驗(yàn)兩種植物的原生質(zhì)體是否具備__________的能力。為了便于觀察細(xì)胞融合的狀況，通常用不同顏色的原生質(zhì)體進(jìn)行融合，若甲植物原生質(zhì)體采用幼苗的根為外植體，則乙植物可用幼苗的__________為外植體。(2)植物細(xì)胞壁的主要成分為__________和果膠，在獲取原生質(zhì)體時(shí)，常采用相應(yīng)的酶進(jìn)行去壁處理。在原生質(zhì)體融合前，需對(duì)原生質(zhì)體進(jìn)行處理，分別使甲原生質(zhì)體和乙原生質(zhì)體的__________失活。對(duì)處理后的原生質(zhì)體在顯微鏡下用__________計(jì)數(shù)，確定原生質(zhì)體密度。兩種原生質(zhì)體1∶1混合后，通過(guò)添加適宜濃度的PEG進(jìn)行融合；一定時(shí)間后，加入過(guò)量的培養(yǎng)基進(jìn)行稀釋，稀釋的目的是__________。(3)將融合原生質(zhì)體懸浮液和液態(tài)的瓊脂糖混合，在凝固前倒入培養(yǎng)皿，融合原生質(zhì)體分散固定在平板中，并獨(dú)立生長(zhǎng)、分裂形成愈傷組織。同一塊愈傷組織所有細(xì)胞源于__________。下列各項(xiàng)中能說(shuō)明這些愈傷組織只能來(lái)自于雜種細(xì)胞的理由是哪幾項(xiàng)？__________A．甲、乙原生質(zhì)體經(jīng)處理后失活，無(wú)法正常生長(zhǎng)、分裂B．同種融合的原生質(zhì)體因甲或乙原生質(zhì)體失活而不能生長(zhǎng)、分裂C．培養(yǎng)基含有抑制物質(zhì)，只有雜種細(xì)胞才能正常生長(zhǎng)、分裂D．雜種細(xì)胞由于結(jié)構(gòu)和功能完整可以生長(zhǎng)、分裂(4)愈傷組織經(jīng)__________可形成胚狀體或芽。胚狀體能長(zhǎng)出__________，直接發(fā)育形成再生植株。(5)用PCR技術(shù)鑒定再生植株。已知甲植物細(xì)胞核具有特異性DNA序列a，乙植物細(xì)胞質(zhì)具有特異性DNA序列b；M1、M2為序列a的特異性引物，N1、N2為序列b的特異性引物。完善實(shí)驗(yàn)思路：Ⅰ．提取純化再生植株的總DNA，作為PCR擴(kuò)增的__________。Ⅱ．將DNA提取物加入PCR反應(yīng)體系，__________為特異性引物，擴(kuò)增序列a；用同樣的方法擴(kuò)增序列b。Ⅲ．得到的2個(gè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)__________后，若每個(gè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物在凝膠中均出現(xiàn)了預(yù)期的__________個(gè)條帶，則可初步確定再生植株來(lái)自于雜種細(xì)胞。23．（2022秋·江蘇徐州·高三統(tǒng)考期末）某品系棉花的光籽(無(wú)絨)和毛籽(有絨)是一對(duì)相對(duì)性狀，其長(zhǎng)(zhǎng)絨機(jī)理如下圖(基因A、B、D

位于三對(duì)同源染色體上)，研究人員利用光籽棉的不同突變體與野生型毛籽棉進(jìn)行雜交，F(xiàn)1自交，F(xiàn)2結(jié)果如下表。請(qǐng)回答問(wèn)題：組別親本F1表現(xiàn)型F2表現(xiàn)型及比例①突變體甲×毛籽棉毛籽光籽：毛籽=7：9②突變體乙×毛籽棉光籽光籽：毛籽=13：3③突變體丙×毛籽棉光籽光籽：毛籽=3：1(1)野生型毛籽棉的基因型是_______，光籽棉的基因型有_______種。(2)①組中，突變體甲的基因型是_______，F(xiàn)2毛籽棉中與F1毛籽棉基因型相同的概率是_______。(3)②組中，突變體乙的基因型可能有_______種，F(xiàn)2光籽棉中與F1光籽棉基因型相同的概率是_______。(4)③組中，突變體丙的基因型是_______。①組F2光籽棉中與③組F2光籽棉基因型相同的概率是_______。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，8號(hào)染色體的~880kb至~903kb區(qū)間與突變體丙的光籽表型相關(guān)。根據(jù)野生型毛籽棉的該區(qū)間設(shè)計(jì)引物，提取突變體丙和野生型的DNA進(jìn)行PCR，產(chǎn)物擴(kuò)增結(jié)果如下圖。據(jù)圖分析突變體丙出現(xiàn)光籽的根本原因是_______

。24．（2022秋·北京大興·高三統(tǒng)考期末）蚊蟲分布范圍廣，生物量大，其中的雌蚊會(huì)叮咬人類，可傳播多種傳染病，須采取防控措施防止傳病蚊種泛濫。研究者利用CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)和同源重組修復(fù)技術(shù)提高蚊蟲群體中雄蚊比例。(1)CRISPR/Cas9系統(tǒng)可以實(shí)現(xiàn)對(duì)雙鏈DNA的精確切割，由三部分組成：crRNA、tracrRNA及Cas9蛋白，如圖1。crRNA會(huì)與tracrRNA結(jié)合形成sgRNA，sgRNA通過(guò)__________與目標(biāo)DNA結(jié)合，引導(dǎo)Cas9蛋白對(duì)DNA進(jìn)行切割，導(dǎo)致其斷裂。(2)同源重組修復(fù)是一種高保真的DNA雙鏈斷裂、修復(fù)技術(shù)，原理如圖2，其過(guò)程為CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)切割使DNA斷裂后，啟動(dòng)同源修復(fù)，使得染色體DNA上的靶向序列被替換成所需序列。①現(xiàn)需構(gòu)建基因表達(dá)載體，請(qǐng)結(jié)合圖2選出目的基因中必要的結(jié)構(gòu)或基因__________。A．限定在體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的啟動(dòng)子B．限定在生殖細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的啟動(dòng)子C．限定在受精卵內(nèi)表達(dá)的啟動(dòng)子D．I-Ppol基因（能夠切割X染色體DNA的核酸酶基因）E.氨芐青霉素抗性基因②通過(guò)____________技術(shù)將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵，該受精卵發(fā)育成_____________性蚊蟲。Cas9蛋白將對(duì)應(yīng)的靶向序列進(jìn)行切割，以基因表達(dá)載體中同源序列間的DNA為模板進(jìn)行修復(fù)，最終實(shí)現(xiàn)子代都繼承相應(yīng)基因，使群體中雄蚊比例升高。(3)除利用轉(zhuǎn)基因滅蚊之外，還存在寄生菌滅蚊技術(shù)，當(dāng)雄蚊被沃爾巴克菌感染后，精子會(huì)被細(xì)菌產(chǎn)生的毒素污染。健康雌蚊的卵細(xì)胞與這些“毒精子”相遇后，產(chǎn)生細(xì)胞質(zhì)不相容效應(yīng)，導(dǎo)致后代無(wú)法正常發(fā)育。相對(duì)于寄生菌滅蚊，利用轉(zhuǎn)基因滅蚊的優(yōu)勢(shì)有_____________（答出兩點(diǎn)）。(4)目前我國(guó)尚不允許釋放轉(zhuǎn)基因蚊蟲，請(qǐng)解釋原因___________。25．（2022春·吉林·高二?？计谥校┥锕こ碳夹g(shù)在農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)、醫(yī)藥衛(wèi)生等領(lǐng)域有廣泛的用途。請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題。(1)我國(guó)體細(xì)胞克隆猴“中中”和“華華”的誕生再次說(shuō)明了_____具有全能性。植物組織培養(yǎng)的全過(guò)程，證明了植物體細(xì)胞具有全能性。所謂全能性是指細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后，仍具有產(chǎn)生___或分化成其他各種細(xì)胞的_____。(2)利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)制造的人工種子具有天然種子不可比擬的特點(diǎn)，人工種子具有的優(yōu)點(diǎn)：能保持優(yōu)良品種的_____，生產(chǎn)上不受季節(jié)、氣候和地域限制，方便_____等。(3)動(dòng)物細(xì)胞融合和植物原生質(zhì)體融合的原理都是_____，不同的是誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)常用的方法是用_____誘導(dǎo)。(4)許多重要的生物制品，如病毒疫苗、單克隆抗體等，都可以借助動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)來(lái)大規(guī)模生產(chǎn)。

當(dāng)細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸會(huì)發(fā)生接觸抑制，此時(shí)需要用_____處理分散成單個(gè)細(xì)胞，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)液應(yīng)定期更換，以防止_____對(duì)細(xì)胞自身造成危害。(5)生物技術(shù)革命為人類帶來(lái)了巨大的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益，在某些方面對(duì)人們傳統(tǒng)的觀念也造成了巨大的沖擊。以下做法中明顯違背我國(guó)相應(yīng)法律法規(guī)或倫理道德的有_____。①轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品的直接加工品，在產(chǎn)品外包裝中標(biāo)注“加工原料為轉(zhuǎn)基因”標(biāo)識(shí)再上市②為了避免妊娠過(guò)程給自身帶來(lái)影響，選擇用“試管嬰兒”技術(shù)，并找人代孕以得到孩子③在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行冠狀病毒基因改造研究，以備在發(fā)生戰(zhàn)爭(zhēng)時(shí)用于投放他國(guó)④養(yǎng)牛場(chǎng)中運(yùn)用胚胎性別鑒定技術(shù)，篩選雌性胚胎進(jìn)行胚胎移植以擴(kuò)大高產(chǎn)奶牛數(shù)量

解密19基因工程（分層訓(xùn)練）B組提高練第I卷（選擇題）一、單選題1．（2022秋·福建廈門·高三廈門一中?？茧A段練習(xí)）酒精是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的試劑，下列關(guān)于酒精的使用方法不恰當(dāng)?shù)氖牵?/p>

）A．脂肪鑒定實(shí)驗(yàn)中，染色后滴加1-2滴50%的酒精洗去浮色B．光合色素提取和分離實(shí)驗(yàn)中，用95%的酒精加入適量無(wú)水碳酸鈉提取綠葉中的色素C．植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，用75%的酒精對(duì)外植體和操作者雙手進(jìn)行消毒D．DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，用95%的冷酒精溶液溶解DNA2．（2022秋·廣東江門·高三統(tǒng)考階段練習(xí)）視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（RGC）可將視覺(jué)信號(hào)從眼睛傳向大腦。隨著年齡增長(zhǎng)，在DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的作用下，DNA甲基化水平升高，使RGC受損后不可恢復(fù)，視力下降。科學(xué)家把OCT、SOX和KLF三個(gè)基因?qū)氤赡晷∈蟮腞GC，使受損后的RGC能長(zhǎng)出新軸突。下列分析正確的是（

）A．DNA甲基化通過(guò)改變DNA堿基序列影響RGC中基因的表達(dá)，從而使視力下降B．導(dǎo)入基因前要用限制酶、DNA連接酶和耐高溫的DNA聚合酶構(gòu)建基因表達(dá)載體C．OCT、SOX和KLF基因的表達(dá)產(chǎn)物可能提高了DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的活性D．導(dǎo)入OCT、SOX和KLF基因有可能治療因RGC受損而導(dǎo)致的視力下降3．（2022秋·浙江·高三校聯(lián)考期中）下圖表示某轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的構(gòu)建流程圖，下列敘述正確的是（

）A．若擴(kuò)增DNA的引物序列太短，則擴(kuò)增出非目的基因片段的概率將增大B．若將重組DNA分子導(dǎo)入到大腸桿菌細(xì)胞中，一般能直接獲得具有活性的目的基因表達(dá)產(chǎn)物C．若胚胎培養(yǎng)到囊胚階段，進(jìn)行胚胎分割時(shí)可用胰蛋白酶進(jìn)行處理D．胚胎移植時(shí)需對(duì)受體進(jìn)行注射促排卵劑處理，有利于提高胚胎移植成功率4．（2022秋·江蘇淮安·高三校聯(lián)考期中）在基因工程中，常采用花粉管通道法和土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞。下圖為花粉管通道法的一般原理示意圖。相關(guān)敘述正確的是（

）A．外源DNA進(jìn)入胚囊最終獲得的種子均含有目的基因B．植物生長(zhǎng)各個(gè)時(shí)期均可通過(guò)花粉管通道導(dǎo)入外源DNAC．花粉管通道法最大的優(yōu)點(diǎn)是無(wú)需植物組培，技術(shù)簡(jiǎn)單D．含外源DNA的種子發(fā)育成植株后均具有相應(yīng)性狀5．（2022·浙江·模擬預(yù)測(cè)）DNA半不連續(xù)復(fù)制假說(shuō)是指DNA復(fù)制時(shí)，一條子鏈連續(xù)形成，另一條子鏈先形成短片段后再進(jìn)行連接（如圖1）。為驗(yàn)證假說(shuō)，某小組進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：培養(yǎng)T4噬菌體→于不同時(shí)刻分離噬菌體DNA→加熱→離心→檢測(cè)相應(yīng)位置DNA單鏈片段含量，結(jié)果如圖2。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．加熱的目的是使DNA解旋，從而獲取不同時(shí)刻形成的長(zhǎng)短不同的DNA單鏈片段B．與60秒相比，120秒結(jié)果中短鏈片段減少的原因是短鏈片段連接形成長(zhǎng)片段C．若以DNA連接缺陷的噬菌體為材料，則圖2中的曲線峰值將右移D．DNA復(fù)制過(guò)程中需要用到解旋酶、DNA聚合酶和DNA連接酶6．（2022·浙江·模擬預(yù)測(cè)）蛋白質(zhì)工程是當(dāng)前的新興分子生物學(xué)技術(shù)，通過(guò)改造或合成基因，來(lái)改造現(xiàn)有的蛋白質(zhì)或制造新的蛋白質(zhì)，以滿足人類生產(chǎn)、生活的需求。下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說(shuō)法錯(cuò)誤的是（

）A．蛋白質(zhì)工程技術(shù)會(huì)改變組成蛋白質(zhì)的氨基酸的種類、數(shù)目和排列順序B．蛋白質(zhì)工程獲得的蛋白質(zhì)都是自然界已存在的蛋白質(zhì)（天然蛋白質(zhì)）C．蛋白質(zhì)工程不直接改造蛋白質(zhì)的原因是改造基因易于操作且改造后可遺傳D．蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)出來(lái)的蛋白質(zhì)的活性與天然蛋白質(zhì)相似，而且穩(wěn)定性更高7．（2022秋·吉林長(zhǎng)春·高三長(zhǎng)春市第六中學(xué)?？茧A段練習(xí)）下列有關(guān)基因工程的敘述正確的是（）A．限制酶只存在于原核生物中，只能識(shí)別DNA分子的特定核苷酸序列B．只有同種限制酶切割的末端才能連接，不同限制酶切割的末端不能連接C．基因工程中，只能利用天然質(zhì)粒，質(zhì)粒上的標(biāo)記基因用于重組DNA的篩選D．質(zhì)粒是獨(dú)立于擬核DNA和真核細(xì)胞核之外的環(huán)狀雙鏈DNA8．（2022·浙江紹興·統(tǒng)考一模）限制性內(nèi)切核酸酶SalI和XhoI識(shí)別序列與切割位點(diǎn)如下圖1。用SalI切割目的基因兩側(cè)，用XhoⅠ切割載體質(zhì)粒，再用連接酶處理可形成重組質(zhì)粒。實(shí)驗(yàn)者用2種酶單獨(dú)切割或同時(shí)切割普通質(zhì)粒和重組重粒，再將產(chǎn)物電泳分離，其結(jié)果如下圖2。下列敘述正確的是（

）A．SalI切割產(chǎn)生的黏性末端與XhoI切割產(chǎn)生的黏性末端不同B．根據(jù)重組質(zhì)粒的酶切結(jié)果可知有2個(gè)目的基因插入重組質(zhì)粒中C．重組質(zhì)粒上有1個(gè)限制酶SalI和1個(gè)限制酶XhoI的識(shí)別序列D．2種酶切后產(chǎn)生的2kb產(chǎn)物可作為探針篩選含目的基因的受體細(xì)胞9．（2021秋·山東青島·高三青島二中校考期末）實(shí)時(shí)熒光定量PCR簡(jiǎn)稱qPCR，靈敏度高特異性好，是目前檢測(cè)微小殘留病變的常用方法。將熒光標(biāo)記的Taqman探針與待測(cè)樣本DNA混合，當(dāng)探針完整時(shí)，不產(chǎn)生熒光。在PCR過(guò)程中，與目的基因結(jié)合的探針被TaqDNA聚合酶水解，R與Q分離后，R發(fā)出的熒光可被檢測(cè)到在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光（如圖所示），隨著循環(huán)次數(shù)的增加，熒光信號(hào)強(qiáng)度增加，通過(guò)實(shí)時(shí)檢測(cè)熒光信號(hào)強(qiáng)度，可得Ct值（該值與待測(cè)樣本中目的基因的個(gè)數(shù)呈負(fù)相關(guān)）。下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．每個(gè)模板DNA分子含有4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)B．在反應(yīng)過(guò)程中，需要ATP為新鏈的合成提供能量C．做qPCR之前，需要先根據(jù)目的基因的核苷酸序列合成引物和Taqman探針D．熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定的閾值時(shí)，經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少，說(shuō)明含有的病變的概率越小10．（2022秋·山東濟(jì)南·高三統(tǒng)考期中）科學(xué)家利用PCR技術(shù)搭建了世界上第一個(gè)古DNA研究的超凈室，利用現(xiàn)代人的DNA列設(shè)計(jì)并合成了一種類似磁鐵的“引子”，成功將極其微量的古人類DNA從土壤沉積物的多種生物的DNA中識(shí)別并分離出來(lái)，完成一種古人類——尼安德特人的全基因組測(cè)序。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是（

）A．設(shè)計(jì)“引子”的DNA序列信息只能來(lái)自現(xiàn)代人的核DNAB．尼安德特人的雙鏈DNA可直接與“引子”結(jié)合從而被識(shí)別C．PCR檢測(cè)古人類DNA時(shí)需“引子”，解旋酶和耐高溫的DNA聚合酶D．設(shè)計(jì)“引子”前不需要知道尼安德特人的DNA序列11．（2022·河北·一模）某國(guó)外科研小組把人的誘導(dǎo)多能干細(xì)胞注入豬的早期胚胎中，成功培育出人豬嵌合體胚胎，并在豬體內(nèi)發(fā)育了3～4周后才終止妊娠。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．實(shí)驗(yàn)過(guò)程需利用體外受精、胚胎移植等胚胎工程的相關(guān)技術(shù)B．誘導(dǎo)多能干細(xì)胞可以由成體的成纖維細(xì)胞、B細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來(lái)C．若成功培育出“人豬嵌合體”將會(huì)面臨巨大的倫理道德挑戰(zhàn)D．該研究為在動(dòng)物體內(nèi)培育出可供移植的人類器官提供了可能12．（2022秋·湖北·高三湖北省天門中學(xué)校聯(lián)考開學(xué)考試）很多生物技術(shù)的應(yīng)用已經(jīng)與我們的日常生活密切相關(guān)。下列有關(guān)生物技術(shù)的說(shuō)法或做法正確的是（

）A．在我國(guó)，通過(guò)生殖性克隆有可能解決一些夫婦不孕不育的問(wèn)題B．科學(xué)家將小鼠抗體上結(jié)合抗原的區(qū)域“嫁接”到人的抗體上，經(jīng)過(guò)這樣改造的抗體誘發(fā)免疫反應(yīng)強(qiáng)度就會(huì)增大很多C．單克隆抗體被廣泛用作診斷試劑，還可以運(yùn)載藥物，也能直接用于治療疾病D．胚胎移植時(shí)為避免受體對(duì)來(lái)自供體的胚胎發(fā)生免疫排斥，往往需要對(duì)受體注射免疫抑制劑13．（2022·湖北武漢·高三武漢市第一中學(xué)校考階段練習(xí)）所謂“設(shè)計(jì)試管嬰兒”，是指將體外受精形成的胚胎（幾個(gè)細(xì)胞期）在植入母體孕育前，將一個(gè)細(xì)胞取出進(jìn)行某些基因檢測(cè)，當(dāng)檢測(cè)結(jié)果符合人們需要時(shí)，再把胚胎植入母體孕育。下列有關(guān)敘述正確的是（

）A．“設(shè)計(jì)試管嬰兒”應(yīng)用了細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)B．與“設(shè)計(jì)試管嬰兒”相比，“試管嬰兒”需要經(jīng)過(guò)遺傳學(xué)診斷C．“設(shè)計(jì)試管嬰兒”和“試管嬰兒”都是有性生殖D．對(duì)于“設(shè)計(jì)試管嬰兒”技術(shù)，我們應(yīng)該強(qiáng)行禁止、反對(duì)爭(zhēng)論14．（2022秋·浙江寧波·高三統(tǒng)考階段練習(xí)）生物安全是指與生物有關(guān)的各種因素對(duì)社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、人類健康以及生態(tài)環(huán)境所產(chǎn)生的危害或潛在風(fēng)險(xiǎn)。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．消除生物武器威脅、防止生物武器擴(kuò)散是生物安全防控的重要方面B．由于技術(shù)問(wèn)題，生殖性克隆可能孕育出有嚴(yán)重生理缺陷的克隆動(dòng)物C．為避免可能產(chǎn)生的基因歧視，基因檢測(cè)機(jī)構(gòu)不能隨意泄露基因檢測(cè)的結(jié)果D．從外來(lái)入侵害蟲的原產(chǎn)地引入天敵進(jìn)行治理，不會(huì)對(duì)入侵地造成生態(tài)影響15．（2022·山東·煙臺(tái)二中統(tǒng)考模擬預(yù)測(cè)）生物技術(shù)的進(jìn)步在給人類帶來(lái)福祉的同時(shí)，也引起了人們對(duì)它的安全性的關(guān)注，以及倫理道德的碰撞，帶來(lái)新的困惑和挑戰(zhàn)。下列關(guān)于生物技術(shù)的安全性和倫理問(wèn)題的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是（

）A．抗蟲棉的抗蟲基因不會(huì)隨著人們食用棉籽油進(jìn)入人的細(xì)胞內(nèi)B．我國(guó)堅(jiān)決反對(duì)治療性克隆，不允許進(jìn)行任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)C．通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了高產(chǎn)、無(wú)農(nóng)藥殘留的農(nóng)副產(chǎn)品，可造福人類D．生物武器具有致病性強(qiáng)、攻擊范圍廣等特點(diǎn)，世界各國(guó)都應(yīng)抵制二、多選題16．（2022秋·江蘇鹽城·高三鹽城市伍佑中學(xué)?？茧A段練習(xí)）下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)敘述，錯(cuò)誤的是（

）A．酵母和菜花均可作為提取DNA的材料B．DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸餾水C．向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?，可見玻棒上有白色絮狀物D．DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱，冷卻后變紫17．（2022秋·山東濟(jì)寧·高三鄒城市第二中學(xué)校考階段練習(xí)）雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結(jié)構(gòu)如下圖所示。已知ddNTP按堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式加到正在復(fù)制的子鏈中后，子鏈的延伸立即終止。某同學(xué)要通過(guò)PCR技術(shù)獲得被32P標(biāo)記且以堿基“C”為末端的、不同長(zhǎng)度的子鏈DNA片段。在反應(yīng)管中已經(jīng)有單鏈模板、引物、DNA聚合酶和相應(yīng)的緩沖液等，還需要加入下列原料中的（

）A．dGTP，dATP，dTTP，dCTP B．dGTP，dATP，dTTPC．α位32P標(biāo)記的ddCTP D．γ位32P標(biāo)記的ddCTP18．（2022秋·河北保定·高三河北省唐縣第一中學(xué)?？茧A段練習(xí)）下圖是將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)爰?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”的示意圖。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因。判斷下列說(shuō)法正確的是（）A．將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌B常用的方法是顯微注射法B．將完成導(dǎo)入過(guò)程后的細(xì)菌涂布在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能生長(zhǎng)的包括導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的細(xì)菌和導(dǎo)入了質(zhì)粒A的細(xì)菌C．將完成導(dǎo)入過(guò)程后的細(xì)菌涂布在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上，能生長(zhǎng)的就是導(dǎo)入了質(zhì)粒A的細(xì)菌D．目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是受體細(xì)胞能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)19．（2022秋·山東臨沂·高三校考開學(xué)考試）胰島素用于治療糖尿病，但胰島素注射后易在皮下堆積，需較長(zhǎng)時(shí)間才能進(jìn)入血液，進(jìn)入血液后又易被分解，因此治療效果受到影響。下圖是新的速效胰島素的生產(chǎn)過(guò)程，有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．新的胰島素的產(chǎn)生是依據(jù)基因工程原理完成的B．新的胰島素生產(chǎn)過(guò)程中不涉及中心法則C．新的胰島素產(chǎn)生過(guò)程中最困難的一步是由胰島素分子結(jié)構(gòu)推測(cè)氨基酸序列D．若用大腸桿菌生產(chǎn)新的胰島素，常用Ca2＋處理大腸桿菌20．（2022秋·江蘇無(wú)錫·高三統(tǒng)考期末）醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中試管嬰兒卵漿置換技術(shù)已經(jīng)有了多種突破。該技術(shù)首先取得女性的卵細(xì)胞核，并將其移植入優(yōu)質(zhì)的去核卵細(xì)胞內(nèi)，使兩者重組成活力較強(qiáng)的卵細(xì)胞，經(jīng)體外受精形成胚胎后移植入母體子宮。下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．該技術(shù)主要適用于卵子質(zhì)量不佳的女性B．該技術(shù)可以解決男性精子質(zhì)量不佳的問(wèn)題C．該技術(shù)能顯著提高大齡女性的受孕幾率D．該技術(shù)會(huì)導(dǎo)致倫理道德方面的質(zhì)疑和爭(zhēng)議第II卷（非選擇題）三、綜合題21．（2022秋·江蘇南通·高三濟(jì)南市歷城第二中學(xué)統(tǒng)考階段練習(xí)）干燥綜合征（SS）是臨床常見的一種自身免疫病，其血清中存在多種抗體，其中以SSB抗體異性最強(qiáng)，影響最顯著。科研人員為建立抗SSB抗體全自動(dòng)定量檢測(cè)的磁微?；瘜W(xué)發(fā)光試劑，利用基因工程技術(shù)獲得重組SSB蛋白，流程如下，請(qǐng)分析回答：(1)利用RNA通過(guò)①過(guò)程獲得cDNA需要____________酶。通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增SSB基因的前提是要測(cè)定該基因兩端部分核苷酸序列，目的是____________。(2)為確保與PET41a質(zhì)粒定向連接，獲得的SSB基因兩端要含有____________酶切位點(diǎn)。在PCR過(guò)程中，第____________輪循環(huán)產(chǎn)物中出現(xiàn)含所需限制酶的片段A。(3)獲得含SSB基因的重組質(zhì)粒后，進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)切割原質(zhì)粒和重組質(zhì)粒，獲得片段大小如右表（1kb=1000堿基對(duì)）（注意：DNA片段大小與圖中所畫比例一致）。SSB基因的長(zhǎng)度為____________。限制酶EcoRIBamHI和XhoI原質(zhì)粒8.1kb2.7kb、5.4kb重組質(zhì)粒3.4kb、5.0kb未做該處理(4)③過(guò)程目的是將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到大腸桿菌內(nèi)，并接種于添加____________的培養(yǎng)基上，收集菌落進(jìn)行鑒定，將陽(yáng)性菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理，篩選得到重組SSB蛋白。(5)為檢測(cè)重組質(zhì)粒表達(dá)情況及重組蛋白與抗體結(jié)合能力，科研人員通過(guò)注射含純化的重組SSB蛋白的弗氏佐劑進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完成下表：實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)操作分組取健康、生理狀態(tài)相同的小鼠隨機(jī)均分成兩組。實(shí)驗(yàn)處理實(shí)驗(yàn)組注射含純化的重組SSB蛋白的弗氏佐劑，對(duì)照組①____________，連續(xù)三次。飼養(yǎng)在相同且適宜環(huán)境中飼養(yǎng)。②___第三次免疫后第七天取小鼠血清并提取抗體進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果分析與對(duì)照組相比，若抗體檢測(cè)呈③____________，則表明重組SSB蛋白具有與相應(yīng)抗體高度結(jié)合的能力。22．（2022秋·浙江·高三校聯(lián)考階段練習(xí)）草甘膦是一種非選擇性除草劑，殺死雜草的同時(shí)也殺死農(nóng)作物。它與植物體內(nèi)的PEP（磷酸烯醇式丙酮酸）結(jié)構(gòu)相似，可與PEP競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合EPSP合酶，阻止PEP轉(zhuǎn)化，影響植物細(xì)胞正常代謝。我國(guó)科學(xué)家從草甘膦施用土壤中的某微生物體內(nèi)獲取GR79基因（草甘膦抗性基因），并將其導(dǎo)入植物體細(xì)胞中獲得抗草甘膦的轉(zhuǎn)基因植物。據(jù)圖回答下列問(wèn)題：(1)GR79基因發(fā)揮抗草甘膦作用的機(jī)理可能是______。從分離得到的某土壤微生物體內(nèi)獲取含有GR79基因的質(zhì)粒，并將其保存在某細(xì)菌群體（受體菌）中，各個(gè)受體菌分別含有該微生物的不同的基因，這些受體菌群中該微生物的所有DNA序列克隆的匯總，稱為______。(2)據(jù)圖推測(cè)，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增GR79基因時(shí)，需設(shè)計(jì)能與該基因兩條模板鏈3’端______的引物；同時(shí)為構(gòu)建該基因表達(dá)載體，需在引物1和引物2的______端加上限制酶______的識(shí)別序列。(3)實(shí)驗(yàn)中常采用______法將GR79基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物受體細(xì)胞；為避免該基因在近緣農(nóng)作物中傳播，可將其導(dǎo)入植物受體細(xì)胞的______；除溫度、酸堿度等環(huán)境因素外，影響該基因?qū)胫参锸荏w細(xì)胞成功率的因素有______。(4)為檢測(cè)GR79基因是否導(dǎo)入植物體細(xì)胞，可在培養(yǎng)基中添加______篩選含該基因的受體細(xì)胞；也可利用______技術(shù)更加精準(zhǔn)地進(jìn)行檢測(cè)，若待檢DNA中含有該基因，則會(huì)發(fā)現(xiàn)硝酸纖維素膜上會(huì)出現(xiàn)______。(5)經(jīng)檢測(cè)，科研人員發(fā)現(xiàn)部分獲得GR79基因的植物幼苗不具有抗草甘膦的能力，原因可能是______。23．（2022秋·湖北·高三校聯(lián)考階段練習(xí)）遺傳印記是因親本來(lái)源不同而導(dǎo)致等位基因表達(dá)差異的一種遺傳現(xiàn)象，DNA甲基化(DNA的部分堿基上結(jié)合甲基)是遺傳印記重要的方式之一。來(lái)自親本的甲基化印記在子一代體細(xì)胞的有絲分裂中保持終生，但在子一代形成配子時(shí)，親本的甲基化印記被去除，遺傳印記會(huì)重新設(shè)定。鼠的灰色(A)對(duì)褐色(a)是一對(duì)相對(duì)性狀，下圖為遺傳印記對(duì)小鼠等位基因表達(dá)和傳遞影響的示意圖，甲基化的基因不能表達(dá)?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)圖中雌鼠的表現(xiàn)型為_______________，圖中雄鼠的A基因來(lái)自于____________(填“父方”、“母方”)，理由是______________________________。(2)圖中雌鼠與雄鼠雜交，子代小鼠的表現(xiàn)型及比例為__________________________________________。(3)為進(jìn)一步追蹤遺傳印記的遺傳方式，科研人員將綠色熒光蛋白(GFP)基因通過(guò)基因工程技術(shù)整合到小鼠的染色體上，下圖為所用載體圖譜示意圖和限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)。為使GFP基因(該基因序列不含圖中限制酶的識(shí)別序列)與載體正確連