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文檔簡(jiǎn)介
1、艾滋病檢測(cè)技術(shù)和應(yīng)用,北京市出入境檢驗(yàn)檢疫局艾滋病確認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室,HIV檢測(cè)的病毒學(xué)基礎(chǔ),人類免疫缺陷病毒human immuno deficiency virus HIV,HIV感染細(xì)胞過程動(dòng)畫演示,HIV的主要結(jié)構(gòu)基因及其抗原,HIV-1具有高度的可變性,逆轉(zhuǎn)錄酶保真度每個(gè)復(fù)制周期生成基因序列徐璐其他HIV獨(dú)奏(通常稱為準(zhǔn)品種Quasi Species)的混合物,HIV-1具有高度的可變性,據(jù)估計(jì)HIV-1每一代的平均時(shí)間約為2.5天。這意味著從HIV感染到診斷AIDS,每年復(fù)制140多臺(tái)病毒的速度更新了數(shù)千代。HIV的類型和亞型、HIV、HIV-1、HIV-2、o、m、A、B、C、d、E
2、、f、G、H、I、j CRF 01-。 C CRF09_cpx 96GH2911尚未發(fā)布CRF10_CD TZBF061 C、D CRF11_cpx GR17 A,F(xiàn)crf13 _ cpx96cm1849a、crf01 _ AE、G、G mu 2079 CRF 01 _ AE B CRF 16 _ A2D kisii 5009 A2,d循環(huán)重組病毒(CRF),全國(guó)第二HIV分子流動(dòng)不同的轉(zhuǎn)移路徑HIV-1亞型分布,待檢查3333檢查的樣本:血清和血漿、唾液、尿液、檢查HIV抗體(ELISA法),原則3360間接法(第一代)雙抗原三明治法(第三代試劑)。判斷結(jié)果有客觀依據(jù)(閾值)??勺詣?dòng)化操作檢
3、測(cè)多種標(biāo)本(血清、血漿、唾液、尿液)是最廣泛使用的方法,為了確保HIV ELISA試劑發(fā)展、抗原重組或合成多肽HIV-1/特異性,無需過度稀釋標(biāo)本,提高敏感性。特異性是雙特異性HIV抗原的保證。,同時(shí)檢測(cè)P24抗原和HIV抗體,第4代試劑包裝和標(biāo)記的分別是P24抗原的單克隆抗體,HIV-1G P160,HIV-1O GP41,HIV-2GP36。分別為P24抗原、HIV-1 M組、HIV-1M組方法學(xué):ELISA抗體三明治法,比抗體檢出時(shí)間提前約一周,用于早期用途3360個(gè)嬰兒或早期HIV感染診斷的獻(xiàn)血者選擇監(jiān)測(cè)效果和病程進(jìn)行, 排除超體假陽(yáng)性的多種茄子方法,例如免疫印跡法(WB)、免疫熒光法
4、(IFA)和放射免疫沉積法,得出不同HIV抗原的抗體結(jié)論3360 HIV抗體陽(yáng)性(Positive)、HIV抗體陰性(Negative)、HIV陰性(Negative) 超體試劑敏感性必須好。去除假陽(yáng)性確認(rèn),確認(rèn)真質(zhì)子。確認(rèn)試劑要有高度的特異性。HIV抗體確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn),陽(yáng)性: 2個(gè)env帶或env帶1個(gè)p24對(duì)女性3360,沒有條帶:必須至少有一個(gè)帶,但陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)未吸入HIV抗體不確定性,原因: HIV感染早期非特異性反應(yīng),其他致病源交叉反應(yīng)在正常人的高發(fā)病率HIV()、HIV抗體(-) HIV陽(yáng)性母親的嬰兒:母體中的HIV抗體、可能的HIV(-)、HIV抗體(-)使用病毒本身的檢測(cè)方法3360P2
5、4。出生后從母體被動(dòng)獲得的HIV抗體,診斷新生兒的HIV感染依靠抗體檢查渡邊杏。出生大約12個(gè)月后,來自母親的抗體消失,新生兒自身基于免疫系統(tǒng)的抗體,新生兒開始出現(xiàn)。只有在18個(gè)月后,才能用抗體檢查方法診斷。通過病毒學(xué)檢查方法,可以早期診斷嬰兒HIV感染。HIV DNA PCR實(shí)驗(yàn)是診斷嬰兒HIV感染的第一種方法,38感染的孩子出生48小時(shí)后可能出現(xiàn)HIV DNA PCR牙齒陽(yáng)性。出生后兩周,檢查靈敏度大幅提高,14日陽(yáng)性率達(dá)到93。28日陽(yáng)性率為96,特異性(約99)牙齒高,HIV-1病毒負(fù)荷(Viral Load) HIV-1病毒負(fù)荷顯示體內(nèi)克隆的病毒數(shù)通常是血漿HIV RNA的拷貝數(shù)。抗
6、病毒治療目的、反應(yīng)水平、月、月測(cè)試限制、病毒負(fù)荷測(cè)量的意義、疾病預(yù)測(cè)過程:高病毒負(fù)荷可以預(yù)測(cè)疾病過程的快速發(fā)展監(jiān)測(cè)療效:牙齒何時(shí)開始治療和治療效果。有效的抗病毒治療應(yīng)該能大大減少病毒負(fù)荷HIV急性感染的輔助診斷。有效的抗病毒治療28周病毒負(fù)載1個(gè)log以上1624周病毒負(fù)載減少可能會(huì)降至最低測(cè)試限制以下。否則,應(yīng)考慮改變治療方案、常用病毒負(fù)載測(cè)量方法、分支DNA信號(hào)放大系統(tǒng)HIV-1 Quantiplex (bDNA)逆轉(zhuǎn)錄PCR系統(tǒng)AMP Licor HIV-1顯示器(RT-PCR)核酸序列放大系統(tǒng)Nuclisens HIV 廣泛的FDA批準(zhǔn)應(yīng)用提取和純化,需要組織及體液不足檢測(cè)時(shí)間,臨床穩(wěn)定患者每日病毒負(fù)荷量的自然變化約為0.3 0.4個(gè)日志(2 2.5倍)
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