8、實驗八 核仁組織者區(qū)(NOR)的銀染顯示法_第1頁
8、實驗八 核仁組織者區(qū)(NOR)的銀染顯示法_第2頁
8、實驗八 核仁組織者區(qū)(NOR)的銀染顯示法_第3頁
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文檔簡介

核仁組織者區(qū)(NOR)的銀染顯示法,實驗目的 實驗原理 實驗步驟 作業(yè),一、實驗目的,掌握核仁組織者區(qū)(NOR)的快速銀染顯示法,并了解NOR在細胞中分布情況。,二、實驗原理,當NOR在間期轉錄時,產生一種與轉錄活動有關的酸性蛋白,此蛋白可保留至中期并能將染液中的銀離子還原為金屬銀而顯現(xiàn)為黑色。所以銀染法可在中期染色體上顯示具有轉錄活性的NOR數(shù)目。而且,染色的深黑程度,還可以反應出基因的活性高低。,三、實驗步驟,快速銀染法: 在染色體標本上滴加含1%甲酸的2%明膠水溶液3滴,再加50%硝酸銀3滴,混合后蓋上蓋片,將標本置于60恒溫臺上處理至液體為棕黃色為止,自來水沖洗,空氣干燥,鏡檢。,實驗結果,若染色適中,間期核及染色體為金黃色,油鏡觀察,可在某些染色體上看到成對的黑色小點,此即為銀染NOR(Ag- NOR)。 若整張片子色淡,間期核及染色體都不易看清,為染色時間不足,在未滴過香柏油的情況下,可重新續(xù)染。 若染色時間偏長,則染色體為棕色,此時,仍可看到黑色的NOR,只是NOR與染色體間的反差較低。染色嚴重過度時,整張片子都布滿黑色沉淀,這樣的標本一般都丟棄不用。若標本珍貴,也可采用特殊方法褪色后重新染色。,四、作 業(yè),在油鏡下繪

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