仿制藥生物等效性試驗(yàn)設(shè)計(jì)--崔一民

1、仿制藥生物等效性試驗(yàn)設(shè)計(jì),崔一民 北京大學(xué)第一醫(yī)院 E-mail: ,生物等效性（BE）的概念,生物等效性試驗(yàn)是指用生物利用度研究的方法，以藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)為指標(biāo)，比較同一種藥物的相同或者不同劑型的制劑，在相同的試驗(yàn)條件下，其活性成分吸收程度和速度有無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的人體試驗(yàn)。 生物等效性試驗(yàn)在藥物研究開發(fā)的不同階段，其作用可能稍有差別，但究其根本，生物等效性試驗(yàn)的目的都是通過測定血藥濃度的方法，來比較不同的制劑對藥物吸收的影響，也即藥物不同制劑之間的差異，以此來推測其臨床治療效果差異的可接受性，即不同制劑之間的可替換性。,BE研究適用范圍,改變國內(nèi)已上市銷售藥品的劑型，但不改變給藥途徑的口服制劑或

2、其他有關(guān)制劑（化學(xué)藥）。 已有國家藥品標(biāo)準(zhǔn)的制劑（化學(xué)藥）。 改變口服藥物制劑處方或工藝的補(bǔ)充申請 其他,BE研究方法,通常意義的BE研究是指通過測量不同時(shí)間點(diǎn)的生物樣本（如血漿或尿液）中藥物濃度，獲得藥物濃度-時(shí)間曲線來反映藥物從制劑中釋放吸收到體循環(huán)中的動(dòng)態(tài)過程。并經(jīng)過適當(dāng)?shù)挠?jì)算得到曲線下面積（AUC）、達(dá)峰濃度（Cmax）、達(dá)峰時(shí)間（Tmax）等參數(shù)后，通過統(tǒng)計(jì)學(xué)比較判斷兩制劑是否生物等效。,生物樣本中藥物濃度測定,建立生物樣本中藥物濃度定量分析方法是進(jìn)行生物等效性研究的關(guān)鍵之一。 開始入選受試者前，應(yīng)建立可靠的和可重現(xiàn)的藥物濃度定量分析方法。,方法學(xué)建立和考察的內(nèi)容,特異性； 標(biāo)準(zhǔn)曲線

3、和定量范圍； 定量下限； 精密度與準(zhǔn)確度； 樣品穩(wěn)定性； 提取回收率。,普通制劑 隨機(jī)、交叉、單劑量、兩周期試驗(yàn)設(shè)計(jì) 控、緩釋制劑 隨機(jī)、交叉、單劑量和多劑量、兩周期試驗(yàn)設(shè)計(jì),生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì),生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì),交叉設(shè)計(jì)是目前應(yīng)用最多最廣的方法。 把受試對象隨機(jī)分為兩組，按一定順序處理，一組受試者先服用受試制劑，后服用參比制劑；另一組受試者先服用參比制劑，后服用受試制劑。兩順序間應(yīng)有足夠長的間隔時(shí)間，為清洗期。,生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì),為什么采用一般采用交叉設(shè)計(jì)？ 對每位受試者都連續(xù)接受兩次或多次的處理，相當(dāng)于自身對照，可以將制劑因素對藥物吸收的影響與其他因素區(qū)分開來，減少了

4、不同試驗(yàn)周期和個(gè)體間差異對試驗(yàn)結(jié)果的影響。,可能出現(xiàn)的其它設(shè)計(jì)方案 在進(jìn)行兩種以上劑型比較時(shí)，也可以進(jìn)行多周期試驗(yàn)設(shè)計(jì)。 在試驗(yàn)藥物的半衰期過長時(shí)，可進(jìn)行平行試驗(yàn)設(shè)計(jì)。,生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì),單劑量給藥交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì),給藥,20天,-7天,1天,3天,研究日,篩查,-1天,入院,出院,入院,14天,給藥,出院,15天,17天,隨訪,單劑量給藥平行試驗(yàn)設(shè)計(jì),給藥,8天,-7天,1天,研究日,篩查,-1天,入院,出院,隨訪,PK,為什么要做血藥濃度達(dá)到穩(wěn)態(tài)時(shí)的生物等效性比較？ 觀察制劑的控釋或緩釋特性是否一致。,生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì),受試者的例數(shù)？ SFDA指導(dǎo)原則：1824例 根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)的

5、把握度進(jìn)行計(jì)算 對某些變異性大的藥物可能需要適當(dāng)增加 例數(shù),生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì),如果試驗(yàn)藥物是前藥怎么辦？ 原則上以原藥為基礎(chǔ)進(jìn)行等效性研究。 在原藥代謝很快、藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)變異大導(dǎo)致血液濃度測定困難或受試者數(shù)目過大時(shí)可以主要活性代謝產(chǎn)物為基礎(chǔ)進(jìn)行等效性研究。,生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì),如何確定參比藥物？ 原則上選擇國內(nèi)已經(jīng)批準(zhǔn)上市相同劑型藥 物中的原創(chuàng)藥。 在無法獲得原創(chuàng)藥時(shí)，可考慮選用上市主 導(dǎo)產(chǎn)品作為參比制劑。,生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì),生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì),如何確定給藥劑量？ 給藥劑量一般應(yīng)與臨床單次用藥劑量一致，不得超過臨床推薦的單次最大劑量或已經(jīng)證明的安全劑量。 受試制劑

6、和參比制劑一般應(yīng)服用相等劑量。 需要使用不相等劑量時(shí)，應(yīng)說明理由并提供所用劑量范圍內(nèi)的線性藥代動(dòng)力學(xué)特征依據(jù)，結(jié)果可以劑量校正方式計(jì)算生物利用度。,生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì),如何確定清洗期 ？ 設(shè)定清洗期是為了消除兩制劑的互相干擾，避免上個(gè)周期內(nèi)的處理影響到隨后一周期的處理中。 清洗期一般不應(yīng)短于7個(gè)消除半衰期。,生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì),如何設(shè)計(jì)取樣點(diǎn)？ 取樣點(diǎn)的設(shè)計(jì)對試驗(yàn)結(jié)果的可靠性及藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)計(jì)算的合理性，均有十分重要的意義。 一般應(yīng)兼顧到吸收相、平衡相（峰濃度）和消除相。服藥前應(yīng)先取空白血樣。一般在吸收相部分取23 個(gè)點(diǎn)，峰濃度附近至少需要3個(gè)點(diǎn)，消除相取35 個(gè)點(diǎn)。 采樣持續(xù)應(yīng)到

7、受試藥原形或其活性代謝物35個(gè)半衰期時(shí)，或至血藥濃度為Cmax 的110120，AUC0-t/AUC0-通常應(yīng)當(dāng)大于80%。,受試者入選標(biāo)準(zhǔn)： 男性健康受試者，1840 周歲。 體重指數(shù)（體重(kg)/身高(m)2）在正常范圍（1924）內(nèi)。 試驗(yàn)前簽署知情同意書。,生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì),受試者排除標(biāo)準(zhǔn)（舉例）： 通過直接提問和體檢，有任何顯著的臨床疾病者。 臨床上有顯著的變態(tài)反應(yīng)史、特別是藥物過敏史者。 經(jīng)研究前全面體檢和實(shí)驗(yàn)室檢查發(fā)現(xiàn)有任何顯著的臨床疾病者。 正在服用或在服第一劑研究藥物前3周中曾服用任何處方藥或非處 方藥（每天3g以內(nèi)撲熱息痛除外）者。 在此研究給第一劑的日期前4個(gè)月

8、內(nèi)接受過任何試驗(yàn)性藥物者。 喝酒每周超過28單位酒精（1單位285ml啤酒或25ml烈酒或1 玻璃杯葡萄酒）者。 每天吸煙超過10支或相等量的煙草者。 有證據(jù)表明其為藥物濫用者。 在研究前一個(gè)月獻(xiàn)過血，或打算在研究期間或研究結(jié)束后一個(gè)月內(nèi) 獻(xiàn)血或血液成分者。 研究者認(rèn)為受試者有任何原因可能不會(huì)完成本研究者。,生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì),為什么選擇男性受試者？ 消除性別間的差異。 避免受女性經(jīng)期及妊娠的影響。,生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì),藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的計(jì)算,在生物等效性研究中，其主要藥代參數(shù)Cmax 和Tmax 均以實(shí)測值表示，AUC0t 以梯形法計(jì)算。 一般用非房室數(shù)學(xué)模型分析方法來估算藥代動(dòng)力

9、學(xué)參數(shù)，為什么？ 用房室模型方法估算藥代參數(shù)時(shí)，采用不同的方法或軟件其值可能有較大差異。,BE研究中常用的軟件,WinNonLin DAS 研究者可根據(jù)具體情況選擇使用，但所用軟件必須經(jīng)確證并應(yīng)在研究報(bào)告中注明所用軟件。,等效判斷標(biāo)準(zhǔn),采用主要藥代參數(shù)經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后以多因素方差分析（ANOVA）進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，然后用雙向單側(cè)t 檢驗(yàn)和計(jì)算90置信區(qū)間的統(tǒng)計(jì)分析方法來評價(jià)和判斷藥物間的生物等效性。,等效判斷標(biāo)準(zhǔn),關(guān)于方差分析 方差檢驗(yàn)是顯著性檢驗(yàn)，設(shè)定的無效假設(shè)是兩藥無差異，檢驗(yàn)方式為是與否。 在P0.05時(shí)認(rèn)為兩藥差異無統(tǒng)計(jì)意義，但并不能認(rèn)為兩者相等或相近。,等效判斷標(biāo)準(zhǔn),關(guān)于等效檢驗(yàn) 雙向單側(cè)

10、t 檢驗(yàn)及（12）%置信區(qū)間法是目前生物等效檢驗(yàn)的唯一標(biāo)準(zhǔn)。 SFDA規(guī)定：一般經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后的受試制劑的AUC0t 在參比制劑的80125范圍，受試制劑的Cmax 在參比制劑的70143范圍，判斷兩藥生物等效。 如有必要時(shí)，應(yīng)對Tmax 經(jīng)非參數(shù)法檢驗(yàn)，如無差異，可以認(rèn)定受試制劑與參比制劑生物等效。,各國等效判斷標(biāo)準(zhǔn)比較,等效判斷標(biāo)準(zhǔn),出現(xiàn)Tmax不等效，Cmax等效，AUC等效或 Cmax不等效，AUC等效時(shí)，怎么看？ 目前比較肯定AUC 對藥物吸收程度的衡量作用，而Cmax、Tmax 依賴取樣時(shí)間的安排，用它們衡量吸收速率有時(shí)是不夠準(zhǔn)確的，不適合用于具有多峰現(xiàn)象的制劑及個(gè)體變異大的試驗(yàn)。故

11、在評價(jià)時(shí)，若出現(xiàn)某些不等效特殊情況，需具體問題加以具體分析。,BE研究的臨床試驗(yàn)報(bào)告,生物等效性研究臨床報(bào)告內(nèi)容至少應(yīng)包括以下內(nèi)容 （1）實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?（2）生物樣本分析方法考察的數(shù)據(jù)，提供必要的圖譜； （3）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和操作方法，包括全部受試者的資料、樣本例 數(shù)、參比制劑、給藥劑量、服藥方法和采樣時(shí)間安排； （4）受試者各時(shí)間點(diǎn)的藥物濃度、藥代參數(shù)和藥時(shí)曲線； （5）采用的統(tǒng)計(jì)分析方法以及詳細(xì)統(tǒng)計(jì)過程和結(jié)果； （6）服藥后的臨床不良反應(yīng)觀察結(jié)果，受試者中途退出和脫落記錄及原因； （7）生物利用度或生物等效性結(jié)果分析以及討論； （8）參考文獻(xiàn)。,化學(xué)藥物制劑人體生物利用度和生物 等效性研究技術(shù)指導(dǎo)

12、原則 (二五年三月),主要參考文獻(xiàn),舉例：A片劑的生物等效性研究,XXX制藥有限公司生產(chǎn)與YYY制藥有限公司 生產(chǎn)A片劑的開放、隨機(jī)、交叉研究,研究目的,在中國男性健康受試者中評價(jià)XXX制藥有限公司生產(chǎn)與YYY制藥有限公司生產(chǎn)A片劑的生物等效性。,試驗(yàn)設(shè)計(jì),本研究為開放、單劑量、雙周期隨機(jī)交叉設(shè)計(jì)； 計(jì)劃入組24例，均為男性； 受試者于試驗(yàn)當(dāng)日清晨按試驗(yàn)設(shè)計(jì)口服試驗(yàn)制劑或參比制劑。于1周后交叉服用另一制劑。試驗(yàn)結(jié)束后進(jìn)行隨訪； 每周期分別于給藥前及給藥后第0.5、1、1.5、2、3、4、6、8、10、12、16、24小時(shí)采集靜脈血測定血漿中A的濃度，計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，判定兩種制劑是否生物等效

13、。,入選標(biāo)準(zhǔn),年齡在1840周歲之間健康男性, 且同一批入組受試者年齡相差不超過10歲； 體重指數(shù)(BMI)在1924之間, 體重不應(yīng)低于50Kg； 自愿參加本試驗(yàn)并簽署書面知情同意書。,排除標(biāo)準(zhǔn),受試者在首次服用研究藥物前30天內(nèi)患有嚴(yán)重疾病（研究者認(rèn)為沒有臨床顯著意義除外）；或有胃腸肝腎疾病患者；或有其他影響吸收、分布、代謝和排泄等因素者； 有藥物過敏史者； 受試者在篩選試驗(yàn)前2年內(nèi)有藥物濫用史或酗酒史（定義飲用酒精的量：每日飲用酒精的量約為40g）； 飲用過量茶、咖啡和/或含有咖啡因的飲料者（8杯/天）； 乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒抗體(Anti-HCV)、艾滋病病

14、毒抗體(Anti-HIV)中有一項(xiàng)呈陽性者； 實(shí)驗(yàn)室檢查異常且研究者認(rèn)為有臨床意義的受試者； 收縮壓90mmHg的受試者；臥位5分鐘和站立后立即測定的血壓值：收縮壓之差20mmHg，舒張壓之差10 mmHg的受試者；,排除標(biāo)準(zhǔn)（續(xù)）,受試者在首次服用研究藥物前2周曾經(jīng)吸過煙或服用過含有煙堿的產(chǎn)品（包括但不限定是香煙、煙斗、雪茄煙、咀嚼用煙草、煙堿片、煙堿口香糖），或在首次服用研究藥物前1周內(nèi)曾經(jīng)飲酒者； 在過去4周內(nèi)采集全血200 ml或過去12周內(nèi)采集全血400 ml或過去2周內(nèi)采集成分血（采集血清成分或血小板成分）者； 3個(gè)月內(nèi)用過已知對臟器有損害的藥物者；或在給予試驗(yàn)藥物前2周內(nèi)有用藥史

15、者；或目前正在使用藥物者； 在試驗(yàn)開始前2個(gè)月內(nèi)參加過其他試驗(yàn)者； 不能和研究者很好溝通者（語言障礙、智力發(fā)育不良或腦功能受損者）； 在緊急情況下不能取得聯(lián)系者； 由研究者判斷為不適合參加本試驗(yàn)的受試者。,用法用量,采用隨機(jī)的服藥順序，受試者在第一研究周期早晨空腹單次口服試驗(yàn)制劑或參比制劑，在第二研究周期交叉服用參比制劑或試驗(yàn)制劑，劑量均為5mg，兩次服藥間隔至少1周。,生物等效性評價(jià)指標(biāo),主要判定指標(biāo)：Cmax 和 AUC0-24h； 參考指標(biāo)：AUC0- 和 Tmax,安全性評價(jià)指標(biāo),不良事件（癥狀）； 不良事件（檢查）； 生命體征（血壓、心率）； 嚴(yán)重不良事件。,評價(jià)方法,藥代動(dòng)力學(xué)：使用WinNonLin Version 5.0程序的非房室模型法計(jì)算試驗(yàn)制劑和參比制劑的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)Cmax，Tmax，AUC0-24h，AUC0-，t1/2 。 生物等效性分析：藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)Cmax，AUC0-24h，AUC0-的生物等效性分析采用WinNonLin程序中的Bioequivalence Wizard模塊；Tmax采用SPSS軟件 Wilcoxon檢驗(yàn)法進(jìn)行分析。 安全性分析： 將試驗(yàn)過程中觀察到的不良事件及實(shí)驗(yàn)室