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1、動物細胞培養(yǎng)2.2.1動物細胞培養(yǎng)和核移植技術第 1 課時【學習目標】1 、簡述動物細胞培養(yǎng)的過程、條件及應用。2 、比較動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)區(qū)別?!緦W習重點】1 、動物細胞培養(yǎng)的過程、條件。【自主學習】一、動物細胞工程常用的技術手段1、動物細胞工程常用的技術手段有哪幾種?2、 _ 是動物細胞工程技術的基礎。二、動物細胞培養(yǎng)1、動物細胞培養(yǎng)的概念( 1)動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關的組織,它分散成_ ,后放在 _ 中,讓這些細胞 _ 和 _ 。( 2)動物細胞培養(yǎng)的原理是:_ 。2、動物細胞培養(yǎng)的過程( 1)基本概念什么是細胞貼壁?什么是接觸抑制?什么是原代培養(yǎng)?什么是傳代培養(yǎng)?

2、說明:分瓶之前,稱原代培養(yǎng);出現(xiàn)接觸抑制用胰蛋白酶處理,再分瓶培養(yǎng)為傳代培養(yǎng)。( 2)過程幼齡動物組織或胚胎剪碎原代培養(yǎng)細胞懸液單個細胞細胞貼壁生長胰蛋白酶胰蛋白酶傳代培養(yǎng)細胞懸液細胞株或細胞系【思考探究】為什么選用幼齡的動物組織或胚胎?1動物細胞培養(yǎng)如何使組織分散為單個細胞?這說明細胞間的物質(zhì)是什么?能不能用胃蛋白酶?制成細胞懸液的主要目的是什么?培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿應具備什么條件?貼滿瓶壁的細胞要如何處理才能繼續(xù)培養(yǎng)?目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為10 代以內(nèi)的,為什么? 10 50 代,50 代以后細胞有什么變化?【例 1】下列有關動物細胞培養(yǎng)的敘述中正確的是()A、動物細胞培

3、育的目的是獲得大量的細胞分泌蛋白B、動物細胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶使細胞分散C、細胞的癌變發(fā)生于原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過渡過程中D、培養(yǎng)至50 代后的傳代細胞稱為細胞株3、動物細胞培養(yǎng)的條件無菌、無毒的環(huán)境采取什么措施保證無菌、無毒的環(huán)境?營養(yǎng)什么是合成培養(yǎng)基?培養(yǎng)動物細胞時為什么要加入血清、血漿?溫度和 PH適宜的溫度一般為_ ;適宜的PH一般為 _ 。氣體環(huán)境細胞培養(yǎng)所需氣體主要為O2 和 CO2,它們分別有什么作用?4、動物細胞培養(yǎng)技術的應用生產(chǎn)生物制品:疫苗、干擾素、單克隆抗體等;2動物細胞培養(yǎng)作為基因工程中的受體細胞;檢測有毒物質(zhì)及毒性;科研方面:篩選抗癌藥物、治療和預防疾病等。5、動物細

4、胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的區(qū)別植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)理論基礎 ( 原理 )細胞的全能性細胞增殖培養(yǎng)基的物理性固體液體(合成培養(yǎng)基)質(zhì)培養(yǎng)基的成分水、礦質(zhì)元素、蔗糖、葡萄糖、氨基酸、無機鹽、氨基酸、瓊脂等維生素、動物血清等過程結果新的植株或組織新的細胞株或細胞系 植株快速繁殖脫毒植株的生產(chǎn)蛋白質(zhì)制品如病毒培育疫苗、干擾素、單克隆抗體用途 人工種子生產(chǎn)藥物、 殺蟲劑等;檢測有毒物質(zhì); 研等究藥理病理;移植治療轉基因植物的培育相同點都需人工條件下的無菌操作,需要適宜的溫度、PH、O2 等特別注意以下幾點:1.動物細胞培養(yǎng)基成分特有的動物血清含有蛋白質(zhì)、氨基酸、 葡萄糖、 激素等多種成分。2. 兩技術手

5、段培養(yǎng)過程中都進行有絲分裂,都是無性繁殖,都可稱克隆,都不涉及減數(shù)分裂。3. 植物組織培養(yǎng)最終產(chǎn)生新個體,體現(xiàn)全能性;動物細胞培養(yǎng)產(chǎn)生大量細胞,不形成新個體,故不能體現(xiàn)全能性?!纠?2】一般來說,動物細胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件()無毒的環(huán)境無菌的環(huán)境合成培養(yǎng)基需加血漿溫度與動物體溫相近需要 O2,不需要 CO2 CO2能調(diào)培養(yǎng)液 pHA. B. C. D. 3動物細胞培養(yǎng)【例 3】動物細胞培養(yǎng)與植物細胞培養(yǎng)的重要區(qū)別在于()A. 培養(yǎng)基不同;B. 動物細胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進行;C. 動物細胞可以傳代培養(yǎng),而植物細胞不能;D. 動物細胞能夠大量培養(yǎng),而植物細胞只能培養(yǎng)成植株?!倦S堂練習】

6、1、在進行動物細胞培養(yǎng)時,通常選用的培養(yǎng)材料是()A、衰老退化的動物組織細胞B、成熟動物個體的體細胞C、動物的受精卵細胞D、動物胚胎或幼齡動物個體的細胞2、下列關于動物細胞培養(yǎng)的敘述中,錯誤的是()A、用于培養(yǎng)的細胞大多取自胚胎或幼齡動物的器官或組織B、將所取的組織先用胰蛋白酶等進行處理使其分散成單個細胞C、在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離,制成懸浮液D、動物細胞培養(yǎng)只能傳50 代左右,所培養(yǎng)的細胞會衰老死亡3、在動物細胞培養(yǎng)過程中,使用胰蛋白酶的目的是()A、使動物組織分散為單個細胞進行培養(yǎng)B、去掉細胞壁成為原生質(zhì)體C、去掉細胞膜暴露出原生質(zhì)體便于細胞融合D 、促進蛋白質(zhì)水解為多肽4、離體的植物組織或細胞在適當培養(yǎng)條件下發(fā)育成完整的植株,離體動物

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