分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題及其答案_第1頁
分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題及其答案_第2頁
分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題及其答案_第3頁
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分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題及其答案_第5頁
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文檔簡介

一、名詞解釋1、廣義分子生物學(xué):在分子水平上研究生命本質(zhì)的科學(xué),其研究對象是生物大分子的結(jié)構(gòu)和功能。22、狹義分子生物學(xué):即核酸(基因)的分子生物學(xué),研究基因的結(jié)構(gòu)和功能、復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯、表達(dá)調(diào)控、重組、修復(fù)等過程,以及其中涉及到與過程相關(guān)的蛋白質(zhì)和酶的結(jié)構(gòu)與功能 3、基因:遺傳信息的基本單位。編碼蛋白質(zhì)或 RNA 等具有特定功能產(chǎn)物的遺傳信息的基本單位,是染色體或基因組的一段 DNA 序列(對以 RNA 作為遺傳信息載體的 RNA 病毒而言則是 RNA 序列)。4、基因:基因是含有特定遺傳信息的一段核苷酸序列,包含產(chǎn)生一條多肽鏈或功能 RNA所必需的全部核苷酸序列。5、功能基因組學(xué):是依附于對 DNA 序列的了解,應(yīng)用基因組學(xué)的知識和工具去了解影響發(fā)育和整個(gè)生物體的特定序列表達(dá)譜。6、蛋白質(zhì)組學(xué):是以蛋白質(zhì)組為研究對象,研究細(xì)胞內(nèi)所有蛋白質(zhì)及其動(dòng)態(tài)變化規(guī)律的科學(xué)。7、生物信息學(xué):對 DNA 和蛋白質(zhì)序列資料中各種類型 信息進(jìn)行識別、存儲、分析、模擬和轉(zhuǎn)輸8、蛋白質(zhì)組:指的是由一個(gè)基因組表達(dá)的全部蛋白質(zhì)9、功能蛋白質(zhì)組學(xué):是指研究在特定時(shí)間、特定環(huán)境和實(shí)驗(yàn)條件下細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的全部蛋白質(zhì)。 10、單細(xì)胞蛋白:也叫微生物蛋白,它是用許多工農(nóng)業(yè)廢料及石油廢料人工培養(yǎng)的微生物菌體。因而,單細(xì)胞蛋白不是一種純蛋白質(zhì),而是由蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白質(zhì)的含氮化合物、維生素和無機(jī)化合物等混合物組成的細(xì)胞質(zhì)團(tuán)。11、基因組:指生物體或細(xì)胞一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)總和。12、C 值:指生物單倍體基因組的全部 DNA 的含量,單位以 pg 或 Mb 表示。 13、C 值矛盾:C 值和生物結(jié)構(gòu)或組成的復(fù)雜性不一致的現(xiàn)象。14、重疊基因:共有同一段 DNA 序列的兩個(gè)或多個(gè)基因。15、基因重疊:同一段核酸序列參與了不同基因編碼的現(xiàn)象。16、單拷貝序列:單拷貝順序在單倍體基因組中只出現(xiàn)一次,因而復(fù)性速度很慢。單拷貝順序中儲存了巨大的遺傳信息,編碼各種不同功能的蛋白質(zhì)。17、低度重復(fù)序列:低度重復(fù)序列是指在基因組中含有 210 個(gè)拷貝的序列18、中度重復(fù)序列:中度重復(fù)序列大致指在真核基因組中重復(fù)數(shù)十至數(shù)萬(105)次的重復(fù)順序。其復(fù)性速度快于單拷貝順序,但慢于高度重復(fù)順序。19、高度重復(fù)序列:基因組中有數(shù)千個(gè)到幾百萬個(gè)拷貝的 DNA 序列。這些重復(fù)序列的長度為 6200 堿基對。20、基因家族:真核生物基因組中來源相同、結(jié)構(gòu)相似、功能相關(guān)的一組基因,可能由某一共同祖先基因經(jīng)重復(fù)和突變產(chǎn)生。21、基因簇:基因家族的各成員緊密成簇排列成大段的串聯(lián)重復(fù)單位,定位于染色體的特殊區(qū)域。22、超基因家族:由基因家族和單基因組成的大基因家族,各成員序列同源性低,但編碼的產(chǎn)物功能相似。如免疫球蛋白家族。23、假基因:一種類似于基因序列,其核苷酸序列同其相應(yīng)的正常功能基因基本相同、但卻不能合成功能蛋白的失活基因。24、復(fù)制:是指以原來 DNA(母鏈)為模板合成新 DNA(子鏈)的過程?;蛏矬w以DNA/RNA 為模板合成 DNA/RNA 的過程。25、半保留復(fù)制:DNA 復(fù)制過程中,新合成的子代 DNA 分子 中,一條鏈?zhǔn)切潞铣傻?,另外一條鏈來自親代,這種復(fù)制方式稱為半保留復(fù)制。 26、復(fù)制子:基因組上能夠獨(dú)立進(jìn)行復(fù)制的單位, 包括復(fù)制起點(diǎn)和復(fù)制終點(diǎn)。所有的原核生物的染色體、噬菌體僅有一個(gè)復(fù)制子;真核生物的染色體有多個(gè)復(fù)制子27、復(fù)制起始點(diǎn):DNA 分子上起始復(fù)制并控制復(fù)制起始頻率的特定位置28、復(fù)制終點(diǎn):終止復(fù)制的位點(diǎn)。29、復(fù)制叉:又稱生長點(diǎn),復(fù)制開始時(shí),起始點(diǎn)處的 DNA 雙螺旋 要解鏈,松開的兩股鏈和未松開的雙螺旋形狀象一把叉子,稱為復(fù)制叉,是復(fù)制有關(guān)的酶和蛋白質(zhì)組裝成新的復(fù)合物和新鏈合成的部位。30、引物:是人工合成的與模板 DNA 互補(bǔ)的寡核苷酸序列31、簡并引物:是指代表編碼單個(gè)氨基酸所有不同堿基可能性的不同序列的混合物。32、相向復(fù)制:從兩個(gè)起點(diǎn)開始兩條鏈的復(fù)制,形成兩個(gè)復(fù)制叉,各以一條鏈為模板單一方向復(fù)制出一條新鏈。33、單向復(fù)制:復(fù)制從一個(gè)起始點(diǎn)開始,只有一個(gè)復(fù)制叉,以同一方向生長出兩條鏈。34、雙向復(fù)制:從一個(gè)起始點(diǎn)開始,沿著兩個(gè)相反的方向形成兩個(gè)復(fù)制叉,一方向移動(dòng),兩條 DNA 鏈都被作為模板,各生長出兩條新鏈,形成一個(gè)復(fù)制泡,用電子顯微鏡可以觀察到復(fù)制泡的存在。這是原核生物和真核生物 DNA 復(fù)制最主要的形式35、D 環(huán)復(fù)制:又稱取代環(huán)復(fù)制,是線粒體 DNA 的復(fù)制形式。復(fù)制中呈字母 D 形狀而得名。36、DNA 的半不連續(xù)復(fù)制:DNA 在復(fù)制過程中,一條鏈合成是連續(xù)的,而另一條鏈合成是不連續(xù)的,這樣的復(fù)制過程稱為半不連續(xù)合成。37、岡崎片段:DNA 復(fù)制時(shí),以 53方向的母鏈作為模板,子鏈沿 53最初合成長短不一、不連續(xù)核苷酸小片段,最后連接成為完整子鏈,這些小片段稱之為崗崎片段。38、前導(dǎo)鏈:以 35方向 DNA 鏈為模板鏈,子代 DNA 以 53方向連續(xù)合成,稱為前導(dǎo)鏈。39、后隨鏈:以 53方向 DNA 鏈為模板鏈,子代 DNA 以 53方向不連續(xù)合成,形成許多不連續(xù)的岡崎片段,最后連接成一條完整的 DNA 鏈,稱為后隨鏈,又稱后滯鏈。40、引物酶:又稱引發(fā)酶,合成起始引物,引物長度為 10-60 個(gè)核苷酸,E.coli 中是 DnaG蛋白。41、RNA 聚合酶:以一條 DNA 鏈或 RNA 鏈為模板催化由核苷 -5-三磷酸合成 RNA 的酶。促進(jìn) DnaA 活性,促進(jìn)復(fù)制起始。42、端粒:真核生物線性染色體 DNA 的兩端是一種特殊結(jié)構(gòu)稱為端粒 功能:穩(wěn)定染色體末端結(jié)構(gòu),防止染色體末端融合、重組、降解;補(bǔ)償 5末端在切除 RNA 引物后留下的空缺 43、DNA 的損傷:生物體生命過程中 DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)生的任何改變都稱之為 DNA 損傷。44、DNA 修復(fù):是細(xì)胞對 DNA 受損傷后的一種反應(yīng)。主要包括:直接修復(fù)、切除修復(fù)、錯(cuò)配修復(fù)、重組修復(fù)、易錯(cuò)修復(fù)和 SOS 應(yīng)急反應(yīng)45、光修復(fù):光裂合酶能特異地和嘧啶二聚體結(jié)合,在可見光下催化光化合反應(yīng),使環(huán)丁烷環(huán)回復(fù)到兩個(gè)獨(dú)立的嘧啶,這一過程叫光復(fù)活作用。46、應(yīng)急反應(yīng)(SOS 反應(yīng)):許多能造成 DNA 損傷或抑制 DNA 復(fù)制的過程能引起一系列復(fù)雜的誘導(dǎo)效應(yīng),這種效應(yīng)稱為應(yīng)急反應(yīng)(SOS 反應(yīng))47、同義突變:指突變改變了密碼子的組成,但由于密碼子的簡并性沒有改變所編碼的氨基酸序列的突變48、錯(cuò)義突變:指基因突變改變了所編碼氨基酸的序列,不同程度地影響蛋白質(zhì)和酶的活性。49、無義突變:指基因改變使代表某種氨基酸的密碼子變?yōu)榻K止密碼子,導(dǎo)致肽鏈合成過早終止。50、致死突變: 有些錯(cuò)義突變和無義突變嚴(yán)重影響到蛋白質(zhì)活性甚至完全無活性, 從而影響了表現(xiàn)型。51、滲漏突變: 有些錯(cuò)義的產(chǎn)物仍然有部分活性,使表現(xiàn)型介于完全的突變型和野生型之間的中間類型。52、中性突變: 有些錯(cuò)義突變不影響或基本上不影響蛋白質(zhì)活性,不表現(xiàn)出明顯的性狀變化。53、電泳:帶電顆粒在電場的作用下,向著與其電性相反的電極移動(dòng),稱為電泳。54、遷移率:是指帶電顆粒在單位電場下泳動(dòng)的速度。影響遷移率的內(nèi)在因素:(1)樣品所帶靜電荷的多少(2)樣品顆粒大?。?)樣品分子空間構(gòu)象 影響遷移率的外界因素:電場強(qiáng)度 、電泳緩沖液的離子強(qiáng)度 、電泳緩沖液的 pH 值、支持物及其濃度的影響、插入染料的影響 、溫度的影響 、電滲55、DNA 重組:又稱遺傳重組,指 DNA 分子內(nèi)或分子間發(fā)生遺傳信息的重新組合,重組產(chǎn)物叫重組 DNA56、同源重組:又稱一般性重組,指發(fā)生在兩條同源 DNA 分子之間,通過配對、鏈斷裂和再連接,而產(chǎn)生片段交換過程。重組產(chǎn)物稱為重組體57、Holliday 中間體:同源重組中,兩條同源的 DNA 分子經(jīng)過配對、斷裂和再連接,形成的連接分子,稱為 Holliday 中間體58、Chi 位點(diǎn):它是刺激重組的位點(diǎn)。這一位點(diǎn)是由 8 個(gè)堿基組成的非對稱序列59、特異位點(diǎn)重組:指發(fā)生在一個(gè)特定的短 DNA 序列內(nèi),由特異的酶和輔助因子識別和作用的重組。60、單鏈同化:單鏈 DNA 與同源雙鏈 DNA 分子發(fā)生鏈的交換,從而使重組過程中 DNA配對、Holliday 中間體的形成、分支移動(dòng)等步驟得以實(shí)現(xiàn)的過程。61、轉(zhuǎn)座子:基因組上中可以移動(dòng)的 DNA 片段。轉(zhuǎn)座子由基因組的一個(gè)位置轉(zhuǎn)移到另一個(gè)位置的過程叫轉(zhuǎn)座62、反轉(zhuǎn)座子:又稱反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子或反轉(zhuǎn)錄子,是一類在轉(zhuǎn)座過程中需要以 RNA 為中間體,經(jīng)過反轉(zhuǎn)錄過程再分散到基因組中的轉(zhuǎn)座子。生物學(xué)意義:對基因表達(dá)的影響;反轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)基因的重排;反轉(zhuǎn)座子在進(jìn)化中的作用63、轉(zhuǎn)錄:生物體以 DNA 為模板合成 RNA 的過程。 64、反轉(zhuǎn)錄:生物體以 RNA 為模板合成 DNA 的過程。65、剪接:真核生物 RNA 前體去除內(nèi)含子,連接外顯子的過程。66、剪接體:在 mRNA 前體內(nèi)含子的剪接過程中,由多個(gè)核內(nèi)小分子核糖核酸(snRNA)和蛋白質(zhì)組裝形成催化剪接反應(yīng)的復(fù)合體。67、模板鏈:“鏈” 、 “反義鏈” ,指用于轉(zhuǎn)錄的 DNA 單鏈,是合成 RNA 的模板68、編碼鏈:“鏈” 、 “有義鏈” 、 “非模板鏈” ,指模板鏈的對應(yīng) DNA 鏈,堿基序列與mRNA 一致(DNA:T,RNA:U)69、編碼序列 :編碼序列從 AUG 開始以三核苷酸單位閱讀直到出現(xiàn)終止密碼 UGA , UAA 或 UAG 之一。70、RNA 編輯:是指轉(zhuǎn)錄后的 RNA 在編碼區(qū)發(fā)生堿基的插入、丟失或替換等現(xiàn)象。編輯的生物學(xué)意義:(1)改變和補(bǔ)充遺傳信息;(2)增加基因產(chǎn)物的多樣性,是基因調(diào)控的一種方式,有利于進(jìn)化;(3)可能與學(xué)習(xí)和記憶有關(guān)71、反式作用因子:通過擴(kuò)散到與其編碼基因不在同一個(gè) DNA 分子上的靶位置,識別、結(jié)合而調(diào)節(jié)基因表達(dá)的分子。如轉(zhuǎn)錄因子、RNA 聚合酶72、順式作用元件:通常只在原位影響與其處于同一個(gè) DNA 分子上的、物理上緊密相連、被表達(dá)的基因序列。通常不編碼蛋白,多位于基因旁側(cè)或內(nèi)含子中。如啟動(dòng)子、終止子、增強(qiáng)子、操縱基因、MAR73、啟動(dòng)子:位于轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)附近,且為轉(zhuǎn)錄起始所必需,可被 RNA 聚合酶特異性識別、結(jié)合,并起始轉(zhuǎn)錄的一段保守 DNA 序列,其本身不被轉(zhuǎn)錄。74、-10 序列( Pribnow 框) :幾乎所有原核基因的啟動(dòng)子中,在轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游 -10bp 位點(diǎn)區(qū)域都有一個(gè)典型的 6bp 區(qū)域,共有序列為 TATAAT(T80A95T45A60A50T96 )序列,稱為-10 序列或 Pribnow 框。75、- 35 序列(Sextama 框 ):轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游約35bp 處有一段 6bp 區(qū)域,共同序列為 TTGACA(T82T84G78A65C54A45) ,稱為-35 序列(Sextama 框 )76、操縱子:是原核生物在分子水平上基因表達(dá)調(diào)控的單位,由調(diào)節(jié)基因、啟動(dòng)子、操縱基因和結(jié)構(gòu)基因等序列組成。77、增強(qiáng)子:指能使基因轉(zhuǎn)錄頻率明顯增加的 DNA 遠(yuǎn)端調(diào)控序列78、強(qiáng)終止子:無需其他蛋白質(zhì)因子的幫助,而是依靠轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物形成特殊的二級結(jié)構(gòu)就可以終止轉(zhuǎn)錄,這種終止子被稱為內(nèi)部終止子。79、弱終止子:需要在一種蛋白質(zhì)因子 的幫助才能終止,所以又稱為 依賴性終止子。80、結(jié)構(gòu)基因:編碼參與細(xì)胞結(jié)構(gòu)或代謝活動(dòng)的結(jié)構(gòu)蛋白、酶的基因。81、操縱基因:指操縱子中常與啟動(dòng)子相鄰或重疊的序列,被有活性調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合后,影響啟動(dòng)子啟動(dòng)下游結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄,是一類順式作用元件。82、調(diào)節(jié)基因:編碼控制其它基因表達(dá)的蛋白質(zhì)或 RNA 的基因。83、調(diào)節(jié)蛋白:是調(diào)節(jié)基因產(chǎn)物,有活性調(diào)節(jié)蛋白可與操作基因結(jié)合,控制下游結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄。84、效應(yīng)物:調(diào)節(jié)蛋白需要有一個(gè)小分子物質(zhì)結(jié)合并改變其活性,共同調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄,這個(gè)小分子物質(zhì)稱為效應(yīng)物(effector)85、CAP :(降解物活化蛋白)或 CRP(環(huán)腺苷酸受體蛋白)是分子量為 22.5kd 的二聚體86、順反子:遺傳學(xué)將編碼一個(gè)蛋白質(zhì)或多肽的遺傳單位稱為順反子(cistron) 。87、多順反子:原核細(xì)胞中數(shù)個(gè)結(jié)構(gòu)基因常串聯(lián)為一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位,轉(zhuǎn)錄生成的 mRNA 可編碼幾種功能相關(guān)的蛋白質(zhì),為多順反子(polycistron) 。88、單順反子:真核 mRNA 只編碼一種蛋白質(zhì),為單順反子(single cistron) 。 89、遺傳密碼: DNA(或 mRNA)中的核苷酸序列與蛋白質(zhì)中氨基酸序列之間的對應(yīng)關(guān)系稱為遺傳密碼。特點(diǎn):連續(xù)性、簡并性、通用性、變異性、方向性、變偶性90、密碼子:mRNA 上每 3 個(gè)相鄰的核苷酸編碼蛋白質(zhì)多肽鏈中的一個(gè)氨基酸,這三個(gè)核苷酸就稱為一個(gè)密碼子或三聯(lián)體密碼。91、同義密碼子:同一種氨基酸具有兩個(gè)或更多密碼子的現(xiàn)象稱為密碼子的簡并性。對應(yīng)于同一種氨基酸的不同密碼子稱為同義密碼子。92、開放閱讀框架:從 mRNA 5 端起始密碼子 AUG 到 3 端終止密碼子之間的核苷酸序列,按照三聯(lián)體密碼連續(xù)排列編碼一個(gè)蛋白質(zhì)多肽鏈,稱為開放閱讀框架(open reading frame, ORF)。 93、RNA 的再編碼:mRNA 以不同的方式翻譯,改變原來編碼信息,稱為 RNA 的再編碼94、氨基酸的活化:是指氨基酸與 tRNA 相連,形成氨酰-tRNA 的過程。氨基酸的活化在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行。反應(yīng)由氨酰-tRNA 合成酶(又稱氨基酸活化酶)催化。意義:(1)使氨基酸本身被活化,利于下一步形成肽鍵反應(yīng)。 (2)tRNA 可攜帶氨基酸到 mRNA 的指定部位,使氨基酸進(jìn)入到肽鏈合適的位置95、安慰誘導(dǎo)物:又稱義務(wù)誘導(dǎo)物:能高效誘導(dǎo)酶的合成,但不是酶作用底物,與酶底物結(jié)構(gòu)類似的分子96、應(yīng)急反應(yīng):當(dāng)細(xì)菌能源十分缺乏時(shí),幾乎所有的生化反應(yīng)都停止,為生存,細(xì)菌體內(nèi)可立即產(chǎn)生一種應(yīng)急應(yīng)答反應(yīng),關(guān)閉許多基因表達(dá)。97、反式作用因子:通過擴(kuò)散到與其編碼基因不在同一個(gè) DNA 分子上的靶位置,識別、結(jié)合而調(diào)節(jié)基因表達(dá)的分子。如轉(zhuǎn)錄因子、RNA 聚合酶98、順式作用元件:通常只在原位影響與其處于同一個(gè) DNA 分子上的、物理上緊密相連、被表達(dá)的基因序列。通常不編碼蛋白,多位于基因旁側(cè)或內(nèi)含子中。如啟動(dòng)子、終止子、增強(qiáng)子、操縱基因、MAR99、轉(zhuǎn)錄后的加工:是指將各種前體 RNA 分子加工成成熟 RNA 的過程。100、信號序列:所有靶向輸送的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中存在分選信號,主要為 N 末端特異氨基酸序列,可引導(dǎo)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞的適當(dāng)靶部位,這一序列稱為信號序列 。 101、分子伴侶:分子伴侶是細(xì)胞一類保守蛋白質(zhì),可識別肽鏈的非天然構(gòu)象,促進(jìn)各功能域和整體蛋白質(zhì)的正確折疊。102、應(yīng)急反應(yīng)(strigent response):當(dāng)細(xì)菌能源十分缺乏時(shí),幾乎所有的生化反應(yīng)都停止,為生存,細(xì)菌體內(nèi)可立即產(chǎn)生一種應(yīng)急應(yīng)答反應(yīng),關(guān)閉許多基因表達(dá)。103、管家基因:在生物體幾乎所有的細(xì)胞中始終表達(dá)的基因,表達(dá)產(chǎn)物大致以恒定水平始終存在于細(xì)胞內(nèi),是維持細(xì)胞最低限度功能所不可缺少的基因, 是細(xì)胞生存所必須的。這類基因的表達(dá)稱為組成型表達(dá)104、奢侈基因:只在特定的細(xì)胞類型或細(xì)胞生長發(fā)育特定時(shí)間表達(dá)的基因。這類基因的表達(dá)稱為可調(diào)節(jié)表達(dá)105、核基質(zhì)結(jié)合區(qū):30nm 染色質(zhì)纖維以特定的 DNA 序列結(jié)合在核基質(zhì)上,這些特定DNA 序列稱為 MAR,它使纖維狀的染色質(zhì) DNA 形成數(shù)以萬計(jì)的環(huán)狀結(jié)構(gòu)域。106、絕緣子:是一類特殊的順式作用元件,阻止激活或阻遏作用在染色質(zhì)上的傳遞,使染色質(zhì)活性限定于結(jié)構(gòu)域內(nèi)107、座位控制區(qū)(LCR):是一種遠(yuǎn)距離順式元件,為相連接的基因提供了一個(gè)可以活化的染色體環(huán)境,可能是 DNaseI 的超敏感位點(diǎn)和許多轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn),可促進(jìn)基因轉(zhuǎn)錄108、CpG 島:真核生物基因組中,常見富含的 CpG 的區(qū)域,稱為 CpG 島,常位于轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)及其附近,其甲基化程度直接影響轉(zhuǎn)錄活性。109、DNA 甲基化:真核生物 DNA 雙螺旋中,胞嘧啶核苷的嘧啶環(huán) 5 位甲基化,并與其上的鳥嘌呤形成 mCpG,是 DNA 甲基化的唯一形式 110、高速泳動(dòng)蛋白(HMG):活性染色質(zhì)中含有兩種高度豐富的小分子非組蛋白,這些蛋白具有異常高的電荷,在凝膠電泳中移動(dòng)快,所以稱為高速泳動(dòng)蛋白(HMG) 111、小衛(wèi)星 DNA 序列:又稱可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù),重復(fù)單位 6-40bp,每個(gè)拷貝長度 0.1-20Kb(6-100 次) ,分為位于鄰近染色體端粒的區(qū)域(端粒家族) ,以及分散在基因組的多個(gè)位置上(高變家族) ,一般沒有轉(zhuǎn)錄活性。112、增強(qiáng)子:指能使基因轉(zhuǎn)錄頻率明顯增加的 DNA 遠(yuǎn)端調(diào)控序列。二、填空題1、原核生物復(fù)制方式: 型復(fù)制、滾環(huán)復(fù)制、 D 環(huán)復(fù)制 2、真核生物復(fù)制方式:多起點(diǎn)雙向復(fù)制3、真核生物基因組組分包括:核內(nèi)染色體 DNA、核外細(xì)胞器 DNA(線粒體 DNA、葉綠體 DNA) 、質(zhì)粒4、 真核生物 DNA 序列類型:單拷貝序列、低度重復(fù)序列、中度重復(fù)序列、高度重復(fù)序5、 PCR 體系:引物、DNA 聚合酶 模板 dNTP Mg 2+濃度6、反式作用因子結(jié)構(gòu)包括:DNA 結(jié)合結(jié)構(gòu)域、轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域、二聚體結(jié)構(gòu)域,其中,DNA 結(jié)構(gòu)域包括:螺旋-轉(zhuǎn)角- 螺旋(HTH)結(jié)構(gòu)基序、鋅指( ZF)結(jié)構(gòu)基序、螺旋-突環(huán)-螺旋(HLH )結(jié)構(gòu)基序、亮氨酸拉鏈(LZ)結(jié)構(gòu)基序7、DNA 的提取的一般步驟1、準(zhǔn)備生物材料 2、裂解細(xì)胞 3、去除雜質(zhì) 4、沉淀 DNA 5、檢測 6、保存三、簡答論述題1、增強(qiáng)子為什么具有遠(yuǎn)距離作用呢?答:成環(huán)模型:認(rèn)為增強(qiáng)子通過一些蛋白質(zhì)因子的介導(dǎo)可與遠(yuǎn)距離的啟動(dòng)子結(jié)合,使DNA 形成了一個(gè)環(huán),從而促使遠(yuǎn)距離的啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄。成環(huán)模型也符合染色體的側(cè)環(huán)模型和核基質(zhì)的調(diào)控理論,也就是說 DNA 的特殊序列可以和核基質(zhì)結(jié)合形成側(cè)環(huán),在某些細(xì)胞中有些基因通過環(huán)的形成讓增強(qiáng)子區(qū)和啟動(dòng)子區(qū)相互靠近,使這些基因能得以表達(dá)??磥憝h(huán)的形成主要是兩種因素:某些蛋白質(zhì)因子的介導(dǎo); 和核基質(zhì)特異的結(jié)合2、 病毒基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)答:a 與細(xì)菌相比,病毒基因組很小,大小相差較大。b 病毒基因組由 DNA 組成,也可以由 RNA 組成,每種病毒顆粒中只含有一種核酸,核酸結(jié)構(gòu)可以是單鏈或雙鏈、環(huán)狀或線狀。c 有重疊基因。d 大部分是用來編碼蛋白質(zhì)的,基因間的間隔序列較短。e 功能上相關(guān)的基因集中成簇,在基因組的特定的部位,形成一個(gè)功能單位或轉(zhuǎn)錄單元,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為多順反子,之后經(jīng)過簡單加工。f 噬菌體的基因是連續(xù)的;而真核細(xì)胞病毒的基因是不連續(xù)的,具有內(nèi)含子。3、 細(xì)菌染色體基因組結(jié)構(gòu)的一般特點(diǎn)答: 細(xì)菌的染色體基因組通常僅由一條環(huán)狀雙鏈 DNA 分子組成,染色 體相對聚 集在一起,形成一個(gè)較為致密的區(qū)域,稱為類核。 只有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn),數(shù)個(gè)相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起,受同一調(diào)控區(qū)調(diào)節(jié),合成多順反子 mRNA。 具有操縱子結(jié)構(gòu)。 編碼蛋白質(zhì)的基因都是單拷貝,但 rRNA 基因是多拷貝。 和病毒的基因組相似,非編碼的 DNA 部份所占比例比真核細(xì)胞基因組少得多。 基因組 DNA 中具有多種調(diào)控區(qū)如復(fù)制起始區(qū)、復(fù)制終止區(qū)、轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)區(qū)和終止區(qū)等,還有重復(fù)序列,比病毒基因組復(fù)雜。 具可移動(dòng)的 DNA 序列4、 真核生物基因組的特點(diǎn)答: 真核生物的基因組比較龐大,具有多個(gè)復(fù)制起始點(diǎn)。 一個(gè)基因組包括多條線狀染色體,每條染色體 DNA 上有多個(gè)復(fù)制起始點(diǎn)。 真核生物的基因組 DNA 與蛋白質(zhì)結(jié)合形成染色質(zhì)的復(fù)雜高級結(jié)構(gòu),儲存于細(xì)胞核內(nèi)。 真核細(xì)胞被核膜分隔成細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì),在基因表達(dá)中,轉(zhuǎn)錄和翻譯在時(shí)間和空間上被分隔,不偶聯(lián)。 真核生物基因組存在著許多重復(fù)序列,重復(fù)序列單位長度不一,重復(fù)程度各異。 真核生物的蛋白質(zhì)基因一般以少拷貝形式存在,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子。 存在著可移動(dòng)的 DNA 序列。 大多數(shù)真核生物基因含內(nèi)含子,為斷裂基因。5、滾環(huán)復(fù)制特點(diǎn):(1)共價(jià)延伸;(2)模板鏈和新合成的鏈分開;(3)不需 RNA 引物,在正鏈 3OH 上延(4)只有一個(gè)復(fù)制叉;(5)形成多聯(lián)體;6、D 環(huán)復(fù)制的特點(diǎn):D 環(huán)復(fù)制的特點(diǎn)是: 復(fù)制起始點(diǎn)不在雙鏈 DNA 同一位點(diǎn),內(nèi)、外環(huán)復(fù)制有時(shí)序差別。7、DNA 聚合酶反應(yīng)特點(diǎn) 以 4 種 dNTP 作為底物 反應(yīng)需要接受模板指導(dǎo) 鏈延伸需要引物 3-羥基存在 新鏈延伸方向 5 3 產(chǎn)物 DNA 極性與模板相對8、DNA 聚合酶 I 的結(jié)構(gòu)DNA 聚合酶 I 有 5 個(gè)結(jié)合位點(diǎn):(1) 模板結(jié)合位點(diǎn)(2) 引物結(jié)合位點(diǎn)(3) 底物 dNTP 結(jié)合位點(diǎn)(4) 53外切酶結(jié)合位點(diǎn)(5) 3 5校正位點(diǎn)9、DNA 聚合酶 I 的主要活性和生理功能5 3聚合活性: 催化條件:4dNTP、Mg2+、模板 DNA(雙鏈) 、RNA 引物;可用與 DNA 測序3 5外切活性:無 dNTP 是外切活性,有 dNTP 時(shí),校正作用5 3外切活性 內(nèi)切酶活性生理功能:滯后鏈合成中除去 RNA 引物并添補(bǔ)其留下的缺口;參與 DNA 損傷修復(fù) 10、DNA 聚合酶 II 的主要活性5 3聚合活性3 5外切活性生理功能:修復(fù)中起作用11、DNA 聚合酶 III 的主要活性多亞基酶5 3聚合活性3 5外切活性生理功能:是體內(nèi) DNA 復(fù)制的主要承擔(dān)者12、DNA 的復(fù)制過程1、復(fù)制的起始DNA 解旋、解鏈,形成復(fù)制叉:拓?fù)洚悩?gòu)酶、解旋酶及單鏈 DNA 結(jié)合蛋白RNA 引物合成:依賴于單鏈模版,由引物酶催化合成一小段 RNA 引物特點(diǎn):原核環(huán)形 DNA 通常只有一個(gè)起點(diǎn),雙向復(fù)制;真核線性 DNA 通常多個(gè)起始點(diǎn),形成多個(gè)復(fù)制叉2、復(fù)制的延長子鏈延長:引物合成后,由 polII 催化,在引物 3-OH 末端逐一添加與模板鏈對應(yīng)互補(bǔ)的脫氧核苷三磷酸半不連續(xù)合成:A.領(lǐng)頭鏈:鍵的延長方向與解鏈方向相同,為連續(xù)合成B.隨從鏈:鍵的延長方向與解鏈方向相反,為不連續(xù)合成,產(chǎn)生岡崎片段3、復(fù)制的終止水解引物及填補(bǔ)空隙:岡崎片段合成后,由 Pol I 水解去除 RNA 引物,并填補(bǔ)留下的空隙連接酶連接岡崎片段形成完整雙鏈 DNA 分子:空隙填補(bǔ)后,DNA 片段與片段之間的一個(gè)缺口由 DNA 連接酶催化連接,從而產(chǎn)生完整的雙鏈 DNA 分子13、端粒酶的生物學(xué)意義(1)細(xì)胞水平的老化,可能與端粒酶的活性下降有關(guān)。(2)基因突變、腫瘤形成,端粒也可表現(xiàn)缺失,融合或序列縮短等現(xiàn)象。(3)研究端粒的變化是目前腫瘤研究中的一個(gè)新領(lǐng)域。14、DNA 重組的意義1、迅速增加遺傳群體的多樣性2、與 DNA 修復(fù)有關(guān)3、可調(diào)節(jié)某些基因的表達(dá)15、轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座的特征 轉(zhuǎn)座不依賴靶序列的同源性 轉(zhuǎn)座后靶序列重復(fù) 轉(zhuǎn)座子的插入具有專一性轉(zhuǎn)座具有排他性轉(zhuǎn)座具有極性效應(yīng)活化臨近的沉默基因區(qū)域性優(yōu)化16、轉(zhuǎn)座子的應(yīng)用1、用于難以篩選的基因的轉(zhuǎn)移2、作為基因定位的標(biāo)記3、篩選插入突變4、構(gòu)建特殊菌株5、克隆難以進(jìn)行表型鑒定的基因 17、RNA 轉(zhuǎn)錄的一般特點(diǎn) 具有選擇性,即只對基因組或 DNA 分子中的編碼區(qū)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄 開始于特定位點(diǎn),并在特定的終點(diǎn)處終止 催化轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的是 RNA 聚合酶 被轉(zhuǎn)錄的 DNA 雙鏈中只有其中一股模板鏈(反義鏈)作為 RNA 合成的模板,進(jìn)行“不對稱”轉(zhuǎn)錄 啟動(dòng)子控制起始 底物為 4 種 5-核糖核苷三磷酸 合成方向 5318、原核生物啟動(dòng)子的特征結(jié)構(gòu)典型:都含保守的識別序列(R)、結(jié)合序列(B)、起始位點(diǎn)(I)以及間隔長度;直接和聚合酶相結(jié)合;常和操縱子相鄰;常位于基因的上游;19、真核 RNA 聚合酶的一般特點(diǎn) 結(jié)構(gòu)非常復(fù)雜結(jié)構(gòu)具有相似性3 類 RNA 聚合酶都有幾種共同的亞基:根據(jù)其結(jié)構(gòu)與功能,可以分為核心亞基、共同亞基和非必須亞基。20、原核生物和真核生物的 rRNA 基因差異原核生物無 5.8S rRNA5S rRNA 編碼基因與其它 rRNA 編碼基因關(guān)系不同重復(fù)次數(shù)不同21、帽子結(jié)構(gòu)的功能 (1) 對翻譯起識別作用-為核糖體識別 RNA 提供信號,Cap0 的全部都是識別的重要信號, Cap1,2 的甲基化能增進(jìn)識別 (2) 增加 mRNA 的穩(wěn)定性,使 5端免遭外切核酸酶的攻擊(3) 有助于 mRNA 越過核膜,進(jìn)入胞質(zhì)22、poly(A) 的功能 (1) 可能與核質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān)(2) 增強(qiáng) mRNA 穩(wěn)定性 (3) 增強(qiáng)可翻譯能力 23、剪接機(jī)制剪接體套索模型 第一次轉(zhuǎn)酯,內(nèi)含子形成套索 第二次轉(zhuǎn)酯,外顯子 1、2 連接、套索狀內(nèi)含子釋放 拼接體解體與套索降解24、翻譯(蛋白質(zhì)的生物合成):以氨基酸為原

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