《細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)》PPT課件.ppt

T-SPOT.TB診斷結(jié)核感染 臨床應(yīng)用進(jìn)展,結(jié)核的現(xiàn)狀,結(jié)核病是全球嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題之一。據(jù)WHO統(tǒng)計(jì)，全球約有20億人感染結(jié)核分枝桿菌，每年有約200萬人死于結(jié)核。 我國(guó)是世界上22個(gè)結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家之一，結(jié)核感染導(dǎo)致的死亡人數(shù)是其他傳染性疾病總死亡人數(shù)的2倍以上。,結(jié)核的傳統(tǒng)診斷手段,結(jié)核菌素皮試： 低敏感性：免疫力低下人群中其敏感性大大降低。 低特異性：與卡介苗接種和其他環(huán)境分枝桿菌有交叉，易造成“假陽性”結(jié)果。 細(xì)菌學(xué)檢查：常規(guī)培養(yǎng)：2月；快速培養(yǎng)：1周； 陽性率取決于采集標(biāo)本中細(xì)菌數(shù)量，不利于早期診斷。 病理學(xué)檢查：陽性率低，對(duì)取材標(biāo)本有較高要求，有創(chuàng)傷，對(duì)肉芽腫性病變需進(jìn)一步鑒別。,基于T淋巴細(xì)胞檢測(cè)結(jié)核感染的原理,結(jié)核感染的免疫應(yīng)答反應(yīng)以細(xì)胞免疫為主，結(jié)核感染后體內(nèi)長(zhǎng)期存在抗原特異性的記憶性T細(xì)胞 當(dāng)再次遇到抗原刺激時(shí)，能迅速活化增殖，釋放r干擾素 r干擾素是結(jié)核分枝桿菌感染后機(jī)體免疫應(yīng)答中最重要的細(xì)胞因子,基于T淋巴細(xì)胞檢測(cè)結(jié)核感染的原理,T-SPOT.TB技術(shù)： 利用結(jié)核桿菌感染者外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）中存在結(jié)核特異性T細(xì)胞，這些淋巴細(xì)胞在受到結(jié)核特異 抗原刺激后分泌r干擾素而設(shè)計(jì)的T細(xì)胞免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)。 檢測(cè)外周血中受結(jié)核特異抗原刺激釋放r干擾素的T淋巴細(xì)胞，經(jīng)酶聯(lián)免疫顯色后，通過ELISPOT分析系統(tǒng) 對(duì)斑點(diǎn)進(jìn)行計(jì)數(shù)，1個(gè)斑點(diǎn)代表一個(gè)細(xì)胞，計(jì)算出抗原特異性細(xì)胞的頻率。,基于T淋巴細(xì)胞檢測(cè)結(jié)核感染的原理,包,基于T淋巴細(xì)胞檢測(cè)結(jié)核感染的原理,基于T淋巴細(xì)胞檢測(cè)結(jié)核感染的原理,基于T淋巴細(xì)胞檢測(cè)結(jié)核感染的原理,空白對(duì)照孔內(nèi)斑點(diǎn)數(shù)小于10且陽性對(duì)照孔內(nèi)斑點(diǎn)數(shù)大于20時(shí)視為試驗(yàn)有效 T-SPOT.TB試驗(yàn)結(jié)果用每106 PBMCs中斑點(diǎn)形成細(xì)胞（SFCs）的數(shù)目來描述，即SFCs/106 PBMCs,T-SPOT.TB的臨床意義,T-SPOT.TB高靈敏度,T-SPOT.TB的臨床意義,T-SPOT.TB的臨床意義,T-SPOT.TB高特異性 ESAT-6CFP 10均來自結(jié)核分枝桿菌基因組RD1區(qū)域 僅結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群（人型、牛型、非洲型）存在 RD1區(qū)基因 卡介苗和大多數(shù)環(huán)境分枝桿菌缺失RD1區(qū)基因 T-SPOT.TB不會(huì)受卡介苗接種影響,T-SPOT.TB的臨床意義,基于T淋巴細(xì)胞檢測(cè)結(jié)核感染的原理,T-SPOT.TB在診斷結(jié)核感染方面具有良好的敏感性和特異性，在現(xiàn)有結(jié)核診斷方法存在缺陷的今天， T-SPOT.TB 可以給臨床診斷提供參考。 基于結(jié)核抗原特異性T細(xì)胞向病變部位集中的特點(diǎn)， T-SPOT.TB的檢測(cè)物已