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文檔簡介

腎活檢組織光鏡和免疫熒光標本的制備及檢查,大連市中心醫(yī)院腎內科 于曉霞,前 言,光鏡、免疫熒光、電鏡觀察腎活檢組織結構對診斷各種類型的腎小球疾病有重要意義 標本處理及制片質量的好壞，與診斷的難易及準確與否有著極為密切的關系 必須重視標本制備中的每個細小環(huán)節(jié),準備工作,生理鹽水浸透紗布（潮濕擰不出水） 紗布及編號的膠布置培養(yǎng)皿備用 清潔5ml小瓶，加光鏡固定液3ml（10的中性福爾馬林溶液），蓋塞緊后備用 清潔5ml小瓶內加冷電鏡固定液3ml置冰瓶（4%戊二醛）,腎活檢標本的初步處理,取材判斷,皮質組織 皮髓交界組織 皮質-髓質-皮質組織 僅取得髓質組織則為取材不成功,取材判斷,判斷已取組織：腎組織，肌肉、脂肪、結締組織等 用解剖顯微鏡或放大鏡判斷腎組織部位（皮質和髓質，有無腎小球），及時與術者聯(lián)系 腎皮質色淡，見分布不規(guī)則，朦朧的紅色小點（腎小球）。隨經驗積累，可肉眼判定 立即置腎組織于蠟板上，迅速測量其長度（cm），記錄 、分割，迅速固定 取標本部位、量重要。如無腎小球或皮質1 cm，考慮再次穿刺,標本分切法,取組織長1.5cm2.0cm最佳（1次） 小鑷子將組織輕置蠟板上，鏡下觀察、量長度 銳利刀片切割組織1mm、2mm及4mm數(shù)段 先供電鏡標本，要求皮質1mm（腎小球1個） 其次免疫病理，需組織約2mm（腎小球35個） 余組織供光鏡（腎小球10個）,標本分切法,腎活檢穿刺組織的分取 LM：光鏡；IF：免疫熒光；EM：電鏡,標本的處理,光鏡 分切后的組織平放蠟板上（勿扭曲） 小鑷子沾少許光鏡固定液于組織表面，約30 組織稍硬后，再將整條組織放入固定液內（這樣固定的組織平整、不易彎曲，便于切出完整的切片）,標本的處理,免疫熒光及免疫酶標 分切后的組織迅速置預冷的培養(yǎng)皿內的濕紗布中 置冰瓶即送至恒溫冷凍切片機內（2d,標本的處理,電鏡 將分切后的腎組織即浸4%的冷戊二醛固定液中，置冰瓶內送至電鏡室,注意事項,短時完成觀察和分切標本，注意保持腎組織濕潤，切勿使其干涸 解剖顯微鏡光源不宜太強，否則觀察組織易干涸，不易看清腎小球 免疫熒光用的腎組織必須避免接觸固定液，尤其含酒精固定液（避免影響冰凍切片結果）；電鏡和光鏡固定液不得互相混淆 動作輕柔夾取未固定組織，勿牽扯組織，避免人為因素造成組織細胞變形,腎活檢標本光鏡檢查,HE,PAS,PASM,Masson,腎活檢標本免疫熒光檢查,MN-IgG,IgAN-IgA,LN-IgM,免疫熒光,電 鏡,常用染色,HE,PAS,Masson,PAM-Masson,剛果紅,油紅“O”

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