二十九章人乳頭瘤病毒.ppt

第二十九章 人乳頭瘤病毒 (Human Papillomavirus, HPV),是乳多空病毒科（Papovaviridae）、乳頭瘤病毒屬的一個(gè)種。 引起人皮膚、粘膜的增生性病變，臨床表現(xiàn)為良性疣或乳頭狀瘤。 HPV也是尖銳濕疣（condyloma acminatum，CA）的病原體。 某些型別的HPV可使組織發(fā)生癌變，引起子宮頸癌等。,球形，直徑52-55 nm，20面體對(duì)稱，無(wú)包膜，環(huán)狀dsDNA，3個(gè)基因區(qū)組成 早期區(qū) 含有6 個(gè)ORF E1、E2基因:與病毒復(fù)制轉(zhuǎn)錄調(diào)控有關(guān) E5、E6、E7基因:誘導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)化， 晚期區(qū) 編碼結(jié)構(gòu)蛋白L1和L2 是衣殼的主要蛋白和次要蛋白。 上游調(diào)控區(qū) 復(fù)制起點(diǎn)和調(diào)控元件,一）生物學(xué)性狀,HPV增殖方式獨(dú)特，與上皮細(xì)胞的分化階段相關(guān)，因此不能在常規(guī)組織細(xì)胞中培養(yǎng)。 成熟病毒僅在角質(zhì)細(xì)胞中產(chǎn)生，抗原接觸免疫系統(tǒng)的機(jī)會(huì)少，免疫原性低，易形成持續(xù)感染。,一）生物學(xué)性狀,HPV具有高度的宿主和組織特異性，對(duì)人的皮膚和粘膜上皮細(xì)胞具有特殊的親嗜性，在易感細(xì)胞核內(nèi)增殖形成核內(nèi)嗜酸性包涵體，使感染細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榭张菁?xì)胞。 HPV不能在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中增殖，組織培養(yǎng)也未成功。,一）生物學(xué)性狀,培養(yǎng)特性,二）致病性與免疫性,扁平疣：常由HPV 3和10型引起。 6、11、16、18、31和33等型別為粘膜嗜性HPV，感染泌尿生殖道及口腔。 生殖器疣又稱尖銳濕疣（condylemata acuminata）：性傳播疾病（STD），主要由HPV-6感染所致，也可由HPV-11引起。,77個(gè)血清型，根據(jù)感染部位不同可將HPV分為嗜皮膚性和嗜粘膜性兩大類，兩類之間有一定交叉。,二）致病性與免疫性,某些型別HPV與一些肛門(mén)、生殖器腫瘤發(fā)生密切相關(guān)。根據(jù)HPV的致癌潛力將其分為： 高危型：主要包括HPV 16、18、31、33、45、35、39、51、52和58等型別，其中16、18、33型與子宮頸癌發(fā)生密切相關(guān)； 低危型：主要包括HPV6和11型。,二）致病性與免疫性,三）微生物學(xué)檢查,（一）醋酸白試驗(yàn) （二）細(xì)胞學(xué)檢查 （三）組織病理學(xué)檢查 （四）核酸分子雜交技術(shù) 1. 斑點(diǎn)雜交法 2.原位雜交法 3. DNA印跡法 （五）聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）,防治：加強(qiáng)教育、嚴(yán)格社會(huì)管理 治療: 1. 局部敷藥，如5% 5-咪奎莫特，5% 5-氟尿嘧啶；25%竹葉脂液。 2. 用激光、冷凍、電灼或者手術(shù)去除疣； 3. 局部注射干擾素。 4. 復(fù)發(fā)應(yīng)連續(xù)或者綜合治療。,四）防治原則,第三十一章 狂犬病毒 （Rabies virus）,狂犬病是人畜共患的自然疫原性傳染病，目前尚無(wú)有效的治療方法，一旦發(fā)病，死亡率近乎100%。 狂犬病病毒是一種嗜神經(jīng)性病毒。屬于彈狀病毒科 (Rhabdoviridae)、狂犬病毒屬 (Lyssavirus)。 多種野生動(dòng)物和家畜等可以發(fā)生狂犬病病毒的自然感染與傳播，并且可以通過(guò)咬傷、抓傷或密切接觸等形式感染人類而引起狂犬病。,一）生物學(xué)性狀,形態(tài)與結(jié)構(gòu),子彈頭形狀: 一端鈍圓，另一端扁平，平均大小為130-300 nm60-85 nm 核酸：-ssRNA RNA基因組編碼5種蛋白:3-N, P, M, G, L-5 有一層磷脂層包被，包膜上嵌有釘狀突起,在易感動(dòng)物或人的中樞神經(jīng)細(xì)胞、主要是大腦海馬回的錐體細(xì)胞中增殖時(shí)，可以在胞質(zhì)內(nèi)形成一個(gè)或多個(gè)、圓形或橢圓形、直徑為20-30nm的嗜酸性包涵體，稱內(nèi)基小體（Negri body）。,培養(yǎng)特性,一）生物學(xué)性狀,糖蛋白G: 病毒表面，刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體、血凝抑制抗體和細(xì)胞免疫應(yīng)答； 核蛋白N：病毒核心，屬特異性抗原，能夠以核蛋白(RNP)的形式誘生保護(hù)性的細(xì)胞免疫應(yīng)答，但不能刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體。,主要抗原,一）生物學(xué)性狀,野毒株（wild strain）或街毒株（street strain）: 從自然感染的動(dòng)物體內(nèi)分離到的病毒，潛伏期長(zhǎng)，毒力強(qiáng) 固定毒株（fixed strain）： 將野毒株接種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腦內(nèi)，并連續(xù)傳50代以上獲得的潛伏期為4-6天的毒株，潛伏期短，毒力弱。,變異,一）生物學(xué)性狀,病毒抵抗力不強(qiáng)。 對(duì)熱敏感，60 經(jīng)30 min或100 2 min即可滅活。 易被強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、乙醇、乙醚等滅活。 肥皂水、離子型或非離子型去垢劑亦有滅活作用。,抵抗力,一）生物學(xué)性狀,主要是病犬（80-90%），其次是由貓和狼。發(fā)達(dá)國(guó)家的野生動(dòng)物如狐貍、食血蝙蝠、臭鼬和浣熊等逐漸成為重要傳染源。隱性感染的犬、貓等動(dòng)物亦有傳染性。 患病動(dòng)物唾液中含有大量的病毒，于發(fā)病前5d即具有傳染性,傳染源,二）致病性與免疫性,病毒主要通過(guò)被咬傷、抓傷的皮膚損傷處進(jìn)入人體。粘膜也是病毒的侵入門(mén)戶，如患病動(dòng)物的唾液污染眼結(jié)膜等，也可發(fā)病。,傳播途徑,二）致病性與免疫性,狂犬病的傳播,發(fā)病機(jī)制,人被病犬咬傷 病毒隨犬唾液經(jīng)傷口進(jìn)入人體 （病毒在入侵部位的肌細(xì)胞中增殖） 通過(guò)神經(jīng)肌肉接頭侵入外周神經(jīng) 細(xì)胞-細(xì)胞間傳遞形式 神經(jīng)節(jié)直至中樞神經(jīng)系統(tǒng)（腦組織中病毒迅速增殖擴(kuò)散） 沿傳出神經(jīng)傳至唾液腺及其他組織。,二）致病性與免疫性,laboratory diagnosis dogs and cats in a rabies endemic area should beheld for 10 days for observation Histopathology : Negri bodies Rapid virus antigen detection therapy wound treatment passive immunization horse anti-rabies serum human rabies immune globulin active immunization :inactivated vaccine,犬患狂犬病按癥狀分為狂暴型和麻痹型兩種： 狂暴型分前驅(qū)期、興奮期、麻痹期； 麻痹型病犬以麻痹癥狀為主，興奮期極短或無(wú)。犬狂犬病整個(gè)病程不超過(guò)5-6 d。 病貓以狂暴型為多，病程較短，癥狀與犬相似。因其與人接觸密切，咬傷人的危險(xiǎn)性甚大。,二）致病性與免疫性,前驅(qū)期 發(fā)熱、頭痛、乏力、周身不適等癥狀，對(duì)痛、聲、光等刺激較敏感，并有咽喉緊縮感。約5080%病人傷口部位及其附近有麻木或蚊走感； 興奮期或痙攣期 處于興奮狀態(tài)，如極度恐懼、煩燥，對(duì)水聲、風(fēng)等刺激非常敏感，易于引起發(fā)作性咽肌痙攣、呼吸困難等。部分患者出現(xiàn)特殊的恐水癥狀，在飲水、見(jiàn)水、流水聲或談及飲水時(shí)，可引起嚴(yán)重咽喉肌痙攣，稱為“恐水癥”（hydrophobia）。隨后，部分病人出現(xiàn)精神失常、定向力障礙、幻覺(jué)、譫妄等。病程進(jìn)展很快； 麻痹期 痙攣減少或停止，出現(xiàn)弛緩性癱瘓，神志不清，最終因呼吸麻痹和循環(huán)衰竭而死亡。,二）致病性與免疫性,典型臨床表現(xiàn),體液免疫：感染后機(jī)體產(chǎn)生中和抗體。有中和游離狀態(tài)的病毒、阻斷病毒進(jìn)入神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的作用。 細(xì)胞免疫：殺傷性T淋巴細(xì)胞特異性地作用于病毒的蛋白抗原，引起病毒溶解；單核細(xì)胞產(chǎn)生的IFN和IL-2具有抑制病毒復(fù)制和抵抗病毒攻擊的作用。,免疫性,二）致病性與免疫性,(一 )標(biāo)本直接檢查 1顯微鏡檢查內(nèi)基小體 2. 抗原檢查 （1）免疫熒光法 （2）免疫酶法 （3）斑點(diǎn)免疫結(jié)合法（DIA） 3核酸檢測(cè)：用RT-PCR法檢測(cè)標(biāo)本中狂犬病病毒RNA。,三）微生物學(xué)檢查法,（二）分離培養(yǎng) （三）抗體檢測(cè) （四）捕捉動(dòng)物觀察,捕捉消滅野犬，加強(qiáng)家犬的管理和普及接種犬用狂犬疫苗是預(yù)防狂犬病的重要措施。 人被患病動(dòng)物咬傷、抓傷或其他帶毒的實(shí)驗(yàn)用具傷害皮膚和肌肉時(shí)，應(yīng)采取妥善處理傷口和特異性防治相結(jié)合的措施。,四）防治原則,傷口處理 立即用20%肥皂水、清水充分沖洗數(shù)分鐘，然后用5%碘酒燒灼傷口。若傷口過(guò)深，可作清創(chuàng)術(shù)。再用3%H2O2溶液，0.1%高錳酸鉀或0.1%新潔爾滅處理。最后傷口周圍用抗狂犬病病毒免疫球蛋白作浸潤(rùn)性注射。劑量為40 IU/kg。,四）防治原則,預(yù)防接種 接種狂犬疫苗是預(yù)防發(fā)病的重要措施。即所謂的預(yù)防性治療。由于狂犬病的潛伏期長(zhǎng)，從被咬傷到發(fā)病一般經(jīng)過(guò)幾十天或幾個(gè)月，在此期間盡早接種疫苗可免于發(fā)病。 嚴(yán)重咬傷者，除應(yīng)給予高效價(jià)免疫血清進(jìn)行被動(dòng)免疫外，仍需要接種狂犬疫苗，可收到更佳效果。,四）防治原則,第三十二章 朊粒（prion）,傳染性蛋白粒子 (proteinaceous infectious particle) 個(gè)體微小(300 nm)，不含核酸，構(gòu)象異常的蛋白酶抗性蛋白，稱為朊蛋白(PrP)。 對(duì)各種理化作用的抵抗力強(qiáng)，具有傳染性。 傳染性海綿狀腦病(transmissible spongiform encephalopathies, TSEs)的病原體。,是一種不含核酸和脂類的疏水性糖蛋白。 細(xì)胞朊蛋白(cellular isoform of PrP, PrPC)： 正常人和動(dòng)物的神經(jīng)細(xì)胞編碼的一種糖基化膜蛋白，分子量為33-35103，稱為PrP33-35，命名PrPC，它對(duì)蛋白酶、去污劑敏感。 羊瘙癢病朊蛋白(scrapie isoform of PrP, PrPSC)： 分子量為27-30103，稱為PrP27-30，能抵抗蛋白酶的消化作用。 PrPC和PrPSC的一級(jí)結(jié)構(gòu)完全相同，但其空間結(jié)構(gòu)不同,一）生物學(xué)性狀,PrPc和PrPsc主要區(qū)別,對(duì)理化因素的抵抗力強(qiáng) 對(duì)甲醛、乙醇、蛋白酶和放射性核素等具有抵抗力 消毒常用5%次氯酸鈉或2 mol/L的氫氧化鈉浸泡手術(shù)器械2 h，高壓滅菌需用202 kPa、134 處理1 h，以徹底滅活朊粒,一）生物學(xué)性狀,抵抗力,共同特征：潛伏期長(zhǎng)（可達(dá)數(shù)年至數(shù)十年之久）一旦發(fā)病即呈慢性進(jìn)行性發(fā)展，最終死亡。 病理特點(diǎn)：朊粒致中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化性病變，大腦和小腦的神經(jīng)細(xì)胞融合、消失，形成多數(shù)小空泡并伴有星狀膠質(zhì)細(xì)胞增生，出現(xiàn)海綿狀改變?yōu)樘卣鳎∽儾课粺o(wú)炎癥反應(yīng)，而是由朊粒蛋白（PrP）大量堆積在神經(jīng)組織里，形成淀粉樣斑塊,二）致病性與免疫性,腦組織海綿樣改變，空泡形成,臨床表現(xiàn)：癡呆、共濟(jì)失調(diào)、震顫等中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。 致病機(jī)制：未明。目前認(rèn)為，PrPC轉(zhuǎn)變?yōu)镻rPSC是疾病發(fā)生的基本條件，PrPSC在中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞內(nèi)聚集而導(dǎo)致疾病的發(fā)生。,二）致病性與免疫性,人和動(dòng)物prion病,normal,在歐洲已流行了近300年（第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的TSE）,感染動(dòng)物表現(xiàn)為消瘦、步態(tài)不穩(wěn)、脫毛、麻痹等，因病羊由于瘙癢而常在圍欄上摩擦身體而得名，病死率極高。,1. 羊瘙癢病 (scrapie of sheep and goat),俗稱瘋牛病(mad cow disease)，1986年首次在英國(guó)報(bào)道。該病潛伏期4-5 y，發(fā)病初期表現(xiàn)為體質(zhì)變差，體重減輕，產(chǎn)奶量下降等非特異性癥狀。隨后神經(jīng)系統(tǒng)癥狀逐步明顯，出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)失調(diào)、震顫等，由于病牛常表現(xiàn)出感覺(jué)過(guò)敏、恐懼甚至狂亂，因此俗稱“瘋牛病”。,2. 牛海綿狀腦病 (bovine spongiform encephalopathy, BSE),3. 顫抖病 （Kuru Disease）,病人小腦受損，產(chǎn)生共濟(jì)失調(diào)和震顫。“Kuru”一詞是當(dāng)?shù)胤窖?，用?lái)形容本病顫抖和跳動(dòng)的特征 Kuru病的潛伏期為5-30年，早期癥狀為運(yùn)動(dòng)失調(diào)、顫抖，晚期出現(xiàn)癡呆。病程一般不超過(guò)1年，大多在6-9個(gè)月內(nèi)死亡 當(dāng)?shù)赜凶诮绦允呈瑦毫?xí)，這是感染本病的原因,Kuru disease,4. 克雅?。–JD),又稱傳染性癡呆病或早老性癡呆病，是一種致命性人海綿狀腦病 潛伏期可達(dá)數(shù)十年，開(kāi)始出現(xiàn)精神、感覺(jué)方面的癥狀，隨后出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)失調(diào)，晚期出現(xiàn)肌肉痙攣并伴有癡呆，多在5-12個(gè)月內(nèi)死亡 現(xiàn)已證實(shí)此病是由朊粒蛋白PrPSC大量沉積在神經(jīng)組織里，形成淀粉樣斑塊，引起致死性中樞神經(jīng)系統(tǒng)慢性退化性疾病,有傳染型、家族遺傳型和散發(fā)型等三型 傳染型：占10%，主要由醫(yī)源性傳播，如角膜移植和硬腦膜移植等，或使用污染的手術(shù)器械，或使用人垂體制備的生長(zhǎng)激素等，多于手術(shù)后18個(gè)月發(fā)病 家族遺傳型：占10-15%， GSS綜合征:主要臨床特征是小腦運(yùn)動(dòng)失調(diào)，眼球震顫和步態(tài)異常，后期出現(xiàn)癡呆； 致死性家族性失眠:是一種特別罕見(jiàn)的遺傳性失調(diào)，臨床特點(diǎn)是睡眠紊亂與智力下降 散發(fā)型：最為常見(jiàn)，占75-80%,一種新型的人類傳染性海綿狀腦病，1996年由英國(guó)CJD監(jiān)測(cè)中心首次報(bào)導(dǎo)。本病與典型的CJD在好發(fā)年齡、臨床特征、腦電圖和病理等方面有明顯變化，因此被認(rèn)為是新變種(new variant CJD,v-CJD)。,5. 克-雅病變種 (variant CJD, v-CJD),1.免疫組化技術(shù) 是目前確認(rèn)TSE的有效手段。 2.免疫印跡技術(shù) 蛋白印跡(Western blotting)檢測(cè)PrPSC是一種簡(jiǎn)單而敏感的診斷方