DB21T 1735-2009 馬鈴薯脫毒種薯生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程.docVIP

DB21 遼 寧 省 地 方 標 準 DB21/T17352009馬鈴薯脫毒種薯生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程2009-07-27發(fā)布 2009-09-01實施遼寧省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局 發(fā)布 1 范圍本規(guī)程規(guī)定了馬鈴薯脫毒苗的培育、繁殖，各級脫毒種薯生產(chǎn)的產(chǎn)地環(huán)境、栽培技術(shù)、收獲、貯藏等技術(shù)操作規(guī)程。本規(guī)程適用于遼寧省馬鈴薯脫毒種薯生產(chǎn)。2 規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適于本標準，然而，鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本，凡是不注明日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。GB18133-2000馬鈴薯脫毒種薯3 術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標準。3.1脫毒在無菌操作的條件下，經(jīng)過莖尖剝離脫去主要危害馬鈴薯的病毒。3.2脫毒組培苗簡稱脫毒苗，指經(jīng)過莖尖剝離脫毒、組織培養(yǎng)后，經(jīng)檢測確認不帶馬鈴薯卷葉病毒（PLRV）、馬鈴薯Y病毒（PVY）、馬鈴薯A病毒（PVA）、馬鈴薯X病毒（PVX）、馬鈴薯S病毒（PVS）、馬鈴薯紡錘塊莖類病毒（PSTVd）等病毒的種苗。3.3扦插苗脫毒苗切段剪取其主莖及側(cè)枝頂端在溫室或網(wǎng)室扦插成活的苗。3.4脫毒種薯由脫毒組培苗生產(chǎn)出的原原種、原種、良種。3.4.1 原原種（脫毒小薯）利用組培苗在防蟲溫室和網(wǎng)室隔離條件下生產(chǎn)出來的微型薯。3.4.2 原種分為一級原種和二級原種。3.4.2.1 一級原種用原原種作種薯，在良好隔離條件下生產(chǎn)出符合GB18133-2000一級原種質(zhì)量標準的種薯。3.4.2.2 二級原種用一級原種作種薯，在良好隔離條件下生產(chǎn)出符合GB18133-2000二級原種質(zhì)量標準的種薯。3.4.3 良種用二級原種作種薯，在隔離條件下生產(chǎn)出的符合GB18133-2000良種質(zhì)量標準的種薯。3.5病毒病株允許率各級脫毒種薯繁殖田中病毒病株的允許比率。3.6細菌病株允許率各級脫毒種薯繁殖田中細菌性病害病株的允許比率。3.7真菌病株及其它病株允許率各級脫毒種薯繁殖田中真菌病株和其它病株的允許比率。3.8混雜植株允許率各級脫毒種薯繁殖田內(nèi)混入其他馬鈴薯品種的雜株或異癥株比率。3.9有缺陷薯指畸形、次生、龜裂、蟲害、凍傷、黑心和機械損傷的薯塊。4 脫毒組培苗快繁4.1脫毒組培苗的培育4.1.1選材選用生產(chǎn)上主栽的或已審定品種的休眠芽或剛出土幼苗的莖尖、或田間成株上的腋芽作莖尖剝離材料。4.1.2培養(yǎng)基的制備每1000 m1 MS培養(yǎng)基（見附錄）加GA30.2mg0.5 mg，6-BA0.1 mg0.2 mg，NAA0.01 mg0.05 mg，分裝入管（瓶）。4.1.3滅菌在0.15Mpa/cm2壓力下高壓滅菌鍋滅菌1520min，冷卻備用。4.1.4莖尖剝離將入選材料放入紗布袋，用自來水沖洗1h后，在無菌條件下，放入75%酒精中浸23s，再用0.1%升汞液消毒36min，取出用無菌水沖洗35次置于吸濕紙上，在體視解剖鏡下用手術(shù)刀等工具剝掉幼葉層，切取帶12個葉原基的生長點，迅速接入裝有莖尖分化培養(yǎng)基的試管或培養(yǎng)瓶中，每瓶接種1個生長點，注明品種、編號和接種日期。4.1.5培養(yǎng)條件溫度2225，光照時數(shù)12 h/d14h/d，光照強度2000lx3000lx條件下培養(yǎng)。4.2病毒檢測本單位自檢，然后送到國家法定植檢部門復檢認定。繼代擴繁中選留的脫毒苗，每年至少作一次病毒復檢。根據(jù)檢測結(jié)果出具檢驗報告單，如果脫毒苗沒有檢出PLRV、PVX、PVY、PVA、PVS和PSTVd等病毒和類病毒，方可進行組培苗生產(chǎn)。不合格的脫毒苗不得用于組培快繁。4.3脫毒苗組培快繁4.3.1脫毒組培苗來源：經(jīng)按4.2方法檢測，脫除了所列病毒的組培苗。4.3.2培養(yǎng)基：用MS培養(yǎng)基。滅菌同4.1.3。4.3.3快繁：將脫毒苗剪成1cm左右，帶一葉一芽的莖段接種于MS培養(yǎng)基上，每瓶培養(yǎng)基接種1015個莖段，待莖段長成高10cm左右小苗，進行切段轉(zhuǎn)接，反復繼代培養(yǎng)繁殖。4.3.4培養(yǎng)條件：同4.1.55原原種生產(chǎn)5.1環(huán)境條件脫毒組培苗在溫室或4045目網(wǎng)室內(nèi)隔離栽培。5.2煉苗將苗齡30d左右的組培苗拔去瓶塞，煉苗23d。5.3基質(zhì)蛭石、草炭、珍珠巖或細沙都可作基質(zhì)。每茬薯收后基質(zhì)必須嚴格消毒，可反復使用23季。5.4 消毒工作人員進出溫室、網(wǎng)室必須更換鞋和工作服，并用肥皂洗凈手。扦插工具每次使用前均應蒸煮消毒，不能蒸煮的用肥皂水認真清洗后用75 酒精浸泡消毒。5. 5 剪取莖尖扦插的脫毒苗高5 cm7 cm、側(cè)枝長5 cm6 cm時，剪取3 cm4 cm長的主莖頂端或側(cè)枝尖端（每株最多剪3次），供扦插用。5.6扦插苗處理扦插苗放入生根液中浸泡5 min后取出備插。5.7 管理5.7.1 緩苗期管理：脫毒苗插好后，輕細均勻噴水，使基質(zhì)充分飽和吸水，及時拱棚蓋膜，拱棚內(nèi)相對濕度保持在90 95 。5.7.2 施肥：扦插苗生根成活后及時撤從扦插苗成活至收薯前10 d，根據(jù)苗情噴施0.2 0.3 N:P:K2:1:3的營養(yǎng)液46次，撤拱棚后噴第一次肥濃度應減半， 每7d10 d噴一次。5.7.3 澆水：勤澆、細澆、少澆，保持基質(zhì)濕潤，持水量50 60 ，收前3 d7d停止?jié)菜?.7.4 病蟲害防治：脫毒苗扦插成活出棚后至收前15 d，網(wǎng)室內(nèi)外每隔710 d噴殺蟲劑一次，防治蚜蟲。早、晚疫病發(fā)病初期開始用藥，每隔7d 10 d噴殺菌劑一次。發(fā)現(xiàn)病株連同薯塊拔除，帶出網(wǎng)室外銷毀。5.8 收獲、包裝、貯存5.8.1 原原種收獲：早熟品種在扦插后55d70d，中早熟品種70 d 85 d，晚熟品種在插后85 d100d即可收獲。收獲時避免機械損傷和品種混雜。收后攤晾4 d 7 d，剔除爛薯、病薯，傷薯及雜物。5.8.2 分級標準：按種薯個體重量大小分為三級。一級5 g以上、二級2 g5g、三級1 g2 g。5.8.3 包裝與貯存：采用尼龍網(wǎng)袋包裝，每袋2000粒左右，按等級和收獲期分品種裝袋，作好標記，放在溫度2 4 ，相對濕度80 85，通風良好條件下貯存。6原種及良種生產(chǎn)6.1選地：選擇海拔1500 m以上的高寒少蚜山區(qū)或中低海拔地區(qū)，自然隔離條件良好(500 m內(nèi)無茄科、十字花科作物，無商品薯種植)土質(zhì)疏松、肥力中上、排灌方便，兩年內(nèi)未種植過茄科和十字花科作物的向陽地塊（最好是砂壤土）。6.2 種薯準備：選用通過休眠的原原種做種薯。在適宜的播期向前推30d40d種薯出窖，先室內(nèi)催芽然后曬種。催芽溫度1015，待芽基0.3cm時平攤在有散射光的地方，放34層，隔5d7d翻動一次，幼芽長到0.5cm1.0cm，粗壯、變成濃綠色或紫色并有根點出現(xiàn)時即可播種。10 g以上的薯可切塊播種，每塊帶1個以上芽眼。6.3切刀消毒消毒藥液：2000 m1(0.1 酸性升汞、0.1 高錳酸鉀、75 乙醇任選一種即可)。將配好的藥液倒入盆，切刀柄朝上浸入藥液中。先取出一把刀，切完一個種薯后放回藥液；取另一把切刀，再切完一個種薯又放回藥液。如此兩把刀交替使用。切薯塊時，邊切邊肉眼觀察切面，發(fā)現(xiàn)病薯或可疑薯塊即全部淘汰。6.4播種當距地表10厘米耕層溫度穩(wěn)定在5時，就是當?shù)剡m宜的馬鈴薯播期。播種深度8cm，不得過淺過深。播種密度為一般控制在50006000株/667m2。6.5施肥：根據(jù)土壤肥力及目標產(chǎn)量進行測土施肥，有條件的地方多施腐熟農(nóng)家肥，總肥量70%做底肥。6.6田間管理6.6.1追肥、中耕、培土：齊苗后進行第一次中耕除草進行。78片葉時第二次中耕，培土成低壟?，F(xiàn)蕾第三次中耕結(jié)合追肥，培土成高壟。整個生育期內(nèi)噴施3次葉面肥，前期葉面肥以磷肥為主，后期以鉀肥為主。6.6.2 去雜去劣現(xiàn)蕾至枯黃期前2周，三次拔除混雜植株，異常株，包括地下塊莖。6.6.3病蟲害防治 防?。翰『Ψ乐沃饕乐卧?、晚疫病等真細菌病害，馬鈴薯現(xiàn)蕾開始噴施殺菌劑，每710d一次。發(fā)現(xiàn)中心病株及時拔除帶出田外處理。 嚴格防蚜：齊苗后選用不同殺蟲劑，每7 d10 d防治蚜蟲一次，連續(xù)34次。6.7收獲、包裝、貯存：按5.8有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。7 二級原種生產(chǎn)7.1選地：高海拔自然隔離條件好（500 m內(nèi)無茄科和十字花科作物，無高代薯種植的地塊)土質(zhì)疏松、肥力中上、排灌方便兩年內(nèi)未種植過茄科和十字花科作物向陽的地塊（最好是砂壤土）。7.2 種薯準備：選用通過休眠的一級種做種薯。在適宜的播期向前推30d40d種薯出窖，先室內(nèi)催芽然后曬種。催芽溫度1015，待芽基0.5cm時平攤在有散射光的地方，放23層，隔5d7d翻動一次，幼芽長到1cm1.5cm，粗壯、變成濃綠色或紫色即可播種。50 g以下的薯直接播種，50g以上切塊播種。切塊的原則是切透、切了，不留薯肉，切成30g左右的立方塊，每塊帶1個以上芽眼。7.3切刀消毒：同6.37.4播種在耕層10 cm地溫穩(wěn)定在5為適宜播期。播種深度8cm10cm，不得過淺過深。播種密度為一般控制在45006000株/667m2，晚熟品種密度小一些，早熟品種密度大一些。7.5施肥：同6.57.6田間管理：同6.6.1、6.6.2、6.6.37.7收獲、包裝、貯存：按5.8有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。8良種生產(chǎn)8.1選地：自然隔離條件好（300 m內(nèi)無茄科和十字花科作物，無高代薯種植的地塊)土質(zhì)疏松、肥力中上、排灌方便兩年內(nèi)未種植過茄科和十字花科作物向陽的地塊（最好是砂壤土）。8.2 種薯準備：選用通過休眠的二級種做種薯。其他同7.28.3切刀消毒：同6.38.4播種：同7.48.5施肥：同6.58.6田間管理8.6.1追肥、中耕、培土：同6.6.18.6.2 去雜去劣現(xiàn)蕾至盛花期，兩次拔除混雜植株，異常株，包括地下塊莖。8.6.3病蟲害防治：同6.6.38.7收獲、包裝、貯存：按5.8有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。9各級種薯的質(zhì)量要求種薯生產(chǎn)中不允許發(fā)生檢疫性病蟲害，允許率為“0”，一旦發(fā)現(xiàn)此類病蟲害，應立即報給檢疫部門，由檢疫部門根據(jù)病蟲害種類采取相應措施。同時該地塊所有馬鈴薯不能作為種薯。各級別種薯非檢疫性限定有害生物和其他檢測項目應符合最低要求（見表1）。表1 各級別種薯田間植株質(zhì)量要求項 目允 許 率（%） 原原種一級原種二級原種良種混雜00.51.03.0病毒重花葉00.20.51.0卷葉00.2 0.51.0總病毒病*01.03.05.0青枯病000.51.0黑脛病000.51.010 檢驗方法10.1 田間檢查田間檢查以目測為主，目測不能確診的非正常植株或器官組織需馬上采集樣本進行實驗室檢驗。10.2.1 原原種田間檢查溫室或網(wǎng)棚中，組培苗扦插結(jié)束后30天40天，同一生產(chǎn)環(huán)境條件下，全部植株。10.2.2 一級原種、一級原種和良種種田間檢查采用目測檢查，每種薯批每次至少隨機抽檢5點7點，每點100株（見表2）。表2 每種薯批抽檢點數(shù)檢測面積（畝）檢測點數(shù)檢查總數(shù)（株）155500155006-10（每增加100畝增加1點）600-1000500每500畝劃為一個檢測區(qū)每區(qū)同上一級原種、二級原種生育期間要進行三次檢驗。第一次檢驗是在植株現(xiàn)蓄期，第二次在盛花期，第三次在枯黃期前二周。良種生育期間進行兩次田間檢驗。檢驗時間與一、二級原種的第一、二次檢驗時間相同。當?shù)谝淮螜z查指標中任何一項超過允許率的5倍，則停止檢查，該地塊馬鈴薯不能作種薯銷售。第一次檢查任何一項指標超過允許率在5倍以內(nèi)，可通過種植者拔除病株和混雜株降低比率，最后一次檢查為最終田間檢查結(jié)果。對最后一次檢查結(jié)果合格的種薯，執(zhí)行塊莖檢驗程序，否則根據(jù)結(jié)果降級或不作