DB46T 255-2013 馬氏珠母貝插核育珠技術(shù)規(guī)程.doc

ICS65.150B51備案號：38080-2013DB46海南省地方標(biāo)準(zhǔn)DB 46/ T 2552013馬氏珠母貝插核育珠技術(shù)規(guī)程Technical regulations for nucleus-inserting and pearl production of pearl oyster Pinctada fuctada martensii (Dunker)2013 - 07 - 10發(fā)布2013 - 08 - 01實施海南省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布DB46/ T 2552013前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T 1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由海南省海洋與漁業(yè)廳提出。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：海南大學(xué)、海南省海鈺珍珠研究院。本標(biāo)準(zhǔn)起草人：馮永勤、周永燦、謝珍玉、王世鋒、方再光。6馬氏珠母貝插核育珠技術(shù)規(guī)程1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了馬氏珠母貝Pinctada fuctada martensii (Dunker)插核育珠技術(shù)規(guī)程的術(shù)語和定義、術(shù)前處理、栓口、細(xì)胞小片制作、插核、術(shù)后休養(yǎng)和育珠。本規(guī)程適用于馬氏珠母貝插核育珠技術(shù)操作。2 規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。NY 5052 無公害食品 海水養(yǎng)殖用水水質(zhì)DB46/T 13 海水養(yǎng)殖珍珠3 術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1母貝殼長3 cm以上尚未進行插核手術(shù)的貝的統(tǒng)稱。3.2小片貝用于制作外套膜細(xì)胞小片的母貝。3.3育珠貝經(jīng)過人工插核手術(shù)，在貝體內(nèi)已植入珠核及細(xì)胞小片后用于培育珍珠的成貝。3.4插核在珍珠貝體內(nèi)植入珠核及細(xì)胞小片的操作過程。3.5術(shù)前處理母貝性腺發(fā)育初期或生理機能過強時，采取抑制性腺發(fā)育和減弱生理機能強度；母貝生殖腺過于飽滿時，采取促進生殖細(xì)胞排放等處理措施。3.6休養(yǎng)期母貝插核手術(shù)后經(jīng)過20 d30 d的休養(yǎng)恢復(fù)期。3.7育珠期母貝插核手術(shù)后，經(jīng)過休養(yǎng)、珍珠育成至收獲的全過程。3.8殼長 由貝殼的前端至后端的最大距離。3.9殼高 由貝殼頂端至腹緣的最大距離。3.10殼寬左右兩殼間的最大距離。3.11體重 貝個體的濕重量。4 術(shù)前處理4.1 抑制性腺發(fā)育及生理機能強度的方法4.1.1 塑料筐吊養(yǎng)處理法塑料筐為長方形，規(guī)格為長40 cm、寬30 cm、高16 cm，四周有長方形的孔，孔長1.5 cm、寬0.8 cm，每筐裝入母貝6080個，吊養(yǎng)水深3 m5 m，吊養(yǎng)時間15 d30 d。4.1.2 網(wǎng)籠吊養(yǎng)處理法用網(wǎng)目2 mm的聚乙烯網(wǎng)布縫制成長110 cm、寬60 cm的網(wǎng)袋，在網(wǎng)袋內(nèi)套入兩個直徑32 cm的錐形貝籠，每籠裝入母貝40個，吊養(yǎng)水深3 m5 m，吊養(yǎng)時間7 d15 d。4.2 促進生殖細(xì)胞排放的方法按照4.1.1的吊養(yǎng)方法，選擇晴天氣溫較高時將塑料筐提升至水深0.5 m的水層，第二天再將塑料筐下降至水深3 m5 m水層，以此方法連續(xù)操作34次，利用水溫變動刺激生殖細(xì)胞排放；經(jīng)檢查大部分生殖細(xì)胞已排放之后，將母貝再次深吊于水深5 m水層，吊養(yǎng)3 d5 d后用于插核施術(shù)。5 栓口5.1 插核貝的選擇選擇1.52.5齡母貝，殼高6.5 、殼寬2.3 以上，體重大于38 g，貝體健壯，植核部位較大并疏松。5.2 清貝先用清貝刀切斷母貝足絲和清除貝殼表面的附著生物，再用海水沖洗貝殼表面的污泥。5.3 排貝將母貝腹緣向上緊密排列于排貝籠內(nèi)，為使插核貝之間盡可能沒有縫隙，把個別貝腹緣向下倒插于兩貝之間，然后將排貝籠吊養(yǎng)于海區(qū)2 h3 h。5.4 栓口 將排貝籠中的母貝稍松開，當(dāng)母貝自然張殼時,用開口器張開貝殼，然后在兩殼間塞入寬1.3 cm1.5 cm的木塞，或用開口器張開貝殼后直接放于插核臺手術(shù)。6 細(xì)胞小片制作6.1 小片貝的選擇選擇1.5齡至2齡、殼長6.5 cm以上、貝體健康、貝殼珍珠層呈銀白色、外套膜自然伸展至貝殼邊緣、外套膜厚薄適中的母貝作為制作細(xì)胞小片的小片貝。6.2 切取外套膜剖開小片貝，用剪刀剪取從唇瓣下方至肛門腹面的外套膜，剪取路線為外套膜肌集束端與色線之間。然后用小片刀以色線為中間，按內(nèi)、外各占一半比例把外套膜切成長條形。外套膜邊緣觸手應(yīng)切除干凈。6.3 抹片把切成長條狀的外套膜放置于玻璃板或質(zhì)地堅實的光滑木板上，用濕棉花球抹去外套膜兩面的粘液，在分泌珍珠質(zhì)的一面（稱正面，即自然生長時外套膜緊貼貝殼的一面）應(yīng)輕抹，避免損傷分泌珍珠質(zhì)的組織細(xì)胞。6.4 切小片用小片刀將經(jīng)抹片的長條形外套膜切成方形或近方形的小片，小片邊長根據(jù)擬植入的珠核大小而定，直徑7.5 mm8.5 mm的珠核，小片邊長為2.6 mm3.0 mm；直徑6.5 mm7.5 mm的珠核，小片邊長為2.3 mm2.6 mm；直徑5.0 mm6.5 mm的珠核，小片邊長為2.0 mm2.3 mm。6.5 消毒與染色使用醫(yī)用紅汞藥水配成3海水溶液，然后滴于小片上染色與消毒。6.6 小片使用時間小片制作完成后，應(yīng)在20 min以內(nèi)使用完。7 插核7.1 切口將插核貝安放于插核臺后，先判別是否適宜進行插核手術(shù)。對適宜手術(shù)的插核貝，用開口刀在其足基部黑白處切開一弧形切口，切口寬度以稍小于珠核直徑為宜，刀口深度應(yīng)不傷及足絲腺。7.2 通道使用通道針往“左袋”（腹嵴與腸管之間部位）和“右袋”（圍心腔與泄殖孔之間部位）進行通道，通道路徑緊靠表皮下面前進，不應(yīng)傷及腸管和消化肓囊。7.3 插核7.3.1 核位核位包括“左袋”和“右袋”，“左袋”位于縮足肌腹面，腹嵴與腸管之間；“右袋”位于圍心腔與泄殖孔之間。7.3.2 珠核規(guī)格擬植入珠核的規(guī)格根據(jù)插核貝的殼高來確定，具體見表1：表1 插核貝的殼高與植入珠核規(guī)格插核貝殼高cm植入單核規(guī)格mm植入雙核規(guī)格mm左袋左袋右袋6.57.06.67.26.06.55.06.07.07.57.27.56.57.06.06.57.58.07.58.07.08.06.57.08.09.08.08.58.08.57.07.57.3.3 送核先向“左袋”部位送核，用送核器吸住珠核1/3面積部位，沿著通道向“左袋”核位前進，當(dāng)珠核到核位時，用送核器向核位輕壓珠核，使珠核埋植于核位內(nèi)，埋植深度以從腹嵴表皮觀察珠核不造成表皮隆起為準(zhǔn)?！坝掖辈课凰秃?，只用送核器沿通道送至“右袋”核位即可。一個插核貝只植單核部位為“左袋”，植雙核為部位為“左袋”和“右袋”。7.4 送小片送小片有“先送小片法”和“后送小片法”兩種，“先送小片法”為先送小片后送核; “后送小片法”為先送核后送小片?！跋人托∑ā睉?yīng)把分泌珍珠質(zhì)的細(xì)胞面向上，用小片針把小片分別送至左袋和右袋核位即可；“后送小片法”是將分泌珍珠質(zhì)的細(xì)胞向下，用小片針把小片送至珠核表面后，沿著珠核把小片移至珠核后端下方，使珠核緊壓住小片。7.5 暫養(yǎng)完成插核手術(shù)后的育珠貝先放于休養(yǎng)籠中，然后放置于插核室水槽中或吊養(yǎng)于插核室附近的貝架上暫養(yǎng)。8 術(shù)后休養(yǎng)8.1 休養(yǎng)籠具休養(yǎng)籠具有錐形休養(yǎng)網(wǎng)籠和方型塑料籠兩種，錐形籠底部直徑32 cm、高20 cm，網(wǎng)籠底部用網(wǎng)目2 mm的聚乙烯網(wǎng)布包住，上方為3 cm網(wǎng)目的聚乙烯網(wǎng)；塑料籠規(guī)格長40 cm、寬35 cm、高16 cm，其四周有長方形孔，孔長1.5 cm、寬0.8 cm。8.2 放養(yǎng)密度錐形休養(yǎng)籠放養(yǎng)手術(shù)貝40個；方型塑料休養(yǎng)籠放養(yǎng)手術(shù)貝60個。休養(yǎng)貝選擇風(fēng)平浪靜、潮流緩慢的海區(qū)吊養(yǎng)，吊養(yǎng)水深3 m4 m。8.3 休養(yǎng)期管理插核手術(shù)后第2 d至第7 d，每天檢查死亡情況。檢查時把貝籠提至表層，如發(fā)現(xiàn)死亡個體應(yīng)盡快撿出，并清除貝籠中的污物，記錄死亡貝數(shù)及吐出的珠核數(shù)。檢查操作過程速度應(yīng)快、輕，盡量減少對插核手術(shù)貝的刺激。8.4 貝體康復(fù)判定休養(yǎng)貝體康復(fù)時，貝殼腹緣生長出新鱗片，有新的足絲分泌，貝體軟體部黑色素恢復(fù)到手術(shù)前的狀態(tài)。8.5 休養(yǎng)時間休養(yǎng)時間一般為20 d30 d。9 育珠9.1 育珠海區(qū)條件的要求育珠貝養(yǎng)殖場所應(yīng)選擇風(fēng)浪比較小，潮流比較暢通的海區(qū)，水深5 m以上，底質(zhì)為沙、礫石或沙泥，受臺風(fēng)影響較小的海區(qū)；且要求養(yǎng)殖海區(qū)的海水鹽度2535，冬季水溫不低于13 ，夏季水溫不高于30 。海水水質(zhì)應(yīng)符合NY 5052 的規(guī)定。9.2 育珠貝籠具聚乙烯錐形網(wǎng)籠，筐底直徑32 、高20 ，網(wǎng)目長度3 ；聚乙烯片狀網(wǎng)籠，長70 cm、寬40 cm，網(wǎng)目4 cm。9.3 育珠貝放養(yǎng)密度聚乙烯錐形網(wǎng)籠，每籠放養(yǎng)休養(yǎng)期結(jié)束后的育珠貝30個；聚乙烯片狀網(wǎng)籠，每籠放養(yǎng)育珠貝4045個。9.4 育珠貝的管理9.4.1 清貝根據(jù)貝