GB14974-1994蘋(píng)果和山楂制品中展青霉素限量衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn).pdf

中華 人 民 共 和 國(guó) 國(guó) 家 標(biāo) 準(zhǔn)蘋(píng)果和山植制品中展青霉素 限量衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)G B 1 4 9 7 4 一 9 4 H y g i e n i c s t a n d a r d f o r t o l e r a n c e l i mi t so f p a t u l i n i n a p p l e a n d h a w t h o r n p r o d u c t s1 主題內(nèi)容與適用范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了蘋(píng)果、 山 植制品中展青霉素限量及檢驗(yàn)方法本標(biāo)準(zhǔn)適用于蘋(píng)果、 山植制品及其半成品( 原汁、 原醬) 。2 蘋(píng)果、 山植制品中 展青.寨最高允許I 蘋(píng)果、 山植制品中展青霉素最高允許量見(jiàn)下表。品種指標(biāo)， k g / k g半成品( 原汁、 原醬)(1 0 0果汁、 果醬55 0果酒毛s o箱頭(s o山植條( 餅)簇s o3 檢驗(yàn)方法3 . ， 原理 樣品中展青霉素經(jīng)提取、 凈化、 濃縮、 薄層展開(kāi)后， 利用薄層掃描儀進(jìn)行紫外反射光掃描定量。3 . 2 試劑3 . 2 . 1 硅膠G F 2 s3 . 2 . 2 薄層色譜展開(kāi)劑 橫向: 氯仿一 丙酮( 3 0 : 1 . 5 ) ; 縱向: 甲 苯一 乙酸乙醋一 甲 酸( 5 0 : 1 5 ， 1 ) ,3 . 2 . 3 展青霉素標(biāo)準(zhǔn)品。3 . 2 . 4 乙酸乙醋。3 . 2 . 5 1 . 5 %碳酸鈉溶液。3 . 2 . 6 無(wú)水硫酸鈉。3 . 2 . 7 三氯甲烷 。3 . 2 . 8 顯示劑 溶解。 . 1 g MB T H H C I H , O 3 一 甲 基一 2 苯并唾哇酮蹤水合鹽酸鹽于2 0 m L蒸餾水中， 置于冰箱中保存， 每3 夭重新配制。3 . 3 儀器一一一一一中 華人民共和國(guó)1 R 生部1 9 9 4 一 0 3 一 1 8 批準(zhǔn)1 9 9 4 一 0 9 一 0 1 實(shí)施G $ 1 4 9 7 4 一 9 413 門(mén)薄層掃描儀。13 . 2 層析槽( 內(nèi)徑1 1 . 5 c m、 高2 0 c m的標(biāo)準(zhǔn)擊) 。3 . 3 . 3 玻璃板1 0 c m X 1 0 c m ,3 . 3 . 4 紫外光燈。3 . 4 操作方法3 . 4 門(mén)提取3 . 4 . 1 . 1 果汁、 果酒: 量取果汁2 5 m L ， 置于分液漏斗中， 加人等體積的乙酸乙酷， 振搖2 m i n , 靜置分層， 重復(fù)以上步驟兩次， 合并有機(jī)相， 加2 . 5 m L l . 5 碳酸鈉振搖 1 m i n ， 靜置分層后， 棄去碳酸鈉層， 同上步驟再用碳酸鈉處理一次。將提取液濾入1 0 0 m L梨形瓶中， 于4 0 水浴上用真空減壓濃縮至近干，用少許氯仿清洗瓶壁， 濃縮干， 加氯仿0 . 4 m L定容， 供薄層色譜測(cè)定用。3 . 4 . 1 . 2 果醬: 稱取樣品2 5 g 置于乳缽中， 加適量無(wú)水硫酸鈉研磨后， 稱至三角瓶中， 加8 0 m L乙酸乙酷浸泡3 0 m i n ， 振蕩3 0 m i n ， 過(guò)濾， 取濾液 5 0 m L ， 以下操作同3 . 4 . 1 . 1 .3 . 4 - 2 測(cè)定3 . 4 - 2 . 1 薄層板的制備: 取硅膠G F 2 1 1 5 g ， 加水1 5 M L , 涂布1 0 c m X 1 0 c m玻璃板上， 一次涂成5 塊，薄層厚度為。 . 3 m m， 陰干后， 1 0 5 烘烤2 h ， 放入干燥器中 備用。3 . 4 . 2 . 2 點(diǎn)樣: 取一塊薄板， 在距底邊和右邊1 0 c m處， 用微量注射器滴加1 . 。 P g / m l _ 的展青霉素標(biāo)準(zhǔn)液1 0 u L ， 相距左邊4 c m處滴加1 0 W L 樣液， 在樣品點(diǎn)同一垂直線上， 距頂端2 c m處點(diǎn)2 0 n g 的標(biāo)準(zhǔn)液， 為位置參考點(diǎn)。3 . 4 . 2 . 3 展開(kāi) 橫向展開(kāi)到頂端后取出揮干， 進(jìn)行縱向展開(kāi)， 至頂端后， 取出揮干， 在2 5 4 n m紫外燈下觀察， 出現(xiàn)黑色吸收點(diǎn)則樣品為陽(yáng)性。進(jìn)行掃描定量測(cè)定。3 . 4 . 2 . 4 薄層色譜掃描測(cè)定 儀器操作條件: 測(cè)定波長(zhǎng)2 7 0 n m; 參考波長(zhǎng)3 1 0 n m; 反射光測(cè)定; 掃描速度4 0 n m / m i n ; 記錄儀紙速2 0 n m / m i n ; 測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)及樣品中展青霉素峰面積。3 . 4 - 2 . 5 陽(yáng)性樣品的確證: 將陽(yáng)性樣品的薄層色譜板， 噴以MB T H顯色劑, 1 3 0 0C 烘烤 1 5 m i n ， 冷至室溫后， 于3 6 5 n m紫外燈下觀察， 展青霉素應(yīng)呈橙黃色點(diǎn)。3 . 4 . 2 . 6 計(jì)算 果汁: X= “ x 果醬: x= X式中: X 展青 霉素含量， p g / m L ; c展青 霉素 標(biāo)準(zhǔn)液濃度， k g / m L ; A 樣液展青霉素峰面積; S 標(biāo)準(zhǔn)溶液展青霉素峰面積; V 加人氯仿定容體積， m l ; D 樣液點(diǎn)稀釋倍數(shù); W樣品的重量， 9 ; V , 液體樣品的體積, m L .15 精密度: 變異系數(shù)( %) 小于1 0 %.3 . 6 最低檢出限: 3 ; g / L . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ( 1 ) 。 . . . ( 2 ) 515 X1一叭1一W X火 DD XX VV XXA一sA了