GB4479.1-2010食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑莧菜紅.pdf

GB 4479.12010食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑 莧菜紅 2010-12-21 發(fā)布 2011-02-21 實(shí)施中 華 人 民 共 和 國(guó) 國(guó) 家 標(biāo)中 華 人 民 共 和 國(guó) 國(guó) 家 標(biāo) 準(zhǔn)準(zhǔn)中 華 人 民 共 和 國(guó) 衛(wèi) 生 部中 華 人 民 共 和 國(guó) 衛(wèi) 生 部 發(fā)布 GB 4479.12010 I 前 言 本標(biāo)準(zhǔn)代替 GB 4479.11999食品添加劑 莧菜紅 。 本標(biāo)準(zhǔn)與 GB 4479.11999 相比，主要變化如下： 增加了安全提示； 取消了60.0%的質(zhì)量規(guī)格； 水不溶物指標(biāo)由0.30%修改為0.20%； 修改了鑒別試驗(yàn)的方法； 分光光度比色法平行測(cè)定的允許差由 2.0%修改為 1.0%； 增加了未反應(yīng)中間體指標(biāo)和檢測(cè)方法； 增加了未磺化芳族伯胺（以苯胺計(jì)）指標(biāo)和檢測(cè)方法； 砷（As）的檢測(cè)方法由化學(xué)限量法修改為原子吸收法； 取消了重金屬（以 Pb 計(jì)）的質(zhì)量規(guī)格； 增加了鉛（Pb）指標(biāo)和檢測(cè)方法。 本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B和附錄C為規(guī)范性附錄，附錄D為資料性附錄。 本標(biāo)準(zhǔn)所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為： GB 4479.11986、GB 4479.11996、GB 4479.11999。 GB 4479.12010 1 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑 莧菜紅 1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)適用于 1-萘胺-4-磺酸鈉經(jīng)重氮化后與 2-萘酚-3，6-二磺酸鈉偶合而制得的食品添加劑莧菜紅。 2 規(guī)范性引用文件 本標(biāo)準(zhǔn)中引用的文件對(duì)于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標(biāo)準(zhǔn)。 3 化學(xué)名稱、結(jié)構(gòu)式、分子式和相對(duì)分子質(zhì)量 3.1 化學(xué)名稱 3-羥基-4-（4-偶氮萘磺酸）2，7-萘二磺酸三鈉鹽 3.2 結(jié)構(gòu)式： 3.3 分子式 C20H11N2Na3O10S3 3.4 相對(duì)分子質(zhì)量 604.48（按 2007 年國(guó)際相對(duì)原子質(zhì)量） 4 技術(shù)要求 4.1 感官要求：應(yīng)符合表 1 的規(guī)定。 表1 感官要求 項(xiàng) 目 要 求 檢驗(yàn)方法 色澤 紅褐色至暗紅褐色 自然光線下采用目視評(píng)定。 組織狀態(tài) 粉末或顆粒 4.2 理化指標(biāo)：應(yīng)符合表 2 的規(guī)定。 GB 4479.12010 2 表2 理化指標(biāo) 項(xiàng) 目 指 標(biāo) 檢驗(yàn)方法 莧菜紅，w/% 85.0 附錄 A 中 A.4 干燥減量、氯化物（以NaCl計(jì)）及硫酸鹽（以NaSO4計(jì)）總量，w/% 15.0 附錄 A 中 A.5 水不溶物，w/% 0.20 附錄 A 中 A.6 副染料，w/% 3.0 附錄 A 中 A.7 未反應(yīng)中間體總和，w/% 0.50 附錄 A 中 A.8 未磺化芳族伯胺（以苯胺計(jì)） ，w/% 0.01 附錄 A 中 A.9 砷（As）/（mg/kg） 1.0 附錄 A 中 A.10 鉛（Pb）/（mg/kg） 10.0 附錄 A 中 A.11 GB 4479.12010 3 附 錄 A （規(guī)范性附錄） 檢驗(yàn)方法 A.1 安全提示 本標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)方法中使用的部分試劑具有毒性或腐蝕性，按相關(guān)規(guī)定操作，操作時(shí)需小心謹(jǐn)慎。若濺到皮膚上應(yīng)立即用水沖洗，嚴(yán)重者應(yīng)立即治療。在使用揮發(fā)性酸時(shí)，要在通風(fēng)櫥中進(jìn)行。 A.2 一般規(guī)定 本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑和水，在沒(méi)有注明其他要求時(shí)，均指分析純?cè)噭┖虶B/T 66822008規(guī)定的三級(jí)水。 試驗(yàn)中所需標(biāo)準(zhǔn)溶液、 雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液、 制劑及制品在沒(méi)有注明其他規(guī)定時(shí)， 均按GB/T 601、 GB/T 602、GB/T 603規(guī)定配制和標(biāo)定。 A.3 鑒別試驗(yàn) A.3.1 試劑和材料 A.3.1.1 硫酸。 A.3.1.2 乙酸銨溶液：1.5g/L。 A.3.2 儀器和設(shè)備 A.3.2.1 分光光度計(jì)。 A.3.2.2 比色皿：10mm。 A.3.3 鑒別方法 應(yīng)滿足如下條件： A.3.3.1 稱取約0.1g試樣（精確至0.01g） ，溶于100mL水中，顯紅色澄清溶液。 A.3.3.2 稱取約0.2g試樣（精確至0.01g） ，加20mL硫酸，溶液顯紫色，取此液2滴3滴加入5mL水中顯紅色。 A.3.3.3 稱取約0.1g試樣（精確至0.01g） ，溶于100mL乙酸銨溶液中，取此溶液1mL，加乙酸銨溶液配至100mL，該溶液的最大吸收波長(zhǎng)為520 nm2nm。 A.4 莧菜紅的測(cè)定 A.4.1 三氯化鈦滴定法(仲裁法) A.4.1.1 方法提要 在酸性介質(zhì)中，莧菜紅中的偶氮基被三氯化鈦還原分解，按三氯化鈦標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的消耗量，計(jì)算其含量。 A.4.1.2 試劑和材料 A. 檸檬酸三鈉。 GB 4479.12010 4 A. 三氯化鈦標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液：c(TiCl3)=0.1mol/L(現(xiàn)用現(xiàn)配，配制方法見(jiàn)附錄B)。 A. 鋼瓶裝二氧化碳。 A.4.1.3 儀器和設(shè)備 A錐形瓶(500mL)； B棕色滴定管(50mL)； C包黑紙的下口玻璃瓶(2000mL)； D裝有 100g/L 碳酸銨溶液和 100g/L 硫酸亞鐵溶液等量混合液的容器(5000mL)； E活塞； F空瓶； G裝有水的洗氣瓶。 圖 A.1 三氯化鈦滴定法的裝置圖 A.4.1.4 分析步驟 稱取約 0.5g 試樣（精確至 0.0001g） ，置于 500mL 錐形瓶中，溶于 50mL 煮沸并冷卻至室溫的水中，加入 15g 檸檬酸三鈉和 150mL 煮沸的水，振蕩溶解后，按圖 A.1 裝好儀器，在液面下通入二氧化碳的同時(shí)，加熱沸騰，并用三氯化鈦標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定使其固有顏色消失為終點(diǎn)。 A.4.1.5 結(jié)果計(jì)算 莧菜紅以質(zhì)量分?jǐn)?shù)1w計(jì)，數(shù)值用表示，按公式(A.1)計(jì)算： %100)4/)(1000/(11=mMVcw（A.1） 式中： c 三氯化鈦標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為摩爾每升（mol/L） ； V 滴定試樣耗用的三氯化鈦標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為毫升（mL） ； M 莧菜紅的摩爾質(zhì)量數(shù)值，單位為克每摩爾（g/mol）M（C20H11N2Na3O10S3）=604.48； m1 試樣的質(zhì)量數(shù)值，單位為克（g） 。 GB 4479.12010 5 計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后 1 位。 平行測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于 1.0（質(zhì)量分?jǐn)?shù)） ，取其算術(shù)平均值作為測(cè)定結(jié)果。 A.4.2 分光光度比色法 A.4.2.1 方法提要 將試樣與已知含量的莧菜紅標(biāo)準(zhǔn)品分別用水溶解，用乙酸銨溶液稀釋定容后，在最大吸收波長(zhǎng)處，分別測(cè)其吸光度值，計(jì)算其含量。 A.4.2.2 試劑和材料 A. 乙酸銨溶液：1.5g/L。 A. 莧菜紅標(biāo)準(zhǔn)品： 85.0（質(zhì)量分?jǐn)?shù)、按A.4.1測(cè)定） 。 A.4.2.3 儀器和設(shè)備 A. 分光光度計(jì)。 A. 比色皿：10mm。 A.4.2.4 莧菜紅標(biāo)樣溶液的配制 稱取約 0.5g 莧菜紅標(biāo)準(zhǔn)品（精確到 0.0001g） ，溶于適量水中，移入 1000mL 容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。吸取 10mL，移入 500mL 容量瓶中，加乙酸銨溶液稀釋至刻度，搖勻，備用。 A.4.2.5 莧菜紅試樣溶液的配制 稱量與操作方法同 A.4.2.4 標(biāo)樣溶液的配制。 A.4.2.6 分析步驟 將莧菜紅標(biāo)樣溶液和莧菜紅試樣溶液分別置于 10mm 比色皿中，同在最大吸收波長(zhǎng)處用分光光度計(jì)測(cè)定各自的吸光度值，用乙酸銨溶液作參比液。 A.4.2.7 結(jié)果計(jì)算 莧菜紅以質(zhì)量分?jǐn)?shù)1w計(jì)，數(shù)值用表示，按公式(A.2)計(jì)算： 0001wmAAmw= （A.2） 式中： A 莧菜紅試樣溶液的吸光度值； m0莧菜紅標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）； A0莧菜紅標(biāo)樣溶液的吸光度值； m試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）； w0莧菜紅標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。 計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后 1 位。 平行測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于 1.0（質(zhì)量分?jǐn)?shù)） ，取其算術(shù)平均值作為測(cè)定結(jié)果。 GB 4479.12010 6 A.5 干燥減量、氯化物(以NaCl計(jì))及硫酸鹽(以Na2S04計(jì))總量的測(cè)定 A.5.1 干燥減量的測(cè)定 A.5.1.1 分析步驟 稱取約 2g 試樣（精確至 0.001g） ，置于已在 1352恒溫干燥箱恒量的稱量瓶中，在1352恒溫干燥箱中烘至恒量。 A.5.1.2 結(jié)果計(jì)算 干燥減量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)以2w計(jì)，數(shù)值用表示，按公式(A.3)計(jì)算： %1002322=mmmw（A.3） 式中： m2試樣干燥前質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）； m3試樣干燥至恒量的質(zhì)量數(shù)值，單位為克（g）。 計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后1位。 平行測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于 0.2%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)） ，取其算術(shù)平均值作為測(cè)定結(jié)果。 A.5.2 氯化物(以NaCl計(jì))的測(cè)定 A.5.2.1 試劑和材料 A. 硝基苯。 A. 活性炭；767針型。 A. 硝酸溶液：1+1。 A. 硝酸銀溶液：c(AgNO3)=0.1mol/L。 A. 硫酸鐵銨溶液： 配制方法：稱取約14g硫酸鐵銨，溶于100mL水中，過(guò)濾，加10mL硝酸，貯存于棕色瓶中。 A. 硫氰酸銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液： c(NH4CNS)=0.1mol/L。 A.5.2.2 試樣溶液的配制 稱取約2g試樣（精確至0.001g），溶于150mL水中，加約15g活性炭，溫和煮沸2 min3min，加入1mL硝酸溶液，不斷搖動(dòng)均勻，放置30min(其間不時(shí)搖動(dòng))。用干燥濾紙過(guò)濾。如濾液有色，則再加5g活性炭，不時(shí)搖動(dòng)下放置1h，再用干燥濾紙過(guò)濾(如仍有色則更換活性炭重復(fù)操作至濾液無(wú)色)。每次以水10mL洗活性炭三次，濾液合并移至200mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻。用于氯化物和硫酸鹽含量的測(cè)定。 A.5.2.3 分析步驟 GB 4479.12010 7 移取50mL試樣溶液，置于500mL錐形瓶中，加2mL硝酸溶液和10mL硝酸銀溶液 (氯化物含量多時(shí)要多加些)及5mL硝基苯，劇烈搖動(dòng)至氯化銀凝結(jié)，加入1mL硫酸鐵銨溶液，用硫氰酸銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定過(guò)量的硝酸銀到終點(diǎn)并保持1min，同時(shí)以同樣方法做一空白試驗(yàn)。 A.5.2.4 結(jié)果計(jì)算 氯化物(以NaCl計(jì))以質(zhì)量分?jǐn)?shù)3w計(jì)，數(shù)值用表示，按公式(A.4)計(jì)算： %100)200/50(1000/ )(410113=mMVVcw（A.4） 式中： c1 硫氰酸銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為摩爾每升（mol/L）； V 滴定空白溶液耗用硫氰酸銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為毫升（mL）； V0 滴定試樣溶液耗用硫氰酸銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為毫升（mL）； M1 氯化鈉的摩爾質(zhì)量數(shù)值，單位為克每摩爾（g/mol）M1（NaCl）=58.4； m4試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）。 計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后1位。 平行測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于0.3（質(zhì)量分?jǐn)?shù)），取其算術(shù)平均值作為測(cè)定結(jié)果。 A.5.3 硫酸鹽(以Na2S04計(jì))的測(cè)定 A.5.3.1 試劑和材料 A. 氫氧化鈉溶液： 2g/L。 A. 鹽酸溶液：1+1999。 A. 氯化鋇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液：c(1/2BaCl2)=0.l mol/L（配制方法見(jiàn)附錄C） 。 A. 酚酞指示液：10g/L。 A. 玫瑰紅酸鈉指示液：稱取0.lg玫瑰紅酸鈉，溶于10mL水中(現(xiàn)用現(xiàn)配)。 A.5.3.2 分析步驟 吸取25mL試樣溶液（A.5.2.2），置于250mL錐形瓶中，加1滴酚酞指示液，滴加氫氧化鈉溶液呈粉紅色，然后滴加鹽酸溶液至粉紅色消失，搖勻，溶解后在不斷搖動(dòng)下用氯化鋇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定， 以玫瑰紅酸鈉指示液作外指示液， 反應(yīng)液與指示液在濾紙上交匯處呈現(xiàn)玫瑰紅色斑點(diǎn)并保持2min不褪色為終點(diǎn)。 同時(shí)以相同方法做空白試驗(yàn)。 A.5.3.3 結(jié)果計(jì)算 硫酸鹽（以Na2SO4計(jì)）以質(zhì)量分?jǐn)?shù)4w計(jì)，數(shù)值用表示，按公式(A.5)計(jì)算： %100)200/25()2/(1000/ )(423224=mMVVcw（A.5） 式中： c2 氯化鋇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為摩爾每升（mol/L）； GB 4479.12010 8 V2 滴定試樣溶液耗用氯化鋇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為毫升（mL）； V3 滴定空白溶液耗用氯化鋇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為毫升（mL）； M2 硫酸鈉的摩爾質(zhì)量的數(shù)值，單位為克每摩爾（g/mol）M2（Na2SO4）=142.04； m4 試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）。 計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后1位。 平行測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于0.2（質(zhì)量分?jǐn)?shù)），取其算術(shù)平均值作為測(cè)定結(jié)果。 A.5.4 干燥減量、氯化物(以NaCl計(jì))及硫酸鹽(以Na2SO4計(jì))總量的結(jié)果計(jì)算 干燥減量和氯化物(以NaCl計(jì))及硫酸鹽(以Na2SO4計(jì))的總量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)5w計(jì)，數(shù)值用表示，按公式(A.6)計(jì)算： 4325wwww+=（A.6） 式中： 2w干燥減量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)； 3w氯化物(以NaCl計(jì))的質(zhì)量分?jǐn)?shù)； 4w 硫酸鹽(以Na2SO4計(jì)) 的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。 計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后1位。 A.6 水不溶物的測(cè)定 A.6.1 儀器和設(shè)備 A.6.1.1 玻璃砂芯坩堝：G4，孔徑為5m15m。 A.6.1.2 恒溫干燥箱。 A.6.2 分析步驟 稱取約3g試樣（精確至0.001g），置于500mL燒杯中，加入5060熱水250mL，使之溶解，用已在1352烘至恒量的玻璃砂芯坩堝過(guò)濾，并用熱水充分洗滌到洗滌液無(wú)色，在1352恒溫干燥箱中烘至恒量。 A.6.3 結(jié)果計(jì)算 水不溶物以質(zhì)量分?jǐn)?shù)6w計(jì)，數(shù)值用表示，按公式(A.7)計(jì)算： %100566=mmw （A.7） 式中： m6 干燥后水不溶物質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）； m5 試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）。 計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后2位。 平行測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于0.05（質(zhì)量分?jǐn)?shù)），取其算術(shù)平均值作為測(cè)定結(jié)果。 GB 4479.12010 9 A.7 副染料的測(cè)定 A.7.1 方法提要 用紙上層析法將各組分分離，洗脫，然后用分光光度法定量。 A.7.2 試劑和材料 A.7.2.1 無(wú)水乙醇。 A.7.2.2 正丁醇。 A.7.2.3 丙酮溶液：1+1。 A.7.2.4 氨水溶液：4+96。 A.7.2.5 碳酸氫鈉溶液：4g/L。 A.7.3 儀器和設(shè)備 A.7.3.1 分光光度計(jì)。 A.7.3.2 層析濾紙：1號(hào)中速，150mm250mm。 A.7.3.3 層析缸：240mm300mm。 A.7.3.4 微量進(jìn)樣器：100L。 A.7.3.5 納氏比色管：50mL有玻璃磨口塞。 A.7.3.6 玻璃砂芯漏斗：G3，孔徑為15m40m。 A.7.3.7 50mm比色皿。 A.7.3.8 10mm比色皿。 A.7.4 分析步驟 A.7.4.1 紙上層析條件 A. 展開(kāi)劑：正丁醇+無(wú)水乙醇+氨水溶液6+2+3。 A. 溫度：2025。 。 A.7.4.2 試樣溶液的配制 稱取 1g 試樣（精確至 0.001g） ，置于燒杯中，加入適量水溶解后，移入 100mL 容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻備用，該試樣溶液濃度為 1%。 A.7.4.3 試樣洗出液的制備 用微量進(jìn)樣器吸取 100L 試樣溶液，均勻地注在離濾紙底邊 25mm 的一條基線上，成一直線，使其在濾紙上的寬度不超過(guò) 5mm，長(zhǎng)度為 130mm，用吹風(fēng)機(jī)吹干。將濾紙放入裝有預(yù)先配制好展開(kāi)劑的層析缸中展開(kāi)，濾紙底邊浸入展開(kāi)劑液面下 l0mm，待展開(kāi)劑前沿線上升至 150mm 或直到副染料分離滿意為止。取出層析濾紙，用冷風(fēng)吹干。 GB 4479.12010 10 用空白濾紙?jiān)谙嗤瑮l件下展開(kāi)，該空白濾紙應(yīng)與上述步驟展開(kāi)用的濾紙?jiān)谕粡垶V紙上相鄰部位裁取。 副染料紙上層析示意圖見(jiàn)圖 A.2。 基 線主 染 料130mm150mm250mm25mm副 染 料 (4)副 染 料 (3)副 染 料 (2)副 染 料 (1) 圖 A.2 副染料紙上層析示意圖 將展開(kāi)后取得的各個(gè)副染料和在空白濾紙上與各副染料相對(duì)應(yīng)的部位的濾紙按同樣大小剪下，并剪成約5mm15mm的細(xì)條， 分別置于50mL的納氏比色管中， 準(zhǔn)確加入5mL丙酮溶液， 搖動(dòng)3min5min 后，再準(zhǔn)確加入 20mL 碳酸氫鈉溶液，充分搖動(dòng)，然后分別在 G3玻璃砂芯漏斗中自然過(guò)濾，濾液應(yīng)澄清，無(wú)懸浮物。分別得到各副染料和空白的洗出液。在各自副染料的最大吸收波長(zhǎng)處，用50mm 比色皿，將各副染料的洗出液在分光光度計(jì)上測(cè)定各自的吸光度值。 在分光光度計(jì)上測(cè)定吸光度時(shí)，以 5mL 丙酮溶液和 20mL 碳酸氫鈉溶液的混合液作參比液。 A.7.4.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 吸取 6mL 1的試樣溶液移入 100mL 容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，該溶液為標(biāo)準(zhǔn)溶液。 A.7.4.5 標(biāo)準(zhǔn)洗出液的制備 用微量進(jìn)樣器吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液 100L，均勻地點(diǎn)注在離濾紙底邊 25mm 的一條基線上，用吹風(fēng)機(jī)吹干。將濾紙放入裝有預(yù)先配制好展開(kāi)劑的層析缸中展開(kāi)，待展開(kāi)劑前沿線上升 40mm,取出用冷風(fēng)吹干，剪下所有展開(kāi)的染料部分，按 A.7.4.3 的方法進(jìn)行萃取操作，得到標(biāo)準(zhǔn)洗出液。用 10mm 比色皿在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)吸光度值。 同時(shí)用空白濾紙?jiān)谙嗤瑮l件下展開(kāi)，按相同方法操作后測(cè)洗出液的吸光度值。 A.7.4.6 結(jié)果計(jì)算 副染料的含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)7w計(jì)，數(shù)值用表示，按公式(A.8)計(jì)算： GB 4479.12010 11 ()()SbAbAbAwssnn+=)6/100)(5/117LL（A.8） 式中： A1An 各副染料洗出液以 50mm 光徑長(zhǎng)度測(cè)定出的吸光度值； b1bn 各副染料對(duì)照空白洗出液以 50mm 光徑長(zhǎng)度測(cè)定出的吸光度值； As 標(biāo)準(zhǔn)洗出液以 10mm 光徑長(zhǎng)度測(cè)定出的吸光度值； bs 標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照空白洗出液以 10mm 光徑長(zhǎng)度測(cè)定出的吸光度值； 5 折算成以 10mm 光徑長(zhǎng)度的比數(shù)； 100/6 標(biāo)準(zhǔn)洗出液折算成 1試樣溶液的比數(shù)； S 試樣的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。 計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后 1 位。 平行測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于 0.2（質(zhì)量分?jǐn)?shù)） ，取其算術(shù)平均值作為測(cè)定結(jié)果。 A.8 未反應(yīng)中間體總和的測(cè)定 A.8.1 方法提要 采用反相液相色譜法，用外標(biāo)法分別定量各未反應(yīng)中間體，最后計(jì)算未反應(yīng)中間體總和的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。 A.8.2 試劑和材料 A.8.2.1 甲醇； A.8.2.2 乙酸銨溶液：2g/L； A.8.2.3 1-萘胺-4-磺酸鈉； A.8.2.4 7-羥基-1，3-萘二磺酸鈉； A.8.2.5 3-羥基-2，7-萘二磺酸鈉； A.8.2.6 6-羥基-2-萘磺酸鈉； A.8.2.7 7-羥基-1，3，6-萘三磺酸鈉。 A.8.3 儀器和設(shè)備 A.8.3.1 液相色譜儀：輸液泵流量范圍0.1 mL/min5.0mL/min，在此范圍內(nèi)其流量穩(wěn)定性為1 %；檢測(cè)器-多波長(zhǎng)紫外分光檢測(cè)器或具有同等性能的紫外分光檢測(cè)器； A.8.3.2 色譜柱：長(zhǎng)為150mm ，內(nèi)徑為4.6mm的不銹鋼柱，固定相為 C18 、粒徑5m； A.8.3.3 色譜工作站或積分儀； A.8.3.4 超聲波發(fā)生器； A.8.3.5 定量環(huán)：20L。 A.8.4 色譜分析條件 GB 4479.12010 12 A.8.4.1 檢測(cè)波長(zhǎng)：238nm； A.8.4.2 柱溫：30； A.8.4.3 流動(dòng)相：A，乙酸銨溶液；B，甲醇； 濃度梯度：A（100）比B（0）保持5min，再50min線性濃度梯度從A（100）比B（0） 至A（70）比B（30）； A.8.4.4 流量：1.0mL/min； A.8.4.5 進(jìn)樣量：20L。 可根據(jù)儀器不同，選擇最佳分析條件，流動(dòng)相應(yīng)搖勻后用超聲波發(fā)生器進(jìn)行脫氣。 A.8.5 試樣溶液的配制 稱取約0.1g莧菜紅試樣（精確至0.0001g），加乙酸銨溶液溶解并定容至100mL。 A.8.6 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 分別稱取約 0.01g（精確至 0.0001g）已于真空干燥器中干燥 24h 后的 1-萘胺-4-磺酸鈉、7-羥基-1，3-萘二磺酸鈉、3-羥基-2，7-萘二磺酸鈉、6-羥基-2-萘磺酸鈉、7-羥基-1，3，6-萘三磺酸鈉。用乙酸銨溶液分別溶解并定容至 100mL。然后分別吸取 10.0mL、5.0mL、2.0mL、1.0mL 上述各標(biāo)準(zhǔn)溶液，用乙酸銨溶液定容至 100mL。配制成系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。 A.8.7 分析步驟 在本標(biāo)準(zhǔn) A.8.4 規(guī)定的色譜分析條件下，分別用微量注射器吸取試樣溶液及系列標(biāo)準(zhǔn)溶液注入并充滿定量環(huán)進(jìn)行色譜檢測(cè)，待最后一個(gè)組分流出完畢，進(jìn)行結(jié)果處理。測(cè)定各標(biāo)準(zhǔn)溶液物質(zhì)的峰面積，分別繪制成各標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定試樣溶液中的 1-萘胺-4-磺酸鈉、7-羥基-1，3-萘二磺酸鈉、3-羥基-2，7-萘二磺酸鈉、6-羥基-2-萘磺酸鈉、7-羥基-1，3，6-萘三磺酸鈉的峰面積，根據(jù)各標(biāo)準(zhǔn)曲線求出各自未反應(yīng)中間體的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。 色譜圖見(jiàn)附錄 D。 A.8.8 結(jié)果計(jì)算 未反應(yīng)中間體的總和以質(zhì)量分?jǐn)?shù)13w計(jì)，數(shù)值用%表示，按公式（A.9）計(jì)算： 1211109813wwwwww+=（A.9） 式中： 8w1-萘胺-4-磺酸鈉的含量%； 9w7-羥基-1，3-萘二磺酸鈉的含量%； 10w3-羥基-2，7-萘二磺酸鈉的含量%； 11w6-羥基-2-萘磺酸鈉的含量%； 12w7-羥基-1，3，6-萘三磺酸鈉的含量%。 A.9 未磺化芳族伯胺(以苯胺計(jì))的測(cè)定 GB 4479.12010 13 A.9.1 方法提要 以乙酸乙酯萃取出試樣中未磺化芳族伯胺成分， 將萃取液和苯胺標(biāo)準(zhǔn)溶液分別經(jīng)重氮化和偶合后再測(cè)定各自生成染料的吸光度予以比較與判別。 A.9.2 試劑和材料 A.9.2.1 乙酸乙酯。 A.9.2.2 鹽酸溶液：1+10。 A.9.2.3 鹽酸溶液：1+3。 A.9.2.4 溴化鉀溶液：500gL。 A.9.2.5 碳酸鈉溶液：200g/L。 A.9.2.6 氫氧化鈉溶液：40gL。 A.9.2.7 氫氧化鈉溶液：4g/L。 A.9.2.8 R鹽溶液：20g/L。 A.9.2.9 亞硝酸鈉溶液：3.52g/L。 A.9.2.10 苯胺標(biāo)準(zhǔn)溶液：0.1000g/L。 配制：用小燒杯稱取0.5000g新蒸餾的苯胺，移至500mL容量瓶中，以150mL鹽酸溶液（1+3）分三次洗滌燒杯，并入500mL容量瓶中，水稀釋至刻度。移取25mL該溶液至250mL容量瓶中，水定容。此溶液苯胺濃度為0.1000g/L。 A.9.3 儀器和設(shè)備 A.9.3.1 可見(jiàn)分光光度計(jì)。 A.9.3.2 比色皿：40mm。 A.9.4 試樣萃取溶液的配制 稱取約2.0g試樣（精確至0.001g）于150mL燒杯中，加100mL水和5mL氫氧化鈉溶液（40g/L），在溫水浴中攪拌至完全溶解。將此溶液移入分液漏斗中，少量水洗凈燒杯。每次以50mL乙酸乙酯萃取兩次，合并萃取液。以10mL氫氧化鈉溶液（4g/L）洗滌乙酸乙酯萃取液，除去痕量色素。再每次以10mL鹽酸溶液（1+3）對(duì)乙酸乙酯溶液反萃取三次。合并該鹽酸萃取液，然后用水稀釋至100mL，搖勻。此溶液為試樣萃取溶液。 A.9.5 標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照溶液的制備 吸取2.0mL苯胺標(biāo)準(zhǔn)溶液至100mL容量瓶中，用鹽酸溶液（1+10）稀釋至刻度，混合均勻，此為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照溶液。 A.9.6 重氮化偶合溶液的制備 GB 4479.12010 14 吸取10mL試樣萃取溶液，移入透明潔凈的試管中，浸入盛有冰水混合物的燒杯內(nèi)冷卻10min。在試管中加入1mL溴化鉀溶液及0.5mL亞硝酸鈉溶液，稍用力搖勻后仍置于冰水浴中冷卻10min，進(jìn)行重氮化反應(yīng)。另取一個(gè)25mL容量瓶移入1mL R鹽溶液和10mL碳酸鈉溶液。將上述試管中的苯胺重氮鹽溶液加至盛有R鹽溶液的容量瓶中， 邊加邊略振搖容量瓶， 用少許水洗凈試管一并加入容量瓶中，再以水定容。充分混勻后在暗處放置15min。該溶液為試樣重氮化偶合溶液。 標(biāo)準(zhǔn)重氮化偶合溶液的制備，吸取10mL標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照溶液，其余步驟同上。 A.9.7 參比溶液的制備 吸取10mL鹽酸溶液（1+10）、10mL碳酸鈉溶液及1mL R鹽溶液于25mL容量瓶中，水定容。該溶液為參比溶液。 A.9.8 分析步驟 將標(biāo)準(zhǔn)重氮化偶合溶液和試樣重氮化偶合溶液分別置于比色皿中，在510nm波長(zhǎng)處用分光光度計(jì)測(cè)定各自的吸光度Aa、Ab，以A.9.7作參比溶液。 A.9.9 結(jié)果判定 AbAa即為合格。 A.10 砷的測(cè)定 A.10.1 方法提要 莧菜紅經(jīng)濕法消解后，制備成試樣溶液，用原子吸收光譜法測(cè)定砷的含量。 A.10.2 試劑和材料 A.10.2.1 硝酸。 A.10.2.2 硫酸溶液：1+1。 A.10.2.3 硝酸-高氯酸混合溶液：3+1。 A.10.2.4 砷（As）標(biāo)準(zhǔn)溶液：按GB/T 602配制和標(biāo)定后,再根據(jù)使用的儀器要求進(jìn)行稀釋配制成含砷相應(yīng)濃度的三種標(biāo)準(zhǔn)溶液。 A.10.2.5 氫氧化鈉溶液：1g/L。 A.10.2.6 硼氫化鈉溶液：8g/L(溶劑為1g/L的氫氧化鈉溶液)。 A.10.2.7 鹽酸溶液：1+10。 A.10.2.8 碘化鉀溶液：200g/L。 A.10.3 儀器和設(shè)備 A.10.3.1 原子吸收光譜儀。 A.10.3.2 儀器參考條件：砷空心陰極燈分析線波長(zhǎng)：193.7nm；狹縫：0.5nm1.0nm；燈電流： 6mA10mA。 GB 4479.12010 15 A.10.3.3 載氣流速：氬氣 250mL/min。 A.10.3.4 原子化器溫度：900。 A.10.4 分析步驟 A.10.4.1 試樣消解 稱取約 1g 試樣 （精確至 0.001g） ， 置于 250mL 三角或圓底燒瓶中， 加 10mL15mL 硝酸和 2mL硫酸溶液，搖勻后用小火加熱趕出二氧化氮?dú)怏w，溶液變成棕色，停止加熱，放冷后加入 5mL 硝酸-高氯酸混合液，強(qiáng)火加熱至溶液透明或微黃色，如仍不透明，放冷后再補(bǔ)加 5mL 硝酸-高氯酸混合溶液，繼續(xù)加熱至溶液透明無(wú)色或微黃色并產(chǎn)生白煙（避免燒干出現(xiàn)炭化現(xiàn)象） ，停止加熱，放冷后加水 5mL 加熱至沸，除去殘余的硝酸-高氯酸(必要時(shí)可再加水煮沸一次)，繼續(xù)加熱至發(fā)生白煙，保持 10min，放冷后移入 100mL 容量瓶（若溶液出現(xiàn)渾濁、沉淀或機(jī)械雜質(zhì)須過(guò)濾） ，用鹽酸溶液稀釋定容。 同時(shí)按相同的方法制備空白溶液。 A.10.4.2 測(cè)定 量取25mL消解后的試樣溶液至50mL容量瓶， 加入5mL碘化鉀溶液， 用鹽酸溶液稀釋定容， 搖勻，靜置15min。 同時(shí)按相同的方法以空白溶液制備空白測(cè)試液。 開(kāi)啟儀器，待儀器及砷空心陰極燈充分預(yù)熱，基線穩(wěn)定后，用硼氫化鈉溶液作氫化物還原發(fā)生劑，以標(biāo)準(zhǔn)空白、標(biāo)準(zhǔn)溶液、樣品空白測(cè)試液及樣品溶液的順序，按電腦指令分別進(jìn)樣。測(cè)試結(jié)束后電腦自動(dòng)生成工作曲線及扣除樣品空白后的樣品溶液中砷濃度，輸入樣品信息（名稱、稱樣量、稀釋體積等） ，即自動(dòng)換算出試樣中砷的含量。 平行測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于 0.1mg/kg ，取其算術(shù)平均值作為測(cè)定結(jié)果。 A.11 鉛的測(cè)定 A.11.1 方法提要 莧菜紅經(jīng)濕法消解后，制備成試樣溶液，用原子吸收光譜法測(cè)定鉛的含量。 A.11.2 試劑和材料 A.11.2.1 鉛（Pb）標(biāo)準(zhǔn)溶液：按GB/T 602配制和標(biāo)定后,再根據(jù)使用的儀器要求進(jìn)行稀釋配制成含鉛相應(yīng)濃度的三種標(biāo)準(zhǔn)溶液。 A.11.2.2 氫氧化鈉溶液：1g/L。 A.11.2.3 硼氫化鈉溶液：8g/L(溶劑為1g/L的氫氧化鈉溶液)。 A.11.2.4 鹽酸溶液：1+10。 A.11.3 儀器和設(shè)備 A.11.3.1 原子吸收光譜儀 GB 4479.12010 16 A.11.3.2 儀器參考條件：GB 5009.122010 第三法 火焰原子吸收光譜法。 A.11.4 分析步驟 可直接采用A.10.4.1的試樣溶液和空白溶液。 按GB 5009.122010 第三法 火焰原子吸收光譜法操作。 平行測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于 1.0mg/kg，取其算術(shù)平均值作為測(cè)定結(jié)果。 GB 4479.12010 17 附 錄 B （規(guī)范性附錄） 三氯化鈦標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的配制方法 B.1 試劑和材料 B.1.1 鹽酸； B.1.2 硫酸亞鐵銨； B.1.3 硫氰酸銨溶液：200g/L； B.1.4 硫酸溶液：1+1； B.1.5 三氯化鈦溶液； B.1.6 重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液： c(1/6K2Cr2O7)=0.1mol/L，按GB /T602配制與標(biāo)定。 B.2 儀器和設(shè)備 見(jiàn)圖 A.1。 B.3 三氯化鈦標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的配制 B.3.1 配制 取 100mL 三氯化鈦溶液和 75mL 鹽酸，置于 1000mL 棕色容量瓶中，用新煮沸并已冷卻到室溫的水稀釋至刻度，搖勻，立即倒入避光的下口瓶中，在二氧化碳?xì)怏w保護(hù)下貯藏。 B.3.2 標(biāo)定 稱取約 3g（精確至 0.0001g）硫酸亞鐵銨，置于 500mL 錐形瓶中，在二氧化碳?xì)饬鞅Ｗo(hù)作用下，加入 50mL 新煮沸并已冷卻的水，使其溶解，再加入 25mL 硫酸溶液，繼續(xù)在液面下通入二氧化碳?xì)饬髯鞅Ｗo(hù)，迅速準(zhǔn)確加入 35mL 重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液，然后用需標(biāo)定的三氯化鈦標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定到接近計(jì)算量終點(diǎn)，立即加入 25mL 硫氰酸銨溶液，并繼續(xù)用需標(biāo)定的三氯化鈦標(biāo)